GUIA de BiologiaCelMol2014-I

Embed Size (px)

Citation preview

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    1/62

    1

    ASOCIACINUNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

    FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

    SEMESTRE 2014I

    I CICLO

    GUIA DE PRCTICA DE BIOLOGIA CELULAR YMOLECULAR

    PROFESOR COORDINADOR:Mg. EDITH RODRIGUEZ QUISPE

    https://www.google.com.pe/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&docid=00xEyc08sfrqQM&tbnid=0khwSCXxmTwfzM:&ved=0CAUQjRw&url=http%3A%2F%2Fwww.logrosperu.com%2Fcentros-de-estudios-superiores-del-peru%2Funiversidades-peruanas%2Flima%2F77-universidad-privada-san-juan-bautista-usjb.html&ei=XsXqUpnnEsm5kQfR_IDABw&bvm=bv.60444564,d.eW0&psig=AFQjCNESpmSquELS9CVBgpGqQ7yOs15Xtg&ust=1391204060163677
  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    2/62

    2

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N1

    APLICACIN DEL MTODO CIENTFICO

    I. OBJETIVOS:

    Dar a conocer los lineamientos bsicos del mtodo cientfico y su aplicacinAdiestrar al estudiante en el uso del mtodo cientfico para usarlos en el campo de la medicina.

    II. MATERIALES:

    Lectura (s )seleccionada (s) a partir de revista especializada.

    III PROCEDIMIENTO.- Hacer una descripcin de las diferentes etapas que comprende en mtodo cientfico.- Leer el artculo seleccionado rpidamente para tener una idea general del mismo.

    - Proceda a leer el artculo cuidadosamente y analizarlo con el propsito de establecer lo siguiente:1.Reconocimiento del problema planteado2. Formulacin de la hiptesis3.Formulacin de objetivos y mtodos4.Prueba de hiptesis mediante la experimentacin5.Anlisis de resultados y conclusiones.

    IV.RESULTADO-Entregar el reporte del artculo evaluado considerando todos los pasos del mtodo cientfico.

    Artculo de la Revista Peruana de Medicina Experimental y SaludPblica 2013 30(4):616-20.Artculo de la Revista Peruana de Medicina Experimental y SaludPblica 2008 25(2):250-52.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    3/62

    3

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N2

    LABORATORIO: INSTRUMENTAL Y BIOSEGURIDAD

    III. OBJETIVOS:

    Dar a conocer los lineamientos bsicos de organizacin, instrumental y seguridad en el laboratorio sea de

    anlisis clnico o de investigacin.

    IV. MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO:

    Tubos de ensayo Placas de Petri Pipetas Baguetas o varilla de vidrio Matraces(Erlenmeyer, Fiolas) Probetas Propipeta Beaker (vasos de precipitacin)

    Pipetas (graduadas y volumtricas Mecheros de Bunsen y de alcohol Asas de Kolle o asa de siembra Balanza analtica Estufa o incubadora Espectrofotmetros o colormetros pH metros

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    4/62

    4

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    5/62

    5

    V. PROCEDIMIENTO:A)Descripcin de tipos de Laboratorio : clnico, investigacin y acadmico

    1. ORGANIZACIN:Generalmente los laboratorios funcionan de acuerdo a las actividades que ha de realizar se debeconsiderar reas, estructura y diseo interior, considerando lo siguiente: Mesas de trabajo y repisa sobre la mesa Mesa para instrumentales (balanza, microscopio, pH metro, etc.)

    Armarios para reactivos y material de vidrio Extractor de gases.

    2. SECCIONES:

    Cada laboratorio puede presentar una o varias secciones dependiendo de la naturaleza de la actividad.En forma general el laboratorio debe contar reas fsicas o secciones:

    Toma de muestra Separacin y clasificacin de muestras Lavado y esterilizacin Almacn Sala de trabajo

    B)Clasificacin y Descripcin y Cuidados de los Materiales de ms Uso en el Laboratorio.Con la ayuda del docente proceda a la descripcin y clasificacin y dibujo de la mesa; los materialespueden ser clasificados como: Volumtricos, Recipiente, Soporte, de uso especfico.

    .1. Cuidado del material de vidrio:Todo material de vidrio debe estar ubicado en una zona especfica y codificados. El material a guardardebe estar completamente limpio, para lo cual debe ser sometido a un riguroso lavado, dependiendo delcaso se usar mezcla sulfocrmica o agua regia debiendo ser sometidos posteriormente a numerososenjuagues con agua corriente y finalmente con agua destilada o bidestilada, y otros podrn serautoclavados. Los materiales sern sometidos a temperaturas de 37- 45 C para el secado respectivo.

    3.2. Cuidado de equipos:

    Todo equipo o instrumental debe estar ubicado en una zona de poco transito, alta iluminacin y en unamesa slida. Para el manejo de los mismos se debe tener conocimiento de la manipulacin debindosecontar con el manual respectivo. Antes de comenzar a operar un equipo verificar el voltaje, resistencia yamperaje del equipo.Terminado el trabajo el instrumental debe quedar limpio y apagado. Anotar en el cuaderno de control lafecha, hora de inicio y trmino de uso del equipo.

    C)BIOSEGURIDAD:

    La seguridad en el laboratorio es de alta responsabilidad. Cualquier actividad en un laboratorio tieneriesgos potenciales. Las reglas generales son:1. El laboratorio NO es un lugar para correr, empujar y bromear.2. Aprende donde esta y como se usa el equipo de seguridad.

    3. Lee todas las instrucciones para la actividad ANTES de empezar a trabajar. Pon atencin a lasnotas que indican PRECAUCION.

    4. Cualquier accidente, informar inmediatamente al responsable del laboratorio.5. No comer ni beber en el laboratorio. No probar ninguna sustancia que se use en el laboratorio.

    Lavarse las manos antes y despus de cualquier actividad.6. Llevar a cabo solamente aquellas actividades que se nos asigna. Nunca trabajes solo en el

    laboratorio7. Mantener el rea de trabajo limpia: sin libros, ni papeles, ni equipo alguno innecesario.8. Asegurarse de apagar las salida de gas, mecheros, hornillas y de cerrar todas las llaves de agua al

    terminar la clase.9. Sigue las instrucciones del profesor acerca de la forma adecuada de limpiar y recoger los

    materiales.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    6/62

    6

    10. Usar MANDIL para cubrir la ropa cuando se esta trabajando en el laboratorio.11. Al calentar materiales, inclinar el tubo de ensayo en direccin fuera de uno y de los dems.

