Manual de Ecologia y Salud

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    NDICE

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    UNIVERSIDADNACIONALAUTNOMADEMXICODr. Jos Narro Robles

    Rector

    Dr. Sergio M. Alcocer Martnez de CastroSecretario General

    Mtro. Juan Jos Prez CastaedaSecretario Administrativo

    Dra. Rosaura Ruiz GutirrezSecretaria de Desarrollo Institucional

    MC Ramiro Jess SandovalSecretario de Servicios a la Comunidad

    Lic. Luis Ral Gonzlez PrezAbogado General

    ESCUELA NACIONAL DE ENFERMERA Y OBSTETRICIA

    Lic. Severino Rubio DomnguezDirector

    Mtra. Dolores Zarza ArizmendiSecretaria General

    Mtra. Gabriela Garza InfanteSecretaria Administrativa

    Lic. Pilar Sosa RojasJefa de la Divisin de Estudios Profesionales

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    MANUALDE PRCTICAS

    DEECOLOGA Y SALUD

    Gabriel Flix Burgos

    Ofelia Flores Jurez

    Vctor Valverde Molina

    Lilia Sevilla Romero

    Mara del Carmen Servin Rodas

    Martha Patricia Jurez Morales

    LICENCIATURA EN ENFERMERA Y OBSTETRICIA 2009

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    NDICE

    pgina

    Prlogo. 5

    Introduccin 7

    PRCTICAS OBLIGATORIAS

    1. Microscopio ptico. 13

    2. Terrario... 22

    3. Triada ecolgica.. 37

    4. Clulas eucariota y procariotas.. 39

    5. Respi racin anaerobia.. 47

    6. Influencia de los factores bit icos y abiticos.. 55

    7. Contaminacin atmosfrica. 64

    8. Tincin de Giemsa para observar leucoci tos.. 699. Reaccin antgeno-anticuerpo. 73

    10. Reacciones febri les.. 78

    11. Tincin de Gram 85

    12. Toma de muestras 91

    13. Contaminacin de manos... 102

    14. Ecologa microbiana ambiental. 107

    15. Hongos. 112

    16. Protozoarios... 117

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    17. Tenias .. 130

    18. Nematodos..... 136

    PRACTICAS COMPLEMENTARIAS

    19. Agua............................................................................................... 142

    20. Tincin de Ziehl -Neelsen.............................................................. 147

    21. Acuar io ........................................................................................... 152

    PRCTICAS DE INVESTIGACIN EXPERIMENTAL

    Construccin de columnas para el estudio de diferentesecosistemas y sus interrelaciones.............................................

    159

    Influencia de la concentracin salina en la morfologa deAr temia gracilis.............................................................................

    165

    Glosario.................................................................................................. 167

    Abreviaturas.......................................................................................... 173

    Programa terico-prct ico de Ecologa y Salud................................ 174

    Bibliografa............................................................................................ 182

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    PRLOGO

    Con este manual, la Escuela Nacional de Enfermera y Obstetriciacontina su proyecto de publicacin de textos, que tienen la caracterstica de

    ser materiales de apoyo actualizados, didcticos, grficos y econmicos al

    alcance de todos los estudiantes.

    En noviembre de 1985 se edit por primera vez el Manual de Prcticas

    de Ecologa y Salud para los estudiantes de Enfermera. En 1994 se elabor la

    segunda edicin con ilustraciones a colores y en ella se incluan prcticas

    nuevas, se eliminaron otras y se actualizaban las restantes.En 2005, aparece la tercera edicin, adecuada al Plan de Estudios para

    la Licenciatura en Enfermera y Obstetricia actualizacin 2000, se cambian de

    de obligatorias a complementarias las prcticas de acuario, microscopio y

    preparacin de medios de cultivo por no sacrificar peces, abordarse en otros

    niveles y ser funcin del tcnico de laboratorio respectivamente; se agregan

    prcticas de apoyo a la comprensin del ambiente y de aplicacin a la prctica

    de Enfermera, es el caso de las prcticas de clorofila, la distribucin de las

    comunidades microbianas, la fagocitosis y la contaminacin de las manos; se

    actualizan el resto de las prcticas y se mantiene la inclusin de ilustraciones

    para facilitar el proceso enseanza-aprendizaje.

    Esta cuarta edicin del Manual de prcticas de ecologia y salud

    conserva la organizacin adoptada el las ediciones anteriores, esto es la trada

    ecolgica, pero hace cambios importantes en los factores del ambiente al

    sustituir las prcticas obligatorias sobre observacin de diferentes tipos de

    clorofila y factores ambientales en la distribucin de las comunidades

    microbianas por su escasa relacin con los contenidos del programa de la

    asignatura y el mnimo apoyo en la formacin y el quehacer profesional del

    Licenciado (a) en Enfermera y Obstetricia por las prcticas de la trada

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    ecolgica y la influencia de los factores biticos y abiticos en el cambio de

    color de los peces. Se agregan prcticas complementarias y de investigacin,

    se amplan modifican y actualizan las restantes prcticas. Este manual dirigido

    a Enfermera no pretende incluir todos los temas en el amplsimo campo de la

    ecologa, inmunologa microbiologa y parasitologa, hay la confianza de que

    con la participacin de la Comisin de Revisin de Planes y Programas de

    Estudios del H. Consejo Tcnico de la ENEO-UNAM, de los profesores que

    imparten la asignatura, de los presidentes de academia de las reas de

    Enfermera y de los tcnicos de laboratorio, esta edicin y las subsecuentes se

    irn perfeccionando.

    Se agradece a los profesores que imparten la asignatura de ecologa y

    salud en la Licenciatura en Enfermera y Obstetricia sus valiosas aportaciones

    en la elaboracin de este manual y mi reconocimiento de manera especial a la

    profesora Ofelia Flores Jurez por sus propuestas de trada ecolgica,

    influencia de los factores abiticos y abiticos y la de investigacin titulada

    influencia de la concentracin salina en la morfologa deArtemisa gracilis; a la

    profesora Lilia Sevilla Romero por su prctica de respiracin anaerobia y al

    profesor Vctor Valverde Molina por su prctica de investigacin titulada

    Cultivo del alga espirulina en el laboratorio.

    Lic. Severino Rubio Domnguez. Director de la ENEO-UNAM.

    2009.

    INTRODUCCIN

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    En la actualidad la ecologa no slo se considera como una cienciabiolgica, sino tambin como una ciencia humana. El futuro de nuestra especie

    depende de lo bien que se logre comprender esta vision y aplicarla hacia unmanejo ms sabio de los recursos naturales. El hombre vive con esta calidadde vida debido tanto a la organizacin econmica y el desarrollo cientfico ytecnolgico como a la economa natural (naturaleza) necesaria para lasustentabilidad a largo plazo y en realidad para la existencia misma del gnerohumano. Tambin es cierto que los objetivos de salud pblica se constituyenas mismos dentro de las variantes de la ecologa, ya que no es posibleimaginar al humano saludable en un mundo erosionado, escaso de recursos ycontaminado. No hay que olvidar que despus de todo, el hombre pertenece a

    este frgil y bello planeta y no el planeta pertenece a este ser pensante ytecnolgico.Para fines de comprensin de la salud pblica e individual, del ecosistema

    se separan artificialmente a los factores del husped y del parsito que junto alambiente determinan el proceso salud-enfermedad. El husped y el parsitohan desarrollado a travs de los tiempos evolutivos una serie de relacionesestrechas que los han modificado mutuamente hasta lograr una simbiosisconocida como relacin husped-parsito.

    En este manual se describen ejercicios experimentales que muestran lascaractersticas del ambiente, su deterioro y la contaminacin, as como las delhusped y del parsito que determinan esta relacin, se hace nfasis en losmecanismos defensivos del husped y los factores que lo debilitan, as comoen las caractersticas generales del parsito, las formas de evidenciar supresencia con fines diagnsticos y sus variadas formas de transmisinintegradas al concepto de cadena infecciosa indispensable para fundamentaracciones de Enfermera tendientes a prevenir las enfermedades infecciosas.

    En todo lo anterior, no hay que olvidar que quien determin estos cambiosfu el ambiente en las diferentes regiones del planeta y en los distintos tiemposevolutivos, pero hasta el tiempo actual la relacin del ambiente con el parsito y

    el husped y entre estos dos ltimos sigue cambiando, por lo que el procesosalud-enfermedad se vuelve cada da ms dinmico, lo que obliga a losprofesionales de la salud, es el caso de Enfermera a estar actualizados en latrada ecolgica para cada una de las enfermedades ms importantes.

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    Al igual que las ediciones anteriores, este manual presenta una tabla de lasabreviaturas frecuentemente utilizadas en ecologa y salud ubicada despusdel glosario como anexo 1.

    A diferencia de las otras ediciones, el manual incluye en cada prctica unafrase clave que se enuncia despus del ttulo en la parte superior derecha y espropuesta derivada de la experiencia docente del autor principal y de laconsulta de variada informacin bibliogrfica que orienta, sintetiza y enfatiza elconcepto medular de la prctica a realizar.

    Por ltimo, al ser el manual de prcticas de ecologa y salud un documentosemiprogramado, se agregan actividades de busqueda de informacin quefacilitan el aprendizaje de los temas abordados en cada prctica.

    PROGRAMA DE PRCTICAS DE ECOLOGA Y SALUD (48 horas)

    Las prcticas de Laboratorio en Ecologa y Salud del plan de estudios de la

    Licenciatura en Enfermera y Obstetricia estn diseadas de tal forma que

    ayuden a los estudiantes a observar, comprender y reafirmar los conocimientos

    adquiridos durante el curso terico.

    La primera prctica es un recordatorio de las precauciones, cuidados y el uso

    correcto que se debe tener al manipular el microscopio ptico, para evitar un

    mal uso del equipo durante las prcticas siguientes.

    Las siguientes seis prcticas estn enfocadas al anlisis y comprensin de los

    factores del medio ambiente, como son el ecosistema, la triada ambiente-

    hospedero-agente, diversidad de organismos, respiracin anaerobia, el flujo de

    la energa, respuesta de los organismos a los factores biticos y abiticos, y la

    contaminacin ambiental, donde se hace especial nfasis en sta ltima, ya

    que se vive en tiempos de alto riesgo, debido a la explosin demogrfica, laexpansin de las ciudades, la industrializacin y el incremento de vehculos

    automotores, de tal manera que cada uno de los que habitamos este planeta,

    tenemos la obligacin de cuidar y preservar la casa donde nos desarrollamos.

