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Dirección General de Epidemiología
Instituto de Diagnóstico y referencia Epidemiológicos“Dr. Manuel Martínez Báez”
lineamientos para la vigilancia entomológicapor laboratorio
Entomología–RNLSP/InDRE Página 1 de 80 Versión No.01
LINEAMIENTOS PARA LA VIGILANCIA
ENTOMOLÓGICA POR LABORATORIO
DGE-InDRE–RNLSP
2015
Fotografía de la portada propiedad de HKS Arquitectos
Entomología–RNLSP/InDRE Página 2 de 80 Versión No.01
PRIMERA EDICIÓN, 2015
ENTOMOLOGÍA–RNLSP ESTE DOCUMENTO FUE AVALADO POR LOS REPRESENTANTES DE LAS INSTITUCIONES QUE
CONFORMAN EL GRUPO TÉCNICO INTERINSTITUCIONAL DEL COMITÉ NACIONAL DE
VIGILANCIA EPIDEMIOLÓGICA (CONAVE). TODOS LOS DERECHOS RESERVADOS CONFORME A LA LEY, © INDRE-DGE-SECRETARÍA DE SALUD SE PERMITE LA REPRODUCCIÓN TOTAL O PARCIAL SI SE CITA LA FUENTE: “LINEAMIENTOS
PARA LA VIGILANCIA ENTOMOLÓGICA POR LABORATORIO” VERSIÓN NO. 01. INDRE, 2015. COLECCIÓN PUBLICACIONES TÉCNICAS DEL INDRE: ISBN: EN PROCESO INSTITUTO DE DIAGNÓSTICO Y REFERENCIA EPIDEMIOLÓGICOS DR. MANUEL MARTÍNEZ
BÁEZ. FRANCISCO P MIRANDA 177, COL. LOMAS DE PLATEROS DEL. ÁLVARO OBREGÓN, C. P. 01480, MÉXICO, D. F. TEL. (55)53-42-75-50 www.indre.salud.gob.mx LA EDICIÓN ESTUVO A CARGO DE: DR. JOSÉ ALBERTO DÍAZ QUIÑONEZ EL DISEÑO ESTUVO A CARGO DE: LIC. BRENDA ESCOBEDO LÓPEZ IMPRESO EN MÉXICO. PRINTED IN MEXICO
Entomología–RNLSP/InDRE Página 3 de 80 Versión No.01
SECRETARÍA DE SALUD
DRA. MERCEDES JUAN LÓPEZ SECRETARIA DE SALUD
DR. EDUARDO GONZÁLEZ PIER
SUBSECRETARIO DE INTEGRACIÓN Y DESARROLLO DEL SECTOR SALUD
DR. PABLO ANTONIO KURI MORALES SUBSECRETARIO DE PREVENCIÓN Y PROMOCIÓN DE LA SALUD
LIC. MARCELA GUILLERMINA VELASCO GONZÁLEZ
SUBSECRETARIA DE ADMINISTRACIÓN Y FINANZAS
DR. GABRIEL O´SHEA CUEVAS COMISIONADO NACIONAL DE PROTECCIÓN SOCIAL EN SALUD
LIC. MIKEL ARRIOLA PEÑALOZA
COMISIONADO FEDERAL DE PROTECCIÓN CONTRA RIESGOS SANITARIOS
DR. JOSÉ MELJEM MOCTEZUMA COMISIONADO NACIONAL DE ARBITRAJE MÉDICO
DR. GUILLERMO MIGUEL RUIZ-PALACIOS Y SANTOS
TITULAR DE LA COMISIÓN COORDINADORA DE INSTITUTOS NACIONALES DE SALUD Y
HOSPITALES DE ALTA ESPECIALIDAD
LIC. RODRIGO REINA LICEAGA TITULAR DE LA UNIDAD COORDINADORA DE VINCULACIÓN Y PARTICIPACIÓN SOCIAL
DR. NELLY AGUILERA ABURTO
TITULAR DE LA UNIDAD DE ANÁLISIS ECONÓMICO
LIC. CARLOS SANDOVAL LEYVA DIRECTOR GENERAL DE COMUNICACIÓN SOCIAL
DR. JESÚS FELIPE GONZÁLEZ ROLDAN
DIRECTOR GENERAL DEL CENTRO NACIONAL DE PROGRAMAS PREVENTIVOS Y CONTROL
DE ENFERMEDADES
DR. EDUARDO JARAMILLO NAVARRETE DIRECTOR GENERAL DE PROMOCIÓN DE LA SALUD
DR. CUITLÁHUAC RUIZ MATUS
DIRECTOR GENERAL DE EPIDEMIOLOGÍA
Entomología–RNLSP/InDRE Página 4 de 80 Versión No.01
LIC. JUAN CARLOS REYES OROPEZA DIRECTOR GENERAL DE INFORMACIÓN EN SALUD
Entomología–RNLSP/InDRE Página 5 de 80 Versión No.01
INSTITUTO DE DIAGNÓSTICO Y REFERENCIA EPIDEMIOLÓGICOS
DR. MANUEL MARTÍNEZ BÁEZ
DR. JOSÉ ALBERTO DÍAZ QUIÑONEZ
DIRECTOR GENERAL ADJUNTO
BIOL. IRMA LÓPEZ MARTÍNEZ
DIRECTORA DE DIAGNÓSTICO Y REFERENCIA
QFB. LUCÍA HERNÁNDEZ RIVAS
DIRECTORA DE SERVICIOS Y APOYO TÉCNICO
LIC. ADRIANA CASTRO CABRERA
SUBDIRECTORA DE OPERACIÓN
BIOL. NORMA ANGÉLICA MONTES COLIMA
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE BACTERIOLOGÍA
QBP. IRMA HERNÁNDEZ MONROY
ASESORA TÉCNICA DE LA DIRECCIÓN
M. EN C. BELÉN TORRES LONGORIA
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE VIROLOGÍA
QFB. ROBERTO VÁZQUEZ CAMPUZANO
JEFE DEL DEPARTAMENTO DE ENFERMEDADES EMERGENTES Y URGENCIAS
M. EN C. JUAN CARLOS CARPIO PEDROZA
JEFE DEL DEPARTAMENTO DE PARASITOLOGÍA
DRA. CLARA GORODEZKY LAUFERMAN
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE INMUNOLOGÍA
M. EN C. JUDITH ESTEVEZ RAMÍREZ
JEFA DEL DEPARTAMENTO DE CONTROL DE MUESTRAS Y SERVICIOS
DR. JOSÉ ERNESTO RAMÍREZ GONZÁLEZ
JEFE DEL DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA MOLECULAR Y VALIDACIÓN DE TÉCNICAS
Entomología–RNLSP/InDRE Página 6 de 80 Versión No.01
M. EN C. HERÓN HUERTA
JEFE DEL LABORATORIO DE ENTOMOLOGÍA
COORDINADOR DE LA RED DE DIAGNÓSTICO DE ENTOMOLOGÍA
Entomología–RNLSP/InDRE Página 7 de 80 Versión No.01
GRUPO DE TRABAJO
M. EN C. HERÓN HUERTA
JEFE DEL LABORATORIO DE ENTOMOLOGÍA
COORDINADOR DE LA RED DE DIAGNÓSTICO DE ENTOMOLOGÍA
BIOL. JUAN LUIS TÉLLEZ RENDÓN
BIOL. MARIO OCTAVIO GONZÁLEZ ROSALES
BIOL. BEATRIZ SALCEDA SÁNCHEZ
BIOL. MARÍA VIANEY VIDAL ACOSTA
BIOL. CRESCENCIO PÉREZ RENTERÍA
BIOL. JOSÉ ORDÓÑEZ ÁLVAREZ
ADSCRITOS AL LABORATORIO DE ENTOMOLOGÍA
QFB. LUCÍA HERNÁNDEZ RIVAS
DIRECTORA DE SERVICIOS Y APOYO TÉCNICO
DR. HUGO MARTÍNEZ ROJANO
ASESOR TÉCNICO DE LA DIRECCIÓN GENERAL ADJUNTA DEL INDRE
COORDINADOR DE MEDICINA LABORAL
DR. JOSÉ ALBERTO DÍAZ QUIÑONEZ
DIRECTOR GENERAL ADJUNTO
Entomología–RNLSP/InDRE Página 8 de 80 Versión No.01
ÍNDICE
INTRODUCCIÓN ............................................................................................................ 10
ANTECEDENTES DE LA RNLSP PARA EL DIAGNÓSTICO DE ENTOMOLOGÍA ...... 11
RED NACIONAL DE LABORATORIOS PARA LA VIGILANCIA ENTOMOLÓGICA ... 12
MARCO LEGAL ............................................................................................................... 14
OBJETIVO GENERAL .................................................................................................... 14
OBJETIVOS ESPECÍFICOS ................................................................................................... 14
ORGANIZACIÓN DE LA RED NACIONAL DE LABORATORIOS DE
ENTOMOLOGÍA ............................................................................................................. 15
FUNCIONES DEL LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA .............................. 16
FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS ESTATALES DE SALUD PÚBLICA ............... 17
DEFINICIONES OPERATIVAS MUESTRAS ENTOMOLÓGICAS................................ 18
TOMA, MANEJO Y ENVÍO DE MUESTRAS ................................................................. 24
TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS .......................................................................................... 24
1. ENTOMOLOGÍA-ENFERMEDAD DE CHAGAS ............................................ 24
Toma, manejo y envío de muestras ....................................................................................... 25
Interpretación de resultados por el laboratorio .................................................................. 28
Xenodiagnóstico ....................................................................................................................... 29
2. ENTOMOLOGÍA-MOSQUITOS DE IMPORTANCIA MÉDICA ................ 32
Toma, manejo y envío de muestras ....................................................................................... 33
Ovitrampas ............................................................................................................................... 36
ALGORITMOS ................................................................................................................ 37
Interpretación de resultados por el laboratorio .................................................................. 40
Determinación taxonómica .................................................................................................... 43
3. ESCORPIONES DE IMPORTANCIA MÉDICA .............................................. 43
Toma, manejo y envío de muestra ......................................................................................... 44
Interpretación de resultados por el laboratorio .................................................................. 46
Determinación taxonómica .................................................................................................... 47
4. OTROS TAXA ............................................................................................................. 48
Toma, manejo y envío de muestras ....................................................................................... 49
Interpretación de resultados por el laboratorio .................................................................. 52
Determinación taxonómica. ................................................................................................... 54
5. ECTOPARÁSITOS DE IMPORTANCIA MÉDICA ......................................... 54
Entomología–RNLSP/InDRE Página 9 de 80 Versión No.01
Toma, manejo y envío de muestras ....................................................................................... 57
Interpretación de resultados por el laboratorio .................................................................. 61
Determinación taxonómica .................................................................................................... 63
ESTÁNDARES DE CALIDAD ......................................................................................... 63
CRITERIO DE EVALUACIÓN ........................................................................................ 65
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES .............................................................................. 67
COLECCIÓN DE ARTROPODOS CON IMPORTANCIA MÉDICA-CAIM .................... 67
Chinches Triatominae ............................................................................................................ 67
Escorpiones ............................................................................................................................... 72
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD .................................................................................... 73
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ............................................................................... 74
Entomología–RNLSP/InDRE Página 10 de 80 Versión No.01
INTRODUCCIÓN
Uno de los objetivos principales de la vigilancia entomológica es llevar acabo el
monitoreo de la distribución y dispersión de las especies de artrópodos con
importancia médica, debido en parte a que varias especies han incrementado su
distribución favorecida por diferentes factores humanos (deforestación, cambio de
uso de suelo, etc.) y ecológicos (v. gr. cambio climático), los cuales han llevado al
establecimiento de vectores en nuevas áreas geográficas del país, algunas de las
cuales pueden considerarse de riesgo, debido a la capacidad de transmisión de los
vectores en las diferentes enfermedades involucradas. Por ello, es indispensable
identificar las especies de vectores, monitorear su distribución actual y establecer
la capacidad vectorial para la prevención de enfermedades transmitidas por
vectores.
Por ello, el Laboratorio de Entomología lleva acabo procedimientos encaminados
al estudio de artrópodos con importancia médica en México, con el objetivo de
obtener diagnósticos estandarizados y con calidad, en apoyo a los programas de
Vigilancia Epidemiológica dirigidos al diagnóstico, control de calidad y referencia
de las muestras entomológicas que se remiten a través de la Red Nacional de
Laboratorios de Salud Pública (RNLSP). Además de desarrollar investigación
básica y aplicada en el campo de la entomología médica, con programas de
capacitación continua y la coordinación de la Red Nacional de Laboratorios de
Salud Pública en el componente de Entomología.
El presente documento establece los lineamientos de operación para la vigilancia
basada en el laboratorio de las enfermedades trasmitidas por vectores, así como la
toma, manejo y envío de muestras, metodología para el análisis de muestras
(métodos tradicionales) y evaluación del desempeño con estándares de calidad.
Antecedentes de la Red Nacional de Laboratorios de Salud Pública La Red Nacional de Laboratorios de Salud Pública (RNLSP) es el conjunto de
laboratorios de vigilancia epidemiológica con objetivos específicos que le han
permitido unificar métodos de diagnóstico, criterios de interpretación de
resultados, transferencia tecnológica, generación de conocimiento y formación de
recursos humanos. Es el soporte técnico-científico útil para la vigilancia
epidemiológica y que genera información de calidad para la toma oportuna de
decisiones a través de la confirmación de diagnósticos mediante estudios de
laboratorio en muestras biológicas.
