Manual de Practicasa. Instrumental Bqd 2016

7/24/2019 Manual de Practicasa. Instrumental Bqd 2016

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BIOQUIMICO DIAGNSTICO

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

Facultad de Estudios Superiores CuautitlnDepartamento de Ciencias Qumicas

MANUAL DE PRCTICAS

ANLISIS INSTRUMENTAL

LICENCIADO EN BIOQUIMICO DIAGNSTICOClave de la Carrera: 105-39

Clave de la asignatura: 1439

M.C. Miriam A. Castillo RodrguezM.C. Pablo Hernndez MatamorosM.C. Enrique Ramos LpezQ.F.B. Elia Granados Enrquez

Q.F.B. Ivn Santilln CanoQ. Ma. Del Carmen Campo-Garrido

Revisin y Correccin: 2016- II


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INTRODUCCION

Con la amplia gama de tcnicas instrumentales de anlisis con las que se cuenta en la

actualidad y a su incesante desarrollo, el dominio de todos ellas es difcil de abordar en

su totalidad en un curso de licenciatura, por lo tanto es necesario adquirir conocimiento

de una manera general, que nos permita interpretar y manejar datos obtenidos con

cualquiera de ellas.

La gran variedad de tcnicas instrumentadas de anlisis se basan en una relacin que

existe entre la propiedad (absorbancia, ndice de refraccin, pH, rea de pico, potencial,

conductancia, intensidad de corriente, etc.) con la composicin del sistema (anlisis

cualitativo) o bien la cantidad de alguno de sus componentes (anlisis cuantitativo).

Generalmente algunas de las tcnicas se utilizan bsicamente para el anlisis

cualitativo, otras ms en el anlisis cuantitativo y un buen grupo de ellas es capaz de

cumplir con ambas funciones.

La propiedad (P) , no es solamente afectada por la composicin del sistema tambin por

variables como temperatura, presin, tiempo, perturbaciones ocasionadas al realizar la

medicin, presencia de sustancias qumicas interferentes, etc. es por esta razn en este

curso se estudia la relacin entre la propiedad y la composicin; relacin en donde es

necesario ejercer un control efectivo sobre las dems variables que adems de la

composicin afectan la propiedad, todo esto a fin de obtener informacin til desde el

punto de vista analtico de esta manera P ser funcin de la composicin. Pudiendo as

proponer mtodos basados en esta relacin para poder conocer la composicin de cierta

sustancia(s) en muestras de inters.

Este enfoque contribuye a la formacin profesional en anlisis instrumental y al perfil

profesional en su rea.


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OBJETIVOS

OBJETIVO(S) GENERALES DE LA ASIGNATURAQue el alumno conozca las tcnicas y mtodos ms utilizados en A. Instrumental al obtener

y utilizar informacin obtenida con estos para en la cuantificacin de sustancias en

muestras de inters en el mbito bioqumico clnico para que desarrolle habilidades,

actitudes y criterio apropiados a fin de resolver problemas en su rea.

OBJETIVOS DEL CURSO EXPERIMENTAL

PRCTICAS CONVENCIONALES: Reafirmar los conocimientos tericos en la aplicacin

de las metodologas analticas empleando un equipo instrumental para identificar y

cuantificar una sustancia en una muestra de inters en el rea bioqumica clnica

1) Conocer e identificar las partes bsicas del equipo utilizado para su manejo adecuado a

fin de obtener resultados confiables.

2) Conocer la informacin que el equipo genera y su uso para anlisis cuantitativo.

3) Interpretar y relacionar variables a utilizar para efectuar el clculo de contenido de una

sustancia en una muestra real.

PRCTICA DE DISEO: Elaborar un formato experimental fundamentado qumica e

instrumentalmente para cuantificar sustancias de inters en su rea a travs de las

siguientes etapas

1) Realizar una investigacin respecto a un procedimiento base y con ello:

2) Estructurar un diseo experimental (protocolo).

3) Consultar la metodologa propuesta con el asesor con la finalidad de mejora.

4) Desarrollar en laboratorio el diseo propuesto para la cuantificacin de una muestra.

5) Contrastar los resultados obtenidos con el diseo propuesto a fin de identificar fuentes

de error tanto de diseo como experimental a fin de optimizar el protocolo.

6) Desarrollar nuevamente el experimento corregido y cuantificar.


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Asignatura: ANLISIS INSTRUMENTAL Grupo_______Carrera: LICENCIADO EN BIOQUMICO DIAGNSTICO Perodo: 2016-semana ACTIVIDAD FECHA Entrega de

productos)

1 a)Presentacinb) Informacin sobre el Sistema de Gestin

de Calidad (SGC).

c) Organizacin para trabajo en equipo.

2 a) Aplicacin del examen diagnstico,

Resolucin y evaluacin de este.

b) Preparacin de soluciones y Manejo de

material y equipo comn en el laboratorio

de Anlisis Instrumental.

-Examen diagnstico

evaluado.

-Clculos y soluciones

etiquetadas.

3 Prctica 1 Determinacin de Azul Timol

Con Espectrofotometra UV/VIS.

C. Previo 1

4 Prctica 2 Determinacin de cido

Ascrbico por curva de calibracin

C. previo 2

Informe prctica 1

5 Prctica 3 Determinacin de Zn(II)

Con Absorcin Atmica.

C. previo 3

Informe prctica 2

6 Entrega y discusin de los de Ejercicios Informe prctica 3

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICOFACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS QUMICASSECCIN DE QUMICA ANALTICA

CALENDARIZACIN

CODIGO: FPE-CQ-DEX-01-02; FPE-CQ-DEX-03-

02; FPE-CQ-DEX-04-02.

Node REVISI N: 0


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Unidad I /Primer Examen escrito

Asignacin del proyecto para Diseo

Experimental

7 Prctica4.Determinacin por HPLC C. previo 4

8 Prctica No. 5 Determinacin de etanol por

Cromatografa de Gases en enjuague

C. previo 5

Informe prctica 4

9 Prctica No.6 Determinacin de plata en un

desinfectante

C. previo 6

Informe prctica 5

10 Prctica no. 7 Determinacin

potenciomtrica de Fe(II) en tabletas.

C. previo 7

Informe prctica 6

11 Entrega y discusin de los de Ejercicios

Unidad 2 /segundo Examen escrito.

Informe prctica 7

12 Revisin del Formato de Diseo

Experimental (FDE) y experimentos

preliminares.

Avances de diseo

13 1 Sesin prctica de Diseo Experimental.

14 2 Sesin prctica de Diseo Experimental.

15 Presentacin oraldel Diseo Experimental

Aplicacin de la encuesta FPG02-FESC-01

Informe de Trabajo

del Diseo Exp.

16 Entrega de Promedios finales (desocupar gavetas)


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TABLA DE PRCTICAS Y TEMAS QUE CUBRE DEL PROGRAMANMERO

DE

PRCTICA

NOMBRE DE LA PRCTICA

NMERO Y NOMBRE DE LA

UNIDAD TEMATICA EN EL

PROGRAMA DE LA ASIGNATURA1 Determinacin Cuantitativa de Azul Timol

espectrofotomtrica

1.1 Concordancia de una medicin

instrumental

1.2 Preparacin de patrones analticos

2 Determinacin de cido ascrbico por

Curva de Calibracin Indirecta

2.2 Conocer instrumentacin y aplicacin de

espectrofotmetro

3 Determinacin de Zn por

Espectrofotometra de Absorcin Atmica

2.4 Conocer instrumentacin y aplicacin de

espectrofotmetro de Absorcin Atmica.

4 Determinacin de fenilefrina por HPLC 3.2, 3.4 Conocer y aplicar instrumentacin de

cromatografa de lquidos de alta resolucin

5 Determinacin de etanol por

Cromatografa de Gases en enjuague

bucal

3.2 Conocer y aplicar instrumentacin de

cromatografa de gases

5 Determinacin de plata en un

desinfectante

4.3 Conocer instrumentacin de

potenciometra

4.1 Aplicar las tcnicas electroqumicas.

6 Determinacin potenciomtrica de Fe(II)

en tabletas.

4.2 Aspectos bsicos y necesidades en una

curva de valoracin potenciomtrica.

7 Prctica de Diseo 1.2, 2.4, 4.2 determinacin de sustancias de

inters en su rea.


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SISTEMA DE EVALUACIN

I.-En Prcticas Convencionales

1) Trabajo de laboratorio (TL)Se evala la calidad de los resultados experimentales, as

como la destreza adquirida en el manejo del equipo y material de laboratorio (10%)

2) Cuestionario previo (CP). Se evala una revisin previa del procedimiento a realizar en

la prctica (10%)

3) Informe de trabajo (IT). Se evala el informe en cuanto a claridad y presentacin as

como la consistencia entre los resultados experimentales y el resultado del anlisis

reportado y estimar si la informacin se proces adecuadamente (80%).

La puntuacin concreta en base 10 para cada punto del informe es:

a) Nombre del experimento, fecha y Datos completos como contenidos del producto

analizado (en caso tenerlo) pesadas, preparacin de soluciones y estndares,

concentraciones de estos (1.0punto).

b) Resultados (grfica, tablas, volmenes utilizados para punto de equivalencia) (2puntos)

c) Anlisis de resultados incluyendo: reacciones y constante de equilibrio condicional, en

caso de que se efecte, regresiones lineales y clculos de contenido (5.0 puntos)

d) Conclusiones justificadas qumica e instrumentalmente (1.5puntos)

e) Referencias consultadas (0.5puntos)

II.-En prctica de Diseo Experimental.

1) Formato del diseo experimental (FD). Se evala si el proyecto planteado por el equipo

de alumnos se llevar de manera adecuada a la solucin del problema planteado (40%)

2) Informe de Diseo (ID) (se evalan los mismos puntos que el Informe de prctica

convencional) (60%)


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La puntuacin en una escala de 100 puntos se presenta en la siguiente tabla:

TIPO DE ACTIVIDAD ASPECTO A

EVALUAR

# DE ACTIVIDADES

REALIZADAS

% FINAL

Prctica Convencional TL,CP, IT 7 52

Prctica de Diseo FD, IT 1 12

Examen destreza yhabilidades demanejo e equipo yclculos decontenido individual

3*

(dos escritos y uno oral)

36

100

*Es importante que se acredite al menos uno de los dos exmenes escritos paraconsiderar el promedio final.


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Facultad de Estudios Superiores CuautitlnDepartamento de Ciencias Qumicas

Seccin de Qumica Analtica

REGLAMENTO INTERNO DE LABORATORIO

1.-En todas las sesiones es obligatorio el uso de bata, lentes de seguridad y zapatocerrado en el laboratorio.

2.- Se debern conservar limpias las instalaciones (en especial las campanas deextraccin, canaletas y tarjas de las mesas de laboratorio), el material y el equipo detrabajo (incluyendo las balanzas analticas) al inicio y al final de cada sesin experimental.

3.- Se deber guardar orden y disciplina dentro del laboratorio y durante la sesin

experimental, quedando prohibida la entrada a personas ajenas al mismo, incluyendo losinter-laboratorios.

4.- Queda estrictamente prohibido fumar, consumir alimentos y bebidas dentro dellaboratorio, ya que muchas de las sustancias qumicas que se emplean son inflamables y/otxicas.

5.- Es importante que antes de trabajar, el estudiante conozca las caractersticas de lassustancias qumicas que va a utilizar para que pueda manipularlas adecuadamente (sedeber apoyar en la consulta de las fichas de seguridad).

6.-Para la extraccin de reactivos lquidos, se debern emplear perillas de hule y nuncasuccionar con la boca.

7.- Los reactivos qumicos no debern ser manipulados directamente, se debern usarimplementos como pipetas, esptulas, cucharas, etc.

8.-Despus de manipular sustancias qumicas es necesario lavarse las manos con agua yjabn.

9.-Si se utilizan mecheros, parrillas o cualquier otro aparato, se deber estar atento en sumanejo para evitar un accidente.

10.- En caso de ingestin, derrame o inhalacin de algn reactivo por parte de algnestudiante, deber ser notificado al asesor del grupo, el cual tomar las accionespertinentes, previa consulta de las fichas de seguridad.

11.- Al trmino de la sesin experimental, el asesor de grupo, deber regresar lasdisoluciones empleadas a su lugar de resguardo ubicado en el anaquel.


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12.-Todas las personas que elaboren disoluciones y/o generen residuos deben etiquetarcorrectamente los frascos que se utilicen para este propsito utilizando la etiqueta delSistema de Gestin de Calidad.

13.-Los residuos de cada experimento debern tratarse y eliminarse adecuadamente por

los alumnos, previa consulta del diagrama ecolgico incluido en el manual de prcticas ycon el apoyo del asesor.

14.- Cuando el residuo no pueda ser eliminado, el alumno deber resguardarlo, en uncontenedor, debidamente etiquetado y cerrado, y colocarlo en el anaquel destinado paraello.

15.- Antes de iniciar las actividades experimentales se le solicitar al laboratorista elmaterial y equipo necesarios, para ello, una persona responsable del equipo dejar sucredencial (nicamente de la UNAM) en depsito y firmar un vale por el material y equiporecibidos. En caso de que existiera un defecto en el material o equipo recibido, ste deber

ser anotado en el vale.

16.-Es responsabilidad del alumno revisar el estado en que recibe el material, ya que altrmino de la sesin experimental lo debe regresar en las mismas condiciones en las quelo recibi y perfectamente limpio.

17.- En caso de extravo o dao del material o equipo de laboratorio, se resguardar el valede solicitud de material y la credencial del estudiante responsable del dao o extravohasta su reposicin con iguales caractersticas.

18.- Los alumnos que adeuden material de laboratorio, debern reponerlo a la mayor

brevedad posible o a ms tardar el ltimo da de realizacin de prcticas, de lo contrario losdeudores sern reportados al Departamento de Servicios Escolares y no podrn inscribirseen el siguiente semestre.

19.-El nmero mximo de alumnos que podrn permanecer en el cuarto de balanzas(L-101-102) ser el mismo que el nmero de balanzas disponibles.

20.-Cuando sea asignada, una gaveta a los alumnos y por razones de olvido o prdida dela llave, queda prohibido forzarla. En tal situacin los alumnos debern solicitar suapertura, por escrito, al responsable del laboratorio, previa autorizacin del profesor.

21.- La gaveta podr usarse hasta la semana 15 del semestre por lo que, el grupo deestudiantes debern desocuparla a ms tardar en la semana 16.

22.-No se permitir el uso de balanzas y equipos a personas ajenas al laboratorio o fueradel horario de su sesin experimental.

Vo.Bo.: Comit de Calidad del Depto. de Ciencias Qumicas.

Cuautitln Izcalli, Mayo del 2015.


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PROTECCION PERSONAL

CUANDO EMPIECES A TRABAJAR EN EL LABORATORIO: Te indicarn cmo se

deben utilizar los instrumentos que vayas a usar. Adems, debers saber dnde se

encuentran los extintores, el botiqun, la ducha, los aparatos lavaojos, y las salidas de

emergencia.

ANTES DE EMPEZAR UNA REACCIN: Debers conocer la peligrosidad de los reactivos

que vayas a usar, as como de los productos que se obtienen de la propia reaccin

(toxicidad, inflamabilidad, riesgo de explosin, riesgos biolgicos) y tomars las

precauciones apropiadas (por ejemplo, trabajar en la campana extractora). En cualquier

caso.

AL TERMINAR UNA SESIN: Tendrs que tratar los residuos para eliminar su

peligrosidad o los almacenars adecuadamente clasificados y etiquetados hasta que se

retiren.

AL ABANDONAR EL LABORATORIO: Te asegurars de que no queda encendida la

campana extractora y ningn foco de peligro: gases, agitadores, calentadores, etc.


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DISEO EXPERIMENTAL

Recomendaciones para realizar el diseo experimental:

Objetivos: Proponer experimentos fundamentados qumica e instrumentalmente para

cuantificar una sustancia de inters en su rea y para esto debe:

Estructurar y justificarlo en base a reacciones qumicas conocidas de uso comn.

Consultar la metodologa propuesta con el asesor con la finalidad de mejorarlo.

Aplicar el diseo para la cuantificacin de una muestra real.

Contrastar los resultados con el diseo propuesto a fin de identificar fuentes de

error tanto de diseo terico como experimental.

Para poder evaluar adecuadamente el desarrollo de los estudiantes en el diseo de

experimentos; se debe elaborar un formatoque debe considerarse como una gua para

presentarlo a revisin con el asesor en la fecha sealada en el calendario

El formato de diseo experimental debe contener al menos los siguientes puntos:

Los objetivos que se persiguen con la experimentacin.

Listado de actividades generales. Desglosadas en cada parte (material y

reactivos, preparacin de soluciones, procedimiento experimental, etc.)

Programa desglosado por cada actividad general (*).

distribucin equitativa del trabajo para cada integrante del equipo de trabajo.

Tratamiento que darn a los resultados experimentales despus de

obtenerlos mediante un anlisis estadstico.

Referencias consultadas

El informe de Actividades Final (despus de efectuar la experimentacin

correspondiente) debe incluir los puntos anteriores as como el anlisis de resultados y los

clculos de contenido de sustancia en la muestra.

Por ltimo, es necesario hacer una recomendacin. La naturaleza misma del diseo

experimental es dinmica ya que durante su desarrollo se requiere una retroalimentacin

continua y consciente para afinar los aspectos del diseo que se han contemplado. El

hecho de que en esta asignatura se presente una gua para presentarlo a revisin no

niega su dinmica intrnseca, esto es, aunque durante su elaboracin cada estudiante

debe retroalimentarse con la informacin que poco a poco va obteniendo para ir

modificando cada aspecto del diseo en forma lgica y armnica.


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Los alumnos deben

1) Cubrir las prcticas que comprende este manual.

2) Elaborar una bitcora; la cual debe contener nombre de la prctica o sesin de

trabajo, fecha, todos los clculos y las mediciones (pesadas, preparacin de

disoluciones, cambios de procedimiento, observaciones, etc.) resultados (medidas

de propiedad, grficas), anlisis de resultados (clculos de contenido,

identificaciones, reacciones efectuadas) conclusiones y referencias consultadas.

En caso de error NO BORRAR NADA solo cruzar con una lnea y escribir lo

corregido abajo o a un lado.

3) Contar con:

El 80% de asistencia al curso (10 minutos de tolerancia). La falta anula la

calificacin del reporte correspondiente.

Entrega puntual y en tiempo de los productos a evaluar (IT, ID, CP, etc.)

Aquellas personas que faltaron a la parte experimental de la prctica no tendrn

calificacin de reporte y por ende no se colocar su nombre, a menos que haya

realizado la prctica en otro grupo (bajo autorizacin de los profesores y su informe

lo realizar de manera individual).


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ACTIVIDADES CONTEMPLADAS PARA LA SEMANA No.1

1. El profesor expondr una introduccin sobre el curso de laboratorio, explicando las

actividades por realizar, el reglamento y la forma de evaluacin (ver apartado

evaluacin) e Informar sobre el Sistema de Gestin de Calidad (SGC).

2. Se incluirn las fechas en las actividades calendarizadas en el manual de prcticas.

3. Se le dar formato a la hoja de inscripcin (anotar el nombre de las prcticas).

4. Se formarn equipos (4-5 personas) de trabajo entre los alumnos del grupo.

5. Se les solicitar el siguiente material a los estudiantes, el cual estar bajo su propiedad

en gaveta por grupo que retirarn concluido el curso:

INDIVIDUAL POR EQUIPO (3-4

ESTUDIANTES)

POR GRUPO

Bata blanca y lentes

de proteccin

Bitcora de trabajo 1 candado con 3 llaves

Libreta y Manual de

prcticas

2 frascos de plstico de 100 mL

8 frascos de plstico de 10 mL

Servitoallas

Detergente lquido

1Marcador o

etiquetas pequeas

Perilla de hule o propipeta

Franela y escobilln

Muestras por analizar

en cada prctica (ver

manual)

1 barra magntica


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ACTIVIDADES CONTEMPLADAS PARA LA SEMANA No.2

1 Se recordar el uso y manejo del material y reactivos que se utilizarn durante el

curso de laboratorio realizando clculos y pesadas en la balanza Analtica de algunas

soluciones de las prcticas que durante el semestre se utilizarn.

2 Recomendar a alumnos con nfasis a leer antes de cada prctica la introduccin y

parte experimental debido a que el cuestionario previo es individual y se aplica antes de

iniciar la sesin experimental.

3 Revisar el material solicitado asignando la gaveta que se ocupar por el grupo,

colocando este material en ella y etiquetando correctamente (Grupo, carrera, profesores,

semestre, etc.)

4 El profesor organizar y repartir el tratamiento, a los equipos de trabajo, de los

residuos generados en cada prctica.

5 Se avisar a los alumnos dnde y cundo se entregar la bitcora calificada cada

semana (de preferencia en un mismo lugar y da aunque la califique un profesor diferente

ya que son dos).

6 Se aplicar y resolver el examen diagnstico.

NOTA al Profesor: ver la bitcora de asignatura, en ella se encontrarn las soluciones

a preparar de cada grupo.


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PRCTICA No. 1 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE AZUL DE TIMOL EN UNA MUESTRA DERESIDUOS MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN ESPECTROFOTOMTRICA A pH ALCALINO.

I. OBJETIVOS

Cuantificar azul de timol en una muestra mediante una Curva de Calibracin.

Evaluar la calidad y validez de los resultados obtenidos en la medicin calculando

algunos parmetros estadsticos (desviacin estndar, % RSD, factor respuesta

promedio, prueba de adecuabilidad as como la linealidad del grfico de calibracin)

Analizar las respuestas grficas obtenidas para asociar la magnitud de absorbancia

del Azul Timol con el pH del medio qumico utilizado.

II. INTRODUCCIN

El uso de curvas de calibracin para la cuantificacin de analitos es un recurso de gran

importancia en la qumica analtica, sin embargo, existen varios tipos de curvas

dependiendo de las caractersticas particulares del problema a tratar como ejemplo

tenemos a las curvas de calibracin, adiciones patrn, uso de estndar interno, valoracin,

El mtodo o curva de calibracin se utiliza particularmente para analizar mezclas sencillas,

cuando no existen interferencias fsicas o qumicas entre la matriz y el analito de intersen la muestra problema, en general la respuesta analtica es debida exclusivamente a

dicho analito.

El mtodo consiste en preparar una solucin mediante pesada directa de un patrn

primario, con esta solucin patrn se preparan una serie de soluciones estndar que

cumplan con las siguientes caractersticas:

a) La concentracin del analito se incremente proporcionalmente (por ejemplo 2, 4, 6,

8, 10 ppm).

b) Se deben preparar al menos 5 sistemas (de diferentes concentraciones).


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c) Los incrementos de concentracin entre los sistemas se recomienda que sean

constantes.

d) Que la matriz qumica donde se preparan los estndares sea semejante a la del

problema (pH, pX, sales, etc.)

Una vez preparados estos estndares, se procede a medir la propiedad o respuesta de los

sistemas en el instrumento adecuado y se obtienen una serie de valores con los que se

construye el grfico de P (propiedad o respuesta) en funcin de Cs (concentracin

estndar). La Figura 1, muestra un ejemplo donde el eje x corresponde a la concentracin

y en el eje y la respuesta o propiedad medida de cada estndar. Se observa que existe

una ecuacin matemtica que relaciona el comportamiento entre las dos variables. En la

mayora de los casos se ajusta a la ecuacin de una recta (y=mX+b) y mediante una

regresin (mnimos cuadrados) se obtiene la dispersin mnima entre los datos y su

ecuacin.

Figura 1. Ejemplo de una curva de Calibracin

Por ltimo se realiza la lectura directa o de una dilucin apropiada para la cuantificacin del

analito problema (punto azul), que posteriormente se interpola en la grafica y se obtiene la

concentracin correspondiente, tambin se obtener mediante la resolucin de la ecuacin

obtenida de la regresin. La validez y calidad del resultado est relacionado con la


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dispersin de los datos obtenidos, donde una mayor dispersin implica menor precisin.

Para evaluar la dispersin y por lo tanto, la calidad del valor que se reportar, se hace uso

de los parmetros estadsticos como: la desviacin estndar o el coeficiente de variacin

Finalmente, para medir la respuesta de la propiedad P = Absorbancia, en este caso se

utilizar espectrofotometra de ultravioleta-visible (UV/Vis), una tcnica que se revisar

ms a fondo posteriormente y donde la respuesta tiene una relacin A= K C

III. EQUIPO(S), REACTIVO(S) Y MATERIAL(ES)

Material y Equipo Reactivos y Soluciones

6 matraces volumtricos de 10 mL Agua destilada

1 matraz volumtrico de 25mL

12 tubos de ensaye medianos con gradilla

2 vasos de precipitados de 50 mL

2 Pipeta volumtrica de 1 y 2, mL

Estndar de azul de timol

Muestra problema de azul de timol

1 Pipeta volumtrica de 1,2,3,4,5, mL

1 esptula pequea, propipeta

1 piseta y un espectrofotmetro con celdas

NaOH

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Preparacin de soluciones (algunas soluciones se encontrarn en el anaquel)

Solucin de NaOH 0.01 M

Solucin Patrn o estndar de Azul de Timol 40 ppm

Solucin problema


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2. Tabla. Preparacin de la curva de Calibracin y problema (por duplicado)

Sistemas BCO 1 2 3 4 5 Pdiludo1 Pdiludo2

Soln. de NaOH 0.01 M 2 2 2 2 2 2 2 2

Soln. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 1 1

Solucin patrn de azul de

timol 40 ppm (mL)

0 1 2 3 4 5 0 0

aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10

Tabla.-Prueba de Adecuabilidad del sistema.

sistema 1 2 3 4 5 6

Soln. de NaOH 0.01 M 2 2 2 2 2 2

Solucin patrn de azul de

timol 40 ppm (mL)

3 3 3 3 3 3

aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10

3 .Calibracin del espectrofotmetro: El procedimiento de calibracin se realizar de

acuerdo al instructivo utilizando al sistema blanco.

4. Obtencin del espectro de absorcin y determinacin de (longitud de onda)

de trabajo.- Con el sistema 5 mida la absorbancia a 700 nm, ajuste ahora la en el

espectrofotmetro a 690 nm y mida la absorbancia nuevamente y as sucesivamente

hasta llegar a 500 nm a intervalos de 10 nm.

Nota: para cada cambio de se debe ajustar el espectrofotmetro con el blanco.

Registrar los datos de absorbancia y % de Transmitanciaen la tabla y graficar

A = f() % T= f() y determine la longitud de onda de mxima absorcin en el

Grfico.


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5.-Obtencin de la curva de calibracin: Se mide la absorbancia de los sistemas

preparados para la curva de calibracin (del 1 al 5), a la longitud de onda de mxima

absorcin y graficar A = f (Concentracin de ascrbico).

6. Determinacin de la concentracin de Azul de Timol Problema.

Se mide la absorbancia de los problemas diluidos (1 y 2) y determine la concentracin

Al interpolar en la grfica (recuerde que se realiz una dilucin del problema).

7.- Efectuar la medicin para la prueba de adecuabilidad.- Se mide la absorbancia de

los sistemas preparados para esta prueba y se registran en la tabla correspondiente.

V. RESULTADOS

Tabla - Datos experimentales del espectro de absorcin.

