Guia de Seleccion de Columnas HPLC Agilent

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Gua de seleccin de colum

nas para HPLC

Agilent

Esta informacin puede modificarse sin previo aviso.

Agilent Technologies, Inc. 2009Impreso en Alemania, 1 de Septiembre de 2009 5990-4435ES

Gua de seleccin de columnaspara HPLC Agilent

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Productos del catlogo................................................................1

Pautas para la seleccin de columnas de HPLC.........................3Diagrama de flujo de seleccin de columnas para HPLC............................................................4Gua rpida de fases ligadas para fase reversa ZORBAX............................................................5

Gua de columnas y fases mviles: Fase reversa.........................................................................8Gua rpida de nomenclaturas USP para columnas de HPLC ...................................................11Desarrollo de mtodos en el rango de pH 1-12........................................................................13Gua de seleccin de cartuchos .................................................................................................18

Columnas para HPLC analtica ..................................................19Poroshell 120 .............................................................................................................................20ZORBAX Eclipse Plus..................................................................................................................23ZORBAX Eclipse PAH .................................................................................................................30ZORBAX Eclipse XDB .................................................................................................................32ZORBAX StableBond de 80 ....................................................................................................40ZORBAX Rx.................................................................................................................................48ZORBAX Extend-C18 de 80 ....................................................................................................52ZORBAX Bonus-RP.....................................................................................................................56Columnas de fase reversa ZORBAX Original .............................................................................61Columnas de fase normal ZORBAX............................................................................................62ZORBAX HILIC Plus ....................................................................................................................66Kits para el desarrollo de mtodos ZORBAX .............................................................................68Kits de validacin de mtodos ZORBAX ....................................................................................70Columnas de intercambio inico ZORBAX: SAX y SCX..............................................................71

Columnas para aplicaciones especiales....................................73ZORBAX de resolucin rpida y alta definicin, 1,8 m............................................................74ZORBAX de resolucin rpida y alto rendimiento 1,8 m.........................................................77ZORBAX de resolucin rpida de 3,5 m ..................................................................................85ZORBAX Solvent Saver...............................................................................................................90ZORBAX PrepHT.........................................................................................................................94Columnas Agilent Prep LC........................................................................................................100Columnas quirales Ultron ES....................................................................................................103

Columnas para cromatografa bioanaltica .............................105Estrategia ZORBAX para el desarrollo de mtodos de fase reversa de protenas y pptidos............................................................................................................106

ZORBAX StableBond de 300 ................................................................................................113ZORBAX Extend-C18 de 300 ...............................................................................................118

Poroshell 300 ...........................................................................................................................110

Columnas y consumibles ZORBAX para anlisis de aminocidos (AAA) ................................122Columnas de filtracin en gel ZORBAX GF-250 y GF-450......................................................124Columnas HPLC Agilent Bio-Monolith .....................................................................................128

Diagrama de flujo para la seleccin de columnas para HPLC de fase reversa ZORBAX............6

Para obtener ms informacin y consultar un listado completode las sesiones disponibles, visitewww.agilent.com/chem/eseminars

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Las nuevas columnas cumplen con nuestrocompromiso de brindar una mayorproductividad y una mejor forma de pico para cidos, bases y neutros.Tanto si lleva a cabo cromatografa convencional o ultrarrpida, separacin de biomolculas oanlisis complejos de compuestos bsicos, confe en las columnas de Agilent, que ofrecen elms alto rendimiento del sector as como los resultados rpidos y reproducibles que ustednecesita. Todas fabricadas con la calidad y fiabilidad sin competencia de Agilent.

Nuevas columnas Poroshell 120: alta eficiencia y resolucin con un 50% menos de presinque las columnas sub 2 micras.

Nuevas columnas Eclipse Plus: las columnas C18 y C8 ofrecen una mejor forma de pico,mientras que la nueva fase ligada Phenyl-Hexyl y la fase ligada C18 para separaciones dePAH amplan las opciones de selectividad para acomodar un mayor nmero de aplicaciones

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La bomba binaria 1290 Infinity combina compensacin activa con un volumen de retardo de tan slo 10 l, algo que hace posible la tecnologa multicapa del nuevo mezcladorAgilent Jet Weaver, para conseguir gradientes ultrarrpidos y una mejor sensibilidad de la deteccin UV

El diseo ptico del detector de diodos 1290 Infinity, incluida la celda de flujo de cartuchoAgilent Max-Light, ofrece un nuevo nivel de sensibilidad en UV y robustez de la lnea base avelocidades de adquisicin de espectros tan rpidas como 160 Hz

El diseo de flujo continuo de prxima generacin del inyector automtico 1290 Infinityconsigue la mxima precisin para volmenes de inyeccin tanto grandes como pequeossin necesidad de cambiar el loop de muestra

El Flexible Cube 1290 se combina con el inyector automtico para facilitar el modo deinyeccin con loop fijo para la obtencin de tiempos de ciclo ultrarrpidos o con el lavadoautomtico por retroflujo del asiento de la aguja para alcanzar nuevas cotas de bajo efectomemoria por arrastre de muestra

El actuador de vlvula separable y las cabezas de vlvula intercambiables por el usuario delcompartimento de columna termostatizado 1290 Infinity mejoran la usabilidad y preparan elcamino a soluciones de desarrollo de mtodos de ultraalta productividad, multimtodo yautomatizadas

Las columnas LC ZORBAX de resolucin rpida y alta definicin (1,8 m) facilitan unatransferencia de mtodos de HPLC a UHPLC rpida, sencilla y segura mediante el uso dequmicas de columna idnticas

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Productos del catlogo


Pautas para la seleccin de columnas deHPLC

Para facilitar la seleccin de la columna que mejor se adapta a una determinada aplicacin,hemos incluido el siguiente material de referencia para ayudarle a maximizar su recurso msvalioso: su tiempo.

Encontrar instrucciones detalladas sobre la eleccin de una columna inicial para el desarrollode mtodos, basadas en factores clave para la separacin tales como el analito y la fasemvil. Y le indicaremos la pgina donde se encuentra la columna que se ajusta a susnecesidades.

Le mostraremos cmo seleccionar la mejor columna para molculas pequeas y anlisis deprotenas y pptidos, de acuerdo con factores como la configuracin de columna y la faseligada.

Esta seccin recoge, de manera clara y concisa, las distintas categoras de la farmacopeaestadounidense (USP) en las que se encuadra la familia de columnas ZORBAX de Agilent,para que usted pueda seleccionar fcilmente columnas conformes con la USP u otrasfarmacopeas.

La resolucin cromatogrfica entre dos o ms picos depende de la eficiencia, la selectividad y la retencin de la columna, tres factores que se ven afectados por el pH. Si en un tipo decolumna se pueden llevar a cabo mltiples separaciones, esta seccin describe una estrategiacompleta de desarrollo de mtodos basada en cambiar el pH de la fase mvil.

Estrategias de desarrollo de mtodos y seleccin decolumnas para HPLC

Diagrama de flujo de seleccin de columnas para HPLC

Directrices bsicas para la eleccin de una columna HPLC de fase reversa

Gua rpida de categoras USP para columnas de HPLC

Desarrollo de mtodos HPLC en fase reversa

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Pautas para la seleccin de columnas de HPLC

Consulte el Catlogo Fundamental de Cromatografa 2009-2010 si desea obtener una lista completa de columnas y consumibles de LC.

El siguiente diagrama constituye una gua para la seleccin de la columna a utilizar en su anlisis. Siga las indicaciones referentes al analito y ala fase mvil. A la derecha encontrar la pgina donde podr consultar las caractersticas de la columna seleccionada.

Diagrama de flujo de seleccin de columnas para HPLC

Peso molecular 2000

Soluble en agua

Soluble en disolventeorgnico

Soluble en agua

Soluble en disolventeorgnico

Inica

No inica

Soluble en THF

MeOH y MeOH: H2O oACN y ACN: Soluble en

H2O

Soluble en hexano

Adaptacin autorizada de "Practical HPLC Methodology and Applications", Brian A. Bidlingmeyer, John Wiley & Sons, Inc., New York, p. 109

Muestra

Modo de fase normal con slice sin tratar 62

19

66

124

71 & 128

113

Modo de fase normal con fase ligada

Modo de fase reversa con fase ligada

Permeacin en gel (molcula pequea)

Modo de fase reversa con fase ligada

Modo de fase reversa con fase ligadautilizando el control de ionizacin

Modo de fase reversa con fase ligadautilizando un agente de par inico

Modo de fase reversa con slice sin tratar(HILIC)

Modo de intercambio inico

Cromatografa de permeacin en gel

Cromatografa de filtracin en gel

Modo de intercambio inico con materialde poro ancho

Modo de fase reversa con material deporo ancho

Vase la pgina

62Vase la pgina

Vase la pgina

19Vase la pgina

19Vase la pgina

19Vase la pgina

Vase la pgina

71Vase la pgina

Vase la pgina

Vase la pgina

Vase la pgina

4



Gua rpida de fases ligadas para fase reversa ZORBAX

Nuevas columnas ZORBAX RP-HPLC Usos y aplicaciones recomendadas Pgina No.