La RNLSP depende de la Secretaría de Salud y es el Instituto de Diagnóstico y
Referencia Epidemiológicos (InDRE) “Dr. Manuel Martínez Báez” su órgano rector
en el área de vigilancia epidemiológica. Tiene fundamento legal en la Norma Oficial
Mexicana NOM-017-SSA2-2012, Para la vigilancia epidemiológica y está
Entomología–RNLSP/InDRE Página 11 de 80 Versión No.01
conformada por 31 Laboratorios Estatales de Salud Pública (LESP) de las 32
entidades federativas del país (el Distrito Federal envía sus muestras al InDRE).
El Marco Analítico Básico de la RNLSP consta de 27 diagnósticos, distribuidos en
16 redes de vigilancia específica.
ANTECEDENTES DE LA RNLSP PARA EL DIAGNÓSTICO DE
ENTOMOLOGÍA
Ante la urgente necesidad de solventar los problemas de salud estrechamente
relacionados en las extensas áreas tropicales del país y darse cuenta de la
necesidad de investigación sobre los diversos padecimientos con lo cual se auxilia
la labor del servicio médico, en la década de 1930 el entonces Departamento de
Salubridad, propuso la organización de un centro destinado al estudio científico de
las enfermedades consideradas como tropicales, mismo que se concretó al
formularse el Plan Sexenal de Gobierno para los años de 1934 a 1940. En el año de
1935 se elaboró el proyecto de creación y de organización, y el 19 de marzo de 1939
quedó formalmente inaugurado el Instituto de Salubridad y Enfermedades
Tropicales. En el proyecto se propuso la colaboración de un laboratorio de
entomología, ante el hecho de que muchos de los padecimientos que serían sujeto
de estudio, los artrópodos estaban involucrados directa o indirectamente en los
procesos morbosos, desde entonces el laboratorio de entomología e insectario han
establecido pautas para el estudio de los artrópodos con importancia médica en
México.
Estas actividades, condujeron a la formación obligada de una colección de
referencia para la identificación taxonómica de los artrópodos con importancia
médica, la cual actualmente es una de las colecciones especializadas en este rubro
en México.
A partir de la década de 1990, se empezó a conformar el proyecto de organización
de la Red de Entomología, que desde entonces a la fecha está consolidado por
diferentes estados de acuerdo a su marco analítico básico establecido.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 12 de 80 Versión No.01
RED NACIONAL DE LABORATORIOS PARA LA VIGILANCIA ENTOMOLÓGICA
Los estados con color rojo, representan los laboratorios con prueba de diagnóstico y/o control de calidad, en amarillo los estados que no han implementado el diagnóstico.
Figura. 1. Red de laboratorios de entomología que integran el componente de enfermedad de Chagas en su marco analítico
Los estados con color azul, representan los laboratorios con prueba de diagnóstico y/o control de calidad, en amarillo los estados que no han implementado el diagnóstico.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 13 de 80 Versión No.01
Figura. 2. Red de laboratorios de entomología que integran el componente de mosquitos en su marco analítico
Los estados con color café representan los laboratorios con prueba de diagnóstico y/o control de calidad, en amarillo los estados que no han implementado el diagnóstico.
Figura.3. Red de laboratorios de entomología que integran el componente de escorpiones en su marco analítico
Los estados con color verde representan los laboratorios con prueba de diagnóstico y/o control de calidad, en amarillo los estados que no han implementado el diagnóstico. Figura.4. Red de laboratorios de entomología que integran el componente de otros
Taxa en su marco analítico
Entomología–RNLSP/InDRE Página 14 de 80 Versión No.01
MARCO LEGAL 1. Constitución Política de los Estados Unidos Mexicanos. Artículo 4. DOF
05/02/1917, Última Reforma D.O.F. 15/02/2012.
2. Ley General de Salud. Artículo 3, XV; 59; 64, III; 133; 134, I; 136, 138, 139 y
141. DOF 7/02/1984, Última Reforma DOF 07/06/2012.
3. NORMA Oficial Mexicana NOM-017-SSA2-2012, Para la vigilancia epidemiológica. DOF: 19/02/2013.
4. Norma Oficial Mexicana NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002. Protección
ambiental-salud ambiental-residuos peligrosos biológico-infecciosos-
clasificación y especificaciones de manejo.
5. Norma Oficial Mexicana NOM-052-SEMARNAT-2005, Que establece las
características, el procedimiento de identificación, clasificación y los listados
de los residuos peligrosos. DOF: 23/06/2006.
6. Norma Oficial Mexicana NOM-032-SSA2-2010 para la Vigilancia
Epidemiología, Prevención y Control de las Enfermedades Transmitidas por
Vector. DOI 01-06-2011
7. Norma Oficial Mexicana NOM-033-SSA2-2011, Para la vigilancia, prevención y
control de la intoxicación por picadura de alacrán. DOF-08-12-2011.
8. Norma Oficial Mexicana NOM-017-SSA2-2012, Para la vigilancia
epidemiológica, publicada en el Diario Oficial de la Federación el 19 de febrero
de 2013.
http://dof.gob.mx/nota_detalle.php?codigo=5288225&fecha=19/02/2013.
9. Secretaría de Salud. Programa Sectorial de Salud 2013-2018. Diario Oficial de
la Federación DOF: 12/12/2013.
10. Plan Nacional de Desarrollo 2013-2018. Diario Oficial de la Federación, DOF:
20/05/2013, www.dof.gob.mx
11. Secretaría de Salud. Programa de Acción Específico 2013-2018. Sistema
Nacional de Vigilancia Epidemiológica, primera edición 2014.
OBJETIVO GENERAL Establecer los lineamientos para la aplicación de algoritmos de diagnóstico, control de calidad y referencia de las muestras entomológicas relacionadas a las Enfermedades Transmitidas por Vectores a través de la RNLSP, en apoyo a la vigilancia epidemiológica. OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Diagnóstico de determinación taxonómica de artrópodos a la RNLSP.
Control de calidad de las muestras entomológicas de la RNLSP-Entomología.
Elaboración y aplicación de paneles de eficiencia a la RNLSP-Entomología.
Mantenimiento de la colección de referencia: Colección de Artrópodos con
Importancia Médica (CAIM).
Entomología–RNLSP/InDRE Página 15 de 80 Versión No.01
Actualización de métodos de estudio y taxonómicos de artrópodos con
importancia médica.
Capacitación y actualización del personal de laboratorio y campo en los
procedimientos, técnicas y métodos de entomología médica.
Cultivo y mantenimiento de insectos para fines de diagnóstico, enseñanza e
investigación.
ORGANIZACIÓN DE LA RED NACIONAL DE LABORATORIOS DE ENTOMOLOGÍA La RNLSP es dirigida por el laboratorio de Entomología, adscrito al departamento de control de muestras y servicios del InDRE. La red está integrada por los Laboratorios Estatales de Salud Pública (LESP) a través del componente de entomología con cuatro diagnósticos básicos: Mosquitos, Chinches Triatominae, Escorpiones y Otros Taxa, de los cuales cada estado declara su marco analítico básico, en algunos estados tienen establecidos laboratorios de diagnóstico locales, los cuales realizan diagnóstico básico. Se establece la evaluación mediante ensayos de aptitud a la red nacional de acuerdo al procedimiento ENTO-P-05.
LABORATORIO DE ENTOMOLOGÍA INDRE (LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA)
LABORATORIOS O ÁREAS DE ENTOMOLOGÍA (LESP) (RED ESTATAL DE DIAGNÓSTICO)
PROGRAMA ESTATAL DE ENFERMEDADES TRANMITIDAS POR
VECTORES, RED DE APOYO JURISDICCIONAL
Figura. 5. Procesos de relación de la red de entomología
Muestras
Resultados
Muestras
Resultados
Ensayos de aptitud
Evaluación
Entomología–RNLSP/InDRE Página 16 de 80 Versión No.01
FUNCIONES DEL LABORATORIO NACIONAL DE REFERENCIA El laboratorio de entomología del InDRE es el laboratorio nacional de referencia y es el órgano normativo para el diagnóstico entomológico al cual se designan las siguientes funciones y atribuciones en el ámbito de su competencia:
Realizar diagnósticos entomológicos considerados de urgencia de acuerdo al servicio de diagnóstico inmediato.
Mantener algoritmos de referencia y criterios de interpretación de resultados preestablecidos.
Realizar el control de calidad mediante el Programa de Evaluación Externa del Desempeño (PEED) a la RNLSP con base en el procedimiento ENTO-P-05.
Realizar el control de calidad interno.
Monitorear del desempeño de la red de laboratorios de entomología.
Aplicar el programa de evaluación externa del desempeño.
Capacitar en servicio para la formación de recursos humanos.
Capacitar anualmente al personal de la red.
Supervisar directamente a los laboratorios estatales.
Apoyar técnicamente a los laboratorios que lo requieran y soliciten.
Desarrollar investigación operativa en apoyo a la vigilancia epidemiológica.
Generar información de orden nacional en materia de diagnóstico, control de calidad, formación de recursos humanos e investigación operativa para la vigilancia epidemiológica que coadyuven para la toma de decisiones en el control y prevención de las enfermedades trasmitidas por vectores a nivel nacional.
Apoyar estudios entomológicos básicos y de campo sobre la distribución, bionomía, ecología de vectores de Enfermedades Transmitidas por Vectores (ETV), y contribuir al entendimiento de la dinámica de la transmisión de ETV, con el objetivo de desarrollar estrategias de control más efectivas.
Realizar técnicas entomológicas estándar: identificación morfológica, disección, montaje y preservación de muestras.
Identificar especies de vectores de todas las ETV.
Apoyar técnicas para la detección de la infección de los mosquitos con virus de dengue.
Identificar artrópodos sospechosos de transmitir enfermedades que son referidas por hospitales, otras instituciones o personas.
Dar mantenimiento a la Colección de Artrópodos con Importancia Médica (CAIM).
Actualización de métodos de estudio y taxonómicos de artrópodos (procedimientos y métodos).
Entomología–RNLSP/InDRE Página 17 de 80 Versión No.01
FUNCIONES DE LOS LABORATORIOS ESTATALES DE SALUD PÚBLICA
Realizar los procesos analíticos de entomología de acuerdo a su marco analítico básico declarado.
Asegurar la calidad del diagnóstico.
Emitir en tiempo y forma los resultados de los exámenes de laboratorio, de acuerdo a la prioridad del diagnóstico.
Referir muestras al InDRE para control de calidad y conformación de acuerdo con la Norma Oficial Mexicana NOM-032-SSA2-2010 para la vigilancia epidemiología, prevención y control de enfermedades Transmitidas por Vector.
Participar como mecanismo de apoyo técnico, proporcionando información relacionada y requerida por el programa sustantivo del área de su competencia.
Monitoreo del desempeño
Evaluar cómo se llevan a cabo los procedimientos, métodos y técnicas estandarizadas.
Seleccionar muestras positivas y negativas para control de calidad y evaluación.
Compilar las muestras de las jurisdicciones y redes de apoyo.
Reportar inmediatamente las incongruencias encontradas en resultados.
Analizar la información generada.
Capacitar en el área de entomología al personal de los laboratorios locales del programa y demás instituciones del sector salud que lo requieran, o dónde se ha detectado la necesidad a través del monitoreo del desempeño en el área de competencia, en apoyo a la vigilancia epidemiológica.
Supervisar el manejo adecuado del equipo asignado conforme a lo establecido en los documentos autorizados y manuales de operación correspondiente para el aseguramiento de la calidad en la red estatal.
Proporcionar información de importancia detectada en el laboratorio mediante informes, notas informativas y reportes a la dirección del LESP para que sea difundida a las instancias estatales correspondientes, contribuyendo a la vigilancia epidemiológica estatal y nacional de manera veraz y oportuna.
Ensayos de aptitud
Participar en la evaluación del desempeño del InDRE, a través de los programas oficiales correspondientes.
Generar la evidencia de la evaluación y enviar resultados al InDRE.
Organizar la información de estas actividades y proporcionarla cuando sea requerida por las instancias evaluadoras.
Capacitación
Organizar el curso anual de capacitación estatal para los laboratorios de acuerdo a las necesidades detectadas a través del PEED o del monitoreo.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 18 de 80 Versión No.01
Mantener los niveles de estándar en la capacidad diagnóstica de los integrantes de la red.
Capacitar al personal en el manejo de equipo nuevo.
Brindar apoyo técnico al personal de la red que lo solicite.
Dar el curso de inducción al puesto al personal de nuevo ingreso y generar evidencia del mismo.
Apoyo técnico
Participar en las urgencias epidemiológicas en el área de su competencia.
Colaborar y/o elaborar trabajos de investigación operativa que proporcionen información prioritaria estatal, una vez que los protocolos sean aceptados por los comités de investigación.
Apoyar en la selección de especies y en el suministro de materiales y reactivos requeridos por los laboratorios de la red estatal de acuerdo a la evaluación proporcionada por el InDRE.
Participar en la elaboración y actualización de los manuales técnicos referentes a diagnóstico y temas especializados (bioseguridad, manejo de residuos peligrosos biológico-infecciosos, etc.) para uso en el ámbito estatal y local.
