OBTENCIÓN DE PLANTAS SANAS DE PAPA, L. … · mejores plantas, por parte de los agricultores más tecnificados, además de la ausencia de programas orientados a ];1 producción de

Pardn Clrtona Viclor M

PJRDO-CJIWON lelol MallutlP(lIenClalJdau II11 uso le1 I()I (l UlIa nueva especiacutee v un lU vlmiddot J- lungl relslro d ll e o Jcdmaes) como hiorreguauores de maleza b l Ilulllales que parasitan a COllvza

el1 e cUlvo dc ( tI hOllarelSIl en Cololllhn FI ( Id ca l 1 ( e aranco L I cn 11 ~ a ISla Vol

-~ No l (2000h) p38 ColomhliL fll Rcvisra Le N F V)I2 (1997e) p9 25 (6 No

I I red llIa les (roya de Cordia iacute Boraglllaceae) en Colomha E R sp

--C - ProSJodillll (Jifielllhclllmlilll Faculiexcl- I N 11 eVlsta(WllllcrlJrth (F _al dCOllal de Jgronomiacutea MedelJiacuten UI llgl (redilloes) primer registro para ( 1 h Vo JI No 2 (l998dl p277-283

00111 liL 111 Revlsla leNF Vol 5 No 1 (1994) p21 26

UrolllyceJ (-iexcliexclXIYI PalouiJlard y ILlllOt roya del pasto Angleuacutell (DidlGluiulI Hegiaros nuevos para la nora de (trJ(I1lI11 (Poiacuter) Huhhar)lmdlllaJes (Rovas) de e f h u una nuevaRev o Olll la 11 cllleacuterllleacutedad para OIOlllhiexcliexcliexcl EI ASCOLFIF ~Siexcliexcl Academia Cofomhiana de Cieleias

xactas hSleas y Naturales VoL22 No 84 Inforllla oL 23 NO3 (1997g) p23-25 (1998c) p347-354

Y SALJZAR YM Bmclliaria iexcliexcl(I(gilla( (Link) Hilch y B (fl~()yas (FUllgl (redil1a(s) NI P m Icml

colecladas sohre uo 1 ppu ( oaceae) dos nuevos hospedallles de s P ll]ldS aromallCilS y llolIlyus(aiai-llaIiCilI Yoshillo en1~1LdKIll~es el] d uepanaml1I10 de JllIiacuteoquia laquo()h~nlhlL 11 ASCOLFI lnloacuterma VolU- Rnlsla f( Nf Vo 5 No (1994)

P I f- 20 No) 11(97) p44 _45 23

Royas (Ulgl IJredinafes) Y Una nueva roya del [ldSI() hraclllana comuacuten en Cmhmiddot E~)eCladas sohre grlIlllllcac ell d JS()I 1lt1 11

lnl(lfllla VoL 23 No 1 (J997)eral [dIIKll) ue J111 iOljUla dcpoladas el la [l7middot8

c~lcCClone de MFDFL y M1INM 11 (tldasa Vol 18 No 86 (1993h) p37 44

sLAZAR yM lJndinales (Royas) sohre Rosaclac CII (lllhla M d ll R)yas (iexclungi lIrcdiacutenaleSl del 9) 1 __ e e 111 998

Herharo MI)I lmiddot 11lhaJo de grado (Ingenieros colectadas ell el JgroIlOIllOS) UnivIsiexcldjd N deacutepartalJllIl[O de Amioqllla elllre 1)7 e aCIOlla de

1942 EII Rlvl-a leNI Vo Ntildeo 2 ( OIOlllhla Facultad de Ciacuteiexcleias (l993c) p53-68 AgrllllllIariIS

Sif)OW P and SYDOW H--- Taxonltlllliacutea illlollltolooiacutea dllnhucJolI Lel(lTII -- ~1()nograplla lJredinnrulll y k ew 01 lt IdnLO de

crlag 11 J Ciexclallllr Il)021924 v14 hospedanes de las royas de 11 cPl~ilS dd paslo hrachiaria el] (ololllhiexcla 11 ASCOLH

UM N ~1 l Inlolna Vol 23 No 1(19971) p5-7 Il lilllIario rarcial de (Jrcdlllalls de Cundlllalllarca sL 4 7 1 n 1978

- p Trahajo de glj() (B 1 u loogo)Universidad

Aprohado para su pUhlicacioacuten Mayo 17 de 2001

uso Iltcs rae Nal Agr Medclljo VoU4 Nr

1 y l I3JJmiddotlJ5tJl0IJI

OBTENCIOacuteN DE PLANTAS SANAS DE PAPA SolallUIIl

tuberosum L VARIEDAD SALENTUNA A TRAVEacuteS DE LAS TEacuteCNCIAS DE TERMOTERAPIA y CULTIVO DE

MERISTEMAS ill vitro

Adriana Marulanda Aguirrc 1 Gerardo Martiacutencz Loacutepezz

RESUMEN

Se obtuvieron plallas Super Elite de papa (jofaHlIll wherosull L) de la variedad regional Salentuna catalogada como papa filia implel1leltalldo las teacuteClicas de lermolerapia cultivo in vitro de lIleristemas y lIlultiplicacioacuten acelerada

Se limpioacute esta variedad del complejo de e1lfennedades que la aJeClabal para ellfregarle a los productores 111 material sallo que los lIlotive a regresar al callpo con una alternativa de produccioacuten de mayor calidad y rentabilidad

La Jalta de semilla sana es lila necesidad selllida por los agriCllfOres del departallento de Caldas pIes hace lIIaacutes de treiwa (1101 quc 10 se relIcva el material vegetal y no existen programas de produccioacutelI de selllilla certificad(l de esta variedad en el paiacutes

Palabras claves SolanulII tl~erOSlIl Salellfllla semilla salla terapia de calor in vitro multiplicacioacuten raacutepida

ABSTRACT

OBTAINMENT OF HEALTHY paTATO PLANTS Sol(IIII tlberosllIll L ~ --------- ~----_--- shy

SALElvTUNA V4RIETY THROUGH THE TERMOTfIERAPYS TECllNlQUES AND

Estuuiallte Universiuau de Caluas Facultau ue Ciencias Agropecuarias Programa Agronomiacutea Manizales Colombia e-mail amam200mixmaiLcol1l

Profesor Universidau de Caluas Facullad de Ciencias Agropecuarias e-mail GerardoMartinez Lnetscapenet

RcvFacNaLAgrMcdclliacuten VoL 54 No 1 y 2 p 1J51-IJM 2001 1J51

rvLlrubnda iexcl Adnalla Maniacutencz L Geriexcllrdo

MERISTEMS CULTlVATION il litro

Potatoes (sectol(IIfii~ Ittb~cmslllll L) Supcr Elitc plallls Val obtaiacutelled fmm the SalefllllIa regiollal variacuteen Vhiclz is cata[ogued as a filie polato illlplemellling termofherapys fedlliqlles IacuteJI vitro propagati(Il (~f merIacutestells and accelerated multiplirmioll This lariery was clealed iexclrom fhe cOlIplex of diseases fhm ajJeCfed if in order fo gire iexclhe prodllrers a healthy material thaf encollrage fhem to refum lO iexclhe rolllllryside viliexcl a le produrtion altemmile that will give thelll beller quality and lIigher vield

771e lad ofh((llthy senl is a lny high priority for the region S potalO growers silce for lIIore thall 30 ye the vegetabe material has lU heel renewed lId iexclere re not programs 10 prollote (he produrtiol uf rlrtijicd seeds of this sperifir varie) arollId he roullfn

Key words So1m1111 I t1lJros Salellfulla llealtiexclv seed heal tllerapy In vitro rapid tllultiplicatioll

lNTRom ICClOacuteN

La papa el cuarto cultivo maacutes importante a escala mundwl es utilizada por el 95 de la humal11dad en su dIcta alimenticw micntras en Colombia ocupa el primer lugar con mayor consumo en las zonas friacuteas (Guerrero y Martiacutenez 1980) Su CUltIVO cn el paiacutes se realIacutea por encima de los 2500 msnm en los departamentos de A11lioqula Boyad Caldas Cauca Cundll1amarea Nariuumlo Tolimil los Santanderes y el Valle dd Cauca (Lu)aacuten 1982)

En el uepartdlmnto de Caldas a pesar de que los agriculores dlspollen tk extellsas 1(lllaS apropIadas para su siembra y tienen tradicioacuten COlllO

cultlVadorLs de uiexclcha espeCie d uacuterea sembrada se ha vcniuo ndllc leudo por la

peacuterdida de rentabilidad de las variedades de papa utilizadas en la zona incluyendo la Salentuna debido a la utilizacioacuten continuada de semilla producida en la nmma finca S1I1 ninguna garantiacutea sanitaria y soacutelo en muy pocos casos con buen criterio de seleccioacuten de las mejores plantas por parte de los agricultores maacutes tecnificados ademaacutes de la ausencia de programas OrIentados a la produccioacuten de semilla sana de las varIedades regIOnales lo que ha permitido la acumulaCIoacuten de un complejo de entcrmedades causadas por bacterias hongos nematodos y virus (Maniacutene el al 1998)

