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Tlamati Sabiduría Volumen 8 Número Especial 2, Octubre 2017

4°r. Encuentro de Jóvenes en la Investigación de Bachillerato-CONACYT Acapulco, Guerrero 4, 5 y 6 de octubre 2017

Memorias Extracción de los metabolitos secundarios en Mangifera indica (mango)

Gabriela Robles Jimón (Becaria) [email protected]

Unidad Académica Preparatoria No.33, Universidad Autónoma de Guerrero.

Doc. Luz Patricia Ávila Caballero (Asesor) [email protected]

Facultad de Ciencias Químico- Biológicas Universidad Autónoma de Guerrero.

Introducción

El mango se cultiva desde tiempos muy remotos, como lo prueba el hecho de que en la

India, en sus sagradas escrituras de más de 4000 años mencionan su cultivo como de origen

antiguo (Mata y Mosqueda, 1995). Algunos botánicos estiman que esta planta fue domesticada

por el hombre desde hace 6000 años (Hill, 1952; citado por Galán, 1999). El centro de origen de

este frutal, en el Sudeste de Asia, va desde 27º de Latitud Norte hasta casi 5º sobre el Ecuador y

desde Sri Lanka hasta las Islas Canarias. Las especies de mango se encuentran distribuidas en una

amplia zona geográfica con distintas condiciones ambientales y exhiben una considerable

diversidad genética, particularmente de caracteres de fruto (Galán, 1999). La distribución de su

cultivo se extendió primeramente por el Sudeste Asiático y más tarde al archipiélago Malayo;

mientras que su distribución al resto del mundo es relativamente reciente, en virtud de apertura en

el siglo XVI de las rutas comerciales marítimas, así los portugueses lo llevaron primeramente al

continente Africano y posteriormente a las costas de Brasil, en América; y de aquí se distribuye al

resto del continente americano llegando a las costas del Golfo de México (estado de Veracruz) en

el siglo XVII procedente de la Isla de Barbados; por otro lado, los españoles lo introducen vía

océano Pacífico directamente de las islas de Filipinas a México (costas del estado de Guerrero) en

1779 y de nuestro país se introduce a Florida en 1883 (Mata y Mosqueda, 1995).

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Puede vivir bien en diferentes clases de terreno, siempre que sean profundos y con un

buen drenaje, factor este último de gran importancia. En terrenos en los que se efectúa un

abonado racional la profundidad no es tan necesaria; sin embargo, no deben plantarse en suelos

con menos de 80 a 100 cm de profundidad. Se recomiendan en general los suelos ligeros, donde

las grandes raíces puedan penetrar y fijarse al terreno. El pH estará en torno a 5.5-5.7; teniendo el

suelo una textura limo-arenosa o arcillo-arenosa. Un análisis de un suelo donde los mangos

prosperan muy bien dio el siguiente resultado: cal (CaO) 1,2 %, magnesio (MgO) 1,18 %, potasa

(K2O) 2,73 %, anhídrido fosfórico (P2O5) 0,15 %, nitrógeno 0,105 %. El mango tiene una mayor

importancia económicamente ya que ocupa el quinto lugar de consumo mundial y tercero entre

los tropicales, al igual de importante por su distribución mundial.

Se cultiva en alrededor de 100 países, en uno de los más consumidos a nivel mundial. Se

encuentra ampliamente distribuido en países asiáticos y latinoamericanos, y en general, en

regiones con clima cálido. Se cultivan en todo el mundo alrededor de cuatro millones de

hectáreas y se producen cerca de 28 millones de toneladas. En las áreas de su cultivo genera

fuentes de empleo, contribuye a la alimentación humana y genera ingresos económicos. En

México, dentro de los frutales, el mango ocupa el segundo lugar, en cuanto a superficie sembrada

con 176,781.49 ha, sólo por debajo del cultivo de la naranja que tiene una superficie de

348,558.26 ha y por encima de los cultivos de limón, aguacate y plátano que cuentan con una

superficie de 145,831.50, 101,881.82 y 80,923.28 ha, respectivamente. (Food and Agriculture

Organization of the United Nations, 2007)

El mango conocido como la especie de mayor importancia en México y en el estado de

Guerrero perteneciente de la familia Anacardiaceae, del genero Mangifera y de la especie indica

es una arbórea frutal. Esta especialmente crece en la Zona Intertropical, es de pulpa carnosa y

dulce. Destaca entre sus principales características su buen sabor. Dicha pulpa puede ser o no

fibrosa, siendo la variedad llamada mango de hilacha la que mayor cantidad de fibra contiene. Es

una fruta normalmente de color verde en un principio, y amarillo, naranja e incluso rojo-granate

cuando está madura, de sabor medianamente ácido cuando no ha madurado completamente.