Eclipse PlusDisponible en RRHD y RRHT, 1,8 m

Excelente primera opcin para el desarrollo de mtodos Larga duracin a pH 2-9 para separaciones fiables de compuestos bsicos,

cidos y neutros Mejor forma de pico con compuestos bsicos Alta eficacia y resolucin con columnas de 1,8, 3,5 y 5m Pruebas QA/QC para mayor reproducibilidad a largo plazo

Poroshell 120 Partculas superficialmente porosas para alta eficiencia a bajas presiones Eficiencia de tipo sub-2 micras con una partcula de 2,7 m Fases C18 con y sin desactivacin para optimizacin de la selectividad Compatible con instrumentos LC de 400 y 600 bares

Eclipse XDBDisponible en RRHT, 1,8 m

Cuatro opciones de selectividad para el desarrollo flexible de mtodos Alto rendimiento en un amplio rango de pH: pH de 2 a 9 Buena forma de pico para especies cidas, bsicas y neutras Larga duracin, con ligado extradenso y doble desactivacin Separaciones rpidas, ultrarrpidas y de alta resolucin con columnas de 1,8 y 3,5 m Opciones desde columnas capilares a preparativas

StableBond (SB)Disponible en RRHD y RRHT, 1,8 m

Compuestos bsicos, cidos y neutros Estabilidad excepcional a pH bajo Utilizable a altas temperaturas (hasta 90 C para C18, 80 C para

C8, C3, Fenil, CN y Aq) y bajo pH como herramienta de selectividad adicional Amplia seleccin de fases ligadas para distinta selectividad

(C18, C8, C3, CN, Fenil, Aq) Utiliza fases mviles para LC/MS con cido frmico, cido actico o TFA Utiliza fases mviles con TFA para la separacin de protenas y pptidos Separaciones rpidas usando columnas de 1,8 y 3,5 m

ZORBAX RxDisponible en RRHT, 1,8 m

Separacin general de compuestos bsicos, cidos y neutros a bajo pH con selectividad diferente a la de las columnas SB

Rx-C8 es la misma que SB-C8

Bonus-RPDisponible en RRHT, 1,8 m

Separacin de compuestos bsicos en fases mviles con mayor proporcin acuosa Separacin general de compuestos bsicos, cidos y neutros en los rangos de pH

medio o bajo; especialmente estable a pH bajo Separacin de pptidos con distinta selectividad Separaciones rpidas utilizando columnas de 3,5 m

Extend-C18Disponible en RRHT, 1,8 m

Separacin de compuestos bsicos por encima de su pKa en forma de base libre;separacin de compuestos bsicos, cidos y neutros a pH alto: hasta 11,5

Utiliza hidrxido amnico como aditivo de fase mvil para LC/MS de pequeasmolculas o pptidos

Separacin en los rangos de pH alto, medio y bajo con cambios de selectividad Separaciones rpidas utilizando columnas de 3,5 m

Columnas ZORBAX originales Usos y aplicaciones recomendadas Pgina No.

ZORBAX Separacin general de compuestos bsicos, cidos y neutros a bajo pH con selectividaddiferente a la de las columnas SB; mayor nmero de silanoles activos que SB

Separacin en "modo mixto" a valores de pH ms neutros

ZORBAX ODS Classic(sin desactivar)

Separacin general de compuestos bsicos, cidos y neutros a pH de medio a bajo conselectividad diferente a la de las columnas SB o XDB

23

20

32

40

49

56

52

61

61

Para pedidos on line www.agilent.com/chem/store


Este diagrama de flujo aporta informacin sobre la eleccin de una columna inicial para el desarrollo de mtodos de muestras de molculaspequeas, protenas y pptidos, al tiempo que recoge decisiones sobre la fase ligada y la configuracin de la columna.

La mayora de los cromatografistas utilizan HPLC de fase reversa como una de las principales tcnicas de anlisis. La HPLC de fase reversasirve para analizar analitos tanto inicos como no inicos. Por lo tanto, este diagrama de flujo para la seleccin de columnas ZORBAX secentrar en columnas de fase reversa. Para seleccionar ms fcilmente una columna de fase reversa para el desarrollo de mtodos demolculas grandes y pequeas, siga el esquema descrito en estas pginas.

Diagrama de flujo para la seleccin de columnas ZORBAX para HPLCde fase reversa: molculas grandes y pequeas

El dimetro de la columna define cunto material (masa) se puede inyectar en una columna; cuanto menor sea el dimetro, menor ser la cantidad de material que sepuede inyectar manteniendo una buena forma de pico. Las columnas de menor dimetro proporcionan mayor sensibilidad y, por lo tanto, se utilizan habitualmente para

LC/MS y aplicaciones con muestra limitada.

4,6 mmDimetro de columna4,6 mm

Se recomienda una C18 como fase ligada inicial de columna para la mayora de las muestras, ya que maximiza la retencin desde compuestos moderadamente polareshasta compuestos apolares. Deberan considerarse fases de cadenas ms cortas si no puede optimizarse la resolucin con una fase C18 o si est analizando protenas

ms grandes.

Fase Estacionaria inicial en columna

La eleccin del tamao del poro de relleno se basa, en primer lugar, en el tamao de las molculas que vayan a analizarse. Tpicamente las molculas pequeas puedendifundirse fcilmente desde la entrada a la salida en rellenos de poros de 80 a 120 , pero los pptidos y las protenas no pueden. Por esta razn, se recomienda que

utilice rellenos de 300 de tamao de poros (300SB) para condiciones isocrticas de separaciones de gradientes de pptidos y protenas.

300 Tamao de poro de rellenoDe 80 a 120

PM > 2.000

Molculas grandesPM < 2.000

Molculas pequeas

Tipo de columnaDimetro interno (mm)

Carga demuestra(aprox.) Flujo normal

Mayorsensibilidad Aplicaciones

Analtica 4,6 0,1-1,5 mg 0,5-3 ml/min Separaciones estndar

Solvent Saver 3,0 150-500 ug 0,3-1,5 ml/min + Economiza disolvente, usa instrumentos HPLC estndar

NarrowBore (de dimetro estrecho)

2,1 50-120 ug 0,1-0,5 ml/min ++ Alta sensibilidad, muestra limitada, LC/MS, economiza disolvente

Microbore 1,0 10-50 ug 10-100 l/min ++++ Alta sensibilidad, muestra limitada, LC/MS

Capilar 0,5; 0,3 1-10 ug 1-15 l/min +++++ Muy alta sensibilidad, LC/MS, pptidos y protenas

Nanocolumna 0,1; 0,075 100-200 ng 200-500 nl/min ++++++ Muy alta sensibilidad, LC/MS, pptidos y protenas

Semipreparativa 9,4 1-10 mg 5-10 ml/min Separaciones preparativas de mg

Preparativa 21,2 20-250 mg 20-60 ml/min Cientos de miligramos hasta 1 gramo

Eclipse Plus C18 StableBond 300SB-C18

6



150 mm 150 mm

La longitud de columna convencional es de 150 mm o 250 mm para alta resolucincon partculas de 5 m. Este es un buen punto de inicio de un anlisis normal

porque proporcionar una alta resolucin en un anlisis de 20-30 minutos. Paraanlisis rpidos, se deben emplear columnas ms cortas (75 mm y 50 mm) con

partculas menores (3,5 m).

Para digestos de protenas y pptidos, 150 mm es tambin una buena longitud de partida para la columna. El tiempo de gradiente normal en una columna de esta longitud ser de 30-60 minutos para un anlisis de alta resolucin. Para anlisis rpidos, se deben emplear columnas ms cortas (50 mm) con

partculas menores (3,5 m).

Molculas pequeas Molculas grandesPM > 2.000PM < 2.000

Para anlisis convencionales de molculas pequeas y grandes, el tamao estndar de partcula es de 5 m. No obstante, hay disponibles tamaos de partcula ms pequeos, los cuales proporcionan mayor eficacia y resolucin. Tambin estn disponibles en longitudes de columna cortas.

Tamao de partcula porosa estndar

Longitud de columna

5 m5 y 3,5 m

Para pptidos, las partculas de resolucin rpida de 3,5 m se pueden utilizar concolumnas ms cortas para anlisis de gradiente ms rpidos y de alta resolucin.

Pero para las protenas, las columnas Poroshell, con un ncleo slido y unaenvoltura porosa, proporcionan los anlisis ms rpidos.

Tamaos de partcula para anlisis rpidos

4,6 x 50 mm, 3.5 m

4,6 x 150 mm, 5 m

959963-9024,6 x 150 mm, 3.5 m

959993-902

959933-9024,6 x 75 mm, 3.5 m

Anlisis rpidos

660750-9022,1 x 75 mm, 5 m

Anlisis estndar Anlisis rpidos

883995-902

959941-9024,6 x 50 mm, 1.8 m

Molculas grandes

4,6 x 150 mm, 5 m

865973-902

Anlisis estndar

Molculas pequeas

Opciones de partida para columnas

3,5 m puede ser el tamao de partcula inicial preferido porque proporciona escalabilidad hacia arriba (5 m) y hacia abajo (1,8 m) sin necesidad de revalidar el mtodo.

Las partculas de resolucin rpida de 3,5 m proporcionan un 60% ms deeficiencia que las partculas de 5 m, mientras que las partculas de resolucin

rpida HT a 600 bares y resolucin rpida HD a 1200 bares de 1,8 m proporcionanun 200% ms de eficiencia. Las columnas ms cortas se pueden utilizar para reducir

de manera significativa el tiempo de anlisis de molculas pequeas.

2,1 x 50 mm, 1.8 m959757-902

Eclipse Plus C18 Resolucin rpida

Resolucin rpida HT, 600 bares

Eclipse Plus C18

ZORBAX 300SB-C18 Resolucin rpidaZORBAX 300SB-C18

Poroshell 300SB-C18

Dimetro estrecho RRHD, 1200 bares

Eclipse Plus C18*

* Primera eleccin para uso en el LC 1290 Infinity u otros instrumentos UHPLC conlmites de presin a 1000 bares.

Eclipse Plus C18

Resolucin rpida de 3,5 mResolucin rpida HT de 1,8 mResolucin rpida HD de 1,8 m

Resolucin rpida de 3,5 mPoroshell de 5 m



Gua de columnas y fases mviles: Fase reversa

Las columnas de HPLC constan de dos partes, el relleno qumico de la columna y su soporte ohardware. Para decidir sobre el relleno qumico, consulte la seccin del catlogo correspondientea cada tipo de fase ligada. Para seleccionar el hardware de la columna y el tamao departcula, consulte la seccin de tamaos de columna y separaciones rpidas, incluidas lascolumnas de resolucin rpida y HT de resolucin rpida ZORBAX de Agilent, as como lascolumnas Solvent Saver y capilares, y las columnas PrepHT.

Seleccin del tamao de poroSeleccione un relleno de columna de poro pequeo (60-120 ) si el peso molecular del solutoes inferior a aproximadamente 5.000. En caso contrario, utilice un relleno de columna con300 de tamao de poro.

Seleccin del tamao de partculaEl tamao de partcula estndar para columnas de HPLC es 5 m, aunque ahora predomina eluso de las de 3,5 m para el desarrollo de mtodos. Si es necesario realizar anlisis de altavelocidad o mayor resolucin, pueden utilizarse partculas de 1,8 m y 3,5 m. Columnas mscortas con estas partculas consiguen separaciones de alta resolucin ms rpidas; la mximaeficacia se consigue con el tamao de partcula de 1,8 m en columnas de resolucin rpidaHT. El tamao de partcula de 3,5 m trabaja con presiones de rutina y puede utilizarse entodos los LC. Las columnas RRHT con partculas de 1,8 m cortas (de 50 mm o menos)pueden utilizarse en los LC estndar optimizados, mientras que las ms largas exigen un LC de mayor presin (uno que soporte presiones superiores a 400 bares).