    En estas prcticas el alumno ir tomando conciencia de los riesgos de la

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    contaminacin del aire, agua, alimentos y suelo y las acciones que corresponde

    para evitarla en la promocin de la salud.

    Para los factores del hospedero se incluyen varias prcticas, donde se aplican

    los conocimientos de inmunologa, las clulas que participan en los

    mecanismos de defensa especfica e inespecfica, la reaccin antgeno-

    anticuerpo y las reacciones febriles.

    En las prcticas siguientes, se aplican los conocimientos del agente etiolgico

    donde se estudian varios aspectos de los microorganismos (tincin, forma e

    identificacin parcial de las bacterias y de los hongos), las caractersticas

    morfolgicas de los parsitos (protozoarios, tenias y nematelmintos) quepermiten al alumno comprender e identificar a los agentes causales de las

    enfermedades infecciosas y parasitarias.

    OBJETIVOS

    Identificar en un modelo ecolgico (ecosistema) los elementos e

    interrelaciones, as como la influencia de su alteracin sobre la flora y la fauna,

    para planear y aplicar acciones de enfermera en la comunidad.

    Identificar los mecanismos especficos e inespecficos que el hospedador utiliza

    para regular su relacin con el parsito,

    Identificar las caractersticas generales de los microorganismos y parsitos que

    ayuden al diagnstico y explique los mecanismos bsicos de patogenicidad.

    Realizar la toma de muestras ms utilizadas en el diagnstico microbiolgico,en donde el personal de enfermera es el responsable de ello

    A partir de la identificacin de factores que afectan la salud de una persona o

    grupos de personas, hacer un plan de atencin individual comunitario para la

    prevencin y control de las enfermedades infecciosas.

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    A travs de situaciones experimentales, los alumnos identificarn la interaccin

    del ambiente, hospedero y parsito en el proceso salud enfermedad y

    propondrn medidas para mejorar la salud y el medio ambiente.

    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

    Las actividades de aprendizaje propuestas en este manual de prcticas se

    sustentan en los contenidos de cada una de las prcticas y se encuentran

    detalladas al final de cada una de ellas. Las actividades generales son

    Construccin de un ecosistema en el cual se observe la manutencin y

    el reciclaje de energa que se lleva a cabo dentro del mismo ecosistema

    Investigacin de los niveles de contaminacin de la atmsfera

    proponiendo medidas especficas para el saneamiento del medio

    ambiente en su comunidad.

    Construccin de un modelo ecolgico.

    Realizar in vitro pruebas inmunolgicas.

    Toma de muestras, observacin y cultivo de microorganismos para

    investigar la presencia de agentes patgenos.

    Observacin de protozoarios, de las formas adultas y larvarias de los

    principales helmintos parsitos.

    METODOLOGA

    La forma como se llevarn a cabo las prcticas ser la siguiente:En un primer momento se recuperar la informacin terica bsica de lamateria y de otras asignaturas sobre la prctica que se realizar (sntesis inicialo apertura).En un segundo momento se llevar a cabo el desarrollo experimental deacuerdo con la metodologa previamente comentada y estudiada.En un tercer momento se analizarn los resultados, transfirindolos a

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    situaciones generales.Finalmente, el alumno realizar las actividades de aprendizaje y expondr susresultados y conclusiones.

    CRITERIOS DE ACREDITACIN

    Reporte analtico escrito de cada uno de los experimentos realizados en lassesiones prcticas llevando a cabo las actividades de aprendizaje e indicandolas acciones de enfermera en las prcticas que as lo indiquen.Resolucin de casos.

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    PRCTICA 1

    OBJETIVOS

    Conocer las partes mecnicas, pticas y el sistema de iluminacin delmicroscopio.

    Manejar correctamente las partes mecnicas.

    Manejar adecuadamente el sistema ptico.

    Manejar adecuadamente el sistema de iluminacin.

    Conocer los cuidados que se deben tener con el microscopio.

    Identificar los factores que daan el microscopio.

    INTRODUCCIN

    Un microscopio simple es una lente de aumento ordinario con la cual se

    puede observar gran nmero de objetos microscpicos.

    El microscopio compuesto, difiere del microscopio simple, en que tiene

    dos sistemas de lentes, uno conocido como objetivo y el otro por ocular, el

    primero montado en el revlver y el segundo en el tubo del ocular; la imagen

    que el ojo observa, tiene un aumento igual al producto de la multiplicacin de la

    lente ocular por la lente objetivo.

    La potencia de un microscopio ptico compuesto se mide por el poder de

    resolucin que es la distancia que debe separar a los objetos puntiformes para

    que se vean como dos imgenes distintas.

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    El poder de resolucin del microscopio ptico compuesto en condiciones

    ideales es de aproximadamente la mitad de la longitud de onda de la luz

    empleada por lo que si ilumina con luz amarilla de longitud de onda de 0.4 m,

    los dimetros ms pequeos distinguibles son aproximadamente de 0.2 m. En

    los microscopios de la escuela para calcular la mxima amplificacin que

    permita una adecuada resolucin se multiplica los dimetros del objetivo de

    inmersin (100 x) por los dimetros del ocular (15x), haciendo posible as la

    amplificacin del objeto 1,500 veces; por lo que objetos de

    1.0 m, pueden ser amplificados a 1.5 mm, resultando as claramente visibles.

    MATERIAL POR EQUIPO

    1 microscopio 1 hoja papel seda. 1 lienzo 1 cubreobjetos. 1 portaobjetos

    METODOLOGA

    Las partes mecnicas, pticas y el sistema de iluminacin del

    microscopio.

    Las diferentes partes del microscopio compuesto se ven en el diagrama;

    consta de:a. Sistema ptico: est formado por el ocular, los objetivos y el

    condensador.b. Sistema mecnico: est formado por una base, el brazo, el tubo, la

    platina, el revlver, el tornillo macromtrico, el tornillo micromtrico,los tornillos del diafragma y el condensador, el carro del microscopioy los seguros superior y lateral de la cremallera.

    c. Sistema de iluminacin: est formado por una fuente luminosa, uninterruptor y los filtros de luz.

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    El sistema ptimo puede ser muy variado segn el tipo de microscopiode que se trate; as puede tener un solo ocular o puede ser binocular, losobjetivos por lo regular son 3 (seco dbil 10x, seco fuerte 43x y objetivo deinmersin 100x), montados en un revlver mvil y por ltimo el condensadorque tiene un juego de lentes y filtros (diafragma) que sirve para concentrar yorientar los rayos luminosos sobre la preparacin.

    El sistema mecnico consta del tubo del ocular unido en su parte inferiora una torre giratoria la cual est montada en el extremo superior del brazo delmicroscopio y en la otra cara de este extremo est el revlver con sus 3objetivos. En la parte media del brazo est la platina montada por engranes(cremalleras) la cual se sube o se baja por medio de dos tornillos, el msgrande llamado macromtrico o de movimientos rpidos y otro ms pequeo

    llamado micromtrico o de movimientos lentos. La cremallera puede tener dostornillos, uno superior que limita los movimientos hacia arriba y otro lateral quefrena a los engranes e impide los movimientos de los tornillos macromtricos ymicromtricos.

    Sobre la platina esta el carro del microscopio, que por medio de dostornillos desplaza a la preparacin a cualquier lado sobre la superficie de laplatina. Por debajo de la platina se encuentra el condensador de la luz que esaccionado por un tornillo hacia arriba o hacia abajo y, adems tiene una

    palanca para abrir o cerrar el diafragma, permitiendo el paso de mayor o menorcantidad de luz.

    La lmpara del microscopio es una fuente de luz mvil, empotrada en laparte superior de la base del microscopio con un botn en la parte lateral de labase que sirve para encenderla, regular su intensidad o apagarla. La toma dela corriente elctrica se hace mediante un cable con una clavija en su extremo.

    Manejo adecuado del microscopio.

    1 Sacar el microscopio de la cubierta de plstico o de su caja sosteniendoel brazo del microscopio con una mano y con la otra la base.

    2 Colocar el microscopio a aproximadamente 15 cm del borde de la mesa

    de laboratorio, de tal modo que el brazo del microscopio, puede hacia el

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    operador.

    3 Examinar el microscopio y, con la ayuda del diagrama, identificar sus

    componentes que se indican a continuacin:

    a) Ocular i) Tornillo del diafragma.b) Carro del microscopio j) Tornillo del condensador.c) Revlver k) Tornillo micromtrico.d) Objetivo seco dbil l) Tornillo macromtricoe) Objetivo seco fuerte m) Seguro superior de la cremallera.f) Objetivo de inmersin. n) Seguro lateral de la cremallera.g) Platina o) Fuente de luz.h) Condensador.

    4 Limpiar todos los lentes con papel seda.

    5 Conectar la fuente de luz y encenderla.

    6 Colocar el objetivo seco dbil en posicin paralela al haz de luz (sentir

    un "chasquido" cuando haya quedado bien colocado)7 Poner la preparacin del portaobjetos sobre la platina del microscopio.

    8 Acomodarla porcin de la preparacin que se va a examinar con los dos

    tornillos del carro del microscopio de tal manera que quede situada con

    la apertura central de la platina.

    9 Bajar el objetivo seco dbil con la ayuda del tornillo macromtrico a

    aproximadamente medio centmetro por encima del cubreobjetos.

    10 Elevar el condensador al mximo con la ayuda del tornillo del

    condensador.

    11 Observar por el ocular y luego mover el tornillo del diafragma de tal

    modo que ste se abra a su lmite mximo. Tal lmite se determina

    mirando por el ocular y observando los cambios en la intensidad de la

    luz al mismo tiempo que se manipula el tornillo del diafragma; si la luz es

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    demasiado brillante hacer los ajustes necesarios.

    12 A continuacin enfocar hacia arribacon el tornillo micromtrico hasta

    que la muestra se observe con toda claridad.

    13 Para cambiar de objetivos girar el revlver del microscopio. Elmicroscopio debe permanecer en foco con cualquier objetivo o requerir

    pequeos ajustes con el tornillo micromtrico.

    14 Hay que recordar que algunos tipos de microscopios no tienen tope de

    bajada que detenga la platina antes de llegar a los objetivos,por lo que

    puede romper las lentes o estrellar la preparacin. Para evitar esto

    es necesario que el estudiante acerque la platina observando por un

    lado del microscopio y despus observar por el ocular girando el tornillomicromtrico hacia arribacon el objeto de evitar que la lente entre

    en contacto con la preparacin.