La obtenCIoacuten dc semilla de papa SalcntuIla ltbre ue enfermedadcs es una necesidad sentida ya que no eXIste en el dcpanamcllto 11l en el paiacutes programas

Oblcnci(m de plamas smltlS dc papa

de produccIoacuten de semilla certi fIcada de eacutesta variedad muy apreCIada por los agricultores en el Departamento de Caldas Las variedades producIdas en los programas de produccioacuten de semIlla que se adelantan en otras regiones del paiacutes no son aceptadas por las exigencias del mercado local y por su falta de adaptabiltdad a las zonas de paacuteramo Una de las formas de detener el proceso degenerativo que ha venido sufriendo esta varIedad en os uacuteltimos 30 m10s es proceder a seleccionarla tratarla para eliminarle los problemas sanitarios que ha acumulado y multiplicarla para ofrecerle a los agricultores un material de propagacioacuten que les permita tener la oportunidad de mejorar sus

rendimlcntos sin necesidad de incurrir en mayores costos de fertilizacioacuten y control de enfermedades haciendo del cultivo una cmpresa rentablc (Martiacutenez e al 1998)

La variedad Salentuna corresponde al Clon 309 de la Coleccioacuten Central Colombiana (Cee 309) (Variedad antigua de Salento) Quindiacuteo) caracterizada por tener tallos gruesos ramificados foliacuteolos primarios medianos verde claro nores abundantes morado intenso y fruuiflea-cioacuten abundante Los tubeacuterculos son de tamat10 mediano forma redonda lIgeramente aplanada ojos supertklales plll puacuterpura y crema con pulpa color crema (Figura 1)

Figura l Tubeacuterculo de papa de la var Salcntuna con sus ojos caracteriacutesticos d4 color crema alrededor de los mismos las coloraciones oscuras corresponden a 1 presencia de esclerocios de Rhizoctonia solani (Foto G Martiacutenez L)

RcvFacNalAgLMl-tlclliacuten Vo154 N~ 1) l~ P lJ5iexcl~136iexcl 2(XlI

MIJulallda A Adnalla Maniacutenel L bull Gerardo

MERISTEMS CULTVATON iJl vilro

POlaoes (SolaJlIl lllberoSlI1I L) SlIper Elile plenas Val obtailled jrolll lhe Salelluna regional variety whicll is ((lalogled as a filie polaro illlplemenlIacuteng lermolllerapys leclIliques in vilro propagalioll oj lleriSlems and acceleraled mulliplication

Tllis variey was clealled rom Ihe cOll1plcr o diseases Iha aiecled il in order 10 gile Ihe producers a Izealliexcly material 111m elcourage iexclhelll lO refllm lo lhe COlll1l1yside wiliexcl a Iell prodllcfiol allernafive lhaf lViacutell give hem belfer qualify and higher vied

The lad ojiexcliexclealfhy seed is a vel) lligh priority jor lIe regioll s pOlalO growers sillce jor llore iexclhall 30 years he vegelable mal erial 1m lO beell renewed alld here are

lO programs 10 prOlllOle Ihe prodllclIacuteOIl o certified seeds oj Izis specific variev around he COUllfrv

Key words SolalIl11 flIbcroSlIll Salcllflllla healtliy sced lieat fherapy In viro rapid lItfiexclipli(~liltiexcl~~- ~-~~-~

INTRODtlCCIOacuteN

La papa el cuarto cultivo maacutes importante a escala mundial es utilizada por el 95 de la humanidad en su dicta alimenticia mientras en Colombia ocupa el primer lugar con mayor consumo en las zonas friacuteas (Guerrero y Maniacutenez 1980) Su cultivo en el paiacutes se realiza por encima de los 2500 msnI11 en los departamentos de Antioquia Boyacaacute Caldas Cauca Cundinamarca Narifiacuteo Tolima los Santalldercs y el Valle del Cauca (Luiexclaacuten 1982)

En el departamento de Caldas a pesar de que los agricultores disponcn de cxtensas zonas apropIadas para su siemhra y tienen tradicioacuten como cultivadores de dicha especic cl ltIacuterea sembrada se ha vcnido reducicndo por la

peacuterdida de rentahilidad de las variedades de papa utilizadas en la zona incluyendo la Salentuna dehido a la utilizacioacuten continuada de semilla producida en la misma finca sin ninguna garantiacutea sanitaria y soacutelo en muy pocos casos con huen criterio de seleccioacuten de las mejores plantas por parte de los agricultores maacutes tecnificados ademaacutes de la ausencia de programas orientados a ]1

produccioacuten de semilla sana de las variedades regionales lo quc ha permitido la acumulacioacuten de un complcJo de enfermedadcs causadas por hacterias hongos nematodos y virus (Martillel ef al 1998)

La obtcllcioacuten uc semilla de papa SalCl1tlllla lihrc ue enfermedades es una Ilcccsidad Sl1l11cleacutel ya lue no existe en el departament(l ni en el paiacutes programas

Obl(1ciacuteUacuten de iexclltamas sanas dc papa

de produccioacuten de semilla certifiacutecada de eacutesta variedad muy apreciada por los agricultores en el Departamento de Caldas Las variedades producidas en los programas de produeeioacuten de semilla que se adelantan en otras regiones del paiacutes no son aceptadas por las exigencIas del mereado local y por su falta de adaptabilidad a las zonas de paacuteramo Una de las formas de detener el proceso degenerativo que ha venido sufriendo esta variedad en os uacuteltimos 30 antildeos es proceder a seleccionarla tratarla para eliminarle los problemas sanitarios que ha acumulado y multiplicarla para ofrecerle a los agricultores un matcrial de propagacioacuten que les permita tener la oportullldad de mejorar sus

rendimientos sin necesidad de incurrir cn mayores costos de fertilizacioacuten y control de enfermedades haciendo del cultivo una empresa rentable (Martiacutenez ef al 1998)

La variedad Salentuna corresponde al Clon 309 de la Coleccioacuten Central Colombiana (CCC 309) (Variedad antigua ue Salento) Quindiacuteo) caracterizada por tener tallos gruesos ramificados foliacuteolos primarios medianos verde claro flores ahundantes morado intenso y fructiacutefica-cioacuten ahundante Los tubeacuterculos son de tamafiexclo mediano forma redonda ligeramente aplanada ojos superficiales piel puacuterpura y crema c~n pulpa color crema (Figura 1)

Figura 1 Tubeacuterculo de papa de la vaL Salentuna con sus ojos caracteriacutesticos de color crema alrededor de los mismos las coloraciones oscuras corresponden a la presencia de esclerocios de Rhizoctonia solani (Foto G Martiacutenez L)

1353Rcv F~c Na Agr Medclliacuten Vo154 No I 2 p1351middot136() lOO

1352

Se adapta desde los 1809 a 3300 nsnm Su periodo vegetativo es de siete a ocho mescs Su rendimiento comercial es de lO toneladas por hectaacuterea la materia seca es el 235 (peso especiacutefico 1096) el porcentaje de azuacutecares reductores es de O J el periodo ue reposo tres meses a 15deg C y 90 BR Su caldad culmaria excelentc para consumo frcsco sicnuo susceptible a la Gota (Phytophthora mfestans Mont de Bary) (Federacioacuten Colomhiana de Productores de Papa 1999)

En esta invesugacioacutel1 se utilizaron las teacutecnicas de terapia de calor y cultivo dt mensttmas in vitro para obtener plantas de la varitdad Salentuna lihres de las enfermedades transmitidas en la semilla y reconocidas como de mayor inCldcncia tconoacutemlca en la regioacuten para que sirvan dc base al desarrollo posterior de esquemas de productioacuten 3telerada de semilla de papa por esquejes como los sugeridos por Cervantes de Ketaacuten el al ( 1981 l Meleacutendez y Quevedo (1980) Y Lago (llJlJ I l creando asiacute las condiciones que pCflmtan tener material sano a disposici6n de los agricultores

Lo anterior permitiraacute quc los cultivadorcs ue la regioacuten puedan adelantar procesos productivos con esta variedad generando nucvamente empleo y mCJores oportunidades de vida en la zona de ellllvO de papa en el Dcpartamento de Caldas elilllinamJo la necesidad de traer papa de otras zonas productoras evIacutelando asiacute el ricsgo de mtrnducir nucvas plagas y cnlaacutel11eacutedadcs a la reg1l1l1