(nm) Abs % T500510520530540550560570

580590600610620630640650660670680690700

Grfica. Determinacin de ptima

Longitud de onda determinada_________


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BIOQUMICO DIAGNSTICO

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Tabla . Datos experimentales para la curva de calibracin y elanlisis estadstico

S ConcentracinM Azul deTimol

A1 A2 Aprom Kprom= Aprom/ C

1

2

3

4

5

Grfica . Curva de Calibracin (Aprom. en funcin de la concentracin M de azulde timol)

Kprom = Factor de Respuesta promedio (constante de proporcionalidad)Si la respuesta es lineal el factor de respuesta ser constante cualesquiera quesean los valores de Apromy C; para ello calcular STD = Desviacin estndar (por

sus siglas en ingls)% RSD = Porcentaje de desviacin estndar relativa* (por sus siglas en ingls) ocoeficiente de variacin, con un valora bajo (menor al 2%) permite afirmar casicon certeza que el grfico A= f(C) es una recta.


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Tabla.- Prueba de adecuabilidad del sistema permite verificar que el sistema de

medicin funciona apropiadamente, independientemente de las condiciones ambientales)

Sistema 1 2 3 4 5 6 Aprom STD %RSD

Absorbancia

%RSDun valora bajo (menor al 2%) de este permite afirmar con certeza que el sistemade medicin funciona apropiadamente a pesar de variaciones ambientales.

VI. INFORME DE TRABAJO

ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME DE TRABAJO.1.- Datos Generales

I) CARTULA. Incluir en ste orden: Nombre de la Universidad, nombre de la Facultad,

nombre de la Seccin, nombre de la asignatura comenzando con Laboratorio de,

Nmero y nombre de la prctica, Nmero de equipo, Nombre de los integrantes

(solamente de aquellos que participaron en su realizacin, se dar por entendido que los

que no aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica, Nombre de los

profesores (incluir grado: QFB, Q, M en C, Dr., etc.), Fecha de realizacin de la prctica y

Fecha de entrega de reporte.

II) NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA.

III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo y a las actividades realizadas en

la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que deben responder el Qu?,

Cmo? y Para qu?

IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones de la Tcnica instrumental en las

diferentes reas que contempla su carrera, incluyendo ejemplos (recordar que deben citar

las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:

Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones

reales que se emplearon en caso de una modificacin a la parte experimental


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23

reportada en el Manual en caso de estar ya preparada indicar la concentracin

exacta tal como aparece en el frasco.

Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados.

Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tabla

incluyendo nmero y nombre. Especificar la concentracin real de la solucin deNaOH que se emple.

Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir

imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo

reportado en el Manual.

Realizacin del espectro de absorcin; mismas consideraciones del punto

anterior.

Lectura de los sistemas de calibracin; mismas consideraciones del punto

anterior.Lectura de los sistemas de adecuabilidad.

Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en la

sesin experimental.

2) RESULTADOS. Incluir:

Tabla .- Datos experimentales del espectro de absorcin, completa.

Grfico del espectro de absorcin indicando nmero y nombre CORRECTO (el

nombre correcto de un espectro de absorcin incluye el nombre del analito, lacomposicin de la matriz as como las condiciones de amortiguamiento

impuestas, pH por ejemplo, y la concentracin del analito, la cual es bien

conocida ya que se emplea un sistema de la curva de calibracin para su

realizacin), considerar que se incluirn 2 grficos, uno A = f(M) y A= F(mg/L)

Incluir tabla: con nmero y nombre.

No. Sistema Concentracin (unidades) Absorbancia promedio

Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (el

nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo elmodelo: PROPIEDAD=f [analito]UNIDADES).

Adems debe incluir: Ecuacin de la recta bajo el modelo:

PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito] UNIDADES +/- (valor de la

ordenada al origen)


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No indicar la propiedad y la concentracin del analito como x y y, y tambin

debe incluir Coeficiente de determinacin (r2). Recordar que se tienen que incluir

2 grficos, uno con unidades de concentracin Molar y otro con unidades de

concentracin en ppm, cada uno con las especificaciones citadas anteriormente.


Muestra empleada (nombre comercial)

Presentacin

Lote y fecha de caducidad (u origen)

Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific

experimentalmente)

Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula,

por 100ml, etc.)% de principio activo con respecto al marbete

3) ANLISIS DE RESULTADOS.Incluir:

Tabla.- Datos experimentales para el anlisis estadstico, adicionando una

columna final:

Sistema [analito]UNIDAD Abs1 Abs2 AbsPROM STD %RSD Intervalo C.

Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente de stos datos, finalizando

con la justificacin del valor del coeficiente de determinacin y la validez de los

resultados de cuantificacin.

Analizar los criterios qumicos que afectan para elegir la ptima en los 2

espectros de absorcin ( A= f(longitud de onda) y %T= F(longitud de onda) y

por tanto justificar porqu se consider ese rango de nm para realizar el grfico,

para esto analizar el efecto de la matriz (enfocndose en el pH y calcularlo) en

la determinacin, emplee una escala de zonas de predominio del analito y el

color que presenta el azul Timol al pH de trabajo.

Analizar la relacin de las variables involucradas y contrastarlas con la funcinobtenida.

Incluir los clculos de cuantificacin, en el siguiente orden: Clculo de la

concentracin del STD (debe coincidir con lo reportado en el diagrama de flujo

en Preparacin del STD), clculo de la concentracin de los sistemas de la

curva, Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva,


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considerar las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el

diagrama de flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades si se

reporta en otras unidades; al final discutir sobre los resultados obtenidos en

ambas grficas.

Clculo de Factor de respuesta promedio (K prom) y su % RSD. Tablade adecuabilidad y datos de % RSD.

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo y a los redactados por ustedes (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS. Debern ser citadas ya sea en la introduccin o

en el anlisis de resultados en caso que se hallan empleado.

DATOS: Peso molecular de Azul de Timol = 466.6 g/mol.

pKa(s) de Azul de Timol = 2.0, 8.7 ( color rojo, amarillo, azul respectivamente )

VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO DE LOS REACTIVOS UTILIZADOS
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/b/bc/Thymolblau_skeletal.png


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PRCTICA No. 2 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CIDO ASCRBICO (VITAMINA C) ENTABLETAS EFERVESCENTES MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN INDIRECTA SIN DILUCIN

BAJO CONDICIONES DE AMORTIGUAMIENTO A pH cido.I.-OBJETIVOS:

Cuantificar cido ascrbico en tabletas efervescentes por una curva de calibracin

indirecta bajo condiciones qumicas amortiguadas en pH y a una longitud de onda

seleccionada.

Identificar la sustancia que da la absorbancia al pH de trabajo, mediante su

espectro de absorcin y la reaccin qumica establecida.

Calcular el coeficiente de absortividad a la longitud de onda seleccionada con los

datos de la curva de calibracin y/o con los del espectro de absorcin.

II.- INTRODUCCIN

Los principios de preparacin y trazo de una curva de calibracin ya fueron estudiados en

prcticas anteriores, donde se considera que la respuesta del instrumento es lineal

respecto a la concentracin de la sustancia a cuantificar, sin embargo debe considerarse

que si la curva es indirecta existe una o varias reacciones efectuadas en los sistemas de

preparacin, dado que la sustancia de inters da seal muy pobre o no da seal, este

reactivo que genera la reaccin debe encontrarse en exceso , considerando el siguiente

estado de equilibrio de manera general:

aX bY cZ Keq > 106

inicio VstCst

agrega VyCy

equilibrio a VyCy-b/a VstCst c/a VstCst

En el caso de que Y d la seal, el modelo matemtico que describe la respuesta grfica

es: A = Ky[Y] y considerando el estado de equilibrio anterior entonces:

[Y] =VyCy- b/aVstCst/ Vaforo. Entonces la funcin ser: P = Ky [(VyCy - b/a VstCst)/ Vaforo]


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Vst, Vy, Vaforo, representan los volmenes de los reactivos utilizados al preparar los

sistemas del estndar, reactivo Y y el aforo utilizado, Cst , Cy representan las

concentraciones molares del estndar (stock) y la concentracin del reactivo Yagregado

para generar la reaccin

Entonces se puede graficar P=f (VstCst/ V aforo), obtenindose una funcin de pendiente

igual a -Kyb/a y ordenada al origen igual a KyVyCy/Vaforo

En esta prctica se propone la cuantificacin indirecta de cido ascrbico en una forma

farmacutica, siguiendo las variaciones de una especie colorida (Y).


MATERIAL POR EQUIPO REACTIVOS

6 tubos grandes de ensaye con gradilla Agua destilada

5 matraces volumtricos de 10 mL


cido ascrbico estndar

2 pipeta volumtrica de 0.5 1, 2,3,4,5 mL Buffer cido actico /Acetato 0.01 M

pH=4.51 matraz volumtrico de 25, 50 y 100 mL

2 pipeta graduadas de 10 mL

1 agitador magntico c/barra

1 embudo con papel filtro

1 piseta, esptula y mortero con pistilo

Tabletas efervescentes (leer el marbete y

anotar el contenido de cido ascrbico)

Un espectrofotmetro con celdas de

plstico o vidrio.

2,6 diclorofenol indofenol


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IV.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

PREPARACIN DE SOLUCIONES.- Ya se considera la preparacin como viene

indicada para que alcance para todo el grupo, etiquetar para su uso.