    Cuidados que se deben tener con el microscopio y factores que daan sufuncionamiento y conservacin.

    El buen funcionamiento del microscopio depende del mantenimientoadecuado y el uso correcto. A continuacin se dan algunas instrucciones tiles.

    1. El microscopio debe ser guardado en un lugar seco y al cubierto del

    polvo.

    2 Al trasladar el microscopio de un sitio a otro, se debe tomar el brazo del

    microscopio con una mano y colocar la otra mano debajo de la base

    para sostenerlo

    manteniendo el microscopio en posicin vertical. En el caso de que lafuente de luz no se de tipo integrado, llevar primero el microscopio a la

    mesa de laboratorio y despus volver por la fuente de luz. No transportar

    ambas partes al mismo tiempo.

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    1. Mantener el microscopio por lo menos a 15 centmetros del borde de la

    mesa de laboratorio.

    2. No manejar las lentes con los dedos; el sudor contiene cidos grasos y

    otras substancias que pueden opacar las lentes.

    3. Antes y despus de usar el microscopio, deben limpiarse las lentes

    accesibles con papel seda. Las lentes accesibles son: ocular, objetivos y

    condensador.

    4. Los lentes objetivos, el ocular y el condensador no deben ser

    desarmados por el estudianteporque podra permitir que se

    introdujera polvo al interior del microscopio el cual solo se podra limpiar

    mediante el desarme de las lentes y esto solo puede hacerlo personal

    especializado. Adems hay que recordar que el poder de resolucin del

    microscopio depende de que todos los lentes estn centrados y a la

    distancia correcta unas de otras.

    5. Cuando se usa aceite de inmersin, una vez terminada la observacin,

    hay que quitar el aceite que ha quedado en la lente, ya que si se deja, se

    seca y se adhiere a la lente, y despus es muy difcil quitarlo. Para

    limpiar de aceite la lente debe de usarse papel seda.

    6. Cuando no es posible limpiar las lentes accesibles en seco, pueden

    limpiarse con un papel seda impregnado con una pequesima cantidad

    de agua o xilol. No debe usarse exceso de xilol porque las lentes

    vienen montadas con blsamo de Canad, el cual es disuelto por el xilol

    (consultar con el profesor).

    7. Las partes mecnicas del microscopio se pueden limpiar simplementecon un lienzo hmedo con agua. La cremallera el tornillo macromtrico

    debe ser limpiada ocasionalmente con una pequea cantidad de aceite o

    grasa delgada. El tornillo micromtrico no necesita aceite.

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    8. Algunos microscopios presentan un seguro lateral de la cremallera; el

    cual consiste en un tornillo situado al lado derecho del brazo del

    microscopio prximo al tornillo macromtrico y es accionado por la perilla

    de mayor tamao. Una vez enfocada la preparacin puede fijarse a la

    platina apretando suavemente este seguro, por lo que si se requiere una

    vez ms enfocar o cambiar la preparacin debe aflo jarse este

    seguro. No debe girarse los tornillos micromtricos y macromtricos

    mientras el seguro est apretado por que se destruye la rosca del

    tornillo.

    9. Hay que manejar con mucho cuidado el tornillo que desplaza hacia

    arriba o hacia abajo el condensador evitando forzar o con movimientosbruscos ya que tiene una rosca muy corta hecha de un material poco

    resistente.

    10. Si el microscopio no funciona, notificarlo Inmediatamenteal

    profesor.

    11. No permitir que ningn reactivo qumico entre en contacto con parte

    alguna del microscopio.

    12. Antes de guardar el microscopio, asegurarse siempre que el objetivo

    seco dbil est en la posicin de trabajo, es decir, en lnea con el tubo

    del microscopio.

    13. Al desconectar el enchufe de la fuente de luz, no tirar del cable; se

    debe sujetar firmemente el enchufe y luego desconectarlo del contacto

    elctrico.

    14. Si el microscopio tiene una cubierta o caja, asegurarse de que cubra por

    completo al microscopio o que quede bien fijo dentro de la caja.

    Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una

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    introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados,conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

    1. Cules son los tipos de microscopios existentes?2. Con qu material se limpian las partes mecnicas de un microscopio?3. Cmo deben limpiarse los lentes de un microscopio?4. Qu es el ocular y cuntos tiene un microscopio?5. Que son los objetivos y cuntos tiene el revlver?6. Por qu el objetivo de inmersin usa aceite?7. En qu objetivo del microscopio se observan los microorganismos a

    mayor aumento?8. En qu objetivos se observan las preparaciones en fresco?9. Para qu sirven los tornillos micromtricos y macromtrico?10. Cmo se calcula el poder de resolucin de un microscopio?

    Figura 19-1

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    .

    PRCTICA 2

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    El terrario es una simplificacinextrema de un sistemabiolgico para estudiar suscomponentes bsicos.

    CTICA 1OBJETIVOS

    Observar la variacin cuantitativa en el tejido vegetal y animal en el

    . ecosistema

    Calcular el aumento de biomasa vegetal y animal en el ecosistema.

    Identificar a los organismos auttrofos y hetertrofos en el

    ecosistema

    INTRODUCCIN

    El terrario es un modelo ecolgico que permite investigar la vida de losorganismos, el medio en que se desarrollan, las interacciones entre ellos yambiente. Es de gran utilidad para comprender y cuantificar fenmenos tanimportantes como la fotosntesis, la respiracin y el ciclo del agua.

    En la fotosntesis, la energa del espectro visible de la luz solar atrapadacon la molcula fotorreceptora llamada clorofila, le permite a la plantacombinar el bixido de carbono del aire y el agua que absorbe del suelo para

    producir oxgeno y glucosa (energa qumica), la cual se transforma durante larespiracin en una molcula de alta energa llamada trifosfato de adenosina(ATP) que utiliza para elaborar sus tejidos que al ser consumidos alimentan alos herbvoros y stos a su vez a los carnvoros. Cuando la planta, el herbvoroo el carnvoro no son consumidos por otro animal y mueren, el tejido que elloscontienen es degradado por microorganismos del suelo (bacterias y hongos)

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    llamados reductores.Adems de la transformacin de la energa solar, la fotosntesis es

    importante debido a que durante este proceso se libera oxgeno alambiente, el cual es indispensable para que las plantas, los animales yotros seres vivos lleven a cabo la respiracin aerobia.

    Desde el punto de vista qumico, el proceso fotosinttico incluyealmacenamiento de una parte de la energa solar como energa de enlace enlos alimentos. La ecuacin general de esta reaccin de oxidacin-reduccinpuede escribirse como sigue:

    LuzCO2 + 2H2A (CH2O) + 2A,

    Energa

    La oxidacin es:

    2HA 4H + 2A

    La reduccin es:

    4H + CO2 (CH2O) + H2O

    Para las plantas, las algas y las cianobacterias, A es el oxgeno, esdecir, el agua se oxida con la liberacin del oxgeno gaseoso y el bixido decarbono se reduce a carbohidratos (CH2O), con la produccin de agua. Por loque, el oxgeno de la siguiente ecuacin proviene del agua y la ecuacingeneral, sinttica y balanceada de la fotosntesis es como sigue:

    Reaccin general de la fotosntesis.

    Clorofila6CO2 + 12H 2O + Energa C 6H12O6 + 60 2 + 6H2O

    Bixido Agua solar Glucosa Oxgeno Aguade

    carbono

    La fotosntesis es un fenmeno complejo, variable en sus reactivos,condiciones de desarrollo y organismos que la realizan.

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    En algunos tipos de fotosntesis bacteriana El H2A (el reductor) no es elagua, sino un compuesto inorgnico como sulfuro de hidrogeno (H2S), comosucede, en las bacterias pertenecientes a las famlias Clorobacteriaceae yThiorhodaceae o un compuesto orgnico en las bacterias no sulfurosasprpuras y marrones (Athiorhodaceae), en consecuencia, no selibera oxgenoen estos procesos.

    La mayora de las plantas, fijan el bixido de carbono por el ciclo deCalvin o ciclo de las pentosas fosfato, una minoria reducen el bixido decarbono por el ciclo del cido dicarboxlico en condiciones diferentes de luz,temperatura y agua.

    Las plantas que reducen el bixido de carbono por el ciclo de Calvin ociclo de las pentosas fosfato llevan a cabo la fotosntesis a intensidades

    luminosas y temperaturas moderadas. En contraste, las plantas que reducen elbixido de carbono por la va del cido dicarboxlico estn adaptadas a la luzbrillante, altas temperaturas y emplean el agua de manera ms eficiente.

    Las implicaciones ecolgicas es que las plantas de las que depende elhombre para su alimentacin en su mayora utilizan el ciclo de Calvin o ciclode las pentosas fosfato como el trigo, arroz, papa y la mayora de las verdurasse desarrollan en la zona templada del hemisferio norte donde se practicaagricultura mecanizada, en cambio las cosechas de orgen tropical como elmaz, sorgo y caa de azcar son plantas que utilizan el ciclo del cidodicarboxlico.

    La respiracin es una oxidacin bitica que produce energa condescomposicin de la materia orgnica o inorgnica. En el ecosistema tierra losprocesos heterotrficos de descomposicin (catabolismo) se equilibran demanera aproximada con el metabolismo auttrofo (anabolismo), aunque esteequilibrio vara mucho localmente. Los tipos de respiracin sonaproximadamente paralelos a los tipos de fotosntesis y se dividen en tres:

    Tipo 1, la respiracin aerobia, en la cual el oxgeno gaseoso esel oxidante (aceptor de electrones).

    Tipo 2, la respiracin anaerobia, en la cual un compuesto

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    inorgnico distinto al oxgeno es el oxidante.

    Tipo 3, la fermentacin, en la cual un compuesto orgnico es eloxidante.

    La respiracin aerobiaes el fenmeno inverso a la fotosntesis, porel cual la materia orgnica (C6H12O6, recurdese glucosa) se descomponea CO2 y H 2O con la liberacin de energa. Todas las plantas y animalessuperiores y la mayora de los procariotes y protistas obtienen su energade este modo. La respiracin completa rinde CO2, H2O y energa, pero elproceso puede realizarse de manera incompleta liberando menos energa ycompuestos orgnicos que pueden usarse posteriormente por otrosorganismos para obtener energa. La energa contenida en el carbohidratose libera durante la respiracin mediante la glcolisis y el ciclo de Krebs

    realizadas en el citoplasma y las mitocondrias respectivamente.

    Reaccin general de la respiracin aerobia.