DEFINICIONES OPERATIVAS MUESTRAS ENTOMOLÓGICAS Muestra para diagnóstico Se considera una muestra para diagnóstico, aquella que es remitida de un LESP mediante oficio y relación de datos al laboratorio de entomología del InDRE y que contiene uno o diversos ejemplares de artrópodos, sin resultado de determinación taxonómica a nivel de especie o subespecie. La muestra puede incluir artrópodos con o sin importancia médica, además puede ser una muestra de la cual no se conozca su clasificación biológica. Muestra para confirmación Se considera una muestra para confirmación, aquella que sea remitida por el LESP mediante oficio y relación de datos al laboratorio de entomología del InDRE y que incluya un resultado de determinación taxonómica a nivel de familia, género, especie o subespecie del taxón en cuestión. El resultado emitido por el laboratorio de entomología del InDRE será positivo o negativo, en aquellas muestras para búsqueda coproparasitológica y en la determinación taxonómica del nombre del taxón específico, no se incluirá ningún porcentaje de correlación, sólo se confirma el resultado del LESP. Muestra para control de calidad El control de calidad de las muestras entomológicas se basa en la NOM-032-SSA2-2010, para la vigilancia epidemiológica, prevención y control de las enfermedades transmitidas por vectores numeral 6.5.9, la cual indica: [Control de calidad de las muestras entomológicas.- El control de calidad y la referencia de la identificación taxonómica de artrópodos con importancia médica se llevará a cabo por el laboratorio de entomología del InDRE, por lo que los LESP, deben enviar el 10% de muestras positivas (artrópodos con importancia médica) y el 5% de muestras
Entomología–RNLSP/InDRE Página 19 de 80 Versión No.01
negativas (artrópodos sin importancia médica). Los ejemplares deben enviarse de acuerdo a las indicaciones contenidas en el instructivo para envío y recepción de muestras foráneas del InDRE]. Se considera una muestra para control de calidad, aquella que es remitida de un LESP al laboratorio de entomología del InDRE, mediante oficio, relación de datos y si el resultado de la determinación taxonómica a nivel especie o subespecie, refiere específicamente a algún artrópodo con importancia médica en México. Será necesario que el determinador del LESP cuente con la capacitación del laboratorio de entomología del InDRE sobre el taxón que representa la muestra. En el resultado de las muestras procesadas se indicará el porcentaje de correlación o concordancia entre el resultado del InDRE y el LESP. Casos especiales
1) En el Control de Calidad (CC) de la determinación taxonómica de chinches
Triatominae para los estadios ninfales del primero al quinto estadio no se
pueden determinar a nivel especie, hasta que adquieren la etapa adulta, por
lo cual pueden enviar el resultado a nivel genérico (Triatoma sp., con
referencial al estadio de la ninfa).
2) Con relación al CC de la búsqueda coproparasitológica en las chinches
Triatominae, pueden enviar ninfas y/o adultos junto con la laminilla del
estudio, el resultado indicará positivo o negativo a Trypanosoma cruzi.
3) Para las muestras de mosquitos en estado larval, el diagnóstico taxonómico
deberá basarse exclusivamente en las larvas de cuarto estadio.
4) Con referencia a los escorpiones, cuando los resultados de las muestras sean
de ejemplares juveniles, estos podrán ser informados a nivel genérico,
debido a que en esta etapa de desarrollo de los escorpiones, los caracteres
taxonómicos no son adecuados para separar las especies o subespecies.
5) En relación a las arañas, si los resultados de las muestras son de ejemplares
pre-adultos, estos podrán ser informados a nivel género, debido a que en
esta etapa de desarrollo de las arañas, los caracteres taxonómicos no son
adecuados para separar las especies.
Para cada resultado de control de calidad de las muestras entomológicas, se especifica el porcentaje de correlación entre la determinación taxonómica del LESP y del laboratorio de entomología del InDRE, con base en lo anterior se indican los siguientes criterios para el CC. 1º Criterio. La persona que emite el resultado del LESP debe de contar con la capacitación previa en taxonomía del grupo en cuestión. 2º Criterio. Envío de muestras, resultado para CC mediante oficio y relación de datos de las muestras procedentes de los LESP a nivel especie o subespecie, o que cumpla con los casos especiales (p. ej. chinches Triatominae).
Entomología–RNLSP/InDRE Página 20 de 80 Versión No.01
3º Criterio. Incluir muestras positivas (especies de artrópodos con importancia médica) y negativas (especies de artrópodos sin importancia médica). 4º Criterio. Cuando el resultado de la identificación taxonómica del LESP indique como resultado una muestra con determinación a nivel género (indeterminada=sp) que no esté contemplada en los casos especiales, el resultado del Laboratorio de Entomología, no incluye la muestra en CC y tampoco en la evaluación del porcentaje de correlación, dicho resultado será incluido como parte del diagnóstico.
Muestra de referencia
Se considera una muestra de referencia aquella que incluya o contenga uno o diversos ejemplares con identificación taxonómica a nivel de género, especie o subespecie, que haya sido identificada taxonómicamente por el personal del laboratorio de entomología del InDRE y que se encuentre registrada en el acervo de la CAIM del laboratorio de entomología, InDRE. Generalmente la muestra es enviada a los LESP para fines comparativos para identificación taxonómica.
Muestras del panel de eficiencia
Se considera una muestra de panel de eficiencia, aquella que incluya uno o diversos ejemplares que hayan sido identificados taxonómicamente por el personal del Laboratorio de Entomología del InDRE; que sea etiquetada con un código o número clave y sea remitida a los LESP para evaluar al personal en la identificación taxonómica. La evaluación puede constar de diferentes muestras de uno o varios taxones.
Ensayos de aptitud para evaluación de los LESP
La evaluación del diagnóstico entomológico implica establecer resultados comparativos en relación a las muestras para diagnóstico, control de calidad, confirmación, referencia y paneles de control, así como en las técnicas y procedimientos que generan los LESP y el InDRE. Los procedimientos de diagnóstico, confirmación, caracterización y supervisión, constituyen elementos importantes para comparar el desempeño de los LESP con base en su capacidad técnica y al marco analítico establecido de acuerdo a sus necesidades y prioridades. Con referencia a lo anterior, los paneles de control entomológicos constituyen herramientas para estimar los resultados propios con respecto a otros laboratorios y permiten detectar los errores generados en las técnicas y procedimientos de los laboratorios.
Muestra para acervo de la colección entomológica
Se considera muestra para acervo a todo aquel material biológico que se encuentra registrado en el acervo de la CAIM del InDRE, el cual quedará en resguardo, preservación y conservación con base en el reglamento interno de la colección de entomología.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 21 de 80 Versión No.01
Muestra positiva
Todas aquellas especies o subespecies de artrópodos implicadas en la transmisión de algún patógeno causante de alguna enfermedad que sea causa directa o indirecta de algún daño por picadura, mordedura o cualquier otro medio considerado con importancia para la salud pública de México. En el caso de la búsqueda coproparasitológica en chinches Triatominae, se considera muestra positiva a la presencia del parásito Trypanosoma cruzi.
Muestra negativa
Todas aquellas especies que no estén implicadas en la transmisión de algún patógeno causante de alguna enfermedad y no sean causa directa o indirecta de algún daño por picadura, mordedura u otro medio que no tenga importancia para la salud pública en México. En el caso de la búsqueda coproparasitológica en chinches Triatominae, se considera muestra negativa a la ausencia del parásito Trypanosma cruzi.
Muestra recibida
Toda aquella muestra que sea remitida del LESP al laboratorio de entomología del InDRE, mediante oficio y relación de datos. Cada oficio recibido será indicado por un número de referencia del laboratorio de entomología del InDRE.
Muestra procesada
Toda aquella muestra estudiada en el laboratorio de entomología del InDRE, de la cual se emite un resultado por escrito con referencia al LESP, en el cual se incluye número de oficio, fecha del oficio, número de muestras, resultado del estudio y rubrica del responsable del laboratorio de entomología del InDRE.
Muestra indeterminada
Toda aquella muestra que es procesada por el laboratorio de entomología del InDRE con resultado por escrito, el cual indica un diagnóstico inespecífico; la identificación taxonómica puede dar como resultado, una categoría taxonómica a nivel de familia o género; en la búsqueda coproparasitológica en chinches Triatominae como “no se obtuvo la muestra” (nom), lo cual puede deberse a diferentes factores que son causa directa de la interacción parásito-huésped y a la ecología del parásito.
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Muestra inadecuada
Toda aquella muestra que no es adecuadamente preservada, empacada o que carezca de datos de referencia o procedencia (p. ej. Escorpiones remitidos en frascos sin alcohol, frascos rotos, muestras sin datos de colecta, etc.).
Muestra rechazada
Toda aquella muestra que es remitida del LESP al laboratorio de entomología del InDRE que no haya sido enviada mediante oficio y relación de datos o que no cumplan con el manual para envío de muestras del InDRE.
Muestra pendiente
Toda aquella muestra que es aplazada para su estudio. ESTÁNDAR DE SERVICIO La capacidad de análisis de las muestras entomológicas se basa únicamente en artrópodos con importancia médica, debido a que las muestras consideradas como negativas pueden ser grupos aún no descritos, en los cuales se desconocen aspectos de biología y taxonomía, o no se tiene información de referencia. El personal considerado para procesar las muestras entomológicas deberá cumplir con los siguientes criterios: 1) Cumplir con una capacitación en servicio en el InDRE del grupo taxonómico
en cuestión. 2) Enviar muestras para control de calidad al InDRE. 3) Asistir a los cursos anuales del laboratorio de entomología del InDRE. 4) Realizar la evaluación anual por medio de muestras de panel de eficiencia. 5) Cumplir como mínimo cinco años en la identificación del grupo en cuestión. 6) Contar con muestras de referencia del laboratorio de entomología del InDRE.
Para cada grupo de artrópodos con importancia médica se requiere de previa preparación o montaje, lo cual debe ser considerado para el tiempo de respuesta por parte del laboratorio, además del tiempo de captura de datos, informe de resultados y envío. La capacidad de análisis de las muestras puede variar por varias razones que afectan directamente al resultado, las más comunes son: 1) Ejemplar mal preservado. 2) Ejemplar incompleto. 3) Inadecuado método de montaje o preservación. 4) Identificación inadecuada por falta de información o material de referencia. 5) Falta de experiencia en el grupo taxonómico en estudio.
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Cuadro 1. Estándar de Servicio de muestras entomológicas
Análisis de muestras Estadio
Técnica de
preparación para
preservación y
montaje
Proceso de
resultado
pre-analítica,
analítica
post-analítica
(días hábiles)
Determinación taxonómica
Mosquitos Larva OH etílico al 75% 8
Adulto alfiler
entomológico 8
Escorpiones
Adulto OH etílico al 75% 8
Chinches Triatominae
Ninfa Adulto alfiler
entomológico 8
Chinches de cama
(Cimicidae)
Adulto Laminillas 8
Otros Taxa:
Piojos Adulto Laminillas
Pulgas Adulto Laminillas 8
Garrapatas Adulto OH etílico al 75% 8
Arañas Adulto OH etílico al 75% 8
Moscas simúlidos
(Simulium) Adulto larva Laminillas 8
Moscas miasigenas Larva OH etílico al 75% 8
Moscas flebotominos
(Lutzomyia) Adulto Laminillas 8
Moscas tábanos
(Tabanidae) Adulto
alfiler
entomológico 8
Moscas chaquistes
(Ceratopogonidae) Adulto Laminillas 8
Moscas establos (Muscidae,
Calliphoridae) Adulto larva
Alfiler
entomológico
laminillas
8
Otras moscas Adulto Variable 8
Identificación de muestras en laminilla para microscopio
Búsqueda
coproparasitológica 8
Entomología–RNLSP/InDRE Página 24 de 80 Versión No.01
TOMA, MANEJO Y ENVÍO DE MUESTRAS
La toma, manejo y envío de muestras se realiza de acuerdo al procedimiento básico
en la toma de muestras biológicas para diagnóstico y manual para la toma, envío y
recepción de muestras para diagnóstico, así como al procedimiento para la
recepción, registro, distribución, almacenamiento y custodia de muestras (ENTO-
P-02).
TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS
1. ENTOMOLOGÍA-ENFERMEDAD DE CHAGAS
La enfermedad de Chagas es un problema de salud pública, se estima que alrededor
de 1 800 000 personas podrían estar infectadas y otros 70 millones se encuentran
en riesgo constante (Ramsey et. al., 2003). En relación al vector de esta
enfermedad, en el mundo existen 137 especies de chinches de la subfamilia
Triatominae, distribuidas en 5 tribus y 13 géneros, en México se han reportado 7
géneros, siendo el género Triatoma el más importante con 32 especies (Lent &
Wygoddzinsky, 1979).
El laboratorio de entomología del InDRE cuenta actualmente con una red de
laboratorios estatales de salud pública que comprende 24 estados, de los cuales 15
han integrado el diagnóstico de entomología de la Enfermedad de Chagas (Fig.1).
En este sentido el laboratorio de entomología del InDRE colabora con el
diagnóstico taxonómico y parasitológico de muestras entomológicas de chinches de
la subfamilia Triatominae, a través del control de calidad y referencia de las
mismas con base en la CAIM. El diagnóstico tiene la finalidad de apoyar la
vigilancia entomológica de la enfermedad de Chagas y otras enfermedades
transmitidas por vector en coordinación con el programa de vectores del Centro
Nacional de Prevención y Control de Enfermedades (CENAPRECE). Además de
realizar investigación aplicada en apoyo al programa de vectores y en la
participación con información para la toma de decisiones conjuntas y normas, así
como en la capacitación del personal de salud relacionado a la vigilancia
entomológica de la enfermedad de Chagas y en la coordinación de la red nacional
de laboratorios de entomología.
de Trypanosoma cruzi
Parásito Laminilla 8
Xenodiagnóstico
Parásito Laminilla 8
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Toma, manejo y envío de muestras Los ejemplares se pueden obtener de manera directa en áreas silvestres, refugios y
lugares de resguardo, como pueden ser gallineros, corrales, madrigueras y
viviendas humanas con ciertas características y teniendo en cuenta las medidas de
seguridad mínimas para evitar el contacto con las heces u otros fluidos del insecto.
