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I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Antonio OLMOS, Edson BERTOLINI, M. Teresa
GORRIS, M. Carmen MARTÍNEZ, José A. PINA,
Nuria DURÁN-VILA, Mariano CAMBRA
Laboratorio de Virología e Inmunología
Departamento de Patología Vegetal
Centro de Protección Vegetal
Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA).
Moncada, Valencia
Oferta Tecnológica / IVIA
XI Foro INIA. Valencia. 03 de octubre, 2013
“Adaptación al cambio climático en la producción de
frutos cítricos y subtropicales”
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Instituto Valenciano de Investigaciones Agrarias (IVIA).
Centro de Protección Vegetal y Biotecnología
Laboratorio de Virología e Inmunología
Experiencia:
-Desarrollo y validación de métodos y protocolos serológicos y
moleculares para la detección y diagnóstico de patógenos de plantas.
- Control de virus, viroides y fitoplasmas de especies leñosas mediante
métodos convencionales (con base epidemiológica) y biotecnológicos
(plantas transgénicas que expresan genes de anticuerpos).
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
IVIA LABORATORIO DE BIOSEGURIDAD
(nivel de contención P2)
Centro de Protección Vegetal y Biotecnología
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Laboratorio Nacional de
Referencia del MAGRAMA
para diagnóstico de virus,
viroides y fitoplasmas de
especies leñosas, patata,
batata y fresa
IVIA Invernadero de
Bioseguridad (P2)
Miembro de la Red Nacional
RE-LAB de Laboratorios de
Alerta Biológica de
Presidencia de Gobierno
coordinada por Instituto
Carlos III de Salud.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
OFERTA:
1) Producción de reactivos de diagnóstico y diseño y
validación de protocolos y kits de detección y
diagnóstico simples, robustos y precisos.
www.plantprint.net
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
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Tissue print real-time PCR
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Immobilized samples can be stored until use or
mailed to a laboratory without biological risks.
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIAS
Añadir 100 μl de agua
destilada u otro tampón
Transferir 3 µl del extracto
directament para la
amplificación por PCR a
tiempo real
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIASTecnología validada para detección
de patógenos de cítricos por PCR
en tiempo real
- CTV
- CVEV
- CEVd y HSVd
- Spiroplasma citri
- ‘Ca. Liberibacter’
spp. (causing HLB)
- X. citri subsp. citri
Disponibles
comercialmente:
www.plantprint.net
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIASHost plant with symptoms or suspected
Biological indexing Serological tests Molecular tests
Inoculation of woody
indicator plants
(Mexican lime)
Tissue print-ELISA
with 3CA5+3DF1
monoclonal antibodies
or
DAS-ELISA with mono
or polyclonal antibodies
IC-RT-PCR (using
PIN1/PIN2 primers)
or
IC-RT-nested-PCR
(using PEX1/PEX2/
PIN1/PIN2 primers)
Tissue print-ELISA with
3CA5+3DF1
monoclonal antibodies
or
DAS-ELISA with mono
or polyclonal antibodies
IC-RT-PCR (using
PIN1/PIN2 primers)
or
IC-RT-nested-PCR
(using PEX1/PEX2/
PIN1/PIN2 primers)
Positive results in both tests
Typical
symptoms
No
symptoms
Serological
and
molecular
screening
tests
Confirmation
by serological
or
molecular
screening tests
Positive results by
one of the
confirmation tests
HOST CTV
INFECTED
Screening tests
Bulletin OEPP/EPPO Bulletin 34, 155-157 (2004)
OFFICIAL EU PROTOCOL FOR CTV DETECTION
I V I ANSTITUTO ALENCIANO DE NVESTIGACIONES GRARIASSecuenciación masiva “New
generation sequencing”
Muestra
Purificación de:
dsRNA, ssRNA,
siRNA o RNA
total y control
de calidad
Preparación de
genotecas de
cDNA
Secuenciación
automática
Análisis bioinformático:
Ensamblado de secuencias
para detección de virus y
viroides (15 días/1 mes)
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En un futuro próximo ELISA, PCR en tiempo real
y secuenciación masiva serán los métodos de
elección para detección y diagnóstico con
capacidad de substituir a los métodos
biológicos.
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OFERTA:
2) Control de virosis y sus vectores con bases
epidemiológicas y diseño de sistemas de producción
de plantas libres de virus en viveros.
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Muchas gracias
por su atención
