Instituto Politcnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas Departamento de Microbiologa Microbiologa General Tincion de Ziehl-Neelsen Equipo 4

Instituto Politcnico NacionalEscuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Departamento de MicrobiologaMicrobiologa General

Tincin de Ziehl-Neelsen

Equipo 4

Fundamento de la tincin de Ziehl-Neelsen

Esta tincin demuestra la capacidad de bacterias teidas deresistir a la decoloracin por cidos y alcoholes. Esto se correlaciona con su alto contenido en lpidos de su pared celular y presencia decidos miclicosque aumentan el carcter hidrfobo.Se utiliza para diagnosticar bacterias del genero Mycobacterium y algunas especies de Nocardia, Corynebacterium y Actinomycetes.Interpretacin de la tincin Las bacterias que resisten la decoloracin son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que se utiliza azul de metileno como tincin de contraste.

Cmo sucede?

La tincin de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua, provoca una nueva solidificacin de lo cidos grasos de modo que el colorante ya no puede salir de las bacterias.

Procedimiento.Filtrar la fucsina fenicada antes de cubrir por completo el porta objetos con esta.Colocar el porta objetos en un puente para poder calentarlo suavemente hasta la emisin de vapores.

Realizar un frotis con la cepa problema.Realizar un frotis con la cepa problema.Pasados 5 min. despus de la emisin de vapores se lava al chorro de agua para eliminar el exceso de fucsina( lavar ambas caras).Cubrir la superficie del frotis con alcohol-cido efectuando un movimiento de vaivn por 2 min. Hasta que el alcohol-acido arrastre suave y completamente la fucsina. Lavar con un chorro suave de agua.

Cubrir el frotis durante 1 minuto con azul de metileno. Lavar ambas caras del frotis con un chorro suave de agua y dejar secar.Una vez seco se procede a observar al microscopio.

Resultados por grupoequipoMicroorganismosformaagrupacinAcido-alcohol resistente1Mycobacterium phleibacilosaisladosPositivoStaphylococcus aureuscocosracimosnegativo2Mycobacterium phleibacilosaisladosPositivoStaphylococcus aureuscocosracimosnegativo3Mycobacterium phleibacilosaisladosPositivoStaphylococcus aureuscocosracimosnegativo4Mycobacterium phleibacilosaisladosPositivoStaphylococcus aureuscocosracimosnegativo5Mycobacterium phleibacilosaisladosPositivoStaphylococcus aureuscocosracimosnegativo6Mycobacterium phleibacilosaisladosPositivoStaphylococcus aureuscocosracimosnegativo7Mycobacterium phleibacilosaisladosPositivoStaphylococcus aureuscocosracimosnegativo

Equipo 6M. phleiEquipo 5S. aureusEquipo 5M. phleiDiscusinTodos lo resultados obtenidos son iguales a los reportados en la bibliografa. No existieron variaciones en el trabajo desarrollado en el laboratorio.ConclusinEsta tcnica es muy importante para la diferenciacin de bacterias y para el diagnstico de enfermedades como la tuberculosis o la lepra. Referencias Bibliogrficas.Brock, Biologa de los microorganismos. Madigan, M.; Martincko, J.; Parker, J. Ed. Pearson Prentice Hall, 10ma edicin, Southern Illinois University, EUA, (2004), Pp. 412-413.Microbiologa Clnica Practica. Martos, P. y co. Ed. Servicio Publicaciones, 2da edicin, Colombia (1994), Pp. 43-44.Microbiologia Estomatologica. Negroni, M. Ed. Medica Panamericana, 2da edicion, Argentina. Pp. 547-549.