Miexclrulanda A Adriana ManineacuteY iexcl Genrco

MATERIALES Y MEacuteTODOS

Esta investigacioacuten se realizoacute entre DICiembre de 1997 y Octubre de 1999 Los tubeacuterculos utilizados en esta investigacIoacuten fueron colectados en las zonas paperas del Departamento de Caldas Se utilizaron tubeacuterculos de papa de variedad Salentuna colectados en las salidas de campo a las zonas productoras de papa en el Paacuteramo de Letras y en el municipio de Marulanda y en particular en la hacienda la Esperanza a 3240 m de altitud latituu5deg IN y 75deg 21W temperatura media 8degC y humedad relativa promedio ue 95 teniendo en cuenta que cumplieran con las caractcriacutesticas fenotiacutepicas de la variedad

A los tubeacuterculos colectados se les hicieron pruebas fitopatoloacutegicas para determinar cuaacuteles microorganismos patoacutegenos de la papa se encontraban presentes en ellos

Teniendo en cuenta que los tubeacuterculos de la variedau Salen tuna para iniciar la brotacioacuten despueacutes de su cosecha reqUleren un periodo de 3 meses de reposo a 15degC y 90 de HR los tubeacutertulos se fueron llevados a un lugar oscuro que conservara las anteriores condiciones y a los 15 diacuteas despueacutes del momento de la cosecha de acuerdo al tratamicnto evaluado prcviamente por Bctallcourt se sumergieron durante 5 nUl1utos en una soluciacuteuacuten preparada con

iexclnlll la clJ1 1ltlI1ICa llelallCOurl bIUdiexcliexclIIlC

Iiexcliexclcultad dc CICllClih Agropecuaria t llIwridad dc (lld ~Ialllak 1 1 hlcr dc iexcleacuteNi

ObtelluOacuten de pbllla~ 1Il1S de papa

5 ppm de aacuteCldo gihereacutelico (PROGIBBl para inducir la hrotacioacuten temprana de los tubeacuterculos se dejaron secar al aire y nuevamente se llevaron a las condiciones ideales de oscuridad temperatura y H R hasta observar la brotacioacuten

Con los tubeacuterculos brotados se realizaron siembras en materos plaacutesticos con suelo esterilizado que fueron llevados al invernadero donde se observoacute el proceso de germinacioacuten durante 15 diacuteas controlando visualmente los contenidos de humedad uel suelo

Cuando los brotes tuvieron 5 cm de altura las plantas fueron llevadas durante 3 semanas a un cuarto previamente preparauo para el tratamiento de terapia de calor con paredes aisladas con icopor en donde se sometieron a una temperatura y luminosidad constantes de 37C y 1000 lux respectivamente durante 12 horas y maacutes del 95 HR (Cervantes de Kecaacuten el al1()91 Vargas)

La terapia de calor es una teacutecnica que contribuye a la eliminaCIoacuten de virus de las plantas cuando se utiliza asociauo con el cultiVO de tejidos in vitro (Price 1933 Kassanis 1950 Cervantes de Kecaacuten el al1()81 Costa1975 v Walkey y Cooper 1975

4 Entrevista con Eisa v Vargas ESludiacuteallle Facultad de Ciencias Agmpecuanas Universidad de Caldas Manizales t5 de Enero de 1998

Postenormel1le cada semana durante mcs se realizoacute la toma de brote

terminales axilares para utilizarlos en el proceso de aislamiento y cultivo de meristemas dehido a que los puntos de crecimiento de brotes y raIacuteCes de plantas infectadas (On alguacuten virus estuviesen libres de t1 o lo llevasen en concenshytraciones muy bajas (Kassanis 1965 Martiacutenez 1979)

La capacitacioacuten para la obtencioacuten de meristemas y mitropropagacioacuten in vitro se realizoacute inicialmente en yuca y posteriormente se adaptoacute a papa en los laboratorios de BlOtecnologiacutea del Centro Internacional (CIAT)

de Agricultura Tropical

Util izando desarrollados

los por

procedimientos Roca (1980) Y

Cervantes de Kecaacuten el al (1981) se procedioacute en la caacutemara de t1ujo laminar con la ayuda de microhisturiacutees y un 111lcroscopio de luz al aislamiento de los meristemas el iminando las hojas que cubren la yema para obtener un meristema acompantildeauo de un primordio roliar de aproximadamente 02 mm de

largo

Con base en las recomendaciones del asistente deacute investigaCloacuten R Escobar (CIAT) y utilizando los procedimientos desarrollados por Espinoza el al (1992) se utilizaron tres medios para desarrollo de l11enstemas y propagacioacuten del material vegetal de papa Tabla l

135RevraeNl AgrMeacutedclliacuten Vo154 Nos 1 y 2 1J51~n16 2(X)j

Se adapta desde los 2809 a 3300 nsnm Su periodo vegetativo es de siete a ocho meses Su rendImiento comercial es de 20 toneladas por hectaacuterea la materia seca es el 235 (peso especiacutefico 1(96) el porcentaje de azuacutecares reductores es de 01 el periodo de reposo tres meses a 15u C v 90 ti R Su calidad culiacutenarid excelente para consumo fresco siendo susceptIble a la Gota (Phytophthora mfestans MOIlI de Bary) (Federacioacuten Colombiana de Productores de Papa 1999)

En esta Il1vcstJgacioacuten se utIlizaron las teacutecnicas de terapia de calor y cultivo de meristemas in vitro para obtener plantas de la variedad Salentuna lihres de las enfermedades transmItidas en la semilla y reconocidaS como de mavor incidencia econoacutemica en la regioacuten p~ra que sirvan de base al desarrollo posterior de esquemas de produccioacuten aeelerada de semilla de papa por esquejes eomo los sugerIdos por Cervantes de Kecuacuten el al (1981) Meleacutendez y Quevedo (1980) y Lago (1991) creando asiacute las condiciones que permitan tener material sano a disposicioacuten de los agricultores

Lo anlenor permitiraacute que los cultivadores de la regioacuten puedan adelantar procesos productivos con esta variedad generando nuevamente empleo y mejores oponullIdauacutees de vida en la zona dL cultivo de papa en el Departamento de Caldas eliminando la necesldauacute (k traer papa de otras lOnas prouuctoras evitando asiacute Ll riesjo de mtrodullr nuevas plagas y cnftrIllLuades a la regHllL

~1arulallljiexcl driana Martine 1 (ciexclardo


Esta investIgacioacuten se realizoacute entre DIciembre de 1997 y Octubre de J 999 Los tubeacuterculos utilizados en esta investigalloacuten fueron coketados en las zonas paperas del Departamento de Caldas Se utilizaron tublrculos de papa de variedad Salelltuna colectados en las salidas de campo a las zonas productoras de papa en el Paacuteramo de Letras y en el municipio de Marulanda y en particular en la hacienda la Esperanza a 3240 m de altitud lalllud 5deg IN Y 75deg 21W temperatura media 8C y humedad relativa promedIO de 95 teniendo en cuenta quc cumplieran con las caracteriacutesticas tCnotiacutepicas de Ja variedad

A los tubeacuterculos colectados se les hicieroll pruebas fitopatoloacutegicas para determinar cuaacuteles microorgal1lsmos patoacutegenos de la papa se eneontraban presentes en ellos

Teniendo en cuenta que los tubeacuterculos de la variedad Salentuna para iniciar la brotacioacuten despueacutes de su cosecha requieren un periodo de 3 meses de reposo a 15C y 90 de BR los tubeacuterculos se fueron llevados a un lugar Oscuro que conservara las anteriores condiciones y a los 15 diacuteas despueacutes del momento de la cosecha de acuerdo al tratamiento evaluado previamente por Betancourt 1 se sumcrgieron durante 5 IlIlIlutos Cll unil soluciuacuten preparilda con

Inllc 111 (JI flIl(iquestiexcl IklalllPlIrl hllldlllllc

laculud de (IClIC iexclgiexclOplCUarrI I 1111liexclidad de (alda IU11lk 1 de IlIer dc Il)qg

5 ppm de aacutecido glbereacutelico (PROGIBR) para inducir la brotacioacuten temprana de los tubeacuterculos se dejaron secar al aire y nuevamente se llevaron a las condiciones ideales de oscuridad temperatura y H R hasta observar la brotacioacuten

Con los tubeacutereulos brotados se realizaron siembras en materos plaacutesticos con suelo esterilizado que fueron llevados al invernadero donde se observoacute el proceso de germinacioacuten durante 15 diacuteas controlando visualmente los contenidos de humedad del suelo

Cuando los brotes tuvieron 5 cm de altura las plantas fueron llevadas durante 3 semanas a un cuarto previamente preparado para el tratamiento de terapia de calor con paredes aisladas con icopor en donde se sometieron a una temperatura y luminosidad constantes de 37C y 1000 lux respectivamente durante 12 horas y maacutes del 95J) HR (Cervantes de Kecaacuten el al1991 Vargas4

)

