Flora Bacterian Bucal en Beagle

7/24/2019 Flora Bacterian Bucal en Beagle

1/10

REDVETRev. electrn. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet2012 Volumen 13 N 1 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010112.html

Flora bucal en perros de la raza Beagle con enfermedad periodontal inducidahttp://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010112/120109.pdf

1

REDVET -Revista electrnica de Veterinaria - ISSN 1695-7504

Flora bucal en perros de la raza Beagle con enfermedadperiodontal inducida (Buccal flora in Beagle dogs race withperiodontal desease-induced)

Cabrera Garca, Alexei: Centro de Ciruga Experimental (CENCEX) | GuerraBarroso Mabel: Hospital Peditrico Juan Manuel Mrquez | Soca Prez,Maylin: CENCEX | Rodrguez Sosa, Vctor Manuel: CENCEX | DomnguezLpez, Heberto Arides: CENCEX | Purn Guzmeli, Carlos Alberto: CENCEX |Soto Cantero Luis: Facultad de Estomatologa | Macas Hernndez, Ileana:CENCEX | Aliaga Aleaga, Yilenis: CENCEX | Acosta Berbes, Anais:CENCEX | Guerrero Contreras, Miladys: CENCEX | Gil Daz, FelipeAlejandro: CENCEX

E-mail: [email protected]

Resumen

La enfermedad periodontal afecta a los perros durante toda su vida y se debe ala acumulacin de placa dental bacteriana en las coronas dentales a lo largo dela enca, lo que conlleva a una reaccin inflamatoria de la misma, conocidacomo gingivitis. Con el fin determinar la flora bucal en perros con enfermedadperiodontal inducida se estudiaron 10 canes de la raza Beagle que previamentefueron sometidos a una intervencin quirrgica para inducir la enfermedad. Atodos se les realiz un exudado de la placa supragingival con hisopos estrilesde algodn que fueron depositados en tubos con un medio base para suconservacin y transporte. Las muestras fueron procesadas en el laboratorio demicrobiologa del Hospital Peditrico Juan Manuel Mrquez, en un medio deAgar sangre y cultivados durante 24 horas. Los resultados reflejaron que laNeisseria sp y el Estreptococos hemoltico se observaron en el 100% de losanimales muestreados, seguido del Estafilococus coagulasa negativa (90%),Corynebacterium sp (80%), mientras que el Estafilococus epidermitis, Proteus

mirabilis y el Estreptococos pneumoniae se observaron en un 10% de losanimales muestreados. Del total de aislamiento, las bacterias Grampositivasrepresentaron el 74,41%, mientras que las Gramnegativas se comportaron enun 25,58%.

Palabras claves : enfermedad periodontal inducida | flora bucal bacteriana |Beagle


2/10



2

Abstract

Periodontal diseases affect the dogs all its life and this is due to the

accumulation of bacterial dental plaque along the gums as results this provokesa well known inflammatory reaction defined as gingivitis. The purpose of thispaper was to determine the bucal flora in dogs with periodontal diseaseinduced. To carry on this research 10 dogs were taken as sample from theBeagle race that previously had been carried to a surgical intervention to inducethe disease. From these dogs an exudes sample of the supragingival plaquewas made with sterile cotton hysopes desited in tubes with a medium base fortheir conservation and transportation. At the Microbiology Department at JuanManuel Marquez Hospital the samples were processed in agar blood mediumand cultivated during 24 hours. The results showed that Neisseria sp. and

Streptococcus hemoliticus was observed in 100% of thre animal studiedfollowed by Stafilofoccus coagulasa negative (90%), Corynebacterium sp.(80%) cohilo Stafilococcus epidermitis, Proteus mirabilis and Streptococcuspneumoniae were observer in 10%. All these results from a totalmicroorganism isolated. Grampositives bacterias represented the 74.41% whileGramnegatives bacterias was of a 25,58%.

Key words : periodontal disease-induced | buccal bacterial growth | Beagledogs

INTRODUCCIN

La enfermedad periodontal afecta al tejido que soporta al diente (ligamentoperiodontal) y al periodonto (enca y hueso alveolar) causando comoconsecuencia, la prdida de dientes. Es una enfermedad de origen bacterianodonde colonizan los microorganismos el nicho supra y subgingival, estimulandode esta manera la respuesta del husped, derivndose entonces lasalteraciones tisulares que definen finalmente las lesiones tpicas de estaentidad patolgica.

Se ha demostrado que algunas bacterias, que son capaces de colonizar lostejidos, invaden las clulas epiteliales y endoteliales sin embargo su principalefecto sobre los tejidos del husped no derivan exclusivamente de esteacontecimiento, sino de la respuesta inflamatoria e inmunolgica que soncapaces de estimular.

