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“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis“ Página 1
UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD
CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA
Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.
Alumno: Ramón Japón Geovanny Efrén
Curso: Quinto Paralelo: A
Grupo N° 5
Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes 04 de agosto del 2014
Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes 11 de agosto del 2014
PRÁCTICA N° 10
Título de la Práctica: Intoxicación por Hierro.
Animal de Experimentación: Cobayo.
Vía de Administración: Intraperitonial
Tiempos:
o Inicio de la práctica: 08: 00 am
o Hora de administración del toxico al cobayo: 08:06 am
o Deceso del animal: 08:12 am (6 minutos)
o Inicio del baño maría: 08:30 am
o Finalización del baño maría: 09:00 am
o Final de la práctica: 10:30 am
OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA
1. Observar la reacción que presenta el cobayo ante la Intoxicación por cloruro férrico.
2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el
toxico en el animal.
3. Adquirir la destreza para realizar y reconocer la positividad de las reacciones de
identificación del toxico en medios biológicos.
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MATERIALES
o Jeringa de 10 cc
o Varilla
o Espátula
o Probeta
o Campana
o Panema
o Papel filtro
o Embudo
o Fosforo
o Pinzas
o Cocineta
o Porta tubo
o Tabla de disección
o Cronómetro
o Perlas de vidrio.
o Equipo de disección
o Bisturí
o Vasos de precipitación 200 y
500 ml.
o Equipo de destilación.
o Tubos de ensayo
o Pipetas
o Guantes de látex
o Mascarilla
o Mandil
o Gorro
SUSTANCIAS
Cloruro férrico 10 ml o 200 gotas
(FeCl3).
Clorato de potasio 4 g (KClO3).
Ácido clorhídrico concentrado 25
ml o 500 gotas (HCl).
Hidróxido de potasio (KOH).
Sulfocianuro de Potasio [KCNS]
Ferricianuro de Potasio
[Fe (CN)6K3]
Ferrocianuro de Potasio
[Fe (CN)6K4]
Ácido sulfhídrico (H2S)
Agua destilada (H2O).
EQUIPO:
Balanza.
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PROCEDIMIENTO
1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo además de tomar todas las medidas de
bioseguridad.
2. Colocamos el cobayo en el panema.
3. Tener todos los materiales a utilizar listos.
4. Administramos al cobayo, 10 ml de solución de coluro férrico por vía
intraperitoneal, anotamos el tiempo.
5. Observamos los efectos que produce en el cobayo hasta que se produjo la muerte
del animal.
6. Procedimos a la apertura del cobayo con la ayuda del equipo de disección.
7. Observamos el estado de las vísceras.
8. En un vaso de precipitación recolectamos los líquidos que vertían de animal y
colocando las vísceras (picadas lo más finas posibles).
9. Adicionamos a las vísceras 50 perlas de vidrio, 2 gramos de clorato de potasio y
ácido clorhídrico concentrado 25 ml y lo llevamos a baño maría por 30 minutos.
10. Cinco minutos antes de que se cumpliera el tiempo establecido del baño maría
adicionamos 2 gramos más de clorato de potasio.
11. Una vez finalizado el baño maría dejamos enfriar y filtramos.
12. Con el filtrado luego procedimos a realizar las reacciones de identificación de
mercurio en medios biológicos.
13. Una vez terminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.
REACCIONES DE RECONOCIMIENTO
1.- CON LOS NaOH Y KOH: El hierro reacciona frente a los NaOH y KOH
produciendo un precipitado blanco de Fe(OH)2; este precipitado rápidamente se
oxida formándose primeramente verde sucio, luego negro y finalmente pardo
rojizo.
Fe2+ + (OH) Fe(OH)2
2.- CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO: El Fe2+ no reacciona frente a
este reactivo, el Fe3+ reacciona originando un complejo color rojo sangre, esta
reacción es más sensible para reconocer el hierro.
3.- CON EL FERRICIANURO DE POTASIO Fe (CN)6K3: Frente a este
reactivo, las sales ferrosas producen un precipitado, sino que forma un complejo
color pardo oscuro.