Las chinches Triatominae deberán preservarse vivas para su estudio
coproparasitológico, bajo las siguientes medidas:
Los ejemplares deberán colocarse en frasco de plástico o vidrio, de tamaño
adecuado al número de organismos. Es importante utilizar un frasco para cada
colecta.
En el interior del frasco se debe colocar un círculo de papel en la base y sobre éste
una tira de papel plegado en forma de acordeón, el cual no debe alcanzar más de la
mitad de la altura del frasco.
La tapa tiene que estar perforada para facilitar la respiración de los organismos,
cuidando que los orificios no sean tan grandes, para permitir la salida de los
insectos.
La manipulación de las chinches debe hacerse con pinzas y guantes, nunca con las
manos.
Cada muestra debe contener los datos de colecta: país, estado, municipio, localidad,
dirección, nombre del jefe de familia, en el caso de que se colecten en una vivienda,
lugar de colecta, fecha de colecta y colector.
Si los organismos a enviar ya se encuentran muertos, entonces su transportación
deberá ser en “seco”. Las muestras se deberán colocar en el interior de una caja de
cartón o unicel y estas a su vez pueden ser envueltas en papel, exceptuando la tapa,
posteriormente se rellenaran los espacios entre cada una de las muestras, para
evitar en lo posible que se muevan.
También es importante considerar el tiempo de envío, para el cual no deberán
pasar más de una semana con las muestras retenidas (Fig. 6).
Figura.6. Secuencia y condiciones mínimas de envío de muestras al laboratorio de
entomología del InDRE
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ALGORITMO
Los algoritmos incluyen los procedimientos para identificación taxonómica,
búsqueda coproparasitológica de Trypanosoma cruzi y Xenodiagnóstico, los
cuales se basan en los siguientes métodos del laboratorio.
1) ENTO-M-01. Búsqueda coproparasitológica de Trypanosoma cruzi en
chinches hematófagas (Reduviidae, Triatominae).
2) ENTO-M-02. Identificación taxonómica de chinches hematófagas.
3) ENTO-M-03. Demostración de Trypanosoma cruzi en sangre por
Xenodiagnóstico.
4) ENTO-M-016. Cultivo de chinches hematófagas (Reduviidae, Triatominae) en
colonias para insectario.
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Figura. 7. Algoritmo determinación taxonómica de chinches Triatominae. Clave
tabulador 1F631002
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Figura. 8. Algoritmo para búsqueda coproparasitológica de Trypanosoma cruzi.
Clave tabulador 1F631004
Interpretación de resultados por el laboratorio Muestra para diagnóstico. Se considera a toda muestra que es remitida por el
LESP mediante oficio y relación de datos al laboratorio de entomología del InDRE
y que contiene uno o diversos ejemplares de chinches sin resultado taxonómico o
positividad a Trypanosoma cruzi.
Muestra para confirmación. Se considera a toda muestra que es remitida por
el LESP mediante oficio y relación de datos al laboratorio de entomología del
INDRE y que incluya un resultado de determinación taxonómica de alguna especie
de importancia médica de chinches, o bien resultado positivo o negativo a
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Trypanosoma cruzi. El resultado emitido por el laboratorio de entomología del
InDRE no incluirá ningún porcentaje de correlación.
Muestra para control de calidad. Se considera a toda que es remitida de un
LESP al laboratorio de entomología del InDRE, mediante oficio, relación de datos
y resultado de determinación taxonómica a especie del ejemplar y/o la positividad
a T. cruzi que el LESP haya enviado para CC. Sobre este resultado se expresa un
porcentaje de concordancia.
El número de muestras remitidas al laboratorio de entomología del InDRE que se
refieran para CC, serán estimadas con base en la Norma Oficial NOM–032–SSA2–
2010, para la vigilancia epidemiológica, prevención y control de enfermedades
transmitidas por vector numeral 6.5.9, indica que las muestras mensuales deberán
ser el 10% de las muestras positivas y el 5 % de las muestras negativas. Las
muestras deberán enviarse con todos los datos anteriormente citados más los
datos de diagnóstico con resultado de determinación taxonómica y/o positividad a
Trypanosoma cruzi.
Xenodiagnóstico Sirve para determinar la presencia de Trypanosoma cruzi en sangre de pacientes a
través de la alimentación de especies de chinches Reduviidae: Triatominae de
tercer o cuarto estadio minal libres de infección y cultivadas en el insectario del
laboratorio del InDRE.
Es una técnica parasitológica en la cual se puede detectar la presencia de
Trypanosoma cruzi en sangre del paciente alimentando chinches Reduviidae:
Triatominae y realizando preparaciones en fresco con deyecciones de chinches
cultivadas en el insectario, observándolas mediante un microscopio compuesto con
objetivos 10x y 40x (Fig. 9).
Criterios de Inclusión: Cuando se sospecha que el paciente está en fase aguda
de la infección por T. cruzi y se requiere la demostración del agente en sangre.
Criterio de exclusión: Cuando el paciente se encuentra en fase crónica o
presenta entomofobia.
Criterios de diagnóstico: positivo/negativo es la presencia o ausencia del
agente T. cruzi en sangre.
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Figura. 9. Colocación de frascos vial con 20 ninfas de Triatominos cada una en el
antebrazo del paciente
LISTA DE ESPECIES CON IMPORTANCIA MÉDICA EN MÉXICO
(Chinches Triatominae)
Clase Insecta
Orden Hemíptera
Familia Reduviidae
Subfamilia Triatominae
Especies:
Belminus costaricensis Herrer, Lent & Wygodzinzki, 1954
Rhodnius prolixus Stal, 1859
Dipetalogaster maxima (Uhler, 1894)
Eratyrus cuspidatus Stal, 1859
Pastrongylus geniculatus (Latreille, 1911)
Pastrongylus rufotuberculatus (Champion, 1899)
Paratriatoma hirsuta Barber, 1938
Triatoma barberi Usinger, 1939
Triatoma bolivari Carcavallo, Martínez & Peláez, 1984
Triatoma brailovskyi Martínez, Carcavallo & Peláez, 1984
Triatoma dimidiata (Latreille, 1811)
Triatoma gerstaeckeri (Stal, 1859)
Triatoma gomeznunezi Martínez, Carcavallo & Jurberg, 1994
Triatoma hegneri Mazzotti, 1940
Triatoma incrassata Usinger, 1939
Triatoma indictiva Neiva, 1912
Triatoma lecticularia (Stal, 1859)
Triatoma longipennis Usinger, 1939)
Triatoma mazzotti Usinger, 1941
Triatoma mexicana (Herrich-Schaeffer, 1848)
Triatoma neotomae Neiva, 1911
Triatoma nitida Usinger, 1939
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Triatoma pallidipennis (Stal, 1872)
Triatoma peninsularis Usinger, 1940
Triatoma phyllosoma (Burmeister, 1835)
Triatoma picturata Usinger, 1939
Triatoma proctracta (Uhler, 1894)
Triatoma recurva (Stal, 1869)
Triatoma rubida (Uhler, 1894)
Triatoma sinaloensis Ryckman, 1962
Triatoma bassolsae Alejandre-Aguilar, Nogueda-Torres, Cortez-Jiménez,
Jurberg, Galvao & Carcavallo, 1999
Triatoma sp. (ninfas de todas las especies)
a) Determinación taxonómica
Criterios de inclusión: Todos los ejemplares que pertenecen a especies de
importancia médica y que se encuentren en buen estado físico.
Criterios de exclusión: Todos los ejemplares que no se encuentren bien
preservados y/o dañados y sea imposible identificarlos taxonómicamente.
Criterio de diagnóstico: Se considera positivo a todos los ejemplares con
importancia médica y negativos a los que carecen de importancia médica, en este
caso son todas las demás familias relacionadas a Reduviidae consideradas con
muestras negativas, esto es, otras familias relacionadas como son Coreidae,
Pentatomidae, etc.
b) Búsqueda coproparasitológica
Criterios de inclusión: Todos los ejemplares que lleguen al laboratorio vivos o
recientemente muertos y, por lo tanto se les pueda extraer muestra para análisis de
parásitos de Trypanosoma cruzi.
Criterios de exclusión: Se considera una muestra inconveniente para búsqueda
parasitológica cuando el ejemplar se encuentre sumergida en alcohol o algún otro
conservador que pudiera intervenir en la viabilidad del parásito e interpretación
del resultado. Se considera muestra no trabajada o no obtenida (NoM), aquella en
que la chinche llegue en condiciones de deshidratación severa o por algún otro
motivo no pudiera ser obtenida la muestra correspondiente.
Criterio de diagnóstico: positivo/negativo. Se considera positivo o negativo de
acuerdo a la presencia o ausencia de Trypanosoma cruzi en la muestra.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 32 de 80 Versión No.01
2. ENTOMOLOGÍA-MOSQUITOS DE IMPORTANCIA MÉDICA
Los miembros de la familia Culicidae se conocen en México como mosquitos,
zancudos o moyotes en etapa adulta, y como maromeros en estado de pupa,
agujitas de agua o gusarapos en la etapa larval. Los mosquitos son insectos
holometábolos que pertenecen a la orden Diptera, en la etapa adulta presentan un
par de alas membranosas que se originan del mesotórax y otro par de alas
modificadas en balancines que se originan del metatórax; las partes bucales son
del tipo haustelado, lo que indica que se encuentran alargadas y adaptadas para la
ingestión de alimento líquido. Los estados juveniles, (huevecillos, larvas y pupas),
son acuáticos y comunes en cuerpos de agua con poca movilidad.
Los sitios de crianza adecuados para los juveniles de cada especie son
seleccionados de manera natural por las hembras. Existen especies que se crían –
preferentemente- en cuerpos de agua permanentes o temporales, pequeños o
grandes de aguas limpias, eutroficadas y en algunos casos contaminadas, dulces o
salobres, con vegetación o sin ella. Hay un gran número de especies que se
especializan en explotar cuerpos de agua acumulados en ciertas plantas o en
habitáculos inundados de animales, como sería en el caso de los huecos de
cangrejos. Otras especies se encuentran comúnmente en recipientes artificiales
que contienen agua, y por lo tanto hasta cierto punto son sinatrópicos.
Las hembras de muchas especies regularmente se alimentan de sangre de
vertebrados, hábito que determina la importancia sanitaria del grupo. Los daños
directos son causados principalmente por sus picaduras y por los componentes
salivales que provocan reacciones alérgicas que pueden manifestarse poco después
de que el mosquito ha completado su alimentación y cuya duración depende de la
susceptibilidad de cada individuo (Harwood & James, 1987). Por otra parte, los
daños indirectos se asocian a su capacidad vectorial por la inoculación de
organismos patógenos causantes de enfermedades como dengue, paludismo,
encefalitis, fiebre amarilla, filariasis, etc. Los mosquitos constituyen el grupo más
importante, desde la perspectiva médica y veterinaria a nivel mundial, por las
diversas enfermedades en las que están implicados.
En México se reconocen cerca de 250 especies de mosquitos, de las cuales más de
70 especies están implicadas en la salud pública. La red actual de laboratorios
estatales de salud pública que refieren en su marco analítico el estudio de
mosquitos, se conforma por 19 estados que remiten muestras para diagnóstico y
control de calidad.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 33 de 80 Versión No.01
Toma, manejo y envío de muestras Larvas
El estudio de las larvas puede llevarse a cabo con muestras preservadas en alcohol
etílico o en laminillas con Bálsamo de Canadá.
Estudio en alcohol etílico.
Las muestras deberán preservarse en alcohol al 80%, por cada tubo o frasco se
deben colocar un máximo 10 de larvas.
Cada tubo debe contener una etiqueta de colecta a lápiz o con impresión láser que
coincida con la relación de muestras de los datos de los tubos o frascos, además
debe coincidir con él número de tubo de la relación de muestras. Los datos
mínimos que deben llevar los tubos en la relación de muestras son: estado,
municipio, localidad, dirección, fecha de colecta, colector(es), número de
ejemplares, para los casos de control de calidad debe incluir el resultado de la
identificación taxonómica a nivel de especie. (En caso de que las larvas sean
enviadas en laminilla, estas deberán estar completamente secas para evitar que la
muestra de dañe en el traslado).
El procedimiento comúnmente utilizado para la identificación taxonómica del
ejemplar en alcohol etílico, es colocar la muestra en una caja de Petri pequeña y
observarla en el microscopio estereoscópico, se visualiza de menor a mayor
aumento. Se puede apoyar en claves taxonómicas, o por comparación con
ejemplares de referencia. Para manipular el ejemplar se utilizan agujas de
disección. Una vez identificada la muestra se regresa el ejemplar al tubo que la
contenía, esto se hace con la ayuda de un gotero de boca ancha y así
consecutivamente hasta determinar todas las muestras del tubo. En caso de que un
ejemplar está incompleto o mal preservado la muestra no se procesa, lo cual puede
ser causa de rechazo.
Es recomendable el montaje de larvas en laminillas con Bálsamo de Canadá o
Euparal con el fin de hacer una identificación taxonómica con más detalle de los
ejemplares para estudio.
Estudio en laminilla con Bálsamo de Canadá o Euparal (Figs. 10-15).
Colocar el ejemplar en un recipiente con alcohol etílico para observación al
microscopio, y seleccionar el ejemplar adecuado para el montaje permanente.
Colocar el ejemplar en KOH al 10% por 12 horas a temperatura ambiente.
Si su aclarado es adecuado, ponga el ejemplar en agua bidestilada caliente (no
hirviendo) de 10 a 15 minutos.
Posteriormente colocar el ejemplar en ácido acético al 8% durante 10 minutos.
Después en alcohol etílico graduales de 70%, 80%, 96% y absoluto, en cada paso de
10 a 15 minutos.