1) -- Buffer de acetatos 0.01 M pH = 4.5 (ya est preparado en el anaquel)

2) --Solucin estndar de cido ascrbico: Se pesan 20 mg del reactivo estndar de

cido ascrbico en un vaso de precipitados de 40 mL se disuelven en aproximadamente 5

mL de agua destilada con agitacin magntica, trasvasar al matraz de 10 mL y aforar

con agua destilada.

3)-- solucinstock de cido ascrbico:A 10 mL de Buffer pH= 4.5 se le agrega 2 mL

de la solucin estndar de cido ascrbico y se aforan a 100 mL con agua destilada.

4)--Solucin de 2,6 diclorofenolindofenol (DFI): Pesar 25 mg de 2,6

diclorofenolindofenol en un vaso de precipitados de 40 mL y agregar 10 mL de agua

destilada con agitacin magntica, trasvazar al matraz de 50 mL y aforar con agua

destilada.

5) -- Solucin problema: Se pesan 3 tabletas (al menos) de una en una para obtener el

peso promedio y se anota en la bitcora cada peso, se pulverizan finamente en un

mortero.

-- Se pesan 20 mg de polvo de tabletas en un vaso de precipitados de 40 mL se

disuelven en aproximadamente 5 mL de agua destilada con agitacin magntica,

trasvasar al matraz de 10 mL y se afora con agua destilada.

6) --Solucin problema diluida: a 5 mL del buffer pH = 4.5 agregar 2 mL* de la soln.

Problema y aforar a 10 mL con agua destilada.

*si la formulacin es de 1.0 g de ascrbico se diluyen como se menciona, si es de 2.0 g de ascrbico se

agregan 1 mL de soln. Problema.


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2.Tabla Preparacin de Sistemas (curva de calibracin y problema)

Sistema Blanco 1 2 3 4 5 6 SP1 SP2

Soln. 1 Buffer de acetatos pH=4.5 3 3 3 3 3 3 3 3 3

Soln. 3 stock de cido ascrbico 0 0 1 2 3 4 5 0 0

Soln. 4 (2,6 diclorofenolindofenol DFI) 0 1 1 1 1 1 1 1 1

Soln. 6 Problema diluido 0 0 0 0 0 0 0 0.5 1

Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10 10

3 .Calibracin del espectrofotmetro: El procedimiento de calibracin se realizar

de acuerdo al instructivo utilizando al sistema blanco.

4. Obtencin del espectro de absorcin y determinacin de (longitud de onda)

de trabajo.- Con el sistema 1 mida la absorbancia a 580 nm, ajuste ahora la en el

espectrofotmetro a 470 nm y mida la absorbancia nuevamente y as sucesivamente

hasta llegar a 460 nm a intervalos de 10 nm.

Nota: para cada cambio de se debe ajustar el espectrofotmetro con el blanco.

Registrar los datos de absorbancia y % de Transmitanciaen la tabla y graficar

A = f() % T= f() y determine la longitud de onda de mxima absorcin.

5. Obtencin de la curva de calibracin: Se mide la absorbancia de los sistemas

preparados para la curva de calibracin (del 1 al 6), a la longitud de onda de

mxima absorcin y graficar A = f( Concentracin de ascrbico ).


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V. RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla - Datos experimentales del espectro de absorcin.

(nm) 460 470 480 490 500 510 520 530 540 550 560 570 580

A

% T

Grfica 1.- Espectro de Absorcin A= f( Longitud de onda )

Tabla- . Curva de Calibracin Indirecta

Sistema 1 2 3 4 5 6 SP1 SP2

Conc.M del

estndar

Absorbancia


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Grafico 2.- Curva de Calibracin Indirecta de Ac. Ascrbico A = f(M)


ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL INFORME DE TRABAJO.

1.- Datos Generales





que no aparezcan no recibirn calificacin correspondiente a esa prctica. Nombre de los




III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las

actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que

deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.


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IV) INTRODUCCIN. Incluir solamente aplicaciones del Mtodo de cuantificacin en las


las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones


reportada en el Manual. Si se emplean reactivos comerciales incluir la pureza y

densidad (en caso de reactivos lquidos).

Preparacin de la muestra; indicando los posibles cambios realizados. Mencionar

la marca, presentacin y gramaje de la muestra empleada en caso que el alumno

la halla proporcionado.

Preparacin de los sistemas de la curva de calibracin; en forma de tablaincluyendo nmero y nombre. En el caso del buffer especificar la concentracin y

pH reales con las que se trabajaron, as como del cido ascrbico y DFI.

Calibracin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede incluir

imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a lo

reportado en el Manual.

Realizacin del espectro de absorcin; mismas consideraciones del punto

anterior.

Lectura de los sistemas de calibracin; mismas consideraciones del puntoanterior.


sesin experimental.


Tabla .- Datos experimentales del espectro de absorcin, completa.

Grfico del espectro de absorcin indicando nmero y nombre CORRECTO (el

nombre correcto de un espectro de absorcin incluye el nombre del analito, lacomposicin de la matriz as como las condiciones de amortiguamiento

impuestas y la concentracin del analito, la cual es bien conocida ya que se

emplea un sistema de la curva de calibracin para su realizacin), considerar que

se incluirn 2 grficos, uno en funcin de Absorbancia y otro en % Transmitancia.


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Tabla - Datos experimentales de la Curva de calibracin.


nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el

modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).

Adems debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la

ordenada al origen)


debe incluir Coeficiente de determinacin (r2).



Presentacin

Lote y fecha de caducidad (u origen)Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific

experimentalmente)

Resultado experimental (reportado como en el marbete: mg/por

tableta, por 100ml, etc.)

% de contenido (principio activo con respecto al contenido registrado

por el marbete)

3) ANLISIS DE RESULTADOS.Incluir: Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente al valor del coeficiente de

determinacin para la validez de los resultados de cuantificacin.

Identificar y calcular las condiciones de amortiguamiento impuestas en los

sistemas de la curva (calcular el pH y pCH3COO)

Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima en los 2

espectros de absorcin. Adems justificar porqu se consider ese rango de nm

para realizar el espectro de absorcin, para ello realizar la escala de zonas de

predominio para 2,6 DFI y ver el color que presenta en cada caso. Proponer una escala de prediccin de reacciones redox para obtener la

reaccin representativa llevada a cabo entre el cido ascrbico y el DFI,

Balancear, as como calcular la Keq considerando que en los equilibrios

redox el clculo no es mediante Ley de Hess, sino mediante la frmula general

que considera los E (s).


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Analizar que cambiara en la respuesta del espectro de absorcin y en la curva

de calibracin si el anlisis se realizara a un pH bsico. Explicar.

Analizar la relacin de las variables involucradas (A y Concentracin) en funcin

de la respuesta grfica y contrastarlas con la Ley de Lambert & Beer.

Calcular el Coeficiente de absortividad molar, incluyendo unidades correctas,especificando a que sustancia corresponde ese valor.





regresin a las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el

diagrama de flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las

similares al marbete as como el % de principio activo; esto se debe reportarcon los datos de ambos sistemas problema (Sp1y SP2), al final discutir sobre los

resultados obtenidos en ambos sistemas.

Con base al % de principio activo (recordar que es el comparativo entre el

resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar las posibles

fuentes de error que condujeron a la diferencia con el contenido reportado y las

acciones preventivas que sugieres para la mejora.

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo y a los (particulares).

5) REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS, ELECTRNICAS O HEMEROGRFICAS.

Debern ser citadas ya sea en la introduccin o en el anlisis de resultados en caso que

se hallan empleado.

DATOS

cido ascrbico(C6H8O6) pKas = 4.05, 7.252,6 diclorofenolindofenol ( C12H7Cl2NO2 ) pKa= 5.758 (forma cida roja, bsica azul)C6H7O6-/ C6H6O6 + H+ + 2e- Eo = 0.13 V ( a pH=4.5)C12H7Cl2NO2 / C12H9Cl2NO2 Eo = 0.43 V ( a pH=4.5)

(roja) (Incolora)


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VII. ORIENTACIONES PARA EL TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE RESIDUOS

El cido actico glacial, La inhalacin de sus vapores es altamente txico produce

trastornos en las vas respiratorias. Cualquier contacto directo con la piel u ojos debe de

lavarse con abundante agua.


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PRCTICA No. 3 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE ZINC EN UN MULTIVITAMNICOMEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN POR ESPECTROFOTOMETRA DE ABSORCIN

ATMICAI. OBJETIVOS

Conocer el fundamento, las partes bsicas y manejo del espectrofotmetro de

absorcin atmica, para obtener resultados confiables en este tipo de instrumento.

Interpretar y relacionar las variables a utilizar para efectuar el clculo de contenido

de zinc en un multivitamnico comercial por una curva de calibracin directa.

II. INTRODUCCIN

La curva de calibracin se prepara mediante diluciones de una solucin estndar (stock)

de la misma naturaleza del analito a determinar en la muestra, en un intervalo que pueda

ser trabajado en el instrumento y la muestra se prepara de manera tal que la

concentracin del analito en la muestra o en su dilucin se encuentre dentro de dicho

intervalo.

