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8/10/2019 Medios de Cultivo (TIPOS DE CULTIVOS Y ESPECIFICACIONES)
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MEDIOS RICOS Y ENRIQUECIDOS:NO TIENEN AGENTES INHIBIDORES
MEDIO COMPONENTESPRINCIPALES
CARACTERSTICAS USOS VISUALIZACIN DELAS COLONIAS
MEDIOS SLIDOSAgar nutritivo Caldo nutritivo + Agar.
Diferentes versiones con
distintos componentes(peptona, triptona-soja,infusin de cerebro ycorazn, agar Brucella, agarColumbia, etc.)
No es diferencial Medio rico para el cultivo demicroorganismos en general, crecen
una gran mayora, excepto algunosmuy exigentes
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Agar TSA Digestin enzimtica de sojay casena.
No es diferencial, si nose le aade sangre
Medio rico para el cultivo demicroorganismos en general. Se usacomo base para agar sangre. Crecen
una gran mayora, e incluso algunosexigentes, comoBrucella,Corynebactrium, Listeria
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Agar Columbia Peptona, triptena, extractode levadura y extracto decorazn, almidn
No es diferencial, si nose le aade sangre
Medio rico para el cultivo demicroorganismos en general. Se usacomo base para agar sangre. Crecenuna gran mayora, e incluso algunos
exigentes al aadir sangre.
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BHI Infusin de tejidos animales,peptonas, glucosa y tampn
No es diferencial Medio rico que permite elcrecimiento de una gran mayora delos microorganismos, menos losmuy exigentes. Se puede usar como
base para Agar sangre.
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8/10/2019 Medios de Cultivo (TIPOS DE CULTIVOS Y ESPECIFICACIONES)
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Agar sangre Agar base (BHI, Columbia,
TSA, Brucella) + 5% sangrede oveja desfibrinada
Diferencial, permite ver
distintos tipos dehemlisis
Aislamiento de la gran mayora de
microorganismos, incluidos algunosmuy exigentes. No permite elcrecimiento deNeisseriay
Haemophilus.
Distingue tres tipos de
hemlisis:-hemlisis o hemlisis total-hemlisis o hemlisis
parcial-hemlisis o no hemlisis
Agar sangre con disco
de bacitracina
dem. a agar sangre + disco
de bacitracina de muy bajaconcentracin (0,04U)
Diferencial, hemlisis Identificacin de Streptococcus
pyogenesy Streptococcusagalactiae
S. pyogenes: Colonias beta-
hemolticas sensibles abacitracina (halo deinhibicin), S. agalactiae,colonias beta-hemolticas nosensibles
Agar sangre con estraestafiloccica
Agar sangre con una estracon S.aureus. La beta-hemlisis producida por S.
aureuslibera factor V yfactor X, permitiendo elcrecimiento deHaemophilus
Identificacin deHaemophiluscomo colonias satlites en la estrade Staphylococcus aureus.
Colonias puntiformessatelitales deHaemophilus
Agar sangre paraanaerobios
Agar base (p.e.., Columbia)+ 5% sangre de oveja +extracto de levadura +hemina + vitamina K
Diferencial, hemlisis Medio enriquecido, permite elcrecimiento de una gran mayora deanaerobios
Hemolisis
Agar chocolate Agar sangre, con la sangrelisada (por calentamiento a80C). Los eritrocitos lisadosliberan la hemoglobina yotros nutrientes como factorX (hemina) y factor V(NAD)
Ya no es diferencial Medio rico que permite elcrecimiento de una gran mayora delos microorganismos, incluidos losmuy exigentes comoNeisseriay
Haemophilus
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8/10/2019 Medios de Cultivo (TIPOS DE CULTIVOS Y ESPECIFICACIONES)
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Agar CLED Cistina, lactosa, deficiente
en electrolitos. La cistinamejora la recuperacin de lasenterobacterias. La lactosa yel indicador (azul de
bromotimol) permitendistinguir las bacteriasfermentadoras de lactosa deno fermentadoras de lactosa.La deficiencia en electrolitoslimita el movimiento de
Proteus.
Medio rico y diferencial,
permite distinguirfermentadoras y nofermentadoras de lactosa
Para urocultivo Fermentadoras de lactosa se ven
amarillas (baja el pH y vira elindicador a amarillo). Las nofermentadoras se ven incoloras,
blancas o incluso azuladas (si subenel pH por utilizacin de las
peptonas).
