Introduccion a La Microscopia Optica

7/23/2019 Introduccion a La Microscopia Optica

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ING. JUAN JOS GONZLEZ GUILLN

INGENIERA EN MATERIALES

UNIDAD 1:

MICROSCOPAPTICA


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1 MICROSCOPA PTICA

OBJETIVO: El estudiante conocer los principios de formacin de imgenes en el

microscopio ptico, sus principales componentes y sus aplicaciones para ladeterminacin de la microestructura.

1.1 Principios de formacin de imgenes.

1.2 Partes y funcionamiento del microscopio ptico.

1.3 Mtodos de iluminacin.

1.4 Preparacin de muestras.

1.5 Interpretacin de microestructuras.

1. 6 Analsis de imgenes.


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1.1 PRINCIPIOS BSICOS DE FORMACIN DE IMGENES


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Tipos demicroscopios

Microscopioptico

Microscopioelectrnico

Microscopioptico Simple

Microscopio

pticoCompuesto

M.O. Normal

Campo oscuroContraste de fasesFluorescencia

TransmisinBarridoDigitalEfecto tnel o cuntico

Lupa


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Anillo de ajustede los oculares

Tornillo quepermite mover

el cabezal

Tornillosreguladores de

la platina

Tornillos del

condensador

Palanca decierre deldiafragma


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Tornillomicromtrico

Tornillomacromtrico

Freno


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Beam

splitter

camera

Reflected light

Transmitted light
http://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.htmlhttp://micro.magnet.fsu.edu/primer/anatomy/componenthome.html


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Lamparay Condensador: projectan un haz deluz paralelo hacia la probeta para iluminacin

Platina portamuestrascon movimiento X-Y:

la muestra es colocada sobre la platina y asdiferentes partes de la probeta puedenobservarse debido a la capacidad de movimientoen direcciones X-Y.

Botones de enfoque: desde que la distanciaentre el objetivo y el ocular es fijada, el enfoquese logra mediante el movimiento relativo de laprobeta hacia los lentes objetivos.


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Estn colocados enel revolver

Tienen un sistema

de amortiguacin Un anillo coloreado

indica los aumentos Son de 4, 10, 40 y

100 (inmersin)aumentos


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Azul40x

Amarillo10x

Rojo

4x

Blanco100x

Amortiguacin


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Objective specifications

Objectives are the most important components of alight microscope: image formation, magnification, thequality of imagesand the resolutionof the microscope

Anatomy of an objective

ricalture

dmin= 0.61 /NA


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Ajuste de la distanciainterpupilar

Oculares


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(Diaphragm)

Eyepieces (Oculars) work in combination with microscopeobjectives to further magnifythe intermediate image

M=(L/fo)(25/fe)


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Aumento Poder de

resolucin N de campo Profundidad de

foco Contraste


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Se calculamultiplicando

el aumentodel objetivo

por elaumento delocular


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Distancia si dospuntos sedistinguen

Mayor, cuandomenor es lalongitud de onda

Mayor, cuanto mas

grande es laapertura numrica

Mayor, con aceitede cedro


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Es eldimetro de

la imagenobservada atravs del

ocular,expresado enmilmetros


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Microscopa de campo oscuroLa luz se hace incidir muy oblicuamente sobre la preparacin.Los rayos que la atraviesan , pero que siguen ms o menos la trayectoria inicial,

no son recogidos por el objetivo.Slo la luz que es difractada por el objeto, o que el objeto refleja casualmente,llega al objetivo.De esta manera la imagen del objeto aparece como puntos luminosos sobre unfondo oscuro.

MTODOS DE ILUMINACIN

Microscopa de polarizacin

La finalidad es conseguir contrastar las diferentes estructuras observadasaprovechando que entre ellas pueda haber alguna que sea capaz de cambiar elplano de polarizacin de la luz, es decir, que haya alguna sustancia birrefringente.

Microscopa de contraste de fases

El contraste de fases bsicamente es un mtodo de iluminacin que trata unadeterminada porcin de la luz (la que ha sufrido difraccin al atravesar el objeto) deforma diferente al resto (la que no ha sufrido ninguna alteracin) para, acontinuacin, provocar que la primera porcin de la luz interfiera con el resto, demanera que resulte una imagen visible de una muestra transparente.


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Condenser annulus allows only ring of light to reach thecondenser.

Light rays illuminating the sample but not interacting with it willgo straight through and be imaged along a ring at the back focalplane of the objective

Light rays diffracted by the sample are phase shifted by aapproximately a quarter wavelength and will be scattered over arange of angles and will generally not propagate in the exactforward direction

A phase plate at the back focal plane of the objective altersselectively the phase and magnitude of the non-diffracted wave.

http://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htm (reference)l

Phase

plate

http://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.html (ex)
http://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.htmlhttp://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htmhttp://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.htmlhttp://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htmhttp://www.microscopyu.com/tutorials/java/phasecontrast/positivenegative/index.htmlhttp://www.microscopyu.com/articles/phasecontrast/phasemicroscopy.htm


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AplicacionesSegn el tipo de iluminacin:De campo oscuro:Est especialmente indicada para muestras con poco contraste , y observar losrelieves superficiales en una probeta.

Luz polarizada:Aplicaciones geolgicas, principalmente para el estudio de minerales ensecciones rocosas delgadas.Minerales naturales e industriales, materiales compuestos tales como

cementos, cermicas, fibras minerales y polmeros.Identificacin de fibras de asbestos, estudio de la formacin rocosa, polmerosnaturales y sintticos, fibras de nylon, etc

De Contraste de fases

Aplicaciones qumicas e industriales: mineraloga, cristalografa y morfologa depolmeros.Microcristales sin color, polvo, partculas slidas y polmeros cristalinos que tienenun ndice de refraccin que difiere slo ligeramente del medio de Inmersin.

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