PRACTICA N°4

EXTRACCIÓN DE ACIDO DESOXIRIBONUCLEICO

I.INTRODUCCION

En la presente práctica hablaremos sobre La extracción del ADN, no es muy conocido el método que se utiliza o la forma en cómo se extrae y se separa el ADN ya sea vegetal o animal para su estudio. Solo conocen la forma de hacerlo la gente que está preparada como los químicos o biólogos, ya que estos tienen los conocimientos necesarios para poder hacerlo correctamente. La extracción y separación del ADN es importante ya que gracias a esto uno puede estudiar el ADN ya sea vegetal o animal para saber ciertas características que se desean conocer como por ejemplo; para conocer si una persona está enferma o algo común que hacen los doctores antes de intervenir a un paciente en quirófano es hacerle un estudio de sangre para ver si anda bien en el número de plaquetas y así poder determinar si lo interviene o no, entre otras cosas más se puede utilizar esta técnica.

Los motivos para la realización de este trabajo es para conocer como es el procedimiento y todo lo que implica realizarlo, además de que tengan conocimiento de cuál es el principal objetivo de hacer esta técnica, además de saber cómo uno puede separar diferentes moléculas como, proteínas, lípidos, carbohidratos y por supuesto ADN, para los estudios que se quieran hacer.

II.OBJETIVOS:

Utilizar un método sencillo de extracción de ADN a partir de células eucariotas poniendo de manifiesto su estructura fibrilar.

Reconocer algunos componentes estructurales del ADN.

III.MARCO TEORICO

EL ADN Es la abreviatura del ácido desoxirribonucleico (en inglés, DNA). Constituye el material genético de los organismos. Es el componente químico primario de los cromosomas y el material del que los genes están formados.

La extracción y separación del ADN, no es muy conocido el método que se utiliza o la forma en cómo se extrae y se separa el ADN ya sea vegetal o animal para su estudio. Solo conocen la forma de hacerlo la gente que está preparada como los químicos o biólogos, ya que estos tienen los conocimientos necesarios para poder hacerlo correctamente. La extracción y separación del ADN es importante ya que gracias a esto uno puede estudiar el ADN ya sea vegetal o animal para saber ciertas características que se desean conocer como por ejemplo; para conocer si una persona está enferma o algo común que hacen los doctores antes de intervenir a un paciente en quirófano es hacerle un estudio de sangre para ver si anda bien en el número de plaquetas y así poder determinar si lo interviene o no, entre otras cosas más se puede utilizar esta técnica.

IV.MATERIALESMuestras de origen vegetal y animal

Solución de lisisCloruro de sodio

Acetato de sodioSolución salina

citratadaEtanol 96%

REACTIVO DE VIAL AZUL DE METILENOTUBOS DE ENSAYO 16X150MM

MORTERO Y PILON

TIJERA

MECHEROEMBUDO

Beakers 20ml,500ml

PROPIPETAS

GASAS 10X15CM

GRADILLA PARA TUBOS

PINZAS DE MADERAPIPETA

V. PROCEDIMIENTO.

A. Extracción de ADN:

El ADN en las células eucariotas se encuentra en el núcleo disperso y muy replegado unido a proteínas para formar la cromatina. Para extraerlo se requiere homogenizar la muestra para proceder al lisado de membranas , la liberación de ADN el retiro de proteínas asociadas a dicha macromolécula y su posterior obtención bajo la forma de fibras . 1. Colocar en el mortero la muestra ( 3 fresas sin hojas y/o plátano 3 cm/ ) e incorporar 2 ml de NaCl 0.9% triturar por 1 minuto. 2. Añadir 10ml de la solución de lisis y seguir triturando hasta obtener una masa homogénea y semilíquida (aprox. 5minutos). 3. Incluir a la preparación 2ml de acetato de sodio, mezclar, para luego dejar reposar por 5 minutos. 4..Filtrar la preparación en untubo de 16x150 con la ayuda de un embudo cubierto con gasa. 5. Transvasar 5-8ml d el filtrado a un beaker pequeño e incorporar 2 volúmenes de etanol frio por las paredes e introducir rápidamente una bagueta delgada y girar sobre su mismo eje a fin para recuperar el ADN bajo la forma de fibras y colocarla en un tubo 16x150mm conteniendo 1 ml de solución salido citratada para su resuspención y uso en la parte experimental B. 6. Obtener más fibra de ADN para reconocer el carácter ácido, para ello dejar caer en las hebras el colorante básico como el azul de metileno.

B. Identificación de Pentosas (reacción de Bial)

Las pentosas en solución ácida se deshidratan dando furfural que al reaccionar con el orcinol en presencia de FeCl3, dan un producto de condensación de color verde-azulado 1. Colocar 1 ml de ADN en un tubo 16x150 y en otro tubo de 16x150 colocar 1 ml agua destilada. 2. Agregar 3 ml de Reactivo de Bial a cada tubo; calentar cuidadosamente cada tubo en la llama de un mechero hasta que la solución comience a hervir. 3. Obsérvese y anótese el color que aparece en cada tubo de ensayo.

VI.CONCLUSIONES

En esta práctica se logro el objetivo principal y planteado que es la extracción del ADN siguiendo una serie de pasos para poder lograrlo, así se pudo separar de otros componentes como proteínas, lípidos, carbohidratos y se pudo distinguir cual era cual y el resultado final fue la extracción y separación del ADN que se obtuvo en una forma de pastilla y se guardo para que después se utilice pero primero se purifique para que no quede ningún resto de residuos que no sean ADN. Esta práctica fue un éxito ya que se siguió paso a paso como se debe de extraer y separar el ADN y por qué se hizo en presencia de una persona capacitada y que fue verificando cada uno de los pasos y resultados que se obtuvieron.

VII.CUESTIONARIO

1.¿Cual es la composición básica del ADN?

Químicamente, el ADN está formado por unas moléculas que son los nucleótidos. Existen cuatro tipos distintos: A - T- G - C. Se van uniendo en larguísimas cadenas (varios miles)

El ADN se organiza en dos hebras paralelas y complementarias, ya que A sólo se une a la T y la G a la C. A su vez se enrolla formando una "doble hélice".

2.¿Qué proteína esta asociada al ADN?

Las proteínas asociadas al ADN se conocen colectivamente con el nombre de histonas. Son polipéptidos relativamente cortos cargados positivamente (básicos) y por lo tanto son atraídos por las cargas negativas del ADN (ácido)  .Además encontramos las bases nitrogenadas (adenina,timina,citosina),fosfato y la desoxirribosa

3.¿Por qué el ADN absorbe luz uv a 260 nm?

Por que la absorción es producida por un DNA de cadena doble,las bases nitrogenadas que forman parte de la estructura del DNA tienen la propiedad de absorber luz UV con un máximo de absorción de 260 nm

ViII.BIBLIOGRAFIA:

Ácido Desoxirribonucleico

http://www.educa.madrid.org/web/ies.antoniogala.mostoles/dep_bio_archivos/EXTRACCION_DE_ADN.pdf.

Extracción de ADN

http://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-adn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml