P.8 DIARREA INFECCIOSA, Avenatti Victor.pdf

L A B O R A T O R I O D E M I C R O B I O L O G I A P r c t i c a 8 D i a r r e a I n f e c c i o s a P g i n a | 1

A v e n a t t i J . V c t o r M . P g i n a 1

PRCTICA 8 Diarrea Infecciosa y Enterobacterias: E. Coli - Shigella - Salmonella

Sr. Vctor M. Avenatti J.

1. Introduccin: Caractersticas generales de las enterobacterias, patognesis. 2. Diarrea Aguda Infecciosa: etiologa, epidemiologa y clasificacin. 3. ESCHERICHIA COLI: Caractersticas, cepas. 4. SHIGELLA: Transmisin, caractersticas, la toxina Shiga, Diagnostico de laboratorio

(cultivos y p. bioqumicas) 5. SALMONELLA: Caractersticas, Patologa, 1)Fiebre Tifoidea 2) estado de portador 3) sepsis 4) la gastroenteritis (diarrea). Diagnstico de laboratorio: cultivos y Ensayo de aglutinacin de widal 6. Materiales Fecales: coprocultivo. 7. Autoevaluacin. 8. Bibliografa.

INTRODUCCIN: CARACTERSTICAS GENERALES DE LAS ENTEROBACTERIAS.

Las bacterias pertenecientes a la familia Enterobacteriaceae son huspedes habituales del tubo digestivo. Constituyen el 80% de los bacilos Gram negativos con significacin clnica. Salmonella, Shigella, Citrobacter y Yersinia se consideran patgenos primarios, as como determinados E. coli productores de diarrea. El resto son saprfitos y actan como patgenos oportunistas (debilidad del husped, solucin de continuidad de las mucosas). Son bacilos Gram negativos no esporulados, aerobios o anaerobios facultativos; la mayora son mviles por flagelos. Son oxidasa negativa, fermentan la glucosa con produccin de cido y la mayora reducen los nitratos a nitritos. Son poco exigentes nutricionalmente.

Poseen tres antgenos: - Ag O (somtico). Corresponde al polisacrido de la membrana externa presente en el LPS (no hay que olvidar que el LPS est compuesto de lpido A, que acta como endotoxina, y oligosacridos). Permite diferenciar grupos O. O for Outer

- Ag K (capsular). Corresponde al Ag Vi de S. typhi. - Ag H (flagelar). Los Ag K y H diferencian serotipos o serovariantes. Slo las bacterias que son mviles van a poseer este antgeno. Shigella no tiene este antgeno H, Salmonella tiene antgenos H que cambian peridicamente, protegindola de los anticuerpos. Tambin poseen: -Fimbrias o Pili para adherirse a las clulas epiteliales y moco (p. ej. fimbrias P del E. coli productor de pielonefritis). Se pueden detectar por examen directo de las heces en campo oscuro y crecen en medios ordinarios de cultivos y en el medio TCBS.



PATOGENESIS: Las enterobacterias producen 2 tipos de enfermedades:

1) La diarrea con o sin invasin sistmica. 2) Varias otras infecciones, incluyendo infecciones del tracto urinario, neumona, bacteriemia y sepsis, especialmente en los debilitados pacientes hospitalizados.

DIARRE AGUDA INFECCIOSA: La diarrea se define por el aumento en el peso diario de las heces por encima de 200 g. Habitualmente se acompaa de un aumento del nmero de deposiciones y de una disminucin de la consistencia. La normalidad en cuanto al nmero de deposiciones vara entre tres al da y tres a la semana.

ETIOLOGA Y EPIDEMIOLOGA: La causa ms frecuente de diarrea aguda son las infecciones. Puede ser causada tambin por frmacos, toxinas, etc. La mayora de las diarreas infecciosas se deben a transmisin del agente por va fecal-oral. La transmisin persona a persona tambin puede ocurrir mediante aerosolizacin (agente Norwalk, rotavirus), contaminacin de manos o superficies, o actividad sexual. El diagnstico en general de las diarreas bacterianas se realiza mediante el coprocultivo.

CLASIFICACIN: La diarrea de causa infecciosa puede estar producida principalmente por virus o bacterias.

