POE Etapa PRE Y POS Analitica HE-1

HOSPITAL DE ESPECIALIDADES DE LAS FUERZAS ARMAS HE-1

POE DE DETERMINACIÓN SEROLOGICA EN LA

ETAPA PRE Y POST- ANALITICA DEL SERVICIO DE

BANCO DE SANGRE DEL HE-1

CODIGO: F002-03FECHA:PAGINA: 1

POE DE DETERMINACIÓN SEROLOGICA EN LA ETAPA PRE Y POST- ANALITICA DEL SERVICIO DE BANCO DE SANGRE

DEL HE-1






1. INDICE

1. Índice

2. Objetivo

3. Alcance

4. Referencias

5. Definiciones

6. Responsabilidades

7. Contenido

7.1.Fase pre-analítica

7.1.1 Registro

7.1.2 Selección

7.1.3 Recolección de muestras

7.1.4 Preparación del sitio de punción y desinfección

7.1.5 Técnica de flebotomía

7.1.6 Extracción de la unidad de sangre

7.1.7 Transporte de muestras

7.1.8 Conservación de muestras

7.2.Fase pos-analítica

7.2.1 Validación de resultados

7.2.2 Invalidación de resultados

7.2.3 Almacenamiento

7.3.Precauciones de seguridad

8. Anexos.

2. Objetivo






Describir y estandarizar las normas generales en el proceso pre-analítico y post-analítica de los procesos de Tamizaje serológico, el cual será una guía para el personal del Banco de Sangre del Hospital de Especialidades Medicas F.F.A.A. y toda persona que lo requiera.

3. Alcance

Todo el personal técnico que labora en el área de Banco de Sangre.

4. Referencias

Centro de Investigación de Enfermedades Infecciosas, Procedimiento Operativo estándar para obtener resultados confiables, PUCE.

Insertos BIOMERIEUX: Anti-HCV, HBsAg , HIV, Chagas , ICE Sífilis, AAABB, American Association of Blood Banks, Manual Técnico para Banco de Sangre,30-

31,100-110, 2005.

5. Definiciones

Toma de muestras: es el acto en el que se obtiene, una parte de tejido, líquido, secreción de una persona, para su estudio en un laboratorio; cuando dicha obtención se efectúa con un método invasivo se denomina extracción

Muestra: es una cantidad limitada de suero o plasma utilizada en el análisis serológico.

Fase pre-analítica: es el conjunto de operaciones que se realizan desde que se recibe una petición analítica hasta que se inicia el análisis.

Fase pos-analítica: está relacionada con la transcripción y reporte de resultados.

Recopilación de datos.- en este punto tenemos que reunir la mayor cantidad posible de información sobre la temática a tratar, de diferentes fuentes.

Asepsia.- Conjunto de métodos aplicados para la conservación de la esterilidad.

6. Responsabilidades

El responsable es el personal técnico capacitado que realiza el procesamiento de las muestras.

El jefe será el encargado de verificar el cumplimiento de los procedimientos y además cumplirá la función de filtro en la revisión de los resultados obtenidos.

La Dirección Hospitalaria será la responsable proporcionar los recursos necesarios para la realización del proceso serológico.

7. CONTENIDO






7.1 FASE PRE-ANALÍTICA

La etapa pre-analítica va a comenzar de una forma cronológica partiendo desde la entrega de la hoja de la entrevista y selección del donante a cada para su posterior llenado, para después seguir con la preparación, toma de muestra, separación de los componentes del tubo testigo y termina en el almacenamiento de las muestras para el posterior análisis.

El lugar en el cual se receptan las donaciones debe ser acogedor, brindar todas las comodidades posibles para que el donante este tranquilo y sienta un ambiente placentero y se motive para una futura donación, con lo cual aseguraríamos más sangre para el servicio.

7.1.1 REGISTRO:

Al momento de la entrevista la información que recolectamos durante la pre-selección del donante debe permitir identificarlo positivamente y ligarlo con los registros previos existentes en el sistema e - Delphyn.

El único documento para el registro del donante en el sistema va a ser la cédula u otro documento que lo identifique con foto.

Se procederá a explicarle que tiene que llenarla completamente en forma personal con letra clara y legible los datos personales de la hoja, fecha, las preguntas deberán ser respondidas desde la 1 a la 35 los hombres y desde la 1 a la 38 las mujeres (Anexo 1), colocar el número de cedula su nombre y la firma, todo esto en la cara anterior, si la persona es analfabeta será e Licenciado laboratorista encargado del turno quien deberá ayudarle a llenar la ficha. Y en caso de tener alguna duda será respondida al momento de la entrevista.