Existe una gran variedad de mangos aproximadamente tiene unas 130 especies descritas y solo 8

son aceptadas. Las variedades que se cultivan en México son Manila, Ataulfo, Haden, Tommy

Atkins, Kent, Keit y Manililla.

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La mayoría de la producción nacional de este frutal se destina para el consumo interno,

generalmente como fruta fresca, aunque también existe algo de industrialización (rebanadas en

almíbar, jugos o fruta seca). Del total de la superficie sembrada en México, 25 % corresponde a

la variedad Manila, seguidas por las variedades de Ataulfo y Haden con el 16 y 15%

respectivamente (Martínez y de la Trinidad, 2007). Por sus propiedades bromatológicas, es una

fuente importante de vitamina A y riboflavina y otros elementos importantes para el organismo

humano. Por su contenido en antioxidantes naturales, es una fruta de gran interés dietético y

nutricional, además de que contiene fibra y betacaroteno (Prieto et al., 2005).

En la presente investigación se realizó la extracción e identificación de los metabolitos

secundarios presente en las hojas de Mangifera indica por considerarse como un recurso

medicinal, dentro de la herbolaria tradicinal iniciando la deshidratación de las mismas en alcohol

del 96° y posteriormente se colocaron en placas de cromatografia fina para su determinación.

Antecedentes

Se han realizado estudios referente a la maduración de este fruto por la exposición a

etileno exógeno de mangos ‘Kent’ refrigerados durante 4 días estimuló la maduración de los

mismos y desarrolló el color en la cáscara, lo que mejoró la apariencia externa de los frutos; sin

embargo, el color interno no logró completar su desarrollo. Los tratamientos con 100 y 500 µL L-

1 de etileno presentaron una mejor respuesta a la aplicación de dicho gas. El sabor de los frutos

tratados con etileno fue ligeramente menos dulce y más ácido, y no se detectaron sabores u olores

anormales debidos al tratamiento con etileno exógeno. (Revista Fitotecnia Mexicana, Diciembre,

2004). Entre otros estudios relevantes realizados en los subproductos de la produción del mango

se encuentra la obtención de la extracción de grasa de semilla de mango variedad Manila y se

realizó la caracterización química del perfil de ácidos grasos. Con esta información se presenta

una alternativa para el aprovechamiento de subproductos de la industria de jugos y néctares para

regiones tropicales. Los porcentajes de extracción promedio fueron mayores que los obtenidos

para semillas como el maíz. Este proceso puede ser incluido en paquetes tecnológicos de

regiones con poco desarrollo tecnológico, para generar fuentes de empleo y darle un valor

agregado a los subproductos agrícolas. La siguiente etapa de este trabajo será realizar las

evaluaciones técnico-económicas para determinar la viabilidad de este trabajo en zonas tropicales


de bajos recursos.(Revista Mexicana de Agronegocios, junio, 2013).Sin embargo se han

empezado a realizar investigaciones sobre los metabolitos presentes en este fruto, por las

propiedades de bienestar que se le atribuyen.De las primeras especies estudiadas en este ambito

es el mango de azúcar, variedad colombiana pequeña, de escasa fibra, buen aroma y sabor. Esta

investigación evaluó la capacidad antioxidante del fruto en diferentes estados de maduración por

FRAP (Ferric reducing antioxidant power) y DPPH (2,2-diphenylpicrylhydrazyl) clasificados por

inspección visual y escala CIELab. Las características nutricionales y el valor ORAC (Oxygen

Radical Absorbance Capacity) se determinaron en el mango maduro. Los resultados indican que

el mango de azúcar y un producto tipo néctar poseen capacidad antioxidante, compuestos

bioactivos y nutricionales beneficiosos para la salud. (Revista Chilena de Nutrición, Septiembre,

2014).El mango al considerarse una fruta valiosa como fuente de compuestos antioxidantes con

comprobado beneficio a la salud. Sin embargo, factores como la variedad, temporalidad de

cultivos, tratamientos pre y post-cosecha, extracción de bioactivos y algunas barreras fisiológicas

pueden modificar su potencial nutracéutico.(Nutrición Hospitalaria, Enero, 2015).

