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GUIA PRCTICA DE BIOQUIMICADra. Luz Chacaltana Ramos
Dra. Bertha Pari Olarte
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PrimerParcial
Laboratorio
de
ioqumica
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BIOSEGURIDAD
I.-INTRODUCCIN
Las normas de bioseguridad en el laboratorio de Bioqumica son un conjunto de
medidas y normas preventivas, destinadas a mantener el control de riesgos
laborales procedentes de agentes biolgicos, fsicos o qumicos, logrando la
prevencin de impactos nocivos frente a riesgos propios de su actividad diaria,
asegurando que el desarrollo o resultado final de dichos procedimientos no atente
contra la seguridad del trabajador.
En el laboratorio de Bioqumica se manipula y experimenta con componentes
moleculares (protenas, cidos nucleicos y otras), para lo cual se utilizan agentes
fsicos y qumicos que puedan causar dao si no se manipulan adecuadamente. En
este sentido se exige seguir todas las normas de manipulacin y conducta del
personal que asiste al laboratorio de Bioqumica, las cuales constituyen las guas
de bioseguridad.
El curso de Bioqumica es fundamental ya que permite comprender los procesosqumicos que ocurren en el organismo como por ejemplo la formacin y
transformacin de los nutrientes que componen un determinado alimento.
II. HISTORIA
La bioseguridad, como disciplina naci durante la dcada del 70, en
respuesta operativa hacia los riesgos potenciales de los agentes biolgicos
modificados por Ingeniera Molecular, a partir de los trabajos de P. Berg (1974)
se cre el Comit Asesor de ADN recombinante.
En 1983 la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) edita el Manual de
Bioseguridad en el laboratorio que pasa a ser la publicacin internacional de
referencia.
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En 1985 el CDC desarroll una estrategia de "Precauciones Universales para
sangre y fluidos corporales" para referirse a las preocupaciones que existan acerca
de la transmisin de HIV en el lugar de trabajo.
La aparicin del virus HIV origin la publicacin de Normas de
Bioseguridad Internacionales, Nacionales, Regionales, Provinciales, de
Instituciones Cientficas y Asistenciales
III.- PRINCIPIOS BASICOS DE BIOSEGURIDAD
Los Principios de la Bioseguridad, tiene tres pilares que sustentan y dan origen a
las Precauciones Universales.
Estos son: Universalidad, Barreras de proteccin y Medidas de eliminacin.
Universalidad: De este principio nace el concepto de potencialidad, es
decir, que sin importar si se conoce o no la serologa de un individuo, el
estrato social, sexo, religin, etc., uno debe seguir las precauciones
universales ya que potencialmente puede portar y transmitir
microorganismos patgenos.
Barreras:
Son los elementos que protegen al auxiliador de la transmisin
de infecciones. Se clasifican en dos grandes grupos, la inmunizacin activa
(vacunas) y el uso de barreras fsicas.
Barreras fsicas:
o Guantes: Para todo proceso referido a la manipulacin de sangre o
fluidos corporales y manejo de pacientes sin excepcin.
o Proteccin Va respiratoria. - Indicacin de uso: Cuando se prevea la
formacin de aerosoles, manejo de pacientes que tengan hemorragias en
boca o nariz al toser o estornudar pueden formar aerosoles.
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o Gafas: Proteccin en la mucosa del ojo. Las Indicaciones de uso: cuando
se prevea la formacin de aerosoles y en todo proceso referido a la
manipulacin de sangre o fluidos corporales.
o Mascarillas de reanimacin: Proteccin en la mucosa bucal y vas
respiratorias. Se usar siempre que se deba proporcionar ventilacin
asistida a una persona y no se disponga de un respirador.
Medidas de Eliminacin mediante este principio se establece la manera
de descartar los elementos de riesgo patolgico protegiendo a los individuos
y al medio ambiente.
IV.- RECOMENDACIONES PERSONALES DE CONDUCTA
Las recomendaciones para todo personal que labora en un laboratorio de
Bioqumica son:
1. Manipular con cuidado los reactivos qumicos que generalmente son
altamente txicos.
2. Seguir las recomendaciones indicadas en los frascos de reactivos en lo
referente precauciones y a su grado de toxicidad.
3. No ingerir alimentos adentro del laboratorio.
4. Utilizar con mesura los materiales y reactivos porque son muy costosos.
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5. Realizar las pruebas con sumo cuidado porque son altamente sensibles a la
contaminacin.
6. Utilizar proteccin corporal (mandil, mascarilla, guantes, etc.)
7. Mantener el mximo cuidado de atencin cuando se aplican las tcnicas
porque son de cuidado.
8. Asegurarse de no presentar cortes, raspones u otras lastimaduras en la
piel y en caso de que as sea cubrir la herida de manera conveniente.
9. Usar guantes de ltex de buena calidad para todo manejo de material
biolgico.
10.No tocar los ojos, nariz o piel con las manos enguantadas
11.No abandonar el laboratorio o caminar fuera del lugar de trabajo con los
guantes puestos.
