MICROPROPAGACIN DE NUDOS Y YEMAS OBTENIDOS EX VITRO

I. INTRODUCCION:

El desarrollo de una metodologa de micropropagacin a partir de meristemos apicales es importante para conocer el comportamiento in vitro de esta variedad y apoyar la multiplicacin de plantas lite de sexo femenino seleccionadas en campo por sus caractersticas fenotpicas especiales; adems se puede realizar una cuidadosa seleccin del material gentico, manejar grandes volmenes de plntulas en espacios reducidos y mantener un stock de plantas libres de enfermedades.

La micropropagacion de yemas y nudos se realiza mediante un protocolo descrito a continuacin y que consta de 4 fases, las cuales son necesarias, para una buena desinfeccin y desarrollo de la prctica.FASE DE DESINFECCION: Se proceden a lavar los nudos y/o yemas con ayuda de desinfectantes alcohol 70% e hipoclorito de sodio 0.4% y enjuagar con abundante aguaFASE DE ESTABLECIMIENTOS DE YEMAS Y/O NUDOS: En esta fase se observa la adaptacin del explanto al nuevo medio, puede o no establecerse, asi como puede sufrir contaminacion a pesar de haber sido desinfectado previamente.FASE DE MULTIPLICACION: El explanto sembrado comienza a brotar meristemas apicales de los nudos gracias a los nutrientes que absorbe del medio MS.FASE DE ENRAIZAMIENTO: Durante esta fase el explanto empieza a enraizar en el medio de cultivo y elonga sus races para poder tener mayor alcance de los nutrientes presentes y asi abastecerse con lo suficiente para lograr desarrollarse.

II. MATERIALES Y METODOS:

III. RESULTADOS:

Los resultados obtenidos despus de 15 dias de cultivo se muestran en la tabla 01. A pesar de la fase de desinfeccin previa al sembrado del explanto, se pudo observar a los pocos das de sembrado el establecimiento de colonias de bacterias y hongos (Ver figura 1), los cuales impidieron desarrollarse al explanto de camote, solo 3 lograron establecerse libres de contaminantes y ya se observa el crecimiento de brotes en los nudos (Ver figura 2).

NUDOS DE CAMOTE

BACTERIAS426.67%

HONGOS853.33%

SANOS320.00%

TOTAL15100%

TABLA 1: Se muestran los resultados evaluados en funcin de 15 brotes de camote.

FIGURA 1: Se muestran los ejemplares de nudos de camote contaminados por hongos y bacterias, el 80% del total sufri contaminacin y por lo tanto no crecieron como se esperaba.

FIGURA 2: Se muestran los ejemplares de nudos de camote que se establecieron en el medio y no fueron contaminados, El frasco de la derecha se observa un poco turbio debido a que el nudo empez a enraizar en el medio.

IV. CONCLUSIONES

Se concluy que a pesar de las condiciones aspticas que adoptemos en el desarrollo de la prctica, muchas veces la contaminacin viene dada en el tallo del explanto, en este caso en el nudo, por lo que a pesar de desinfectar previamente los ejemplares resultaron contaminados.

A pesar de las muestra contaminadas aproximadamente el 20 del total logro desarrollarse, cabe destacar que no todos los explantos fueron extrados de una sola planta madre.

La fase de enraizamiento parece estar empezando en 1 de los 3 brotes que lograron establecerse y se puede apreciar tambin el crecimiento de meristemos en los nudos.

V. DISCUSIONES

Una forma de obtener plantas libres de patgenos es a travs del cultivo in vitro de meristemos que se fundamenta en el hecho de que la distribucin de los microorganismos (virus, bacterias y micoplasmas) en los tejidos de la planta no es uniforme y su concentracin tiende a disminuir progresivamente hacia el pice del tallo (Jimnez 1998).

Jimnez (1998) indica que los pices y meristemos que son empleados como material inicial para el cultivo in vitro, son reas de sntesis de auxinas por lo que la concentracin endgena es alta y que normalmente cuando se emplean pices no se adicionan auxinas al medio de cultivo aunque estos pueden estimular el crecimiento, pero cuando se emplean meristemos es frecuente que no exista suficiente auxina endgena siendo necesaria la adicin exgena.

VI. REF. BIBLIOGRAFICA

Jimnez E. 1998. Cultivo de pices y meristemos. En J. Prez (Ed.), Propagacin y mejora gentica de plantas por biotecnologa (pp. 45-56).

Jimnez C. 1999. Induccin de embriognesis somtica en papayo (Carica papaya Linnaeus) cultivar PT-101-B. Tesis Bilogo.Universidad Nacional Agraria La Molina. Lima,Per. 82 pp.