4.- CON EL FERROCIANURO DE POTASIO Fe (CN)6K4: Con este
reactivo los iones ferrosos reaccionan dando un precipitado color blanco que
rápidamente se hace azul, conocido como azul de Prusia.
Fe (CN)6 + Fe2+ Fe(CN)6
5.- CON EL H2S: Con este gas, el hierro produce un precipitado negro de
sulfuro de hierro.
Fe2+ + H2S SFe + 2H+
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GRÁFICO:
Animal de experimentación
cobayo
Extraer las vísceras del
cobayo y colocarlas en un
vaso de precipitación
Inyectar 10 ml el toxico
(FeCl3)
Llevar a baño María por 30
minutos con agitación regular
Triturar las vísceras, colocar
50 perlas de vidrio y 2g de
KClO3 y 25 ml de HCl
Observar los síntomas del
cobayo luego de la
administración del toxico
Una vez finalizado el baño
María, dejar enfriar y filtrar
Colocar al cobayo en la tabla
de disección
Obtener el filtrado para
realizar las reacciones
correspondientes.
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3
6
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REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLÓGICOS
CON HIDRÓXIDO DE POTASIO
Reacción positivo característico pardo rojizo
CON EL SULFOCIANURO DE POTASIO
Reacción positivo característico color rojo sangre
CON EL FERRICIANURO DE POTASIO
Reacción positivo característico color pardo oscuro
Antes Después
Después Antes
Antes Después
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CON EL FERROCIANURO DE POTASIO
Reacción positivo característico color azul
CON EL ACIDO SULFHIDRICO
Reacción positivo característico precipitado negro
OBSERVACIONES
Hemos observado que al administrar el toxico (cloruro férrico) por vía intraperitoneal
el cobayo presentó perdida de motilidad, hipoxia, convulsiones y finalmente murió.
CONCLUSION
Al culminar esta práctica pudimos determinar que el hierro es una sustancia altamente
tóxica, ya que actuó rápidamente en la motilidad, presentando hipoxia y convulsiones
que produjeron la muerte del animal después de la administración de 10 ml de toxico y
luego de esto se realizó las reacciones de identificación en las constatamos la presencia
de cadmio en el filtrado obtenido de la decocción de las vísceras.
RECOMENDACIONES
Realizar la asepsia del área de trabajo.
Utilizar el equipo de protección adecuado: bata de laboratorio, guantes,
mascarilla, zapatones si es necesario.
Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.
Después
Antes Después
Antes
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Utilizar la cámara de gases para realizar las pruebas y evitamos así
intoxicaciones.
Tener material para la toma de cada reactivo y evitar contaminación de los
reactivos que pueden llevar a un error en las reacciones.
CUESTIONARIO
¿PROPIEDADES FÍSICAS- QUÍMICAS DEL HIERRO?
Estado físico: Líquido Color: Marrón oscuro Olor: Débil, semejante al del ácido
clorhídrico Temperatura de ebullición: > 100 ºC (depende de la pureza) Temperatura de
la inflamación: No inflamable. Se descompone por el calor liberando ácido clorhídrico.
Temperatura de autoignición: No inflamable Densidad del líquido: > 1,4g/ml,
dependiendo de la pureza y la temperatura. Presión de vapor: Sin información
Solubilidad en agua: 100%
¿DONDE SE ENCUENTRA EL HIERO?
El hierro es un ingrediente en muchos suplementos minerales y vitamínicos. Los
suplementos de hierro igualmente se venden solos y sus diversos tipos abarcan:
Sulfato ferroso
Gluconato ferroso
Fumarato ferroso
¿CUAL ES LA FISIOPATOLOGÍA DE LA INTOXICACIÓN?
Daño Gastrointestinal Las sales de hierro corroen y erosionan la mucosa GI. Generan una gastroenteritis hemorrágica que puede llegar a perforación (peritonitis). Al dañar la barrera de la
mucosa gastrointestinal, facilitan el paso de las bacterias a la sangre llevando a diseminación hematógena y sepsis.