12.Lavar las manos con jabn y agua inmediatamente despus de realizar el
trabajo.
13.No detener manualmente la centrifuga, no destaparla antes de que cese
de girar.
14.No permitir la entrada de personas ajenas al laboratorio y/o que no
tengan sus implementos de bioseguridad adecuados.
15.
Emplear en todo momento las medidas de bioseguridad en el laboratorio.
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V.-NORMAS DE BIOSEGURIDAD
NORM S GENER LES DE BIOSEGURID D
oMantener el lugar de trabajo en ptimas
condiciones de higiene y aseo
oNo es permitido fumar en el sitio de
trabajo.
oLas condiciones de temperatura, iluminacin
y ventilacin de los sitios de trabajo deben
ser confortables.
oUtilice en forma sistemtica guantes
plsticos o de ltex en procedimientos que conlleven manipulacin de
elementos. Hacer lavado previo antes de quitrselos y al terminar el
procedimiento.
oLvese cuidadosamente las manos antes y despus de cada procedimiento e
igualmente si se tiene contacto con material patgeno.
o Evite deambular con los elementos de proteccin personal fuera de su
rea de trabajo.
oEmplee mascarilla, protectores oculares y delantal plstico durante
procedimientos que puedan generar salpicaduras o gotitas aerosoles de
sangre u otros lquidos corporales.
oRealice desinfeccin y limpieza a las superficies, elementos, equipos de
trabajo, al final de cada procedimiento y al finalizar la jornada de acuerdo a
el proceso descrito en el manual de limpieza y desinfeccin.
oLos recipientes para transporte de muestras debe ser de material
irrompible y cierre hermtico.
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oRestrinja el ingreso a las reas de alto riesgo biolgico al personal no
autorizado, al que no utilice los elementos de proteccin personal necesarios
y a los nios.
oDisponga el material patgeno en las bolsas de color rojo, rotulndolas con
el smbolo de riesgo biolgico.
VI.- ELEMENTOS DE PROTECCIN PERSONAL
USO DE LOS ELEMENTOS DE PROTECCIN PERSON L
Los elementos de proteccin personal son un complemento indispensable de los
mtodos de control de riesgos para proteger al trabajador colocando barreras en
las puertas de entrada para evitar la transmisin de infecciones.
1.-Protectores oculares:En los procedimientos que
se generen gotas de sangre o lquidos corporales. Con
esta medida se previene la exposicin de mucosas de
boca, nariz y ojos, evitando que se reciban inculos
infectados.
2.-Mascarilla buco nasal:
protege de eventuales
contaminaciones con saliva, sangre o vmito, que
pudieran salir del paciente y caer en la cavidad oral y
nasal del trabajador. Al mismo tiempo, la mascarilla
impide que gotitas de saliva o secreciones nasales del
personal de salud contaminen al paciente, debe usarse
en los pacientes en los cuales se halla definido un plan de aislamiento de gota.
3.-Braceras:
Para evitar el contacto del
antebrazo y brazo con sangre o lquidos
corporales.
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4.-Guantes:
Reducen el riesgo de contaminacin por fluidos en las manos.
Los guantes deben ser de ltex bien ceidos para
facilitar la ejecucin de los procedimientos. Si el
procedimiento a realizar es invasivo de alta exposicin,se debe utilizar doble guante.
5-Gorro:
Se usa con el fin
de evitar en el trabajador de laboratorio el contacto
por salpicaduras por material contaminado y adems
evita la contaminacin de las sustancias o reactivos
que se manejan con los cabellos del trabajador delaboratorio.
VII. El RIESGO BIOLGICO
El Riesgo Biolgico es aquel susceptible de ser producido por una exposicin no
controlada a Agentes Biolgicos. Existe un smbolo internacional que
representa el Riesgo Biolgico. Este smbolo y signo internacional de
peligro biolgico debe colocarse en las puertas de los locales donde se
manipulen Agentes Biolgicos del grupo de riesgo 2 o superior .
Smbolo Internacional de Riesgo Biolgico
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Las vas de infecciones ms frecuentes
adquiridas en el laboratorio
A travs de la boca
Comer, beber y fumar en el laboratorio. Pipetear con la boca.
Transferencia de microorganismos a la boca mediante los dedos o
utensilios contaminados (bolgrafos, lpices, etc.).
A travs de la piel
Inoculacin accidental con una aguja hipodrmica, otros instrumentos
punzantes o vidrios.
Cortes, rasguos.
A travs de los ojos
Salpicaduras de materiales infecciosos en los ojos.
Transferencia de microorganismos a los ojos mediante
dedos contaminados.
A travs de los pulmones
Inhalacin de microorganismos transportados por el aire
VIII NIVELES DE BIOSEGURIDAD.
Nivel 1:
Trabajo que involucra a agentes de peligro potencial mnimo para el personal y
el medio ambiente. Representa un sistema bsico de contencin que se basa
en prcticas microbiolgicas estndar sin ninguna barrera primaria o secundaria
especialmente recomendada, salvo una pileta para lavado de manos.