Se informara a los donantes sobre las pruebas de laboratorio a realizarse y de los pasos siguientes si hubiese un resultado dudoso.

Si es puesto en la lista de donantes diferidos cuando en la entrevista no logra ser idóneo para la donación o una de las pruebas que se realicen en su sangre resulta anormal se les debe informar de ello.

Los menores de 18 años llenaran la ficha junto con el consentimiento del representante legal y esto constará mediante la firma del mismo, este se encuentra en la parte baja de la hoja de la entrevista en la parte posterior (Anexo 6).

7.1.2 SELECCIÓN DEL DONANTE:

En este proceso se debe identificar el comportamiento o los eventos que ponen a una persona en riesgo de adquirir una enfermedad transmisible o bien un riesgo médico personal.






Se debe informar al donante que sus datos personales y los datos referentes a la donación y pruebas complementarias serán tratados confidencialmente de acuerdo a la ley que lo garantiza.

Informar al donante que puede hacer preguntas en cualquier momento y que puede retirarse o autoexcluirse en cualquier fase de la donación.

Se procederá a la entrevista según los criterios de donación del servicio de banco de sangre.

En caso de no poder donar explicarles la razón para que no se alarmen o disgusten e incentivarlos a que regresen una vez terminado el tiempo de diferimiento, según el caso.

Indicar al donante que si hay un resultado dudoso se le podrá notificar hasta las 72 horas, para que se acerque al banco de sangre a tomarse una segunda muestra.

Solicitar a los donantes que informen acerca de cualquier enfermedad que se manifieste pocos días después de la donación.

Los donantes deben tener la oportunidad de indicar en forma confidencial si su sangre es apta o no para ser transfundida a través de una hoja denominada autoexclusión.

El donante debe firmar un consentimiento informado que debe ser requisito legal para poder recolectar y utilizar la sangre del donante potencial. Debe constar la firmar el donante leyó y comprendió la información referente a los exámenes que se le va a realizar, las enfermedades infecciosas transmisibles por vía transfusional, las reacciones adversas que pueden presentarse.

7.1.3 RECOLECCIÓN DE MUESTRAS

Después de la entrevista con el profesional (Licenciados), el donante ingresa a la sala o lugar de extracción donde será atendido por otro profesional encargado de la extracción de sangre, el profesional deberá saludarlo en forma cordial e indicarle donde dejar sus pertenencias y a qué lugar deberá ir para realizarle la extracción.

Instrucciones previas antes de cada extracción:

Se debe trabajar con todos los niveles de asepsia posibles, sin joyas, uñas cortas y realizar el lavado de manos entre la atención de uno y otro donante; si ello no es posible usar alcohol gel y cada 3 donantes lavarse las manos; usar guantes desechables por cada donante.

Para una correcta identificación del donante y concordancia con el número de donación asignado, preguntar el nombre al donante y corroborar que corresponda al mismo de la Ficha Selección del Donante, procedemos a colocar los códigos de barra en la bolsa de extracción, la bolsa con CPDA y las bolsas satélites, tubos (tubo lila y tubo rojo) y en el registro de autoexclusión. (Anexo 2).

Indicarle al donante que tome asiento en el sillón, explicar lo que se le va a realizar.






Revisar ambos brazos para elegir la vena que se va a puncionar, indicar que se siente en el sillón, que quede cómodo con el brazo recto para realizar una buena punción venosa.

Revisar la integridad de la bolsa que se va a usar. Revisar si en la Ficha Selección del Donante está marcada alguna condición de extracción.

En el Banco de Sangre se usa balanzas agitadoras, colocamos la bolsa de extracción en el equipo, junta y ordenada. Se utilizan bolsas de extracción con clamp en las tubuladuras, por lo cual cerramos y luego pasamos la tubuladura de punción por debajo del clamp, que está sobre el equipo, y dejamos al alcance del sillón donde se ubicó al donante para efectuar la punción.

7.1.4 PREPARACIÓN DEL SITIO DE PUNCIÓN Y DESINFECCIÓN CUTÁNEA

Visualmente y palpando, se selecciona una vena firme y grande en el antebrazo en una zona de la piel que esté libre de lesiones, (la selección de una buena vena es importante porque: facilita flujo continuo de sangre, evita manipulaciones y ajustes frecuentes de la aguja que resultan dolorosos para el donante).

Se debe limpiar un área de 8 - 10 cms. en el sitio de punción, la zona debe limpiarse meticulosamente para asegurar su asepsia.

Ligar el brazo y luego desinfectar el sitio de punción.

Para la desinfección se debe utilizar torundas mojadas con alcohol 70º.

Es importante cumplir el tiempo de acción del desinfectante: alcohol 70°-30 segundos.