La terapia de calor es una teacutecnica que contribuye a la eliminacioacuten de virus de las plantas cuando se utiliza asociado con el cultivo de tejidos in vitro (Price 1933 Kassanis 1950 Cervantes de Kecaacuten el al 1981 Costa1975 y Walkey y Cooper 1975

Entrevista con Eisa V Vargas Esluulante

Facultad de Ciencias Agropecuarias Universiuad de Caluas Manizales 15 de Enero de 1998

Posteriormente cada semana durante mes se realizoacute la toma de brote

terminales yo axilares para utilizarlos en el proceso de aislamIento y cultivo de meristcmas debido a que los puntos de crecimiento de brotes y raiacuteces de plantas infectadas con alguacuten ViruS estuviesen libres de eacutel o lo llevasen en concenshytraciones muy bajas (Kassanis 1965 Martiacutenez 1979)

La capacitacioacuten para la obtencioacuten de meristcmas y micropropagacioacuten in viacutetro se realizuacute inicialmente en yuca y posteriormente se adaptoacute a papa en los laboratorios de Biotecnologiacutea del Centro Internacional de Agricultura Tropical (CIAT)

Utilizando los procedimientos desarrollados por Roca (1980) Y Cervantes de Kccaacuten el al (1981) se procedioacute en la caacutemara de tlulo laminar con la ayuda de microblsturiacutecs y un microscopIo de luz al aislamiento de los meristcmas eliminando las hojas que cubren la yema para obtener un meristema acompauumlado de un primordio foliar de aproXimadamente 02 mm de largo

Con hase en las recomendaCIOnes del asistente de investigacioacuten R Escobar (CIA T) y llti izando los procedimientos desarrollados por Espinoza el al (1992) se utilizaron tres medIOS para desarrollo de l11eristemas y propagacioacuten del material vegetal de papa Tabla l

1355Rev FacNalgrMedellin Vo154 Nos 1 y 211351middot1366 2(Xll

1arulalldiexcl A Adrlltllla rmiddotv1iexcliexclrtiacutellll (iexclcfardo

Tejidos lJllIVL1S1JaJ Je CalJas) seTabla 1 Ingrcdiel1les agregaJos al meJio baacutesico Murashlge~Skoog (MS) para la mjo Je las puntas de las hOJas y utiexcljl() un meJJO p para erecinlienlO Jepreparacioacuten de mcJios para menstemas y propagaCIoacuten de papa siguiendo las rccol11CnJaclOlls Jd Dr las pluacutentulas dilaacuteenciaJas Tahla 2Manzur (DireelOr Jd Lahoratorio de

Medio Medios MS Unidad

A 01 mgtt Ac Gibereacutelico (meristemas) 004 mglt Kinetina

25 Sacarosa 06 Agar

B 01 Mglt Ac Gibereacutelico (meristemas) 200 mgllt Putrescina HCL

25 Sacarosa 06 Agar

04 mglt Al Gibereacutelico (Propagacioacuten) 001 mglt Al Naftalenacetico

05 mglt Bencilamino purina

20 mglt Pantotenato de Ca

20 Sacarosa

UtiacutelizanJo los protocolos de manejo anterior Figura 2 Plaacutentulas de papa var Sallntuna in vitro prcsenlallJo Jecoloracioacuten (Foto

del medio A para eSllmular el desarrollo A Marulanda A) de merislemas se colocaron 15 mi en Alrededor de seis semanas despueacutes tubos Je ensayo en condieiones euanJo los meristemas estaban aseacutepticas il1lcialmente con Jos Jiacuteas de comenzanJo la diferenciacioacuten de tejidos Tabla 2 IngreJientcs agrlgaJos al medio huacuteslco MS para la preparacioacuten Je meJic oscuriJaJ total pam promover su se transfirieron al medio 1para estimular para plantas diferenciadas de papa Ji rerencIaciuacuten y [1osteriorlllente se la propagacioacuten del material vegllal con trallsririacuteelOn a un aacuterea con fotopenoJo los mismos materiales y [1roceJimientos

ReactivosMedio Medios MS UniJaJJe 12 horas Je luz a temperatura Je los meJios A y B mencionaJos constante Je 25C y una intensidaJ de anteriormente

P 30 grlt Sacarosa lOOO lux para promover su

2 mglt Glicina(PlantasJifcrenciacioacuten La implementacioacuten de lsta tecnologiacutea mglt M~lnositoldiferenciadas) 100

se llevoacute a cabo en el laboratorio de 05 mglt Acmiddot Nicotiacutenico

AlreJeJor de tres semanas Jespueacutes Cultivo Je Tejidos de la UniversIJad de mglt PiriJoxina05cuanJo los meriSlemas ohtllliJos CalJas ln Maniacutezales

05 mglt Tiamina alcanzaron un tamano Jl I~2 mm

2 mglt AlA fueron trans feriJos al I11lJio B ln A las llueve semanas de frascos Je vidrIO Jl (iexclO x (JO mm con observaciolles se encontroacute un lento tapa cn los cuales se colocaron cn Jesarrollo de las pluacutentulas y un color

utilizaron frascos Je VIdrio de 60 x 9Para realizar el transplante con baseconJiciollls aseacute[1ticas 25 mI Jd medIO y rOlO en las puntas Je las hojas mm cuhiertos con una membrana een los procedimientos Jesarrollados poren las mismas eonJicH1nes de oscuridaJ (antocIaninas) (Figura 2) para plaacutestico CRISTAFLEX a los cuales ~Cervantes de Kecaacuten el al (1981) sey posterior IUf que l1I el pmclsl soluciollar el lento crecimiento y color

13Rev racN1 AgrMnlrllill 0154 Nos 1 l 2 l 151middotHM 2(Xl

rvLlrUillda i ith IHltI ManiacuteJK L (iexclcrardo

Tabla l Ingredientes agregados al 111ldiacuteo baacutesico Murashlge-Skoog (MS) para la preparacioacuten de mediacuteos para menstemas y propagacioacuten de papa

Medio Mediacuteos MS Unidad Ingredientes

A (meristemas)

01 004 25 06

B (meristcmas)

01 200 25 06

(Propagacioacuten) 04

001 05 20 20

Utilizando los protocolos de manejo del medio A para estimular el desarrollo de meristemas se colocaron 15 mi en tubos de ensayo en condiltIacuteones aseacutepticas iniciahnente con dos diacuteas dc oscuridad total para promover su dIferenciacioacuten y posteriormcnlC sc transfiricron a un uacuterca con fotoperiodo de 12 horas de luz a temperatura constante de 25degC y una intet1sidad de IIX)O lux para promover su diferenciacuteacioacuten

Alrededor de tres semanas despueacutes cuando los merislemas ohtenidos alcanzaron un tamantildeo de 1-2 mIn

fueron transferidos al medio B en frascos de vidrio de (iexclO x (iexclO 111111 con tapa en los cuales se colocaron cn condiciolles aseacutepticas 25 mi del medio y en las mIsmas condIciones de oscllndad y posterior Ill que en el proceso

mglt Al Gibereacuteliacuteco mglt Kmetina

Sacarosa Agar

Mglt Al Gibereacutelico mglt Putrescina HCl

Sacarosa Agar

mgiacutelt Al Gibereacutelico mglt Al Naftalenacetico mglt Bencilamino purina mglt Pantotenato de Ca

Sacarosa

anterior

Alrededor de seis semanas despueacutes cuando los meristemas estaban comenzando la difirenciaciacuteoacuten de tejidos se transririeron almediacuteo 1 para estimular la propagacIoacuten de miexcliexcltenal vegetal con los misl1los materiiexcliexclles y procedimientos de los medios A y B mencionad anteriormente

La implementacioacuten de esta tecnologiacutea se llevoacute a cabo en el laboratorio de Cultivo de Tejidos de la Universidad de Caldas en Manizales

A las nueve semanas de ohservac iones se encontroacute un lento desarrollo de las plaacutentlllas y un color rojo e11 las puntas de las hojas (antoCIaninas) Figura 2) para solucionar e lento creclmiellto y color

OlHellCJOacutell de pbnlls sallas de p~IJla

rojo de las puntas dc las hOjas y siguiendo las rccomendaciacuteoms del DI Manzur (Director del Laboratorio de

Tejidos lIl1Iversidad de Caldas) se utilizoacute un medIo p para crecimill1to de las pluacutentulas diacute fcret1ciadas Tahla 2

Figura 2 Plaacutentulas de papa var Salentuna in vitro presentando decoloracioacuten (Foto A Marulanda A)

Tabla 2 Ingredientes agregados al medio haacuteslcO MS para la preparacioacuten de l11edio para plantas dIferenciadas de papa