    C.1 SMBOLOS y PICTOGRAMAS DE SEGURIDAD :1-Reconocer y ubicar los smbolos de bioseguridad segn la clasificacin de: advertencia,prohibicin, salvamento y de obligatoriedad.2- Significado de los pictogramas en las etiquetas de los reactivos.

    SMBOLO SIGNIFICADO SMBOLO SIGNIFICADO

    T+ Muy Txico. O Comburente.

    T Txico. C Corrosivo.

    Xn Nocivo. Xi Irritante.

    F Fcilmente Inflamable. E Explosivo.

    F+ ExtremadamenteInflamable.

    N Peligroso para medioambiente.

    VI.CUESTIONARIO:(entregar al inicio de la prctica incluir referencias bibliogrficas)1. El vidrio es un material de amplio uso en el laboratorio qu propiedades debe tener este material?2. Dibuje los smbolos de radiacin, riesgo biolgico, producto cancergeno.3. Cules son las caractersticas de los smbolos de obligatoriedad y de advertencia. Dibuje 1 cada uno

    de ellos.4.Qu son los materiales corrosivos y comburentes, de dos ejemplos de cada uno de ellos.5. Qu es y cul es su importancia del espectrofotmetro y centrifuga en la medicina.

    V.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    7/62

    7

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    INFORME PRACTICA N2: LABORATORIO: INSTRUMENTAL Y BIOSEGURIDAD

    ESTUDIANTE:..

    PROFESOR:.

    INTRODUCCION

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    8/62

    8

    II. MARCO TEORICO (2 Carrillas)

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    9/62

    9

    III. OBSERVACIONES:3.1 Materiales de Recipiente

    1.a)Nombre:b) Caractersticas-uso.

    2.a) Nombreb)Caractersticas-uso

    3.a) Nombreb)Caracteristicas-uso

    4.a) Nombreb)Caractersticas-uso

    3.2 Materiales Volumtricos

    1.a) Nombreb)Caractersticas-uso

    2..a) Nombreb)Caracteristicas-uso

    3. .a) Nombreb)Caractersticas-uso

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    10/62

    10

    3.3 Materiales de uso Especfico:

    1.a) Nombreb)Caractersticas-uso

    2..a) Nombreb)Caractersticas-uso

    3.a) Nombreb)Caractersticas-uso

    4.a) Nombreb)Caractersticas-uso

    5a) Nombreb)Caractersticas-uso

    6. a) Nombreb)Caractersticas-uso

    7. .a) Nombreb)Caractersticas-uso

    8.a) Nombreb)Caractersticas-uso

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    11/62

    11

    4.SIMBOLOS de SEGURIDAD

    4.1 Salvamento

    4.2 Obligatoriedad

    4.3 Advertencia

    4. Prohibicin

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    12/62

    12

    CONCLUSIONES :

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 3

    RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LOS CARBOHIDRATOS

    I. OBJETIVO

    Reconocer las unidades monomricas y macromoleculares como componentes fundamentales de todos los seresvivos.

    II. MATERIALES POR MESA

    Solucin de Glucosa al 1% (Monosacrido)Solucin de fructuosa al 1%(Monosacrido)Solucin de Sacarosa al 1% (Disacrido, azcar comn)Solucin de Maltosa al 1% (Disacrido)Solucin de Almidn al 1% (Polisacrido)Solucin de Lugol

    cido sulfrico concentradoReactivo de MolishReactivo de BenedictTubos de 13x100Tubos de 16x150Pipeta de vidrio de 5 ml. graduadaPropipetaPinzas de maderaMecheros, trpode, rejilla de asbestoGuantesPlumn marcadorIII. PROCEDIMIENTO

    3.1. Determinacin General de Glcidos (reaccin de Molish):

    Los Glcidos o Hidratos de carbono por accin deshidratante del cido sulfrico originan compuestos derivadosdel furfural, los que en presencia del alfa-naftol presente en el Reactivo de Molish, formarn un compuestocoloreado.

    Preparacin:

    1. Colocar 1 ml. De cada solucin del glcido al 1% (Glucosa, Fructuosa, Sacarosa y Almidn) en un tubo de13x100 y roturarlo.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    13/62

    13

    2. Adicionar a cada tubo con glcido una (1) gota del Reactivo de Molish, agitar suavemente.3. Agregar lentamente por la pared del tubo sin agitar 1 ml. de cido sulfrico concentrado.4. Observar la formacin de un anillo coloreado en la zona de interfase.

    3.2. Determinacin de Azcares Reductores:

    Un Azcar reductor al ser sometido a la accin del calor en el medio alcalino del Reactivo de Benedict, sufrefenmenos de enolizacin y se fragmenta formando cuerpo fuertemente reductores para el cobre del Reactivo deBenedict que se transforma en Ion cuproso (Cu+) el que reaccionar con los iones OH-del medio para formarOxido cuproso (Cu2O) que es de color rojo ladrillo.

    Preparacin:

    1. Colocar 2 ml. de cada solucin de glcido al 1% (Glucosa, Fructuosa, Sacarosa, Maltosa y Almidn) enun tubo de 16x150 mm y roturarlo.

    2. Adicionar 1 ml. de Reactivo de Benedict a cada tubo.3. Someter los tubos a ebullicin en agua hirviendo en un beaker por 5 minutos.Retirarlos con ayuda de una

    pinza.4. Observar la formacin de color (rojo ladrillo si es positivo)

    3.3. Determinacin de Almidn:

    El yodo del Lugol es absorbido por el almidn a nivel de los enlaces glucosidicos y forma con l compuestoscomplejos de color azul negruzco (yoduro de almidn).

    Preparacin:

    1. Colocar 2 ml. de solucin de Almidn al 1% en un tubo de 16x150 mm.2. Adicionar 3 gotas de Lugol y agitar.3. Observar la formacin de color (azul negro si es positivo)4. Calentar el tubo hasta perder el color y luego enfriar el tubo.

    IV. CUESTIONARIO: (entregar al inicio de la prctica -incluir referencias bibliogrficas)

    1. Diga cuales son las principales fuentes de carbohidratos en nuestra dieta y cul es el requerimiento diario?2. Definir azcares reductor y no reductor, de 2 ejemplos.3. Explique el significado de deficiencia de disacaridasa, de un ejemplo.4. Establezca las diferencias estructurales y funcionales entre el almidn y el glucgeno

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    14/62

    14

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

    FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    INFORME PRACTICA N3 RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LOS CARBOHIDRATO

    ESTUDIANTE:..