Las soluciones preparadas se llevan al instrumento de medicin y se registra una

respuesta P para cada dilucin de estndar y de muestra. Los resultados se grafican P=

f(concentracin de cada dilucin del estndar). Se debe evaluar la linealidad de la

respuesta en relacin a la concentracin del analito mediante la inspeccin grfica y se

efecta adems la regresin lineal para determinar la mejor ecuacin que exprese el

comportamiento de la misma. La interpolacin de la seal de la muestra (o su dilucin) en

la recta permite conocer la concentracin de esta.

La Espectrometra de Absorcin Atmica (EAA) se utiliza habitualmente en la

determinacin cuantitativa de soluciones de iones metlicos Se ha aplicado a

determinacin de hasta 70 elementos, en concentraciones trazas (ppb) y hasta 1%. Cabe

mencionar que esta tcnica no diferencia estados de oxidacin de los metales, por lo que

solo se mide la cantidad de metal total.

Previo a la cuantificacin por EAA es necesario realizar una digestin cida a fin de

eliminar la presencia de materia orgnica, an en muestras lquidas y adems para


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solubilizar los metales, sobretodo en muestras slidas. Para ello se utiliza normalmente

cido ntrico concentrado y calor, hasta que no se generen humos amarillos, reflejo de

que todava hay una reaccin redox presente.

El zinc es un nutriente que nos aporta casi todas las enzimas de la piel, incluyendo

aquellas que se encargan de crear el colgeno y producir nuevas clulas, tanto el zinc

como el hierro son fundamentales en la produccin de clulas en los folculos capilares y

en el transporte de oxgeno, etc.

A continuacin, se presenta un esquema de un espectrofotmetro de absorcin atmica

con flama (EAA-F).


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MATERIAL REACTIVOS

1 piseta y 1 esptula Acido ntrico R.A.

Nitrato de Zn

Multivitamnico

Fortimin (o sol. oral

infantil de marca libre)

2 matraces volumtricos de 10 mL


1 micropipeta de 100 L(vol. Variable)

1 parrilla con agitador magntico c/barra

Solo un equipo pedirlo

6 tubos de ensaye con gradilla

6 Matraces volumtricos de 10 mL

1 Matraces volumtricos de 25 mL

1Pipeta volumtrica de 1, 2, 3, 4, 5 mL

EQUIPO

Espectrofotmetro de

absorcin atmica


1.1Preparacin de soluciones

Solucin de cido ntrico 1 M.

Solucin estndar de Zn .- Se mide 1 ml de una solucin de Zn elemental 100 ppm con

pipeta volumtrica y se agrega y afora a 25 ml con solucin cida (soln. Stock).

Solucin problema del multivitamnico - Medir 0.1 mL del multivitamnico Fortimn (sol.

oral infantil) agregar con mucho cuidado 2 mL de cido ntrico concentrado, mezclando

con agitacin magntica y con calentamiento en parrilla a 100 oC *(colocarla dentro de la

campana de extraccin), para eliminar el azcar contenido, hasta que no se generen

humos amarillos. Enfriar y aforar a 10 mL con Soln. cida. (Soln. Problema)


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*No sobrepasar la temperatura y tener paciencia hasta que la solucin quede lo ms transparente

posible

1.2 Preparacin de sistemas para la curva de calibracin y problema

Sistema 0 1 2 3 4 5 Pdiludo

Soln. Acida (mL) 3 3 3 3 3 3 3

Soln. Stock Zn aprox. 4 ppm 0 1 2 3 4 5 0

Soln. Problema (mL) 0 0 0 0 0 0 0.12

Agua destilada (aforo) 10 10 10 10 10 10 10

3. Obtencin de resultados

a) Optimizar las condiciones de medicin en el equipo (EAA-Fl).

Siguiendo el programa que controla el equipo, revisar que estn las siguientes

condiciones: muestreo manual, mezcla de gases = acetileno /aire, seal absorbancia,

posicin correcta de la lmpara, longitud de onda () 213.9 nm, ancho de banda = 0.7,

voltaje de la lmpara =15 A, etc. (para determinacin de zinc)

b) Optimizacin de la lmpara de ctodo hueco.

El procedimiento se realizar siguiendo las indicaciones del profesor para alinear la

lmpara de ctodo hueco hacia el monocromador y la posicin del quemador.

c) Medicin de la Absorbancia.

Considerando las indicaciones del programa de trabajo del equipo, primero se emplea

agua destilada y despus el blanco reactivo (sistema blanco) para calibrar la seal a cero.

Despus se solicitan las soluciones estndar y problemas, anotar la lectura promedio de

las mediciones que realiza (Tabla 2) y graficar los resultados que se van obteniendo.


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Tabla 1. Medicin a absorbacia de los sistemas para la curva y problema

Sistema Zn(ppm)

estndar

Abs.

medida

1

2

3

4

5

Pdiludo

Grafica 1. Absorbancia en funcin de la concentracin de Zn


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VI. INSTRUCCIONES PARA EL INFORME DE TRABAJO

ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL

INFORME DE TRABAJO.

1.- Datos Generales









III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base al objetivo general del Manual y a las

actividades realizadas en la prctica redactar 2-3 objetivos particulares recordando que

deben responder el Qu?, Cmo? y Para qu?.



las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:

Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones



densidad (en caso de reactivos lquidos).


la marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla

proporcionado. Incluir tabla:

Peso de polvo de tableta empleada

(unidades):

Peso promedio por tableta (unidades):


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incluyendo nmero y nombre. En el caso de la solucin cida indicar la

concentracin molar empleada.

Optimizacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de flujo, puede

incluir imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del profesor no a loreportado en el Manual. Recuerde especificar la mezcla de gases, longitud de

onda y voltaje de la lmpara que realmente se emplearon.

Optimizacin de la lmpara de ctodo hueco; mismas consideraciones del punto

anterior.

Calibracin con el sistema blanco y lectura de los sistemas de la curva de

calibracin; mismas consideraciones del punto anterior. No olvidar mencionar qu

se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo ya para apagarlo.

Disposicin de residuos; mencionar cmo se dispusieron los residuos en lasesin experimental.


Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de calibracin. Adicionando una

columna ms donde coloquen la concentracin molar (M) de cada sistema.


nombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el

modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).Adems debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:

PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la

ordenada al origen)



2 grficos, uno con unidades de concentracin Molar y otro con unidades de

concentracin en ppm, cada uno con las especificaciones citadas anteriormente.

Incluir tabla: con nmero y nombre.Muestra empleada (nombre comercial)

Presentacin, Lote y fecha de caducidad (u origen)

Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific)

Resultado experimental (reportado como en el marbete

% de principio activo con respecto al marbete


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3) ANLISIS DE RESULTADOS:

Incluir la copia de la hoja del Manual del equipo de Absorcin atmica para la

medicin de Zn.

Calcular el pH en los sistemas (es el mismo) en base a la concentracin

utilizada de HNO3 y ver si es una condicin de amortiguamiento. Establecer que especie de Zn(II) es la representativa que tienen los sistemas

antes de medir, utilice una escala de zonas de predominio para Zn(II).

Justificar en base al clculo de solubilidad molar condicional (SM) que el Zn(II)

no ha precipitado bajo las condiciones de pH amortiguado y por ende es posible

el anlisis sin interferencias.

Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima, se

puede apoyar con la curva de calibracin, la hoja para medicin de Zn por

absorcin atmica y al rango de concentraciones que se manejaronexperimentalmente en la curva de calibracin.

Describir brevemente con sus propias palabras como funciona la lmpara de

ctodo hueco y como se lleva a cabo el proceso de nebulizacin y atomizacin.

Mencionar las posibles interferencias que se pueden llevar a cabo y cmo

evitarlas para que no afecten en la medicin del Zn.

Analizar la relacin de las variables involucradas y contrastarlas con la Ley de

Lambert & Beer.

Calcular el Coeficiente de absortividad molar, incluyendo unidades correctas, lamanera de cmo se calcul con la grfica y su interpretacin.

Escribir la reaccin que se lleva a cabo en la Digestin cida con HNO 3

concentrado, justificando el nombre de la entidad qumica que se genera en

forma de gas caf rojizo y el por qu se realiz en la prctica.




curva, Interpolacin de la propiedad de la muestra en la ecuacin de la curva,considerar las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el

diagrama de flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a las

similares al marbete as como el % de principio activo; al final discutir sobre los

resultados obtenidos.


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resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles

errores que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que

cometi y las acciones preventivas que sugieres para la mejora.

4) CONCLUSIONES. Con base al objetivo y a los redactados por ustedes (particulares).



DatosZn(OH)nn-1= log 1= 4.4 , log 3= 14.4, = log 4= 15.5 Zn(OH)2=15.68HNO3/ NO2Eo= 0.79 V

C12H22O11 CO2 (considere un potencial menor al HNO3)(sacarosa)


La inhalacin de vapores de cido ntrico y sus productos de reaccin produce trastornos

en las vas respiratorias, usarlo siempre en la campana extractora.

La solucin cida sobrante de todo el grupo se debe mezclar y guardar bien etiquetadaindicando fecha de preparacin y concentracin aproximada en frasco de vidrio.


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1 SESION DE EJERCICIOS

1.- El coeficiente de Absortividad Molar de una solucin acuosa de fenol a 211 nm es de

6170 cuando se mide en celdas de 1 cm, calcular el intervalo de concentraciones en el

cual La absorbancia no es menor a 0.15 ni mayor de 0.8.