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Nivel 2:
Trabajo que involucra a agentes de moderado peligro potencial para el personal
y el medio ambiente.
Es adecuado cuando se trabaja con sangre derivada de humanos, fluidos
corporales, tejidos, etc. donde puede desconocerse la presencia de un agente
infeccioso.
Se deben utilizar las dems barreras primarias y secundarias que correspondan,
tales como mscaras contra salpicaduras, proteccin facial, delantales y guantes
Nivel 3:
Trabajo que involucra a agentes que pueden causar enfermedades serias o
letales como resultado de la exposicin.
Al manipular agentes del Nivel de Bioseguridad 3 se pone mayor nfasis en las
barreras primarias y secundarias para proteger al personal en reas contiguas,
a la comunidad y al medio ambiente de la exposicin a aerosoles
potencialmente infecciosos.
Nivel 4:
Trabajo con agentes peligrosos o txicos que representan un alto riesgo
individual que ponen en peligro la vida. Los riesgos principales para el
personal que trabaja con agentes del Nivel de Bioseguridad 4 son la
exposicin respiratoria a aerosoles infecciosos, la exposicin de membranas
mucosas o piel lastimada a gotitas infecciosas y la auto inoculacin.
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IX USO DE PRODUCTOS QUMICOS.
Los productos qumicos generalmentepresentan pictogramas de peligrosidad,
los cuales indican los riesgos de
manipular un producto en particular.
Considerar la combustin y rango de
inflamabilidad de los distintos tipos de
gases, lquidos y slidos. Muchos
agentes qumicos son combustibles por
lo que su manipulacin debe realizarse
lejos del fuego.
Considerar los criterios de toxicidad en
el caso de productos corrosivos, irritantes, nocivos y txicos. Muchos reactivos
son agentes cancergenos y mutgenos.
El almacenamiento de reactivos debe ser el apropiado y acorde con su grado de
peligrosidad. Es importante considerarla incompatibilidad de reactivos, el tipo de
armarios de seguridad, el control de reactivos muy txicos, cancergenos ymutgenos.
Uso de gases comprimidos y licuados. Considerar los tipos de gases que se
emplean en el laboratorio, sus propiedades fsicas, tipos, riesgos y medidas de
seguridad.
X. MANIPULACIN DE AGENTES INFECCIOSOS.
Infecciones accidentales en laboratorios. La manipulacin de agentes biolgicos
tiene un riesgo potencial de contaminacin. Lo ms frecuente se relaciona con el
personal no calificado o descuidos de la normas de conducta.
Situaciones de riesgo en el manejo de agentes infecciosos: pipeteo, apertura de
recipientes hermticos; centrifugacin; homogeneizacin; agujas y jeringas.
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Medida de proteccin. Diseo de los experimentos. Diseo de los laboratorios
segn el tipo de agente infeccioso.
Desinfeccin y esterilizacin. Medidas elementales en la esterilizacin por vapor.
Causas ms frecuentes de esterilizaciones inadecuadas. Desinfeccin con agentes
qumicos lquidos o en solucin: niveles de desinfeccin y precauciones bsicas en
el empleo de agentes desinfectantes.
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FIOL
Lafiolas, tambin llamados "matracesaforados" son recipientes de vidrio de
cuello muy largo y angosto, en el cualtienen una marca que seala un volumenexacto a una temperatura determinadaque est grabada en el mismorecipiente y generalmente es 20c.Se emplean en operaciones de anlisis
qumico cuantitativo, para preparar
soluciones de concentraciones
definidas.
PROBET
Recipiente de vidrio para medir
volmenes que consiste en un cilindro
graduado; su precisin es bastante
aceptable, aunque por debajo de la
pipeta.
Las hay de capacidades muy diferentes:
10, 25, 50 y 100 ml.
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Recipientes de vidrio para medir
volmenes, son de gran precisin. Las hay
de capacidades muy diferentes: 0'1, 1'0,
2'0, 5'0, 10'0...
Al vaciar la pipeta se debe hacer
lentamente para evitar que quede lquido
pegado a las paredes. La ltima gota no es
necesario recogerla porque ya viene
aforada para que quede sin caer (salvo que
se indique lo contrario en la propia pipeta).
Pueden ser de dos formas: altos o bajos;
Sin graduar o graduados. Nos dan un
volumen aproximado (los vasos al tener
mucha anchura nunca dan volmenes
precisos).
Se pueden calentar sustancias en el
(pero no directamente a la llama) con
ayuda de una rejilla.
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Se emplea para trasvasar lquidos
o disoluciones de un recipiente a
otro de boca estrecha sin
desperdiciar contenido.
Tambin para filtrar, en este
caso se coloca un filtro de papelcnico o plegado sobre el embudo.
Conocido como Matraz de Sntesis
Extrema de Qumicos.
Matraz de vidrio donde se pueden agitardisoluciones, calentarlas (usando rejillas),
etc. Las graduaciones sirven para tener un
volumen aproximado.