Configuracin de la columnaLos tamaos de columna ms habitualmente recomendados para el desarrollo de mtodosanalticos son 4,6 x 150 mm y 4,6 x 75 mm. Si necesita ms resolucin, utilice una columnade mayor longitud, 4,6 x 250 mm, o una columna de la misma longitud con partculas demenor tamao. Durante el desarrollo del mtodo, seleccione el dimetro interno de columna(por ejemplo, 2,1 o 3,0 mm) que mejor responda a objetivos de aplicacin adicionales (porejemplo, sensibilidad o consumo de disolvente) o a la compatibilidad requerida con ciertostipos de instrumento (capilares, nano o preparativos).

Para obtener ms informacinrelativa a la seleccin de lacolumna, visitewww.zorbaxmethod.com



Tipo de slice y fase ligadaTipo de slice

Las columnas de fase reversa ZORBAX de Agilent utilizan tres tipos de microesferas de sliceporosa, la ZORBAX SIL original, ZORBAX Rx-SIL y ZORBAX Rx-SIL modificada. Las ZORBAXRx-SIL y ZORBAX Rx-SIL modificada son muy puras y menos cidas que la ZORBAX SILoriginal. Una slice menos cida implica menor potencial de interaccin entre el analito y los grupos silanol de la superficie de la slice, especialmente si los solutos son bsicos, ycontribuye a una forma de pico mejorada. Para desarrollar un mtodo nuevo, recomendamosutilizar productos de fase reversa basados en ZORBAX Rx-SIL modificada (Eclipse Plus) y ZORBAX Rx-SIL (Eclipse, StableBond etc.). Sin embargo, se han desarrollado muchos yexcelentes mtodos en columnas de fase reversa basadas en ZORBAX SIL, por lo queseguimos fabricando estos productos de elevada calidad y fiabilidad.

Fase ligada

Una buena opcin de fase ligada de partida es C18 o C8. Si los solutos de inters de lamuestra no se separan adecuadamente en stas, utilice las columnas CN y Fenil. staspodran ofrecerle diferencias significativas en selectividad frente a las fases alqulicas linealesa la hora de efectuar la separacin.

En general, los solutos grandes, como las protenas, se separan mejor en columnas de fasereversa de cadena corta (C3, CN) y los pptidos y las molculas pequeas en columnas de cadenas ms largas (C8, C18). En muchos casos, no obstante, estas premisas bsicasconvencionales no se cumplen. Por ejemplo, los pptidos tambin se pueden separareficazmente en columnas de cadena corta, mientras que los pptidos hidrofbicos puedenpresentar mejor recuperacin en fases de cadena ms larga. Por ello, es mejor seleccionarinicialmente una fase intermedia del espectro hidrofbico (por ejemplo, C8) y despuscambiar a una fase ms hidrofbica o hidroflica dependiendo de los resultados iniciales y de las propiedades de solubilidad de la muestra.



pH y fase mvil

Columna para HPLC

Faseestacionaria

Dimensiones decolumna

Propiedades fsicasPropiedades qumicas

Tipo desuperficie

Tamao deporo

Tamao departcula

LongitudDimetrointerno

Estabilidad qumica/SensibilidadFactor de retencin

EficienciaVelocidad

La seleccin de fase mvil para un sistema de fase reversa comienza con la eleccin delmodificador orgnico. Las diferencias de selectividad y la retencin de la muestra varansignificativamente entre las fases mviles que contienen acetonitrilo, metanol y tetrahidro-furano (THF). La solubilidad de la muestra suele variar en estos disolventes y dictamina lautilizacin de disolventes especficos. La deteccin UV a determinadas longitudes de onda no es posible con algunos modificadores (por ejemplo, metanol a 200 nm).

Tanto el pH como la fuerza inica de la porcin acuosa de la fase mvil son parmetrosimportantes para desarrollar mtodos robustos insensibles a pequeas variaciones de lascondiciones. Con compuestos inicos, la retencin de especies tpicas presenta cambiossignificativos segn el pH. Es muy importante controlar el pH en tales sistemas de fase reversapara estabilizar la retencin y la separacin de las bandas. Un rango de pH entre 2 y 4 sueleofrecer las condiciones de retencin ms estables frente a pequeos cambios de pH y es elrecomendado como punto de partida del desarrollo de mtodos para la mayora de lasmuestras, incluidos los compuestos bsicos y los cidos dbiles tpicos.



Gua rpida de nomenclaturas USP paracolumnas de HPLC

La Farmacopea de Estados Unidos (USP) es una fuente estndar de numerosos mtodosfarmacuticos. Especifica las columnas por materiales de relleno y no por fabricante. La USP ha actualizado sus definiciones de L1. A continuacin, incluimos las definiciones ms recientes y columnas aplicables que se pueden encontrar en esta gua de seleccin de columnas. Las columnas de resolucin rpida y alto rendimiento (RRHT) se encuentranahora en las categoras L1, L7 y L11.

Si desea obtener una lista completa de las nomenclaturas USP, consulte el CatlogoFundamental de Cromatografa de Agilent, edicin 2009-2010 (ISBN 5989-9611EN).

NomenclaturaUSP Materiales de relleno USP Columnas

Tamaode partcula(m)

Tamaode poro()

L1 Octadecilsilano enlazado qumicamente con micropartculascermicas o de slice porosas, de 1,5 a 10 m de dimetro

ZORBAX Eclipse Plus C18ZORBAX Eclipse Plus XDB-C18ZORBAX SB-C18ZORBAX Extend-C18ZORBAX Rx-C18ZORBAX ODSZORBAX ODS Classic

1,8; 3,5; 51,8; 3,5; 5; 71,8; 3,5; 5; 71,8; 3,5; 5; 73,5; 53,5; 5; 75

95808080807070

L3 Partculas de slice porosa, de 5 a 10 m de dimetro ZORBAX SilZORBAX Rx-Sil

55

9580808070

L7 Octilsilano enlazado qumicamente con partculas de slicetotalmente porosa, de 1,5 a 10 m de dimetro

ZORBAX Eclipse Plus C8ZORBAX Eclipse XDB-C8ZORBAX SB-C8ZORBAX Rx-C8ZORBAX C8

1,8; 3,5; 51,8; 3,5; 5; 71,8; 3,5; 5; 71,8; 3,5; 5; 75

9580808070

L8 Una capa esencialmente monomolecular de aminopropilsilanoenlazada qumicamente con un soporte de gel de slicetotalmente porosa, 10 m de dimetro

ZORBAX NH2 5 70

L10 Grupos nitrilo enlazados qumicamente con partculas de sliceporosa, de 3 a 10 m de dimetro

ZORBAX Eclipse XDB-CNZORBAX SB-CNZORBAX CN

3,5; 53,5; 53; 5

808070

L11 Grupos fenilo enlazados qumicamente con partculas de sliceporosa, de 1,5 a 10 m de dimetro

ZORBAX PhenylZORBAX SB-PhenylZORBAX Eclipse XDB PhenylZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl

51,8; 3,5; 53,5; 51,8; 3,5; 5

70808095



L13 Trimetilsilano enlazado qumicamente con partculas de slice porosa, de 3 a 10 m de dimetro

ZORBAX TMS 5 70

L14 Gel de slice de 10 m de dimetro enlazado qumicamente con un revestimientofuertemente bsico de amonio cuaternario de intercambio aninico

ZORBAX SAX 4 70

L20 Grupos dihidroxipropano enlazados qumicamente con partculas de slice porosa,de 3 a 10 m de dimetro

ZORBAX GF-250 5 150

L33 Relleno que tiene la capacidad de separar protenas por su tamao molecular enun rango de 4.000 a 400.000 daltons. Es esfrico, basado en slice y tratado paraproporcionar estabilidad de pH.

ZORBAX GF-250 4 150

L35 Relleno de slice esfrica estabilizada con circonio con una fase ligada monocapamolecular hidroflica (tipo diol)

ZORBAX GF-250ZORBAX GF-450

46

150300

L56 Propilsilano enlazado qumicamente con partculas de slice totalmente porosa, de 3 a 10 m de dimetro

ZORBAX SB-C3 3,5; 5 80

L57 Una protena de reconocimiento quiral, ovomucoide, enlazada qumicamente con partculas de slice, unos 5 m de dimetro, con un tamao de poro de 120 ngstroms.

Ultron ES-OVM 5 120

L60 Gel de slice porosa y esfrica, de 10 m o menos de dimetro, cuya superficie se ha modificado covalentemente mediante grupos alquilamida y desactivado.

Bonus-RP 1,8; 3,5; 5 80

NomenclaturaUSP Materiales de relleno USP Columnas

Tamao departcula(m)

Tamaode poro()



Desarrollo de mtodos en el rango de pH 1-12

La resolucin cromatogrfica entre dos o ms picos depende de tres factores:eficiencia de la columna, selectividad yretencin. Con los analitos ionizables (bases y cidos), todos estos factorescambian drsticamente con el pH. Porejemplo, la retencin puede mejorarcambiando el pH de separacin, de formaque se separen los analitos en su forma noionizada. Los cambios en el pH de la fasemvil tambin mejoran la eficiencia de lacolumna ya que puede modificarse laionizacin del analito y la de los silanolesresiduales. As se minimizan las interaccionessecundarias entre los analitos y la superficiede slice que provocan una degradacin dela forma del pico. Para lograr una resolucinptima es necesario tambin modificar el pHde la fase mvil. La siguiente estrategia dedesarrollo de un mtodo explica cmo serealiza esto con una mayor vida til de lacolumna.

Las tres regiones generales paraseparaciones cromatogrficas son las de pHbajo, medio y alto, tal como se definen en la Figura 1. Esta figura destaca las ventajasde realizar separaciones de analitos ionizablesen cada regin de pH. El desarrollo de mtodosprocede investigando las separaciones cromato-grficas primero a pH bajo y seguidamente apH ms elevado hasta lograr unos resultadosptimos. Hay disponible una columna idealpara cada regin de pH.

Tiem

po d

e re

tenc

in

+ /neutro neutro

neutro neutro/-

NO NOS

Carga de analitos

Carga de la superficie de la slice

Interaccin secundaria delintercambio inico

Fase ligada recomendada Eclipse XDB oBonus-RP

Eclipse Plus o Bonus-RP Extend-C18

Figura 1: Tres regiones de pH para separaciones HPLC de compuestos bsicosEsta figura ilustra el comportamiento de retencin de un analito bsico en relacin con el pKa y el pH. El pKa del analito es 6,5.