Alteración Cardiovascular Las altas concentraciones de hierro aumentan la permeabilidad capilar generando
salida de líquido a un tercer espacio. Lo anterior, sumado a la hemorragia gastrointestinal, genera hipovolemia e hipoperfusión tisular y shock.
Acidosis Metabólica Es el producto de la hipoperfusión tisular que lleva al metabolismo anaeróbico y
posteriormente a la acidosis láctica. Coagulopatía El Hierro elemental se une a los factores de coagulación, alterando su actividad, prolongando el PT y PTT.
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Disfunción Orgánica
Hepática: El hierro libre llega a los hepatocitos generando daños mitocondriales. Renal: Por efecto directo el hierro produce necrosis tubular. SNC: Por daño vascular y alteraciones metabólicas genera letargo y coma.
BIBLIOGRAFÍA
Toxicología Médica Dr. Phil, Dr. Med. H. Funher. Editorial Científico-
Médico. Madrid. España. 2010
WEBGRAFÍA
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/002659.htm
http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-
98872001000600010
http://www.encolombia.com/medicina/revistas-medicas/pediatria/vp-
391/pedi39104-intoxicacion
AUTORIA
Bioq. Farm. Carlos García MSc.
FIRMAS DE LOS INTEGRANTES
__________________ __________________
Elizabeth Guzmán Geovanny Ramón
_________________________
Gisela Fernández
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GLOSARIO
CEFALALGIAS: hace referencia a los dolores y molestias localizadas en cualquier
parte de la cabeza, en los diferentes tejidos de la cavidad craneana, en las estructuras
que lo unen a la base del cráneo, los músculos y vasos sanguíneos que rodean el
cuero cabelludo, cara y cuello. En el lenguaje coloquial cefalea es sinónimo de dolor
de cabeza.
VÉRTIGOS: El vértigo es una sensación ilusoria o alucinatoria de movimiento de
los objetos que nos rodean o de nuestro propio cuerpo, por lo común, una sensación
de giro. El vértigo suele deberse a un trastorno en el sistema vestibular.
HIPOPERFUSIÓN TISULAR: Aporte insuficiente de los nutrientes y el oxígeno
necesarios para la actividad normal de los tejidos y las células, también se denomina
Shock.
HEMATÓGENA: Que se produce en la sangre o derivado de ella.
SEPSIS: Es la respuesta sistémica del organismo huésped ante una infección, con
finalidad eminentemente defensiva.
ANEXOS
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Revista médica de Chile versión impresa ISSN 0034-9887
Rev. méd. Chile v.129 n.6 Santiago jun. 2001
http://dx.doi.org/10.4067/S0034-98872001000600010
Intoxicación aguda por hierro en un caso
Acute iron poisoning. Report of one case
Francisco Jover D, Lucio Andreu G,
Jaqueline Robert G, Jaime Merino S
Correspondencia a: Francisco Jover Díaz. C/Amadeo de Saboya 2,5º B. 03012. Alicante. España. Teléfono 96-5250654/5656843 Fax 96-5938652. E-
mail: [email protected]
The ingestion of iron-containing products is a potential toxicological emergency. It is a leading cause of pediatric unintentional ingestion fatalities because some iron-
containing compounds are readily available (vitamin mixtures, iron pills). Among adults, it has been described as accidental overdoses (mainly in pregnancy) and as suicidal attempts. We report a 42 years old woman, admitted due to the intentional
ingestion of iron pills with suicidal purposes. A plain abdominal X ray showed at least 20 pills in the gastric fundus and antrum. She was successfully treated with intravenous
desferroxamine chelation. Plain abdominal X ray examination can be very useful in the diagnosis of acute iron poisoning (Rev Méd Chile 2001; 129: 660-2) (Key-words: Iron compounds; Iron chelating agents; Poisoning)
Recibido el 26 de febrero, 2001. Aceptado en versión corregida el 28 de marzo,
2001. Servicio de Medicina Interna. Hospital Clínico Universitario de San Juan
Alicante. España.