En una valoracin es el recipiente sobre el
cual se vaca la bureta.
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Puede ser de vidrio o plstico.
Es un Recipiente de volumen variable,
normalmente pequeo. Sirven para hacer
pequeos ensayos en el laboratorio.
Se pueden calentar, con cuidado,
directamente a la llama. Se deben colocar
en la gradilla y limpiarlos una vez usados,
se colocan invertidos para que escurran. Si
por algn experimento se quiere mantener
el l uido se utilizan con ta n de rosca.
Consiste en una varilla de vidrio, que se utiliza para mezclar o disolver
las sustancias, pueden ser de diferentes dimetros y longitud. Pueden
prepararse agitadores o baguetas de diferentes tamaos de 6 o ms
milmetros de dimetro para evitar que se rompan fcilmente.
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Las pinzas o tenazas estn hechas de
metal, con ellas podemos tomar los tubos
de ensayo para fijarlos al fuego y
aumentar la temperatura de las soluciones
que estn contenidas en l.
Tambin hay otras pinzas para tubos
buretas u otros recipientes.
Es una lmina de vidrio en forma circular
cncava convexa. Se utiliza en qumica
para evaporar lquidos, pesar productos
slidos o como cubierta de vasos de
precipitados, y contener sustancias
parcialmente corrosivas..
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Es una pieza del equipamiento de
laboratorio, que se usa para sujetar
pinzas, tubos de ensayo, buretas,
embudos,
Tambin se usa para montar aparatos
de destilacin y otros equipos similares
ms complejos.
Se utiliza cuando no se tiene el soporte
universal para sostener objetos con
firmeza. Es ampliamente utilizado en
varios experimentos. La finalidad quecumple en el laboratorio es solo una, ya
que su principal uso es como herramienta
de sostn a fin de evitar el movimiento.
Sobre la plataforma del trpode se
coloca una tela de amianto para que la
llama no d directamente sobre el vidrio
se difunda me or el calor.
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Tambin llamada micro placa. Es una placa
con mltiples pocillos que se utilizan como
pequeostubos de ensayo;puede ser de
plstico o porcelana. Se ha convertido en un
utensilio estndar en la investigacin
analtica y clnica enmicrobiologa,y en
laboratorios de diagnstico. Se usa muy
frecuentemente en elensayo deinmunoabsorcin ligado a enzimas (ELISA).
Es un instrumento de laboratorio usado
para succionar y transferir pequeos
volmenes de lquidos y analizarlos. Suelen
ser de 20000o 1000u.Se presionar un poco para succionar y para
desechar la punta se presiona el botn
lateral.
https://es.wikipedia.org/wiki/Tubo_de_ensayohttps://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADahttps://es.wikipedia.org/wiki/ELISAhttps://es.wikipedia.org/wiki/ELISAhttps://es.wikipedia.org/wiki/ELISAhttps://es.wikipedia.org/wiki/ELISAhttps://es.wikipedia.org/wiki/Microbiolog%C3%ADahttps://es.wikipedia.org/wiki/Tubo_de_ensayo7/26/2019 GUIA-COMPLETA-DE-BIOQUIMICA-PRIMERA-UNIDAD (1).pdf
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Tambin llamada Pera de Succin.
Es un instrumento de laboratorio que se usa junto
a una pipeta para trasvasar lquidos sin la
necesidad de pipetear con la boca.
Una gradilla es una herramienta que
forma parte del material de
laboratorio y es utilizada para
sostener y almacenar gran cantidad
detubos de ensayo.
Su principal funcin es facilitar el
manejo de los tubos de ensayo.
Normalmente es utilizado para
sostener y almacenar este material.
Se encuentra hecho de madera,
plsticoo metal .
https://es.wikipedia.org/wiki/Tubo_de_ensayohttps://es.wikipedia.org/wiki/Tubo_de_ensayo7/26/2019 GUIA-COMPLETA-DE-BIOQUIMICA-PRIMERA-UNIDAD (1).pdf
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Instrumento de laboratorio creado por
Robert Bunsen en 1857. Se usa para
calentar muestras (reactivos) y para
esterilizar sustancias.
Se coloca un trpode sobre ste junto a una
rejilla de amianto y encima de estos
componentes se coloca el recipiente a
Es un equipo que crea un campo
magntico rotatorio que calienta
soluciones. No funciona muy bien en
soluciones es esas ni viscosas.
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Es un equipo de laboratorio que se usa
para realizar pruebas serolgicas,
aglutinacin, incubacin,
procedimientos bioqumicos,
Se utiliza en agua y a veces en aceite.
Su To va desde 37 a 100 grados.
Es un equipo que pone en rotacin una
muestra para acelerar la decantacin
o sedimentacin de sus componentes
(por la fuerza centrfuga) segndensidad.
As se separa en dos fases:
Fase Slida
Fase Lquida
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Tambin se le llama Horno de
Secado.
Es un equipo de laboratorio que se
utiliza para secar y esterilizar
recipientes de vidrio y metal; as
mismo para secar sustancias.