Bajo pH < 3 Regin A pH medio 7 Regin B pH alto > 9 Regin C

Comience el desarrollo delmtodo a un pH bajo, en el que los silanoles de la columnaRP-HPLC estn protonados. As se minimizan las colas depico al eliminar las interaccionessilanol/base.

A pH bajo, los compuestosbsicos estn cargadospositivamente y puede reducirsesu retencin.

Los compuestos cidos puedenestar protonados y presentarmayor retencin.

Los tiempos de retencin sonnormalmente estables frente apequeos cambios en el pH,generando un mtodo robusto.

Los aditivos de fase mvilvoltiles, como el cido frmico o el trifluoroactico (TFA), seutilizan a menudo a bajo pH con LC/MS.

Desarrolle mtodos a pH comomnimo 1 unidad por encima o por debajo del pKa paraminimizar los cambios en laretencin con pequeos cambios del pH.

Algunos grupos SiOH de lasuperficie de slice se conviertenen SiO por encima de pH 4 a 5;pueden producirse interaccionesque den lugar a colas.

Minimice las interaccionesseleccionando una columna biendiseada y desactivada conaditivos como TEA (trielamina),(menos aconsejable) o utilizandofases "ligadas polares".

La ruptura de la slice se evitamediante una qumica de enlaceinnovadora, una fuertedesactivacin y el uso de Rx-SIL.

En esta regin, los compuestosbsicos pueden encontrarse ensu forma de base libre.

Es probable que se d una mayorretencin y resolucin de loscompuestos bsicos.

La retencin cambia poco enesta regin, por lo que puedendesarrollarse mtodos robustos.

La ruptura de la slice se evitamediante una innovadoraqumica de columna bidentada,una desactivacin fuerte, el usode Rx-SIL y una fase mvilptima.

El hidrxido amnico es unexcelente modificador de fasemvil voltil a pH alto.



Desarrollo inicial de mtodos a pH bajo (pH 2-3)

Con tantas opciones de columna disponibles, cmo saber por dnde empezar el desarrollode mtodos? El punto de partida recomendado para el desarrollo de mtodos es el uso deuna fase mvil tamponada a bajo pH, en torno a pH 2-3. El uso de una fase mvil de pH bajoproporciona generalmente las mejores formas de pico para compuestos bsicos en columnasbasadas en slice. A pH bajo, los silanoles de la slice estn completamente protonados, por loque los compuestos bsicos con carga positiva no interaccionan de forma notoria. El resultadoes una buena forma de pico. Muchos compuestos cidos no estn cargados, lo que maximizasu retencin a pH bajo. Estas observaciones suponen ventajas clave para el desarrollo demtodos a pH bajo.

Para el trabajo analtico estndar, comience el desarrollo de mtodos con acetonitrilo como modificador orgnico de la fase mvil y tampn fosfato 20-50 mM (pH 2-3) comocomponente acuoso para aplicaciones no LC/MS. Esas condiciones proporcionan el buencontrol del pH necesario para obtener los anlisis ms reproducibles de compuestosionizables. Para aplicaciones LC/MS, el cido frmico o el TFA son aditivos de fase mvilbuenos para pH bajo.

Elija Agilent ZORBAX Eclipse Plus para obtener la mejor forma de pico

Seleccione inicialmente columnas ZORBAX Eclipse Plus C18 o C8 para el desarrollo demtodos a pH bajo. Las columnas Eclipse Plus son la ltima incorporacin a la familia Eclipse,y utilizan tecnologas mejoradas de slice y de unin para conseguir una mejor forma de picode compuestos bsicos. Las columnas Eclipse Plus se pueden utilizar a pH 2-9, lo que aportaflexibilidad al desarrollo de mtodos. Son muy estables hasta pH 2, lo que las convierte encandidato ideal para el desarrollo inicial de mtodos.



Optimice los disolventes y las fases ligadas a pH bajo

Los pasos iniciales del desarrollo de mtodos pueden conducir a una separacin satisfactoriade forma muy rpida. Pero, si se necesita una mayor optimizacin, puede sustituirse elacetonitrilo por metanol o tetrahidrofurano y volver a optimizar la separacin. Tal vez as seconsiga ya una solucin satisfactoria; no obstante, si an se desea una mayor optimizacin de la selectividad, es posible cambiar la fase ligada de la columna.

A pH bajo, hay muchas opciones de fase ligada disponibles para optimizacin. Se incluyen lasfases de Eclipse Plus, as como la familia Eclipse XDB con C18, C8, Fenil y CN. Las opcionesalternativas incluyen seis fases ligadas StableBond diferentes: SB-C18, SB-C8, SB-Fenil, SB-CN, SB-C3 y SB-Aq.

A pH bajo, puede ser necesario mejorar la retencin de compuestos cidos. Para esassituaciones, rebaje an ms el pH, hasta pH 1-2, y utilice columnas StableBond. Esascolumnas proporcionan la mayor estabilidad a muy bajo pH y muchas opciones deselectividad para obtener separaciones con la mxima resolucin.

Elija Agilent ZORBAX Eclipse Plus para el desarrollo de mtodos a pHmedio (4-9)

Algunas muestras pueden no resolverse a pH bajo o presentar mejor solubilidad y estabilidada pH medio. Mientras se utiliza la columna Eclipse Plus C18, puede usarse el rango de pHmedio para el desarrollo de mtodos. La columna Eclipse Plus es estable hasta pH 9, por loque es igualmente fiable a pH medio. Las columnas de doble desactivacin presentan dosventajas clave: forma de pico ptima a bajo y medio pH, junto con suficiente densidad deligado para proteger la columna frente a la degradacin de la slice a pH 6-9.

A pH medio, los compuestos bsicos (por ejemplo, aminas) pueden tener an una cargapositiva y los silanoles de la superficie de la slice pueden tener carga negativa. Por lo tanto,la proteccin de tantos silanoles como sea posible conduce a una mejor forma de pico a pHmedio. Eso convierte a la columna Eclipse Plus C18 en la mejor opcin de partida para uso apH medio. La primera opcin para modificador de la fase mvil a pH 7 suele ser el tampnfosfato, debido a su rango de tamponado de pH 6,1-8,1. Una segunda opcin para pH medioes el tampn acetato, que tampona en el rango de pH 3,8-5,8 y cuya volatilidad lo convierteen un buen candidato cuando se requiere compatibilidad con LC/MS.



Seleccione entre Agilent ZORBAX Eclipse Plus Phenyl-Hexyl, Eclipse XDB-Phenyl, CN y Bonus-RP

El proceso de desarrollo de mtodos a pH medio reproduce el proceso a pH bajo, con laoptimizacin del modificador orgnico y la seleccin de una fase ligada alternativa si no sealcanza la resolucin necesaria tras ese paso. Las fases ligadas alternativas a pH medio sonlas Eclipse Plus Phenyl-Hexyl, Eclipse XDB-Phenyl Eclipse XDB-CN y Bonus-RP. Proporcionanselectividades muy diferentes para muchas muestras, siguindose de nuevo el proceso dedesarrollo de mtodos. La columna Bonus-RP cuenta con un grupo amida polar embebida que ofrece una selectividad diferente para muchas muestras, proporciona una forma ptimade pico para compuestos bsicos y permite utilizar la columna con fases mviles de hasta un100% de proporcin acuosa.

Elija columnas Agilent ZORBAX Extend-C18 para desarrollo de mtodos apH alto (pH 9-12)

A pH bajo o medio, algunas separaciones de compuestos bsicos an no tendrn la retencinsuficiente o la selectividad deseada. Para esas muestras, pueden resultar apropiadas lasseparaciones a pH alto. Hasta fechas recientes, se evitaban las separaciones en columnas deslice a pH alto debido a la escasa duracin de las columnas, consecuencia de la disolucindel gel de slice subyacente. Las tecnologas de columna ms recientes, como la ZORBAXExtend-C18, pueden proteger la slice de su disolucin, lo que permite conseguir duracionesde columna razonables para explorar las ventajas de selectividad de la operacin a alto pH.

Las opciones de tampn de la fase mvil a pH alto con la columna Extend-C18 son tamponesorgnicos como la trietilamina y el hidrxido amnico. Esos tampones ofrecen un mejorresultado con metanol como modificador orgnico para prolongar la duracin de la columna a pH alto.



Compuestos poco retenidos

INICIO

MUESTRA

Y PASO 1

Bajo pH 3 Separacin inicial

Gua para el desarrollo de mtodos depH bajo a pH alto

Compuestos poco retenidos

cidos

PASO 1a

PASO 1c

PASO 6

cidos

ZORBAX Eclipse Plus C18 o C8Tampn 20-50 mM pH 2,5 (2-3)T=30 C (de ambiente hasta 60 C)Ajuste el % de ACN para 0,5 < k < 20

Problemas de espaciado de bandas








Problemasde

espaciadode bandas



Problemasde

espaciadode bandas





Y PASO 2

Y PASO 3

Y PASO 4

Y PASO 5

Y PASO 6

Y PASO 7

Y

PASO 1e

Y PASO 10

PASO 1c

Problemas

PASO 1e

PASO 2a

PASO 5a

PASO 5bPASO 5d Y

PASO 5d

PASO 10a

Modifique la temperatura de columnaa un mximo de 60 C para EclipseXDB y un mximo de 80-90 C paraStablebond

Modifique la temperatura dentro delrango recomendado para la fase ligada

Compuestos cidos poco retenidos

Aumente o disminuya el % demodificador orgnico en un 5 %(v/v)

Cambie el modificador orgnico (ACN o THF)Ajuste para 0,5 < k < 20Vuelva al PASO 6

PASO 6

ZORBAX Eclipse Plus C18 o C8Tampn 20-50 mM pH 7 (6-9)T = 30C (de ambiente hasta 40 C)Ajuste el % de MeOH para 0,5 < k < 20

COMPUESTOS CIDOS (Par Inico)Use modificador orgnico MeOH, fosfato detetrabutilamonio 10 mM, tampn 25-50 mMpH 7Ajuste el % de MeOH para 0,5 < k < 20

Modifique la temperatura dentro del rangorecomendado para la fase ligada

Aumente o disminuya el % de modificadororgnico en un 5% (v/v)

Cambie el modificador orgnico (ACN o THF)Ajuste para 0,5 < k < 20

pH medio, 7

Alto pH 9

COMPUESTOS BSICOS (Par Inico)Use modificador orgnico MeOH, cidohexanosulfnico 10 mM, tampn 25-50 mM pH3Ajuste el % de MeOH para 0,5 < k < 20


Aumente o disminuya el % demodificador orgnico en un 5%(v/v)



Cambie el modificador orgnico (MeOH o THF)Ajuste el % de orgnico para 0,5 < k < 20Vuelva al PASO 2

Cambie la funcionalidad de fase ligada a EclipseXDB-C18, C8, FenilSB-CN, AQ, Fenil, Bonus-RPVuelva al PASO 1

ZORBAX SB-C18 o SB-C8Tampn 20-50 mM pH (1-3)T = 30C (de ambiente hasta 90C)Ajuste el % de ACN para 0,5 < k < 20

Pruebe un modo de HPLC diferente.