Una vez completa la desinfección, se debe practicar de inmediato la punción, después de preparar la zona de punción no se debe volver a palpar la vena ni tocar la zona desinfectada.

Si se toca la zona de punción, se debe volver a desinfectar.

7.1.5 TÉCNICA DE FLEBOTOMÍA

La posición de la bolsa debe ser por debajo del nivel de la aguja inserta en el brazo para asegurar un buen flujo gravitacional.

Ligar 4 dedos sobre el pliegue del codo antes de la desinfección, para evitar tocar la zona desinfectada con la ligadura.

Cerrar el clamp incorporada la tubuladura, y hacemos un seminudo en la tubuladura sacamos el protector de aguja, luego puncionamos 1 cm. por debajo de la vena,






recorriendo primero un trayecto de piel y luego canalizando la aguja en la vena. Realizar una punción limpia para evitar la formación de coágulos.

Colocar un parche estéril sobre la aguja en el sitio de punción.

En caso de incidente en la venopunción se establece una punción fallida, retiramos la aguja y presionar por unos minutos el sitio de punción.

Se le pregunta al donante si acepta que se le realice una nueva venopunción en caso de aceptar, realizar una nueva punción.

Registrar en la ficha de selección del donante de sangre como doble pinchazo.

7.1.6 EXTRACCIÓN DE LA UNIDAD DE SANGRE

Luego de puncionar la vena, fijar la aguja y tubuladura con tela adhesiva, abrimos el clamp que va a la bolsa de recolección, y presionamos inicio en la balanza agitadora.

Indicar al donante que abra y cierre la mano lentamente, pero con fuerza apretando a su vez la bola de goma para facilitar la presión.

Vigilar la extracción y conversar con el donante incentivándole a la donación voluntaria mientras ésta se realiza para que el momento sea ameno y agradable y así el donante se sienta tranquilo y relajado; esto favorece su fidelización.

La balanza agitadora emitirá una alarma por lo cual el flujo de sangre se detiene ya que se ha obtenido la cantidad preestablecida, ajustamos el semi - nudo y presionamos con una pinza el extremo próximo al paciente y realizamos un corte lo más próximo al nudo y se procede a extraer las muestras en los tubos lila y rojo para las pruebas inmunohematológicas y tamizaje serológico.

Desligar el brazo puncionado del donante.

Colocar un algodón sobre el sitio de punción y sin apretar retirar la aguja, luego presionar fuertemente unos minutos, pedir al donante que siga presionando con fuerza sobre el algodón con la mano por 3 a 4 minutos; de lo contrario, si dobla el brazo o no presiona, se puede producir un hematoma

Descartar la aguja en el contenedor de desechos cortopunzantes que debe estar junto a cada sillón de extracción.

Después del tiempo aconsejado colocarle un curita sobre el sitio de punción.

Dar recomendaciones post donación en forma verbal.






Completar registro de donación en Ficha Selección del Donante con el tipo de bolsa, duración de la extracción, brazo de extracción y si hubo reacción post donación indicando que tipo de reacción hubo. (Anexo 3)

Si el donante se siente bien, y no se observan signos de reacción post-donación y ha esperado un tiempo prudente (5 - 7 minutos), le entregamos su refrigerio, le agradecemos por su donación y lo animamos a que vuelva a donar en unos 3 meses si es hombre y en 4 meses si es mujer.

7.1.7 TRANSPORTE DE MUESTRAS:

Una vez realizada la extracción, las diferentes muestras deben ser organizados por códigos de donación designada por el sistema e- Delphyn para facilitar un reconocimiento rápido y efectivo durante el transporte y recepción.

Después de asegurar que los especímenes están correctamente identificados, se centrifugan en el área correspondiente y se les coloca en las gradillas de trabajo, ordenas para su procesamiento.

Antes de centrifugar la sangre esperar que se complete la formación del coágulo a temperatura ambiente para la obtención de suero y evitar la presencia de fibrina, aproximadamente 20 minutos desde la extracción de la muestra.

Todas las muestras de suero humano y los controles deben ser considerados como potenciales portadores de agentes infecciosos, por lo que se recomienda respetar las condiciones de bioseguridad para su manipulación y procesamiento.

Realizar alícuotas debidamente identificadas del suero obtenido para cada una de las pruebas serológicas del tamizaje.

Una vez centrifugadas las muestras y libres de fibrina, se procede a realizar el análisis propiamente dicho.