La bsqueda de los microorganismos causantes de las enfermedadesperiodontales ha sido motivo de estudio durante muchos aos. En un principio

se asoci la presencia de ciertos agentes etiolgicos como causantes de estapatologa, pero las tcnicas en aquellos tiempos eran limitadas para la


3/10



3

identificacin, posteriormente esta idea inicial fue poco a poco desapareciendoy dio lugar a una segunda corriente de pensamiento en la que se crea que elorigen estaba en alguna alteracin funcional del paciente y que las bacterias noeran ms que colonizadores secundarios de la enfermedad. En estos das seretoma la idea del origen bacteriano, pero pensando ms en una placabacteriana de tipo inespecfica donde se van a organizar 1 .

La placa dental conocida como biofilm dental es la acumulacin heterognea deuna comunidad microbiana variada, aerobia y anaerobia, rodeada por unamatriz intercelular de polmeros de origen salival y microbiano. Estosmicroorganismos pueden adherirse o depositarse sobre las paredes de laspiezas dentales. Su presencia puede estar asociado a la salud, pero si losmicroorganismos consiguen los sustratos necesarios para sobrevivir y persistenmucho tiempo sobre la superficie dental, pueden organizarse y causar gingivitiso enfermedad periodontal 2 .

Los biofilms que colonizan la cavidad oral son uno de los ms complejos queexisten en la naturaleza. Esta complejidad se debe en gran medida a lacomposicin de las distintas superficies, que determinan la existencia de cuatronichos orales diferentes:

1) Mucosa masticatoria.2) Mucosa dorso lingual.3) Saliva.4) Superficies duras (superficies dentales y materiales de restauracin).

Estos biofilms tienen la prevalencia a incrementarse con la edad alcanzando un80% en perros por encima de los cinco aos edad 3 , aunque algunos autoresrefieren que despus de los tres aos tienen un grado de afectacin querequieren de un profundo anlisis 4 y en muchas ocasiones de intervencin 5.

Las bacterias asociadas a las periodontitis residen tanto en el biofilm que seencuentra por encima como por debajo del margen gingival. El biofilmsupragingival est unido a la superficie del diente; sin embargo, la naturalezadel subgingival es ms complicada ya que existen dos diferentes, uno asociado

a la superficie radicular y otro ntimamente relacionado con la superficieepitelial de la pared blanda de la bolsa.

La placa sobre la superficie del diente es la causa primaria del desarrollo de lagingivitis y de la periodontitis 6,7 es por esto que nuestro trabajo se proponecomo objetivo determinar la microflora de la placa supragingival y cuantificarlos porcientos de presentacin de todos los microorganismos aislados en perrosBeagles con una enfermedad periodontal inducida.

MATERIALES Y MTODOS


4/10



4

En el presente estudio se utilizaron 10 canes de la raza Beagle procedentes delCentro Nacional de Produccin de Animales de Laboratorio (CENPALAB), loscuales se encontraban estabulados en el Bioterio de la Facultad de MedicinaVictoria de Girn, todos bajo el mismo rgimen de manejo, alimentacin yestatus de salud. Se usaron perros de ambos sexos, con una edad promedio de1 a 3 aos y un peso vivo entre 9 y 11 kg.

Dichos animales fueron sometidos a una ciruga estomatolgica con el objetivode inducir una enfermedad periodontal de forma experimental la cual consistien colocar alrededor del cuello dental y por debajo del borde subgingival, unadoble ligadura de seda No. 3-0 en los premolares P3 y P4 mandibulares previaseparacin de la gingiva con un decolador. Este proceder se realiz bajoanestesia general empleando Propofol a razn 5 mg/Kg de peso corporal en lainduccin y se mantuvo con Isoflurano entre 2 3% con oxgeno al 95%.

Despus de dos meses de inducida enfermedad periodontal y ya con laenfermedad desarrollada, se tomaron diez muestras de la placa supragingivalen todos los animales. El muestreado se llev a cabo con hisopos estriles dealgodn que fueron depositados en tubos con un medio base para suconservacin y transporte .

Toma de muestra Tubos con el medio base para laconservacin de las muestras

Las muestras fueron procesadas en el laboratorio de Microbiologa del HospitalPeditrico Juan Manuel Mrquez, inoculadas en placas de Petri con agarsangre y se incubaron durante 24 horas a una temperatura de 37C.

Posteriormente se procedi al aislamiento e identificacin de losmicroorganismos teidos por cultivos, para lo cual se realizaron pruebas

fisiolgicas establecidas para el diagnstico microbiolgico final.