    Mitocondrias

    38 AMP + C6HI2O6 + 6O 2 38 ATP + 6CO 2 + 6H 20 + Calor

    Monofosfato Glucosa Oxgeno Trifosfato Bixido guade adenosina de adenosina de carbono

    La energa liberada por la glucosa es almacenada en la molculallamada trifosfato de adenosina (ATP), la cual puede usarse para sintetizar,degradar o transportar otras substancias necesarias para las clulas.

    La respiracin anaerobia la llevan a cabo los saprofitos comobacterias, levaduras, mohos y protozoarios. Las bacterias productoras demetano son ejemplos de anaerobios obligados que descomponen loscompuestos orgnicos produciendo metano (CH4 ) utilizando como oxidantes

    carbonatos o carbono orgnico, empleando as ambos tipos de metabolismoanaerobio. Lo anterior, es de gran importancia desde el punto de vistaecolgico en la descomposicin de los residuos de las plantas y animales, yreduccin de sales en sedimentos profundos; adems de su uso industrial parala obtencin de cidos y alcoholes.

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    La fermentacin, llevada a cabo por la mayora de los seres vivos,consiste en la descomposicin enzimtica de un compuesto orgnico, donde eloxidante (receptor de electrones) es tambin un compuesto orgnico.Ejemplos, la fermentacin alcohlica que desdobla los hidratos de carbono enalcohol etlico o la fermentacin actica que transforma el alcohol etlico encido actico.

    Para medir la energa solar captada en forma de tejido por la planta, secalcula el aumento de peso de la planta y de la misma forma la energa qumicaaprovechada por el herbvoro y el carnvoro.

    En esta prctica slo se determinar la cantidad de energa en forma de tejidoalmacenada por las plantas y los herbvoros.

    MATERIAL POR EQUIPO

    1 recipiente de vidrio transparente, grande y de boca ancha contapadera.

    25 % del volumen del frasco de tierra de hoja sin parsitosmacroscpicos .

    5 % del volumen del frasco de tezontle finamente molido.

    3 % del volumen del frasco de carbn vegetal finamente molido.

    1 pliego de papel celofn transparente. 1 rollo de diurex ancho.

    1 marcador permanente de color negro sin olor.

    1 balanza analtica.

    3 plantas compatibles entre s se sugieren plantas apropiadas para elterrario como Xerfitas (nopalito, maguellito, cactus, (bisnaga);mesfilas (cscara de nuez, lgrima, sapito); Suculentas ( dedito,cortina).

    6 caracoles terrestres (traerlos de 4-8 semanas ms tarde).

    METODOLOGA

    1. Lavar el recipiente con agua y jabn, enjuagarlo bien con el fin de evitar

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    que el jabn contamine el ambiente del terrario.

    2. Etiquetar con el nmero de equipo, grupo y fecha.

    3. Colocar en el fondo del recipiente una pequea capa de tezontle de

    aproximadamente el 5% del volumen del recipiente.

    4. Colocar sobre el tezontle una capa de carbn vegetal deaproximadamente de 3 % del volumen del recipiente.

    5. Agregar la tierra de hoja en una cantidad aproximada al 25% delvolumen del frasco.

    6. Sacar las plantas de la maceta o recipiente en el que se encuentren,quitar el exceso de tierra de las races.

    Figura 2-1

    7. Pesar las plantas.

    8. Sembrar cuidadosamente las plantas evitando daar las races yespacindolas de acuerdo al tamao y tipo de planta.

    9. Agregar una pequea cantidad de agua, dejndola resbalar por losbordes del recipiente, evitando su exceso de acuerdo con la humedad

    Tierra de hoja

    Carbn

    Tezontle

    Terrario

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    del terrario y tipo de planta.

    10. Pesar las plantas.

    11. Sembrar cuidadosamente las plantas evitando daar las races y

    espacindolas de acuerdo al tamao y tipo de planta.

    12. Agregar una pequea cantidad de agua, dejndola resbalar por losbordes del recipiente, evitando su exceso de acuerdo con la humedaddel terrario y tipo de planta.

    13. Cubrir la boca del recipiente con papel celofn, cerrar hermticamente latapa y sellar con diurex las orillas del papel celofn a la cara externa delrecipiente.

    14. Colocar el terrario en un lugar donde reciba la cantidad adecuada de luz,

    de acuerdo al tipo de planta.

    15. Revisar a las 24 horas, la cantidad de agua. De haber un exceso,notable al empaarse las paredes internas del terrario, dejar el recipientedestapado hasta que la tierra adquiera el grado de humedad requerido.Tapar.

    Figura 2-2

    Terrario

    16. Los equipos con nmero non, pesar las plantas de 4 a 8 semanas ms

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    tarde y calcular el aumento de tejido (plantas) .17. Los equipos con nmero par, pesar 6 caracoles terrestres, numerarlos

    y colocarlos en el interior del terrario. Tapar sin sellar.18. Despus de dos semanas, pesar los caracoles y calcular el aumento de

    Tejido animal.

    Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya unaintroduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados,conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

    1. Contesta en los cuadros siguientes lo que se pide.2. Dibujos correspondientes.3. Investigar los conceptos de productividad primaria neta y productividad

    primaria bruta.

    5. Factores abiticos:a) b)

    c) d)

    6. Factores biticos:a) b)

    c) d)

    7. Elementos de la fotosntesis:

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    a) b)

    c) d)

    8. Productos de la fotosntesis:a) b)

    c) d)

    9. Importancia de la fotosntesis:a) b)

    c) d)

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    Tabla 2-1

    Nombre deplanta

    Equipo 1

    Peso de planta

    Inicial Final

    Equipo 3

    Peso de planta

    Inicial Final

    Equipo 5

    Peso de planta

    Inicial Final

    Equipo 7

    Peso de planta

    Inicial Final

    1.2.3.4.5.6.7.8.9.

    10.

    Tabla 2-2

    Tabla 2-3

    PRCTICA 3

    PRCTICA 3

    Nmero decaracol

    Equipo 2

    Peso decaracoles

    Inicial Final

    Equipo 4

    Peso decaracoles

    Inicial Final

    Equipo 6

    Peso decaracoles

    Inicial Final

    Equipo 8

    Peso decaracoles

    Inicial Final

    1.2.3.

    1. Aumento de tejido de las plantas:_________________________________

    2. Aumento de tejido de los caracoles :_______________________________

    3. Concepto de productividad primaria neta:___________________________

    4. Productividad primaria bruta:_____________________________________

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    La trada ecolgica, aborda el procesosalud-enfermedad de

    una manera dinmica,articulada y multicausal.

    OBJETIVOS

    Identificar los componentes de la trada ecolgica

    Identificar los riesgos a los que se enfrenta el hospedero, en el ambiente

    actual.

    Fundamentar acciones preventivas de Enfermera, para resolver

    problemas de salud pblica.

    INTRODUCCION

    Un concepto fundamental en la organizacin de los contenidos bsicos

    del programa terico-prctico de ecologa y salud es la trada ecolgica. A finesdel siglo xix se conceba la enfermedad infecciosa como una entidad causadade manera exclusiva por un microorganismo patgeno; en el siglo xx losavances de la inmunologa permitieron comprender el papel de los mecanismosinespecficos y especficos de defensa en el desarrollo del proceso infeccioso.Posteriormente, con el estudio del ambiente fsico y social, result evidente quela aparicin de la enfermedad depende tambin en buena medida del ambientey de las alteraciones ocasionadas por el hombre.

    Al extrapolar lo anterior a todas anormalidades, fue posible abordar la

    enfermedad desde un punto de vista multifactorial, con base en un trminodidctico llamado trada ecolgica. Segn este concepto, la enfermedad esconsecuencia de tres grandes grupos de factores: ambientales, del husped ydel parsito. El equilibrio de estos factores mantiene la salud de la persona y sualteracin conduce a la enfermedad.

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    Activ idades previas a la prct ica.

    1. Pegar una etiqueta adherible en un extremo de cuatro portaobjetosperfectamente limpios y secos

    2. Poner a remojar los 50 g de grenetina en 125 ml de agua fra durante20 min, verter la solucin anterior en 125 ml de agua hirviendo (con elmechero apagado), mezclar rpidamente con el agitador de vidrio,hasta obtener una solucin transparente.

    3. Barnizar rpidamente, con la mezcla anterior, ayudndose del pincel, loscuatro portaobjetos perfectamente limpios y secos (no barnizar sobre laetiqueta), sostenga los portaobjetos del esmerilado lateral (sin dejarhuellas digitales), cuidar de no poner los dedos sobre la pelcula degrenetina. Colocar los portaobjetos barnizados en posicin vertical,recargados en algn objeto, hasta que solidifique la pelcula de

    grenetina.

    Figura 1-1

    4. El profesor seleccionar a un alumno de cada equipo, al cual se leproporcionarn cuatro portaobjetos con una etiqueta y una pelcula degrenetina. El alumno llevar a su casa las laminillas, las transportaradentro de la caja con divisiones para preparaciones microscpicas (queconstruy previamente el alumno). El alumno colocar cada una de las

    EtiquetaPortaobjetos

    Pelcula de grenetina

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    laminillas en determinados sitios de su casa habitacin, por ejemplo,una en la azotea, otra en el patio, cerca de la ventana, cerca de la puertaprincipal, en el bao, sobre la almohada, en el tapete de la recamara, enla cocina, sobre un librero, cerca del auricular del telfono, etc, durante12 horas.

    5. Numerar las laminillas y escribir en la etiqueta el lugar donde semuestreo. Transportar dentro de la caja con divisiones parapreparaciones microscpicas y llevar al laboratorio el da de la prctica.

    Activ idades en el laboratorio el da de la prctica

    1. Observar en el microscopio a 10X (seco dbil) y a 40X (seco fuerte)

    las partculas que se hallan adherido al portaobjetos, y si es posible inferir

    si hay formas bacterianas o micticas. Hacer esquemas, analizar y tratar

    de explicar las causas por las cuales se encontraron en ese lugar.

    RESULTADOS

    1.- Realiza en hojas blancas en tu cuaderno de prcticas varios cuadroscomo el siguiente, dibujar los esquemas de sus observacionesmicroscpicas.

    Tabla 1-1

    Num. equipo :Num. laminilla:Sitio muestreo:No. Aumentos:Partculas adheridas:

    Observacin al microscopio:

    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

    2.- Realiza una investigacin sobre el dao que causan a la salud humana y al

    Por qu se encontraron las partculas en ese lugar de muestreo? :

    De donde provienen esas partculas?:

    Son artculas or nicas o inor nicas?:

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    ecosistema las partculas que encontraste.

