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7/24/2019 Gobierno Regional de Lambayeque Autoguardado (6)
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I MASTER MIX PCR
Clculos de master mix PCR
1. Cunto de agua PCR debo aadir a primers liofilizados con 74.4 n moles para obtener una
concentracin final de !!u"#
"$%moles&'ol(litros)
(74.4x1!*+u") &(!!x1!*,") u- $ 0.372X10-3L
11!, u-
!.7/ u-
X=372 uL de agua PCR
. Cunto de agua PCR debo aadir a este para obtener una solucin al ! u"#
0e la anterior puedo tomar u-
(!!u") ( u-) $ (!u") (')
!u-$'
... H2O PCR: 45 uL
2 tambien podr3a trabaar com la solucin completa (7 u-) 5 obteni6ndose
(!!u") (7 u-) $ (!u") (')
7! u-$'
... H2O PCR:3345 uL
Cuanto de agua PCR debo aadir a primers liofilizados con ., n" para obtener una concentracin
final de !! u"#
"$%moles&'ol(litros)
(.,x1!*+") & (!! /1!*,")
!.+ /1!*-+ u- de agua PCR
7/24/2019 Gobierno Regional de Lambayeque Autoguardado (6)
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. Cunto de agua PCR debo aadir a este para obtener una solucin al 1! u"#
0e la anterior puedo tomar u-
(!!u") ( u-) $ (1!u") (')
1!! u-$'
... H2O PCR: 95 uL
2 tambi6n podr3a trabaar com la solucin completa (+ u-) 5 obteni6ndose
(!!u") (+ u-) $ (1!u") (')
,!u-$'
... H2O PCR: 557 uL
C!"#u"$% de &a%'e( &)* PCR
C$&+"e'a( "a %)gu)e,'e 'a"a
C$&+$,e,'e C$,#e,'(a#)
, ),)#)a"
C$,#e,'(a#),
/),a"
$"u&e, +$(
(ea##),
$"u&e, uL
+a(a 'u$% 7
'u$%
Mue%'(a de A 1u- 1u- para cadamuestra
H2O + 5
u//e( 10X 1!x 1x . u- 17.5MgC"2 m" .m" .u- 17.5
dTP% ."m !.m"c&u u- 14
P()&e( /$(6a(d 1!u" 1u" .u- 17.5
P()&e( (ee(%e 1!u" 1u" .u- 17.5
Ta8 +$")&e(a%a 8&8l 18&8l u- 35
u-
C$&+$,e,'e C$,#e,'(a#
), ),)#)a"
C$,#e,'(a#),
/),a"
$"u&e, +$(
(ea##),
$"u&e, uL
+a(a 'u$%7
'u$%
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Mue%'(a de A * * 1u- 1u- para cada
muestra
H2O 1.1 7.75u//e( 10X x 1x .u- 17.5
MgC"2 !m" ."m !.,u- 4.375
dTP% .m" !.m"c&u 1u- 7P()&e( /$(6a(d ! u" 1u" !., u- 4.375P()&e( (ee(%e !u" 1u" !.,u- 4.375Ta8 +$")&e(a%a 8&u- 1u&u- u- 35$"u&e, '$'a" * * 1.u-
1. Cunto de cada reacti9o debo aadir si mi art3culo de referencia me indica :ue el
protocolo es el siguiente#
C$&+$,e,'e S'$# C$,#e,'(a#),/),a"
$"u&e,/),a" uL
$"u&e, +$(Rea##),
TRIS HC" 20&M 10&M 3.125MgC"2 3&M 1.5&M .25 1.525T+ 400uM 200uM 1.525
;C" 0.5M 50 M& 1. 1.25Ta 5 diluido !.! /
!.!$1=!
(1!") (1m-)$ / (!m-)
0.05 M=X
b. " >Cl 5 diluido 1=
(")(1!m-) $ (/) (!m-)
!.4 "$/
c. 1!!! mg&- glucosa5 diluido 1=1! G luego 1= $ HHHHH mg&-
1!!!mg1 -
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1=1!