5/10



5

RESULTADOS Y DISCUSIN

La microbiota de la cavidad oral del perro es compleja 8 y se conocen que msde 350 especies de bacterias pueden estar presentes en la misma 9.

En estudios realizados en la placa supragingival por Syed y colaboradores endos perros, se aislaron quince especies diferentes, entre los que se

encontraban: Proteus, Neisseria, Pseudomonas, Escherichia,Estafilococus, Estreptococos, Lactobacillus, Nocardia, Actinomyces,Corynebacterium, Micrococcus, Microbacterium 10 .

Por otra parte otros autores reportan aislamientos de Estreptococos yActinomices en la placa supragingival en estudios realizados en 10 perrosBeagles adultos con avanzada enfermedad periodontal 11 .

En nuestro estudio se obtuvieron ocho especies de bacterias aisladas en los diezcanes trabajados (ver Tabla #1), algunas de las cuales coinciden con los

hallazgos reportados por dichos autores.


6/10



6

Tabla #1. Microorganismos aislados de la placa supragingivalNo Tubo ID Perro Sexo Resultados

Neisserias spEstreptococos hemolticoEstafilococus epidermitisEstreptococos hemoltico

1 2699 Macho

Estafilococus coagulasa negativaNeisserias sp

Estreptococos hemolticoEstafilococus coagulasa negativa

2 2519 Macho

Corynebacterium spNeisserias sp

Estreptococos hemolticosEstafilococus coagulasa negativa

3 1159 Hembra

Corynebacterium spProteus mirabilis

Estreptococus hemolticosEstafilococus coagulasa negativa

Corynebacterium sp4 1479 Macho

Neisserias spNeisserias sp


5 1529 Hembra

Estreptococos hemoltic o Neisserias sp

Estreptococos hemolticosEstafilococus coagulasa negativa

6 1649 Macho



7 1999 Macho


Estreptococos hemolticoCorynebacterium sp

8 2439 Macho

Estreptococos pneumoniaeNeisserias sp

Estreptococos hemolticoCorynebacterium sp

Estafilococus coagulasa negativa9 1139 Macho

Estreptococos hemolticosNeisserias sp

Estreptococus hemolticoEstafilococos coagulasa negativa

10 1479 Macho

Corynebacterium spLa Neisseria sp y el Estreptococos hemoltico estuvieron presentes en


7/10



7

todas las muestras tomadas (100 %) (ver Grfico No.1); sin embargo, hayautores que consideran a la Neisseria sp como parte de la flora normal de lacavidad oral del perro 7 .

Estos resultados no concuerdan con los encontrados por otros autores en susinvestigaciones dado que sus aislamientos de la Neisseria no sobrepasaron el10 % y en ningn momento se report la presencia del Estreptococos hemoltico, obtenindose valores ms significativos para la especiePorphyromas con un 20% y el Actinomices con un 26%, microorganismosque no fueron aislados en nuestras muestras. 11

Grfico #1. Porciento de aislamiento.

Por otra parte el grfico muestra el comportamiento del resto de losmicroorganismos a travs de sus porcientos de aislamiento encontrndose enorden descendente el Estafilococus coagulasa negativa (90%), elCorynebacterium sp (80%), el Estreptococos hemoltico (30%) y elEstafilococus epidermitis , el Proteus mirabilis y el Estreptococos

pneumoniae con un 10% cada uno.

La tabla # 2 muestra la distribucin de los hallazgos en las muestras tomadas,


8/10



8

de las mismas se derivaron 43 aislamientos de los cuales 32 correspondieron abacterias Grampositivas representando un 74,41 % y solamente 11aislamientos correspondieron a bacterias Gramnegativas para un 25,58 %.

Como puede apreciarse en nuestro estudio tambin las bacterias de la placasupragingival son mayormente Grampositivas, lo que se corresponde con labibliografa consultada 12,13

Tabla #2. Distribucin de los aislamientos en las muestras estudiadassegn la respuesta a la coloracin de Gram.

CONCLUSIONES

Se aislaron un total de 8 especies de microorganismos en la placasupragingival de los canes muestreados.

La Neisseria sp y el Estreptococos hemoltico fueron losmicroorganismos con mayor porciento de presentacin aislndoseen todas las muestras tomadas.

El estudio arroj un predominio de las bacterias Grampositivas en laplaca supragingival de los perros muestreados.

RECOMENDACIN

Realizar un estudio ms abarcador de la microbiota bucal del perro queincluya la placa subgingival.