Estudios realizados en este fruto han revelado que contiene nutrimentos como son: Hierro,

Calcio, Potasio, Yodo, Zinc, Magnesio, Sodio, vitamina A, Vitamina B1, Vitamina B2, Vitamina

B3,Vitamina B5, Vitamina B6, Vitamina B9, Vitamina C, Vitamina E, Vitamina K, y Fósforo.

Tiene acción beneficiosa en la piel, la vista, el cabello, las mucosas, los huesos y el sistema

inmunológico. También por su contenido en vitamina C, ayuda en la absorción de hierro, la

formación de glóbulos rojos, colágeno, dientes y huesos, es antioxidante y anticancerígeno.

Ambas vitaminas tienen propiedades antioxidantes. Asimismo, el mango tiene propiedades

digestivas porque su alto contenido de magnesio y fibra resultan en un efecto saciante beneficioso

para personas con sobrepeso y diabetes. Algunas ventajas de la cascara de mango es que ayuda a

la pérdida de peso, previene el cáncer, bueno para la piel, mejora la vista del ojo, controla la

azúcar en la sangre, mejora la digestión, aumenta el sistema inmune, cura el acné, reduce los

signos del envejecimiento, ayuda en el embarazo, aumenta la salud en el cerebro, alivia el

malestar estomacal, reduce el colesterol, etc. Así como la depuración de la sangre, combate los

catarros, actúa muy bien en casos de acidez estomacal, ayuda en caso de estreñimientos, combate

las mucosidades de la garganta evitando que se formen placas bacterianas que provocan

infecciones, libera las vías respiratorias colaborando en la mejor oxigenación de los órganos,



combate ronqueras, fiebres, bronquitis y es un auxiliar para hacer fomentos en casos de golpes o

torceduras aliviando la zona afectada.

Objetivos

General

Extracción de metabolitos secundarios presentes en las hojas del mango (Mangifera

indica)

Objetivo particular

Identificación de metabolitos secundarios presentes en las hojas del mango (Mangifera

indica)

Metodología.

Se realizó una extracción etanólica utilizando las hojas de Mangifera indica, para

posteriormente realizar una cromatografía y observar los diferentes metabolitos presentes en las

hojas de Mangifera indica.

Una pequeña mancha de disolución que contiene la muestra se aplica sobre una tira de

papel cromatográfico a una distancia aproximada de un centímetro de la base. La muestra es

adsorbida en el papel. Esto significa que la muestra entra en contacto con el papel y puede

establecer interacciones. El papel es sumergido en un disolvente adecuado (acetato de etilo,

hexano, metanol y cloroformo) e introducido en un contenedor cerrado. A medida que el

disolvente asciende por el papel, encuentra la muestra que empieza a viajar por el papel con el

disolvente. Los diferentes compuestos de la muestra recorren distancias diferentes dependiendo

de la fuerza de sus interacciones químicas con el papel. La cromatografía en papel requiere algún

tiempo, habitualmente se necesitan varias horas para completarse. (Universidad de

Barcelona,UB).


Materiales:

Material biológico

Alcohol del 96°

Frasco de vidrio

Placa de silica para cromatografía

Cámara de luz ultravioleta

Solventes orgánicos

Cámara fotográfica.

Bolsa oscura

Tubos capilares

Pistola de aire

Liquido revelador

Procedimiento:

1. Buscamos las hojas del mango M.indica, cortamos y seleccionamos las que se encontraban en

mejor estado.

2. Lavamos las hojas para desinfectarlas y las escurrimos.

3. Conseguimos un bote de vidrio con tapa el cual lavamos y secamos.

4. Cortamos las hojas de mango con tijeras que desinfectamos en pedacitos pequeños hasta que

obtuvimos 35gr.Y lo pesamos en una báscula.

5. Obtenido los 35gr, colocamos los trocitos en el frasco de vidrio.



6. Terminando de colocar los pedacitos de hojas de mango cubrimos con alcohol del 96° hasta

cubrir las hojas. De ahí lo colocamos en una bolsa oscura.

En este trabajo realizaremos una cromatografía para poder observar los metabolitos secundarios

que contiene la Mangifera indica (mango):

1. Se utilizo una placa de silica de 8 cm por 6cm de ancho para la realización de la

cromatografia

2. Se colocó el extracto y se repitió 20 veces la aplicación con la ayuda de un tubo capilar.

3. Obtenida la muestra se preparó la solución de solventes en la primera en 2 ml de acetato

de etilo y 8 ml de hexano en donde se sumergió y se tapó y se esperó hasta que llegara

hasta la marca que se señalo anteriormente (1 cm antes de llegar al borde) y se sacó. A

simple vista pudimos observar unas manchas amarillas las cuales revelan la presencia de

clorofila en el extracto.