    PROFESOR:.

    I.INTRODUCCION

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    15/62

    15

    II.MARCO TEORICO

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    16/62

    16

    III.OBSERVACIONESRESULTADO e INTERPRETACIN

    1.Determinacin General de Glcidos (reaccin de Molish):

    Reactivos usados:

    a-Muestras:

    b-Resultado y Explicacin fundamentada de lo ocurrido.:

    2. Determinacin de Azcares Reductores (Reaccin Benedict)Reactivos usados:

    a. Muestras: + +

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    17/62

    17

    b. Resultado y Explicacin o fundamentada de lo ocurrido.:

    3.Determinacin del Almidn :Reactivos usados:

    a. Muestras: + +

    b. Resultado y Explicacin o fundamentada de lo ocurrido.:

    IV.CONCLUSIONES

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    18/62

    18

    V.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICASASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

    FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

    CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 4

    RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLOGICO DE LIPIDOS , PROTEINAS y ADN

    I. OBJETIVOReconocer que compuestos orgnicos como los lpidos y protenas son constituyentes importantes en todos losseres vivos.

    II. MATERIALES POR MESA

    Aceite comestible Albmina al 2% Alcohol Cloroformo ter etlico Solucin alcohlica de Sudam III Hidrxido de sodio al 40% Hidrxido de sodio al 20% Sulfato de cobre al 1% cido ntrico concentrado Etanol FRIO Solucin de Lisis: EDTA,SDS,NACl Azul de metileno Tinta roja 6 Fresas Gasas Baguetas Tubos de 16 x 150 mm. Pipetas graduadas de 5 ml. Morteros Embudos Guantes Propipetas Probeta de 10ml

    III. PROCEDIMIENTO

    1.DETERMINACION DE LIPIDOS

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    19/62

    19

    A. Solubilidad de los LpidosLos lpidos son insolubles en agua y solubles en solventes orgnicos como el ter y cloroformo.

    Preparacin:

    1. Colocar 1 ml. de Aceite en cada tubo y agitar

    2. Agregar:En el tubo N 1: 1 ml de agua destiladaEn el tubo N 2: 1 ml. de AlcoholEn el tubo N 3: 1 ml. de cloroformoEn el tubo N 4: 1 ml. de ter etlico

    3. Agitar (con la misma intensidad a c/u) los tubos..4. Observarlos y determinar el grado de solubilidad de mayor a menor.

    B. Solubilidad y Tincin en Sudam IIIEl Sudam III es un tinte diazo del tipo lisocromo altamente soluble en lpidos tiindolos en la gamadel del rojo cereza al anaranjado.

    Preparacin:

    1. Colocar 1 ml. de aceite comestible en dos tubos de 13x100 mm.2. Adicionar 1 ml. de Sudam III a uno de ellos y al otro agregar 1ml de tinta roja, agitar dejar reposar .3. Observar la coloracin producida en en la zona del aceite en uno de los tubos.

    C. Saponificacin.Las grasas reaccionan en caliente con hidrxido sdico o potsico descomponindose en glicerina y cidos

    grasos. stos se combinan con iones sodio o potasio del hidrxido para dar jabones, que son por ende lassales sdicas o potsicas de los cidos grasos.

    1. Colocar en un tubo 16x150mm 2ml de aceite y 2ml de NaOH 20%.2.Agitar enrgicamente y colocar el tubo en bao mara de 20 a 25 minutos.3. Observe en el tubo las 3 fases: inferior que contiene la solucin de soda sobrante junto con glicerina formada,

    Otra intermedia semislida que es el jabn formado y la superior lpidica de aceite inalterado.

    2.DETERMINACION DE PROTEINAS

    A. REACCION DE BIURETLos compuestos que contienen dos o ms enlaces peptdicos forman un complejo con las sales de cobre

    en un medio fuertemente alcalino, dando un color prpura o violeta.

    Preparacin:

    1. Colocar 2 ml. de la solucin de Albmina al 1% o solucin Clara de huevo al 10% en un tubo de16x150 mm.

    2. Agregar 2 ml. de la solucin de Hidrxido de sodio al 40%y mezclar.3. Aadir 2 gotas de Sulfato de cobre al 1%.4. Incubar a 37 C por 10 minutos.5. Observar la coloracin producida.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    20/62

    20

    B. REACCIN XANTOPROTECASe emplea para determinar la presencia de protenas solubles en una solucin, empleando cido ntricoconcentrado (HNO3). Las protenas que presentan aminocidos con anillos bencnicos, dan derivadosnitrogenados que se colorean de amarillo.

    Preparacin:

    1. Colocar 2 ml. de la solucin de Albmina al 1% o Clara de huevo al 10% en un tubo de 16x1502. Adicionar 2 ml. de cido ntrico concentrado.3. Observar la formacin de un precipitado blanco y hervir por 3 minutos.4. Observar la coloracin producida.

    3. EXTRACCIN DE ADN1.Colocar 4 ml de solucin de lisis adicionar tres fresas (sin hoja) en un mortero, proceder a triturar

    por6minutos.

    2. Seguidamente filtre lo triturado con la ayuda de un embudo con gasa en un tubo de 16x150.3. Aadir al filtrado 5 ml .de etanol frio e introducir rpidamente una bagueta delgada y girar sobre su

    mismoeje a fin para recuperar el ADN .4. Reconocer el carcter cido del material obtenido usando un colorante bsico como el azul de metileno.

    IV. CUESTIONARIO:

    1. Qu son los disolventes orgnicos?2. Cul es la composicin bsica de ADN3. Qu es la obesidad y la proteinuria4. Qu supone la desnaturalizacin de una protena?

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    21/62

    21

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    INFORME PRACTICA N4 RECONOCIMIENTO EN MATERIAL BIOLGICO DE LIPIDOS, PROTEINAY ADN

    ESTUDIANTE:..

    PROFESOR:.

    I.INTRODUCCION

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    22/62

    22

    II. MARCO TEORICO

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    23/62

    23

    III..OBSERVACIONESRESULTADO e INTERPRETACIN

    1.Lpidosa. Solubilidad (total, parcial, insoluble)Muestra:Solventes usados:

    Resultado y Fundamento:

    1.b Solubilidad y tincin en Sudan IIIMuestra:Reactivo usado:

    Resultado y Fundamento:

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    24/62

    24

    1.c Saponificacin:Muestra:Rectivos:Fundamento:

    2. Proteinas2.a Reaccin de Biuret

    Muestra:

    Reactivos usados:Resultados y Fundamento

    2b. Reaccin XantoproteicaMuestra:

    Reactivos usados:Resultados y Fundamento

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    25/62

    25

    3.Extraccin ADNMuestra:

    Reactivos usados:Resultados y Fundamento

    IV.CONCLUSIONES DE LA PRACTICA

    V.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    26/62

    26

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

    CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N5

    MICROSCOPIA: ESTUDIO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO

    I. OBJETIVO

    1. Conocer e identificar correctamente las partes pticas y mecnicas del microscopio compuesto.2. Familiarizar al alumno con el uso correcto, cuidado y conservacin del microscopio.