7.1.8. CONSERVACIÒN DE MUESTRAS.

En el banco de sangre del HE-1 la mayoría de los especímenes no son procesados inmediatamente y por ello necesitan un periodo de almacenamiento; además, después del análisis de las muestras, éstas también son conservadas durante un periodo de tiempo determinado (diete días)

En general, se establece que la conservación de las muestras tiene las siguientes condiciones:

1 a 2 horas a temperatura ambiente. Hasta 7 días en refrigerador entre 2 a 8 °C






Dos ó tres meses en congelador a –20 ° C.

7.2. FASE POS-ANALÍTICA

Luego de haber terminado la corrida se revisara y transcribirá los resultados de la prueba realizada.

Los registros deben ser impresos y archivados.

Se deberá realizar la notificación respectiva a los donantes acerca de cualquier anormalidad significativa detectada.

Los resultados de las pruebas son confidenciales y no deben entregarse a nadie sin el consentimiento escrito del donante.

7.2.1 VALIDACIÓN DE RESULTADOS:

Las muestras con resultados no reactivas se consideran negativas.

Las muestras reactivas o en zona indeterminadas deben repetirse nuevamente y por duplicado.

Si el resultado siguiere siendo positivo se llamara al paciente o donante para una segunda muestra.

La reactividad de la repetición con la segunda muestra constituye un resultado positivo. Y todo hemocomponente debe ser descartado.

La ausencia de reactividad en las dos pruebas implica que el resultado debe confirmarse con una nueva muestra.

7.2.2 INVALIDACIÓN DE RESULTADOS:

Si durante la realización de pruebas de tamizaje el proceso sufriera una alteración por alguna de las siguientes razones: equipos defectuosos, procedimientos incorrectos, reactivos alterados o los controles no cumplen con los criterios de aceptación, los resultados no son válidos. Y se repetirá la corrida.

Antes de anular las pruebas de la corrida, es indispensable que se revise las causas con el supervisor y aplicar medidas correctivas.

Revisar que los valores de los controles del kit estén dentro de los rangos de medición.






Las muestras con densidades ópticas dentro de la zona indeterminada se deberán separarse en la gradilla para repetición por duplicado.

Las muestras lipémicas o hemolizadas pueden producir resultados falsos, indicar en los registros en la parte de observaciones.

TEST ELISA CHAGAS III:

Calcular el cut-off y cuando la placa ha cumplido los criterios de validación.

Las muestras con densidades ópticas dentro de la zona indeterminada se deberán separarse en la gradilla para repetición por duplicado.

Muestras con contaminación microbiana o de personas con otras parasitosis o enfermedades autoinmunes pueden producir resultados falsos.

Reporte de resultados:

Si valida la prueba se procederá con el reporte, utilizando la hoja de trabajo.

Realizar y verificar la transcripción de resultados de tres personas tanto en los registros físicos como en el sistema y antes de su liberación.

Cada persona debe revisar la fidelidad de los datos reportados y transcritos.

Después de realizar las determinaciones analíticas, es aconsejable almacenar las muestras por si fuera necesario realizar medidas adicionales, comprobaciones, etc.

Las muestras con serología reactiva alícuotar en tubos, rotular ponerlas en congelación por un periodo de 5 años en un sitio asignado para el mismo.

7.2.3 ALMACENAMIENTO

Después de realizar las determinaciones analíticas, se debe almacenar las muestras de 2 a 8 ºC por si fuera necesario realizar medidas adicionales, comprobaciones, etc.

Todas la muestras realizadas VIH se almacenan en una bolsa de aluminio sellada herméticamente y puesta a congelación de -20ºC por el periodo de un año.

Las muestras con serología reactiva o indeterminada tapar y colocarlas en refrigeración de -20ºC debidamente rotuladas por un periodo de 5 años y registrar en el sistema en Donaciones en Seroteca.

7.3 Precauciones de Seguridad






Evitar el uso de celulares y cualquier distracción innecesaria

No comer, beber o manipular lentes de contacto en el área de trabajo.

No pipetear con la boca.

Use guantes cuando manipule muestras y reactivos.

Evitar el contacto con los ojos, piel y membranas mucosas en caso de contacto con la piel o mucosas, lave el área afectada con abundante agua.

Limpie y desinfecte cualquier salpicadura o derrame de muestra o reactivo utilizando desinfectante como el hipoclorito de sodio al 0.5 %.

Elimine todo el material contaminado en recipientes adecuados para desechos biológicos.

8 ANEXOS

ANEXO 1:

FICHA DE SELECCIÓN DEL DONANTE






ANEXO 2

COLOCACIÒN DE LOS CÓDIGOS DE BARRA.






ANEXO 3






ANEXO 4

REGISTRO DE RESULTADOS SISTEMA E- DELPHYN

ANEXO 5

CONCENTIMIENTO DEL REPRESENTANTE LEGAL

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