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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS CATEDRA DE FISIOLOGIA ANIMAL Informe de Práctica de Laboratorio: DETERMINACIÓN DE LA DIURESIS OSMÓTICA EN RATAS ALBINAS A CONCENTRACIONES HIPOTÓNICAS, ISOTÓNICAS E HIPERTÓNICAS Docente: FELIX CASTILLO VIERA

Informe de Diuresis en Ratas

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Page 1: Informe de Diuresis en Ratas

UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS

CATEDRA DE FISIOLOGIA ANIMAL

Informe de Práctica de Laboratorio:

DETERMINACIÓN DE LA DIURESIS

OSMÓTICA EN RATAS ALBINAS A

CONCENTRACIONES HIPOTÓNICAS,

ISOTÓNICAS E HIPERTÓNICAS

Docente: FELIX CASTILLO VIERA

2012

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INTRODUCCION

Diuresis osmótica, es el aumento de la micción debido a la presencia de ciertas

substancias en el líquido filtrado por los riñones (este líquido finalmente se

convierte en orina) 1.

La diuresis osmótica se refiere al aumento de la micción causada por la presencia

de ciertas substancias en los túbulos renales, como la glucosa (azúcar en la

sangre) en cantidades excesivas o medicamentos como el Manitol.

La diuresis, está controlada por la hormona antidiurética (ADH), esta hormona es

segregada por la neurohipófisis y regula la permeabilidad al agua del túbulo

contorneado distal y colector controlando la cantidad de agua que se elimina por la

orina. Cuanto mayor sea el nivel de ADH en la sangre, más permeable será la

pared epitelial del TCD y colector y, por tanto, más agua extraerá de la orina. El

nivel de ADH de la sangre es una función de la presión osmótica del plasma.

Neuronas sensibles a la osmolaridad con cuerpos celulares localizados en el

hipotálamo responden a un aumento de la osmolaridad con cuerpos celulares

localizados en el hipotálamo responden a un aumento de la osmolaridad del

plasma con una mayor frecuencia de descarga. Son células neurosecretoras que

envían sus axones a la neurohipófisis, la mayor actividad neural de estas células

aumenta la tasa de liberación de la ADH a la sangre a partir de sus terminales

axónicos, incrementando así el nivel sanguíneo de ADH3.

Así si la osmolaridad de la sangre aumenta como resultado de una deshidratación,

la actividad de las neuronas neurosecretoras se incrementa, se libera más ADH,

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los túbulos renales TCP y TC se vuelven más permeables y el agua se extrae

osmóticamente de la orina a una tasa mayor. Así la excreción de la orina es más

concentrada, es decir, hipertónica.

La formación de orina diluida o hipotónica, se produce por una mayor reabsorción

de solutos, además disminuye la secreción de ADH (hormona antidiurética o

vasopresina) lo que determina que las células de la pared del TCD y TC impidan

que el agua abandone el filtrado por osmosis2.

El presente trabajo, tiene como objetivo la determinación de la diuresis osmótica a

concentraciones hipotónicas, isotónicas e hipertónicas en roedores, para la

comprobación del buen funcionamiento de los riñones evaluando la cantidad de

sales que se eliminan.

II. MATERIALES Y METODOS

La Determinación de la diuresis osmótica en ratas albinas a concentraciones

hipotónicas, isotónicas e hipertónicas cada 30 minutos, se realizo en el laboratorio

G-103 de la Escuela de Microbiología y Parasitología de la Universidad Nacional

de Trujillo.

TRABAJO DE LABORATORIO

De una forma completamente al azar, se eligieron tres ratas albinas para la

realización del experimento.

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Elegidas las ratas, se procedió a designarles que solución y a que concentración

se le haría tomar. Luego a cada una de ellas y por separado se las peso en una

balanza con el único fin de saber cuánto de volumen de cada solución se les haría

tomar. Para saber cuánto de solución aplicarle a cada roedor, el peso de cada uno

de ellos se multiplico por un 8% que representa a la volemia, es decir, al volumen

de sangre que el corazón expulsa en un minuto.

La rata N°1, pesó 115 gramos, por lo que fue sometida a 9.2 ml. de una solución

HIPOTONICA. La rata N°2, pesó 110 gramos, por lo que fue sometida a 8.8 ml. de

una solución ISOTONICA. La rata N°3, pesó 134.5 gramos, por lo que fue

sometida a 10.76 ml. de una solución HIPERTONICA.

Cada solución se le suministro con el máximo cuidado posible, a cada unidad

experimental (las tres ratas albinas) para que no exista algún contratiempo que

conllevase a algún edema pulmonar.

Cada roedor, fue colocado (con sus jaulas para evitar que puedan escapar) en un

embudos grande sostenido por un trípode. Al final del tubo del embudo, se coloco

un pequeño beaker para recoger la orina eliminada por el roedor. Durante los

próximos 30, 60 y 90 minutos se realizo el recojo y medición de volumen de la

orina de cada rata albina; así como la medición de su grado de acidez o

alcalinidad (pH) y de sus concentraciones de cloruro de sodio (NaCl).