Las diarreas virales son de tipo acuoso, sin productos patolgicos, normalmente auto limitadas y producidas ms frecuentemente por rotavirus en los nios y virus Norwalk en los adultos

Las diarreas de origen bacteriano se pueden clasificar segn el mecanismo fisiopatolgico de produccin de la diarrea.

1) Bacterias productoras de entero toxinas. La bacteria que produce tpicamente este tipo de diarrea es el Vibrio cholerae, agente causal del clera (heces en agua de arroz). Tambin producen entero toxinas la Escherichia coli productor de entero toxina (termolbil y termoestable), siendo este ltimo agente la causa ms frecuente de la diarrea del viajero. Este tipo de toxinas actan a nivel de la superficie de los enterocitos sin destruccin de la mucosa, alterando el intercambio inico y favoreciendo el paso de agua libre hacia la luz intestinal para dar lugar de este modo a una diarrea de tipo acuoso, por tanto, sin productos patolgicos (sin sangre, pus ni moco) y sin leucocitos al analizar las heces por el microscopio).

Vibrio cholerae se divide en serogrupos en funcin de su Ag somtico O. La mayora de los casos de clera estn causados por el serogrupo 01, que se clasifican en dos biotipos, clsico y El Tor; a su vez, cada biotipo en dos serotipos, Inaba y Ogawa. La toxina colrica es causante de la diarrea isosmtica. Los vibrios viven en las aguas de las costas y se concentran en los tejidos de los moluscos.



2) Bacterias productoras de neurotoxinas. Los agentes a recordar son el Bacillus cereus, tpicamente transmitido por el arroz frito y el Staphylococcus aureus, por cremas y mayonesas. Esta toxina se ingiere preformada con los alimentos, por lo que la clnica es precoz tras la ingesta de los mismos (en menos de 6 horas). Se denomina neurotoxina porque sobre la clnica de diarrea predomina su accin a nivel del hipotlamo, sobre el rea del vmito, de modo que la clnica principal es la de nuseas y vmitos.

3) Bacterias productoras de citotoxinas. El agente que da nombre al grupo es la Shigella dysenteriae. Tambin producen diarrea por este mecanismo Campylobacter jejuni (como complicacin: S. Guillain Barre), E. coli entero hemorrgico 0157: H7 (como complicacin en los nios produce sndrome hemoltico urmico) y Clostridium difficile. Este ltimo merece una consideracin aparte, ya que es el agente etiolgico de la colitis pseudomembranosa, cuadro que se da en sujetos que han realizado tratamiento con antibiticos. Estas toxinas reciben este nombre porque destruyen las clulas, invadiendo los enterocitos, con una inflamacin mayor a nivel local y, por tanto, produciendo diarrea de tipo disentera, es decir, con moco, pus y sangre en las heces y presencia de leucocitos al observarlas al microscopio.

4) Bacterias entero invasivas. Pertenecen a este grupo la Shigella flexneri, Salmonella enteritidis y E. coli entero invasivo. Las cuales sern el objeto principal de estudio en esta prctica. No actan produciendo toxinas, sino que directamente invaden la mucosa intestinal, provocando por tanto una diarrea con productos patolgicos.

5) Fiebres entricas. A este grupo pertenece la Yersinia enterocoltica, y la Salmonella typhi y paratyphi, que producen la fiebre tifoidea. Son cuadros con clnica sistmica: fiebre (que suele ser el signo ms precoz), cefalea, leucopenia, dolor abdominal, esplenomegalia y bradicardia relativa. Se deben a bacterias que penetran la mucosa intestinal intacta (produciendo escasa clnica a nivel digestivo), alcanzan las placas de Peyer de la submucosa y ganglios linfticos peridigestivos y desde ah pasan al torrente circulatorio, dando lugar al cuadro sistmico. El cuadro sistmico descrito se puede acompaar de un rash macular (rosola tifoidea) en trax y abdomen o de alteraciones del nivel de conciencia en la fiebre tifoidea, que aparecen sobre todo al inicio de la 2 semana.



ESCHERICHIA COLI: Agente patgeno de infeccin del tracto urinario y digestivo En nios y adultos y con amplio estudio en ingeniera gentica con aplicaciones medicas.