    II. MATERIALES

    Microscopios Lminas o portaobjetos Laminillas cubreobjetos Lminas artrpodo (piojo, pulga, ) Suero fisiolgico Pipeta Pasteur 1 Plumn indeleble Papel lente Fibra de pelo y lana

    .

    III. PARTES DEL MICROSCOPIO

    Reconocer cada una de las siguientes partes del microscopio:

    PARTE MECANICA

    Tubo portalentes y cremallera Tornillos macro y micromtrico Revolver Platina Condensador Brazo y Pie

    PARTE OPTICA

    Ocular

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    27/62

    27

    Objetivos Espejo Lentes de condensador Diafragma IV. SISTEMAS QUE COMPRENDE EL MICROSCOPIO

    1. Sistema de soporte: comprende el brazo, el pie, el tubo ocular, el revolver y la platina.

    2. Sistema de Iluminacin: comprende el foco, condensador y diafragma.3. Sistema de Ajuste: comprende el macromtrico, micromtrico y cremallera4. Sistema de Aumento: comprende el ocular generalmente de 10 x , 15 x y los objetivos de 5x, 10, 40, y

    100x.

    V. PROCEDIMIENTO.

    1.Preparar lminas hmedas (gota de suero fisiolgico mas la muestra) con hebra de algodn, hebra de cabello, letrae en posicin de lectura .

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    28/62

    28

    2. Realizar las observaciones de dichas muestras con los objetivos4x, 10x y 40x3. Verificar con la lmina de la letra e, que los movimientos en estos sistemas son invertidos.4.Observar con los objetivos de 4x y 10x las lminas de artrpodos.

    VI. CUESTIONARIO

    1. Definir que es una imagen real y que una imagen virtual2. Cules son las unidades de medida de longitud empleadas en microscopia?3. Defina aumento y, resolucin del microscopio.4. Cmo se define un microscopio electrnico y cules son sus aplicaciones mdicas.

    VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    29/62

    29

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    INFORME PRACTICA N5 MICROSCOPIA: ESTUDIO Y MANEJO DELMICROSCOPIO

    ESTUDIANTE:..

    PROFESOR:.

    I. INTRODUCCION

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    30/62

    30

    II.MARCO TEORICO

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    31/62

    31

    III.OBSERVACIONES

    1.Muestra de Algodn

    4X 10X

    Aumento Total: Aumento Total:Caractersticas: Caractersticas:

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    32/62

    32

    Aumento total:40x

    Caractersticas:

    2.Muestra de Cabello

    4X 10X

    Aumento Total: Aumento Total:Caractersticas: Caractersticas:

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    33/62

    33

    Aumento total:40x

    Caractersticas:

    3.Muestra de letra e

    4X 10X

    Aumento Total: Aumento Total:

    Caractersticas: Caractersticas:

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    34/62

    34

    Aumento total:40xCaractersticas:

    4.Muestra de Pediculus humanusPiojo

    4X 10X

    Aumento Total: Aumento Total:Caractersticas: Caractersticas:

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    35/62

    35

    5.Muestra de Pulex irritansPulga

    4X 10X

    Aumento Total: Aumento Total:Caractersticas: Caractersticas:

    IV.CONCLUSIONES

    V.REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    36/62

    36

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 6

    OBSERVACIONES CELULARES: PROCARIOTES (BACTERIAS) Y EUCARIOTES (HONGOS, PARSITO ).

    I. OBJETIVO

    Conocer diversos organismos microbianos denominados Bacterias, Protozoarios, hongos y parsitos que estnformados por una sola o varias clulas y que habitan diversos medios naturales.Visualizar ciertas caractersticas estructurales en ellas.

    MATERIALES POR MESA

    Laminas con tincin de Gram deEscherichia coli(bacilos) y Streptococcus (cocos)Lminas con Tincin de Ziehl Neesel deMycobacteriumLaminas de muestra fungales (Hongos): PenicilliumMuestra de TeniaPalitos mondadientesSolucin fisiolgica al 0.85%Solucin Mercurio cromoSolucin de Violeta de genciana

    Alcohol yodadoLamina portaobjetosLamina cubreobjetoAceite de inmersinDepsito para eliminar lminas y laminillas.MicroscpiosGuantesPlacas Petri

    PROCEDIMIENTO1.Observacin de Microflora bacteriana en cavidad bucal (Tincin de Vag)

    1. Colocar una gota de solucin fisiolgica sobre una lmina.2. Con el mondadientes obtener una muestra de sarro dental y esparcir con movimientos circulares

    en la gota de solucin fisiolgica.3. Secar a temperatura ambiente y luego cubrir con colorante Mercurio de cromo por 5 minutos.4. Enjuagar y aplicar inmediatamente el colorante Violeta de genciana, dejar por 3 minutos, para

    luego lavar con agua de cao.5. Dejar secar la muestra preparada por accin del calor o al medio ambiente.6. Observar la lmina de 100x. e identifique las diferentes formas bacterianas.

    2.. Observacin de organismo procarionte en la lmina deE. coli(tincin de Gran) con el objetivo de100x.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    37/62

    37

    3.Observacin de organismo procarionte en Lmina de Streptococcus(tincin de Gram) con el objetivo de100x.

    4.Observacin deMycobacterium turbeculosus(tincin Ziehl Neesel) con el objetivo de 100x

    5. Observacin de organismo eucarionte del reino fungi con los objetivos de 4x y 10x (lminas

    coloreadas con azul de lactofenol)6. Observacin de un parsito (identifique sus partes). Use Guantes.

