7/17/2019 Fundamento de Un Papanicolaou

http://slidepdf.com/reader/full/fundamento-de-un-papanicolaou 1/3

FUNDAMENTO DE UN PAPANICOLAOU

1. FUNDAMENTO TEÓRICO:

La tinción de Papanicolaou es un método de tinción muy

importante en citología.

La fijación se realiza al momento de la toma de muestra del

Papanicolaou aplicándole alcohol por Spray evitando una fijación

inadecuada por exeso o falta de esta.

 demás! es fundamental "ue el tiempo entre la toma de muestra y

fijación sea el mínimo posi#le $menos de % segundos&.

La coloración nuclear se realiza mediante la aplicación de

hematoxilina de 'arris como antes ya mencionado! es un

colorantes alcohólico #asófilo.

La tinción citoplasmática se realiza mediante colorantes

alcohólicos de los cuales ti(en de forma diferencial cada tipo

celular de la muestra de#ido a la existencia de una diferencia en

la afinidad electroestática por las proteínas "ue tiene cada

colorante. demás! la diferencia en los tamaos moleculares de los

colorantes determina la tinción diferencial de citoplasma seg)n el

grado de diferenciación celular. *l orange +! ti(e citoplasmas de

células maduras #ien diferenciadas con hiper"ueratosis las "ue

poseen "ueratinas de alto peso molecular generando una

coloración orangeofílica.

*l colorante *,%- es una mezcla de colorantes "ue ti(en

citoplasma y está compuesto por eosina! verde luz y pardo

ismarc/ como antes ya mencionado.

La eosina posee mayor afinidad electrostática desplazando al

orange +! por lo "ue ti(e los citoplasmas de todas las células pero

finalmente son las superficiales e intermedias las "ue poseen

coloración eosinofila o acidofila. *l verde luz ti(e el citoplasma de

7/17/2019 Fundamento de Un Papanicolaou

http://slidepdf.com/reader/full/fundamento-de-un-papanicolaou 2/3

las células menos diferenciadas ya "ue poseen una matriz

permea#le "uedando finalmente las células #asales y para#asales

0e(idas de azul. *l pardo ismarc/ tiene afinidad por la tinción de

la mucina! por lo "ue es el citoplasma de las células

endocervicales las "ue se ti(en con este colorante.

*l aclaramiento es el paso final de la tinción donde se produce la

transparencia celular! para lo cual! se utiliza 1ilol como solución

aclaradora.

2inalmente las muestras se montan por medio de la unión del

portao#jetos con resina o #alsamo la cual es un medio de montaje

solu#le en el agente aclarante y de#e tener un índice de

refracción "ue coincida con am#os.

3. Lavado en agua corriente4 es utilizado para hidratar y limpiar las

muestras y darle un cierto carácter acuoso. *s importantes estilar 

#ien las muestras para evitar la dilución y pérdida de capacidad

de tinción del colorante utilizado.

5. 'ematoxilina de 'arris4 utilizado para realizar la tinción nuclear 

de las células del frotis.

6. lavado en agua corriente4 utilizado para eliminar los exesos de

colorante "ue "ueden en la muestra. *s importante estilar #ien las

muestras para evitar diluir y por lo tanto! disminuir la

concentración del reactivo del paso siguiente.

7. agua acida4 utilizado para realizar una diferenciación de la

coloración nuclear por la hematoxilina! proceso llamado coloración

regresivo. *s importante "ue las inmersiones sean rápidas para

evitar una disminución exesiva de la tinción nuclear.

7/17/2019 Fundamento de Un Papanicolaou

http://slidepdf.com/reader/full/fundamento-de-un-papanicolaou 3/3

%. alcohol 8%94 utilizado para darle carácter alcohólico a las

muestras para "ue reaccionen con el colorante del siguiente paso.

*s importante estilar #ien las muestras para evitar la dilución de

los alcoholes y la pérdida de capacidad de tinción del colorante

utilizado en el paso siguiente.

:. ;range +4 colorante alcohólico "ue ti(e el citoplasma de color 

anaranjado! el cual tiene afinidad electrostática con las proteínas!

de todas las células en una primera instancia. 2inalmente son las

células escamosas superficiales "ueratinisadas alas "ue o#tienen

una tinción orangeolica.

 

<. alcohol 8%94 utilizado para eliminar el exceso de colorante de

las muestras. *s importante estilar #ien las muestras para evitar la

dilución de los alcoholes y la pérdida de capacidad de tinción del

colorante utilizado en paso siguiente.

=. *,%-4 es una mescla de colorantes "ue tienen afinidad por el

citoplasma de las células.

8. alcohol 8%94 *s importante estilar #ien las muestras para evitar 

la dilución de los alcoholes! alteración del xilol y su pérdida de

capacidad como mordiente. Las inmersiones no de#en ser por 

mucho tiempo ya "ue puede disminuir la coloración

citoplasmática.

3-. 1ilol4 utilizado para el aclaramiento de la muestra! se tiene tres

depósitos para una inmersión en cada recipiente! esto es para la

mejor aclaración con la importancia "ue tiene el oxígeno de

ayudar al aclaramiento de las células! para cada inmersión de

xilol.