CARACTERISTICAS: bacilo Gram negativo, flagelado, con aspecto de coco bacilo, fermentador de glucosa, transformador de nitritos-nitratos, anaerobio facultativo.

CEPAS: La severidad de la diarrea por Escherichia coli depende de la cepa infectante y que factores de virulencia posee. Vamos a discutir los 4 grupos de productores de Diarrea: Estos se han nombrado sobre la base de factores de virulencia y las diferentes enfermedades diarreicas enfermedades que causan.

1) Escherichia coli Entero txica (ETEC): causa diarrea del viajero. Tiene Pili (factor de colonizacin) que ayudan a enlazar a intestinal clulas epiteliales, donde se libera exotoxinas que son similares a las exotoxinas de clera. Las toxinas son la toxina lbil al calor (LT), que es igual la toxina del clera y la toxina de calor estable (ST). Estas exotoxinas inhiben la reabsorcin de Na y Cl y estimular la secrecin de Cl - y HCO3- en el lumen intestinal. El agua sigue el tirn osmtico de estos iones, dando como resultado la prdida de agua y electrlitos. Esto produce una diarrea acuosa con un mximo de 20 litros perdidos en un da. La materia fecal se parece el agua de arroz solo como el clera!



2) Escherichia coli entero hemorrgica (EHEC): tambin tienen una colonizacin por poseer Pili como la ETEC, pero difieren en que segregan los poderosos de Shiga-like toxin (tambin llamado verotoxina) que tiene el mismo mecanismo de accin como la Shigella toxin. Ambos inhiben la sntesis de protenas mediante la inhibicin de la ribosoma 60S, lo que resulta en la muerte de las clulas epiteliales intestinales. As pues, estas bacterias permanecen en las clulas epiteliales intestinales y disparan a distancia su toxina Shiga-like. La diarrea es con sangre (hemorrgica), acompaado por intenso dolor en el abdomen calambres, y se llama colitis hemorrgica. Sndrome urmico hemoltico (SUH): est asociada con la infeccin por una cepa de EHEC, llamada Escherichia coli 0157: H7 caracterizada por: anemia, trombocitopenia (disminucin de plaquetas), y la insuficiencia renal (Por lo tanto la uremia). Numerosos brotes se han producido secundarios a infeccin de carne de la hamburguesa servida en cadenas de comida rpida, lo que sugiere que el ganado puede ser un reservorio de EHEC.

3) Escherichia coli entero invasiva (EIEC): Este enfermedad es la misma que la causada por Shigella. De hecho, el principal factor de virulencia se codifica en un plsmido compartida por Shigella y Escherichia coli. Este plsmido da a las bacterias la capacidad de invadir la realidad clulas epiteliales. EIEC tambin produce pequeas cantidades de Shiga-like toxin. El anfitrin trata de deshacerse de las bacterias, y esto se traduce en una respuesta inflamatoria mediada inmunolgicamente con fiebre. Los glbulos blancos invaden la pared intestinal, y la diarrea es con sangre, con los glbulos blancos. Al igual que la shigelosis!

4) Escherichia coli entero patgena (EPEC): causante de episodios diarreicos principalmente en nios y lactantes, con un mecanismo desconocido, pero migran y colonizan el intestino delgado, quizs exista la produccin de toxinas. En animales de experimentacin se ha demostrado la destruccin de las microvellosidades intestinales por adherencia a las mismas. El panorama general es que los diferentes tipos de la diarrea producida por E. coli y otros entricos dependen de la virulencia de la adquisicin de plsmidos, y existe un intercambio activo de estos factores. Tanto la Diarrea por Escherichia coli puede verse exactamente como el clera (heces en agua de arroz) o simplemente como la shigelosis (diarrea con sangre y clulas blanco).



SHIGELLA Hay cuatro especies de Shigella (dysenteriae, flexneri, boydii y sonnei) y todos son inmviles. Si uno mira hacia atrs en el cuadro de Escherichia coli y Shigella tomados de la mano, se ver que Shigella no tiene flagelos. Shigella no fermentan la lactosa y no produce H2S. Estas propiedades pueden ser utilizado para distinguir Shigella a partir de Escherichia coli (lactosa fermentador) y Salmonella (no a la lactosa fermentador, produce H2S). Los seres humanos son los nicos huspedes de Shigella, y la disentera que causa generalmente afecta a la edad preescolar los nios y las poblaciones en hogares de ancianos.