MedIO Medios MS Ul1Idad Reactivos

p 30 (Plantas 2

diferenciadas) 100 05 05 05 2

Para realizar el transplante con base en los procedimientos desarrollados por Cervantes de Kecaacuten el al (1981) se

grIt Sacarosa mglt Glicina mglt M-Inosltol mgIt Al Niacutecotiacutenico mgIt Piridoxina mglt Tiacuteamina mglt AlA

util izaron frascos de vidrio de 60 x 90 mm cubiertos con una membrana de plaacutestico CRISTAFlEX a los cuales se

1357Rcv lac NalAgr Mcdelliacuten Vo154 los I y 2 p U51-Ll6( 2(Kl

iv1aiexcl Ullllliexcl A A~tltIla ManiacutencI l (rlrardo

le colocaron en condiciones aseacutepticas 20 Las observaciones continuaron y mI del 11euio P y se colocaron en alreuedof de la semana 13 las plaacutent ulas sill1l1ans cOl1diciol1ls ue oscuridau inimiddot cOlllenzaron a lllostrar un desarrollo cial postcrior inllllsluad lumiacutenica y uesoruenauo ue tallos ue 5 a 7 tallos por temperatura anles rnencionauas plaacutel1lula Figuras 3 y 4

Figura 3 Plaacutentulas de papa vaL Salentuna in vitro en diferenciacioacuten de tejidos

(Foto A Marulanda A)

Figura 4 Plaacutenlu[a ue papa iJl vil ro var Salentuua con un crecimiet1lo desordenado

de teJluos (Foto A Marulanda A)

Algunas de las plantas presentaron nas uespueacutes del proceso de

dcsarrollo de tubeacuterculos aeacutereos 16 sellla- l1lulllplicaCloacuten Figura S

ltf 1

~ ti

Figura 5 Plaacutentula de papa in vitO var Salentuna presentando la formacioacuten di

tubeacuterculos aeacutereos (Foto A Marulanua A)

Como lO se buscaba la produccioacuten plkacioacuten acelerada de llllcroesqueiexcles d

desordenada de leiacute Idos ni ue tubeacuterculos papa (CIP1992) En una cuacutemara d

aeacutereos se Siguieron las recolllenuaclones nUlo lanllnar y COll cuchillas de bistuI

de Lago (1991) preparlI1uo el medio Ndeg 21 ell caJas de Petri esteacuteriles s utilizado por eacuteL para el CUltiVO ill ilro sacanm las plantulas y se repiexclcaml

de miclOcsqueiexclcs ue papa Tahla 3 sacanuo lntre 5 y () Il1lcmesqueJes pe pluacutemula y selllhrando CIacuteIIC

Postenormente a las 17 semanas se micmesqlleiexcleS por Irasco de vidrio co

procedioacute a la multiplicaCIoacuten ud material 20 mI de lllecho en comlciOl1l

in vino lIlilizando las tlcniacutecas de mulliacute aseacutepticas como mellc lonanK anteriormente

13RcvlaLNalAgrMdelliacutell VtJI5~ tos I y 2 pIlSI-UM 2lXII

le colocaron en condiciones iexcliexclseacutefHicas 20 Las ohservaclOnes contll1uaron y mi del medio P y se colocaron en alrededor de la semana J3 las pluacutentulas similares condiCIones de oscuridad iexclni- cOIllenzaron a mostrar un desarrollo cial posterior intensidad lumiacutenica y desoruenado de tallos de 5 a 7 tallos por temperatura antes n1lI1Lmiddotionadas plaacutentula Figuras 3 y 4

ObleIlliexclUacuten dc plantas -Ull de ptp~l

Algunas de las plantas presentaron nas des pueacutes del proceso de desarrollo de tubeacuterculos aeacutereos 16 semltlshy multiplicacioacuten Figura 5

y

~

r re

Figura 3 Plaacutentulas de papa vaL SaJentuna itl ilro en dIferenciacioacuten de tejidos (Foto A Marulanda A)

Figura 4 Pluacutentula de papa in vino var Salentulla con un crecimiento desordenado de tejidos (Foto A Marulanda A)

Figura 5 Plaacutentula de papa in vilro var Salentuna presentando la formacioacuten de

tubeacuterculos aeacutereos (Foto A Marulanda A)

Como lO se buscaha la produccioacuten desordenada de tejIdos ni de tuheacuterculos aeacutereos se sigllleron las recomendaciones de Lago (1991) preparando el medio utiliiacuteado por eacutel para el cultivo in vilro de 11llcroesljuejes de papa Tabla 3

Posteriormente a las 17 semanas se procediuacute a la multiplicacioacuten del material in vitro utilizando las teacutecnicas de ll1ultlshy

plicaciacutetIacutel1 acekraua de 1l1ICroCSQUeiexclcs uc papa laquo(1 P 1992) En una caacutemara de lUlO lalllll1ar y con cuchillas de histuriacute Ndeg 21 en caiacuteas de Petri esteacuteriles se sacaron las pluacutentulas y se repicltlmn sacanuo cntrc S y 6 llllcroesljucles por pluacutentula y sll11hrando CInco microesquc)cS por frasco dc vidrio con 20 mi de med io en condiciones asepllcas como mcncionamos anteriormente

Rev Fae NaLAgr Mctlclliacutell Vol 54 Nos 1 y 2 P 1311-1366 lOO I 13~9

Mifubnda iexcl dnlIliacutel 1lart1lll 1 lcranJo

Tabla 3 Composicioacuten medIO utilIzado en este experimento para el desarrollo de micfOesciexcluejes

COMPONENTES MS ESTANDAR MEDIO (mgll) MODIFICADO

NHN01 16500 12500 KNO 19000 11000 CaC I2 2Hiquestuuml 4400 Ca(N01)2 3070 MgSG7H 2O 3700 1700

KH 2PO 1700 9700 Na2EDTA 373 378 FeSG 7H2O 278

Fe(S04hmiddot 6H2O 508

HJBOJ 62 62 MnS04 middot4HiquestUuml 223 223 ZnSOq 4H2O 86 86 KI 083 083 CuSGiexcl 5H 2O 0025 0025 Na2 Mo04 2H2O 025 025

CoCI2middot6HiquestUuml 0025 0025 Piridoxina 05 10 Tlamina 01 01 Acido Ascoacuterbllo 30 Acido Gibereacutehco 10 30 Kmetina 001 025 Adenina 025 Acido Clorogeacutenlco 01 Sacarosa 300000 100000 Phylagcl 98000 98000

Se utIliiexclaron dos Ciclos de propagauIacuten acelerada de estas plaacutentulas con hase en 1m programas de l111cropropagacioacuten propuestos por Cervanlcs de Kecaacuten el al ( 1981) con el fin de incrementar el nuacutemero de individuos

Alrededor de la 21 semana cuando estas plaacutenlUlas teniacutean una altura aproximada de 5 cm fueron transplantadas a un sustrato de arena al 100 X completamlnte esteacuteril

Para delectar la prcseIlc ia de irus ~c enviaron muestras de follajl de las plantas obtenIdas in 1ilro al Laboratorio NaCIOnal de SemIllas de CORPOICA en Tibaitataacute para ser indexadas para d virus X de la papa (Polato X pOlexvirtls PVX) d virus Y de la papa (Potato y pOlyvims PVY) d virus dd Enrollamiacutee11lo de hojas de la papa (Potato Leafroll polerovirus PLRV) d virus S de la papa (Potato S carla virus PVS) d virus Latente andino de la papa

(Potato AndeJnlalellllllo1middotims APLV) por el meacutetodo de FUSA (Enzy111e linked i1l1111uno sorbent assay) En la semana 30 eon las plaacutentulas libres de virus se iniCIOacute un programa de propagacioacuten por esciexcluCfes (Figura 6) siguiendo las teacutecl1lcas sugeridas por Meleacutendez y Quevedo 1980 Bryan el l 1981 Cervallles el al 1981 Y Manzur 1993 posterionmntl se sembraron en bandejas

Figura 6 Planta de papa val Salentuna in vitw libre de virus y adaptada

condiciones ambientales (Foto AMarulanda A)

Enreviexcl~~~~on el DL Davitl Manssur Profesor Umversidau oC Caldas Facultau oe- Ciencia

Agropecuarias Manizales 22 de Junio de t9)9

RevFaeNa AgrMcdelliacuten Vo54 Nos 1 y 2 pU51-IlUacuteUacute 200 I llO llteI I Nal p ltIVl )+11 1 2 i 1151 13M 2001

136

MIIiexcld 111 Martille l (icrard)

Tabla 3 C 0 omposlClOll me 10 U11i1zaoo en este experimento para el desarrollo de

mlcroesqueiexcles

COMPONENTES (mglt)

MS ESTAacuteNDAR MEDIO MODIFICADO

NH j N01

KN01

CaCI 2H2O Ca(NO)2 MgS04 7Hp KH2P04

Na2EDTA FeSoiexcl7Hp Fe(SO~) 6H 2O HB01 MnSO~ 4H2O ZnS04 middot 4H2O KI Cusoiexcl 5H2O Na2 MoO~2H20 CoCI2middot6Hp Piridoxiacutena TIamina Aciacutedo Ascoacuterbiacuteco Acido Gihereacutelico Kinetma Adenina Aciacutedo Clorogeacutenico Sacarosa Phytagcl