La intoxicación aguda por hierro se trata de una urgencia médica potencialmente letal. Su rango de toxicidad incluye efectos sobre el sistema gastrointestinal, cardiovascular, efectos metabólicos y sobre el sistema nervioso central. Es una de las principales causas
de intoxicación en la edad pediátrica, sobre todo por ingesta accidental. En la edad adulta se trata de una situación infrecuente casi siempre relacionada con intentos de
suicidios. Presentamos el caso de una mujer que ingirió altas dosis de sulfato ferroso, siendo tratada de forma exitosa. Así mismo revisamos las principales características de esta patología.
Caso clínico: Mujer de 48 años que ingresa por ingesta voluntaria de aproximadamente 25 comprimidos de sulfato ferroso en un intento de suicidio tras una discusión familiar. En total, suponía una dosis de hierro elemental de 2.500 mg (50 mg/kg). La paciente
tomaba suplementos de hierro debido a anemia ferropénica de origen ginecológico. Examen físico: estaba en buen estado general sin alteraciones de consciencia.
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Auscultación cardiopulmonar: sin hallazgos. Abdomen: blando y depresible, sin masas
ni visceromegalias. Sin peritonismo. Neurológico sin focalidad. Laboratorio: leucocitos 13.040/ml con fórmula normal, hemoglobina 10,2 mg/dl, hematocrito 33,7%, plaquetas
206.300/ml, glucosa 337 mg/dl, urea 34 mg/dl, creatinina 0,7 mg/dl. La radiografía simple de abdomen (Figura 1), mostró al menos la presencia de 20 comprimidos en fundus y antro gástrico. Se administró jarabe de ipecacuana vomitando
aproximadamente ocho comprimidos, realizándose lavado gástrico y diversas medidas de sostén. Mediante una gastroscopia se consiguió extraer 4 comprimidos más. En ese
momento, se instauró tratamiento quelante del hierro con desferoxamina intravenosa (10 mg/kg/h), que se mantuvo durante 2 días. Posteriormente se recibieron los resultados de las extracciones sanguíneas realizadas tras 5 h (Hierro (Fe) 364 mcg/dl, Transferrina
(TRF): 328 mg/dl, índice de saturación de la transferrina (IST) 87,38%, Ferritina 11 ng/ml) y 10 h de la ingesta (Fe 373 mcg/dl, TRF: 326 mg/dl, IST 89,54%, Ferritina 12
ng/ml). La paciente presentó fiebre mantenida y molestias faríngeas durante 48 h. Analítica (tras 48 h de la ingesta): glucosa 133 mg/dl, Fe 28 mcg/dl, TRF 264 mg/dl, IST: 8,35%, Ferritina 68 ng/m, con funciones renal y hepática normales. La paciente fue
dada de alta y evaluada en consulta al mes del episodio permaneciendo asintomática.
DISCUSIÓN
La intoxicación aguda por hierro es la primera causa de mortalidad por agentes tóxicos en niños generalmente de causa accidental1. Contribuye a esta alta incidencia la fácil
disponibilidad de fármacos que contienen hierro, la existencia de comprimidos "atractivos" y la falsa reputación de fármaco "benigno"2. En el adulto, es una situación
infrecuente y se asocia a intentos de suicidios.
El hierro es un tóxico único, ya que no es xenobiótico3. En la intoxicación aguda, aumenta la absorción intestinal y se satura la transferrina, quedando gran cantidad de hierro libre circulante que se deposita en los tejidos y causa alteración de los
mecanismos celulares. Produce toxicidad a dos niveles: a) Local: Efecto corrosivo gastrointestinal (ulceración de la mucosa y necrosis coagulativa) y b) sistémico (por
alteración de la fosforilación oxidativa y disfunción mitocondrial) con efectos fundamentalmente cardiovasculares y metabólicos (acidosis metabólica, fiebre, hiperglucemia y leucocitosis). La evolución clínica consta de cuatro fases: fase I
(primeras 6 h): síntomas gastrointestinales (hemorragia digestiva, dolor abdominal, molestias faríngeas). En caso de intoxicación grave, inicialmente aparecen síntomas
neurológicos (coma) y cardiovasculares (hipotensión arterial y shock). En la fase II (6 a 24h), en general aparece una mejoría clínica que en casos leves es definitiva, pero que en casos graves da paso a la fase III (24-48 h) con aparición de falla multiorgánica y
muerte en la mayoría de los casos. Si se supera la fase aguda, en algunos casos pueden aparecer complicaciones como estenosis gástricas o pilóricas con obstrucción intestinal,
septicemia por Yersina o disfunción cardíaca tras varias semanas (fase IV).