Transmisin: por va fecal a oral se produce a travs de heces, agua contaminada y contacto mano-a-mano (si cocinas por favor, lvate las manos!). Shigella nunca se considera parte de la flora intestinal normal! Siempre es un patgeno.

Caractersticas: Shigella es similar a la Escherichia coli entero invasiva (EIEC) en que ambos invaden el epitelio intestinal las clulas y liberan la toxina Shiga, lo que provoca la destruccin celular. Las clulas blancas de llegar a una reaccin inflamatoria. El colon, cuando se ve a travs de una colonoscopia, tiene lceras superficiales donde las clulas se han desprendido. La enfermedad comienza con fiebre (a diferencia de ETEC y el clera, que No hacen invasin en las clulas epiteliales, por lo que no inducen fiebre), dolor abdominal y diarrea. La diarrea puede contener manchas de color rojo brillante, sangre y pus. Los pacientes que desarrollan diarrea debido a que se produce la inflamacin del colon, daado por la toxina Shiga, y ste no es capaz de reabsorber los lquidos y electrolitos.

Shiga-toxin: Esta es la misma toxina como en EHEC y EIEC, y su mecanismo es el mismo. Hay una subunidad A unida a 5 subunidades B. Las subunidades B (B para la unin binding) se unen a la micro vellosidades de la membrana en el colon, lo que permite la entrada de la mortal subunidad A (A de Accin). Las subunidades A inactivar el 60S del ribosoma sntesis, la protena inhibidora y mata a la clula del epitelio intestinal.



DIAGNOSTICO DE LABORATORIO: El diagnstico etiolgico se basa en el aislamiento del microorganismo por coprocultivo. Las muestras de heces deben ser recientes y procesarse en medios diferenciales.

MEDIOS DE CULTIVO Agar Salmonella-Shigella (s-s)

Agar Xilosa-lisina-desoxicolato (xld), colonias incoloras

Agar Mac-conkey:

Agar Hektoen: colonias verdes

IDENTIFICACIN BIOQUMICA Esta identificacin se suele realizar en 2 subfases: Identificacin bioqumica inicial con unas pruebas determinadas: Generalmente, fermentacin de glucosa y lactosa (TSI), descarboxilacin de la lisina (LIA) y utilizacin de la urea.

Agar triple-azcar-hierro

Agar lisina-hierro

Caldo urea. FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO

Temperatura: ptima 37C, rango 10-45C.

Generalmente sensible al calentamiento y resistente al congelado.

pH: ptimo 6.5-7.5, mnimo 4.0-9.0 Humedad: mnima a 0.95

SALMONELLA Caractersticas: La salmonella es un no fermentador de la lactosa, es mvil (como un salmn), y produce H2S. Se habr ledo seguramente sobre el antgeno Vi de Salmonella. Este es un polisacrido capsular que rodea el antgeno O, protegiendo as las bacterias del ataque de los anticuerpos hacia el antgeno O. Este es igual que el antgeno K (slo para confundirnos!), pero con Salmonella se llam Vi (virulencia). Hay miles de los serotipos de Salmonella, pero clnicamente se dividen generalmente en tres grupos: 1)Salmonella typhi, 2)Salmonella cholerae suis, y 3)Salmonella enteritidis. Esto no ser tan difcil de recordar debido a que son nombrados de acuerdo a las enfermedades que causan.



Salmonella se diferencia de los dems entricos porque vive en el tracto gastrointestinal de los animales y los infecta, los seres humanos nos infectamos cuando hay contaminacin de los alimentos o el agua con heces de animales. Muchos animales pueden llevar a la Salmonella. En los EE.UU. hubo incluso una epidemia de la salmonelosis de las tortugas mascotas. Hoy en da, Salmonella es ms comnmente adquirida por comer pollos y los huevos crudos. Salmonella typhi es una excepcin, ya que no es zoontica (una enfermedad infecciosa de los animales que pueden transmitirse al hombre). Salmonella typhi se lleva slo por los seres humanos.

