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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
CATEDRA DE FISIOLOGIA ANIMAL
Informe de Práctica de Laboratorio:
DETERMINACIÓN DE LA DIURESIS
OSMÓTICA EN RATAS ALBINAS A
CONCENTRACIONES HIPOTÓNICAS,
ISOTÓNICAS E HIPERTÓNICAS
Docente: FELIX CASTILLO VIERA
2012
INTRODUCCION
Diuresis osmótica, es el aumento de la micción debido a la presencia de ciertas
substancias en el líquido filtrado por los riñones (este líquido finalmente se
convierte en orina) 1.
La diuresis osmótica se refiere al aumento de la micción causada por la presencia
de ciertas substancias en los túbulos renales, como la glucosa (azúcar en la
sangre) en cantidades excesivas o medicamentos como el Manitol.
La diuresis, está controlada por la hormona antidiurética (ADH), esta hormona es
segregada por la neurohipófisis y regula la permeabilidad al agua del túbulo
contorneado distal y colector controlando la cantidad de agua que se elimina por la
orina. Cuanto mayor sea el nivel de ADH en la sangre, más permeable será la
pared epitelial del TCD y colector y, por tanto, más agua extraerá de la orina. El
nivel de ADH de la sangre es una función de la presión osmótica del plasma.
Neuronas sensibles a la osmolaridad con cuerpos celulares localizados en el
hipotálamo responden a un aumento de la osmolaridad con cuerpos celulares
localizados en el hipotálamo responden a un aumento de la osmolaridad del
plasma con una mayor frecuencia de descarga. Son células neurosecretoras que
envían sus axones a la neurohipófisis, la mayor actividad neural de estas células
aumenta la tasa de liberación de la ADH a la sangre a partir de sus terminales
axónicos, incrementando así el nivel sanguíneo de ADH3.
Así si la osmolaridad de la sangre aumenta como resultado de una deshidratación,
la actividad de las neuronas neurosecretoras se incrementa, se libera más ADH,
los túbulos renales TCP y TC se vuelven más permeables y el agua se extrae
osmóticamente de la orina a una tasa mayor. Así la excreción de la orina es más
concentrada, es decir, hipertónica.
La formación de orina diluida o hipotónica, se produce por una mayor reabsorción
de solutos, además disminuye la secreción de ADH (hormona antidiurética o
vasopresina) lo que determina que las células de la pared del TCD y TC impidan
que el agua abandone el filtrado por osmosis2.
El presente trabajo, tiene como objetivo la determinación de la diuresis osmótica a
concentraciones hipotónicas, isotónicas e hipertónicas en roedores, para la
comprobación del buen funcionamiento de los riñones evaluando la cantidad de
sales que se eliminan.
II. MATERIALES Y METODOS
La Determinación de la diuresis osmótica en ratas albinas a concentraciones
hipotónicas, isotónicas e hipertónicas cada 30 minutos, se realizo en el laboratorio
G-103 de la Escuela de Microbiología y Parasitología de la Universidad Nacional
de Trujillo.
TRABAJO DE LABORATORIO
De una forma completamente al azar, se eligieron tres ratas albinas para la
realización del experimento.
Elegidas las ratas, se procedió a designarles que solución y a que concentración
se le haría tomar. Luego a cada una de ellas y por separado se las peso en una
balanza con el único fin de saber cuánto de volumen de cada solución se les haría
tomar. Para saber cuánto de solución aplicarle a cada roedor, el peso de cada uno
de ellos se multiplico por un 8% que representa a la volemia, es decir, al volumen
de sangre que el corazón expulsa en un minuto.
La rata N°1, pesó 115 gramos, por lo que fue sometida a 9.2 ml. de una solución
HIPOTONICA. La rata N°2, pesó 110 gramos, por lo que fue sometida a 8.8 ml. de
una solución ISOTONICA. La rata N°3, pesó 134.5 gramos, por lo que fue
sometida a 10.76 ml. de una solución HIPERTONICA.
Cada solución se le suministro con el máximo cuidado posible, a cada unidad
experimental (las tres ratas albinas) para que no exista algún contratiempo que
conllevase a algún edema pulmonar.
Cada roedor, fue colocado (con sus jaulas para evitar que puedan escapar) en un
embudos grande sostenido por un trípode. Al final del tubo del embudo, se coloco
un pequeño beaker para recoger la orina eliminada por el roedor. Durante los
próximos 30, 60 y 90 minutos se realizo el recojo y medición de volumen de la
orina de cada rata albina; así como la medición de su grado de acidez o
alcalinidad (pH) y de sus concentraciones de cloruro de sodio (NaCl).