Su temperatura oscila entre 37 a
300 grados centgrados.
Balanza de laboratorio destinada a medir
pequeas masas.
Como mximo pesa 250gr.
Si se pesa una masa menor a 50mg, se anota el
peso del recipiente y se le suma el peso del
recipiente.
Si se pesa una masa mayor a 50mg, se desprecia
el eso del reci iente con el botn TARA.
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Es un recinto o espacio de trabajo cerrado y ventilado para trabajar
de modo seguro con materiales contaminados, agentes patgenos o
compuestos voltiles.
Forma parte del equipo biomdico de muchos laboratorios.
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Segundo
Informe
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Medicin glucmica
I. OBJETIVO GENERAL:Determinar la glucemia e importancia en la salud
II. OBJETIVOS ESPECFICOS: Determinar la concentracin de glucosa en suero o plasma
Conocer los valores de glucemia normales
Identificar factores que modifican la glucemia
III. MARCO TERICO:
Glucemia :
Medida de concentracin deglucosalibre en lasangre,suerooplasma sanguneo
La glucosa es la principal fuente de energa en los seres vivos. Por tal razn es
un metabolito fundamental en los procesos biolgicos. La determinacin
cuantitativa de este biocompuesto, ha sido objeto de muchos estudios y laliteratura ofrece diversas tcnicas de anlisis que varan de acuerdo con
diferentes factores como la naturaleza de la muestra, los contenidos de glucosa y
la viabilidad experimental.
Mantener los niveles de glucosa (azcar) en la sangre dentro de los valores
adecuados puede prevenir o retrasar los problemas de salud que surgen por la
diabetes. La mayora de las cosas que se requiere para cuidarse de diabetes son
cosas que usted mismo har.
Use un plan de alimentos.
Mantngase activo fsicamente.
Tome sus medicinas.
Trate de lograr los niveles deseados de glucosa en la sangre la
mayor parte del tiempo.
Lleve un registro de sus niveles de glucosa en la sangre con los
resultados de sus pruebas diarias y de las pruebas de A1C.
https://es.wikipedia.org/wiki/Glucosahttps://es.wikipedia.org/wiki/Sangrehttps://es.wikipedia.org/wiki/Suero_fisiol%C3%B3gicohttps://es.wikipedia.org/wiki/Plasma_sangu%C3%ADneohttps://es.wikipedia.org/wiki/Plasma_sangu%C3%ADneohttps://es.wikipedia.org/wiki/Suero_fisiol%C3%B3gicohttps://es.wikipedia.org/wiki/Sangrehttps://es.wikipedia.org/wiki/Glucosa7/26/2019 GUIA-COMPLETA-DE-BIOQUIMICA-PRIMERA-UNIDAD (1).pdf
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Qu ocasiona que suban o bajen mis niveles de glucosa?
Los niveles de glucosa en la sangre suben y bajan durante el da. Una de las
claves para cuidarse de la diabetes es que entienda lo que ocasiona estas subidasy bajadas. Si lo sabe, entonces puede tomar medidas para mantener la glucosa
en la sangre en un nivel adecuado.
Qu hace que se eleve la glucosa en la sangre?
Una comida o merienda con ms carbohidratos de lo usual
La inactividad fsica No tomar suficiente medicamento para la diabetes
Los efectos secundarios de otros medicamentos
Infecciones u otras enfermedades
Cambios en los niveles hormonales, como los de la menstruacin
Estrs
Qu hace que baje la glucosa en la sangre?
Perderse una comida o merienda, o comer una comida o merienda
con menos carbohidratos de los planeados
Bebidas alcohlicas, sobre todo si se toman con el estmago vaco
Ejercitarse ms de lo planeado
Tomar demasiado medicamento para la diabetes
Los efectos secundarios de otros medicamentos
Valores normales
Suero o Plasma: 75 115 mg/dL
En los nios pequeos se aceptan valores de 40 a 100 mg/dL
L.C.R: 40 80 mg/Dl
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IV. Reacciones qumicas que ocurren en la prctica
La glucosa oxidasa (GOD) cataliza la oxidacin de glucosa a cido glucnico. El
perxido de hidrgeno (H2O2), producido se detecta mediante un aceptor
cromognico de oxgeno, fenol-ampirona en presencia de peroxidasa (POD):
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de glucosa
presente en la muestra ensayada.
Glicemia enzimtica
Reactivos Provistos
S. Standard :
solucin de glucosa 100 mg/dl (1 g/l).
A. Reactivo A:
solucin conteniendo glucosa oxidasa (GOD), peroxidasa (POD),
4-aminofenazona (4-AF), buffer fosfatos pH 7,0 y 4-hidroxibenzoato en las
siguientes concentraciones:
GOD (microbiana) ................................................ 10 kU/l
POD (rbano) ......................................................... 1 kU/l
4-AF....................................................................0,5 mmol/l
Fosfatos................................................ 100 mmol/l, pH 7,0
Hidroxibenzoato...................................................12 mmol/l
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V. Materiales, Equipos y Reactivos :agua destilada 1 lt.
jeringa de 5 cc 3 c/u
alcohol
algodn
ligadura 2-3 x mesa
tubos de ensayo de 13 x 100
micro pipeta
gradilla
cubetas de espectofotrometro
centrifuga
bao maria
espectofotometro
reactivo:
VI. Procedimiento
1lavamos los tubos de ensayo con agua destila y luego los secamos.