    CUESTIONARIO1. Establezca diferencias entre un organismo Procarionte y eucarionte.2. Qu es la tincin o coloracin de Gram, como se realiza?3. Cules son las dos formas tpicas de los hongos4. Describa 5 enfermedades producidas en el hombre por bacterias y hongos

    BACTERIAS (Procarionte)

    http://docentes.educacion.navarra.es/metayosa/bach2/2biomicro3.html
  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    38/62

    38

    HONGOS (Eucarionte)

    Penicillium

    PARASITO (EUCARIONTE)

    https://www.google.com.pe/search?sa=G&q=conidios+y+conidioforos&tbm=isch&tbs=simg:CAQSZRpjCxCo1NgEGgIICQwLELCMpwgaPAo6CAESFLoHxgakBqMGoQaiBr8H9Qb2BvkGGiCesqmI-mo9d3Q9n7S4pIFk6JRneFi6YI21dhJJ3PKWSQwLEI6u_1ggaCgoICAESBFZzUcMM&ei=lmzyUufuG8upsATe04H4DQ&ved=0CCAQwg4oAA
  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    39/62

    39

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 7

    OBSERVACION DE MEMBRANA Y PARED CELULAR: CELULA ANIMAL Y VEGETAL

    I. OBJETIVO

    Poder diferenciar al microscopio las caractersticas que presentan la membrana celular de la clula animal y lapared celular de la clula vegetal.

    II.MATERIALES POR MESA

    Muestra de clula epitelial de la mucosa bucalMuestra de catfila de cebolla (Allium cepa)Lmina de hongos:Penicillium y AspergilliusMicroscopiosLminas portaobjetosLaminillas cubreobjetosBistur

    Pinza de punta rectaMechero de alcoholColorante Azul de metilenoColorante LugolAlcohol yodadoSolucin fisiolgicaPapel secantePapel lente

    III.PROCEDIMIENTOA) OBSERVACION DE CELULA ANIMAL (RASPADO DE MUCOSA BUCAL)

    1. Colocar una gota de solucin fisiolgica sobre dos lminas portaobjetos.2. Con la ayuda de un hisopo hacer un raspado de la mucosa bucal.3. Colocar la muestra obtenida sobre las lminas que tienen la gota de solucin fisiolgica,4. Agregar a una lmina una gota de suero fisiolgico y a la otra aplicar una gota del colorante azul de

    metileno.5. Cubrir las preparacines con una laminilla cubreobjeto.6. Observar las lminas con objetivo de 10X y 40X.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    40/62

    40

    1- Membrana plasmtica, 2- Mitocondria,3- Retculo endoplsmico rugoso, 4- Ribosomas,5- Nucleolo, 6- Cromatina,7- Citosol (=hialoplasma), 8- Diplosoma (=centriolos),

    9- Retculo endoplsmico liso, 10- Aparato de Golgi

    B)OBSERVACION DE CELULA VEGETAL (CATAFILA DE CEBOLLA)

    1. Con ayuda de la pinza separe una de las catfila de la cebolla y extindalo sobre la lmina portaobjeto.2. Con el bistur corte cuadritos de medio centmetro de catfila.3. Disponga de dos lminas y coloque en ella un cuadradito de catfila.4. Agregar a una lmina una gota de suero fisiolgico y en l otra una gota del colorante lugol4. Cubrir las preparacines con una laminilla cubreobjeto.5. Observar con objetivos de 10x y 40x

    C) OBSERVACION DE UNA CELULA FUNGICA

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    41/62

    41

    1. En una lmina preparada observar un cultivo de hongo coloreada con Azul de Lactofenol.2. Observar con objetivos de menor y mayor aumento3. Reconocer sus partes y precisar su pared celular. .

    HONGOS PLURICELULARES

    Aspergillius

    Penicil li um :1. Conidiforo 2. Mtula 3. Filide 4. Esporas

    http://www.uprm.edu/biology/profs/betancourtc/Lab/Aspergilosis.htm
  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    42/62

    42

    IV. CUESTIONARIO

    1. Qu es una clula epitelial, qu funcin tienen y cuantos tipos se reconocen.2. Cules son los componentes de las paredes celulares de las bacterias, hongos y vegetales3. Defina tincin vital y supravital4. Qu es el lugol , cual es formula y cules son sus aplicaciones..

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    43/62

    43

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 8

    FENOMENOS FISICOS DE LA CELULA: DIFUSION, OSMOSIS

    OBJETIVO

    Observar los fenmenos de difusin y smosis y su importanciapara la clula.

    II. MATERIALES

    Lminas portaobjetoLaminillas cubreobjetosTubos de pruebaLancetas hematolgicasSolucin de NaCl al 0.4% (medio HIPOTONICO)Solucin de NaCl al 0.9% (medio ISOTONICO)Solucin de NaCl al 2.0% (medio HIPERTONICO)Agua destiladaAlcohol corrienteAlgodn estrilPipetas de 1 ml.

    GradillasMicroscopiosPapel lente

    III. PROCEDIMIENTO

    A) Experimento con eritrocitos (clula animal):1. Recepcionar tubos de prueba perfectamente rotulados

    conteniendo:En el 1er. tubo: 3 ml. de Sol. NaCl al 0.4 %En el 2do. tubo: 3ml. de Sol. NaCl al 0.9 %

    En el 3er. tubo: 3ml. de Sol. NaCl al 2.0 %

    2. Colocar 1 gota de cada concentracin de la sol.NaCl enlminas portaobjetos., previamente rotular.

    3. Desinfectar el dedo cordial (tercero) con algodnhumedecido en alcohol y realizar una puncin con ayuda dela lanceta descartable, en el pulpejo del dedo.

    4. Dejar caer 1 gotas de sangre a cada lmina y con la ayudade la laminilla mezclar suavemente, dejar en reposo por 2minutos.5. Colocar el cubreobjeto o laminilla y observar en el

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    44/62

    44

    microscopio.

    B) Experimento con catfila de cebolla (clula vegetales:1. Colocar 1 gota de cada concentracin de NaCl en lminas

    portaobjeto previamente rotuladas.

    2. Agregar a cada lmina trocitos de catafila de cebolla.3. Dejar en reposo dos minutos, para luego cubrirla conuna laminilla.

    4. Observar al microscopio 10x y 40x

    IV. RESULTADO:

    MUESTRA MEDIO FENOMENO

    1Sol.NaCl0.4% + sangre

    2 Sol.NaCl 0.9 % + sangre Isotnica

    3Sol. NaCl 2 % + sangre Hipertnica

    4Sol,NaCl 0.4 + vegetal Hipotnica

    5 Sol.NaCl 0.9 + vegetal Isotnica

    6 Sol.NaCl 2 + vegetal Hipertnica

    VI. CUESTIONARIO

    1. Qu tipo de difusin es la osmosis y qu es presin osmtica?.2. Defina que es: Dilisis, Turgencia y Plasmlisis.3. Qu significa homeostasis?4. En qu consiste los fenmenos de crenacin y citlisis

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    45/62

    45

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N9

    ORGANISMOS MOVILES: PSEUDOPODOS, CILIOS Y FLAGELOS.

