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jorge-dena
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Objetivo: Conocer las técnicas básicas para el análisis de fertilidad microbiana del suelo
Técnicas mas utilizadas
Abundancia de microorganismos
• Biomasa total
• Determinación de grupos funcionales (fijadores de nitrógeno, celulolíticos, nitrificadores, amonificadores, etc.)
Actividad microbiana
• Heterótrofa total (producción de CO2, consumo de O2)
• Enzimas especificas (nitrogenasa, sacarasa, ureasa, amilasa)
PRÁCTICO N°4
Análisis de fertilidad de los suelos
INCUBAR 7 DIAS
20 g suelo
BlancoMuestra
300-400 cc 300-400 cc
15 ml OHNa
Producción de CO2 en laboratorio: Preparación de muestras
CO2 + 2 OHNa CO3Na2 + H2O
Reacción química que se producen durante incubación:
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
Materiales
OHNa 0.2 N
H2O
Pipeta
Cubeta
Frasco de 300-400 cc Balanza
Muestra
pesar 20 g de suelo
colocar en el frasco
hidratar: 60% cc (3 ml)
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
colocar OHNa en las cubetas (15 ml)
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
preparar un “blanco”
colocar las cubetas en los frascos
incubar a 28-30°C (7 días)
cerrar los frascos herméticamente
sellar con papel parafinado
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
Producción de CO2 en laboratorio: Titulación
2 OHNa + Cl2Ba 2 ClNa + (OH)2Ba
CO3Na2 + Cl2Ba 2 ClNa + CO3Ba
(OH)2Ba + 2 ClH Cl2Ba + 2 H2O
Reacciones químicas que se producen durante la titulación:
colocar en erlenmeyer
agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina
titular con ClH 0.2 N
CALCULAR BlancoMuestra
OHNaCO3Na2
H2O
OHNaCO3Na2
H2O
Cl2Ba 2%
fenolftaleina
OHNa 0.2 N
vaso de precipitado
erlenmeyer bureta
blanco y muestra
pinza
pizeta
Titulación: Materiales
ClH 0.2 N
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
enrasar la bureta con ClH blanco
extraer cubeta con pinzacolocar el OHNa en un erlenmeyer
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
agregar Cl2Ba (1ml)
agregar fenolftaleina (1 gota)
Cambio de color del indicador
registrar lectura del blanco(ml de ClH )
agitar mientras se titula
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
OHNa de la muestra agregar Cl2Ba y fenolftaleina
Cambio de color del indicador titular
registrar la lectura de la muestra(ml de ClH )
agitar mientras se titula
Procedimiento para medir la producción de CO2 en laboratorio
(Blanco - Muestra) 4.4 = mg CO2 / 7 d / g de suelo peso del suelo
ClH ≡ CO2/2
ClH 0.2 N ≡ ClH/5 ≡ CO2/2 x 5
peso molecular del CO2 = 44
ml de ClH 0.2 N gastados para titular el blanco
ml de ClH 0.2 N gastados para titular la muestra
factor de conversión
entre ClH y CO2
Cálculo para determinar la cantidad de CO2 por gramo de suelo
Ejemplo:
ClH 0.2 N gastados para titular el blanco: 13,4 ml
ClH 0.2 N gastados para titular la muestra: 7,3 ml
suelo: 20 g
(13.4 – 7.3) 4.4 = 1.34 mg CO2 / 7 d / g de suelo 20
INCUBAR 7 DIAS
Síntesis para medir CO2 en laboratorio
20 g suelo
colocar en erlenmeyer
BlancoMuestra
300-400 cc 300-400 cc
agregar 1 ml Cl2Ba y una gota de fenolftaleina
titular con ClH 0.2 N
15 ml OHNa
CALCULAR
recipiente hermético enterrado (10 cm) medición con jeringa
lectura de CO2
Procedimiento para medir la producción de CO2 a campo
jeringa extractora de gases y detector graduado
x tiempo
Actividades
1) CO2 a campo: observar los implementos
2) CO2 en laboratorio: titular muestras incubadas
3) Cálculos: resolver problemas de CO2 en laboratorio
Casos prácticos de análisis microbiano del suelo
Factores a considerar:
1) No hay valores óptimos absolutos para todos los sitios en estudio.
Usar testigo de suelo sin disturbar
2) Valores mayores no significa mejor fertilidad. Procesos
balanceados
3) Índices entre parámetros químicos y biológicos: por ej. Índice de
mineralización de C (CO2/MO)
Efecto de las practicas productivas
Situaciones analizadas: Bosque Chaqueño
tala y sobrepastoreo testigo
testigo
testigo
quema de pastizal
desmonte selectivo y pasturas
Situaciones analizadas: Agroecosistemas
monocultivo – labranza convencional ganadería y pasturas
siembra directa y rotación
Testigo: suelo bajo alambrado
Parámetros analizados
• Químicos:
• Materia Orgánica• pH• N total• Nitrato
• Biológicos:
• Respiración • Grupos Funcionales• Estructura Poblacional• Índice de Mineralización de C
Bosque Chaqueño
Agroecosistemas
Porcentaje (%) de variación con el suelo testigo
Estructura de las comunidades microbianas
Bosque Chaqueño
Agroecosistemas
33 31 29 33
27 3138
26
2427
17
24
16 11 816
0%
20%
40%
60%
80%
100%
testigo sobrepastoreo quema desmonte-pasturas
nitrificadores
celulolíticos
fijadores
amonificadores
36 3748
34
31
28
30
19
25 16
20
154 8
15
34
0%
20%
40%
60%
80%
100%
testigo lab.convencional SD-rotación ganadería
nitrificadores
celulolíticos
fijadores
amonificadores
Índice de Mineralización de C (IMC)
Bosque Chaqueño IMC
Testigo 0.96
Tala y sobrepastoreo 2.29
Quema de pastizal 1.17
Desmonte selectivo y pasturas
0.96
Agroecosistemas IMC
Testigo 1.02
Monocultivo convencional 1.36
Ganadería y pastura 1.18
Siembra directa y rotación 0.93
IMC= 1 balanceado
>1 pierde C
< 1 gana C