Patologa: Salmonella (como Shigella) no se considera parte de la flora intestinal normal! Siempre es patgena y puede hacer que 4 estados de la enfermedad en los seres humanos:

1) Fiebre Tifoidea, 2) un estado de portador, 3) la sepsis, y 4) la gastroenteritis (diarrea).



1. Fiebre Tifoidea Esta enfermedad causada por Salmonella typhi tambin se le llama fiebre entrica.

Salmonella typhi se mueve un paso ms all EIEC y Shigella. Despus de invadir el epitelio intestinal invade los ganglios linfticos regionales, por ltimo coloniza mltiples sistemas de rganos. Durante esta invasin, las bacterias son fagocitadas por los monocitos y pueden sobrevivir intracelularmente. As Salmonella typhi es un parsito intracelular Facultativo causante de fiebre tifoidea.

La salmonelosis se inicia 1-3 semanas despus de la fiebre de la exposicin e incluye, dolor de cabeza y abdominal el dolor es difuso o localizado en el flanco o fosa iliaca derecha (el leon terminal), a menudo simulando apendicitis. Como la inflamacin de los rganos afectados se produce, el bazo pueden aumentar de tamao y puede que el paciente tenga diarrea y manchas rosadas en el abdomen- erupcin cutnea transitoria que consiste en pequeas manchas de color rosa visto slo en personas de piel clara.

El diagnstico de eleccin de la fiebre tifoidea es el cultivo, ya sea mediante la obtencin de hemocultivos en las dos primeras semanas del cuadro (mayor rentabilidad en la primera Semana) (procedimiento ms rentable para el diagnstico precoz) o mediante el cultivo de las heces a partir de la tercera semana. Las pruebas serolgicas, como la de Widal, tienen numerosos falsos positivos y negativos, y actualmente no se recomienda su utilizacin.

Debido a la aparicin de cepas de S. typhi, resistentes a diversos antibiticos, el tratamiento actualmente recomendado son las quinolonas o cefalosporinas de 3 generacin. A pesar del tratamiento correcto, la tasa de Recadas en los sujetos inmunocompetentes llega al 10%.

2. Estado de Portador: Algunas personas que se recuperan de la fiebre tifoidea se convierten en

portadores crnicos, portadores de Salmonella typhi en sus vesculas y excretan la Bacteria constantemente.

Estas personas no estn activamente infectadas y por lo general no tienen ningn sntoma. (Una vez ms, si vas a cocinar por favor, lvate las manos despus usar el bao!) Algunos portadores requieren ciruga para la eliminacin de la vescula para sanar.

La pauta de eleccin para el portador crnico es el tratamiento prolongado con quinolonas (ciprofloxacino).

3. Septicemia La Salmonella en el torrente sanguneo infecta pulmones, el cerebro o los Huesos. Esta es la diseminacin sistmica por lo general causada por Salmonella choleraesuis y no involucran el tracto gastrointestinal. Nota: Recuerda que la Salmonella se encapsula con la Vi. Nuestro sistema inmunolgico elimina las bacterias encapsuladas por opsonizantes con anticuerpos y, a continuacin los macrfagos y neutrfilos en el bazo (el sistema retculo-endotelial) fagocitan la


A v e n a t t i J . V c t o r M . P g i n a 1 0

bacterias opsonizadas. As, los pacientes que han perdido su bazo (asplnicos), ya sea por trauma o anemia de clulas falciformes, van a tener dificultades para eliminar bacterias encapsuladas y son ms susceptibles a las infecciones por Salmonella. Los pacientes con anemia de clulas falciformes son particularmente propensos a la osteomielitis (infeccin sea).

4. Diarrea (gastroenteritis) La Diarrea es la ms comn presentacin de la infeccin por Salmonella y puede ser

causado por cualquiera de los cientos de serotipos de Salmonella enteritidis.

La presentacin Clnica incluye nuseas, dolor abdominal y diarrea, es decir ya sea lquida o, menos comnmente, contiene mucosa y la sangre de seguimiento. La fiebre se presenta en aproximadamente la mitad de los pacientes.

Esta diarrea es causada por una toxina parecida a la del clera (diarrea acuosa) y, a veces tambin por la inflamacin ileal (diarrea mucosa).