    I. OBJETIVOS

    1. Verificar y comprender el movimiento de la clula de vida libre.2. Observar y comprobar la existencia de estructuras para el movimiento celular.3. Llegar a diferenciar las diferentes estructuras que intervienen en el movimiento celular, hacer una

    comparacin entre ellas.

    II.MATERIALES

    A. MATERIAL DE LABORATORIO Microscopios Placas Petri Pipetas pasteur 1ml Guantes Lminas portaobjetos Laminillas cubreobjetos Gotero o Pipeta de 1 ml. Colorantes: -Lugol al 4%

    -Verde de metilo- rojo neutro

    B.MATERIAL BIOLOGICO Cultivo de Protozoarios.

    III.PROCEDIMIENTO

    Cultivo de Protozoarios:

    En un frasco mediano de boca ancha, con agua estancada, preparar: arroz, zanahoria, lechugapicada y levadura

    Mantener abierto al aire libre durante 6 das, en un lugar donde no haya luz directa.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    46/62

    46

    IV. OBSERVACION

    A) Movimiento ameboideo por seudpodos: Amoeba proteus(Clase Sarcodina)

    1. Sobre una lmina portaobjetos, con un gotero coloque una gota del cultivo de protozoarios que contengaAmoeba, cubrirlo luego con una laminilla cubreobjetos.2. Aadir despus de haber observado una gota de Verde de metiloo Lugol.3. Dibujar las observaciones realizadas a 10x, 20x y 40x.

    B) Movimiento flagelar por flagelos: Euglena viridis (Clase Mastigophora)

    1. Sobre una lmina portaobjetos, colocar una gota de cultivo que contenga Euglena y cubrir con unalaminilla cubreobjetos.

    2. Aadir despus de haber observado una gota de verde de metilo o Lugol.3. Dibujar las observaciones realizadas.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    47/62

    47

    C). Movimiento ciliar por cilios: Paramecium caudatum(Clase Ciliophora)

    1. Sobre una lmina portaobjetos, colocar una gota de cultivo que contenga Paramecium, y cubrirlo conuna laminilla cubreobjeto.

    2. Aadir despus de haber observado la muestra anterior, una gota de verde de metilo o Lugol.3. Dibujar las observaciones realizadas.

    V. PROTOCOLO: REALIZAR ESQUEMAS DE LO OBSERVADO

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    48/62

    48

    AUMENTO Amoeba proteus(Sarcodina)

    Euglena viridis(Mastigophora)

    Paramecium caudatum(Ciliophora)

    10 X

    20 X

    40 X

    VI. CUESTIONARIO

    1. A que atribuye la gran movilidad de los Protozoarios.

    2. Explique las diferencias entre los diferentes tipos de movimientos: por seudpodos, flagelos, cilios.

    3. Que es el Sndrome de Kartagener y su importancia mdica.

    4. Explique tres enfermedades producidos por protozoarios, flagelados y no flagelados.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    49/62

    49

    ASOCIACINUNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 10

    ESTUDIO DE ORGANELOS CELULARES: MITOCONDRIAS, LISOSOMAS, CLOROPLASTOS YPLASTIDOS.

    I. OBJETIVO:

    Mediante el empleo de la tcnica de coloracin vital se observarn las mitocondrias presentes slo en elcitoplasma de las clulas Eucariotas, que vienen a constituir las centrales de energa porque producen

    y almacenan energa bajo la forma de ATP.Las clulas tienen vesculas membranosas que contienen enzimas hidrolticas que permiten la digestinintracelular y que corresponden a los lisosomas los cuales pueden pueden ser identificados en

    protozoarios con una tincin vital. Con el uso de suero fisiolgico observar plastidos en las clulas vegetales eucariticas, los que

    contienen pigmentos y pueden sintetizar y acumular diversas sustancias, como losLeucoplastosque sonplastidos incoloros, los Amiloplastos que acumulan almidn, los Proteinoplastos que acumulanprotenas, los Elaioplastosque acumulan grasas y aceites esenciales. Los Cromoplastos son plastidoscoloreados como el Carotenoque presenta un pigmento de color naranja, el Licopeno de color rojo, laXantofilade color amarillo y los Cloroplastosque presentan un pigmento de color verde y cuyafuncin principal es realizar la fotosntesis.

    II. MATERIALES POR MESA:

    Muestra de: Clulas de epitelio bucal

    Hoja de Elodea (Cloroplastos) Aj amarillo (Xantofila) Zanahoria (caroteno) Papa (Amiloplastos) Betarraga (Antocianina) Cultivo de protozoarios con rojo neutro

    MicroscopiosHoja de bisturiPinzas en puntaLaminas portaobjetoLaminillas cubreobjetoSolucin Verde Janus 1/10,000Frascos con LugolFrasco con Suero Fisiolgico

    Goteros con chupn de jebeHisoposMecheros de alcohol

    III. PROCEDIMIENTO:

    A) OBSERVACION DE MITOCONDRIA EN EPITELIO BUCAL:

    1. Con una lmina limpia y mediante un raspado suave obtener una muestra de la mucosa bucal,2. Realizar un frotis extendiendo la muestra sobre otra lmina,3. Dejar secar la lmina con la muestra al medio ambiente,

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    50/62

    50

    4. Cubrir la muestra con Verde Janus durante 5 minutos,5. Eliminar el exceso de colorante y dejar secar al medio ambiente,6. Observar al microscopio con objetivos de 10x y 40x.

    B) OBSERVACION DE LISOSOMAS en PROTOZOARIOS1.Colocar en una lmina dos gotas cultivo de protozoarios.2.Cubrir con una laminilla y observar los lisosomas a 10x y 40x.

    C.OBSERVACION DE PLASTIDOS EN VEGETALES:

    CLOROPLASTOS: Se localizan en las hojas debajo de la epidermis superior.

    1. Seleccionar una hoja joven de Elodea, colocarla sobre una gota de agua en una lamina portaobjeto.2. Cubrir la muestra con una laminilla.3. Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento.

    CROMOPLASTOS: Son organelas coloreados y presentan formas variadas (redondas, elpticas, oaciculares).

    1. Realizar cortes finos de zanahoria, aj amarillo, betarraga sobre una lmina portaobjetos2. Colocar una gota de agua sobre el corte.3. Cubrir con una laminilla.4. Observar al microscopio con objetivos de menor y mayor aumento.