Pngase en contacto con Agilent Technologies.


ZORBAX Extend-C18pH 10,5 (9-11,5); TEA o amonaco 5-20 mM, otampn orgnico 10-50 mM, o tampn boratoT = 25 C (de ambiente hasta 40 C)Ajuste el % de MeOH para 0,5 < k < 20

Cambie la funcionalidad de fase ligada a ZORBAXEclipse XDB-Fenil o Bonus-RPVuelva al PASO 5

Problemasde

espaciadode bandas

Problemasde

espaciadode bandas

Problemas

de

espaciado

de bandas

Problemasde

espaciadode bandas




Sistemas de columna de cartuchoAgilent ofrece una variedad de materiales de relleno de HPLC muy utilizados en configuraciones de cartucho econmicas y de fcil uso.

Busque estos iconos en las pginas siguientes que le ayudarn a seleccionar las precolumnas y columnas ms apropiadas.

Gua de seleccin de cartuchos

Icono Tipo de cartucho Caractersticas Beneficios

Cartucho Agilent para HPLC Puede invertir las pinzas en la conexinterminal para aadir pre-columnas

EconmicoProlonga la vida til de la columnaPermite cambios rpidos de columnaPuede utilizar cartuchos de 2, 3, 4 y 4,6 mm

Los cartuchos tienen un filtro y un tamiznicos en cada extremo

Ayuda a prevenir posibles obstrucciones

Precolumna ZORBAX:Sistema independiente

Cartucho de alta eficacia, independiente, debajo volumen muerto

Se venden hasta de 400 bares

Cartucho polimrico diseado para selladohermtico frente a superficies metlicas

No se necesitan juntasMs resistente frente a los disolventes queel PEEK

Conexiones reutilizables Apto para conexiones LC de 1/16"

Columnas de cartucho de resolucin rpida yHT de resolucin rpida ZORBAX:rellenos de 3,5 m y 1,8 m, sistemaindependiente

Para una alta productividad en LC/MS,LC/MS/MS y separaciones combinatoriales

Para todos los tipos de analitos Bajo sangrado

Con relleno Eclipse XDB para uso a pH 2-9Con relleno StableBond para uso a bajo pH

Se venden por separado o en paquetes detres

Kit de hardware HPLC para precolumnassemipreparativas ZORBAX:Sistema independiente

Dispositivo de bajo volumen muerto Sella hasta 2.000 psi (135 bares,13,5 Mpa)

Tubo (polifenilen-sulfona) diseado parasellado hermtico frente a superficiesmetlicas

No se necesitan juntas

Conexiones reutilizables Apto para conexiones LC de 1/16"

Sistema de precolumna y columna paraHPLC preparativas de cartucho ZORBAX yAgilent Prep:Opciones independientes y de hardwareintegral

Dispositivo de bajo volumen muerto Prolonga la vida til de la columna

Conexiones reutilizables Permite cambios rpidos de columna

Opciones de hardware para precolumnasintegradas y externas

Utilizable con columnas de 21,2 y 30 mm d.i.


Columnas para HPLC analtica

Buenas noticias para los analistas que no tienen tiempo de hacer un trabajo de columnaspara una aplicacin determinada: las columnas ZORBAX le permiten elegir la columnaadecuada en funcin de su muestra y fase mvil y eliminar cualquier tipo de conjetura.

Adems, la slice ZORBAX de Agilent est fabricada por Agilent; no se adquiere a ningnproveedor externo. Esto significa que controlamos cada paso del proceso de fabricacin yaseguramos la consistencia entre lotes, as como un rendimiento ptimo y unos resultadosfiables a largo plazo.

En esta seccin, encontrar una variada seleccin de columnas ZORBAX diseadas paraobtener una ptima resolucin en un amplio rango de pH, lo que incluye:

Columnas Poroshell 120: alta eficiencia y resolucin con un 50% menos de presin que las columnas sub 2 micras.

Columnas HPLC ZORBAX Eclipse Plus: diseadas para proporcionar una mejor forma de picopara compuestos bsicos de manera fiable.

Columnas HPLC ZORBAX Eclipse XDB: una opcin de confianza para mtodos analticos ynormativos.

Columnas HPLC ZORBAX StableBond: el lder del sector en aplicaciones a pH bajo. Columnas HPLC ZORBAX Rx: proporcionan una excelente estabilidad hasta pH 9. Columnas HPLC ZORBAX Extend-C18: presentan una unin bidentada que permite

desarrollar separaciones de alta resolucin a niveles altos de pH.

Columnas HPLC ZORBAX Bonus-RP: una columna alqulica-amdica que proporciona unaforma de pico excelente para bases, adems de una alternativa de selectividad.

Consiga una resolucin y forma de pico excelentes yelimine los falsos inicios.

Columnas HPLC ZORBAX Eclipse PAH: ideales para aplicaciones que requieran selectividadde forma o la separacin de ismeros geomtricos.

Columnas HPLC ZORBAX originales: fabricadas con slice de tipo A y utilizadas en muchosmtodos de separacin bien establecidos.

Columnas ZORBAX HILIC Plus: consiguen una mejor forma de pico y la retencin decompuestos bsicos polares con slice en modo HILIC

Los kits de desarrollo de mtodos ZORBAX contienen tres columnas por el precio de dos.Cada una tiene una fase ligada diferente para lograr una selectividad ptima.

Kits de validacin de mtodos ZORBAX: seleccione tantas (o tan pocas) columnas comonecesite para simplificar y abaratar la validacin de mtodos.

Columnas ZORBAX de intercambio inico: disponibles en versiones de intercambio aninicofuerte (SAX, Strong Anion Exchange) e intercambio catinico fuerte (SCX, Strong CationExchange).


Poroshell 120

Alta eficiencia y alta resolucin 50% menos de presin que las columnas sub 2 micras Compatible con instrumentos LC de 400 y 600 bares Dos fases ligadas con excelente selectividad y forma de pico

Las columnas Agilent Poroshell 120 poseen una partcula de 2,7 m con un ncleo slido de 1,7 m y una capa externa porosa de 0,5 m. Este tamao de partcula reducido consigueuna alta eficiencia, similar a la de columnas sub 2 micras pero con un 40-50% menos depresin. Estas columnas de alta eficiencia y alta resolucin se pueden utilizar con cualquiertipo de LC. La capa exterior porosa y el ncleo slido limitan la distancia de difusin y mejoranla velocidad de separacin, al tiempo que la estrecha distribucin de tamaos de partculamejora la eficiencia y la resolucin. El ncleo slido limita la distancia de difusin y mejora la velocidad de separacin. Las columnas pueden soportar altas presiones y se pueden utilizar mltiples columnas para lograr la mxima resolucin y eficiencia posibles. Los mismosprincipios se emplean en las columnas Poroshell 300, ideales para separaciones rpidas y dealta resolucin de biomolculas.

Especificaciones de columnas

Fase ligadaTamao deporo

Lmites detemperatura

Rango de pH Desactivacin

Carga decarbono

SB-C18 120 90 C 1,0-8,0 No 8%

EC-C18 120 60 C 2,0-8,0 nica 10%

EC-C8 120 60 C 2,0-8,0 nica 5%Las especificaciones nicamente indican los valores tpicos.



Poroshell 120

DescripcinTamao(mm)

Tamao departcula

(m) SB-C18 EC-C18 EC-C8*

Analtica 4,6 x 150 2,7 683975-902 693975-902 693975-906

Analtica 4,6 x 100 2,7 685975-902 695975-902 695975-906

Analtica 4,6 x 75 2,7 687975-902 697975-902 697975-906

Analtica 4,6 x 50 2,7 689975-902 699975-902 699975-906

Analtica 4,6 x 30 2,7 681975-902 691975-902 691975-906

Solvent Saver 3,0 x 150 2,7 683975-302 693975-302 693975-306

Solvent Saver 3,0 x 100 2,7 685975-302 695975-302 695975-306

Solvent Saver 3 x 75 2,7 687975-302 697975-302 697975-306

Solvent Saver 3,0 x 50 2,7 689975-302 699975-302 699975-306

Solvent Saver 3 x 30 2,7 681975-302 691975-302 691975-306

Dimetro estrecho 2,1 x 150 2,7 683775-902 693775-902 693775-906




Dimetro estrecho 2,1 x 30 2,7 681775-902 691775-902 691775-906*Disponible en diciembre de 2009




Time (min)

Time (min) EP_Poro120

0 2 4 6 8 10

0 2 4 6 8 10

A

B

10

45

67

8

9

10

12

3

12

34

5

67

8

9

Fenoles medioambientales en Poroshell 120

Columna A: Poroshell 120 EC-C18695975-9024,6 x 100 mm, 2,7 m

Columna B: Eclipse Plus C18959964-9024,6 x 100 mm, 1,8 m

Gradiente: A: agua + cido frmico al 0,1%B: acetonitrilo + cido frmico al0,1%2 ml/minInicial: 8% B10 min: 30% B

Detector: 275 nm; celda de flujo 2 mm

Inyeccin: 10 l

Agilent 1200 SL 40 C

Sin amortiguacin de pulsacin

Sin mezclador Calentador 3 l

P = 332 bares

P = 510 bares

1. Hidroquinona

2. Resorcinol

3. Catecol

4. 4-Nitrofenol

5. p-cresol

6. o-cresol

7. 2-Nitrofenol

8. 2,3 Dimetil fenol

9. 2,5 Dimetil fenol

10. 1-Naftol

Poroshell 120 ofrece una eficiencia de tipo sub 2 micras a menorpresin.