16500 19000 4400

3700 1700 373 278

62 223 86

083 0025 025

0025 05 01

1O 001

300000 98000

12500 11000

3070 1700 9700 378

508 62

223 86

083 0025 025

0025 10 01 30 30

025 025 01

100000 98000

Uhtlt1uott de plantas sanas de papa

Para oelectar la presencia oe virus se enviaron muestras oe follaJc de las plantas ohtenidas in vilro al Laboratorio Nacional de Semillas de CORPOICA en Tihaitataacute para ser indexadas para el virus X oe la papa (Potato X potexvirus PVX) el virus Y de la papa (Potato Y potyvims PVY) el virus del Enrollamiento de hojas de la papa (Potato Leafroll poleroviacuterus PLRV) el virus S de la papa (Potato S carlavirus PVS) el virus Latente andino de la papa

(Potato Andcan latent llI0iacuterus APL V) por el meacutetodo de ELlSA (Enzyme hnked immullo sorbent assay) En la semana 30 con las plaacutentulas lIhres de virus se inicioacute un programa de propagacioacuten por esquejes (Figura 6) siguiendo las teacutecnicas sugeridas por Meleacutendez y Quevedo 1980 Bryan el al198ICervantes el al1981 y Manzur 1993 posterlormentc se sembraron en bandejas

Se utIlizaron dos ciclos de Alrededor de la 21 semana cuando Figura 6 Planta de papa vaL Salen tuna in vitro librl de vIrus y adaptada a

propagacioacuten acellrada de Istas plaacutentulas estas plaacutentulas teniacutean ul1a altura condiciones ambientales (Foto AMarulanda A)

con hase en los programas dI aproximada de 5 cm fueron micropropagaciuacutel1 propuestos por

(ntl1splantadiquestiexcl~ a un sustrato de arena al Cervantes de Kecaacuten ef al (1981) con el 100 completamcnte esteacuteril fin de iacutenCICl11lntar el nuacutemero de Entrevista con el Dr David Manssur Profesor UniacuteversliacuteJad dt Caldas Facultall de CiemiasindiVIduos Agropecuarias Manizales 22 de Junio de 1999

(0 Rcv-facNalAgrMcdclliacuteIL Vo154 Nos 1) 2 p1351middot1366 2(X)I 136t

Se II1dUIO la fornlacioacuten de raiacuteces sUlllerglendo las eS4ueiexcles durall( 15 a 20 s(gundos (n uacute(ido indolaceacutetlcn al OOYIt y se sembraron (n un semillero

iexclml~iexcllld1 - Adriacutealla Mrliacutenl1 1 (lerano

en un sustrato conformado por partes Iguales de arella y tierra esterilizado y colocado en bandejas (Figura 7)

Figura 7 ES4Ulles de papa var Salenluna ohtenidos a panir de plaacutentulas 1ibres de virus (Foto A Marulanda A)

Las bandejas p(rmanecieron en condiciones de alta humedad relativa con la ayuda de una (Obertura plaacutestica la cual fue rcmovida al observar la adaptacioacuten de las plaacutentulas estas se fertilizaron con 14-14-14 en dosis de l gplanta cada mes

RESlLTADOS y DISCUSIOacuteN

En los lUhcrculos colectmJos en las salidas d( campo s( rresentawn en las prud1as ritoratoluacutegicas la pnsenCla de

a) Enhrl11edades bactcriales La Pi(rna negra (Erwinia carotovoraLR Jones

biacute Enfermedades fungosas La Costra negra de la papa (Rhiacutezortonia soani Kuumlhn) la Gota de la papa (Phylophthora infestans (Mont) De Bary)

c) Enfermedades virales En pruebas por el meacutetodo de ELlSA (Enzyme linked i11l11unosorbent assay) el virus X de la papa (Potato X pOlexvirus PVX) d virus Y de la papa (Potato Y pOlyviacutems PVY) el ViruS del enrollamiento de hojas de la papa (Potato Leafroll polerrJFims PLRV) el virus S de la papa (Potato S caraiacutems PVS) el virus Latente

La mayoriacutea de estos patoacutegcnos identificados son discminados a traveacutes de los tuheacuterculos Cvlartiacutenez el al

1998)

Despueacutes de habn dejado los

tuheacutenulos 15 diacuteas como pcriodl) de

nposo y de indUCir la brotacioacuten temprana de estos utiliacutezando aacuteCido gibereacuteliacuteco (PROGlBB) la hrotacioacuten de eacutestos fueacute del 100 a partir de los 15 diacuteas con un bucn nuacutemero de ojos y un buen grosor de los tallos

A los 20 diacuteas se semhraron los tuheacuterculos y a los 35 diacuteas comenzoacute a observarse la germinacioacuten la cual fue igualmente del 100

En la terapia de calor en crecimiento activo se determinoacute que las mejores plantas para la obtencioacuten de merislemas se obtuv ieron a los 15 diacuteas despueacutes de haber entrado al cuarto de terapia ya que al incrementarse el tiempo de tratamiento comienza a observarse un

proceso de deslmlratacioacuten de las partes ve~etattvas lo que dificultoacute d alslallliel1lo de los lI1eristemas L a cosecha de hrotes cada se1l1ana se realizoacute sacando las puntas de los tallos maacutes gruesos y suculentos obteniendo de ocho a quince esquejes por planta

Para d cultivo de meristemas in vitro se encontroacute que los medios A y B ofrecieron un buen desarrollo a los meristemas y plaacutentulas de papa pero el medio 1 presentoacute un hnto crecimiento y un estreacutes que estimuloacute la formacioacuten de antoc1aninas comparado con olra~

investigaciones (Cervantes el al 198 l )

El medio P utilizado para planta~

diferenciadas estimuloacute d desarrollo d( callos y tuheacuternllos aeacutereos y esto no e deseable dentro de un programa di producc ioacuten de semilla pl)r esquejes mientras que con el medio desarrolladl por Lago (1991) se observoacute mejo desarrollo y crecimiento (Figura 8)

Ilolland) y la Sarna de la papa andino de la papa (Potato Andean Figura 8 Pluacutentllla de papa val Salentlllla in ilro con hojas tallos v raiacutec

(SlrCp[OIlwCS scahiacutecs (Thal) latenl tymovirus APLV) diferenciadas (Foto i l1arulHllda 1)

Waksman amp IknnciL

1

Se mdujo la formacioacuten de raiacuteces en UII sustrato confllfmado por partcs sumergiendo las csqueJcs duranlc 15 a igllales de arcna y l Iacuteffa csterilIzado y 20 scgundos cn aacutecido llldolaceacutetlco al colocado en bandejas (Figura 7) OOS y se sembraron cn un semillero

Figura 7 Esquejes ele papa var Salentuna obtenidos a partir dc plaacutentulas libres de virus (Foto A Marulanda A)

Las bandeJas permanecieron en b) Enfermedades fungosas La Costra condiciones de alta humedad relativa con negra de la papa (Rluacutezoctollia soani la ayuda de una cobertura plaacutestica la Kuumlhn) la Gota de la papacual fue removida al observar la (Phytoplllhora injestans (Morll) De adaptacioacuten de las plaacutelltulas estas se Bary) fertIlizaron con 14-14-14 en dosis de I gplanta cada mes c) Enfermedades virales En pruebas pOI

el meacutetodo de ELISA (Enzyme lmked RES(iLTADOS y DISCUSIOacuteN Il11l1lul1osorbent assay) el virus X de

la papa (Potato X pOlenIacutertls PVX)En los tubLnulos colectados en las el irus Y de la papa (Potato Y

salidas de campo se prescllaron cn las pOlnims PVY) el VIruS del pruebas fiexcl(opatoloacutegicas la presencia de e1foJiamiento de hops de la papa

(Potalo Leafroll poero virus PLRV)a) Enfermedades bacteriales La Plcrna el virus S de la papa (Potalo S

negra (Erwinia carotovoraLR Jones mrlmirus PVS) el virus Latente Holland) y la Sarna de la papa anclino de la papa (Potato Andean (Streptofl(c scabics (Thaxl) latelU tylllovirus APLV) Waksll1ltln amp Jienriacuteci)

Obtencioacuten de plantas sanas de papa

La mayoriacutea de estos patoacutegenos idemificados son diseminados a traveacutes de los tubeacuterculos (Martiacutencz et al 1998)

Despueacutes de haber dejado los tubeacuterculos 15 diacuteas como periodo de reposo y de inducir la brotacioacuten temprana de estos utilizando aacutecido gibereacutelico (PROGlBB) la brotacioacuten de eacutestos fueacute del 100 a partir de los 15 diacuteas con un buen nuacutemero de ojos y un buen grosor de [os tallos