    Tabla 1-2

    Partculas

    adheridas

    Dao al

    Ecosistema*

    Dao a la salud** Podran

    desencadenarepidemias

    pandemias?***

    *, **, *** Explicar mas ampliamente en una hoja.

    3.- Realiza una investigacin sobre las medidas nacionales e internacionales,a diferentes niveles, que tengan como resultante el constante mejoramiento ycuidado del ambiente y con ello la prevencin y colaboracin en la resolucinde problemas de salud pblica:

    Nivel preventivo Nivel epidmico Nivel sociolgico Nivel ecolgico Nivel poblacional Nivel educativo Nivel legislativo

    Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya una

    introduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados,

    conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

    .ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

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    1. Qu factores del medio ambiente influyen en el proceso de salud-enfermedad?

    2. Qu agentes fsicos, qumicos biolgicos localizaste en laspreparaciones observadas ?

    3. Cmo afectan la salud ?4. En qu lugares donde se colocaron las laminillas hubo mayor incidencia de

    partculas?5. Qu coincidencias y diferencias puedes establecer entre agente biolgico,

    hospedero y agente fsico-qumico del ambiente?6. Es el ruido un agente ambiental que perjudique la salud? Por qu?7. Que condiciones del componente de la trada ecolgica, conocido como

    hospedero (el hombre), determinan cierta susceptibilidad para adquirirenfermedades?

    8. Qu factores socioeconmicos pueden favorecer la aparicin de las

    enfermedades?9. Menciona cinco causas que estn provocando la desertificacin, la

    contaminacin atmosfrica, del suelo y del agua, y que has hecho, hars apartir de hoy, para auxiliar en su control

    PRCTICA 4

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    La anatoma intracelular define el tipode clula; el nmero, la forma denutricin, caractersticas antignicasy biomolculas a los reinos.

    OBJETIVO

    Observar las principales caractersticas de las clulas eucariotas y

    procariotas en una preparacin en fresco.

    INTRODUCCIN

    Antiguamente se crea que todos los seres vivos conocidos podran ser

    clasificados como plantas o animales, sin embargo con el descubrimiento delos microorganismos, los cuales comparten caractersticas de plantas yanimales, se hizo evidente que esta clasificacin era inoperante. Despus demuchas clasificaciones previas, Whittaker en 1969, propuso la clasificacin detodos los seres vivos en cinco grandes reinos: Plantae, Fungi, Animalia,Protista (Protozoa) y Procariotae (Monera); basada en el nivel de organizacin:unicelular procariota (Monera), unicelular eucariota (protista), multinuclear(hongos) y multicelular (plantas y animales); forma de nutricin: absorcin,ingestin o fotosntesis y su lnea evolutiva. En 2002, Kendrick, aunando esto a

    otras tcnicas, la inmunologa y la biologa molecular, los clasifica hoy en daen siete reinos: Archeabacteria, Eubacteria, Chromista, Protozoa, Fungi,Plantae y Animalia.

    Aparte de algunos hongos, y de varios parsitos multicelulares, dos delos reinos de gran importancia en ecologa y salud son los reinos Protista y elProcariotae. Estos dos ltimos se diferencian por el tipo de clula de que estn

    formados.

    Los protistas, los hongos, las plantas y los animales son clulas

    eucariotas ("ncleo verdadero"), que poseen un ncleo observable, rodeado deuna membrana y en su citoplasma contiene organelos rodeados pormembranas como son las mitocondrias, retculo endoplsmico, aparato deGolgi y ribosomas de mayor tamao. Un ejemplo de clula eucariota unicelularson los protozoarios.

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    En cambio, la clula del reino Procariotae es procariota (ncleo primitivo,sin ncleo verdadero), ya que su ncleo no est delimitado por membranas, nocontiene organelos intracitoplsmicos aunque si existe su funcin, son demenor tamao y posee una pared celular qumicamente nica y de grancomplejidad. Un ejemplo de clula procariota son las bacterias.

    El estudio de las bacterias es relativamente difcil debido a su tamaoque vara de 0.1 a 10 m, por lo que no pueden ser observadas a simple vista ypara su estudio es necesario el microscopio ptico ordinario.

    Para la observacin y estudio de las bacterias se utilizan diversosmtodos el ms simple es la observacin en fresco en el microscopio pticoordinario en donde podemos observar a la bacteria viva e investigar su forma,tamao, agrupamiento, movilidad y reacciones a varios compuestos qumicos y

    sueros inmunes. Hay dos mtodos generales que se utilizan para estudios deesta naturaleza. Las tcnicas de gota suspendida y la preparacin en fresco.Ambos mtodos preservan la forma natural de las clulas y reducen los efectosde la distorsin que suelen ocurrir cuando las clulas se secan, fijan y/o tien.

    La observacin en fresco no muestra muchos detalles estructurales delas bacterias por lo que en bacteriologa frecuentemente se tie a las bacterias.

    Las tcnicas de tincin las podemos dividir de una manera general endos grupos: tcnicas de coloracin simple y tcnicas de coloracin especial o

    diferencial.

    Las tcnicas de coloracin simple son aquellas en donde se emplea unslo colorante para teir. Ejemplo azul de metileno

    Las tcnicas de coloracin especial son aquellas en que se usan

    combinaciones de dos o ms colorantes. Ejemplos: Coloraciones de

    Gram, Ziehl-Neelsen, Giemsa, etc.

    MATERIAL POR EQUIPO

    25 ml yogurt natural con cultivos lcticos (alumnos)

    25 ml pulque blanco (natural) (alumnos)

    1 muestra de agua estancada (de canales de Xochimilco

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    Chapultepec) o de florero de varios das (alumnos).

    1 trozo de 2 cm. de alimento (pan, tortilla, verdura o fruta con hongos)

    (alumnos)

    1 jitomate pequeo (alumnos),1 cebolla pequea (alumnos), 3 hojas de

    planta siempreviva alga Elodea (alumnos) 2 mondadientes (palillos de madera limpios) (alumnos)

    1 lanceta estril

    1 torunda alcoholada

    1 asa bacteriolgica.

    10 portaobjetos.

    10 cubreobjetos.

    50 ml de Solucin salina al 0.9% (para todo el grupo)

    1 navaja bistur

    1 microscopio ptico 1 frasco gotero con solucin de azul de metileno.

    3 hisopos.

    2 pipeta Pasteur.

    Papel seda

    Aceite de inmersin

    1 puente de coloracin

    METODOLOGA

    Se sugiere que cada integrante del equipo procese 2 3 muestras para queterminen a tiempo.

    I Observacin de clulas eucariotas.

    Reino Plantae Metafita

    1. Clulas de epidermis de jitomate y siempreviva.-Del jitomate ysiempreviva cortar un cuadrado de la piel de 1 cm por lado, raspar la

    parte interna con la navaja hasta que quede solamente la capa deepidermis transparente, en el caso de la siempreviva, y anaranjada, en elcaso del jitomate; procurar no romper el cuadrado de epidermis; colocarcada epidermis vegetal sobre un portaobjetos y verter una gota de agualimpia en su superficie, colocar el cubreobjetos sobre la muestra, yobservar al microscopio en los objetivos 10x y 40 x . Hacer dibujos en latabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan.

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    2. Clulas de la epidermis de las hojas catfilas de la cebol la.-De lashojas de cebolla, cortar un cuadrado de 1 cm por lado y separar laepidermis que se encuentra hacia la parte cncava de la hoja, colocarla

    sobre un portaobjetos y verter una gota de agua limpia y otra de azul demetileno sobre ella, colocar el cubreobjetos y observar al microscopio enlos objetivos 10x y 40 x de acuerdo con la explicacin del profesor.Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que sesolicitan.

    3. Clulas de hojas de alga Elodea.- se pueden observar:a) las clulas estomticas (clulas que forman el poro

    respiratorio, tienen forma de labios abiertos) yb) clulas de la epidermis general.

    Para observar ambas clulas, corte una hoja pequea de Elodea del

    extremo de la rama de la Elodea donde estn surgiendo hojasnuevas, no manipule fuerte la hojita porque destruye su superficie,colquela sobre un portaobjetos ms 1 gota de agua del acuario,coloque el cubreobjetos y observar al microscopio en los objetivos10x y 40 x de acuerdo con la explicacin del profesor. Hacer dibujosen la tabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan.

    Reino Animalia Metazoa

    4. Clulas de mucosa oral.-Con un hisopo hacer un ligero raspado sobre

    la mucosa oral para obtener clulas epiteliales, colocarlo sin batir sobreun portaobjeto, agregar dos gotas de azul de metileno, colocar elcubreobjeto y observar al microscopio en objetivos 10x y 40 x deacuerdo con la explicacin del profesor. Hacer dibujos en la tabla 3-1 ycontestar las las caractersticas que se solicitan.

    5. Clulas sanguneas.-Una persona del equipo lavar sus manos conagua y jabn, secar, hacer la asepsia con torunda alcoholada en yemade dedo anular, puncionar, colocar una gota muy pequea de sangre(recuerda que entre mas pequea sea tu muestra, es mejor para laobservacin al microscopio ptico ya que la muestra debe dejar pasar la

    luz que se encuentra debajo de la platina y en observaciones de clulas,si estas fueran muy abundantes , estaran encimadas y no las observasbien, debes tener solo una capa de clulas para que las puedasobservar mejor) en el centro del portaobjetos y agregar una gota desolucin salina al 0.9%, mezclar con la punta del cubreobjetos ycolocarlo sobre la preparacin; observar al microscopio ptico 10x y 40x.Hacer dibujo en el cuadro correspondiente y contestar las caractersticas

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    que se piden.

    Reino Fungi

    6. Clulas de levaduras de pulque - poner una gota pequea de pulqueen un portaobjeto limpio, colocar el cubreobjetos y observar a 10 X y 40X

    Reino Protista o Protozoa.

    7. Protozoarios de agua estancada.- Tomar con pipeta pasteur una gotade agua del fondo de un recipiente que contenga agua estancada o deun florero de varios das, depositar sobre un portaobjeto y cubrir con elcubreobjeto y observar los protozoarios y algas con los objetivos 10x y40x apoyndose en la explicacin del profesor. Hacer dibujos en la tabla

    3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan.