El tratamiento generalmente involucra slo lquidos y electrolitos de reemplazo, ya que los antibiticos no acortan el curso de la enfermedad y provocan expulsin bacteriana prolongada en las heces. La diarrea dura slo una semana o menos.

DIAGNSTICO DE LABORATORIO: Se lo realiza mediante Cultivos, y Pruebas bioqumicas y serolgicas: ensayo de aglutinacin de Widal; ELISA

CULTIVOS: Los cultivos son ampliamente considerados por su especificidad del 100%. Se puede realizar cultivos para obtener el crecimiento de Salmonellas en: sangre, secreciones intestinales (vmitos o aspirado duodenal) y heces, con resultados positivos en aproximadamente 85-90%. Sin embargo el coprocultivo posee una sensibilidad inferior al 50% y el urocultivo es mucho menos sensible. 1. Hemocultivos.- Positivo durante la primera semana de enfermedad en el 80% de los casos. 2. Mielocultivo.- Le atribuyen mayor porcentaje de positividad que al anterior. 3. Urocultivo.- Positivos en la siguiente semana 4. Coprocultivo.- Empieza a ser positivo al final de la primera semana con mayor frecuencia en segunda y tercera. Medios de cultivo La mayora crece bien en los medios de cultivo de laboratorio de rutina.

Medios de cultivo diferencial: los medios EMB o MacConkey, permiten detectar con rapidez fermentadores como no fermentadores de lactosa.

1. Agar sulfito de bismuto, colonias negras rodeadas de un halo grande de color marrn o negruzco, a verde con brillo metlico. Se lo usa previo enriquecimiento en CALDO DE



TETRATIONATO

Medios selectivos o especficos:

Medio "SS" (Salmonella - Shigella), contiene lactosa, por lo tanto las Colonias son grises, hmedas, translcidas, con punto negro central por la produccin de H2 S, se diferencia de la Shigella que no tiene punto negro.

Medio Hektoen: contiene sales biliares y colorantes: azul de bromitol y fucsina, retrasa de manera selectiva el crecimiento de la mayora de enterobacterias no patgenas encontradas en el intestino y permite el desarrollo de salmonella y shiguella. Las colonias de salmonella son verdes con punto negro central por la produccin de H2S

Ensayo de aglutinacin de Widal Fundamento La reaccin de Widal es un prueba basado en el principio de aglutinacin antgeno-anticuerpo, donde se determina la presencia de anticuerpos contra el antgeno O y H de la Salmonella typhi para el serodiagnstico de fiebre tifoidea, sin embargo debido a su falta de especificidad, debe ser interpretado en el contexto clnico del paciente.

La importancia de la aglutinacin de Widal radica en ser un mtodo serolgico, rpido, barato, y ampliamente conocido para el diagnstico de la fiebre tifoidea; sin embargo, tiene grandes limitaciones por reacciones antignicas cruzadas con otras bacterias, parsitos, virus y hongos. Materiales: Centrfuga, Mezclador, Jeringuillas de 5 ml. Tubo tapa roja de 10 ml de capacidad, Tubo pequeo de 5 ml de capacidad, Lminas de vidrio con celdillas de 18 mm de dimetro, Pipetas



automticas graduables, Puntas amarillas, Torundas, Torniquete, Separadores de suero, Timer, Reactivos con antgenos para la prueba de Widal, Palillos Procedimiento cualitativo:

Extraer sangre total (sin anticoagulante) centrifugar y separar el suero

Rotular a un lado de las celdillas los antgenos a utilizarse

Utilizando una pipeta, se dispensa una gota de suero del paciente (0,05 ml) en cada anillo/celdilla de la lmina

Mezclar y homogenizar los reactivo y agregar una gota de un reactivo por separado junto al suero

Mezclar las dos gotas y extenderlas en toda la superficie del crculo, usando un palillo individual para cada reactivo

Hacer rotar la lmina en forma de 8 horizontal o ponerla sobre el rotor durante 2 minutos

Resultados:

Proceso Cualitativo: El grado de aglutinacin se registra como sigue: 4+ Aglutinacin del 100% de los organismos 3+ Aglutinacin del 75% de los organismos 2+ Aglutinacin del 50% de los organismos 1+ Aglutinacin del 25% de los organismos - Aglutinacin del 0% de los organismos

