UNIVERSIDAD TÉCNICA DE MACHALA

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc.Alumno: Valverde Durán Sergio AndrésCurso: 5to Bioquímica y Farmacia Paralelo: A Grupo: N°6Fecha de Elaboración de la Práctica: Lunes, 16 de Junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: Lunes, 23 de Junio del 2014

PRÁCTICA N° 3

Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR METANOL

Animal de Experimentación: Cobayo

Vía de Administración: Vía Intraperitoneal

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta el Cobayo ante la Intoxicación por Metanol2. Observar cuidadosamente las manifestaciones y controlar el tiempo en que actúa el

Metanol3. Conocer mediante pruebas de identificación la presencia de Metanol

MATERIALES: Jeringuilla de 10 ml Soporte universal Vaso de 500 ml Agitador Equipo de disección Panema Tabla de disección Aro metálico Gillette Erlenmeyer de 200 ml Refrigerante o equipo de destilación

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO)

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SUSTANCIAS

KMnO4 H2SO4 H2C2O4 Fushina Cloruro de

Fenilhidracina 4% Nitroprusiato de Sodio NaOH HCl K3[Fe(CN)6] KOH Ácido Cromatropico Ácido Tartárico

PROCEDIMIENTO

1. Tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 2. Administrar 5ml de Metanol por vía intraperitoneal3. Colocar el cobayo en la panema4. Observar las manifestaciones que se presentan y en qué tiempo hasta su muerte.5. Con la ayuda de una Gillette procedemos abrir al cobayo6. Observamos órgano por órgano las repercusiones que provoco el Metanol en el

cobayo7. Colocamos las vísceras (picadas lo más finas posibles) en el recipiente adecuado

(Vaso de precipitación) y trituramos en conjunto con una solución de Ácido Tartárico

8. Una vez ya armado el equipo de destilación los vapores producidos por las vísceras se recogerán en un matraz.

9. Con esta solución realizamos una reacción, poniéndola en contacto en conjunto con una placa de Cobre al rojo vivo hasta que desprenda vapores grises, para así poder obtener el aldehído correspondiente (Metanal) para poder realizar las reacciones de reconocimiento

10. Y con esta solución procedemos a realizar las pruebas de caracterización para Metanol

REACCIONES:

1. Reacción de Schiff:

A una pequeña porción de la muestra, se añade 1ml de permanganato de potasio al 1% después de mezclar se adiciona unas gotas de ácido sulfúrico puro, se deja reposar por tres minutos y agregan algunas gotas de solución saturada de ácido oxálico (hasta que decolore la mezcla); la mezcla adquiere un color madera que se decolora totalmente luego de agregarle nuevamente algunas gotas de ácido sulfúrico puro. Finalmente se le añade 1ml de fushina bisulfatada (Reactivo de Schiff), con lo cual se produce un intenso color violeta en caso de positivo.

“Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis” (PARACELSO)

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Corcho Lámpara de alcohol Perlas de vidrio Balanza Probeta Balón volumétrico Cinta Tubos de ensayo

2. Reacción de Rimini

A 5 ml de destilado se agregan 10 gotas de cloruro de fenilhidracina al 4 %, 4 gotas de solución de nitroprusiato de sodio al 2.5% recién preparado y 1ml de solución de hidróxido de sodio, se produce una coloración azul intensa.

3. Con la Fenilhidracina

En un medio fuertemente acidificado con ácido clorhídrico a una pequeña cantidad de muestra se agrega un pedacito de cloruro de fenilhidracina, 2-4 gotas de solución de ferricianuro de potasio al 5 – 10% y algunas gotas de hidróxido de potasio al 12% se obtiene una coloración rojo grosella.

4. Reacción de Marquis

Se toma 1ml de destilado y se agregan 5ml de ácido sulfúrico concentrado, se agita luego con una solución sulfúrica de morfina (0.2 gr de cloruro de morfina en 10ml de ácido sulfúrico concentrado), se obtiene enseguida o después de algún tiempo un color violeta.

5. Con el Ácido Cromotrópico

Con este ácido en un medio fuertemente acidificado con ácido sulfúrico, el formaldehido produce una coloración roja después de calentarla ligeramente.

6. Reacción de Hehner

Se mezcla una gota de destilado con algunos mililitros de leche, se estratifica con ácido sulfúrico concentrado al que se le han agregado trazas de cloruro férrico (5 gotas de cloruro férrico en 500ml de ácido sulfúrico); en caso positivo, en la zona de contacto se produce un color violeta o azul violeta.

GRÁFICOS: Imagen #1 Imagen #2

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Administrar 5 ml de Metanol al Cobayo.

Colocarlo en la panema y observar sus síntomas hasta su deceso

Imagen #3 Imagen #4

Imagen #5 Imagen #6

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Dadas las circunstancias que la dosis administrada no fue suficiente o a su vez el metanol estaba contaminado fue necesario administrar 15 ml más de Metanol repartido en 3 dosis

Una vez muerto el cobayo lo colocamos sujetado a la tabla de disección

Con la ayuda de una Gillette procedemos a hacer un corte longitudinal a la altura del abdomen para obtener las vísceras y observar las repercusiones del Metanol.