    II Observacin de clulas procariotas

    Reino Procariote, Monera o Eubacteria

    8. Sarro dental.-Colocar con el asa bacteriolgica una gota pequea deagua de la llave en el centro de un portaobjeto, tomar una muestra desarro dental con un mondadientes, depositarla sobre las gotas de agua,mezclar, extender, dejar secar, cubrir la preparacin con azul demetileno durante un minuto, lavar suavemente con agua de la llave,ESPERAR A QUE SEQUE COMPLETAMENTE y observar las clulasbacterianas con los objetivos 10x, para enfoque, colocar una gota deaceite de inmersin, girar el revolver y enfocar a 100x enfocandoligeramente con el tornillo micromtrico. de acuerdo con la explicacindel profesor. Hacer dibujos en la tabla 3-1 y contestar las caractersticasque se solicitan.

    9. Lactobacilos de yogurt.- colocar una gota de agua pequea en elcentro de un portaobjetos y en ella disolver una pequea cantidad de

    yogurt, como la cabeza de un alfiler metlico, colocar el cubreobjetos,observar al microscopio en 10X para enfoque, girar el revolver, colocaruna gota de aceite de inmersin y observar a 100X. Hacer dibujos en latabla 3-1 y contestar las caractersticas que se solicitan.

    10.Bacterias de pulque.- Tomar una pequea cantidad de pulque (como la

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    Nombre: bacterias de sarro dentalTipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:

    Tamao en 10x:Color natural:Reino:

    Nombre: bacterias de pulqueTipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:*Tamao en 100x:Color natural:Reino:Nombre: lactobacilos de yogurthTipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:Tamao en 100x:Color natural:Reino:Nombre: protozoarios de aguaestancadaTipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:Tamao en 40x:Color natural:Reino:

    Nombre: levaduras en pulqueTipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:Tamao en 40x:Color natural:

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    Reino:

    Nombre: clulas de epidermis desiempreviva Elodea jitomate cebolla

    Tipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:Tamao en 10x:Color natural:Reino:Nombre: clulas de mucosa oralTipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:Tamao en 10x 40x:Color natural:Reino:Nombre: clulas sanguneasTipo celular:Organelos que se observan:

    Forma celular:Tamao en 10x 40x:Color natural:Reino:

    * Tamao en 10x, aproximado, en fracciones respecto al campo de luz en 10x(ejemplo: la clula observada tiene un tamao aproximado a 1/10 del campode luz del microscpio).

    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE1. Qu tipo de clula presentan las bacterias?2. Qu tipo de clula presentan los protozoarios?3. Qu tipo de clula presentan los metazoarios o helmintos?4. Qu tipo de clula presentan los leucocitos?5. Qu enfermedades infecciosas se identifican en el laboratorio por

    preparacin en fresco?6. Mencione dos tcnicas de coloracin especial no tratadas en esta

    prctica.7. En la evolucin; Cul de los dos tipos de clulas aparece primero?

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    8. Qu estructuras bacterianas no se observan al microscopio pticoordinario?

    PRCTICA 5

    La respiracin no es un proceso pulmonar;sino un fenmeno bioqumico intracelularque llevan a cabo todos los seres vivos.

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    OBJETIVO

    Determinar la produccin de bixido de carbono durante la

    fermentacin de la sacarosa a diferentes concentraciones, por la

    levadura Saccharomyces cerevisiae

    INTRODUCCIN

    La respiracin es una funcin indispensable para la vida de todos losseres vivos, y se lleva a cabo de dos formas: respiracin aerobia, que larealizan la mayora de los seres vivos entre ellos el hombre y la respiracin

    anaerobia o fermentacin, llevada a cabo por algunas bacterias anaerobiasestrictas como Clostridium tetani, C. perfringens, C. botulinum y Treponemapallidum causantes del ttanos, la gangrena gaseosa, el botulismo y la sfilisrespectivamente. Otras bacterias y levaduras que siendo aerobias, puedensobrevivir en condiciones de anaerobiosis, a estas se les denomina anaerobiasfacultativas, entre otras estn las enterobacterias como: Escherichia coli,Salmonella spp, Shigella spp, los cocos piogenos: Staphylococcus aureus;Strpetococcus spp.

    La glucl isis es la primera etapa de la fermentacinExisten varios tipos de fermentacin: la fermentacin, lctica alcohlica,propinica, y actica.

    La fermentacin lctica es un proceso celular anaerbico donde seutiliza glucosa para obtener energa y donde el producto de desecho es elcido lctico, slo se obtiene como eficiencia, dos molculas de ATP ybixido de carbono (CO2). Este proceso lo realizan muchas bacterias(bacterias lcticas) algunos protozoarios y en el tejido muscular cuando, acausa de una actividad motora intensa no hay aporte adecuado de oxgeno, seacumula cido lctico en las clulas musculares causando fatiga muscular. Los

    eritrocitos no tienen mitocondrias por los que obtienen energa a travs de lafermentacin lctica.

    La fermentacin alcohlica(denominada tambin como fermentacindel etanol o incluso fermentacin etlica) es un proceso biolgico defermentacin en plena ausencia de aire (oxgeno - O2), originado por la

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    actividad de algunos microorganismos como las levaduras que procesan loshidratos de carbono (por regla general azcares: como pueden ser por ejemplola glucosa, la fructosa, la sacarosa, el almidn, etc.) para obtener comoproductos finales: un alcohol en forma de etanol (cuya frmula qumica es:CH3-CH2-OH), dixido de carbono (CO2) en forma de gas y DOS molculas deATP que consumen los propios microorganismos en su metabolismo celularenergtico anaerbico.

    Seguramente debe existir una relacin entre la cantidad de azcar disponible yel crecimiento de las levaduras.Qu relacin existe? En lugar de medir el crecimiento de las levaduras, quepodra estar por encima de nuestras posibilidades por el momento, se puedemedir la produccin de CO2 La relacin que se podra encontrar entre elcrecimiento (produccin de CO2) y la concentracin de azcar podra ser de

    varios tipos. En la figura 1 se puede ver cuatro grficas que indican diferentesposibilidades de esta relacin.

    Producir Sacharomyces cereviseae diferentes cantidades de CO 2 empleando diferentes concentraciones de un substrato conocido (Sacarosa)?

    Fig. 1 Concentracin de melaza y produccin de CO2

    En la figura 1 se presentan cuatro grficas que indican diversas manerasen que pudiera llevarse a cabo la produccin de CO2, graficandoconcentracin de bixido de carbono y concentracin de melaza.

    MATERIAL POR EQUIPO

    1 probeta graduada de 100 ml. 10 tubos de ensayo de 25 por 200 ml con tapn de rosca.

    10 tubos de ensayo 10X50 ml. 1 matraz Erlenmeyer de 125 ml.

    1 matraz Erlenmeyer de 250 ml.

    1 gradilla.

    110 cuadros de papel aluminio de 4 X 4 cm papel parafilm.

    1 regla marcada en mm.

    Fig. 1 Concentracin de melaza y produccin de CO2

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    Figura 20-2

    Figura 20-3

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    5. En el tubo nmero uno coloque 25 ml de solucin de melaza (solucin al

    100%), en el tubo dos coloque 25 ml. De melaza concentrada y 25 ml

    de agua destilada, del tubo 2 tome 25 ml de la solucin al 50% y pselo

    al tubo 3, agregue 25 ml de agua destilada y nuevamente tome 25 ml y

    pselo al tubo 4 as sucesivamente hasta completar los diez tubos.

    6. Agregue 5 ml. de solucin de levadura, muy bien agitada a cada una de

    las diluciones de sacarosa dentro de cada tubo de ensayo.

    Tabla 1

    No de tubo Concentraciones

    ( % )

    1 100

    2 50

    3 25

    4 12.5

    5 6.2

    6 3.1

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    7 1.6

    8 0.78

    9 0.39

    10 0.19

    7. Coloque en posicin invertida cada uno de los tubos de ensayopequeos dentro de los tubos grandes y llnelos de lquido siguiendo lassiguientes instrucciones (ver figura 4): a) Practique el llenado de lostubos pequeos dentro de los tubos grandes primero con agua de lallave para adquirir la destreza necesaria que le permita trabajardespus con el lquido que tenga sacarosa. b) Introduzca en posicininvertida un tubo de ensayo pequeo en cada uno de los tubos grandesque contengan la mezcla de levadura y sacarosa y trate de que noqueden burbujas dentro del tubo pequeo, balaceando el tubo grande

    8. Tape los tubos grandes, que queden bien cerrados.9. Pegue por fuera del tubo grande un fragmento de tela adhesiva marcada

    en mm. en un tramo de 4 5 cm. con la mayor precisin posible.Coloque la tela adhesiva a nivel con el punto donde llegue el tubopequeo.

    10. Coloque los tubos en una gradilla y en un sitio, del que anotar lascondiciones ambientales. Condicin de luz, temperatura, humedadaproximada. Deje los tubos en estas condiciones durante 24 horas

    11. Despus de 24 horas, observe por lo menos cinco minutos lo quesucedi en los tubos pequeos. Observe el gas que se produjo ydeposit en el tubo pequeo.

    12. Prepare una tabla donde anotar en una columna la concentracin de lasacarosa, en otra la cantidad de CO2 producido en mm. (gas en el tubopequeo) y en una tercera las condiciones ambientales. Anote lascantidades obtenidas en su equipo y las que otros equipos de su grupohayan obtenido.

    13. Trace una grfica con las lecturas promedio de cada equipo.

    Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya unaintroduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados,conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

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    1. Grafique sus resultados2. Compare la grfica obtenida con sus resultados con la que seleccion,

    antes de iniciar esta prctica.3. Explique cualquier diferencia entre las grficas de sus resultados y la

    seleccionada4. Describa la relacin que existe entre la concentracin del sustrato

    (sacarosa) y la cantidad de CO2 producido por las levaduras5. Considera que la sacarosa es el sustrato ms adecuado para el

    metabolismo de las levaduras?6. Que otros sustratos podra tal vez, dar mejores resultados que la

    sacarosa?7. Cual es la eficiencia de ATP que obtiene la levadura con este proceso?8. Menciona las tres etapas de la respiracin celular aerobia.

    9. Cual es la eficiencia de ATP producida por una molcula de FADH2 yuna de NADH+H

    10. Menciona tres bacterias anaerobias de importancia mdica.

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    PRCTICA 6

    A travs del tiempo, el ambiente

    selecciona la forma y funcin de

    los seres vivos.

    OBJETIVOS

    Observar la influencia de de la luz y la temperatura, en elcomportamiento alimenticio en peces gupis.