    AMILOPLASTO: Son organelas que contienen almidn como sustancia de reserva.

    1. Sobre una lmina portaobjetos colocar una gota de Lugol.2. Agregar un corte transversal fino de papa .3. Cubrir con una laminilla.4. Observar al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento.

    IV. PROTOCOLO:

    MUESTRAS OBSERVACIN DE MITOCONDRIA, CLOROPLASTOS Y PLASTIDIOS

    20 X 40 X TIPO DE ORGANELA PLASTIDIO

    EPITELIO BUCALCULTIVOPROTOZOARIO

    HOJA DE ELODEA

    AJI AMARILLO

    ZANAHORIA

    BETARRAGA

    PAPA

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    51/62

    51

    V. CUESTIONARIO

    1. Qu son las patologas mitocondriales?.

    2. Qu relacin tiene los lisosomas y la autofagia?3. Porque las mitocondrias fijan el verde de Janus.4. Que funcin cumplen los plastidios en las clulas.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    52/62

    52

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 11

    ACCION ENZIMATICA

    I. OBJETIVO: Conocer el mecanismo de accin de las enzimas durante una reaccin qumica. Conocer como acta un catalizador.

    II. MATERIALES: Gradilla Mortero con piln Hgado de pollo Tubos de prueba de 16 x150 /13x100 Hisopos Agua oxigenada Fsforos Dixido de Manganeso Pipetas pasteurss Azul de metileno Pipetas1ml Aceite Cloruro de sodio Succinato sodio 0,1M Gradilla Buffer Fosfato pH7.4 Placas Petri NaCl 0,9% Bisturi

    III. FUNDAMENTACION:Las Enzimas tienen como funcin acelerar la velocidad de una reaccin qumica. El mecanismo de accin serealiza de la siguiente manera:Unin de un Sustrato a la Enzima para formar un Complejo Enzima- Sustrato y desdoblamiento del complejoformado para liberar los Productos.

    E + S E - SE + P

    IV. PROCEDIMIENTO:1. Actividad de la Enzima Catalasa

    MnO2 + 2 H2O2------ 2 H2O + O2 + MnO2

    Catalasa + 2 H2O2------ 2 H2O + O2 + Catalasa

    1) Numerar los tubos del 1 al 32) Colocar en cada tubo 2 ml. de Perxido de hidrgeno (Agua oxigenada).

    3) Agregar al: Tubo 1: cucharita de Hgado de pollo entera Tubo 2: cucharadita de Higado de pollo triturado

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    53/62

    53

    Tubo 3: 2 g. Dixido de Manganeso

    4) Colocar a cada tubo el palito de Ignicin encendido en la boca del tubo5) Si el palito de Ignicin aumenta la intensidad del fuego, la reaccin es positiva.

    b. Actividad de la Enzima Succinato Deshidrogenasa1) Preparar homogenizado de hgado con cloruro de sodio.

    2) Disponer de 2 tubos de 13x100 y roturarlos(tubo 1 y tubo 2)3) Colocar en cada tubo 1 ml de Succinato y luego 1 ml de buffer .4) Aadir 2 gotas de azul de metileno, agitar, anotar el color.5) Incorporar al tubo 1 0,5ml de aceite las paredes y dejar en la gradilla NO MOVER6) Agregar al tubo 2 1ml de homogenizado de hgado e inmediatamente aadir 0,5ml de aceite por las paredes,

    No MOVER, dejar en la gradilla.7)Hacer el seguimiento de la decoloracin de los tubos por 20minutos,8) Analize lo ocurrido ..

    V. CUESTIONARIO:

    1) Defina que es un catalizador2) Qu se entiende por sitio activo.?3) Qu tipo de enzima es la catalasa, y cul es su importancia en el metabolismo ?4) Cul es el rol de la deshidrogenasa succnica y porque se relaciona con el sndrome de Kearns

    SAyre?

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    54/62

    54

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANACURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 12

    CICLO CELULAR: Dvisin Celular : LA MITOSIS

    I. OBJETIVO:

    Se estudiar la mitosis y el ciclo de divisin celular en las clulas meristemticas de la raz de Allium cepa(cebolla).En este sistema la poblacin celular esta en equilibrio dinmico y los cromosomas son relativamente grandes, conun nmero diploide ( 2n =16 ).

    II. MATERIALES:

    Bulbos de cebolla Placas Petri Estiletes y pinzas

    Papel de Filtro Portaobjetos Cubreobjetos Aceite de inmersin Mechero de Alcohol Orcena actica- clorhdrica Aceite de inmersin Papel lente Microscopios

    III. PROCEDIMIENTO:

    1. Cultivar los bulbos de cebolla en vasos pequeos conteniendo agua corriente, la que deber cambiarse cada 24horas, mantener los bulbos en oscuridad a 25C y sometidos a aireacin constante.

    2. Despus de 48 a 72 horas, arrancar con ayuda de una pinza 2 a 3 races del bulbo, cortar 2 cm. de la parteapical y colocarla sobre una placa Petri que contenga Orcena.

    3. Calentar la placa en la llama de un mechero de alcohol hasta aproximadamente 60C y se observe la emisinde vapores blancos, evitar la ebullicin del colorante.

    4. Dejar enfriar y repetir esta operacin cuatro veces.5. Enfriar y dejar reposar durante 15 minutos.6. Colocar la raicilla en la lmina portaobjeto, cortar 2 mm de la punta, aadir una agota de Orcena fra, cubrir la

    preparacin con laminilla.7. Con la punta de un lpiz golpear suavemente la preparacin describiendo crculos concntricos para permitir la

    extensin del tejido meristemtico.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    55/62

    55

    8. Eliminar el exceso de colorante usando una tira de papel filtro.9. Observar la preparacin a mayor aumento y lente de inmersin.

    IV. PROTOCOLO:

    Esquematizar las diferentes fases que se observan:

    Interfase: Los cromosomas no se observan al microscopio debido a que son demasiados delgados y no puedeabsorber suficiente colorante para ser visible.

    Profase: Fase en la cual los cromosomas se observan con sus dos cromtidas.

    Metafase: Se observa el huso acromtico, los cromosomas estn mas condensados y cortos.