4. Se realizó una segunda muestra de solventes que consiste en colocar 8 ml de hexano y 2

ml de acetato de etilo para poder aumentar su polaridad y se tapó en el cual pudimos

apreciar que se notaban distintos colores en cada uno de los extractos.

5. En la última muestra se colocó 9.5 de cloroformo y 0.5 de metanol y se hizo el mismo

proceso en donde notamos la presencia de colores más exactos.

6. La tercera muestra se colocó en la cámara ultravioleta en donde se pudo apreciar con

exactitud la presencia de diversos colores.

7. Para realizar la lectura o revelación es necesario la utilización de la solución reveladora

compuesta por Ácido Fosfomolibdico.

Resultados

Para poder hacer esta investigación realice la extracción etanólica de las hojas de mango

para poder localizar los metabolitos secundarios presentes en las hojas de Mangifera indica

después de una semana dio como resultado un concentrado verde oscuro, al tener este extracto se

pasó a lo siguiente en donde se realizó una cromatografía con una placa de silica al colocar, un

poco de esta extracción se pudo observar un color más claro.


1. Extracción etanólica elaborada

2.Extracción etanólica después de haber reposado 1 semana

La primera cromatografía a base de 2ml de acetato de etilio y 8 ml de hexano se revelo la

presencia de clorofila que es el pigmento que da el color verde a los vegetales y que se encarga de

absorber la luz necesaria para realizar la fotosíntesis, proceso que posibilita la síntesis de

sustancias orgánicas a partir de las inorgánicas (CO2, H2O y sales minerales), mediante la

transformación de la energía luminosa en energía química. La clorofila absorbe sobre todo la luz

roja, violeta y azul, y refleja la verde. Generalmente la abundancia de clorofila en las hojas y su



presencia ocasional en otros tejidos vegetales, como los tallos, tiñen de verde estas partes de las

plantas (Ingeniería Agroindustrial Perú, 2014).

3.Gotas de la extración etanolica 4.Se colocó la placa de silica en la solución colocados en la placa de silica. 2 ml acetato de etilo y 8 ml de hexano

5. Se esperó el resultado de la cromatografía 6.Resultado arrojado en la cromatografía después de haber pasado por la solución.

En la segunda cromatografía se colocaron 8ml de a acetato de etilo y 8 ml de hexano

acetato de etilio y 2ml de hexano y se pudo notar la presencia un poco más clara de colores

distintos como son amarillos y verdes al investigar se notaron las xantofilas que son compuestos

químicos que contienen carbono e hidrógeno contienen uno o más átomos de oxígeno dentro de

la molécula, presentan colores llamativos rojo, naranja y amarillo. (Universidad de Guanajuato


2007). Y la presencia de la clorofila a es el único pigmento que está directamente implicado en

las reacciones luminosas. Absorbe primordialmente luz de los campos azul-violeta y rojo del

espectro y es de color verde oscuro, porque refleja principalmente la luz verde. Mientras que la

clorofila b no participa directamente en las reacciones luminosas, sino que transmite a energía

absorbida a aquellas moléculas de clorofila a que están directamente implicadas. Por este motivo,

la clorofila b se conoce como pigmento accesorio. (Introducción a la Botánica. 2005.)

7.Se le agrego 8 ml de hexano y 2 ml para 8.Se colocó la cromatografia en la solución y la colocación de la siguiente cromatografia. se espero para obtener los resultados.

9. Se obtienen los resultados después de la solución colocada.



En la tercera cromatografía con la cámara ultravioleta no se mostró ninguna luminosidad

se presentaron la clorofila a y b y la presencia de xantofilas.

10. Se colocó la muestra en la cámara ultravioleta para detectar con más precisión los metabolitos secundarios.

Al final se colocó el líquido revelador (Ácido Fosfomolipico) para verificar bien la

presencia bien de cada uno de ellos.

11.Muestras obtenidas de las diferentes soluciones que se le aplicaron a la cromtografia.