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2 Vamos a extraer 3 muestras de sangre teniendo en cuenta las
medidas de bioseguridad y con mucho cuidado vamos a colocar de manera
pausada la sangre extrada en los tubos de ensayo
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3Vamos a llenar uncuarto tubo de ensayo
con la misma cantidad
que tienen los otros
pero con agua destilada
esta vez para que
pueda compensar el
peso al momento deponerlos en la
centrifuga
4Colocamos lostubos de ensayo en la
centrifuga durante 5
min a 2500 RPM
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5en otros 3 tubos
de ensayo con ayuda de
la micro pipeta vamos a
echar la glucosa es decir
el reactivo estndar
6Una vez terminadoel proceso de
centrifugado procedemos
a sacar los tubos de
ensayo y vamos a ver
que la sangre se
encuentra dividida en
eritrocito, plasma.
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8luego vamos a llevarlos tubos de ensayo al
equipo de bao mara
durante 5 minutos a
37C mientras los
movemos lentamente,
7Con ayuda de lamicropipeta vamos a
sacar una pequea
cantidad de plasma de
cada muestra
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9luego vamos avaciar el contenido de
los tubos en unas
cubetas de
espectrofotmetro
10luego esperamosque termine el
espectrofotmetro y
vemos las cifras que dio y
procedemos a calcular.
Luego limpiamos nuestra
rea de trabajo.
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VII.Clculos
Muestra de compaero que lleva una hora de haber comido
Muestra de una compaera
Como podemos ver a pesar del hecho de haber comido
recientemente se mantiene dentro de los valores normales
Observamos que se mantiene dentro de los valores normales
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Muestra de un compaero
A pesar de ser una cifra un poco menor a la de las dems
muestras observamos que an se mantiene dentro delrango promedio establecido.
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VIII. Aplicaciones en su profesin
La patologa ms comn relacionada con el metabolismo de los hidratos de
carbono es la diabetes mellitus. El diagnstico precoz y el control de los
pacientes diabticos, tienen por objeto evitar la cetoacidosis y las
complicaciones resultantes de la hiperglicemia, mediante el tratamiento
adecuado. Dado que existen mltiples factores causales de hiper o
hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condicin fisiolgica y/o la
patologa presente en el paciente.
IX. Conclusiones
El valor de glucemia proporcionado es un
importante dato para la valoracin de un
adecuado control de la diabetes.
Este valor puede verse influido o incluso
modificado por algunas variables resumidas
en este trabajo, algo importante a tener en
cuenta en la prctica clnica y cuando se realizan estudios comparativos
con las glucemias obtenidas en el laboratorio.
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X. Recomendaciones Si sus mediciones de glucosa en la sangre son frecuentemente ms
altas que las deseadas, consulte a su proveedor de atencin mdica.
Hable con su equipo de cuidado de la salud sobre cmo hacer cambios
en su plan alimenticio, su actividad fsica o sus medicamentos para la
diabetes.
Si sus mediciones de glucosa en la sangre son frecuentemente ms
bajas que las deseadas, la llamada hipoglucemia, cuando baja la glucosa
en la sangre, ocurre cuando su nivel de glucosa en la sangre disminuye
a menos de 70 mg/dl. Tener baja la glucosa en la sangre puede hacer
que se sienta hambriento, tembloroso, nervioso, sudoroso, mareado,
adormilado, ansioso o confuso. Si piensa que tiene demasiado baja la
glucosa en la sangre, mdasela con su medidor. Si el resultado es
menor de 70mg/dl, siga estas recomendaciones para regresar a un
nivel ms seguro. Consuma una de las opciones de carbohidratos de
esta lista cuanto antes (cada una tiene unos 15 gramos de
carbohidratos) para elevar su nivel de glucosa en la sangre:
3 4 pastillas de glucosa
Media taza (4 onzas) de jugo de fruta
Media taza (4 onzas) de refresco regular (no de dieta)
8 onzas de leche 5 7 piezas de dulces de caramelo
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1 cucharada de azcar o miel Vulvase a medir la glucosa en la sangre
despus de quince minutos. Si an la tiene en menos de 70 mg, tome
otra porcin de carbohidratos. Repita los pasos hasta que su nivel de
glucosa sea de por lo menos 70 mg/dl. Qu debo hacer si a menudo
tengo baja la glucosa en la sangre? Si su promedio de glucosa en la sangre
es bajo frecuentemente, deber hacer cambios en su plan de alimentos,
actividad fsica o medicinas para la diabetes. Lleve un registro de cundo
tuvo episodios de glucosa baja en la sangre. Anote las causas posibles,
tales como una actividad fsica no planeada, y luego hable al respecto con
su equipo de cuidado de la salud.
