Durante la investigación de Pierre-Alain Monnard, Andrej Luptak y David w. Deamer intentaron aproximar o simular lo que debió ser el sistema de transcripción de ADN y nucleosidos trifosfatados (NTP’s) en épocas primitivas. Para esto se desarrolló una protocelula de doble capa lipidica, la cual se formó mediante procesos de hidratación y rehidratación.

Esta protocélula contiene en sus interior un sistema desarrollado de liposomas consistente de vesículas de DMPC con un sistema de transcripción ARN, mediante una enzima ARN T7 polimerasa y sus plantillas de ADN e iones de magnesio.

Para este caso se usaron las plantillas de ADN: pTRI – XEF y el plásmido d56-33, los cuales codifican para un fragmento de ARN de 248 nucleótidos de largo conteniendo una región flanqueada de 70 nucleótidos por un hammerhead y el virus HDV ribosomal.

MODELOS DE VIDA CELULAR PRIMITIVA

Aplicando este sistema a diferentes temperaturas pudieron observar que la permeabilidad y por tanto la transcripción se ve afectada, para esto se aplicaron procesos de electroforesis de gel.

Se observo que aparecieron franjas que caracterizan el resultado de una transcripción luego que la enzima ARN T7 polimerasa transcribiera las plantillas de ADN usando los deoxinucleosidos trifosfatos disponibles dentro y fuera del sistema liposomal ya que este proceso depende de la permeabilidad selectiva de la capa de fosfolipidos, en este caso el proceso de transcripción se dio mas lento por la ausencia de proteínas en la doble capa lipidica.

MODELOS DE VIDA CELULAR PRIMITIVA

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La aparición de franjas en los resultados de la electroforesis se deben a la fragmentación que produce el hammerhead al poder transcribirse una cadena suficiente larga, estas fragmentaciones se vieron afectadas por el mismo experimenta a 23ºC y 37ºC.

La electroforesis es una técnica para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico. La separación puede realizarse sobre la superficie hidratada de un soporte sólido (p. ej., electroforesis en papel o en acetato de celulosa), o bien a través de una matriz porosa (electroforesis en gel), o bien en disolución (electroforesis libre). Dependiendo de la técnica que se use, la separación obedece en distinta medida a la carga eléctrica de las moléculas y a su masa.

MODELOS DE VIDA CELULAR PRIMITIVA

• Encapsulación liposomal de ARN T7 polimerasa y sus plantillas.•Inactivación del ARN T7 polimerasa.•Tamaño de liposomas luego de la preparación de la reacción de mezcla.•Polimerización ARN con liposomas DMPC.•Purificación del ARN transcrito por pTRI-XEF.•Purificación del ARN producto del d56-33.•Detección de productos del ARN.•Cuantificación de productos ARN.