A los 20 diacuteas se sembraron los tubeacuterculos y a los 35 diacuteas comenzoacute a observarse la germinacioacuten la cual fue igualmente del 100

En la terapia de calor en crecimiento activo se determinoacute que las mejores plantas para la obtencioacuten de meristemas se obtuvieron a los 15 diacuteas despueacutes de haber entrado al cuarto de terapia ya que al incrementarse el tiempo de tratarmento comienza a observarse un

proceso dc deshidratacioacuten de las partes vegetatlviexcliexcls lo que dificultoacute el aislamiento de los meristemas L a cosecha de brotes cada semana se realIZOacute sacando las puntas de los tallos maacutes gruesos y suculentos obteniendo de ocho a quince esquejes por planta

Para el cultivo de meristemas in vIacutelro se encontroacute que los medios A y B ofrecieron un buen desarroUo a los meristemas y pliexclntulas de papa pero el medio 1 presentoacute un lento crecimiento y un estreacutes que estimuloacute la formacioacuten de antocianinas comparado con otras invcstlgaciones (Cervantes el al 198)

El medio P utilizado para plantas diferenciadas estimuloacute el desarrollo de callos y tubeacuterculos aeacutereos y esto no es deseable dentro de un programa de produccioacuten dc semilla por esquejes mientras que con el medio desarrollado por Lago (1991) se observoacute mejor desarrollo y crecimiento (Figura 8)

I ltI ClIl hOI as tallos v miacutecesFigura 8 Pluacutentula de papa val Sa Ien tuna _

diacuteferellciacuteadas (Foto A Marulanda A)

RevblIIAgl Mnlliliacutell Vol 11)2 P iexclliI-13M lO I

Marulamla A nana Marllllel L (erardo

En la multiplicacIoacuten acelerada in dIO cinco microesquejes de cada vllro cada mes se obtUVIeron en prome- plaacutentula Figura 9

Figura 9 Pliacutemtula de papa val Sallntuna in vim en crecimiento lista para comenzar la fase de repique de microesquejes (Foto A Marulanda A)

De acuerdo a los resultado~ obtenidos en las pruehas scroluacutegicas realizadas en CORPOICA TIhaitatuacute las plantas obtenIdas despueacutes de la terapia de calor y el culllvo in liEro se encuentran IIhres de los virus rclaeiollauos

Comparando el lllaterlal ohtenido en el lahoratorio con la descripcioacuten realIzada por FEDEPAPA (1 (99) no se ohservoacute ninguna diferencia morroloacutegica con respecto a las caracteriacutestieas tiacutepicas de la variedad

Las plaacutentulas estaacuten listas para su transplante al suelo y posterior intcgracillIl a un programa de propagaciacutelll mas iva

CONCLlSIONES

La mduccioacuten a la hrotacioacuten tempraml con aacuteCIdo glberdico (PROGIBB) resultoacute ser un excelente tratamiento a utilizar ya que permitioacute disminuir el periodo de reposo de esta variedad que normalmente es de 2-3 meses a l mes

La implementacIoacuten dc la~ tLCI1lCaS de terapIa de calor y CUltIVO in Iiro de meristcl11as de papu en Iiexcl variedad Salentuna pen11lt)() ohtcncr plalllas sanas listas para ser inclUIdas dcntfp de un programa de pmpagacioacutell masiva

Se ha ohtenido matertal de la vaneJad Salentuna libre de las enfermedades IllUacuteS

prevalentes en el departal11enw de Caldas creaacutendose asiacute las condIcuumllIles para la renovaciuacuten del material de siembra

Se han estahlecldll las hases para iniciar programas de producciuacuten de semilla sana de otras variedadLs dc intereacutes para la rcguumliacuten

Se ha demostrado una vez mas la bondad de las teacutecnicas de terapia de calor y cultivo de ll1eriacutestemas en la obtenCIoacuten de plantas sanas

RECOMENnACIO~ES

Se recomHllda que el material buacutesico obtenido sea ulllizado en programas de propagacioacuten acelerada Lll condiCWl1es que permitan conservar su sanidad por el mayor tiempo posihle con el fin de crear las hases de un programa de prodUCCIoacuten de semilla salla de las variedades regl(nales en el Departamento de Caldas

AGRADEClllIE~TOS

Los autores lllalll tiestan su reconocimiento a la Dr~l LetiCla Scrtla al DI David Manssur MaCias y a Sll~

colaboradorcs de lahllratoro 1l1r [1

asesoriacutea V colaboracioacuten

Expresan su graltud al Dr Willia Roca y sus colabnradllres del laborator de BlOteC1ltllogiacutea dLl Cent lntcruacoltal de Agricultura Tropic (eIAT) por pernutir Ll pf(lceso ( capaeitaLloacutell

Al DI Luis Lago y sus colaborador de lahoratono de CORPOICA Tibait~ por su ayuda con las prueb seroluacutegiacutecas Asiacute mismo a la Universid de Caldas por prestar su lahoratorio tejidos espeCIalmente iexclJI grupo InVLstlgaciuacuten de Virologiacutea Vegetal y a FundaCioacuten de apoyo a la Universidad Caldas (lGALA) por su permanel apoyo

A t(ldas las personas que de um otra fnrma colaboraron para realIzaCIoacuten de esta investigaCIoacuten

BIBLIOGRAFiacuteA

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CLRViexclNTIS DI KITIN V MiexclRTIacuteNImiddotZ L (i Ciexcll1ACIlO 13 CORZO (l Iksarrnll) y AdaptltJcltIacutel1 J Tlcnicas JI TLllllok-rapia y Cultivo diacute pilla la Iimpllza de Virus de las Variel Colomhlanas de Iapl Instituto (oloml O(llLU1 110 IrollIlla de liiologiacutea Vq r1I 1lIlLtiacuten dl Il1lsuaLilIacuten llogoiacute l (go iexcl()-Il p12(J

RnheNa AgrMedell[nVoI54Nos] y1 r 1351-13(62001

En la multiplIacuteiacuteacioacuten acelerada in dio cineo mierocsqueJes de eada vitro cada mes se obtuvieron en promeshy plaacutentula Figura 9

~h~ -

Figura 9 Plaacutentula de papa vaL Salcnluna in iacutelm en crecimiento lista para comenzar la fase de repique de microcsqlleie~ (Foto A Marlllanda A)

De acuerdo a los resultados obtenidos Las pluacutentlllas estaacuten listas para su en las pruebas seroloacutegicas realizadas en transplante al suelo y posterior CORPOICA Tihaitataacute las plantas integraCl(m a un programa de obtenidas desputs de la terapia de calor propagacioacuten masiva

y el cultivo ill iacutelro se ellcuelllran lihres de los virus rllaci()1ados ( OCLllSIONES

Comparando el material ohtenido ell La induuioacuten a la hrotacioacuten temprallil el lahoratorio con la descnpcioacuten con iquestHido gibereacuteluumlo (PROGIBB)

realIzada por FEDEPAPA (llt)99) no se resultoacute ser un excelente tratanllento a iexclobscrvoacute ninguna diferencia morfoloacutegica utilizar ya que permitioacute disminuir el leon respecto a las caracteriacutesticas tiacutepicas periodo de reposo de esta variedad que de la variedad normalmente es de 2-3 meses a I mes

ObteacutellciacuteOIl de plantas mS deacute 11

La implementacioacuten de las t6cnicas de terapia de calor y cultivo in vilro de meristemas de papa en la varIedad Salentuna permitioacute ohtener plantas sanas listas para ser incluidas dentro de un programa de propagacioacuten masiva

Se ha ohtenido matenal de la variedad Salentuna lihre de las enfermedades muacutes prevalentes en el departamento de Caldas creaacutendose asiacute las condiciones para la renovacioacuten del material de siemhra

Se han estableCido las hases para inliacutemr programas de produccioacuten de semilla sana de otras variedades de intereacutes para la regioacuten

Se ha demostrado una vez mas la bondad de las teacutecnicas de terapia de calor y cultivo de meristemas en la obtencioacuten de plantas sanas

RECOMENDACIONES

Se reeomienda que el material haacutesilo ohtenido sea utilizado en programas de propagacioacuten acelerada en condiciones que permitan conservar su sanidad por el mayor tiempo posible con el fin de crear las bases de un programa de produccioacuten de scmiacutela sana de las variedades regionales en el Departamento de Caldas

AGRADECLVIIENTOS

Los autores manifiestan su reconocimiento a la Dra Lcticia Serna al Dr David Manssur Macias y a sus colahoradores de lahoratorio por ~ll

aStsoriacutea y colahoraciuacuten

Expresan su gratitud al DI William Roca y sus colahoradores del laboratorio de BlOtecnologiacutea del Ccntro InternaciOnal de Agricultura Tropical (CIAT) por permitir el proceso de capacitacioacuten

