Identificacion de Neisseria

8/14/2019 Identificacion de Neisseria

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IDENTIFICACION DEL GENERO NEISSERIA

Caractersticas del gnero Neisseria

El gnero Neisseria incluye bacterias con morfologa de diplococcos Gram-negativos con unareaccin positiva a las pruebas de oxidasa y catalasa. Conjuntamente con los gneros Moraxella(incluyendo Branhamella catarrhalis, actualmente Moraxella catarrhalis), y Kingella conforman lafamilia Neisseriaceae. Algunas de las caractersticas que permiten diferenciar entre los gneros de lafamilia Neisseriaceae se muestran en el cuadro 3.

En el gnero Neisseria, el cual tiene la mayor importancia clnica dentro de la familiaNeisseriaceae, se incluyen las siguientes especies:

N. gonorrhoeae

N. meningitidis

N. lactamica

N. cinerea

N. polysaccharea

N. subflava

N. sicca

N. mucosa

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N. elongata

N. flavescens


Cuadro 3. Caractersticas diferenciales de los gneros de la familia Neisseriaceae.

GneroCaractersticas

Morfologa celular Catalasa cido a partir de glucosa Oxidasa

Neisseria Diplococos + + V3

Branhamella2 Diplococos + +

Kngella Cocobacilos + +Moraxella Bacilos + +

N. elongata tiene forma bacilar. Actualmente la especie B. catarrhalis se incluye en el gnero Moraxella. La produccin de cido depende de cada una de las especies del gnero.

Los diplococos Gram negativos del gnero Neisseria se asemejan a granos de caf yalgunos producen cpsula. Las especies de Neisseria se caracterizan por ser demetabolismo aerobio y el crecimiento de las especies patgenas se ve favorecido medianteincubacin en una atmsfera altamente hmeda y enriquecida a 5-8% de CO2.

Su temperatura de crecimiento es ptima entre los 35-37oC y tienen requerimientosnutricionales complejos. Algunas especies son capaces de degradar unos pocoscarbohidratos, mientras que otras son completamente incapaces de hacerlo, mientras que lasespecies saprfitas, especialmente, producen pigmentos carotenoides.

Las especies patgenas primarias para el ser humano son N. gonorrhoeae y N.meningitidis. N. gonorrhoeae es nutricionalmente mucho ms exigente que N. meningitidis,de manera tal que puede crecer nicamente en medios enriquecidos como agar chocolate,pero no puede crecer en agar sangre, mientras que N. meningitidis puede crecer tanto enagar sangre como en agar chocolate.



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N. gonorrhoeae es el agente etiolgico de la gonorrea, una enfermedad de transmisinsexual. N. gonorrhoeae es un patgeno humano obligatorio y no hay reservorios animares.N. gonorrhoeae es una bacteria altamente sensible a la desecacin y cambios de

temperatura, por lo que la infeccin se presenta al haber contacto ntimo y prolongado demucosas y secreciones.

El periodo de incubacin de la infeccin vara de de 2 a 7 das . Posterior a esteperodo, en hombres se presenta una descarga purulenta abundante, disuria y si no se datratamiento pueden presentarse complicaciones como epididimitis y prostatitis.

En ms del 50% de las mujeres se puede presentar una infeccin asintomtica o conslo un aumento de las secreciones vaginales. En las infecciones sintomticas hay unaumento de secrecin vaginal, disuria, dolor abdominal y alteraciones menstruales.

Las muestras clnicas de origen genital deben ser inoculadas en mediosenriquecidos pero selectivos, como el agar Thayer-Martin modificado (MTM) o el agarMartin-Lewis (ML), que contienen cuatro antibiticos que ayudan a suprimir el crecimientode bacterias contaminantes: vancomicina (MTM, 3 g/ml; ML, 4 g/ml), colistina (7.5 g/ml),lactato de trimetoprim (5 g/ml) y un agente antifngico (MTM, nistatina, 13.5 g/ml; ML.anisomicina,20 g/ml).

Las colonias de N. gonorrhoeae a las 24 horas de incubacin son pequeas, de 0.5 a 1.0mm de dimetro, generan una coloracin blanca-griscea y son levantadas y brillantes.

