Centro de Estudios Tecnologicos del Mar No. 11

Prctica #2

Determinacin de coliformes totales y fecales

Nombre: Susana Alejandra Corts Jimnez3ro A Laboratorista Ambiental

Introduccin:

Los Coliformes son bacterias tipo Escherichia coli, capaces de crecer en un medio aerbico, se desarrollan en temperaturas de 35C +- 1C. Fermentan la lactosa produciendo gas y cido lctico. (necesitan presencia de oxgeno).Coliformes fecales: poseen las mismas propiedades que los coliformes, pero son termotolerantes y pueden fermentar la lactosa a 94C.

Para enjuiciar la calidad de las aguas se recorre a parmetro fsico qumico y biolgico, es preciso hallar el nmero coliformes totales y fecales como indicadores de contaminacin, ya que la norma oficial nos indica que la cantidad de coliformes totales permitidos para el consumo humano son 200 y coliformes fecales 0.

Objetivos:

Determinar la presencia de coliformes totales y coliformes fecales en muestras de agua del Caon de Doa Petra aplicando el mtodo del nmero ms probable (NMP) de acuerdo con la NOM 112-SSA1-1994.

Mtodo:

1- Disolver la 6.5 gramos de caldo Lactosado (CL) en el 500ml de agua destilada de acuerdo a las instrucciones del fabricante, si es necesario, calentar en parrilla elctrica y usar agitador magntico.

2- Llenar los tubos de ensayo conteniendo el tubo de fermentacin invertido hasta un nivel ligeramente por encima del tubo de fermentacin.

3- Asegurese que los tubos de fermentacin invertidos estn llenos en su totalidad del caldo, invirtiendo sucesivamente los tubos de ensaye.

4- Cerrar los tubos con su tapn de rosca, de forma que no quede muy apretado. Colocar los tubos de ensaye en cristalizadores.

5- Esterilizar los tubos a 121C por 15 minutos a 15 libras de presin. Enfriar y guardar en refrigeracin hasta su uso.

6- A 3 tubos agregar 10 ml de muestra problema, a otros 3 agregar 1 ml y a otros 3 tubos agregar 0.1 ml con pipetas estriles.

7- Incubar los tubos a 35C por 24-48 horas. Leer os tubos a las 24 y 48 horas. Anotar los tubos positivos de cada serie (aquellos tubos que presenten gas o aire dentro del tubo de fermentacion se consideran positivos).

8- Resembrar por medio de asada los tubos positivos en tubos de ensaye con tubos de fermentacin conteniendo caldo EC.(Preparados similar a el CL pero con 18.5 gramos de EC en 500 ml de agua destilada).

9- Incubar los tubos sembrados de caldo EC a 44.5C por 24 horas. Contar los tubos positivos de cada serie (positivo = presencia de gas en el tubo de fermentacin) y anotar los resultados.

10- Por medio de una tabla de nmero mas probable para series de 3 tubos, determinar el numero mas probable de coliformes fecales/100ml de muestra problema.

Resultados:

Discusin:

Nuestros resultados no eran probables, porque la combinacin que nos di en el medio EC no salia en la tabla porque no es posible esa combinacin ya que va de ms concentracin a menos. As que nuestros resultados al final fueron NMP de coliformes totales fue 10ml 3, 1ml 3 y 0.1ml 3 que es igual a >2,400 de C.T. lo cual pasa de la cantidad permitida por la NOM 12-SSA1-1994, ya que esta nos dice que lo permitido para consumo humano es