Con una cinta indicadora de pH se midió el grado de acidez o alcalinidad y

mediante el test de fantus se midió la concentración de cloruro de sodio, el cual

consiste en aplicar a 10 gotas de orina, 1gota de cromato de potasio como

Page 5: Informe de Diuresis en Ratas

indicador y como agente titulante nitrato de plata, endonde las gotas gastadas en

la titulación representa el numero de gramos de NaCl por Litro de orina (el color

debe virar de amarillo a bruño o blanco).

III. RESULTADOS

Cuadro N° 01: Determinación de la diuresis osmótica en ratas a concentración

hipotónica, isotónica e hipertónica, respectivamente, cada 30, 60 y

90 minutos en ratas albinas de laboratorio.

GRUPO DE

ANIMALES

DIURESIS PARCIAL

DIURESIS

ACUMULATIVA

30 minutos 60 minutos 90 minutos

Volumen

(ml.)pH

[NaCl]

g/L

Volumen

(ml.)pH

[NaCl]

g/L

Volumen

(ml.)pH

[NaCl]

g/L

HIPOTONICA 0.4 5 2 1.5 7  2 0.5 7 0 2.4

ISOTONICA 0 0 0 1.3 6 11 1.1 6 9 2.4

HIPERTONICA 0 0 0 0.8 5.5 12 1 5.5 12 1.8

IV. DISCUSION

El pH de la orina suele fluctuar entre 4,6 y 8,0 con un promedio de 6,0.

Normalmente el cuerpo de un mamífero elimina en la orina de 5 a 8 g/L de NaCl.

La ingestión de una solución con bajos contenidos de sales (Hipotónica), produce

una mayor reabsorción de solutos y una mayor eliminación de agua, disminuyendo

la secreción de ADH, lo cual da la formación de orina diluida o hipotónica (Niveles

muy bajos de NaCl)

Page 6: Informe de Diuresis en Ratas

La ingestión de una solución con altos contenidos de sales (Hipertónica), produce

que la osmolaridad de la sangre aumente como resultado de la deshidratación, lo

que hace que se libera más ADH y se produzca una mayor reabsorción de agua y

una mayor eliminación de solutos . Así la excreción de la orina es más

concentrada, es decir, hipertónica.

A los primeros 30 minutos, se observo que la rata N°1, elimino 0.4 ml. de orina con

un pH de 5 y una concentración de NaCl de 2 g/L. La rata N°2, no elimino orina,

por lo que se obvio la media de pH y concentración de NaCl. La rata N°3, no

elimino orina, por lo que también se obvio la media de pH y concentración de

NaCl.

A los 60 minutos la rata N°1 elimino aun más orina de la que había eliminado

anteriormente (1.5 ml.), cuyo pH aumento a 7. La rata N°2 elimino 1.3 ml. de orina

con un pH de 6. La rata N°3 elimino 0.8 ml. de orina con un pH de 5.5.

Y a los 90 minutos La rata N°1 elimino 0.5 ml. de orina con un pH de 7. La rata

N°2 elimino 1.1 ml. de orina con un pH de 6. La rata N°3 elimino 1 ml. de orina con

un pH de 5.5.

V. CONCLUSIÓN

Page 7: Informe de Diuresis en Ratas

Cada vez que se ingiere soluciones con bajos contenidos de sales como NaCl, se

producirá una diuresis hipotónica con un pH menor que 6.0 y una concentración

de NaCl menor que el rango (5 a 8 g/L). El volumen de orina será menor.

Y cada vez que se ingiere soluciones con altos contenidos de sales como NaCl, se

producirá una diuresis hipertónica con un pH mayor que 6.0 y una concentración

de NaCl mayor que el rango (5 a 8 g/L). El volumen de orina será mayor.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFÍCAS

1. http://diccionario.medciclopedia.com/s/2008/osmolaridad-diuresis/.

2. Teresa Audesirk - Gerald Audesir, Biología La Vida En La Tierra, 6° edición,

Editorial Pretince Hall, México 2003, Pg. (776,777 y 782).

3. Tortora – Derrickson, Principios de anatomía y Fisiología, 11° edición,

Editorial Medica Panamericana, México marzo del 2007, Pg. (1003 y 1004).

ANEXOS

Page 8: Informe de Diuresis en Ratas

Imagen 01: Designación de la solución hipotónica, isotónica y e hipertónica a cada

rata albina.

Imagen 03: Solución hipotónica, isotónica y e hipertónica.

Imagen 05: Sistema completo de la determinación de la diuresis osmótica.

Page 9: Informe de Diuresis en Ratas

Imagen 06: Determinación del volumen de la orina.

Imagen 08: Determinación de gramos de NaCl por litro de orina, mediante el test

de fantus.