2.-Trazar la curva de Calibracin espectrofotomtrica de Bi(III) Utilizando Bi(III) 1x10-3M

como stocK a pH = 1.0 , si el coeficiente de absortividad molar del Bi(III) es 5300 a

=265 nm. Por AA

3.-Para determinar la glucosa en un suero sanguneo* se prepararon los siguientes

Sistema 1 2 3 4 5 6 7 8

NaOH 0.1 M 3 3 3 3 3 3 3 3

Estndar de glucosa 2x10-3

M

0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 0 0

Sol. Fe(CN)63-0.01M 2 2 2 2 2 2 2 2

Suero sanguneo * 0 0 0 0 0 0.1 0.1 0.1

Aforo con agua destilada 10 10 10 10 10 10 10 10

Absorbancia a 420 nm 1.42 1.07 0.80 0.45 0.05 0.885 0.876 0.895

a) Graficar y obtener la funcin, mencionando el color de la sustancia que da la seal

b) Calcular los mg promedio de glucosa / dL de suero.

c) Calcular la media, desviacin estndar y % CV del problema.

d) Calcular el coeficiente de absortividad molar de Fe(CN)63-

5.-Resultados Obtenidos para evaluar la adecuabilidad del sistema en la determinacin de

Ampicilina/ Bromhexina en una formulacin por espectrofotometra, completar la tabla


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Sistema Bromhexina Ampicilina

1 0.5698 0.659

2 0.5841 0.676

3 0.6113 0.674

4 0.5817 0.677

5 0.5852 0.657

6 0.5398 0.664

Promedio

Desviacin Estndar

CV %

Decir si el sistema de medicin empleado funciona adecuadamente Por qu?

6.- Los siguientes datos fueron obtenidos en la calibracin de un espectrofotmetro para

la determinacin de potasio en agua mineral

mg K /100

ml

1.1 1.95 2.9 3.85 4.6 4.95

Respuesta 14.2 28 37.3 48.4 62.7 69.4

A) Deducir la ecuacin de la mejor lnea recta

B) Si la muestra de agua da una seal de 30.3 Cul es el contenido de K en la

muestra?


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PRCTICA No. 4 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CLORHIDRATO DE FENILEFRINA EN UNPRODUCTO FARMACUTICO (TABLETAS Y/O GOTAS) MEDIANTE UNA CURVA DE CALIBRACIN

POR CROMATOGRAFA DE LQUIDOS DE ALTA RESOLUCIN (HPLC).I. OBJETIVOS

Conocer los componentes bsicos del cromatgrafo de lquidos de altaresolucin mediante su descripcin frente al equipo, su manejo y cuidados.

Conocer un cromatograma obtenido durante la sesin experimental para ser

utilizado en anlisis cualitativo y cuantitativo, considerando las variables

qumicas que afectan esta respuesta.

Interpretar y relacionar las variables de los cromatogramas obtenidos para

efectuar el clculo de contenido de clorhidrato de fenilefrina por una curva de

calibracin en productos comerciales.

II. INTRODUCCIN

La Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin es la tcnica de separacin ms

ampliamente utilizada en la industria, debido a su sensibilidad. Su fcil adaptacin a

determinaciones cuantitativas es idnea para sustancias no voltiles o termolbiles de

aplicacin en la industria, en muchos campos de la ciencia y para la sociedad en general.

En la Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin, se ponen en contacto dos fases

inmiscibles, una mvil y la otra estacionaria. Una muestra que se introduce en la fase

mvil es transportada a lo largo de la columna que contiene a la fase estacionaria

distribuida. Los componentes separados emergen en orden creciente de interacciones

con la fase estacionaria. La migracin depende de la solubilidad de los solutos en fase

mvil o estacionaria.

Los mtodos de evaluacin para las determinaciones cuantitativas por medio de HPLC

son variados. Sin lugar a duda, la calibracin con estndares es el mtodo ms utilizado

El xito de la separacin para un compuesto dado depende de las condiciones de

operacin como son: tipo y longitud de columna, proporcin y tipo de fase mvil, velocidad

de flujo de la fase mvil, etc.


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Componentes bsicos que integran un equipo de HPLC


Equipo y material Reactivos y smbolo de peligrosidad

Cromatgrafo de lquidos de alta

resolucin HPLC Metanol grado HPLC

Balanza analtica

1 agitador magntico c/barraTrietanolamina

2 matraces aforados de 25 mL

1 esptula y pisetacido actico

6 matraces aforados de 10 mL (grupo)

2 vasos de precipitados de 50 ml Clorhidrato de Fenilefrina

1 pipeta volumtrica de 1,2,3,4,5 mL

1 pipeta graduada de 2 y 6 mL

1 micropipeta de 10 a 100 microlitros

Fenilefrina problema (puede utilizar producto

genrico solo verificando que no contiene

paracetamol)


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1.- PREPARACIN DE SOLUCIONES (verificar en el anaquel las soluciones ya

preparadas y en su caso solo utilizarlas)

-- FASE MOVIL [c. Actico-Trietanoamina-H2O (1.5:0.5:98)]

Se filtra al vaco a travs de una membrana con dimetro de poro 0.45mm.

Se coloca en un frasco perfectamente limpio y se lleva al ultrasonido 15 minutos.

-- SOLUCIN ESTNDAR DE FENILEFRINA

Se pesa en un vaso de precipitados de 50 mL, con balanza analtica, 20 mg del

estndar de fenilefrina, se disuelve en aproximadamente 20 mL de agua desionizada

con agitacin y se afora a 25 mL con fase mvil (Soln. A).

De la soln. A se toma una alcuota, con pipeta volumtrica, de 1 mL llevando a un

aforo de 25 mL con agua desionizada (Sol. Stock)

--- SOLUCIN PROBLEMA DE FENILEFRINA

Solucin Oftlmica.-Se toma una alcuota de 30 L de la solucin oftlmica*, se

adicionan a aproximadamente 5mL de fase mvil y se afora a 50 mL con agua

desionizada(Soln.P1).


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*de acuerdo al marbete: 10g de fenilefrina / 100 mL de solucin.

Tabletas Pesar 5 tabletas y obtener el peso promedio por tableta (Anotarlo).

Triturar 2 tabletas y pesar la cantidad de polvo equivalente a 1 mg* de fenilefrina.

Disolver muy bien el polvo en aproximadamente 5 mL de fase mvil.

Aforar a 10 mL, con agua desionizada, filtrar para eliminar los excipientes insolubles

El filtrado es la soln. P2.

*calcular la cantidad de polvo a pesar de acuerdo al marbete del medicamento (que no

debe contener paracetamol de preferencia)


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2.-TABLA 1 Preparacin sistemas CURVA DE CALIBRACIN Y PROBLEMAS

Sistemas 1 2 3 4 5 Pdil.1 Pdil.2

Sol Stock de fenilefrina aprox. 32 ppm 1 2 3 4 5 0 0

Soln. P (1 ) soln. oftlmica 0 0 0 0 0 3 0

Soln. P (2) tabletas 0 0 0 0 0 0 1

Aforo a mL Con agua desionizada 10 10 10 10 10 10 10

Trasvasar los sistemas debidamente etiquetados a frascos de plstico de

aproximadamente 20 mL y Colocar las soluciones en el ultrasonido 5 minutos.

TABLA 2 CONDICIONES DE LA INSTRUMENTACIN PARA LA CORRIDA

CROMATOGRAFICA

Tipo de

columna

Flujo de fase

Mvil

Detector Longitud de

onda

Volumen de

Inyeccin

C-18 0.8 mL/min UV/VIS 272nm 20L

Se obtienen con atenuacin =5 en el registro.


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3.-PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

A) Fijar el flujo de la fase mvil en la bomba

B) Ajustar la longitud de onda del detector

C) Iniciar el flujo de la fase mvil por la columna durante 10 min para asegurar la

remocin de posibles compuestos retenidos de la columna.

D) Inyectar 20L de las soluciones estndar, iniciando con el menos concentrado.

E) Finalizar con la inyeccin de las soluciones problema.

Despus de la ltima inyeccin, lavar la columna con una fase mvil Metanol/Agua


Llenar la siguiente tabla con los resultados del cromatograma o en su caso efectuar el

clculo (con la frmula pertinente) para cada una de las soluciones inyectadas

(sistemas).

Sistema Concentracin (ppm) Tr (min) W rea Altura N AEPT

1

2

3

4

5

6

7

Tr= tiempo de retencin, W= ancho de pico a la base, N= Nmero de platos tericos,

AEPT= altura equivalente de un plato terico, ppm (partes por milln).


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CURVA DE CALIBRACIN DE FENILEFRINA Area = f (concentracin)


ESQUEMA Y PUNTOS MNIMOS A EVALUAR PARA LA REALIZACIN DEL

INFORME DE TRABAJO.

1.- Datos Generales









III) OBJETIVOS PARTICULARES. Con base en los objetivo de la prctica y a las

actividades realizadas en la misma redactar 2-3 objetivos particulares recordando que

cada objetivo dentro de su estructura deber responder a las preguntas Qu?, Cmo?

y Para qu?.


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las referencias).