Tener mucho cuidado con derramar el primer líquido que se obtiene al hacer el corte, debido que ese líquido ya forma parte fundamental de los análisis posteriores.

Imagen #7 Imagen #8

Imagen #9 Imagen #10

Imagen #11

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Una vez hecho el corte, analizamos órgano por órgano las repercusiones que causo el Metanol en el cobayo.

Luego de esto preparamos la solución de Ácido tartárico que nos servirá para acidular las vísceras antes de someterlas al equipo de destilación

Una vez trituradas las vísceras con la solución de ácido tartárico, armamos el equipo de destilación y recogemos los vapores

Triturar las vísceras lo más fino posible, en conjunto con la solución de ácido Tartárico

Una vez obtenidos los vapores, realizamos una reacción valiéndonos de una Lámina de Cobre al rojo vivo introduciéndola en el líquido hasta obtener vapores grises para transformar al metanol en metanal, es decir en su aldehído

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO

REACCION #1: REACCIÓN DE SCHIFF

POSITIVO NO CARACTERISTICODebido a que la técnica indica que se formara un color violeta intenso, y en este caso solo se evidencio un cambio de color, razón por la cual se reporta de la manera antes indicada

REACCION #2: REACCIÓN DE RIMINI

POSITIVO NO CARACTERISTICODebido a que la técnica indica que se formara un color azul intenso, y en este caso solo se evidencio un cambio de color, razón por la cual se reporta de la manera antes indicada

REACCION #3: CON LA FENILHIDRACINA

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Una vez obtenidos los vapores, realizamos una reacción valiéndonos de una Lámina de Cobre al rojo vivo introduciéndola en el líquido hasta obtener vapores grises para transformar al metanol en metanal, es decir en su aldehído

Antes de la reacción

Después de la reacción:

Decoloración parcial de la mezcla, no se evidenció la presencia del color violeta

Antes de la reacción

Después de la reacción:

Cambio de color

Antes de la reacción

POSITIVO CARACTERISTICO

Debido a que la reacción indica que se formara un color rojo grosella, y como se puede

observar en la imagen se obtuvo el color esperado, se reportó de la manera antes

mencionada

REACCIÓN #5: CON EL ÁCIDO CROMOTRPICO

NEGATIVO

En esta ocasión el resultado fue negativo, ya que como se puede observar en los gráficos no

se produjo cambio alguno al momento de realizar la reacción y la técnica indica que se

formara una coloración rojiza.

REACCIÓN #6: REACCIÓN DE HEHNER

NEGATIVO

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Después de la reacción:

Color rojo grosella

Antes de la reacción

Después de la reacción:

Mantuvo la misma coloración que se produjo en un principio

Antes de la reacción

Después de la reacción:

Se formaron 2 capas, siendo la capa líquida la que adoptó una coloración naranja, no teniendo nada que ver con lo que dice la técnica

La técnica indica la formación de un anillo violeta en la zona de contacto, como se

puede observar en el grafico se formaron dos capas, siendo la fase liquida de color

naranja, razón por la cual no existió indicio alguno de formación del anillo violeta se

reportó negativo

OBSERVACIONESLa hora de administración de la dosis de Metanol fue a las 08:25 am se le administro 5 ml metanol por vía intraperitoneal, a los 2 minutos de la aplicación, el cobayo presentó pérdida de equilibrio, 1 minuto después presento una leve ceguera, y así a los 6 minutos fue evidente la hipoxia en el cobayo.Pasados 19 minutos de la primera dosis, se le administro 5 ml más de metanol, 5 minutos después de la 2da dosis presento convulsiones, 21 minutos después se le administro una 3era dosis de metanol, viendo que el cobayo no moría, 15 minutos después de le administro una 4ta dosis para así finalmente después de 1:23 horas de la primera administración, es decir a las 09:48am el cobayo murió. Al realizar la disección del cobayo observamos que los órganos se encontraban en su mayoría aumentados de tamaño, y era evidente que cada uno de ellos sufrió quemaduras, porque tenían una coloración oscura característica

CONCLUSIONESAl culmino de esta práctica las reacciones que presento el cobayo ante la intoxicación por Metanol fueron varias entre las cuales cito las siguientes:Pérdida de equilibrio, ceguera, hipoxia, convulsiones, perdida de movilidad motoraLa muerte se produjo tras la administración de un total de 20 ml de Metanol en un tiempo de 1:23 horas con lo que concluimos que el Metanol es muy tóxico debido a las reacciones a las quemaduras en conjunto con el aumento de los órganos que provoco internamenteDentro de las 6 reacciones de reconocimiento que existen para Metanol trabajamos las 5 posteriores, obteniendo los siguientes resultados:Reacción de Schiff: Positivo No característico Reacción de Rimini: Positivo No característicoCon la Fenilhidracina: Positivo Característico Con el Ácido Cromotrópico: NegativoReacción de Hehner: Negativo

El conjunto de pruebas nos da la pauta como Bioquímicos Farmacéuticos para la comprobación si existió o no una intoxicación por Metanol.