Pase el ejemplar a una solución de aceite de clavo con alcohol isopropílico en
proporción 1:1 de 10 a 15 minutos.
Después coloque el ejemplar en aceite de clavo de 15 a 20 minutos, cabe mencionar
que en este paso puede permanecer varios días.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 34 de 80 Versión No.01
Finalmente coloque una pequeña gota de Bálsamo de Canadá en un portaobjetos y
coloque el ejemplar en posición dorsal, realice un corte transversal entre el sexto y
séptimo segmento abdominal, y disponga la parte terminal del lado derecho a la
altura de la cabeza en posición lateral.
Coloque la laminilla en una charola porta laminillas e introduzca la charola en el
horno o estufa a 37° C de secado durante 24 horas.
Después retire la laminilla y observe el ejemplar al microscopio, si continua en la
posición óptima agregue otra gota de Bálsamo de Canadá y coloque el cubreobjetos
(el cual debe estar previamente cortado al tamaño de ejemplar).
En caso de que las estructuras no se observen en la perspectiva adecuada, deberá
agregar una pequeña gota de xilol para diluir el preservador, y posteriormente
deberá colocar nuevamente el ejemplar en forma adecuada.
Regrese la laminilla a la estufa para que se seque completamente por unas dos
semanas, posteriormente se etiquetan los ejemplares con los datos de colecta. Una
vez identificada la muestra se coloca la etiqueta de determinación taxonómica.
Figuras. 10-15. Secuencia de pasos para preparación de ejemplares en laminillas
Adultos
Las muestras de adultos pueden remitirse en seco o montados en alfiler
entomológico.
Estudio con preservación en seco.
Los mosquitos adultos que se envían en seco pueden colocarse en una caja
pastillera o caja de Petri que deberá contener un máximo de 10 ejemplares.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 35 de 80 Versión No.01
La caja debe contener una capa de algodón, papel cebolla, y las muestras de
mosquitos, en la otra tapa se colocan el papel cebolla y algodón.
Cada caja debe contener su etiqueta de datos de colecta a lápiz o con impresión
láser, se anexa una relación de las muestras que coincida con los datos de la caja
pastillera o caja de Petri, además debe coincidir con el número de ejemplares con
la relación de muestras. Los datos mínimos que deben de llevar son: estado,
municipio, localidad, dirección, fecha de colecta, colector(es), número de
ejemplares, para los caso de control de calidad debe incluir el resultado de la
determinación taxonómica a nivel de especie.
Estudio en alfiler entomológico (Figs. 16-23).
Para el montaje de mosquitos coloque el ejemplar en una caja Petri de vidrio y con
unas pinzas entomológicas manipule lo menos posible el ejemplar, porque a mayor
manipulación del ejemplar, este se puede dañar.
Coloque una gota de resistol blanco en un triángulo de papel opalina perforado por
el alfiler entomológico, antes de que se seque la gota pegue el ejemplar del lado
derecho con las patas dirigidas en dirección del alfiler entomológico.
Con una escalera entomológica acomode las etiquetas de la forma siguiente; la
primera etiqueta con datos de la identificación taxonómica del ejemplar; la
segunda etiqueta con los datos de colecta; la tercera etiqueta los datos del registro.
Por último el ejemplar se guarda en una caja entomológica de madera.
Una vez que los ejemplares de mosquitos hayan sido montados se pueden
estudiar taxonómicamente con apoyo del microscopio estereoscópico.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 36 de 80 Versión No.01
Figuras. 16-23. Secuencia de pasos para el montaje entomológico
Ovitrampas Se instalan para ovipostura con ciclos de 7 días en el peridomicilio o intradomicilio
de las viviendas seleccionadas (Fig. 24). Todos los huevos colectados deberán ser
cultivados en el Insectario (Delia López Solís A., y cols. Manual para la colecta, cría
e instalación de insectario para Aedes aegypti. Secretaría de Salud) hasta su etapa
de larva o de adulto. Etiquetar las muestras con los datos de colecta y datos
asociados a la vivienda para su posterior referencia. Pueden remitirse muestras
para diagnóstico o control de calidad.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 37 de 80 Versión No.01
Figura. 24. Ovitrampa: Recipiente cilíndrico de plástico en color negro
de un litro de capacidad. Fuente: CENAPRECE. Guía para la vigilancia
entomológica con Ovitrampas. CENAPRECE, programas preventivos. Dengue.
Secretaría de Salud.
ALGORITMOS
Los algoritmos incluyen los procedimientos para identificación taxonómica los
cuales se basan en los siguientes métodos de laboratorio.
1) ENTO-M-12. Identificación taxonómica de mosquitos.
2) ENTO-M-17. Cría y cultivo de mosquitos mediante ovitrampas en el Insectario.
Agua
Bote
Pellón F-1600
Etiqueta
Entomología–RNLSP/InDRE Página 38 de 80 Versión No.01
Figura. 25. Algoritmo para la determinación taxonómica de larvas de mosquitos. Clave tabulador 1F631001, 1F631003
Entomología–RNLSP/InDRE Página 39 de 80 Versión No.01
Figura. 26. Algoritmo para la determinación taxonómica de adultos de mosquitos.
Clave tabulador 1F631001, 1F631002
Entomología–RNLSP/InDRE Página 40 de 80 Versión No.01
Interpretación de resultados por el laboratorio Muestra para diagnóstico. Se considera aquella muestra que es remitida de un
LESP mediante oficio y relación de datos al laboratorio de entomología del InDRE
y que contiene uno o diversos ejemplares de mosquitos (larva o adultos) sin
resultado taxonómico.
Muestra para confirmación. Se considera aquella muestra que sea remitida
por el LESP mediante oficio y relación de datos al laboratorio de entomología del
INDRE y que incluya el resultado de determinación taxonómica de alguna especie
de importancia médica de mosquito. El resultado emitido por el laboratorio
entomología del InDRE no incluirá ningún porcentaje de correlación.
Muestra para control de calidad. Se considera, aquella muestra que es
remitida de un LESP al laboratorio de entomología del InDRE, mediante oficio,
relación de datos y resultado de determinación taxonómica a nivel de especie.
Sobre este resultado se expresa un porcentaje de concordancia o correlación.
El número de muestras remitidas al laboratorio de entomología del InDRE que se
refieran para control de calidad, serán estimadas con base en la Norma Oficial
NOM–032–SSA2–2010, para la vigilancia epidemiológica, prevención y control de
enfermedades transmitidas por vector numeral 6.5.9., que indica que las muestras
mensuales deberán ser el 10% de las muestras positivas y el 5% de las muestras
negativas. Las muestras deberán enviarse con todos los datos anteriormente
citados y deberán cumplir con los siguientes criterios para el control de calidad.
Criterio 1. Solo se considera para control de calidad las muestras positivas debido
a que son las de importancia médica, no consideramos las negativas para obtener
la concordancia, porque la diversidad de especies negativas es mucho mayor que
las positivas, y la mayoría de los LESP no están entrenados para identificarlas; si se
consideraran las muestras negativas muchos LESP bajarían considerablemente sus
porcentajes de concordancia.
Criterio 2. Cuando en las muestras para control de calidad que envía el LESP no
identifican el total de especies positivas, esto puede repercutir en el porcentaje de
concordancia para el control de calidad.
Criterio 3. Cuando en las muestras para control de calidad que envía el LESP no
coincide el total de muestras positivas por especie entre el LESP e InDRE, esto
puede repercutir en el porcentaje de concordancia para el control de calidad.
Criterio 4. Se consideran únicamente para control de calidad larvas de 4° estadio,
si se incluyen en un tubo muestras de la misma especie o de otras especies y con
diferentes estadios solo consideramos las larvas de 4° estadio por especie para la
concordancia.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 41 de 80 Versión No.01
Criterio 5. Norma Oficial Mexicana NOM-032-SSA2-2010, Para la vigilancia
epidemiológica, prevención y control de las enfermedades transmitidas por vector
numeral 6.5.9., indica lo siguiente:
El control de calidad de muestras entomológicas y la identificación taxonómica de
los artrópodos con importancia médica se debe llevar a cabo por el laboratorio de
entomología de la DGE, por lo que los LESP, deben enviar el 10% de muestras
positivas (artrópodos con importancia médica) y el 5% de muestras negativas
(artrópodos sin importancia médica). Los ejemplares deben enviarse de acuerdo a
las indicaciones contenidas en el instructivo para envío y recepción de muestras
foráneas de la DGE, disponible en:
http://www.indre.salud.gob.mx/interior/intd_index.html
Criterio 6. Las muestras deben ser remitidas de acuerdo al instructivo para envío
de muestras foráneas, y cumplir con lo indicado, si no se cumple es causa de
rechazo de muestras.
LISTA DE ESPECIES CON IMPORTANCIA MÉDICA EN MÉXICO
(Mosquitos)
Clase Insecta
Orden Diptera
Familia Culicidae
Especies:
Aedes aegypti (Linnaeus, 1762)
Aedes albopictus (Skuse, 1894)
Aedes vexans Meigen, 1830
Anopheles albimanus Wiedemann, 1820
Anopheles bradleyi King, 1939
Anopheles crucians Wiedemann, 1828
Anopheles darlingi Root, 1926
Anopheles franciscanus McCracken, 1904
Anopheles freeborni Aitken, 1939
Anopheles pseudopunctipennis Theobald, 1901
Anopheles punctimacula Dyar & Knab, 1906
Anopheles punctipennis Say, 1823
Anopheles quadrimaculatus Say, 1824
Anopheles walkeri Theobald, 1901
Coquillettidia perturbans (Walker, 1856)
Coquillettidia venezuelensis (Theobald, 1912)
Culex corniger Thebald, 1903
Culex coronator Dyar & Knab, 1906
Culex declarator Dyar & Knab, 1906
Culex erithrothorax Dyar, 1907
Entomología–RNLSP/InDRE Página 42 de 80 Versión No.01
Culex erraticus (Dyar & Knab, 1906)
Culex iolambdis Dyar, 1918
Culex nigripalpus Theobald, 1901
Culex opisthopus Komp, 1926
Culex pedroi Sirivanakarn & Belkin, 1980
Culex pipiens Linnaeus, 1758
Culex quinquefasciatus (Say, 1823)
Culex restuans Theobald, 1901
Culex salinarius Coquillett, 1904
Culex spissipes (Theobald, 1903)
Culex stigmatosoma (Dyar, 1907)
Culex tarsalis Coquillett, 1896
Culex territans Walker, 1856
Culex thriambus Dyar, 1921
Culiseta impatiens (Walker, 1948)
Culiseta incidens Thomson, 1868
Culiseta inornata (Wililiston, 1893)
Deinocerites cancer Theobald, 1901
Deinocerites pseudes Dyar & Knab, 1909
Haemagogus equinus Theobald, 1903
Haemagogus mesodentatus Komp & Kumm, 1938
Johnbelkinia leucopus (Dyar & Knab, 1906)
Johnbelkinia longipes (Fabricius, 1805)
Limatus durhamii Theobald, 1901
Mansonia indubitans Dyar & Shannon, 1925
Mansonia titillans (Walker, 1848)
Ochlerotatus angustivittatus Dyar & Knab, 1907
Ochlerotatus condolescens Dyar & Knab 1907
Ochlerotatus dosalis (Meigen, 1830)
Ochlerotatus dupreei (Coquillett, 1904)
Ochlerotatus fulvus (Wiedemann, 1828)
Ochlerotatus infirmatus Dyar & Knab, 1906
Ochlerotatus nigromaculis (Ludlow, 1906)
Ochlerotatus scapularis (Rondani, 1848)
Ochlerotatus serratus (Theobald, 1901)
Ochlerotatus sexlineatus (Theobald, 1901)
Ochlerotatus sollicitans (Walker, 1856)
Ochlerotatus squamiger (Coquillett, 1902)
Ochlerotatus taeniorhynchus (Wiedemann 1821)
Ochlerotatus tormentor Dyar & Knab, 1906
Ochlerotatus triseriatus (Say, 1823)
Entomología–RNLSP/InDRE Página 43 de 80 Versión No.01
Ochlerotatus trivittatus (Coquillett, 1902)
Orthopodomyia signifera (Coquillett, 1896)
Psorophora albipes (Theobald, 1907)
Psorophora ciliata (Fabricius, 1794)
Psorophora columbiae (Dyar & Knab, 1906)
Psorophora confinnis (Lynch-Arribalzaga, 1891)
Psorophora cyanescens (Coquillet, 1902)
Psorophora discolor (Coquillett, 1903)
Psorophora ferox (Von Humboldt, 1819)
Psorophora howardii Coquillett, 1901
Psorophora lutzii (Theobald, 1901)
Sabethes chloropterus (Von Humboldt, 1819)
Trichoprosopon digitatum (Rondani, 1848)
Uranotaenia sapphirina (Osten Sacker, 1868)
Wyeomyia aporonoma Dyar & Knab, 1906
Wyeomyia mitchelli (Theobald, 1905)
Determinación taxonómica Criterios de inclusión: Todos los ejemplares que pertenecen a especies de
importancia médica y que se encuentren en buen estado físico.
Criterios de exclusión: Todos los ejemplares que no se encuentren bien
preservados y/o dañados y sea imposible identificarlos taxonómicamente.
Criterio de diagnóstico: Se considera positivo a todos los ejemplares de
mosquitos con importancia médica y negativos a los que carecen de importancia
médica en México.