Utilizar guantes
No desechar los residuos en el lavadero
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CUESTIONARIO
1Por qu se produce mayor concentracin de lactato en los msculos, en el
cual hace que cause dolor en periodo largo de ejercicios?
Importancia del lactato sobre el sistema muscular
Cuando se produce lactato en los msculos, se producen iones de hidrgeno excesivos
junto con el lactato. Si existe una acumulacin sustancial, los msculos se vuelven muy
cidos. Estos iones de hidrgeno causan problemas con la contraccin de los msculos
durante el ejercicio.
Los atletas describen una sensacin de "quemar" o "apretar" en los msculos cuando elesfuerzo es extremo. Cuando el lactato es producido, el ion de hidrgeno es producido;
cuando el lactato sale de la clula, los iones de hidrgeno salen de la clula con el
lactato. Por lo tanto, el lactato no es la causa de la fatiga muscular. Pero est
directamente relacionado con la acidez que se cree ser la verdadera causa de ella.
Aunque a los atletas no les gusta esta sensacin de quemar, realmente es un mecanismo
de defensa contra dao al msculo. Demasiada acidez puede descomponer la fibra
muscular. Se teoriza que una de las causas del entrenamiento excesivo ("over-training")
es demasiado entrenamiento en niveles que producen altos niveles de cido.
Los atletas pueden producir menos lactato o despejar el lactato ms rpidamente de sus
msculos, el proceso reducir los iones de hidrgeno problemticos que inhiben su
desempeo.
La investigacin en los ltimos aos ha demostrado que aunque es importante una
produccin menor, la clave para el xito atltico es poder despejar el lactato del msculo
donde es producido.
Si el atleta entrena bien, su cuerpo mover o transportar el lactato a otro lugar
rpidamente y resolver el problema de tener niveles muy altos de lactato en los
msculos. Esto significa que cuando un atleta compite en un alto nivel podr mantenerniveles altos de esfuerzo durante ms tiempo si su cuerpo despeja el lactato
rpidamente.
Segundo, para los eventos que duran menos de 10 minutos (por ejemplo, la natacin, el
remo, el ciclismo en pista, el patinaje, y muchos eventos de correr), la habilidad de
producir grandes cantidades de energa hacia el final del evento es crtica para el xito.
El lactato sanguneo es una indicacin de cunta energa ha sido generada. Por lo tanto,
una de las mejores maneras para probar si el atleta ha generado niveles altos de energa
hacia el final de un evento, es medir los niveles de lactato en la sangre despus de un
esfuerzo mximo. Mientras ms alto, mejor.
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Mediciones del lactato
Debido a que el lactato juega un papel tan importante en la produccin de energa y el
desempeo deportista, los fisilogos del deporte y los entrenadores han desarrollado
varias maneras de medir y controlarlo.
La manera ms comn de medir el lactato es mediante una prueba de ejercicio graduado
2Dnde se efectuara la regulacin en la glucolisis y cules son los que inhiben sumecanismo?
La gluclisis est regulada por tres reacciones catalizadas por la HEXOCINASA
FOSFOFRUCTOCINASA y PIRUVATO CINASA.
Se inhibe la FOSFOFRUCTICINASA por concentraciones altas de ATP.
3Realiza el balance de energa de glucolisis y Cul es el balance neto en ATP y
caloras?
EN CONCLUSIN, SE FORMAN 2 ATP Y 2 NADH AL BALANCEAR LAS
REACCIONES QUE CONSUMEN ENERGA CON LAS QUE LA GENERAN
4Qu ruta de glucolisis se efecta por la fermentacin?
Las fermentaciones son, igual que la glucolisis, rutas metablicas caractersticasde la falta (o insuficiencia) de oxgeno ambiental. En esas condiciones, el
NADH+H+ no puede ser utilizado por la clula para transformarlo en ATP, sino
que su funcin celular consiste simplemente en recibir los protones y los
electrones desprendidos en otras reacciones celulares. Una vez conseguido esto, su
papel se agota, y lo que la clula necesita es regenerar el NAD+, cuya sntesis es
costosa, para seguir realizando su metabolismo. Algo similar ocurre con el
piruvato.
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Mientras que las clulas aerobias pueden seguir degradndolo y obteniendo la
energa que an contiene, si no hay oxgeno disponible es una molcula que
resulta "intil" para la clula, por lo que su destino final es su eliminacin. Lasfermentaciones van a dar solucin a ambos problemas cuando la clula se
encuentra en un ambiente anaerobio: por una parte, van a ceder los electrones y
los protones del NADH+H+ al piruvato (o a una sustancia relacionada con l),
regenerando as la coenzima que necesitan para seguir funcionando, y por otra
van a sintetizar un derivado del piruvato, que incluya esos protones y esos
electrones, que va a ser eliminado como sustancia de desecho.
5Realiza un cuadro con las diferencias ente la glucolisis anaerbica y la glucolisis
aerobia?