Medio de Kligler(Tubo en pico deflauta)
Lactosa:glucosa 10:1Rojo fenol como indicadorTiosulfato sdicoFe para detectar la formacin
de sulfuro
Medio rico y diferencial,permite ver 4caractersticas de lasenterobacterias:
fermentacin de laglucosa, fermentacin dela lactosa, produccin desulfuro y formacin degases.
Identificacin presuntiva degneros de enterobacterias
Pico rojo/fondo amarillo: fermentanglucosa y no produce sulfuro(Providencia, Shigella, Serratia,algunas especies de Citrobacter)
Pico rojo/ fondo rojo y precipitadonegro: fermenta glucosa y producesulfuro (Salmonella, Proteus)Pico amarillo/fondo amarillo:fermenta glucosa y lactosa y no
produce sulfuro (E. coli, Klebsiella,Enterobacter). Puede haberformacin de gases (se levanta elagar).Pico amarillo, fondo amarillo y
precipitado negro: fermenta glucosay lactosa y produce sulfuro(Citrobater freundii).
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Meller-Hinton Peptona, almidn, pH 7,3 Transparente para
observar bien los halosde inhibicin, no tienePABA (interaccin conantibiticos), grosor 4mm.
Realizacin de las pruebas de
sensibilidad a antibitios (Bauer-Kirby, dilucin en agar y test depsilon)
Se siembra en csped, tres
veces con un hisopo
CALDOS
Caldo nutritivo Extracto de carne con NaCl.Se puede suplementar conextracto de levadura,
peptonas, glucosa, etc.
-- Para microorganismos no exigentes ----
Caldo tioglicolato Caldo suplementado concasena, extracto de levaduray de carne y tiglicolato. Para
anaerobios, aadir ademshemina y vitamina K.
Caldo ms utilizado enmicrobiologa clnica.Bajo potencial redox.
Favorece el crecimiento de aerobios,microaerfilos, y anaerobios (capade parafina lquida), incluso
microorganismos exigentes. Bajopotencial redox, favorece larecuperacin de anaerobios.
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Caldo con carnepicada
Trozos de carne como fuentede protenas
Bajo potencial redox Favorece la recuperacin deanaerobios, mejor cuando se aadeuna capa de parafina lquida.
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CALDOS DE ENRIQUECIMIENTO(agentes inhibidores a baja concentracin, retrasan el crecimiento de la microbiota contaminante y
permiten el enriquecimiento de un microorganismo que se quiere recuperar.
MEDIO COMPONENTES PRINCIPALES CARACTERSTICAS USOSCaldo gram negativos GN Agentes inhibidores a baja
concentracin: citrato y desoxicolato(sal biliar) inhiben las gram positivasy retrasan el crecimiento de lascoliformes
Enriquecimiento de Salmonellay Shigellaen muestras de heces e hisopados rectales
Caldo selenito F Agente inhibidor: selenito de sodio.Inhibe los enterococos y retrasa elcrecimiento de las coniformes. Se
puede aadir cisterna que favorece elcrecimiento de Salmonella.
Enriquecimiento de Salmonella.
Caldo tetrationato Inhibidores: sales biliares y
tetrationato sdico (se genera en lareaccin de tiosulfato con yodo),inhiben las bacterias gram positivas ylas coniformes que no tienen laenzima tetrationato reductasa
Enriquecimiento deSalmonella
Caldo peptonacomplementada
Caldo con peptona pH 8,4 Enriquecimiento de especies de Vibrio,antes de subcultivar en medios msselectivos
Caldo tioglicolato Campy Caldo similar al tioglicolatosuplementado con un poco de agar(semislido) y antibiticos
Enriquecimiento de especies deCampylobacter antes de subcultivar enmedios ms selectivos
Caldo Todd-Hewitt consangre y antibiticos
Como inhibidores lleva cidonalidxico y gentamicina o colistina
Enriquecimiento de Streptococcusagalactiaede muestras genitales.
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MEDIOS SELECTIVOS
MEDIO COMPONENTESPRINCIPALES
CARACTERSTICAS USOS VISUALIZACIN DE LASCOLONIAS
Agar de MacConkey Inhibidores: cristalvioleta y sales biliares.Lactosa como agentediferencial. Rojo neutrocomo indicador.
Selectivo y diferencial Aislamiento debacterias gramnegativas(enterobacterias). Elcolorante cristalvioleta inhiben lasgram positivas. Lassales biliares inhibenlas gram positivas yalgunas gramnegativas (no las
enterobacterias).