Proceso Semicuantitativo: Diluciones seriadas del suero con buffer o solucin salina Interpretacin: Ms de 1/80 = Positivo

81,10

1/160 Enfermedad Activa

H 1/160 Enfermedad Activa

0+H 1/160 Enfermedad Activa

H 1/160 Vacunacin reciente o recuerdo anamnsico de infeccin pasada

0 1/80 Por ms de tres meses: Portador sano

Ay B Mayor a 1/80 Paratifoidea poco intensa

Menor a 1/80 Nios 3 meses a 1 ao. Fiebre paratfica

Vi o K 1.5 - 1.20 Fiebre tifoidea. Epidemiologa. Investigacin de origen de un brote epidmico

SUERO DILUCIONES

0.8 ml. 1/20 0.4 ml. 1/40 0.2 ml. 1/80 0.1 ml. 1/160

0.05 ml. 1/320



FALSOS NEGATIVOS: Antibioticoterapia temprana. Utilizacin de corticosteroides Medicin temprana de anticuerpos (primera semana) Inmunodeficiencias adquiridas y congnitas. Portadores crnicos de Salmonella typhi.

FALSOS POSITIVOS: a. En procesos infecciosos Salmonelosis no Typhi Infecciones por Enterobacterias. Neumonas Tuberculosis pulmonar y miliar Brucelosis Endocarditis bacteriana Rickettsiosis Infecciones por Staphylococcus aureus Tetanos Malaria Amebiasis Dengue Infeccin por VIH Hepatitis viral aguda y crnica Cryptocococcis. b. En procesos no infecciosos Enfermedades Autoinmunes ( Artritis Reumatoide, Lupus Eritematoso Sistmico) Hepatopatas crnicas

Conclusiones: 1. La reaccin de Widal NO es el gold standard para el diagnstico de fiebre tifoidea. 2. La reaccin de Widal sobre diagnostica fiebre tifoidea teniendo en cuenta sus

numerosas reacciones cruzadas.3. Para la interpretacin de la reaccin de Widal se debe conocer la prevalencia de la fiebre tifoidea en una determinada rea

Confirmacin de la Cura: Luego de tres coprocultivos negativos seriados. Uno por semana.

MATERIAS FECALES: COPROCULTIVO Esta muestra se utiliza para el diagnstico etiolgico de gastroenterocolitis aguda, recordando q la mayora de estas son autolimitadas, y una de sus principales indicaciones es una GEBA mayor a 5-7 das o disentera. Excepcionalmente se puede utilizar para la bsqueda de portadores de Salmonella sp. En los laboratorios de Microbiologa de ndole asistencial de adultos se realiza bsqueda de Salmonella y Shigella. Si se sospechan otros agentes consultar con el Laboratorio de Microbiologa. Se debe tomar en cuenta:

1) Investigacin de leucocitos fecales. Puede investigarse mediante la tincin de Wright o

azul de metileno. La presencia de gran cantidad de leucocitos es diagnstico de inflamacin. En pacientes con diarrea aguda, la presencia de pus en heces sugiere infeccin por un germen invasivo. La diarrea causada por organismos no invasivos que producen enterotoxinas, virus y Giardia no se asocia con la presencia de pus en heces.



2) Sangre oculta en heces. La presencia de sangre, bien sea oculta o macroscpica, en asociacin con diarrea, indica inflamacin, y por lo tanto tiene el mismo significado que la presencia de pus en heces

- OBSERVACIONES - Las muestras para coprocultivo, debern tomarse antes de la administracin de antimicrobianos Y preferiblemente antes de tomar anti diarreicos. - Indicar siempre el juicio diagnstico de presuncin y si el paciente es menor de un ao. - Solicitar las investigaciones especiales explcitamente ( C. difficile, C. perfringens, S. aureus ,etc.) - En el caso de bsqueda de portadores de Salmonella, se deber fundamentar adecuadamente el Pedido y se necesitan 3 muestras negativas para asegurar que el paciente no es portador. - Muestras para investigacin de enteroparsitos referirse a sus prcticas de parasitologa.