ZORBAX Eclipse Plus

Excelente forma de pico para compuestos bsicos Elevado nivel de rendimiento (forma de picos, eficiencia, resolucin y durabilidad) con todos

los tipos de muestras: cidos, bases y neutros

Reproducibilidad extraordinaria con los procedimientos de control de calidad ms rigurosos Fabricacin de slice patentada y mejorada con control de los productos desde el inicio al

final

Disponible en partculas de tamaos 1,8, 3,5 y 5 m para anlisis LC rpidos, de altaresolucin y analticos

Las nuevas columnas ZORBAX Eclipse Plus de Agilent ofrecen lo ltimo en rendimiento paralas columnas basadas en slice. La forma de pico es excelente para los compuestos bsicosms complicados, mejorando la eficacia y resolucin con estos tipos de muestras. Estosresultados se consiguen mediante mejoras en la tecnologa de enlace y fabricacin de laslice, completamente controlada por Agilent.

Dado su elevado nivel de rendimiento, las columnas Eclipse Plus resultan ser la opcinperfecta para el desarrollo de mtodos de todas las muestras. Si desea conseguir un rpidodesarrollo de mtodos y mayor productividad, elija columnas con partculas de 1,8m de altaresolucin. Para mtodos estndar, elija columnas convencionales de 5m y de 3,5m deresolucin rpida. Se logra una transferencia de mtodos sencilla con partculas de todos lostamaos.

Se ha mejorado tambin la reproducibilidad lote a lote de columnas incluso con losprocedimientos de control de calidad ms rigurosos, consiguiendo resultados fiables a largoplazo para todos los anlisis.


Fase ligadaTamaode poro

Superficieespecfica


Rango de pH*

Des-activacin

Carga decarbono

ZORBAX Eclipse Plus C18 95 160 m2/g 60 C 2,0-9,0 Doble 9%

ZORBAX Eclipse Plus C8 95 160 m2/g 60 C 2,0-9,0 Doble 7%

ZORBAX Eclipse PAH 95 160 m2/g 60 C 2,0-8,0 No 14%

ZORBAX Eclipse PlusPhenyl-Hexyl

95 160 m2/g 60 C 2,0-8,0 Doble 9%

Las especificaciones nicamente indican los valores tpicos.

*La vida til de la columna se reduce notablemente a pH > 7 y temperaturas > 40 C. A pH 6-9, se mejora la estabilidad decolumna de todas las columnas basadas en slice trabajando a temperaturas < 40 C y utilizando bajas concentraciones detampn en el rango de 0,01 - 0,02M, especialmente con tampones fosfato y carbonato.



LCEC001

1

2

Time (min)

Eclipse Plus C18

Ace 5 C18

SunFire C18

XBridge C18

Discovery HS C18

Luna C18 (2)

Gemini C18

XTerra MS C18

0 1.0 2.0 3.00.5 1.5 2.5 3.5

A

B

Time (min)

LCEC003

0 2 4 6 8 10 12

N = 14000Tf = 1.25

N = 41000Tf = 1.13

N = 60000Tf = 1.00

N = 23000Tf = 1.01

65432

1

Time (min)0 2 4 6 8 10 12

65432

1

1. Sulfanilamida

2. Sulfadiazina

3. Sulfatiazol

4. Sulfamerazina

5. Sulfametazina

6. Sulfametoxazol

Mejor forma de pico y mayor eficiencia con ZORBAX EclipsePlus

Columna A: XBridge C18, 4,6 x 150 mm, 5 m

Columna B: Eclipse Plus C18959993-9024,6 x 150 mm, 5 m

Fase mvil: A: cido frmico al 0,1%B: cido frmico al 0,1% en ACN

Velocidad de flujo: 1,0 ml/min

Gradiente: 0,0 min 10% B15 min 30% B

Temperatura: 40 C

Detector: UV 254 nm

Publicacin: 5989-4934EN

Muestra: Sulfonamidas

ZORBAX Eclipse Plus: mejor forma de pico de la industria sincolas

Columna: Eclipse Plus C18959996-9024,6 x 100 mm, 5 m

Fase mvil: A: 60% AguaB: 40% Acetonitrilo


Temperatura: Ambiente

Detector: UV254 nm


Muestra: Piridina, fenol

1. Piridina

2. Fenol



min0 0.5 1 1.5 2

1

1

2

2

Elimine las colas y maximice la resolucin con columnasEclipse Plus

Columna A: Eclipse Plus C18, 4,6 x 50 mm

Columna B: C18 competitivo, 4,6 x 50 mm

Fase mvil: 65% ACN: 35% tampn fosfato 25 mM (pH 7,4) Tf= 1,20

Tf= 4,86

Eclipse Plus C18, 4,6 x 50 mm

C18 competitivo, 4,6 x 50 mm

1. Oxibenzona

2. Patrones internos

3. Octilmetoxicinamato

1. Nortriptilina

2. Dipropiltalato

Eclipse Plus C18 frente a C8 y RRHT frente a RR

Columna A: Eclipse Plus C18959941-9024,6 x 50 mm, 1,8 m

Columna B: Eclipse Plus C8959943-9064,6 x 50 mm, 3,5 m

Fase mvil: Agua: Acetonitrilo (30:70)


Temperatura: 30 C

Detector: UV 230 nm

Muestra: Extracto de blsamo labial en ACN(fundido a 100 C ACN, enfriado yfiltrado a 0,45 m)

N: 6600Pw : 0.037 min.TF: 0.99 N: 6300

Pw : 0.061 min.TF: 0.98

N: 5000Pw : 0.019 min.TF: 1.09

N: 8800Pw : 0.014 min.TF: 1.20

N: 11600Pw : 0.047 min.TF: 1.06

N: 11800Pw : 0.093 min.TF: 1.02

min0 1 2 3 4

min0 1 2 3 4

247 bar

A

B

88 bar

22 min.

La forma de pico superior y mejor selectividad con Eclipse Plussignifica una mayor resolucin, una cuantificacin ms fcil ymejores resultados en las separaciones.

Una menor retencin puede significar un ahorro de tiempo. En este caso, la C8 es una buena opcin. La columna RRHTproporciona la eficiencia y resolucin que se buscan, pero lafase ligada C8 puede ser la mejor eleccin.



Anlisis rpido de un comprimido analgsico, diferencias deselectividad a pH 2 y pH7

Columna: Eclipse Plus C8959946-9064,6 x 50 mm, 5 m

Gradiente: 10-60% B/3 minpH 2,7: A: cido frmico al 0,1% B: AF al 0,1% en ACNpH 7,0: A: Fosfato Na 20 mM B: ACN

Muestra: Comprimido Excedrin genrico

1. Acetaminofeno

2. Cafena

3. cido acetilsaliclico

4. Desconocido

La capacidad de retencin de Eclipse Plus C8 es menorque la de Eclipse Plus C18

Columna A: Eclipse Plus C8959996-9064,6 x 100 mm, 5 m


Fase mvil: 80% metanol K2HPO4 8 mM (total) pH 7


Detector: UV 215 nm

Muestra: Amitriptilina 0,05 g/l (inyeccin 0,5 l)

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 min

4

pH 2.73

2

1

pH 7.0

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 min

1

2

3

4

2 min.

00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 min

Tf=1.04

Tf=1.00

00 1 2 3 4 5 6 7 8 9 min

3.789

A

B 5.777

Tanto Eclipse Plus C18 como C8 se pueden utilizar en un amplio rango de pHpara optimizar la selectividad o el tiempo de anlisis.

Una columna C8 normalmente se selecciona porque retiene menos que unacolumna C18, con lo que se reduce el tiempo de anlisis.

La columna Eclipse Plus C8 muestra el mismo comportamiento con una formade pico excelente en compuestos bsicos difciles.



Anlisis rpidos y ultrarrpidos de compuestos bsicos enEclipse Plus

Columna A: Eclipse Plus C18959941-9024,6 x 50 mm, 1,8 m


959993-902

Fase mvil: A: 50% K2HPO4 8 nM, pH 7B: 50% ACN


Temperatura: Ambiente

Detector: UV254 nm


Muestra: Berberina, 0,4 mg/ml, 2 l

min

EP103

0 0.5

A

1 1.5 2 2.5

O

OCH3Tf = 1.00

OCH3

O N+ Cl-

min0 0.5 1 1.5 2 2.5

B

Tf = 1.06

1. Berberina



ZORBAX Eclipse Plus

Hardware DescripcinTamao (mm)

Tamao departcula (m)

EclipsePlus C18USP L1


Eclipse PlusPhenyl-HexylUSP L11

EclipsePAHUSP L1

Analtica 4,6 x 250 5 959990-902 959990-906 959990-912 959990-918

Analtica 4,6 x 150 5 959993-902 959993-906 959993-912 959993-918

Analtica 4,6 x 100 5 959996-902 959996-906 959996-912 959996-918

Analtica 4,6 x 50 5 959946-902 959946-906

Resolucin rpida 4,6 x 150 3,5 959963-902 959963-906 959963-912 959963-918


Resolucin rpida 4,6 x 75 3,5 959933-902 959933-906 959933-912



Resolucin rpida HT, 600 bares 4,6 x 100 1,8 959964-902 959964-906 959964-912 959964-918

Resolucin rpida HT, 600 bares 4,6 x 75 1,8 959951-902



Solvent Saver 3,0 x 250 5 959990-318

Solvent Saver 3,0 x 150 5 959993-302 959993-306

Solvent Saver Plus 3,0 x 150 3,5 959963-302 959963-306 959963-312


Solvent Saver HD, 1200 bares 3,0 x 100 1,8 959758-302

Solvent Saver HD, 1200 bares 3,0 x 50 1,8 959757-302

Solvent Saver HT, 600 bares 3,0 x 100 1,8 959964-302 959964-306 959964-312

Solvent Saver HT, 600 bares 3,0 x 50 1,8 959941-302 959941-306 959941-312



Dimetro estrecho 2,1 x 250 5 959790-918

Dimetro estrecho 2,1 x 150 5 959701-902 959701-906 959701-912 959701-918

Dimetro estrecho 2,1 x 50 5 959746-902 959746-906

Dimetro estrecho RR 2,1 x 150 3,5 959763-902 959763-906 959763-912

Dimetro estrecho RR 2,1 x 100 3,5 959793-902 959793-906 959793-912 959793-918




2,1 x 150 1,8 959759-902


2,1 x 100 1,8 959758-902


2,1 x 50 1,8 959757-902

Dimetro estrecho RRHT, 600 bares

2,1 x 100 1,8 959764-902 959764-906 959764-912 959764-918


2,1 x 50 1,8 959741-902 959741-906 959741-912 959741-918


2,1 x 30 1,8 959731-902 959731-906 959731-912

Precolumna, 4/paq. 4,6 x 12,5 5 820950-936 820950-937 820950-938 820950-939

Precolumna, 4/paq. 2,1 x 12,5 5 821125-936 821125-937 821125-938 821125-939

Kit de soporte de la precolumna 0 820888-901 820888-901 820888-901 820888-901

Hardware Descripcin Tamao (mm)Tamao de

partcula (m)



Eclipse PlusPhenyl-HexylUSP L11

EclipsePAHUSP L1

ZORBAX Eclipse Plus



ZORBAX Eclipse PAH

Separacin de alta resolucin de 16 PAH en EPA 610. Una amplia variedad de tamaos de partcula (1,8, 3,5 y 5 m) y tamaos para

separaciones rpidas y de alta resolucin.