    Investigar otros factores que provocan el cambio repentino de coloracinen peces goodeidos.

    INTRODUCCION

    La seleccin natural es el proceso mediante el cual los organismoslogran adaptarse a las nuevas condiciones del medio, toda vez que poseencaractersticas que les proporcionan una ventaja competitiva y les permitendejar una mayor descendencia. La adaptacin es el cambio de unacaracterstica que incrementa la capacidad de un organismo para sobrevivir yreproducirse en un rea especfica. sta puede ser biolgica, psicolgica ysocial. La adaptacin biolgica, a su vez se subdivide en subtipos, el de interspara esta prctica es la adaptacin a los factores abiticos como la luz y la

    temperatura.La actividad de los animales es una resultante de la interaccin delorganismo y el medio ambiente. Los factores ambientales como la luz y latemperatura entre otros, rigen el grado de actividad del animal. Por ejemplo,se observan cambios en su comportamiento si estn sometidos a luz intensa si sta es menor. Muchas investigaciones se han llevado a cabo para

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    demostrar el papel de los factores ambintales en la vida de los organismos(ver Fry y Clark). TambinAl i, ha realizado estudios sobre el efecto de la luzen actividades primarias para los organismos de un ecosistema, como en elcaso de los peces, la formacin de cardmenes o la emigracin del salmn(Oncorhynchus)del Pacifico.

    Desde finales del siglo pasado, numerosos cientficos se han interesadopor los cambios de color y las adaptaciones crpticas de la coloracin de losorganismos, y por lo tanto, en los peces. Es decir, en la facultad que algunospeces tienen de modificar la coloracin del cuerpo , de acuerdo con el color y laapariencia del lugar donde se encuentran. Algunas veces los cambios sonpaulatinos, pero, en ocasiones, la transformacin es repentina y muy notable.

    Se sabe, sin lugar a dudas, que la coloracin de los peces, anfibios,reptiles , seres humanos y otros organismos, se debe a la presencia en ladermis, de clulas que en su interior llevan grnulos de pigmento, llamados

    cromatoforos melanocitos (melanina). Mediante la concentracin o expansindel pigmento dentro de la clula , aumenta disminuye el oscurecimiento de lasuperficie donde se alojan los cromatoforos melanocitos. La funcin dedichas clulas pigmentarias obedece a estmulos qumicos y nerviosos,influidos por secreciones hormonales.

    En esta prctica se investigar en vitro la influencia de la luz y latemperatura en el cambio de coloracin de los peces.

    MATERIAL POR EQUIPO

    1 pecera de 15 x 7 cm de cristal. 6 peces llamados gupis entrenados dos semanas antes de la prctica

    (ver metodologa). 1 frasco en la presentacin mnima de alimento vivo para gupis

    dafnias. 1 caja de cartn forrada por dentro con papel cartulina negra

    cualquier otro papel negro, dentro de la cual quepa la pecera. 1 caja de cartn, con orificios de diferente dimetro, en todas las

    paredes, dentro de la cual quepa la pecera. 1 foco 40 watts. 1 extensin con soquet para el foco. 1 lienzo para tamizar las dafnias red fina. 1 frasco de vidrio transparente, limpio, de 250 ml con tapa de rosca y

    Empaque. 1 termmetro. 8 peces goodeidos peclidos y comprar alimento (4 hembras y 4

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    machos) de acuario.

    METODOLOGA

    Dos semanas antes de la prctica iniciar el condicionamiento de respuesta al

    estmulo..I. Influencia de la luz en los peces gupis.

    1. Preguntar en el acuario donde se compren los gupis, a que hora delda los alimentan y que alimento les proporcionan, si no losalimentaban a una hora especifica, entrenarlos de la siguiente manera.

    2. Los 3 gupis deben entrenarse (condicionarse) para que se alimentencon dafnia u otro alimento vivo en cuanto se aplique un estmulo,como golpear en un lado del acuario con una varilla de vidrio unlpiz. Los peces aprendern a esperar su alimento a la hora prefijada,despus de 2 semanas de entrenamiento. Durante el periodo decondicionamiento observar y anotar el numero de dafnias (u otroalimento vivo que recomienden en el acuario), que se comen lospeces en un lapso de tiempo de 10 min, esto es, contar el numero decapturas que hace cada pez bien, colocar 30 dafnias dentro de lapecera a la hora que se alimentan, despus de los 10 min dealimentacin, retirar las dafnias y contarlas, se pueden retirar con untamiz lienzo, por diferencia obtener el numero de dafnias ingeridas.

    3. El da de la prctica, en el laboratorio, traer su peces condicionados,una caja de cartn forrada por dentro de papel cartulina negra cualquier otro papel negro, la cual invertir sobre la pecera(formando un cuarto oscuro), otra caja de cartn con orificios dediferentes dimetros, un foco con extensin y soquet,

    4. Realizar las investigaciones siguientes en el laboratorio, el dia de lapractica con peces gupis:

    Equipo 1 y 2Peces condicionados a la luz, poner sobre la pecera la caja forrada denegro durante 10 min, retirar la caja, agregar 30 dafnias, golpear con ellpiz la pared de la pecera, dejar que los peces se alimenten de acuerdoal tiempo de entrenamiento (5 10 min), extraer las dafnias restantes,

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    restar las faltantes para obtener la tasa alimenticia en oscuridad(promediar entre los 2 equipos)

    Figura 4-1

    Equipo 3 y 4

    Peces condicionados a la luz, colocar sobre la pecera la caja conorificios de diferentes dimetros y encender un foco por fuera de la cajade manera que la luz penetre por los orificios, mantenerla as durante 10min, retirar la caja y apagar el foco, colocar dentro del acuario 30dafnias, golpear con el lpiz la pared de la pecera, dejar que los pecesse alimenten de acuerdo al tiempo de entrenamiento (5 10 min),extraer las dafnias restantes, restar las faltantes para obtener la tasaalimenticia a luz parcial (promediar entre los 2 equipos).

    Figura 4-2

    Caja de cartn invertidaforrada por dentro conpapel negro

    pecera

    Caja de cartn invertidacon agujeros dediferentes dimetros

    pecera

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    Agua de la llave

    Frasco

    Termmetro

    Equipo 5 y 6Peces condicionados a la luz, encender un foco de 40 watts a 40 cm dela pecera y mantenerlo as 10 min, apagar el foco, colocar dentro del

    acuario 30 dafnias, golpear con el lpiz la pared de la pecera, dejar quelos peces se alimenten de acuerdo al tiempo de entrenamiento (5 10min), extraer las dafnias restantes, restar las faltantes para obtener latasa alimenticia con luz artificial (promediar entre los 2 equipos)

    Figura 4-3

    Equipo 7 y 8 (testigos)Peces condicionados a la luz, agregar 30 dafnias dentro de la pecera,golpear con el lpiz la pared de la pecera, dejar que los peces sealimenten de acuerdo al tiempo de entrenamiento (5 10 min), extraer

    las dafnias restantes, restar las faltantes para obtener la tasaalimenticia con luz natural (promediar entre los 2 equipos)

    II. Influencia de la temperatura en los peces gupis.Equipo 1 y 2 (testigos)

    Peces condicionados a la luz, colocarlos en el frasco transparentecon agua de acuario, anotar la temperatura del agua, 10 minobservar el comportamiento de los peces, si aumenta disminuye suactividad, si responden al estimulo de golpeteo ligero del lpiz haciael cristal, si siguen una dafnia, si la cazan.

    Figura 4-4

    pecera

    40 cm

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    1. Investigar algunos ejemplos ms en los cuales los factores abiticosrepercuten en la fisiologa en la morfologa de las especies

    2. Investigar como repercuten los factores abiticos en el comportamiento, enlas actividades y en la fisiologa morfologa de seres humanos

    3. Investigar algunas patologas humanas debidas a alteraciones de losfactores abiticos en nuestro medio contemporneo.

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    COMISIN METROPOLITANA PARA LA PREVENCIN Y CONTROL DELA CONTAMINACIN AMBIENTAL EN EL VALLE DEMXICO ndice metropolitano de la calidad del aire

    0-100 BUENO, SITUACIN FAVORABLE PARA LAREALIZACIN DE TODO TIPO DE ACTIVIDADES101-200 NO SATISFACTORIO, MOLESTIAS MENORES ENPERSONAS SENSIBLES201-300 MALO, AUMENTO DE MOLESTIAS E INTOLERANCIARELATIVA AL EJERCICIO EN PERSONAS CONPADECIMIENTOS RESPIRATORIOS Y CARDIOVASCULARES ;301 ms, MUY MALO

    Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya unaintroduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados,conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

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    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

    1. Identificar en cul de las siguientes zonas de la ZMCM est situada tucasa: centro, noroeste, noreste, suroeste, sureste y de acuerdo a esto,realizar las siguientes actividades:

    2. Con los datos del IMECA de todo un da luminoso, graficar la evolucindel contaminante contra el tiempo, analizar los resultados y compararcon otros equipos.

    3. Relacionar la actividad humana en la ZMCM con la hora del da y ladistribucin de los contaminantes.

    4. Basndose en la informacin obtenida en el Instituto Nacional deMeteorologa, analizar la topografa y la corriente de los vientos conrelacin a la concentracin de contaminantes.

    5. Relacionar la informacin anterior con el fenmeno de inversin trmicay su influencia en la contaminacin ambiental.

    6. Relacionar fisicoqumicamente la influencia de la neblina y la intensidad

    de la radiacin solar en la concentracin y transformacin de loscontaminantes durante los meses invernales.

    7. Investigar la influencia de los principales contaminantes atmosfricos dela ZMCM en el Proceso Salud-Enfermedad.

    8. Proponer acciones de educacin para la salud que disminuyan el efectode los contaminantes en el Proceso Salud-Enfermedad.

    9. De acuerdo con la clasificacin del IMECA; Cules son las medidas decontingencia ambiental establecidas por la Semarnat.

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    PRCTICA 8

    Neutrof ilo Eosinfilo Basfio Linfoci to

    OBJETIVO

    Identificar los cinco tipos de leucocitos por medio de un frotis de sangre teidocon Giemsa o Wright.