Con una cinta indicadora de pH se midió el grado de acidez o alcalinidad y
mediante el test de fantus se midió la concentración de cloruro de sodio, el cual
consiste en aplicar a 10 gotas de orina, 1gota de cromato de potasio como
indicador y como agente titulante nitrato de plata, endonde las gotas gastadas en
la titulación representa el numero de gramos de NaCl por Litro de orina (el color
debe virar de amarillo a bruño o blanco).
III. RESULTADOS
Cuadro N° 01: Determinación de la diuresis osmótica en ratas a concentración
hipotónica, isotónica e hipertónica, respectivamente, cada 30, 60 y
90 minutos en ratas albinas de laboratorio.
GRUPO DE
ANIMALES
DIURESIS PARCIAL
DIURESIS
ACUMULATIVA
30 minutos 60 minutos 90 minutos
Volumen
(ml.)pH
[NaCl]
g/L
Volumen
(ml.)pH
[NaCl]
g/L
Volumen
(ml.)pH
[NaCl]
g/L
HIPOTONICA 0.4 5 2 1.5 7 2 0.5 7 0 2.4
ISOTONICA 0 0 0 1.3 6 11 1.1 6 9 2.4
HIPERTONICA 0 0 0 0.8 5.5 12 1 5.5 12 1.8
IV. DISCUSION
El pH de la orina suele fluctuar entre 4,6 y 8,0 con un promedio de 6,0.
Normalmente el cuerpo de un mamífero elimina en la orina de 5 a 8 g/L de NaCl.
La ingestión de una solución con bajos contenidos de sales (Hipotónica), produce
una mayor reabsorción de solutos y una mayor eliminación de agua, disminuyendo
la secreción de ADH, lo cual da la formación de orina diluida o hipotónica (Niveles
muy bajos de NaCl)
La ingestión de una solución con altos contenidos de sales (Hipertónica), produce
que la osmolaridad de la sangre aumente como resultado de la deshidratación, lo
que hace que se libera más ADH y se produzca una mayor reabsorción de agua y
una mayor eliminación de solutos . Así la excreción de la orina es más
concentrada, es decir, hipertónica.
A los primeros 30 minutos, se observo que la rata N°1, elimino 0.4 ml. de orina con
un pH de 5 y una concentración de NaCl de 2 g/L. La rata N°2, no elimino orina,
por lo que se obvio la media de pH y concentración de NaCl. La rata N°3, no
elimino orina, por lo que también se obvio la media de pH y concentración de
NaCl.
A los 60 minutos la rata N°1 elimino aun más orina de la que había eliminado
anteriormente (1.5 ml.), cuyo pH aumento a 7. La rata N°2 elimino 1.3 ml. de orina
con un pH de 6. La rata N°3 elimino 0.8 ml. de orina con un pH de 5.5.
Y a los 90 minutos La rata N°1 elimino 0.5 ml. de orina con un pH de 7. La rata
N°2 elimino 1.1 ml. de orina con un pH de 6. La rata N°3 elimino 1 ml. de orina con
un pH de 5.5.
V. CONCLUSIÓN
Cada vez que se ingiere soluciones con bajos contenidos de sales como NaCl, se
producirá una diuresis hipotónica con un pH menor que 6.0 y una concentración
de NaCl menor que el rango (5 a 8 g/L). El volumen de orina será menor.
Y cada vez que se ingiere soluciones con altos contenidos de sales como NaCl, se
producirá una diuresis hipertónica con un pH mayor que 6.0 y una concentración
de NaCl mayor que el rango (5 a 8 g/L). El volumen de orina será mayor.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍCAS
1. http://diccionario.medciclopedia.com/s/2008/osmolaridad-diuresis/.
2. Teresa Audesirk - Gerald Audesir, Biología La Vida En La Tierra, 6° edición,
Editorial Pretince Hall, México 2003, Pg. (776,777 y 782).
3. Tortora – Derrickson, Principios de anatomía y Fisiología, 11° edición,
Editorial Medica Panamericana, México marzo del 2007, Pg. (1003 y 1004).
ANEXOS
Imagen 01: Designación de la solución hipotónica, isotónica y e hipertónica a cada
rata albina.
Imagen 03: Solución hipotónica, isotónica y e hipertónica.
Imagen 05: Sistema completo de la determinación de la diuresis osmótica.
Imagen 06: Determinación del volumen de la orina.
Imagen 08: Determinación de gramos de NaCl por litro de orina, mediante el test
de fantus.