V) DIAGRAMA DE FLUJO. Incluir:Preparacin del STD; indicando los volmenes, masas y/o concentraciones



densidad (en caso de reactivos lquidos). ***


la marca y presentacin de la muestra empleada en caso que el alumno la halla

proporcionado. Si trabajaron con tabletas y gotas se debe describir la preparacin

por separado de cada muestra. Mencionar la composicin y proporcin de laFase mvil que se emple y describir brevemente cmo y con qu se llev a

cabo el proceso de filtracin. No olvidar mencionar el proceso de sonicacin.

Incluir tabla:

Peso de polvo de tableta empleada

(unidades) o Volumen medido de gotas

Peso promedio por tableta (unidades):


incluyendo nmero y nombre.Optimizacin y preparacin del equipo; paso a paso en forma de diagrama de

flujo, puede incluir imgenes o dibujos y ser con base a la explicacin del

profesor no a lo reportado en el Manual. Recuerde especificar el lavado previo de

la columna (Fase estacionaria) y con qu Fase mvil, tipo de columna empleada

(Tipo, marca y longitud), Velocidad de flujo impuesto en la bomba, tipo de

detector y longitud de onda empleada. No es necesario mencionar las

condiciones impuestas en el integrador.

Lectura de los sistemas de la curva de calibracin; mismas consideraciones delpunto anterior. Enfatizar cmo se debe cargar la jeringa con la muestra para

inyectar y propiamente el proceso de inyeccin de la muestra al equipo. No

olvidar mencionar qu se debe hacer una vez que se termin de usar el equipo

ya para apagarlo.


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sesin experimental.


Incluir los cromatogramas con nmero y nombre, tanto de TODOS los sistemasde la Curva de calibracin como de su(s) muestra(s). Recortar y pegar de forma

limpia y ordenada, no solamente engraparlos, y sombrear con marcatextos los

datos del pico de la fenilefrina.

Tabla No. 1.- Datos experimentales de la Curva de calibracin y parmetros

cromatogrficos. Recuerda que la altura ser medido con una regla ya que es un

dato que no da el cromatograma. Incluir el clculo del Intervalo de confianza

para el tiempo de retencin y el nmero de platos toricos.

Grfico de la curva de calibracin indicando nmero y nombre CORRECTO (elnombre correcto del grfico de una curva de calibracin se puede indicar bajo el

modelo: PROPIEDAD=f[analito]UNIDADES).

Adems debe incluir forzosamente: Ecuacin de la recta bajo el modelo:

PROPIEDAD = (valor de la pendiente) [analito]UNIDADES +/- (valor de la

ordenada al origen)



2 grficos, uno con rea como propiedad y otro con altura, cada uno con lasespecificaciones citadas anteriormente.

Incluir tabla: con nmero y nombre. Si emple 2 muestras, sern 2 tablas, uno

por cada muestra.


Presentacin

Lote y fecha de caducidad (u origen)

Marbete (enfocndose slo al analito que se cuantific

experimentalmente)Resultado experimental (reportado como en el marbete: por cpsula,

por 100ml, etc.)

% de principio activo con respecto al marbete


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3) ANLISIS DE RESULTADOS.Incluir:

Calcular el pH y pAcO de la Fase mvil, considerando su preparacin y los

datos de pKas correspondientes.

Trazar el diagrama trivial de zonas de predominio para las especies de

fenilefrina y con base a esta indique la especie representativa presente en laseparacin a las condiciones de amortiguamiento.

Analizar los criterios qumicos que se emplearon para elegir la ptima de

lectura en el equipo.

Analizar qu tipo de cromatografa se emple con base a las polaridades de la

Fase mvil y Fase estacionaria y tambin con base a la proporcin de la Fase

mvil a lo largo de la corrida cromatogrfica, indicando el orden de separacin

de los analitos (que se presentaron en el cromatograma) con base a su

polaridad (quin saldra primero y al ltimo y porqu). Mencionar que datos del cromatograma usaron para IDENTIFICAR el pico de la

fenilefrina y que datos usaron para CUANTIFICAR, indicando porqu.

Discutir cul es el motivo del porqu se les sugiere muestras farmacuticas sin

paracetamol.

Realizar el anlisis e interpretacin correspondiente al valor del coeficiente de

determinacin para la validez de los resultados de cuantificacin.

Incluir los clculos de N (# de platos tericos) y AEPT (o H) para cada sistema;

adems, calcular el tR promedio, N promedio y AEPT promedio y realizar elanlisis correspondiente de estos parmetros cromatogrficos para justificar si

la separacin y corrida cromatogrfica fue eficiente.





regresin a las diluciones de la muestra (deben coincidir con lo reportado en el

diagrama de flujo en Preparacin de la muestra) y cambio de unidades a lassimilares al marbete as como el % de principio activo; esto se debe reportar

para cada una de las muestras que se trabajaron y cada una empleando la

curva con rea y con altura, al final discutir sobre la variabilidad de ambos

resultados.


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resultado experimental y el reportado en el marbete) analizar los posibles

errores que condujeron a ese resultado, mencionando el tipo de error que

cometi y las acciones preventivas que sugieres para la mejora.

4) CONCLUSIONES. Con base en los objetivos de la prctica y a los redactados por

ustedes (particulares).



DATOS

pKa(s) = 8.8 y 9.8

cido actico CH3COOH pKa = 4.8 trietanolamina pKa= 7.8


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Procurar generar y guardar la menor cantidad de residuos. Aquellas soluciones que

puedan ser re-utilizadas deben emplearse o bien ser desechadas adecuadamente


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PRCTICA No. 5 DETERMINACIN CUANTITATIVA DE ALCOHOL ETLICO EN ENJUAGUE BUCALMEDIANTE EL MTODO DE ADICIN DE ESTNDAR INTERNO POR CROMATOGRAFA DE GASES.

I. OBJETIVOS

Aplicar los conocimientos tericos adquiridos para emplear el mtodo de adicin

del estndar interno al realizar un anlisis cuantitativo.

Conocer e identificar las partes bsicas del cromatgrafo de gases para

capacitarse en su manejo a fin de obtener resultados confiables.

II. INTRODUCCION

En Cromatografa de Gases (CG) la muestra se inyecta y volatiliza en la cabeza de una

columna cromatogrfica. La elucin se produce por el flujo de una fase mvil, un gas

inerte (no interacciona con las molculas del analito) cuya nica funcin es la de

transportar el analito a travs de la columna (fase estacionaria). Al pasar por la columna

los solutos son separados y eluyen hacia el detector, cuya respuesta se visualiza en un

integrador o una computadora.

Los estndares internos tienen su mxima utilidad cuando hay prdidas inevitables de la

muestra, por ejemplo durante una inyeccin manual en CG. Si se agrega un estndar

interno a una mezcla antes de cualquier prdida, entonces la fraccin de estndar que se

pierde es la misma que la fraccin de la muestra que se pierde y el cociente (C mta/Cstd)

permanece constante.

Un compuesto para ser utilizado como Estndar Interno (EI), debe reunir los siguientes

requisitos: a) que el pico de respuesta est cercanos pero resuelto de los componentes a

determinar, b) que sea estable y qumicamente inerte, c) tener estructura similar al

componente a determinar, d) no estar presente en la muestra original y e)tener alto grado

de pureza.


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Los enjuagues bucales llevan la finalidad primordial de corregir el mal aliento de origen

bucal, tornndolo agradable. Para ello, deben controlar el desarrollo bacteriano y dejar la

boca agradablemente fresca, por eso integran en su composicin etanol.

1. Fase mvil (gas)

2. Puerto de inyeccin

3. Columna (FE)

4.Horno de la columna

5. Detector

6. Computadora

1. Fase mvil (gas)

2. Puerto de inyeccin

3. Columna (FE)

4.Horno de la columna

5. Detector

6. Computadora

Esquema de un cromatgrafo de gases


REACTIVOS MATERIAL EQUIPOS

Alcohol etlico 6 tubos de ensaye de volumen

pequeo con gradilla

Cromatgrafo de

gases con detector

de ionizacin de

flama

3 vasos de precipitado de 50 mL

1piseta

Alcohol n-proplico 1 jeringa para CG de 10 L

1 micropipeta de 100 a 1000 L


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V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Preparacin de soluciones

Solucin estndar externo.Tomar 200 L de etanoly adicionar 800 L de agua

destilada en un tubo de ensaye (Soln. 1).

Solucin estndar interno. Tomar 100 L de n-propanol, colocarlos en un tubo de

ensayo y adicionar 900 L de agua destilada; (Soln. 2).

Mezcla de estndares.Colocar en un tubo de ensayo 100 L de la Soln. 1 y 100 L

de la Soln. 2 y adicionar 800 L de agua destilada.

Solucin problema. Colocar en un tubo de ensayo 100 L de la Soln. 2 y 100 L del

enjuague bucal y adicionar 800 L de agua destilada

.

2.- DESARROLLO EXPERIMENTAL

Conectar y verificar las conexiones elctricas del equipo

Abrir las vlvulas de los tanques de gas (nitrgeno e hidrgeno) y las llaves de paso.

Encender el equipo y dejarlo calentar.

a) Seleccionar las condiciones de medicin en el equipo (CG-FID).

Siguiendo la pantalla y el programa que controla el equipo, revisar que estn las

siguientes condiciones.


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Documents

Manual de Practicasa. Instrumental Bqd 2016