Cada lote de material est especficamente probado con PAH para garantizar la mximareproducibilidad en las condiciones de trabajo previsibles.

Excelente rendimiento utilizando la slice de alta calidad mejorada de las columnas Eclipse Plus. Adecuadas para aplicaciones que requieran "selectividad de forma" o separacin de

ismeros geomtricos.

Las columnas Agilent ZORBAX Eclipse PAH estn recomendadas para la separacin dehidrocarburos aromticos policclicos. Los PAH se consideran contaminantes prioritarios y elanlisis de estos compuestos potencialmente carcingenos en el agua, el suelo y la comida esde vital importancia. Las columnas Eclipse PAH separan los 16 PAH del mtodo EPA 610 conrapidez y alta resolucin.



Superficieespecfica


Rango de pH

Des-activacin

Cargadecarbono

ZORBAX Eclipse PAH 95 160 m2/g 60 C 2,0-8,0 No 14%Las especificaciones nicamente indican los valores tpicos.



ZORBAX Eclipse PAH

Hardware DescripcinTamao(mm)


EclipsePAHUSP L1

Analtica 4,6 x 250 5 959990-918

Analtica 4,6 x 150 5 959993-918

Analtica 4,6 x 100 5 959996-918

Resolucin rpida 4,6 x 150 3,5 959963-918






Solvent Saver 3,0 x 250 5 959990-318



Dimetro estrecho RR* 2,1 x 100 3,5 959793-918

Dimetro estrecho RRHT, 600 bares 2,1 x 100 1,8 959764-918

Dimetro estrecho RRHT, 600 bares 2,1 x 50 1,8 959741-918

Precolumna, 4/paq. 4,6 x 12,5 5 820950-939

Precolumna, 4/paq. 2,1 x 12,5 5 821125-939

Kit de soporte de la precolumna 820888-901*RR: resolucin rpida de 3,5m

LCEPlusPAHTime (min)

1 2 3 4 5

0

500

250

750

1250

1750

1000

1500

2000

mAU

Anlisis rpidos y de alta resolucin en columnas RRHT Eclipse PAH

Columna: Eclipse PAH959941-9184,6 x 50 mm, 1,8 m

Fase mvil: A = agua; B = acetonitrilo

Gradiente: Tiempo (min) 0,00 3,5 5,2 5,5 6,5

% B401001004040


Temperatura: 25 C

Detector: DAD 220,4 nm sin ref. Tiempo de parada DAD = 6 min

Tiempo de parada = 7

Rs = 2,2Rs = 2,2 frente a 2,0 para4,6 x 50 mm, 3,5 m



CH3

CH3

Si

CH3

CH3

CH3Si

CH3

CH3

CH3Si

CH3

CH3

Si

CH3

CH3

Si

O

O

O

O

O

Ligado extra denso y fase ligada de doble desactivacinEclipse XDB

ZORBAX Eclipse XDB

Cuatro opciones de selectividad para la optimizacin del desarrollo de mtodos Buena forma de pico para compuestos bsicos, cidos y neutros Alto rendimiento en un amplio rango de pH: pH de 2 a 9 Tamaos de partcula de 1,8 m a 7 m Larga duracin, con ligado extradenso y doble desactivacin

Las columnas Agilent ZORBAX Eclipse XDB (C18, C8, Phenyl y CN) proporcionan cuatroopciones de fase ligada para la optimizacin del desarrollo de mtodos. Estas columnasproporcionan una buena forma de pico en un amplio rango de pH (de 2 a 9), para unaflexibilidad adicional de desarrollo de mtodos, con una misma familia de columnas. Las columnas Eclipse XDB se utilizan para el desarrollo de mtodo a pH bajo (de 2 a 3),pudindose utilizar la misma columna para el desarrollo de mtodos en la regin de pH medio (de 6 a 8). En la regin de pH medio, los silanoles residuales son ms activos y es msprobable que se produzcan colas por efecto de las interacciones. Para evitarlo, las columnasEclipse XDB incorporan un ligado extradenso (eXtra Densely Bonded) y doble desactivacinmediante un proceso propio para abarcar el mayor nmero posible de silanoles activos. El resultado: mejor forma de pico de compuestos bsicos a pH de 2 a 9. Estn disponiblestamaos de partculas de 1,8, 3,5, 5 y 7 m para las columnas Eclipse XDB para separacionesde alta velocidad, alta resolucin analticas y de escala preparativas.



Superficieespecfica


Rango de pH*

Des-activacin

Carga decarbono

ZORBAX Eclipse XDB-C18 80 180 m2/g 60 C 2,0-9,0 Doble 10%

ZORBAX Eclipse XDB-C8 80 180 m2/g 60 C 2,0-9,0 Doble 7,6%

ZORBAX Eclipse XDB-Phenyl

80 180 m2/g 60 C 2,0-9,0 Doble 7,2%

ZORBAX Eclipse XDB-CN 80 180 m2/g 60 C 2,0-8,0 Doble 4,3%Las especificaciones nicamente indican los valores tpicos.

*Las columnas Eclipse XDB se han diseado para trabajar en un amplio rango de pH. A pH 6-9, se mejora la estabilidad delas columnas basadas en slice trabajando a temperaturas



La doble desactivacin, el ligado denso y las duraderas partculas Rx-Sil (de tipo sol) se combinan para proporcionar una larga duracin de columna a pH 7 en comparacincon las columnas sil-gel de desactivacin simple utilizadas. Las condiciones utilizadas para esta prueba: alta temperatura (60 C) y alta concentracin salina (250 mM),aceleran la disolucin de la slice, lo que provoca un fallo prematuro de la columna de tipo sil-gel.

Buena forma de pico en un rango amplio de pH con ZORBAX Eclipse XDB

Columna: Eclipse XDB-C8993967-9064,6 x 150 mm, 5 m

Fase mvil: A:pH 3,0 75% tampn fosfato 25 mMpH 3,0: 25% ACNB:pH 7,0 90% fosfato 20 mMpH 7,010% ACN


Temperatura: 40C

LCEC004

1

4

3

2

1

3

2

5

Time (min)

A B

0 2.5 5.0 7.5Time (min)

0 2.5 5.0 7.5

LCEC006

1

4

5

2, 3

1

4

5

2

Time (min)

A B

10 11 120 1 2 3 4 5 6 7 8 9Time (min)

0 1 2 3 4 5 6 7 8

3

Prueba de estabilidad de la columna a pH 7,0

Columna A: C8 de la competenciaTipo SILTras 1826 volmenes de columna

Columna B: Eclipse XDB-C8993967-9064,6 x 150 mm, 5 mTipo SolTras 1843 volmenes de columna

Fase mvil: 60% ACN40% tampn fosfato 250 mM, pH 7,0


Temperatura: 60 C

Muestra: Antidepresivos tricclicos

1. Uracilo

2. Nortriptilina

3. Doxepina

4. Amitriptilina

5. Trimipramina

Las columnas ZORBAX Eclipse XDB proporcionan una buena forma de pico en un ampliorango de pH y son una excelente opcin para el desarrollo de mtodos a pH de 2 a 9.

Muestra: A: 1. Maleate2. Doxilamina3. Clorfeniramina4. Triprolidina5. DifenidraminaB: 1. Procainamida2. N-acetilprocainamida3. N-propionilprocainamida



LCEC008

1

3

2

1

3

2

Time (min)

A B

0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5Time (min)

0 0.5 1.0 1.5 2.0 2.5 3.0 3.5 4.0 4.5

LCEC005Column Volumes of Mobile Phase (X1000)

K of

Am

itrip

tylin

e

0 25.0

5.5

6.0

6.5

7.0

4 6 8 1210

ZORBAX SB-C8

ZORBAX Eclipse XDB-C8

C8 de la competencia

Las columnas Eclipse XDB y StableBond se basanen la misma slice pero tienen un ligado y unadesactivacin diferentes. Eso hace que puedantener una selectividad muy diferente para lamisma muestra en las mismas condiciones, comoilustra este ejemplo.

Prueba de estabilidad de la columna a pH 3 y 60C

Columna: ZORBAX SB-C8883975-9064,6 x 150 mm, 5 m

Columna: Eclipse XDB-C8993967-9064,6 x 150 mm, 5 m

Fase mvil: Condiciones de purga:70% NaAc-HCl 50 mM, pH 3,030% ACNCondiciones de la prueba de retencin:65% metanol35% agua


Temperatura: 60C

Muestra: Antidepresivos tricclicos

Las columnas Eclipse XDB son estables en un amplio rango de pH. A bajo pH, la columna con desactivacin Eclipse es extremadamente estable y muestra una estabilidadequivalente a la de una columna sin desactivacin, SB-C8, a pH 3. Las columnas se purgaron con una fase mvil de pH 3 a 60C. A continuacin se pusieron a prueba conun compuesto fuertemente bsico para determinar si la desactivacin o la fase ligada haban sido hidrolizadas y eliminadas de la superficie de la slice. La columna EclipseXDB result ser muy estable, como muestra su consistencia en la retencin de amitriptilina tras los ms de 12.000 volmenes de columna empleados en la prueba. Otracolumna desactivada muestra una menor estabilidad en las mismas condiciones.

1. Barbital

2. Sulfametoxazol

3. Cafena

Cambios de selectividad para compuestos bsicos con Eclipse XDB y StableBond

Columna A: Eclipse XDB-C8966967-9064,6 x 75 mm, 3.5 m

Columna B: ZORBAX Rx/SB-C8866953-9064,6 x 75 mm, 3.5 m

Fase mvil: 70% 25 mM NaH2PO4, pH 3,030% metanol


Temperatura: 35 C



La columna Eclipse XDB-CN reduce el tiempo deretencin y proporciona una buena selectividad parapesticidas de urea en comparacin con una columnaEclipse XDB-C18.