ANEXO:

E.Coli Klebsiella

Enterobacter

Salmonella Shigella Proteus

Lactosa + + + _ _ _

Indol

+ -Pneumo +Oxytoca

_ _ _ +Vulgaris -Mirabilis

Rojo de Metilo

+ V _ + + +

Vogues Proskauer

_ + + _ _ _

Citrato _ + + _ _ V

H2S _ _ _ + _ +

Urea _ + V _ _ +

Motilidad v _ + + _ +



TSI.- Degradacin de lactosa, sucrosa, dextrosa Positivo: Presencia de color amarillo en la superficie y/o en el fondo del medio, indica una reaccin cida. Presencia de H2S: Degradacin del cido frmico con produccin de sulfuro de hidrgeno Negativo: Presencia de color rojo en la superficie y/o en el fondo del medio, indica una reaccin alcalina.

SIM. (sulfito indol movimiento)

Rojo de Metilo Voges Proskauer

Citrato de Simons

Urea de Stuart

Hidrlisis del Triptfano con produccin de indol, cido pirvico Positivo: rojo Negativo: amarillo plido

Degradacin de la glucosa en cido lctico y actico

Positivo: rojo Negativo: amarillo

Conversin de acetona en diacetil, va

butilenglicol; degradacin de cido pirvico Positivo: rojo

Negativo: amarillo

Utilizacin del citrato de sodio con produccin de hidrxido de

amonio Positivo: azul

obscuro Negativo: verde

Por efecto de la ureasa existe hidrolizacin de la urea con produccin de amonaco. Positivo: rojo o rosado Negativo: amarillo



BIBLIOGRAFIA 1. Kasper DL, Braunwald E, Fauci AS, Hauser SL, Longo DL, Jameson JL. Harrison's Principles of Internal

Medicine. New York: McGraw-Hill, 2005. Volumen 1, parte 2, seccin 6, capitulo 40: Diarrea, pags 245 254

2. Departmento de Microbiologa e Immunologa. University of South Carolina.

http://pathmicro.med.sc.edu/Spanish/chapter11.htm 3. Enfermedades diarreicas agudas, World J Gastroenterol 15 (27): 334148, 2009

http://www.revistaamicac.com/diarreamanejo.pdf 4. WebMD: The Basics of Diarrhea

http://www.webmd.com/digestive-disorders/digestive-diseases-diarrhea 5. FAMIGLIETTI. Consenso sobre las pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos en

Enterobacteriaceae. Revista Argentina de Microbiologa (2005) 37:57-66 www.scielo.org.ar/pdf/ram/v37n1/v37n1a08.pdf

6. Escherichia Coli Infections eMedicine.com 2011

http://emedicine.medscape.com/article/217485-overview 7. Hale, Thomas L.; Keusch, Gerald T. (1996). "Shigella: Structure, Classification, and Antigenic Types".

In Baron, Samuel. Medical microbiology (4 ed.). Galveston, Texas: University of Texas Medical Branch. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK8038/#A1269

8. "Diarrhoeal Diseases: Shigellosis". Initiative for Vaccine Research (IVR). World Health Organization.

Retrieved February 11, 2012. "The serotype 1 of S. dysenteriae (Sd1) is of particular concern due to its expression of the Shiga toxin. It is the cause of epidemic dysentery and can cause vicious outbreaks in confined populations, especially refugee camps http://www.who.int/vaccine_research/diseases/diarrhoeal/en/index6.html

9. McGhie EJ, Brawn LC, Hume PJ, Humphreys D, Koronakis V (2009). "Salmonella takes control:

effector-driven manipulation of the host". Curr Opin Microbiol 12 (1): 11724. http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19157959

10. http://www.fsis.usda.gov/factsheets/salmonella_questions_&_answers/index.asp#3 11. Olopoenia LA, King AL. Widal agglutination test - 100 years later: still plagued by

controversy. Postgrad Med J 2000; 76(892): 80-4. http://pmj.bmj.com/content/76/892/80.full

12. MANUAL DE TOMA DE MUESTRAS PARA ESTUDIO BACTERIOLGICO, PARASITOLGICO Y

MICOLGICO, Departamento de Laboratorio Clnico. Hospital de Clnicas. 2004 http://www.bvsops.org.uy/pdf/laboratorio.pdf

Documents

P.8 DIARREA INFECCIOSA, Avenatti Victor.pdf