Gram (+) % Gram (-) %10 23,25

10 23,251 2,323 6,979 20,938 18,6

1 2,321 2,32

Total 32 74,41 11 25,58

Microorganismos AisladosNeisseria sp

Estreptococos hemoltico

Total de aislamientos 43

Estafilococus epidermitisEstreptococos hemoltico

Estafilococus coagulasa negativaCorynebacterium sp

Proteus mirabilisEstreptococos pneumoniae


9/10



9

BIBLIOGRAFA

1. Escribano,M.; Mastesanz, P.; Bascone, A. Pasado, presente y futuro de lamicrobiologa de la periodontitis. Av Periodon Implantol. 17 (2) 79-872005.

2. Enciclopedia Wikipedia [10 pantallas] Placa dental [serie on line]Disponible en URL: http://es.wikipedia.org/wiki/placadental [Consultada23-11-2010]

3. Fonseca S.A.; Diniz, P.D.; Perecmanis, S.; Silva, A.S.; Cardozo, L.B.;Marcola, T.G. & Drmmond, V.O. Microbiological analysis of PeriodontalDisease Bacterial Plaque on Dogs and Effects of antibioticotherapy on it.Universidade de Braslia, Campus Universitrio Darcy Ribeiro, Braslia-DF.CEP 70.910- 34th World Small Animal Veterinary Congress 2009 - SoPaulo, Brazil.

4. Gawor, J.P.; Jodkowska, K.; Kurski, G.; Korczyski, W.; Ceregrzyn, M.

Oral health in pedigree dogs in association with their bodyweight and typeof skull. Pesquisa Veterinria Brasileira 27 2007. (Supl.). Dental WorkingGroup in Polish Small Animal Veterinary Association; Veterinary ClinicArka, Krakw.; Warsaw Agricultural University; ELWET VeterinaryHospital, Warszawa; Masterfoods Polska, Kouszki Parcel; Department ofGastrointestinal Physiology, Institute of Animal physiology and Nutrition.

5. Gorrel Cecilia. Diagnostics and treatment of periodontal disease in dogsand cats.17 Burnt House Lane, Pilley, Hampshire, SO41 5QN, UK.Proceedings of the 33rd World Small Animal Veterinary Congress 2008 -Dublin, Ireland

6. Gorrel Cecilia. Periodontal disease and diet in domestic pets. The Journalof Nutrition 0022-3166, 1998. American Society for Nutritional Sciences.7. Liebana J.; Castillo, A.M.; Alvarez, M. Periodontal diseases:

microbiological considerations. Med OralPatol Oral Cir Bucal. Suppl: 82-91; 75-82 Nov (2004).

8. Anglica Mara M. Microorganismos asociados a infecciones pormordeduras de perros y gatos. Facultad de Medicina, Universidad deChile. Programa de Doctorado en Ciencias Silvoagropecuarias yVeterinarias, Campus Sur, Monografas Electrnicas de PatologaVeterinaria 2005; 2(1):1-16

9. Wunder, J.A.; Briner, W.W.; Calkins, G.P. Identification of the CultivableBacteria in Dental plaque from the Beagle Dog. Division of DentalReserch, The Procter & Gamble Company, Cincinnati, Ohio. USA. J DENTRES 55:1097, 1976.

10. Syed, S.A.; Svanberg, M.; Svanberg, G. The predominant cultivabledental plaque flora of beagle dogs with periodontitis. Journal of ClinicalPeriodontology.. Vol8, 1 45-56 Febr 1981. Abstract

11. Elliott,D.R.; Wilson, M.; Buckley, C.M.; Spratt, D.A. Cultivable oralmicrobiota of domestic dogs. J Clin Microbiol, 43(11): 5470-5476 Nov2005.

12. Hennet, P. Canine Nutrition and Oral Health. In: Pibot, P.; Biourge,V.; Elliott, D.A. (Eds). Encyclopedia of Canine Clinical Nutrition.


10/10



10

International Veterinary Information Service, Ithaca NY ( www.ivis.org ).15-Nov-2007..

13. Sarkiala, E.; Asikainen, S.; Wolft, J.; Kanervo, A.; Happonen, I.Jousimies-Somer,H. Clinical, radiological and bacteriological finding incanine periodontitis. Journal of Small Animal Practice 34, 265-270 1993.

REDVET: 2012, Vol. 13 N 1Recibido 23.03.2011 / Ref. prov. MAR1129B_REDVET / Revisado 06.10.2011

Aceptado 21.12.2011 / Ref. def. 011209_REDVET / Publicado: 01.12.2012

Este artculo est disponible en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010112.htm concretamente en

http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n010112/011209.pdf

REDVET Revista Electrnica de Veterinaria est editada por Veterinaria Organizacin.

Se autoriza la difusin y reenvo siempre que enlace con Veterinaria.org http://www.veterinaria.org y con REDVET - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet

Documents

Flora Bacterian Bucal en Beagle