    INTRODUCCIN

    La sangre es el lquido tisular ms abundante, esta constituida por plasma yclulas. El plasma contiene agua principalmente, glucosa, protenas comoinmunoglobulinas que funcionan como anticuerpos cuando han identificado aun antgeno, las protenas inactivas del complemento que ayudan a los

    anticuerpos para destruir a las clulas extraas, los factores de la coagulaciny otros componentes. Las clulas son: eritrocitos o glbulos rojos, responsablesdel transporte de oxgeno a todas las clulas son los ms abundantes, lasplaquetas (trombocitos) elementos indispensables en el proceso decoagulacin y los leucocitos o glbulos blancos que participan en la respuestainmune o defensa del organismo contra sustancias extraas o agentes infeccto-contagiosos.

    Losleucocitos son clulas esfricas nucleadas se clasifican de acuerdo a lascaractersticas de su ncleo en:

    mononucleares (linfocitos, monocitos, y macrfagos) y polimorfonucleares (neutrfilos, eosinfilos y basfilos)

    De acuerdo a sus granulaciones intracitoplasmicas, se clasifican en : granulocitos : (Neutrfilos, eosinfilos, y basfilos) y agranulocitos (monocitos y linfocitos)

    TINCIN DE GIEMSA PARA LA OBSERVACIN DELEUCOCITOS

    Monocito

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    MATERIAL POR EQUIPO

    4 gotas de sangre de un voluntario.

    4 portaobjetos.

    1 puente de coloracin.

    1 frasco con colorante de Giemsa.

    1 frasco con metanol.

    1 microscopio.

    1 frasco con aceite de inmersin.1 frotes de sangre teidos por Giemsa,

    METODOLOGA

    Mtodo de preparacin de frotis sanguneo.

    1. Se pone de 1-2 cm del borde de un portaobjetos limpio y sin grasa, una

    gota de sangre (2-3 mm de dimetro) y el portaobjetos se deja sobre la

    mesa con la gota hacia arriba.

    2. Se escoge para extender la sangre otro portaobjetos limpio, sin grasa y

    con un borde liso y regular. Este borde de extensin se pone sobre el

    portaobjetos que tiene la gota de sangre formando con el ngulo de 30,

    luego el borde del portaobjetos que sirve para extender la sangre se

    hace retroceder hasta que toque la gota de sangre que se encuentra

    dentro del ngulo agudo.

    3. Inmediatamente, la gota se extiende a lo largo del borde del portaobjetos

    de extensin, el cual se hace deslizar en sentido contrario en forma

    rpida y uniforme.

    Tcnica de Giemsa:

    1. Preparar un frotis de sangre, fijar la preparacin con alcohol metlico por

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    PRCTICA 9

    El procedimiento ms simple y til parademostrar la reaccin antgeno-anticuerpoes la tipificacin sangunea por la tcnicade aglutinacin.

    OBJETIVO

    Observar la reaccin antgeno-anticuerpo mediante una prueba de

    aglutinacin.

    INTRODUCCIN

    Por su sencillez, sensibilidad y lectura visual las reacciones de

    aglutinacin son la base de muchas tcnicas en el laboratorio de inmunologa,una de tantas es la tipificacin sangunea.

    Las transfusiones sanguneas son una rutina en la prctica clnica, noobstante, an en nuestros das ocasionan peligros inmunitarios, estos riesgospueden evitarse mediante pruebas de la sangre del donador y del receptorantes de la transfusin. Las membranas de los eritrocitos humanos contienenantgenos de grupos sanguneos.

    En el ao de 1901 Landsteiner public sus observaciones acerca de la

    aglutinacin de los eritrocitos de algunos de sus colaboradores al mezclarloscon el suero de otro individuo, este hecho permiti descubrir la presencia deantgenos en la membrana de los eritrocitos, en la actualidad se conocenalrededor de 20 sistemas de grupos sanguneos diferentes y cada ao sedescubren ms.

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    Agregar a cada pocillo en forma separada una gota de los sueros

    hemotipificadores anti A, anti B y Anti Rh.

    Mezclar la sangre y el suero con ayuda de un aplicador de madera,

    hacer movimientos rotatorios suaves durante 3 minutos para que

    produzca una mezcla uniforme.

    Leer las aglutinaciones a simple vista, comparar con el cuadro e

    identificar a que grupo sanguneo pertenece la sangre en el sistema

    ABO y en el caso del sistema Rh identificarlo de acuerdo a la explicacin

    del profesor.

    Figura 7-1

    Elabore un informe INDIVIDUAL de la prctica que incluya unaintroduccin obtenida de por lo menos de dos libros consultados, resultados,conclusiones, actividades de aprendizaje y bibliografa.

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    Antgenos febriles Bacteria / dx Nombre /infeccin

    Nombre / prueba

    Salmonella typhi O Salmonella typhi

    Tifoidea Widal

    Salmonella typhi H Salmonella typhi Tifoidea Widal

    Salmonellaparatyphi A

    Salmonellaparatyphi

    Paratifoidea

    Salmonellaparatyphi B

    Salmonellaparatyphi

    Paratifoidea

    Brucella abortus Brucella abortus

    Brucelosis Huddleson

    Proteus OX 19 Rickettsiaprowazekii

    Tifusexantemtico

    Weil-Flix

    MATERIAL POR EQUIPO

    1 centrfuga.

    2 tubos de hemlisis (13 x 100 mm).

    1 placa de vidrio plano para aglutinacin.

    1 pipeta de 1.0 ml graduada en 0.001 (serolgica).

    1 pipetas Pasteur (0.2 ml).

    1 jeringa con aguja estril de 5.0 ml.

    1 frasco con tintura de yodo al 3%.

    1 lmpara.

    3 aplicadores de madera.

    1 frasco de alcohol isoproplico al 80% o alcohol etlico.

    1 ligadura.

    3 torundas de algodn.

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    1 gradilla

    1 lpiz graso

    1 juego de antgenos febriles:Salmonella tvphi O.Salmonella tvphi "HSalmonella paratyphi A.Salmonella paratvphi B.Brucella abortus

    Proteus OX-19

    METODOLOGA

    1. Aplicar tintura de yodo con una torunda de algodn sobre la reginseleccionada para la venopuncin. Empezar por el sitio central de lavenipuntura ejerciendo un moderado movimiento hacia afuera encrculos concntricos.

    2. Eliminar el exceso de yodo con una torunda de algodn impregnada dealcohol.

    3. Realizar la puncin de la vena y extraer 5.0 ml de sangre. En caso dellevar a cabo simultneamente el hemocultivo, tomar en condiciones de

    esterilidad frente al mechero el doble de volumen sanguneo y transferirinmediatamente 5.0 ml en el medio de cultivo correspondiente.

    4. Depositar la sangre en un tubo de hemlisis para obtener el suero.

    5. Dejar coagular y centrifugar a 2,000 rpm durante 10 minutos.

    6. Transferir el suero con una pipeta Pasteur a otro tubo de13x100 mm y etiquetar.

    Prueba cualitativa

    1. Marcar con el lpiz graso sobre la placa de vidrio, 6 crculos de 3.5 cmde dimetro.

    2. Depositar con la pipeta serolgica 0.08 ml del suero por probar en cada

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    Tabla 8-2

    Antgeno Aglutinacin

    +

    Ttulo de anticuerpos

    Salmonella typhi O

    Salmonella typhi "H

    Salmonella paratyphi A.

    Salmonella paratyphi B.

    Brucella abortus

    Proteus OX-19

    Entregar un informe escrito INDIVIDUAL de los resultados obtenidos en

    la prctica y en casos positivos, indicar a que ttulo de anticuerpos la pruebaes de valor diagnstico.

    ACTIVIDADES DE APRENDIZAJE

    1. Investigar en el marbete del reactivo que son los antgenos comercialesusados en estas pruebas.

    2. Qu clase de inmunoglobulinas mide la tcnica de aglutinacin?3. Investigue dos enfermedades inmunolgicas importantes que cursan

    con fiebre.4. Mencionar tres enfermedades infecciosas donde la reaccin antgeno-

    anticuerpo sea de utilidad diagnstica.5. Consultar en los libros de microbiologa e infectologa, a que ttulo la

    prueba se considera de valor diagnstico y por qu?.

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    PRCG TICA XX INCI PRCTICA 11

    Con frecuencia, la tincin de las bacterias por latcnica de Gram, es el primer paso indispensablepara demostrar la infeccin, identificar a labacteria e investigar el antibitico adecuadopara su tratamiento.

    OBJETIVOS

    Desarrollar la tcnica de coloracin de Gram

    Observar las principales formas y tipos de agrupamiento que

    presentan las bacterias.

    INTRODUCCIN

    Las bacterias ahora incluidas en dos reinos: Archeabacterias y Eubacterias;se distinguen porque las Archeobacterias no producen peptidoglucano, habitanen ambientes extremosos (p. ej., temperatura alta, gran salinidad, o pH bajo),forman metano y no causan enfermedades en el hombre. Las Eubacteriascausantes de enfermedades en el hombre se dividen en tres grandes grupos:Eubacterias gramnegativas con pared celular, Eubacterias grampositivas conpared celular y Eubacterias sin pared celular.

    La observacin de las bacterias, es a menudo el primer paso en la

    identificacin; para facilitar su estudio, las bacterias se tien. Uno de losmtodos de tincin diferencial ms tiles para la observacin, diferenciacin eidentificacin de las bacterias es el desarrollado por el histlogo Dans HansChristian Gram, el cual divide a las bacterias en dos grandes grupos: bacteriasgrampositivas y bacterias gramnegativas, lo que adems, ayuda grandemente

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    en la seleccin del antibitico adecuado para el tratamiento de la infeccin.

    La respuesta a la tincin de Gram es una caracterstica taxonmicaimportante de las bacterias. La propiedad de tincin de Gram parece serfundamental, debido a que la reaccin que implica tiene correlacin conmuchas otras propiedades. Una bacteria determinada, es siempre grampositivao gramnegativa, slo cuando se cumplan una serie de condiciones ambientalesparticulares y en un cultivo joven.

    El procedimiento para tincin de Gram comienza con la preparacin de unfrotis delgado de bacterias sobre la superficie de un portaobjetos, se fija concalor y se inicia el procedimiento propiamente con la aplicacin de un colorantebsico, el cristal violeta. A continuacin, de aplica una solucin de yodo; todaslas bacterias adquieren un color azul en ese punto. Las clulas se tratanentonces con alcohol. Las bacterias grampositivas retienen el complejo cristal

    violeta-yodo, y permanecen azules; las bacterias gramnegativas se decoloranpor completo por efecto del alcohol. En un ltimo paso, se aplica unacontratincin con el colorante de color rojo llamado safranina, de tal maneraque las bacterias gramnegativas decoloradas adquieran un color contrastanterojo y la