Las enterobacterias fermentadoras delactosa (E. coli,Enterobacter, Klebsiella)se ven rosa/rojo/violeta. E. colipuede
presentar um halo rosa alrededor de lscolonias, debido a la precipitacin de lassales biliares a pH muy cido. Las nofermentadoras de lactosa (Salmonella,Shigella,Providencia, Proteus) se ventransparentes.
Agar EMB Inhibidores: eosina yazul de metileno.Lactosa como agentediferencial.
Selectivo y diferencial Aislamiento debacterias gramnegativas(enterobacterias). Loscolorantes inhiben lasgram positivas.
Las enterobacterias fermentadoras delactosa (Enterobacter, Klebsiella) se venrosa/rojo/violeta. E. colise ve de colorverde metlico, debido a la precipitacinde los colorantes a pH muy cido. Las nofermentadoras de lactosa (Salmonella,
Providencia, Shigella, Proteus) se ventransparentes.
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Agar SS Inhibidores: sales
biliares, citrato, y elcolorante verde
brillante: Incorporalactosa y tiosulfatocomo agentesdiferenciales. Rojoneutro como indicador.
Selectivo y diferencial Aislamiento selectivo
de SalmonellayShigellade muestrasde heces o hisopadosrectales.
Colonias deSalmonella: incoloras, no
fermentan la lactosa y con punto centralnegro (producen sulfuro).Colonias de Shigella: incoloras, sin puntocentral negro.Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,pero rosa/rojo, por la fermentacin de lalactosa. Gram positivas no crecen.
Agar entrico Hektoen(HE)
Inhibidores: salesbiliares, citrato, y loscolorantes fucsinacida y azul de
bromotimol. Incorporalactosa y tiosulfatocomo agentes
diferenciales. Azul debromotimol comoindicador.
Selectivo y diferencial Aislamiento selectivode SalmonellayShigella de muestrasde heces o hisopadosrectales.
Colonias de Salmonella: incoloras overdes, del color del medio, no fermentanla lactosa y con punto central negro(producen sulfuro).Colonias de Shigella: incoloras o verdes,del color del medio, sin punto centralnegro. Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas, yamarillas, (fermentacin de la lactosa).Gran positivos no crecen.
Agar XLD Inhibidores: salesbiliares a altaconcentracin, citrato ytiosulfato. Lactosa,sacarosa y xilosa comoagentes diferenciales.Lisina como agentediferencial. Tiosulfatoy citrato como agentesdiferenciales.Indicador: rojo fenol.
Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode especies deSalmonella y Shigella.
Colonias de Salmonellarosas o rojas (nofermentan la lactosa, pero descarboxilan lalisina, suben el pH) con punto centralnegro (por produccin de sulfuro). Lascolonias de Shigellase ven transparentes(no fermentan la lactosa) sin punto centralnegro.Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,pero amarillas, por la fermentacin de lalactosa. Gram positivos no crecen.
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Agar desoxicolato-
citrato (ADC)
Inhibidores:
desoxicolato y citrato.Incorpora lactosa comoagente diferencial. Rojoneutro como indicador.
Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivo
de especies deSalmonella y Shigella.
Colonias de Salmonellay Shigellase ven
transparentes (no fermentan la lactosa).Coliformes (E. coli, Klebsiella,
Enterobacter) pequeas, muy inhibidas,pero rosa/rojo, por la fermentacin de lalactosa.
Agar sulfito de bismuto Inhibidor: bismuto y elcolorante verde
brillante. Sulfatoferroso y sulfito comoagentes diferenciales.
Selectivo y Diferencial.Muy inestable, no se
puede usar al cabo de unasemana tras su
preparacin.
Aislamiento selectivode Salmonella typhi
Colonias con bordes claros y punto centralnegro.
Agar verde brillante Inhibidor: coloranteverde brillante (inhibegram positivas).
Incluye lactosa ysacarosa. Rojo fenolcomo indicador.
Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode especies deSalmonella, salvo S.
typhiy S. paratyphi.No se recomiendapara Shigella
Colonias de Salmonellarosas, blancas otransparentes, dependiendo de lafermentacin de los azcares.