RECOMENDACIONES

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La utilización de reactivos en buenas para de esta manera realizar una buena práctica.

Utilizar el equipo de Bioseguridad necesario para evitar cualquier contacto con los tóxicos que estamos utilizando.

Agregar las cantidades estipuladas en la técnica de reactivos, para así obtener un resultado fiable.

CUESTIONARIO

¿Qué es el metanol?

El metanol es fácilmente confundible con el etanol, otro tipo de combustible alternativo, cuyo nombre sólo difiere en una letra del que nos ocupa. Realmente se diferencian mucho el uno del otro siendo el etanol actualmente más práctico que el metanol, por razones que veremos.

La composición química del metanol, también llamado alcohol de madera, es un alcohol obtenido de la fermentación de la madera, siendo más simple que la del etanol. Se usa como anticongelante, disolvente y combustible alternativo.

¿El metanol como combustible?

El aprovechamiento del metanol como combustible conlleva la combinación con gasolina o algún derivado de ésta. Su producción se da sin mucha dificultad, siendo su mayor componente el metano que se puede obtener del gas natural.

El problema del metanol es que es esencialmente inflamable por lo que actualmente, para su uso como combustible, no se recurre a éste de forma pura. Lo que se está haciendo es una especie de mezcla de metanol con etanol, en una proporción del 90% - 10% respectivamente.

¿Cómo se produce el metanol?

El metanol se puede producir de cualquier fuente basada en el carbón. Éstos incluirían: gas natural, carbón, basuras municipales, basuras del gas del terraplén, maderas, y algas marinas.

El  método más usado para su obtención es, sobre todo, a través del  gas natural empleado para crear un gas de síntesis en un tanque (la combinación de monóxido de hidrógeno y de carbono) que se alimenta con un catalizador del níquel para producir el vapor de agua y el metanol. Luego se destila como último paso para eliminar el agua del metanol acabado.

¿Ventajas del metanol?

Las siguientes son algunas ventajas del metanol como combustible alternativo:

Produce menos contaminación ambiental que los combustibles fósiles.

Se pueden obtener a partir de materias y residuos renovables tales como pasto, bagazo de caña de azúcar, hojarasca, etc.

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Su utilización no requiere una gran modificación de los vehículos de combustible fósil. Simplemente basta con cambiar las piezas plásticas del circuito de combustible.

¿Desventajas del metanol?

El metanol tiene algunas desventajas que se intentan solucionar con la búsqueda de nuevas tecnologías. Pero, no obstante, éstas aún son muchas y le hacen perder puestos ante otros combustibles alternativos, a saber:

El metanol es muy tóxico y la exposición intensa puede producir graves problemas a la salud (esto repercute en los trabajadores de las fábricas de este combustible)

El metanol es corrosivo incluso para algunos metales como el aluminio. De ahí que haya que sustituir las piezas de plástico en los coches. Y, por supuesto, hay que evitar el contacto con la piel.

Al ser tan tóxico su manejo en surtidores deben llevar más precaución y preparación por parte de los trabajadores.

GLOSARIO

HIPOXIA._ Es un estado del cuerpo donde se caracteriza por la falta de Oxígeno, es muy común en las montañas.

INTRAPERITONEAL._ Que está localizado en el interior de la cavidad peritoneal. Se dice de la vía de administración de fármacos por la cual estos son introducidos directamente dentro de la cavidad peritoneal.

TÓXICO._ La toxicidad es la capacidad de cualquier sustancia química de producir efectos perjudiciales sobre un ser vivo, al entrar en contacto con él. Tóxico es cualquier sustancia que provoque daño.

METANOL._ El compuesto químico metanol, también conocido como alcohol de madera o alcohol metílico es el alcohol más sencillo. A temperatura ambiente se presenta como un líquido ligero, incoloro, inflamable y tóxico que se emplea como anticongelante, disolvente y combustible. Su fórmula química es C H 3OH (CH4O)

CONVULSIONES._ un síntoma transitorio caracterizado por actividad neuronal en el cerebro que conlleva a hallazgos físicos peculiares como la contracción y distensión repetida y temblorosa de uno o varios músculos de forma brusca y generalmente violenta

CARBÓN ACTIVADO._ Carbón activado es un término genérico que describe una familia de adsorbentes carbonáceos altamente cristalinos y una porosidad interna altamente desarrollada.

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BIBLIOGRAFÍA Y WEBGRAFÍA

http://www.enbuenasmanos.com/articulos/muestra.asp?art=2825 http://es.wikipedia.org/wiki/Metanol http://es.wikipedia.org/wiki/Carb%C3%B3n_activado http://es.wikipedia.org/wiki/Convulsi%C3%B3 n

FIRMA

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Sergio Andrés Valverde Durán

ANEXOS:

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