Al DI Luis Lago y sus colaboradores de laboratorio de CORPOICA Tibailataacute por su ayuda con las pruehas seroloacutegicas Asiacute mismo a la Universidad de Caldas por prestar su lahoratorio de tejidos especialmcllte al grupo de Inveslgacioacuten de Virologiacutea Vegetal y a la Fundacioacuten de apoyo a la Uniacuteversiacutedad de Caldas (lGALA) por su permanente apoyo

A todas las personas que de una u otra forma colaboraron para la realizacioacuten dc esta investigacIoacuten

BIBLIOGRAFIacuteA

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GUERRERO (l O MARTIacuteNEZ L G 1middotalUilcHl1l de peacuterdidas llcasionada en la variedad dc papa lCA PI RACE por 1m virus iexclgtotato Virw X Potato Virus Y y PolalO Lealrull Virus 111 htopatologiacutea Colombiana VolLJ No (ILJiO) pn-4o

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MARTiacuteNEZ P Determinacioacuten de la llllCClllracioacuten del potalO Virus X en yemas call1iacutellare~ de papa y eiludio dc cuatro fitohormollas sobre la ac[iexclvldad hloloacutegica de cste virus Tcsls Bogotaacute Colombia 197()p105

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WALKEY DG COOPER CV Elector tem)1erature Oll virus eradicatioll and growlh uf inlccted liexclSlle cultures En lnnals (JI Applieacuted nlology Vol 80 (J975) p185-190

NOTA TECNICA

ACLARACIOacuteN ACERCA DE LAS ESPECIES DE UREDINALES SOBRE Scleria Berg EN COLOMBIA

V ietor Manuel Pardo Cardona

RESUMEN

Mediallle el hallaco de los iexcleuumloloroacutes se conirma ta presencia de lns elpecies de Uredil( (lascllke) Ariexcltllr y lJrollJI~~ Iderli P llellllings parasiulIIdo clpeCIacutee1

Seleria Bag (CvpemcClIc) 11 Colollhia Se dicllell tus regiwOs iexcliacutesuiacuteriws de alllbas e11)1

el el paiacutes

Palabras claves Colollhia imiddotleria l rediacutelloes royas

ABSTRAcr

Tite presellce Pl(cilia Ieerial (lascJiexclkl) Arlllr (I(I imiddot(II0i~ P HCW11 parGvIacuteldllg ]iccies orj~(~riUacuteB~i-(CJicri(tile) 111 Colollhiacutea 11 (Ollirllled 1) lhe deeuio iexclhe iexcleiollorpltic lwges o 1)(Ilh nle hislorml rcmrdmiddot of Iiexcloiexcl specie il iexcliexcllis COlllllrv

disclssed

Key IIQrds Colombia SclerIacute Uredilates rusiexcliacutemgi

A rthur y Uromvees seerial PINTRODlJCCIOacutel Henmngs P seerial fue registrada

A traveacutes de la historia del cstudio de primera vez por KLrn Thurstol Wl1etzcl ( 1(33) Y U seerial por Miexcllos Urediacutenaks en Colomhia se ha (913) Sm emhargo tina lecconsiderad) que en el paiacutes existcn dos detenida de amhas citas bihliograacutericaespecies de este importante grupo de en par icular de las ()hservaci()ne~firoparaacutesitos hoobioacutetroros sohre Scerio Kern el al permite ohscrvar que anBerg PIICfIacutellia scfcriae (Pazschke)

lusc( MiCltlhliexcl2ico DqlanullCl1l1 de li()Il~I l 1lIcrltlld NlclI1I1al tic (lll11hl1 AA 384( iexcli711 1(Omiddotl IR9 C lIlaiJ vllllmJo(iiacute)plrcllllllaJIllldcdilL( c

C lmiddotacNalgr MccklliacutellVoI54Nos I y 2 p13SI-13()(iexcl 200

rvLlrubnda iexcl Adnalla Maniacutencz L Geriexcllrdo

MERISTEMS CULTlVATION il litro

Potatoes (sectol(IIfii~ Ittb~cmslllll L) Supcr Elitc plallls Val obtaiacutelled fmm the SalefllllIa regiollal variacuteen Vhiclz is cata[ogued as a filie polato illlplemellling termofherapys fedlliqlles IacuteJI vitro propagati(Il (~f merIacutestells and accelerated multiplirmioll This lariery was clealed iexclrom fhe cOlIplex of diseases fhm ajJeCfed if in order fo gire iexclhe prodllrers a healthy material thaf encollrage fhem to refum lO iexclhe rolllllryside viliexcl a le produrtion altemmile that will give thelll beller quality and lIigher vield

771e lad ofh((llthy senl is a lny high priority for the region S potalO growers silce for lIIore thall 30 ye the vegetabe material has lU heel renewed lId iexclere re not programs 10 prollote (he produrtiol uf rlrtijicd seeds of this sperifir varie) arollId he roullfn

Key words So1m1111 I t1lJros Salellfulla llealtiexclv seed heal tllerapy In vitro rapid tllultiplicatioll

lNTRom ICClOacuteN

La papa el cuarto cultivo maacutes importante a escala mundwl es utilizada por el 95 de la humal11dad en su dIcta alimenticw micntras en Colombia ocupa el primer lugar con mayor consumo en las zonas friacuteas (Guerrero y Martiacutenez 1980) Su CUltIVO cn el paiacutes se realIacutea por encima de los 2500 msnm en los departamentos de A11lioqula Boyad Caldas Cauca Cundll1amarea Nariuumlo Tolimil los Santanderes y el Valle dd Cauca (Lu)aacuten 1982)

En el uepartdlmnto de Caldas a pesar de que los agriculores dlspollen tk extellsas 1(lllaS apropIadas para su siembra y tienen tradicioacuten COlllO

cultlVadorLs de uiexclcha espeCie d uacuterea sembrada se ha vcniuo ndllc leudo por la

peacuterdida de rentabilidad de las variedades de papa utilizadas en la zona incluyendo la Salentuna debido a la utilizacioacuten continuada de semilla producida en la nmma finca S1I1 ninguna garantiacutea sanitaria y soacutelo en muy pocos casos con buen criterio de seleccioacuten de las mejores plantas por parte de los agricultores maacutes tecnificados ademaacutes de la ausencia de programas OrIentados a la produccioacuten de semilla sana de las varIedades regIOnales lo que ha permitido la acumulaCIoacuten de un complejo de entcrmedades causadas por bacterias hongos nematodos y virus (Maniacutene el al 1998)

La obtenCIoacuten dc semilla de papa SalcntuIla ltbre ue enfermedadcs es una necesidad sentida ya que no eXIste en el dcpanamcllto 11l en el paiacutes programas

Oblcnci(m de plamas smltlS dc papa

de produccIoacuten de semilla certi fIcada de eacutesta variedad muy apreCIada por los agricultores en el Departamento de Caldas Las variedades producIdas en los programas de produccioacuten de semIlla que se adelantan en otras regiones del paiacutes no son aceptadas por las exigencias del mercado local y por su falta de adaptabiltdad a las zonas de paacuteramo Una de las formas de detener el proceso degenerativo que ha venido sufriendo esta varIedad en os uacuteltimos 30 m10s es proceder a seleccionarla tratarla para eliminarle los problemas sanitarios que ha acumulado y multiplicarla para ofrecerle a los agricultores un material de propagacioacuten que les permita tener la oportunidad de mejorar sus

rendimlcntos sin necesidad de incurrir en mayores costos de fertilizacioacuten y control de enfermedades haciendo del cultivo una cmpresa rentablc (Martiacutenez e al 1998)

La variedad Salentuna corresponde al Clon 309 de la Coleccioacuten Central Colombiana (Cee 309) (Variedad antigua de Salento) Quindiacuteo) caracterizada por tener tallos gruesos ramificados foliacuteolos primarios medianos verde claro nores abundantes morado intenso y fruuiflea-cioacuten abundante Los tubeacuterculos son de tamat10 mediano forma redonda lIgeramente aplanada ojos supertklales plll puacuterpura y crema con pulpa color crema (Figura 1)

Figura l Tubeacuterculo de papa de la var Salcntuna con sus ojos caracteriacutesticos d4 color crema alrededor de los mismos las coloraciones oscuras corresponden a 1 presencia de esclerocios de Rhizoctonia solani (Foto G Martiacutenez L)

RcvFacNalAgLMl-tlclliacuten Vo154 N~ 1) l~ P lJ5iexcl~136iexcl 2(XlI








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3070 1700 9700 378

508 62

223 86

083 0025 025

0025 10 01 30 30

025 025 01

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OBTENCIÓN DE PLANTAS SANAS DE PAPA, L. … · mejores plantas, por parte de los agricultores más tecnificados, además de la ausencia de programas orientados a ];1 producción de