Agar chocolate conIsovitalex yvancomicina
Agar sangre, con lasangre lisada (porcalentamiento a 80C).Se aade isovitalex(suplementovitamnico,aminocidos, Fe,glucosa, etc.) yvancomicina parainhibir gram positivos
Ya no es diferencial. Loseritrocitos lisados liberanla hemoglobina y otrosnutrientes como factor X(hemina) y factor V(NAD). El aadido devitaminas, aminocidos,glucosa, Fe, etc. permiteel crecimiento de
NeisseriayHaemophilus
Medio selectivomodificado para elaislamiento de
NeisseriayHaemophilus
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Agar salino manitol
(Chapman)
Inhibidor: cloruro
sdico al 7,5%. Manitolcomo agentediferencial, rojo fenolcomo indicador.
Selectivo y diferencial Aislamiento selectivo
de estafilococos ymicrococos
Los estafilococos coagulasa positivos
(Staphylococcus aureus) fermentan elmanitol y dan colonias amarillas. Losestafilococos que no fermentan el manitol(p.e., S. epidermidis) dan colonias blancaso del color del medio.
Agar Columbia CNA Agar base Columbiacon colistina y cidonalidxico
No es diferencial Aislamiento de cocosgram positivos
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Agar selectivo paraestreptococos
Inhibidores: cristalvioleta y antibiticos(trimetoprim-sulfametoxazol y
colistina). Tambinlleva sangre.
Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode S. pyogenes(garganta) y S.agalactiae
Permite ver hemlisis (beta).
Agar PEA (alcohol feniletlico)
Inhibidor: alcoholfenil-etlico (inhibegram negativas).Tambin se puedeaadir 5% sangre deoveja.
Selectivo.Si lleva sangre esdiferencial
Aislamiento selectivode cocos gram
positivos(estafilococos yestreptococos).Tambin para cocosgram positivosanaerobios si seincuba enanaerobiosis.
Si lleva sangre se observan reaccioneshemolticas. Si no, no es diferencial.
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Agar sangre lacada con
kanamicina yvancomicina (KVLB)
Sangre lacada
(congelada-descongelada). Agentesinhibidores:antibiticos(kanamicina, inhibealgunos gram negativosaerbios, yvancomicina, queinhibe gram positivosem general).
Selectivo.
No es diferencial
Aislamiento selectivo
de anaerobios,fundamentalmentegram negativos, demuestras en las quehay microbiotaaerobia y anaerobiamezcladas.
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BHI + Antibiticos dem. a BHI +cicloheximida (inhibehongos saprfitos) +cloranfenicol(antibacteriano)
Selectivo. No esdiferencial
Aislamiento selectivode hongos patgenos
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Agar sangre +antibiticos
Agar base (BHI,Columbia) + 5% sangrede oveja desfibrinada +cloranfenicol +gentamicina
Selectivo y Diferencial Aislamiento selectivode hongos patgenos,incluso los msexigentes. Losantibiticos inhibenlas bacterias.
Agar glucosa deSabouraud
Agentes inhibidores debacterias: antibiticos(cicloheximida ycloranfenicol), pHlevemente cido (5,6)inhibe algunas
bacterias
Selectivo. No esdiferencial
Aislamiento dehongos patgenosdermatofitos.
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Agar SABHI Agar base de
Sabouraud al que se leaade BHI, para poderaislar hongos msexigentes
Selectivo. No es
diferencial
Aislamiento ptimo
deBlastomycesdermatitidis e
Histoplasma
capsulatum
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MEDIOS ESPECFICOS
Bordet-Gengou Bordetella pertussisRegan-Lowe Bordetella pertussisAgar sangre de caballo con carbn Bordetella pertussisyB. parapertussis
Agar Campy con sangre CampylobacterAgar Skirrow Campylobacter
Agar CCF (fructosa, cicloserina, cefoxitina) Clostridium difficileCCYE Clostridium difficile
Agar cistina-telurito Corynebacterium diphtheriaePico de flauta de Loeffler Corynebacterium diphtheriae
BCYE (agar tamponado con carbn y extracto de levadura) Legionella pneumophilaAgar sangre de caballo con bacitracina Legionella pneumophila
Lowestein-Jensen Mycobacterium tuberculosis
Agar Thayer-Martin NeisseriaMartin-Lewis Neisseria
New York City Neisseria gonorrhoeae(tambin micoplasmas genitales)
Diamond Trichomonas vaginalis
Agar TCBS (tiosulfato-citrato-bilis-sacarosa) Vibrio cholerae
Agar CIN (cefsulodina, irgasn, novobiocina) Yersinia