N. meningitidises agente etiolgico de bacteremia y meningitis epidmica. N. meningitidis puede presentar una cpsula de polisacridos extracelulares, la

cual se ha clasificado en trece diferente serotipos: A, B, C, D, X, Y, Z, W125 , 29E,H, 1, K y L. N. meningitidis coloniza las colonizada la mucosa respiratoria, N.meningitidis puede alcanzar sangre y generar una menngococcemia, la cualpuede evolucionar a coagulacin intravascular diseminada, choque endotxico ynecrosis en glndulas suprarrenales, adems de un cuadro de meningitis aguda.



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La infeccin invasiva porN meningitidis puede provocar rpidamente la muerte delpaciente.

Para el aislamiento de N meningitidis a partir de muestras clnicas como sangre y lquidocefalorraqudeo se puede utilizar agar sangre y agar chocolate. El crecimiento en agar sangre de unaislamiento primario de N meningitidis es variable, aunque posteriormente la bacteria puedeadaptarse al medio durante los subcultivos.

Luego del perodo de incubacin bajo las condiciones adecuadas, las colonias de N. meningitidisson de 1.5 mm de dimetro aproximadamente, redondas, de superficie y borde lisos, con aspectohmedo y brillante. Algunas colonias son mucoides por la cpsula dando una coloracin que va deblanco a gris.



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Branhamella (Moraxella) catarrhalis es considerada como parte de la flora normal, aunque se ha

relacionado como agente causante de infecciones pulmonares y de odo medio. Esta es una bacteriano fastidiosa que crece tanto en agar chocolate como en agar sangre, dando una morfologa colonialsimilar a las de Neisseria, pero que puede ser fcilmente diferenciada de las especies de Neisseriamediante la prueba de ADNasa.

Cuadro 4. Caractersticas de N. gonorrhoeae, N. meningitidis, M catarrhalis y K denitrificans.

Caracterstica N meningitidis M. catarrhalis K. denitrificans N. gonorrhoeae

Crecimiento enagar sangre

V1 + +

Morfologa colonialen agar chocolate

Beige a gris,transparente, lisa,1-3 mm

Rosada,opaca, seca, 1-3 mm

Beige a gris,transparente, lisa,1-2 mm

Beige a gris,transparente, lisa,0.5 - 1mm

cido a partir de:

Glucosa + + +

Maltosa +

Lactosa

Sacarosa

Fructosa Reduccin denitratos

+

ADNasa +

V, variable.




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DIA 1Neisseria

Entrega de cultivos. Describir la morfologa colonial. Realizar frotis y tincin de Gram. Describir la morfologa microscpica. Sembrar la bacteria en una placa de agar chocolate y en una placa de agar sangre.

Incubar las placas por 18-24 horas a 35-37oC en atmsfera con 5-8% CO2.

La susceptibilidad a los antimicrobianos se puede determinar tambin por la prueba de difusin endisco u obtenerse las CIM con Etest (AB Biodisk). Este documento presenta los mtodos para laspruebas de susceptibilidad de N. gonorrhoeae a los antimicrobianos con los antibiticosrecomendados comnmente por la OMS para el tratamiento primario de la infeccin: ciprofloxacino,azitromicina, ceftriaxona,cefixima y espectinomicina [OMS 2001].

DIA 2Neisseria

1 Describir la morfologa colonial.2 Realizar frotis y tincin de Gram.3 Describir la morfologa microscpica.4 Realizar la prueba de catalasa.



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56 Realizar la prueba de oxidasa.



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FERMENTACION DE CARBOHIDRATOS


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PRUEBA DE LA ENZIMA SUSTRATO


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ESQUEMAS DE IDENTIFICACION


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REFERENCIAS-MS INFORMACION: Myndi, Perrilla,Manual de Laboratorio para la Identificacin y Prueba de Susceptibilidad a los

Antimicrobianos de Patgenos Bacterianos de Importancia para la Salud Pblica en el Mundoen Desarrollo,2002.

Rojas, Norma, Bacteriologa clnica,2006, facultad de microbiologa, Universidad de costa rica.


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