Las bacterias gram-positivas y gram-negativas tien de forma distinta debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes celulares. La pared de la clula bacteriana sirve para dar su tamao y forma al organismo as como para prevenir la lisis osmtica. El material de la pared celular bacteriana que confiere rigidez es el peptidoglicano. La pared de la clula gram-positiva es gruesa y consiste en varias capas interconectadas de peptidoglicano as como algo de cido teicoico. Generalmente, 80%-90% de la pared de la clula gram-positiva es peptidoglicano. La pared de la clula gram-negativa, por otro lado, contiene una capa mucho ms delgada, nicamente de peptidoglicano y est rodeada por una membrana exterior compuesta de fosfolpidos, lipopolisacridos, y lipoprotenas. Slo 10% - 20% de la pared de la clula gram-negativa es peptidoglicano.

Las clulas fijadas al calor sobre un portaobjetos se tien, primero con una solucin de cristal violeta (otros colorantes bsicos no son tan efectivos) y son lavadas despus para quitar el exceso de colorante. En este estado, todas las clulas, tanto las grampositivas como las gramnegativas, estn teidas de azul. El portaobjetos se cubre entonces con una solucin de yodo-yoduro potsico. El ingrediente activo es aqu el I2; el KI simplemente hace soluble el I2 en agua. El I2 entra en las clulas y forma un complejo insoluble en agua con el cristal violeta. De nuevo tanto las clulas grampositivas como las gramnegativas se encuentran en la misma situacinSe lleva a cabo despus la decoloracin, usando una mezcla de alcohol-acetona, sustancias en las que es soluble el complejo I2-cristal violeta. Algunos organismos (grampositivos) no se decoloran, mientras que otros (gramnegativos) lo hacen. La diferencia esencial entre esos dos tipos de clulas est por tanto en su resistencia a la decoloracin; esta resistencia se debe probablemente al hecho de que en el caso de bacterias gram-negativas, la mezcla de alcohol/acetona es un solvente lipdico y disuelve la membrana exterior de la pared de la clula (y tambin puede daar la membrana citoplsmica a la que se une peptidoglicano). La delgada capa de peptidoglicano es incapaz de retener el de complejo cristal violeta-yodo y la clula se decolora. Las clulas grampositivas, a causa de sus paredes celulares ms espesas (tienen ms peptidoglicano y menos lpido), no son permeables al disolvente, provocando que el de complejo cristal violeta-yodo quede atrapado dentro de la pared celular. Despus de la decoloracin las clulas grampositivas son todava azules, pero las gramnegativas son incoloras. Para poner de manifiesto las clulas gramnegativas se utiliza una coloracin de contraste. Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina bsica. Despus de la coloracin de contraste las clulas gramnegativas son rojas, mientras que las grampositivas permanecen azules.

S.AUREUSLas colonias deS.aureusson grandes, lisas, enteras, presentan consistencia cremosa. Las colonias formadas porS.aureussuelen estarpigmentadascon colores que van delgris alamarillo onaranja en condiciones anaerobias o en caldos no produce pigmentoStaphylococcus aureuses unabacteria anaerobia facultativa,grampositiva productora decoagulasa,catalasa, inmvil y noesporulada.

E.coliEs un bacilo que reacciona negativamente a latincin de Gram(gramnegativo), esanaerobi facultativo , no formaesporas, es capaz defermentarlaglucosay lalactosa.Las colonias redondas mantienen tanto un margen entero (es decir, continuo, liso) como una superficie suave. muestran una forma de elevacin bsica y convexa, las colonias son de uncolorrojo, prpura,amarilloo incluso negro.

Rhodotorula Las colonias de color rojo-anaranjado o naranja, de aspecto cremoso o rugoso, son caractersticas de las especies del gnero Rhodotorula , color que manifiestan estas levaduras por su riqueza en carotenoides.

Tincin de azul algodn de lactofenol Se deben utilizar tinciones que logren preservar la integridad de las estructuras fngicas. es necesario observar las estructuras fngicas con una alta calidad y contraste; para ello se utilizan diversos compuestos qumicos que permitan la tincin entre la pared y el citoplasma de las clulas fngicas. La tincin de azul algodn de lactofenol no es considerada una tincin diferencial, sin embargo, posee caractersticas tintoriales que permiten observar cada uno de los componentes fngicos y apreciar fcilmente las estructuras para una adecuada identifi cacin. El fenol inactiva las enzimas lticas de la clula e impide que sta se rompa; de igual forma, destruye la flora acompaante e inactiva a la clula, quitndole el grado de patogenicidad; adems, acta como mordiente cuando se usa en combinacin con colorantes. El cido lctico preserva las estructuras fngicas al provocar un cambio de gradiente osmtico con relacin al interior fngico, lo que genera una pelcula protectora. El azul de algodn es un colorante cido, que tie el citoplasma y la quitina presente en las clulas fngicas, mientras que el glicerol mantiene hmeda la preparacin. CONCLUSIONES

LAS TINCIONES Permiten hacer visibles los objetos microscpicos y transparentes; Revelan su forma y tamao; Muestran la presencia de estructuras internas y externas y Producen reacciones qumicas especfi cas.la composicin qumica y el contenido de peptidoglicano en la pared celular de las bacterias Gram negativas y Gram positivas explica la coloracion que toma cada una.Los metodos antisepticos se utilizan sobre superficies vivas y los metodos de desinfeccion se usan sobre superficies inertes.