3. ESCORPIONES DE IMPORTANCIA MÉDICA
Los escorpiones o alacranes están representados en todos los continentes excepto
en la Antártida, pero son más abundantes y diversos en regiones tropicales y
subtropicales. El género Centruroides Marx, 1890 de la familia Buthidae (Fig. 27),
es el de mayor importancia médica en el país y principalmente se le ha estudiado
desde el punto de vista toxicológico y epidemiológico.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 44 de 80 Versión No.01
Figura. 27 Centruroides infamatus (C.L. Koch, 1844)
El género Centruroides es el más común y diverso de la familia en México,
contiene 71 especies en el Nuevo Mundo. En México se han registrado 32 especies
y cinco de ellas con taxones subespecíficos (Rein, 2010). Los alacranes como grupo
se consideran animales de amplia distribución, sin embargo, en el nivel específico
es relativamente común encontrar distribuciones restringidas, incluso a escalas
locales (Polis, 1990). El género Centruroides como muchos otros bútidos son
exclusivamente de hábitos lapidícolas que viven bajo piedras y generalmente
también bajo cortezas. Algunas especies pueden llegar a encontrarse en las partes
altas de los árboles y palmeras (Polis, 1990).
Los alacranes se distribuyen en todo nuestro país pero sólo en algunos estados se
tiene la presencia de especies que por su grado de intoxicación se consideran de
importancia médica (Fig. 27). Según el boletín de vigilancia epidemiológica los
estados que presentan una mayor incidencia por picadura de alacrán son: Colima,
Guanajuato, Guerrero, Jalisco, Michoacán, Morelos, Nayarit, Puebla, etc. Aunado a
factores como las condiciones de la vivienda en áreas rurales, tratamientos caseros,
el riesgo en áreas de trabajo en el campo y a los asentamientos irregulares (donde
el hombre invade el territorio natural de estos arácnidos) se propicia el encuentro
con el humano ocasionando que la intoxicación por picadura de alacrán sea un
gran problema de salud pública en México.
Toma, manejo y envío de muestra El laboratorio de Entomología tiene como objetivo principal realizar el diagnóstico
y control de calidad de las muestras que provienen de la Red-LESP, y el programa
prioritario es el Alacranismo. En el laboratorio de Entomología del InDRE se
estudian las muestras de alacranes ya sea con o sin importancia médica, por medio
de claves taxonómicas o a través de la experiencia del determinador que estudia el
grupo, también a través de artículos científicos y con el apoyo de material biológico
Entomología–RNLSP/InDRE Página 45 de 80 Versión No.01
de referencia de la CAIM o de otras colecciones científicas de diferentes
instituciones.
Los ejemplares deben ser depositados en frascos de plástico de boca ancha en
alcohol etílico al 70%, con su etiqueta de datos de colecta (a lápiz) en el interior del
frasco (Fig. 28) incluyendo: estado, municipio, localidad, dirección, fecha de
colecta, sitio de colecta y el nombre del colector.
Figura. 28. Frasco de plástico de boca ancha con etiqueta de datos de colecta a
lápiz
Se utiliza un microscopio estereoscópico con lámpara integrada o externa, caja de
Petri, aguja y pinzas (Fig. 29). Los ejemplares se colocan en la caja de Petri con
alcohol al 70% y también se puede agregar arena de mar en la caja para colocar al
ejemplar en cualquier posición en el caso que se tenga que revisar alguna
estructura por su ubicación.
Los puntos críticos a considerar en este método son en primer lugar la observación
del patrón de coloración, identificación morfológica del ejemplar y comparación
morfológica con otros ejemplares de la colección.
Figura.29. Identificación al microscopio estereoscópico
Entomología–RNLSP/InDRE Página 46 de 80 Versión No.01
Los algoritmos incluyen los procedimientos para la identificación taxonómica los cuales se basan en los siguientes métodos de laboratorio.
Figura. 30. Identificación taxonómica de escorpiones. Clave tabulador 1F631003
Interpretación de resultados por el laboratorio Muestra positiva: Todos los ejemplares que pertenecen a las especies de
importancia médica.
Muestra negativa: Todos los ejemplares que pertenecen a las especies sin
importancia médica.
Muestras indeterminadas: Los ejemplares adultos cuyo resultado quede a
nivel de género o sean juveniles y crías.
Muestras para diagnóstico: Los ejemplares que se envíen para identificación
taxonómica.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 47 de 80 Versión No.01
Muestras para control de calidad: Los ejemplares que se envíen para de la
identificación taxonómica con resultado del LESP a nivel de especie
Muestras rechazadas: Las muestras serán rechazadas si contienen agua; en
seco, sin etiqueta de datos de colecta, con datos de colecta a tinta, y si los
ejemplares están mal preservados.
INTERFERENCIAS
Ejemplares mal preservados que impide que se observe adecuadamente el
patrón de coloración que es importante para la determinación taxonómica y
control de calidad de los mismos. Microscopio con poca resolución.
Luz tenue o no concentrada para observar un carácter específico del
ejemplar.
Diferente tipo de luz.
LISTA DE ESPECIES (POSITIVAS) CON IMPORTANCIA MÉDICA EN
MÉXICO
(Escorpiones)
Clase Arachnida
Orden Scorpiones
Especies:
Centruroides balsasensis Ponce & Francke, 2004
Centruroides elegans (Thorell, 1876)
Centruroides hirsutipalpus Ponce y Francke, 2009
Centruroides infamatus (C. L. Koch, 1844)
Centruroides limpidus (Karsch, 1879)
Centruroides meisei Hoffmann, 1938
Centruroides noxius Hoffmann, 1932
Centruroides ornatus Hoffmann, 1932
Centruroides sculpturatus Ewing, 1928
Centruroides suffusus Pocock, 1932
Centruroides tecomanus Hoffmann, 1932
Centruroides villegasi Baldazo-Monsivaiz, Ponce-Saavedra y Flores
Moreno, 2013
Determinación taxonómica Criterios de inclusión: Todos los ejemplares que pertenecen a especies de
importancia médica y que se encuentren en buen estado físico.
Criterios de exclusión: Todos los ejemplares que no se encuentren bien
preservados y/o dañados y sea imposible identificarlos taxonómicamente.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 48 de 80 Versión No.01
Criterio de diagnóstico: Se considera positivo a todos los ejemplares de
Escorpiones con importancia médica y negativos a los que carecen de importancia
médica en México.
4. OTROS TAXA
ARAÑAS DE IMPORTANCIA MÉDICA
En el mundo existen más de 30,000 especies de arañas, de las cuales, la gran
mayoría produce veneno tóxico y mortal para sus presas (invertebrados) y en el
menor de los casos para algunos vertebrados pequeños, pero sólo un 0.6%
(aproximadamente) tiene un veneno con estructura tal, que puede llegar a ser muy
tóxico para el hombre (Díaz, 2004), y provocar lesiones muy graves como,
dermonecrósis, toxicidad sistémica e incluso la muerte. La Organización Mundial
de la Salud (OMS) considera a cuatro géneros como de gran importancia en salud
pública, debido a la composición química de gran toxicidad de su veneno, que
provocan en el hombre graves manifestaciones clínicas, los cuales son:
Latrodectus, Loxosceles, Phoneutria y Atrax.
En México se distribuyen dos géneros, Latrodectus (L. mactans y L. geometricus)
y Loxosceles (38 especies). El veneno de las especies de Latrodectus es
neurotóxico, y afecta principalmente el sistema nervioso central. Por otra parte, el
de las especies de Loxosceles, es de tipo citotóxico y ocasiona necrosis en algunos
tejidos (Fig. 31).
Figura. 31. Arañas de importancia médica. Izquierda. Latrodectus; derecha
Loxosceles
En nuestro país se tiene registrado que la tasa por mordedura de araña ha sido de
3,000 a 5,000 por año (Tay-Zavala et al., 2004). En el boletín de epidemiología de
la Secretaría de Salud, se registra el número de casos de intoxicación por animales
venenosos, sin especificar qué tipo de animal lo provoca.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 49 de 80 Versión No.01
Toma, manejo y envío de muestras
Si el ejemplar se encuentra vivo, colocar dentro de un recipiente con agua
caliente por unos 15 minutos.
Colocar en un frasco con tapa y guardar en el refrigerador por
aproximadamente una hora.
Pasar a un frasco con etanol al 70% (Fig.32).
La etiqueta deberá contener los datos siguientes: estado, municipio,
localidad, forma de colecta, lugar específico de colecta, fecha de colecta y
colectores. Otra etiqueta con los datos de la determinación taxonómica,
especie, sexo, autor, fecha de determinación y nombre del determinador, en
caso de que sea una muestra para control de calidad.
Figura. 32. Ejemplares preservados en frascos de plástico con alcohol etílico al 70%
Estudio taxonómico
El estudio taxonómico de las arañas con importancia médica, se basa en la
preparación de los ejemplares para la observación de las características
morfológicas de los adultos (hembras y machos). Los ejemplares deberán ser
preservados en frascos de plástico con tapa de rosca conteniendo alcohol etílico al
70%. La determinación taxonómica del material se realiza mediante el uso de
claves taxonómicas, o por medio de la comparación de ejemplares de referencia
depositados en la CAIM del laboratorio de Entomología del InDRE y de diferentes
colecciones científicas entomológicas y descripciones taxonómicas.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 50 de 80 Versión No.01
Muchas de las características taxonómicas para la determinación específica, se
encuentran en los órganos copuladores del macho o en las espermatecas de las
hembras (Fig. 33 y 34), que contienen los epiginios.
Los epiginios se localizan ventralmente en la parte anterior del opistódomo de la
hembra, por debajo del surco epigástrico y los pulmones por lo que se deberá
proceder a su disección. Con la ayuda de pinzas entomológicas y agujas de
disección se corta el epiginio, con mucho cuidado de no romper o maltratar las
espermatecas que se encuentran por debajo de él. Una vez extraído el epiginio, se
coloca en un tubo eppendorf de 0.1 mL con etanol al 70% y se tapa con una
pequeña torunda de algodón y a su vez, el tubo se introduce en el frasco donde se
encuentra el ejemplar adulto.
Figura. 33. Observación de los ejemplares en un microscopio estereoscópico
Finalmente una vez concluida la identificación de la muestra, cada frasco es
integrado a la CAIM del laboratorio de entomología del InDRE, con la finalidad de
incrementar el registro del acervo. Los datos de colecta y de taxonomía, se
capturan en una base de datos de Biótica y se le asigna a cada ejemplar un número
de registro.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 51 de 80 Versión No.01
Figura. 34. a) pedipalpo del macho; b) epiginio con espermatecas de la hembra
ALGORITMO
El algoritmo incluye el procedimiento para identificación taxonómica el cual se
basa en el siguiente método de laboratorio.
1) ENTO-M-08. Identificación taxonómica de arañas (Aranae: Arachnida)
Entomología–RNLSP/InDRE Página 52 de 80 Versión No.01
Figura. 35. Algoritmo para la identificación taxonómica de arañas. Clave tabulador
1F631003
Interpretación de resultados por el laboratorio Muestra positiva: Todos los ejemplares que pertenecen a las especies de
importancia médica.
Muestra negativa: Todos los ejemplares que pertenecen a las especies sin
importancia médica.
Muestras indeterminadas: Los ejemplares adultos cuyo resultado quede a
nivel de género o sean pre-adultos y crías.
Muestras para diagnóstico: Los ejemplares que se envíen para identificación
taxonómica.
Muestras para control de calidad: Los ejemplares que se envíen para de la
identificación taxonómica con resultado del LESP a nivel de especie
Entomología–RNLSP/InDRE Página 53 de 80 Versión No.01
Muestras rechazadas: Las muestras serán rechazadas si contienen agua, en
seco, sin etiqueta de datos de colecta, con datos de colecta a tinta, y si los
ejemplares están mal preservados.
LISTA DE ESPECIES (POSITIVAS) CON IMPORTANCIA MÉDICA EN
MÉXICO
(Arañas)
Clase Arachnida
Orden Araneae
Especies:
Latrodectus geometricus Koch, 1841
Latrodectus mactans (Fabricius, 1775)
Loxosceles alagoni Berea, Binford & Estévez, 2007
Loxosceles alamosa Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles apachea Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles aranea Gertsch, 1973
Loxosceles arizonica Gertsch & Mulaik, 1940
Loxosceles aurea Gertsch, 1973
Loxosceles baja Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles barbara Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles belli Gertsch, 1973
Loxosceles boneti Gertsch, 1958
Loxosceles candela Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles carmena Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles chinateca Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles colima Gertsch, 1958
Loxosceles coyote Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles deserta Gertsch, 1973
Loxosceles devia Gertsch & Mulaik, 1940
Loxosceles francisca Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles greta Berea & Estevez, 2008
Loxosceles huasteca Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles insula Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles jaca Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles luteola Gertsch, 1973
Loxosceles manuela Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles misteca Gertsch, 1958
Loxosceles mulege Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles nahuana Gertsch, 1958
Loxosceles palma Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles reclusa Gertsch & Mulaik, 1940
Entomología–RNLSP/InDRE Página 54 de 80 Versión No.01
Loxosceles rothi Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles seri Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles sonora Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles tehuana Gertsch, 1958
Loxosceles tenango Gertsch, 1973
Loxosceles teresa Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles tlacolula Gertsch & Ennik, 1983
Loxosceles valdosa Gertsch, 1973
Loxosceles yucatana Chamberlin & Ivie, 1938
Loxosceles zapoteca Gertsch, 1958
Kukulkania hibernalis (Hentz, 1842)
Determinación taxonómica.
Criterios de inclusión: Todos los ejemplares que pertenecen a especies
de importancia médica y que se encuentren en buen estado físico.
Criterios de exclusión: Todos los ejemplares que no se encuentren bien
preservados y/o dañados y sea imposible identificarlos taxonómicamente.