6Para qu sirve los NADH+?
Su funcin principal es el intercambio de electrones e hidrogeniones en la
produccin de energa de todas las clulas
Acta como coenzima en las reacciones redox.
Est implicado en reacciones de oxidacin y reduccin llevando los
electrones de una a otra.
GLUCOLISANAEROBICA
GLUCOLISAEROBICA
El producto glucoltico
dominante en la mayora de
los tejidos es el actato
El producto glucoltico
dominante en la mayora
de los tejidos es el piruvato
Se realiza sin oxigeno Se realiza con la presencia
del oxigeno
Hay dos ATP netos Es metabolizada por el ciclo
de Krebs
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7Qu aporta el ciclo de Krebs y por qu es importante?
Es una ruta metabolica, es decir, una sucesin de reacciones qumicas, que
forma parte de la respiracin celular en todas las clulas aerobicas.
El ciclo de Krebs tambin proporciona precursores para muchas biomolculas,
como ciertos aminocidos. Por ello se considera una via anfibolica es decir,
catablica y anablica al mismo tiempo.
Es importante el ciclo de Krebs porque es el proceso centrl de la obtencin de
energa en todos los organismos de planeta
8Grafique Ud. La etapa de la hemostasia de la glucosa
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9Existen individuos que no digieren disacridos, presentan intolerancia a la leche y a los
pasteles, debido a la lactosa y a la sacarosa que contienen. Estos individuos pueden tomarmiel natural, pero no miel adulterada, si la miel natural la fbrica las abejas a partir de la
sacarosa y la adulterada tambin se hacen con la sacarosa. A que puede ser debida esta
diferencia en su aceptacin digestiva?
Debido a que la miel adulterada est mezclada con otros aditivos como glucosa
comercial o jarabe de alta fructosa y por ello no tiene la misma aceptacin digestiva
que la miel natural.
10Habitualmente para las conservas de frutas se utiliza sacarosa Por qu la glucosa
no es adecuada como conservante?
La glucosa se comporta como reductor, dado que el grupo aldehdo (-CHO) de la forma
abierta se oxidara hasta cido (-COOH) por la actividad de bacterias aerobias, originando
fermentaciones no deseadas.
La sacarosa, al ser un azcar no reductor, resiste durante ms tiempo la acidificacin de
las conservas dulces.
11Cuando la sangre se extravasa, por ejemplo en un hematoma, se destruyen hemates yse libera hemoglobina, explicar porque la zona se pone primero morada y posteriormente sevuelve amarillo
Las extravasacin consiste en la salida de la sangre de las venas por rupturas de las
venas. La sangre empieza a migrar en zonas adyacentes donde ocurri el accidente
siempre en el plano del tejido celular subcutneo que es donde se le localizan las venas
superficiales, la sangre venosa hace que la coloracin de la piel cambie a un tono morado,
luego de unos das la sangre se va reabsorbiendo cambiando a un tono verdoso para
finalmente cambiar a color amarillento y luego restaurar el color normal de la piel
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12En estos febriles, al agotarse el glucgeno, y no ingerir alimento, se produce un
exceso de cuerpos cetnicos, sealar que tipo de biomolculas se estn degradando para
originarlos
Los cuerpos cetnicos se producen principalmente en las mitocondrias de las clulas del
hgado. Su sntesis ocurre en la respuesta a bajos niveles de latidos, y despus del
agotamiento de las reservas celulares de glucgeno. la produccin de cuerpos cetnicos
comienza para hacer disponible energa que es guardada como cidos grasos. Los cidos
grasos son enzimticamente descompuestos de la beta oxidacin para formar acetil CoA
13si la membrana celular es impermeable a los azucares fosforilados, que integrantes de
la glucolisis podrn atravesarla y cuales no podrn.Atraviesan todos los azucares glucosa fructuosa y galactosa. Una vez adentro se
fosforilan lo cual, significa que no podrn escapar hacia el exterior y estarn preparados
para su metabolismo. Es decir, las formas fosforiladas de estos azucares simples no
pueden atravesarla
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XI. Bibliografa
http://professional.diabetes.org/
http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bi
oquimica/guia_1_3.pdf
http://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20e
spanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdf
http://www.spinreact.com/files/Inserts/Bioquimica/BSIS17_GLU_TR_201
3.pdf
http://professional.diabetes.org/http://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioquimica/guia_1_3.pdfhttp://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioquimica/guia_1_3.pdfhttp://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioquimica/guia_1_3.pdfhttp://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioquimica/guia_1_3.pdfhttp://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdfhttp://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdfhttp://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdfhttp://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdfhttp://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdfhttp://www.wienerlab.com.ar/VademecumDocumentos/Vademecum%20espanol/glicemia_enzimatica_aa_liquida_sp.pdfhttp://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioquimica/guia_1_3.pdfhttp://avalon.utadeo.edu.co/comunidades/estudiantes/ciencias_basicas/bioquimica/guia_1_3.pdfhttp://professional.diabetes.org/