LCEC010

13

2

6

6

4

5

1

3

24

5

61

32

45

Time (min)

Time (min)

A

B

0 10

0 2 4 6 8 10

Time (min)

C

0 2 4 6 8 10

20 30 40 50

1. Fenurn

2. Monurn

3. Monolinurn

4. Diurn

5. Linurn

6. Pencicurn

Selectividad para pesticidas de urea

Columna A: Eclipse XDB-C18993967-9024,6 x 150 mm, 5 m

Columna B: Eclipse XDB-CN993967-9054,6 x 150 mm, 5 m

Columna C: Eclipse XDB-C18993967-9024,6 x 150 mm, 5 m

Fase mvil: A. 60:40 MeOH:aguaB. 60:40 MeOH:aguaC. 77:23 MeOH:agua


Temperatura: 25C

Muestra: Pesticidas de urea

Esta separacin de protectores solares en las tres fases ligadas Eclipse XDB(C18, C8 y Phenyl) muestra la posibilidad de utilizar diferentes fases ligadaspara optimizar una separacin. Si bien las tres fases ligadas proporcionan unaseparacin adecuada, Eclipse XDB-Phenyl proporciona un orden de elucin delos picos diferente y un tiempo global de anlisis mucho ms corto. Las tresfases ligadas ofrecen asimismo una excelente forma de pico sin necesidad deaditivos en la fase mvil.

Optimizar separaciones con opciones de selectividad Eclipse XDB: Anlisis de protectores solares

Columna A: Eclipse XDB-Phenyl963967-9124,6 x 150 mm, 3,5 m

Columna B: Eclipse XDB-C8963967-9064,6 x 150 mm, 3,5 m

Columna C: Eclipse XDB-C18963967-9024,6 x 150 mm, 3,5 m

Fase mvil: 15% H20: 85% MeOH


Temperatura: 35 C

Muestra: Filtros solares

LCEC007

1

3

2

1

3

2

1

3

2

Time (min)10 12 14 160 2 4 6 8

10 12 14 160 2 4 6 8

10 12 14 160 2 4 6 8

A

B

C

1. Oxibenzona

2. Padimato-O

3. Salicilato de etilhexilo



ZORBAX Eclipse XDB



EclipseXDB-C18USP L1

EclipseXDB-C8USP L7

EclipseXDB-PhenylUSP L11

EclipseXDB-CNUSP L10

Columnas estndar (no requieren hardware especial)

Semipreparativa 9,4 x 250 5 990967-202 990967-206

Analtica 4,6 x 250 5 990967-902 990967-906 990967-912 990967-905

Analtica 4,6 x 150 5 993967-902 993967-906 993967-912 993967-905

Analtica 4,6 x 50 5 946975-902 946975-906





Resolucin rpida 4,6 x 30 3,5 934967-902 934967-906


Resolucin rpida HT, 600 bares 4,6 x 100 1,8 928975-902 928975-906




Solvent Saver 3,0 x 250 5 990967-302 990967-306 990967-312 990967-305

Solvent Saver 3,0 x 150 5 993967-302 993967-306 993967-312 993967-305

Solvent Saver Plus 3,0 x 150 3,5 963954-302 963954-306 963954-312 963954-305


Solvent Saver Plus 3,0 x 75 3,5 966954-302

Solvent Saver HT, 600 bares 3,0 x 100 1,8 928975-302 928975-306






Dimetro estrecho RR* 2,1 x 150 3,5 930990-902 930990-906

Dimetro estrecho RR* 2,1 x 100 3,5 961753-902 961753-906 961753-905

Dimetro estrecho RR* 2,1 x 75 3,5 966735-902



Dimetro estrecho RR* 2,1 x 20 3,5 972700-902 972700-906El lmite de presin de la columna es, a menos que se indique otra cosa, 400 bares.

*RR: resolucin rpida de 3,5m

**RRHT: Resolucin rpida HT de 1,8 m



Dimetro estrecho RRHT, 600 bares** 2,1 x 100 1,8 928700-902 928700-906




MicroBore RR* 1,0 x 150 3,5 963600-902 963600-906

MicroBore RR* 1,0 x 50 3,5 965600-902 965600-906

MicroBore RR* 1,0 x 30 3,5 961600-902 961600-906

Precolumna MicroBore, 3/paq. 1,0 x 17 5 5185-5921 5185-5921

Precolumna, 4/paq. 4,6 x 12,5 5 820950-925 820950-926 820950-927 820950-935

Precolumna, 4/paq. 2,1 x 12,5 5 821125-926 821125-926 821125-926 821125-935

Kit de soporte de la precolumna 820888-901 820888-901 820888-901 820888-901Columnas de cartucho PrepHT (requieren kit de conexiones 820400-901)

Cartucho PrepHT 21,2 x 250 7 977250-102 977250-106





Precolumna PrepHT 17 x 7,5 5 820212-925 820212-926

Hardware de precolumna 820444-901 820444-901

Conexiones terminales PrepHT, 2/paq. 820400-901 820400-901

El lmite de presin de la columna es, a menos que se indique otra cosa, 400 bares.

*RR: resolucin rpida de 3,5m

**RRHT: Resolucin rpida HT de 1,8 m




EclipseXDB-C8USP L7

EclipseXDB-PhenylUSP L11

EclipseXDB-CNUSP L10

ZORBAX Eclipse XDB



ZORBAX Eclipse XDB




EclipseXDB-C8USP L7

Columnas de cartucho de Agilent (requieren kit de soporte 5021-1845)

Analtica 4,6 x 250 5 7995118-585 7995108-585

Analtica 4,6 x 150 5 7995118-595 7995108-595


Solvent Saver Plus 3,0 x 75 3,5 7995230-344

Precolumnas, 10/paq. 4,0 x 4 5 7995118-504 7995118-504

Soporte de cartucho 5021-1845 5021-1845Columnas estndar (no requieren hardware especial)

Resolucin rpida HT 4,6 x 50 1,8 922975-902 922975-906

Resolucin rpida HT, 3/paq. 4,6 x 50 1,8 922975-932

Dimetro estrecho RRHT 2,1 x 50 1,8 922700-902

Dimetro estrecho RRHT, 3/paq. 2,1 x 50 1,8 922700-932Cartuchos HT de resolucin rpida (requieren kit de soporte 820555-901)

Cartucho de resolucin rpida 4,6 x 30 3,5 933975-902 933975-906

Cartucho de resolucin rpida, 3/paq. 4,6 x 30 3,5 933975-932 933975-936







Cartucho de resolucin rpida HT 4,6 x 50 1,8 925975-902

Cartucho de resolucin rpida HT, 3/paq. 4,6 x 50 1,8 925975-932







ZORBAX Eclipse XDB







Kit de hardware para cartuchos RR y RRHT 820555-901

Columnas capilares forradas de vidrio

Capilar 0,5 x 250 5 5064-8286

Capilar 0,5 x 150 5 5064-8287

Capilar RR 0,5 x 150 3,5 5064-8288

Capilar RR 0,5 x 35 3,5 5064-8298

Capilar 0,3 x 250 5 5064-8269

Capilar 0,3 x 150 5 5064-8291

Capilar RR 0,3 x 150 3,5 5064-8271

Capilar 0,5 x 35 5 5064-8296

Capilar 0,3 x 35 5 5064-8297




EclipseXDB-C8USP L7



R

R

R

R

R

R

R1SiO

OH

OH

R1SiO

R1SiO

Fase ligada StableBond protegida estricamente

ZORBAX StableBond de 80

Mxima duracin y mejor reproducibilidad en separaciones a bajo pH: hasta pH 1 La qumica de columna estable patentada permite el uso a temperaturas elevadas y pH bajo

sin degradacin

Seis fases ligadas diferentes proporcionan una amplia selectividad: SB-C18, SB-C8, SB-CN,SB Fenilo, SB-C3, SB-Aq

Slice de alta pureza (tipo B) para una forma de pico ptima

Las columnas Agilent ZORBAX StableBond utilizan exclusivos silanos monofuncionalespatentados con voluminosas cadenas laterales de tipo diisobutilo (SB-C18) o diisopropilo SB-C8, SB-C3, SB Fenilo, SB-CN y SB-Aq) que protegen estricamente los enlaces siloxanoclave del ataque hidroltico a bajo pH. Los materiales de relleno StableBond no estndesactivados para as ofrecer una estabilidad excepcional y maximizar la vida til y lareproducibilidad bajo condiciones de fase mvil cida. La slice de alta pureza y baja acidezproporciona una forma de pico excelente con compuestos cidos, bsicos y neutros, de forma que las columnas StableBond son una opcin excelente para el desarrollo de mtodosde bajo pH. Las columnas ZORBAX StableBond son compatibles con todas las fases mvileshabituales, incluyendo fases mviles muy acuosas.



Superficieespecfica

Lmites detemperatura*

Rango depH*

Des-activacin

Carga decarbono

ZORBAX SB-C18 80 180 m2/g 90 C 0,8-8,0 No 10%

ZORBAX SB-C8 80 180 m2/g 80 C 1,0-8,0 No 5,5%

ZORBAX SB-C3 80 180 m2/g 80 C 1,0-8,0 No 4%

ZORBAX SB-Phenyl 80 180 m2/g 80 C 1,0-8,0 No 5,5%

ZORBAX SB-CN 80 180 m2/g 80 C 1,0-8,0 No 4%

ZORBAX SB-Aq 80 180 m2/g 80 C 1,0-8,0 No propiaLas especificaciones nicamente indican los valores tpicos.

*Las columnas StableBond han sido diseadas para un uso ptimo a bajo pH. A pH 6-8, se mejora la estabilidad de lascolumnas basadas en slice trabajando a temperaturas



LCSB001Column Volumes of Mobile Phase Purge

Rela

tive

Rete

ntio

n

0 5,000 10,000 15,000 20,000 25,000 30,0000.0

0.2

0.4

0.6

0.8

1.0

StableBond SB-C18 (Diisobutil-C18)

ZORBAX Rx-C18 (Dimetilo-C18)

C18 del competidor A

C18 del competidor B

C18 del competidor C

C18 del competidor D

C18 del competidor E

Como indicador de la ruptura de la columna, se mide el tiempo de

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Guia de Seleccion de Columnas HPLC Agilent