Criterio de diagnóstico: Se considera positivo a todos los ejemplares de
arañas con importancia médica y negativos a los que carecen de
importancia médica en México.
5. ECTOPARÁSITOS DE IMPORTANCIA MÉDICA
Los ectoparásitos son artrópodos que se alimentan de sangre de un huésped
vertebrado, los cuales pueden estar relacionados a la transmisión de agentes
patógenos que causan enfermedades en el hombre. Los piojos (Fig. 36) y las pulgas
(Fig. 37) son insectos ectoparásitos que han modificado algunas características
morfológicas para su adaptación a este tipo de vida.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 55 de 80 Versión No.01
Figura. 36. Pediculus humanus. A. Hembra vista dorsal, b. cabeza, parte anterior,
c. segmentos terminales de las patas
Las especies que se alimentan del hombre y que pueden causar algún daño
mecánico o que son capaces de transmitir algún patógeno son:
Pediculus humanus
Pediculus (=Anthropopthirus) capitis (Pediculidae)
Phthirus pubis (Pthiridae)
Las pulgas (Siphonaptera), son ectoparásitos en la etapa adulta de su desarrollo
(Fig. 37).
Figura. 37. Xenopsilla cheopis, a. hembra, vista lateral, b. parte anterior de la
cabeza
Entomología–RNLSP/InDRE Página 56 de 80 Versión No.01
En el abdomen de los machos se encuentran los órganos copuladores que son de
gran importancia para la determinación taxonómica a nivel de especie, y en las
hembras la espermateca, que tiene diferentes formas y tamaños. (Fig. 38 y 39.
Figura. 38. Espermateca
Figura. 39. Aspecto de la genitalia
masculina
La importancia médica de este grupo radica en su gran capacidad vectorial, tal es
el caso de la especie Xenopsylla cheopis, la cual es la especie transmisora más
importante de la peste bubónica, enfermedad que a través de la historia ha matado
a miles de personas en el mundo. Así como también, es el principal vector de la
Rickettsia causante del tifo murino.
Otro grupo de artrópodos ectoparásitos de importancia en salud pública son las
garrapatas (Figs. 40 y 41), las cuales pueden ocasionar daños directos como
consecuencia de sus hábitos hematófagos, así como la transmisión de un gran
número de patógenos que también afectan al hombre.
Figura. 40. Ixodidae, vista
dorsal
Figura 41. Garrapata. Vista
ventral
Entomología–RNLSP/InDRE Página 57 de 80 Versión No.01
Las diversas especies de garrapatas son de importancia médica por el daño
mecánico o directo que pueden causar al hombre, pero sólo algunas de ellas son
capaces de transmitir bacterias, virus y Rickettsia, tal es el caso de la Fiebre
Manchada, ocasionada por Rickettsia rickettsii, llevada por la garrapata café del
perro Rhipicephalus sanguineus. Esta enfermedad ha causado grandes focos
infecciosos en diversos estados de nuestro país.
Por lo anterior, es necesario estudiar adecuadamente las especies de ectoparásitos
de importancia médica, inicialmente identificar taxonómicamente las especies que
se distribuyen en nuestro país y conocer su grado de capacidad vectorial.
Toma, manejo y envío de muestras Preservación en etanol
Se puede llevar a cabo una preservación temporal de los ejemplares de
ectoparásitos, los cuales se deben colocar en frascos o en viales para
microcentrífuga de 1.5 mL (polipropileno No. 1012-00-0) con alcohol etílico al
70%; adicionalmente, se colocan dentro de frascos grandes llenos de etanol al 75%,
para así conservarse por largos períodos de tiempo (Fig.41). Los ejemplares de
garrapatas por ser individuos de tamaño grande, la mejor manera es dejarlos en
este paso y pueden conservarse por mucho tiempo.
Figura. 42. Frasco con viales para preservar muestras en alcohol al 70%
Entomología–RNLSP/InDRE Página 58 de 80 Versión No.01
Laminilla. (Bálsamo de Canadá o Euparal) En el caso de los ejemplares de piojos y pulgas, la mejor manera de preservarlos
para su estudio taxonómico es el montaje permanente, donde la preparación de los
ejemplares puede llevarse a cabo mediante lotes o individualmente mediante los
siguientes pasos (Fig. 43).
Colocar los ejemplares de una misma colecta en un godete o vidrio de reloj con
KOH al 10% en frío durante 24 a 36 horas, para llevar a cabo su aclaración y
limpieza interna.
Si se requiere acelerar el proceso, los ejemplares se introducen en un vial para
centrífuga (máximo diez en un vial, dependiendo del tamaño de los ejemplares) de
1.5 mL (polipropileno No. 1012-00-0).
Colocar con KOH dentro de un vaso de precipitados pequeño parcialmente lleno
con agua (baño María), calentar a temperatura constante antes del punto de
ebullición; el tiempo de aclaración se reduce a tan solo 30 minutos
aproximadamente.
Colocar después en agua destilada durante 10 a 15 minutos, después en ácido
acético glacial.
Posteriormente colocar en un vidrio de reloj o godete con alcohol isopropílico
durante 5-10 minutos.
Figura. 43. Material para preparación de laminillas
Entomología–RNLSP/InDRE Página 59 de 80 Versión No.01
Después sumergir en una solución 1:1 de alcohol isopropílico-aceite de clavo de 10
a 15 minutos, pasar a aceite de clavo durante 10-15 minutos para dar maleabilidad
a los escleritos y terminar de aclarar sus estructuras.
Colocar una pequeña gota de Bálsamo del Canadá sobre el portaobjetos y colocar el
ejemplar en la gota; en el caso de los piojos, colocar el ejemplar con la parte dorsal
hacia arriba y la cabeza dirigida a la parte superior, las patas estiradas lo más que
se pueda a los lados; las pulgas se colocan lateralmente, la cabeza hacia el lado
derecho y las patas estiradas hacia arriba, procurando dejar visible el lado
izquierdo (Fig. 44).
Figura. 44. Montaje en Bálsamo de Canadá
Colocar la lámina en la estufa de secado por 24 horas, enseguida colocar el
cubreobjetos (previamente cortado al tamaño proporcional del ejemplar), con unas
gotas de Bálsamo del Canadá, agregar hasta que éste se cubra completamente, de
manera que no se dañe. Colocar de nuevo la lámina en la estufa de secado. Revisar
las burbujas de aire durante los próximos días y agregar el bálsamo de Canadá si es
necesario. Una vez seco el ejemplar, observar al microscopio compuesto y llevar a
cabo su determinación taxonómica.
La laminilla es etiquetada de la siguiente forma: del lado izquierdo se colocan los
datos de colecta del ejemplar (país, estado, municipio, localidad, tipo de trampa,
lugar específico de colecta, fecha de colecta y colectores) y del lado derecho los
datos de la determinación taxonómica (especie, sexo, autor, fecha de
determinación y nombre del determinador así como la técnica empleada).
Entomología–RNLSP/InDRE Página 60 de 80 Versión No.01
El método de estudio de laboratorio se basa en la preparación de la muestra, con
montaje permanente en laminillas para su identificación taxonómica con los pasos
siguientes: maceración, deshidratación, aclaración y montaje permanente del
ejemplar, colocado en una laminilla. La determinación taxonómica permite
distinguir morfológicamente a los ejemplares procesados mediante el uso de claves
taxonómicas, comparación con material de referencia depositado en diferentes
colecciones científicas entomológicas y descripciones taxonómicas.
Finalmente, los datos de colecta y de taxonomía se capturan en una base de datos
de biótica, y se le asigna un número de colección. La laminilla es integrada a la
colección científica del laboratorio. La laminilla se coloca en la caja entomológica
de porta láminas por lo que hay que mantener la caja en posición vertical, para que
permanezcan en posición horizontal (Fig. 45).
Figura. 45. Procedimiento de identificación taxonómica
ALGORITMO
El algoritmo incluye el procedimiento para la identificación taxonómica de otros
taxa basada en el método.
1) ENTO-M-07. Identificación taxonómica de garrapatas.
Así como también en métodos de estudio para piojos y pulgas con importancia
médica.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 61 de 80 Versión No.01
Figura. 46. Algoritmo para la identificación taxonómica de otros taxa. Clave
tabulador 1F631001, 1F631003
Interpretación de resultados por el laboratorio Muestra positiva: Todos los ejemplares que pertenecen a las especies de
importancia médica.
Muestra negativa: Todos los ejemplares que pertenecen a las especies sin
importancia médica.
Muestras indeterminadas: Los ejemplares adultos cuyo resultado quede a
nivel de género o ninfa.
Muestras para diagnóstico: Los ejemplares que se envíen para identificación
taxonómica.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 62 de 80 Versión No.01
Muestras para control de calidad: Los ejemplares que se envíen para de la
identificación taxonómica con resultado del LESP a nivel de especie.
Muestras rechazadas: Las muestras serán rechazadas si contienen agua, en
seco, sin etiqueta de datos de colecta, con datos de colecta a tinta, y si los
ejemplares están mal preservados.
LISTA DE ESPECIES CON IMPORTANCIA MÉDICA EN MÉXICO
(Ectoparásitos)
Clase Insecta
Orden Siphonaptera
Especies:
Ctenocephalides felis felis (Bouché, 1835
Leptopsylla segnis (Schönherr, 1811)
Pulex irritans Linnaeus, 1758
Pulex simulans Baker, 1895
Tunga penetrans (Linnaeus, 1758)
Xenopsylla cheopis (Rothschild, 1903)
Clase Insecta
Orden Phtipthraptera
Especies:
Pediculus humanus capitis (De Geer, 1778) (referida también como:
Anthropopthirus capitis).
Pediculus humanus humanus Linnaeus, 1758
Pthirus pubis Linnaeus, 1758
Clase Acari
Familia Ixodidae
Especies:
Amblyomma americanum Linnaeus, 1758
Amblyomma cajennense (Fabricius, 1787)
Anocentor nitens Neuman, 1897
Dermacentor albipictus Packard, 1869
Haemaphysalis leporispalustris (Packard, 1869)
Ornithodorus nicollei Mooser, 1932
Othobius lagophilus Cooley & Kohls, 1940
Othobius megnini (Dugés, 1884)
Rhipicephalus sanguineus (Latreillus, 1806)
Entomología–RNLSP/InDRE Página 63 de 80 Versión No.01
LISTA DE ESPECIES CON IMPORTANCIA MÉDICA EN MÉXICO
Phlebotominae-Lutzomyia
Clase Insecta
Orden Diptera
Familia Psychodidae
Lutzomyia (Lutzomyia) cruciata (Coquillet, 1907)
Lutzomyia (Lutzomyia) diabolica (Hall, 1936)
Lutzomyia (Lutzomyia) gomezi (Nitzulescu, 1931)
Lutzomyia (Lutzomyia) longipalpis (Lutz & Neiva, 1912)
Lutzomyia (Nyssomyia) olmeca olmeca (Vargas & Díaz-Nájera, 1959)
Lutzomyia (Nyssomyia) ylephitor (Fairchild & Hertig, 1952)
Lutzomyia (Psathyromyia) cratifer (Fairchild & Hertig, 1961)
Lutzomyia (Psathyromyia) shannoni (Dyar, 1929)
Lutzomyia (Psychodopygus) panamensis (Shannon, 1926)
Lutzomyia ovallesi (Ortiz, 1952)
Lutzomyia serrana (Damasceno & Arouck, 1949)
Determinación taxonómica Criterios de inclusión: Todos los ejemplares que pertenecen a especies de
importancia médica y que se encuentren en buen estado físico.
Criterios de exclusión: Todos los ejemplares que no se encuentren bien
preservados y/o dañados y sea imposible identificarlos taxonómicamente.
Criterio de diagnóstico: Se considera positivo a todos los ejemplares de
ectoparásitos con importancia médica y negativos a los que carecen de importancia
médica en México.
ESTÁNDARES DE CALIDAD La funcionalidad de la red de entomología se base en las fases siguientes: pre-analítica y analítica. Fase pre-analítica En la fase pre-analítica se evalúa la oportunidad de toma de la muestra y calidad de la misma. Se considera una muestra adecuada cuando cumple los criterios establecidos en la
toma, manejo y envío de muestras. El indicador evalúa esta fase mediante el índice
de rechazo de muestras inadecuadas. El punto de corte del mismo es que no rebase
el 10%.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 64 de 80 Versión No.01
ÍNDICE DE
RECHAZO = Número de muestras rechazadas
Número de muestras recibidas en el laboratorio
Indicador semanal
Índice
de
rechazo
7 a 9% Enviar documento de advertencia al área con
solicitud de respuesta inmediata con medidas
correctivas.
>10% No cumple. Acción de corrección al LESP que
envía la muestra mediante correo electrónico y
oficio al director del laboratorio estatal de salud
pública.
Se espera que esta medida sea corregida en el
siguiente envío de muestras.
Fase analítica
Comprende todo el flujo de muestra dentro del proceso analítico y se utilizarán dos indicadores: 1) desempeño técnico y 2) oportunidad del proceso analítico. El indicador de desempeño técnico será obtenido a través de paneles de eficiencia 2 veces por año; y el indicador de concordancia en relación a las muestras para confirmación y control de calidad (10% de positivos y 5% de negativos) con base en el sistema vectorial de del Boletín Caminando a la Excelencia.
Indicador trimestral Índice de desempeño técnico
CONCORDANCIA =
Número de muestras confirmadas para control de calidad por el
InDRE
Número de muestras remitidas para CC por el LESP
X 100
X 100
Entomología–RNLSP/InDRE Página 65 de 80 Versión No.01
CRITERIO DE EVALUACIÓN Índice de
desempeño
>90% Sobresaliente
70 a
89%
Satisfactorio. Se indican medidas correctivas para mejorar
y cumplir en tiempo mínimo de 2 meses y se observa la
continuidad del diagnóstico.