1!!mgcompletar a 1-
1=
50&g #$&+"e'a( a 1 L
d. ! ml de I ;aCl contienen HHHH g de ;aCl
/g ;aCl $ I&1!!I / ! m-$12.5 g de ;aCle. Cunto Cu@24 >2 debe ser pesado para preparar 1!! ml de Cu@24 al I#
P" del Cu@24 >2= ! g&mol5 P" del Cu@24= 1,! g&mol
1g Cu@24.>2!g&mol
/ g Cu@24*1,!g&mol
2perando da como resultado= !.,4 g.Bs3 :ue en 1 g de Cu@24.>2 2
g Cu@24*/ Cu@24. >2
X=7.125 g de CuSO4. 5H2Of. Ju6 porcentae de Cu@24 >2 es agua#
1 g Cu@24.>2!.,4g Cu@24
... H2O e% 0.3 g3g. Cuntos gramos de "gCl 214+ g&mol
/g "gCl+g&mol
/g "gCl $ (1g"gCl.>2) / (+g&mol) &14+ g&mol
Xg MgC"2=0.3
!.4 " se necesitan para preparar ! ml de una solucin
"#
C1V1=C2V2
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(") (/) $!.4") (!m-)
X=4 &L.
i. Ju6 porcentae de "g contiene el "gCl >2#
14+g&mol "gCl.>21!!I
4g "gCl/I
2perando= 1,.1 I "g contiene el "gCl >2
. Cunto Cu@24 >2 debe ser pesado para preparar 1 - de una solucin :ue
contenga ! mg de Cu@24#
0el eercicio !.,4 g Cu@241 g Cu@24 .>2
!.!g/ g Cu@24 .>2
/ g Cu@24 .>2$!.!g/ 1 g&!.,4 g= 0.125 g CuSO45 H2O dee %e( +e%ad$
F. ?l peso molecular de CaC2 es 1!! g&mol5 cuntos gramos son necesarios para
preparar=
K 1 - de !.1 " CaC2#
1!! g&mol1"
/!.1"
X= 10gD&$L %$, ,e#e%a()$% +a(a +(e+a(a( 1 L de 0.1 M CaCO3
K ! mg&- de CaC2#
100 g1 &$"
0.05 g
* *=,=5*10-4
n$Lsoluto&P"
5*10-4D100 =0.05 g de CaCO3
l. 8na solucin estndar de
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/$,m-
K 1! g&-
1! g1!!!m-
x1m-
*=0.15 g
, ml!.g&m-
/ m-!.1 g&m-
X=4.5 &L
K 1!! g&-!.1g&m-
, m-!. g&m-
x!.1 g& m-
*= 3 &L
K ! g&- !.!g&m-
, m-
!. g&m-x!.! g& m-
*=1.5 &Lm. -a solucin salina normal tiene una concentracin de !.I. Cul es su
molaridad# (P" ;aCl = . g&mol)
n$. g & mol1 " segEn "$n&'
. g&mol1!!! m- *1"
!. g 1!!!m-
X=0.0145 M
n. Cuntos gramos de ;a>P24 deben ser pesados para preparar 1 - de una solucin
cuGa concentracin es de ! mg&ml#
Cd$"s&'d
"s$Cdx'd
(!.!g&m-) (1!!!m-) $50 g
o. Cul es la dilucin final de una muestra de suero en un tubo :ue contiene !! Ml de
suero5 !! Ml de solucin salina G !! Ml de reacti9o#
2/8 =1/
=0.25=25/
1/51:
@uero !! u-
@@ !!u-
R !!u-
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p. Cul es la concentracin en mol&- de una solucin :ue tiene 1!! g de ;a2>
disueltos en 1!! ml de agua# P" ;a2>= 4! g&mol4! g1 mol
1!!g/ mol
/$. moles
"$ n&9
"$n&!.1. mol &!.1 -$25 &$" DL
e"a'),a a" 0.001 $"u&e, /),a" de 12.5uL
S$"u#), %'$#
1m-!.mg!.!I
1m-!.1 mg!.!1I
C1 91$c9
!.!1/$ (!.!!1I) (1.u-
X=1.25 uL
O 'a&)F,
1m-!.mg!.!I
C1 91$c9
(!.!I)/$(!.!1I)(1!!!u-)
/$!!u-
"s !! u- de agua
-uego (!.!1I)(/)$(!.!!1I)(1. u-)
X=1.25 uL