En cuanto al manejo clínico es de gran importancia conocer de inicio la severidad de la intoxicación y con ello determinar la actitud a seguir y el pronóstico1-4. Para ello, es
necesario investigar la cantidad de hierro elemental ingerido y el tiempo transcurrido desde su ingesta. La intoxicación con menos de 40 mg/kg se considera como leve, entre 40-60 mg/kg como moderada y más 60 mg/kg es la potencialmente letal. Es importante
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saber que la sintomatología no refleja necesariamente la gravedad de la intoxicación. Si
la clínica es grave se ensombrece el pronóstico, pero también puede ser escasa aún con dosis potencialmente letales. Por tanto, es importante tener otros datos relacionados con
el diagnóstico y pronóstico. Al respecto, algunos autores han señalado que la concentración de hierro sérico a las 4-6 h de la ingesta es el dato de laboratorio que más se correlaciona con la severidad de la intoxicación. Además, el hallazgo de leucocitosis
(>15.000/ml) o de hiperglucemia (como en nuestro caso) se ha correlacionado con la existencia de niveles séricos de hierro >300 mcg/dl. Estos datos pueden ser de utilidad
en caso de no disponer de concentraciones de hierro en urgencias5. Diversos estudios han demostrado que la capacidad de unión de la transferrina al hierro (TIBC) no es un parámetro útil para evaluar la gravedad de la intoxicación6-7.
La radiografía de abdomen es un método útil en estos casos ya que sirve para confirmar la intoxicación, valorar la cantidad de comprimidos ingeridos y monitorizar la eficacia de las maniobras de descontaminación. Es un método de gran valor en las
intoxicaciones por fármacos, ya que todos los fármacos son potencialmente radiopacos, aunque los que mayor radiodensidad alcanzan son los compuestos minerales (cloruro
potásico, de hierro, yodo o carbonato cálcico), y en menor medida antibióticos (macrólidos y betalactámicos), teofilina, acetazolamida y sucralfato8-9.
El tratamiento de la intoxicación aguda se basa en dos pilares:
1) La cantidad de hierro ingerido. En caso de ingesta de <40 mg/kg sólo se precisa la inducción del vómito (ipecacuana). Si la ingesta es moderada (40-60 mg/kg) se
procederá a descontaminación intestinal vigorosa mediante el lavado gástrico con tubo de gran calibre (tubo de Ewald). El carbón activado no es útil ya que no quela metales
pesados. En caso de intoxicación severa (>60 mg/kg) es necesaria la irrigación intestinal total con un catártico (solución de polietilenglicol) para prevenir su absorción intestinal.
2) La quelación del hierro con desferoxamina intravenosa en caso de niveles de hierro séricos >350 mcg/ml, ingesta de más de 60 mg/kg, si persisten los comprimidos en la
radiografía tras las maniobras de descontaminación o en caso de fármacos "retard". La dosis inicial de desferoxamina es de 10-15 mg/kg/h y suele retirarse 24 h después de
que el paciente quede asintomático o si el hierro sérico es menor de 100 mcg/dl.
En conclusión, queremos destacar la gravedad de esta situación y la importancia de conocer su manejo clínico, así como el papel de la radiografía de abdomen en la
identificación de los comprimidos radiopacos.
CONCLUSIÓN:
El hierro es un metal necesario para el equilibrio de la homeostasis del organismo pero
así como otras sustancias el exceso de este puede ocasionar problemas de toxicidad en
la persona.