Conclusiones

El mango es una especie de mayor importancia tanto para México y el estado de Guerrero

ya que su producción es tanto industrial como interna que ocupa 5° lugar en consumo Mundial y

el 3° lugar en los trópicos.Se han realizado algunos estudios de la Mangifera indica en donde se

hacía una aceleración en su maduración, obtención de una aceite a través de la semilla del mango,

sus aspectos agroindustriales, debido a sus grandes beneficios que aporta a la salud. Sin embargo

no es aprovechado adecuadamente ocasionando un gran desperdicio de un producto muy

importante para México.

Realice este trabajo con el objetivo de encontrar los metabolitos secundarios en las hojas

de Mangifera indica por considerarse dentro de la medicina tradicional como medicinales, en

algunos los estados de México, Guerrero, Jalisco, Morelos, Quintana Roo y Sonora, se le utiliza

en diversos padecimientos respiratorios, principalmente para aliviar la tos. Se emplean las hojas

en cocimiento, solas o combinadas con otras plantas, que varían según la región. En Guerrero

agregan a la infusión hojas de lima (Citrus aurantifolia), toronja (Citrus maxima) y sauco

(Sambucus sp.). En Jalisco lo preparan con flor de obelisco (Hibiscus rosa-sinensis), hoja de

chayote (Sechium edule), corona de cristo (Euphorbia splendens) y ocote (Pinus sp.), tomándolo

en la mañana y en la noche. En Quintana Roo, toman como agua de tiempo el cocimiento tibio,

elaborado con la adición de hojas de aguacate (Persea americana), pata de vaca (Bauhinia

divaricata), tulipán (Hibiscus rosa-sinensis) y guanábana (Annona muricata), endulzado con

azúcar.Para el asma y la tos, en Sonora, además de la hoja, utilizan la corteza, semilla y resina.

Para el catarro, en Guerrero, hacen una infusión con las hojas y la toman con un poco de limón y

azúcar; en Quintana Roo, preparan un jarabe con las hojas. Además se utiliza para el acecido o la

garraspera y para fortalecer el pulmón.(Medicina Tradicional UNAM).Obtuve la presencia de la

Clorofila a y b ya que es el pigmento esencial que le da el color verde a las plantas y se encarga

de absorber la luz necesaria para la principal función de la fotosíntesis y las xantofilas que son

unos compuestos químicos de carbono e hidrogeno en los cuales por medio de una cromatografía

podemos distinguirlo por el color amarillo. En donde realizamos tres muestras agregándole

diferentes concentraciones de los solventes (acetato de etilo, hexano, cloroformo y etanol) donde

pude apreciar de manera distinta cada uno de los metabolitos que se encontraba en las hojas del



mango y así obtuve los resultados de los metabolitos de la clorofila y las xantofilas que están

presentes en esta por lo que es necesario realizar investigaciones a fondo que permita determinar

que otros metabolitos estan presentes en las hojas de M indica.

Es importante que aprovechemos adecuadamente el mango ya que trae muchos beneficios

a la salud al igual de importante la plantación o reproducción de esta planta para que sigamos

aprovechándola y no ocasionemos su extinción o colocar en la Norma Oficial 059.Ya que aporta

a México un ingreso económico de exportación y un ingreso para las personas que lo trabajan.

Referencias bibliográficas Revista Chilena de Nutrición, vol. 41, núm. 3, septiembre, 2014, pp. 312-318 Sociedad Chilena

de Nutrición, Bromatología y Toxicología Santiago, Chile

Revista Mexicana de Agronegocios, núm. 32, enero-junio, 2013, pp. 258-266 Sociedad Mexicana de Administración Agropecuaria A.C. Torreón, México

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Nutrición Hospitalaria, vol. 31, núm. 1, enero, 2015, pp. 67-75 Grupo Aula Médica Madrid, España

Revista Fitotecnia Mexicana, vol. 27, núm. 4, octubre-diciembre, 2004, pp. 359-366 Sociedad Mexicana de Fitogenética, A.C. Chapingo, México

https://www.gob.mx/senasica/documentos/exportacion-de-mango-111302

https://www.gob.mx/senasica/documentos/huertos-de-mango-registrados-para-exportacion

http://archivo.infojardin.com/seccion/problemas-plagas-y-enfermedades-del-mango.3221/

http://www.sagarpa.gob.mx/Delegaciones/distritofederal/boletines/Paginas/JAC_0001-1.aspx

http://www.ub.edu/oblq/oblq%20castellano/cromatografia_altres.html

http://www.medicinatradicionalmexicana.unam.mx/monografia.php?l=3&t=mango&id=7607

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