    Anafase: Los cromosomas se dirigen a los polos

    Telofase: Los cromosomas estn en los polos, empieza la formacin de la membrana nuclear

    V. CUESTIONARIO:

    1. Que es mitosis.

    2. Que hay de comn entre mitosis y meiosis.

    3. Que es Indice mittico e ndice interfsico

    4. Defina cariocinesis y citocinesis

    REALIZAR ESQUEMAS:

    FASE DE LA MITOSIS ESQUEMAS

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    56/62

    56

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    57/62

    57

    ASOCIACION UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 13

    OBSERVACION DE ELEMENTOS FORMES DE LA SANGRE

    I. OBJETIVOS

    Determinar la presencia de elementos figurados presentes en una muestra de sangre perifrica humana,mediante el uso de una coloracin diferencial.

    Observar la presencia de ncleos en su interior.

    II. MATERIALES

    MicroscopiosColorante Wright o GiemsaAlcohol yodadoAgua destiladaLminas portaobjetos limpias y desengrasadasLancetas hematolgicasAlgodn estril

    Varillas de coloracin

    III. PROCEDIMIENTO

    A. Obtencin de sangre capilar

    1. Desinfectar el dedo anular con alcohol yodado y algodn y con una lanceta estril punzar el dedo ydejar caer una gota de sangre sobre un extremo de la lmina portaobjetos.

    2. Con ayuda de otra lmina portaobjeto formar un ngulo de 45 y realizar un frotis, tratando deesparcir homogneamente la gota de sangre sobre la superficie de la lmina.

    3. Dejar secar la preparacin y proceder luego a la coloracin con Wright o Giemsa.

    B. Coloracin

    1. Cubrir el frotis con colorante Wright o Leishman por 1 minuto.2.Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por 10 minutos.3.Eliminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de cao.4.Dejar secar la lmina coloreada.5.Una vez que la lmina coloreada a secado, observar al microscopio con el objetivo de 100 X y aceite

    de inmersin.

    IV. PROTOCOLO

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    58/62

    58

    (Esquematice los siguientes elementos que abajo se indican y que sern observados con ayuda delmicroscopio).

    1. LEUCOCITOS GRANULARES:

    a) Neutrfilos segmentados: presenta un ncleo con varios lbulos (2-5) unidas por bandas decromatinas.

    b)Neutrfilos en banda o abastonado: presenta un ncleo no dividido en forma de S o en cayado O.

    c)Eosinfilos: redondos, voluminosos, con granulaciones acidfilas de color anaranjado, ncleo con doslbulos.

    d)Basfilos: son escasos de 0-1, presenta un ncleo difcil de observar, pues se halla cubierto por unagranulacin de color violeta o morado oscuro .

    2. LEUCOCITOS AGRANULARES:

    a) Linfocitos: De forma redonda o irregular, su ncleo es morado, voluminoso y ocupa la mayor partede la clula, el citoplasma es azul y sin granulaciones. Su nmero aumenta con las infecciones.

    b)Monocitos: De forma redonda u ovalada, ncleo variable generalmente en forma de rin, citoplasmasin grnulos. Presenta una gran actividad fagocitaria.

    3. PLAQUETAS:Las ms pequeas de las clulas de la sangre, de forma redonda y no contienen hemoglobina. Son

    esenciales en la coagulacin de la sangre.

    4. HEMATIES O ERITROCITOS:De forma generalmente redonda, sin ncleo, de color rosa intenso, contiene hemoglobina. La protena quese encarga del transporte de oxgeno y anhdrido carbnico.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    59/62

    59

    Neutrofilos

    Eosinfilos

    Basfilo

    Monocitos

    LinfocitosVIII. CUESTIONARIO

    1. Cul es la diferencia entre plasma y suero?.

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    60/62

    60

    2. Diga que es la formula leucocitaria, cules son los valores normales en el adulto y qu significado tiene losvalores anormales.3. Qu es la histidina y cul es su importancia?.4. Que es la anemia, y cul es su origen

    ASOCIACIN UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTAFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

    ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

    CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

    PRACTICA N 14

    GRUPO SANGUINEO Y FACTOR Rh

    I. OBJETIVO:

    Al finalizar la prctica el alumno debe saber qu es el grupo sanguneo, sus aplicaciones en el campo de lamedicina y el grupo sanguneo al que pertenece.

    II. GENERALIDADES:

    El serlogo Karl Landsteiner, en 1900-1901 fue el primero en demostrar la existencia de grupos sanguneos y en1938 el Comit de Higiene de la Liga de la ONU, el Congreso de Microbiologa de 1930 en Londres y laInternacional de Transfusin Sangunea de Pars, se adopt definitivamente la clasificacin de los grupossanguneos humanos heredables, designados como A, B, AB, O.

    GRUPOS SANGUINEOS RESULTANTES

    GRUPO SANGUINEO ANTIGENO EN GLOBULOS

    ROJOS(AGLUTINOGENOS)

    ANTICUERPOS EN PLASMA O

    SUERO SANGUINEO(AGLUTININAS)

    A A Anti-B

    B B Anti-A

    AB AB Ninguno(Receptor universal)

    O Ninguno Anti-A + Anti-B

    (Dador universal)

    III. MATERIAL Y METODOS:

    Lminas portaobjetosLancetas hematolgicasSueros Anti-A, Anti-B, Anti-D o Rh.AlgodnAlcohol yodado

    RECONOCIMIENTO DE GRUPOS SANGUINEOS:

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    61/62

    61

    La tcnica de reconocimiento de grupos sanguneos se basa en la aglutinacin o no de los hemates cuando semezclan con la aglutinina Anti-A o Anti-B.

    PROCEDIMIENTO :

    1. Limpie con algodn embebido en alcohol la yema del dedo anular.

    2.Realizar la puncin utilizando una lanceta hematologa estril.3.Coloque dos gotas de sangre por separado sobre la lmina portaobjetos, de la persona a la cual se va a realizar

    la prueba y en otra lmina otra gota de sangre.4.Agregar a cada gota de sangre una gota de suero Anti-A y Anti-B y Anti-D o Anti-Rh por separado.5.Observar la reaccin e identificar a que grupo pertenece y que factor Eh, si es positivo o negativo

    METODO DE RECONOCIMIENTO PRACTICO:

    GRUPO A GRUPO B

    Anti-A Anti-B Anti-A Anti-B

    GRUPO AB GRUPO O

    Rh: AntiD o Rh (+) Anti- D o Rh (-)

    IV: CUESTIONARIO :

    1. A quienes se les llama receptores y donadores universales, por qu?2. Explique la Eritroblastosis fetal.3. En que se basa el reconocimiento de los grupos sanguneos?4. Explique como se puede hacer el descarte de paternidad

  • 5/20/2018 GUIA de BiologiaCelMol2014-I

    62/62

    62