50 a
69%
Mínimo. Se suspende el diagnóstico por 2 meses y se dan
recomendaciones para cumplir, así como una evaluación
al término de los 2 meses, para reincorporarlo a la red de
diagnóstico.
Se envía oficio al director del LESP correspondiente a
epidemiología estatal, director o subsecretario de servicios
de salud y al secretario de salud estatales
<50% Deficiente. No se incorpora a la red de diagnóstico o se
suspende el diagnóstico hasta que el laboratorio cumpla
con un nivel satisfactorio.
Se envía oficio al director del LESP correspondiente, a
epidemiología estatal, director o subsecretario de servicios
de salud y al secretario de salud estatales, con copia a la
subsecretaría de promoción y prevención de la salud.
Indicador semestral
Índice de desempeño técnico
EVALUACIÓN DEL DESEMPEÑO =
Paneles de eficiencia aprobados con el
90% o más
Paneles recibidos
Criterio de evaluación
De acuerdo al Procedimiento ENTO-P-05. Procedimiento para la evaluación de la
competencia técnica a través de ensayos de aptitud a la RNLSP.
Índice de desempeño
86-100% Muy satisfactorio 76 a 85% Satisfactorio. Se indican sugerencias para mejorar 60 a 75% Regular. Se indican correcciones para cumplir y mejorar
su nivel. Se envía oficio al director del LESP correspondiente.
<59% No satisfactorio. No podrá participar en el siguiente panel de eficiencia hasta cumplir con una capacitación aprobatoria que cumpla con el nivel de satisfactorio o muy satisfactorio. Se envía oficio al Director del Laboratorio Estatal de Salud Pública correspondiente.
X 100
Entomología–RNLSP/InDRE Página 66 de 80 Versión No.01
Captura de datos y resultados
De acuerdo al Procedimiento ENTO-P-03. Procedimiento para la elaboración y
emisión de resultados.
Programa de evaluación externa del desempeño
De acuerdo al Procedimiento ENTO-P-05. Procedimiento para la evaluación de la
competencia técnica a través de ensayos de aptitud a la RNLSP.
Es importante que los laboratorios de la red de entomología que requieran ser
evaluados mediante ensayos de aptitud, cumplan con los siguientes criterios
establecidos en el procedimiento ENTO-P-05.
Criterios de selección de la RNLSP para cumplir con la evaluación
mediante ensayos de aptitud:
Los laboratorios de entomología de la RNLSP que consideren dentro de su marco
analítico básico ser evaluados mediante ensayos de aptitud en el área de
Entomología deberán cumplir plenamente con los siguientes criterios:
a) El personal de la RNLSP deberá cumplir con una capacitación en servicio
aprobatoria en el laboratorio de entomología del InDRE y específicamente en
el grupo para el cual se le hará la evaluación.
b) Haber remitido muestras para control de calidad durante tres meses
diferentes en un periodo semestral.
c) Obtener en promedio mayor o igual al 85% en las tres evaluaciones del
porcentaje de correlación de las muestras remitidas para control de calidad.
d) Haber asistido a un curso anual del laboratorio de entomología.
e) Los LESP deberán contar con un laboratorio o área de entomología donde
puedan procesar las muestras y que su personal cuando menos tenga un año
de antigüedad en el área.
f) Los laboratorios de la RNLSP deberán completar el formato ENTO-F-28
antes de cada participación en los ensayos de aptitud. El cual se les hará
llegar cuando menos dos mes antes del envío programado de las muestras.
g) Sugerencia, deberán tener una capacitación en el uso de dispositivos médicos
(microscopios).
h) Los laboratorios de la RNLSP que no cumplan con los criterios indicados en
los puntos anteriores (A al F), no podrán participar en la evaluación mediante
ensayos de aptitud hasta cumplir con los requisitos indicados.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 67 de 80 Versión No.01
CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES Se indican las actividades de enseñanza y evaluación de la competencia técnica a la
red de entomología.
Cronograma de actividades
ACTIVIDAD E
N
E
F
E
B
M
A
R
A
B
R
M
A
Y
J
U
N
J
U
L
A
G
O
S
E
P
O
C
T
N
O
V
D
I
C
Curso teórico-practico √
Capacitaciones en Servicio √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √ √
Envío del primer panel a la
RNLSP que cumplan con criterios √
Recepción de resultados del Panel
en el InDRE √
Envío de resultados a la RNLSP √
Envío del segundo panel a la
RNLSP que cumplan con criterios √
Recepción de resultados del Panel
en el InDRE √
Envío de resultados a la RNLSP √
COLECCIÓN DE ARTROPODOS CON IMPORTANCIA MÉDICA-CAIM El objetivo de la colección es el preservar y conservar el acervo de la colección
biológica del laboratorio de entomología del InDRE, para proveer información
para la vigilancia, así como el de proveer diagnóstico, investigación, enseñanza y
difusión, generando conocimiento sobre la distribución, sistemática, ecología y
otros campos de aplicación para los artrópodos con importancia médica en
México.
Las actividades están basadas en el procedimiento ENTO-P-04. Colección de
Artrópodos con Importancia Médica-CAIM.
Chinches Triatominae Actualmente la colección biológica del InDRE (Figs. 47 y 48) cuenta en su acervo
con más de 1,000 especies de nombres nominales de diferentes taxanos que
representan más de 350,000 ejemplares curados, los cuales han sido catalogados,
rotulados y computarizados con fines de apoyo a la red de entomología en relación
a muestras de referencia, enseñanza e investigación.
La incorporación a la colección de nuevo material biológico y bases de datos de
colectas que incluyen nuevos datos de distribución de diversos grupos, tienen
implicaciones de importancia médica para la salud pública de México.
El material tipo corresponde actualmente a más de 152 especies de diferentes
taxones en su mayoría al orden Díptera, los cuales se encuentran conservados en
Entomología–RNLSP/InDRE Página 68 de 80 Versión No.01
alcohol etílico al 75%, alfiler entomológico y laminilla con Bálsamo de Canadá.
Cabe mencionar que esta colección contiene material tipo y ejemplares que no se
encuentran representados en otras colecciones científicas.
Figura. 47. Colección de chinches Triatominae preservadas en alfiler entomológico
Montaje en alfiler entomológico
Se realiza con alfileres entomológicos del número 1 o 2 de acuerdo al tamaño del
ejemplar y alfileres de costura para darle una forma natural (Fig. 48-51).
Figura 48. Montaje en alfiler entomológico
Posteriormente se colocan las etiquetas con los datos de colecta y taxonómicos, así
como el número de referencia, y se guardan en una caja entomológica cuidando de
tener cierta distancia entre ellos para evitar que se dañen, los datos son
incorporados a una base de datos.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 69 de 80 Versión No.01
Figura. 49. Dipetalogarter maxima. Adulto macho
Figura. 50. Montaje en alfiler entomológico. Triatoma dimidiata, macho
Entomología–RNLSP/InDRE Página 70 de 80 Versión No.01
Figura. 51. Montaje en alfiler entomológico. Triatoma phyllosoma, hembra
Preservación en seco
Para conservar los ejemplares en seco, colocar en la cajita pastillera (Fig. 52), una
capa de algodón en ambas partes de la caja para amortiguar golpes y movimientos
bruscos, así como papel cebolla para evitar que los tarsos de enreden con el
algodón, las etiquetas de datos se pueden colocar en una de las tapas entre el
algodón y el papel cebolla, se recomienda colocar otra etiqueta con el número de
referencia en la cara externa de la caja para poder identificarla sin abrirla y evitar
dañar el material.
Figura.52. Preservación en seco en caja pastillera
Entomología–RNLSP/InDRE Página 71 de 80 Versión No.01
Preservación
En las cajas entomológicas de madera y en las cajitas pastilleras, se puede
adicionar un pequeño contenedor con cristales de naftalina o paradiclorobenceno
para conservarlas libres de plagas que pudieran dañarlos Fig. 53.
Figura. 53. Preservación de material en caja pastillera con naftalina
De preferencia los ejemplares y las cajas pastilleras deberán guardarse en áreas
con flujo y condiciones ambientales controladas Fig. 54.
Figura. 54. Gabinetes entomológico para la conservar el material montado preservado en alfiler entomológico.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 72 de 80 Versión No.01
Escorpiones Los ejemplares de escorpiones son preservados en frascos estándar de plástico con
capacidad de 180 mL (Fig. 55) y con las siguientes etiquetas: etiqueta de datos de
colecta y etiqueta de identificación taxonómica, para este grupo se agrega otra
etiqueta, que lleva el número de oficio, la fecha y el número de muestra de la
relación enviada por el LESP para poderla localizar en base de datos de Excel (Fig.
56).
Figura. 55. Frascos de poliestireno con empaque para colección de escorpiones.
Figura.56. Etiquetas con
datos de colecta, determinación taxonómica y número de
oficio contenidas en recipiente de plástico para colección de escorpiones.
Por otra parte, los ejemplares se registran en una base de datos con el sistema de
información Biótica, el cual tiene como objetivo la captura de información de
instituciones que albergan colecciones biológicas científicas. Cada recipiente
conteniendo una etiqueta con un número de clave CAIM (Colección de Artrópodos
con Importancia Médica).
ALMACENAMIENTO
Se almacenan en cajones de madera (Fig. 57) y cada cajón tendrá su etiqueta para
identificar la especie que se encuentra en cada uno de ellos, estos cajones a su vez
se encuentran dentro de gavetas de metal diseñadas sólo para este grupo de
artrópodos.
MÉXICO, JALISCO San Martín Hidalgo San Martín Hidalgo
Libertad 77 13-mayo-08
Patio Sin dato
Centruroides infamatus ornatus
1♀ , 11♂ ♂ V. Vidal A. Det. 27-mayo-2008
Oficio: 263 Fecha:15-mayo-
2008 Muestra: 3/8
Entomología–RNLSP/InDRE Página 73 de 80 Versión No.01
Figura. 57. Almacenamiento de alacranes en gavetas dentro de la colección CAIM.
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD En el caso de manipulación de fluidos o disección, así como la manipulación de
triatóminos vivos, la persona que lo realiza se debe proteger con guantes, bata y
careta, así mismo deberá de realizarse un control serológico con intervalo de por lo
menos 6 meses para búsqueda de anticuerpos anti T. cruzi y en caso de resultar
positivo se suministrará el tratamiento específico de acuerdo a la normatividad
vigente.
En el caso del montaje de larvas se debe tener cuidado con la manipulación de
reactivos, como es el caso del Xilol, ya que tiene riesgo para la salud humana. La
preservación de mosquitos con p-diclorobenceno debe hacerse en un lugar
ventilado.
Entomología–RNLSP/InDRE Página 74 de 80 Versión No.01
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INSTITUTO DE DIAGNÓSTICO Y REFERENCIA EPIDEMIOLÓGICOS
Clave ENTO-F-30/0
Emisión 26/agosto/2013
Laboratorio de Entomología
Página 1 de 1 Relación de muestras de mosquitos (Culicidae) de la RNLSP remitidas al Laboratorio de Entomología del InDRE para el Diagnóstico y/o Control de Calidad
GRUPO TAXONÓMICO: _________________
ESTADO:_________________________
NO. OFICIO: _________________________
FECHA DEL OFICIO:____________________
TIPO DE ESTUDIO: _______ CONTROL DE CALIDAD:____________
DIAGNÓSTICO:____________________
TIPO DE MUESTRA: ______ Ovitrampa:_________________
Larva de IV estadio:________________
Adultos:______________
No. Folio o Registro RNLSP
No. Frasco/ tubo
Municipio Localidad Dirección Fecha
Colecta Sitio
Colecta Colector
No. Huevecillos (Ovitrampa)
Determinación Taxonómica
RNLSP No.
Ejemplares InDRE
No. ejemplares
Analista LESP: _________________________
NOTA: El Laboratorio de la RNLSP, deberá cancelar con una línea diagonal las celdas
que no se utilicen
Analista InDRE: ____________________________________________________
Revisó Jefe del Laboratorio Entomología ______________________________
Entomología–RNLSP/InDRE Página 79 de 80 Versión No.01
INSTITUTO DE DIAGNÓSTICO Y REFERENCIA EPIDEMIOLÓGICOS
Clave: ENTO-F-19/0
emisión: 26-agosto-13
LABORATORIO DE ENTOMOLOGIA
Página 1 de 1 Relación de Muestras de Alacranes para Diagnóstico y Control de Calidad remitidas por la RNLSP al Laboratorio de Entomología del InDRE
ESTADO:
NO. OFICIO:
FECHA DE OFICIO: TIPO DE ESTUDIO
DIAGNOSTICO:
CONTROL DE CALIDAD:
No. Frasco
No. Folio o Registro RNLSP
Municipio Localidad Dirección Fecha
Colecta Sitio
Colecta Colector
Determinación Taxonómica
RNLSP
No. ejemplares y
estadio
Determinación Taxonómica
InDRE
No. ejemplares y estadio
Analista LESP _____________________________________ NOTA: Cuando las muestras remitidas son para diagnóstico, la columna "Determinación Taxonómica RNLSP", deberá cancelarse con una línea (así como todas las celdas que so se utilicen), en el caso de que las muestras sean para el CC deberá incluir la determinación taxonómica a nivel de especie Indicar con una H cuando el ejemplar sea una hembra y una M cuando el ejemplar sea macho.
Analista InDRE:___________________________________
Revisó: _________________________________________
SECRETARÍA
DE SALUD
Entomología–RNLSP/InDRE Página 80 de 80 Versión No.01