PRÁCTICA NO.1 USO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO COMPUESTO O VERTICAL.

Introducción. El microscopio es un instrumento especialmente diseñado para el estudio de objetos tan pequeños que no pueden ser examinados a simple vista. El microscopio actúa como una extensión del sentido de la vista, permitiendo el acercamiento al mundo de las cosas pequeñas que habían permanecido invisibles antes de la invención de este aparato.Sin ayuda , el ojo humano no puede distinguir objetos menores de 0.1mm.En nuestro trabajo con los seres vivos encontraremos diferentes tipos de microscopios desde los estereoscópicos de disección que aumenta de 40 a 400 veces el tamaño del organismo, hasta el microscopio electrónico que puede aumentar las imágenes más de 100000 veces. Generalmente trabajamos con los microscopios compuestos o verticales de tipo estudiantil que aumentan de 100 a 1500 veces la imagen.El microscopio es una de las herramientas fundamentales en la investigación biológica, médica, agropecuaria, clínica, entre otras; en la actualidad se ha alcanzado tal perfeccionamiento en su construcción, que el trabajo se realiza con comodidad y fácilmente.

Fundamentación. Tipos de microscopios.

a) Microscopio estereoscópico.El microscopio estereoscópico, también conocido como microscopio de disección o estereomicroscopio, en realidad se trata de un microscopio compuesto doble, que es binocular estereoscópico porque en estos aparatos las imágenes conservan los relieves que pueden observarse simultáneamente con los dos ojos.El aumento que normalmente se obtiene es poco, pero con aditamentos especiales como el aumento zoom, se llegan a alcanzar aumentos de 200 diámetros en promedio.A este microscopio también se le conoce como microscopio de disección, porque no sólo se utiliza para observar cierto tipo de objetos. sino que también pueden efectuarse micro disecciones sobre la platina, las cuales controla la persona observando por los oculares.Erróneamente algunas personas llaman al estereomicroscopio “lupa binocular”, porque este aparato es un microscopio compuesto que tiene lentes oculares y lentes objetivos.b)Microscopio óptico.Un microscopio óptico compuesto moderno tiene una serie de lentes y utiliza luz visible como fuente de iluminación. Con el microscopio óptico compuesto es posible examinar muestras muy pequeñas además de algunos de sus detalles más finos. Un conjunto de lentes finamente talladas forma una imagen focal definida cuyo tamaño es muchas veces mayor que el de la muestra en sí. Este aumento se logra cuando los rayos luminosos procedentes de la fuente de luz pasan a través de un condensador, que tiene lentes que dirigen los rayos de luz a través de la muestra. Desde aquí los rayos pasan al interior de la lente objetivo, la lente más próxima a la muestra. La imagen de la muestra vuelve a ser ampliada por el ocular,El aumento total de la imagen se calcula mediante la multiplicación del aumento (potencia) del objetivo por el aumento (potencia) del ocular. La mayoría de los microscopios utilizados en microbiología poseen varias lentes objetivo, que proporcionan 10 x (bajo aumento), 40 x (gran aumento) y 100 x (deinmersión en aceite, que se describe brevemente). La mayoría de los oculares amplían la imagen 10 veces. Al multiplicar el aumento de un objetivo específico por el del ocular se observa que el aumento total puede ser de 100 x con bajo aumento, de 400 x con gran aumento y de 1 000 x con inmersión en aceite. Algunos microscopios ópticos compuestos pueden conseguir un aumento de 2 000 x con el objetivo de inmersión.

La resolución (también llamada poder de resolución), es la capacidad de las lentes de distinguir detalles finos o, más específicamente, la capacidad de distinguir una distancia separada determinada entre dos puntos. Por ejemplo, si un microscopio tiene un poder de resolución de 0,4 nm es capa: de distinguir dos puntos como objetos separados si están al menos a 0,4 nm de distancia. Un principio general de lamicroscopía es que cuanto más corta sea la longitud de onda de la luz utilizada en el instrumento mayor será la resolución. La luz: blanca utilizada en el microscopio óptico compuesto posee una longitud de onda relativamente grande y no puede resolver estructuras de menos de 0,2 um. Este hecho y otras consideraciones prácticas limitan el aumento logrado por los mejores microscopios ópticas compuestos a casi 2 000 X. Con fines comparativos, los microscopios de van Leeuwenhoek tenían una resolución de 1um.Para obtener una imagen clara con detalles precisos en el microscopio óptico compuesto las muestras deben teñirse para que contrasten nítidamente con el medio que las rodea, es decir con la sustancia en la cual están suspendidas. Para lograr ese contraste es necesario cambiar el índice de refracción de la muestra con respecto al del medio. El índice de refracción es una medida do la capacidad de un medio de producir deflexión de la luz. Se puede cambiar el índice de refracción de las muestras al teñirlas. procedimiento que se analizará más adelante. Los rayos de luz atraviesan en línea recta un medio simple. Tras la coloración, cuando los rayos de luz atraviesan dos materiales (la muestra y el medio que la rodea) con distintos índices de refracción, los rayos cambian la dirección (se refractan) de un trayecto recto mediante la deflexión o el cambio de un ángulo en el límite entre los materiales y aumentan el contraste entre la muestra y el medio. Cuando los rayos de luz se alejan de la muestra, se dispersan y entran en las lentes oculares; por consiguiente aumenta el tamaño de Ia imagen.Para lograr un gran aumento ( 1 OOO x) con buena resolución el objetivo debe ser pequeño. Aunque es deseable que la luz que atraviese la muestra y el medio se refracte de forma diferente, no deben perderse rayos de luz que Hayan atravesado la muestra teñida. Para conservar la dirección de los rayos de luz en el máximo aumento se utiliza aceite de inmersión entre el portaobjetos y la lente del objetivo de inmersión. El aceite de inmersión tiene el mismo índice de refracción que el vidrio, de modo que el aceite se convierte en parte de la óptica del microscopio. J\ mentís que se utilice aceite de inmersión los rayo* de luz se refractan cuando llegan desde lamuestra al aire y el objetivo deberá tener mayor diámetro para capturar la mayoría de ellos. El aceite tiene el mismo efecto que un aumento del diámetro del objetivo; por consiguiente, mejora el poder de resolución de las lentes. Si no se utiliza aceite Je inmersión con un objetivo de inmersión la imagen se coma borrosa, con mala resolución.En las condiciones habituales de trabajo el campo de visión de un microscopio óptico está iluminado de forma brillante. Cuando se enfoca la luz el condensador produce una ilumina-ción brillante (campo claro).No siempre es deseable teñir una muestra. Sin embargo, una célula no teñida tiene poco contraste con su entorno y por consiguiente es difícil de visualizar. Las células no teñidas se observan con más facilidad mediante los microscopios compuestos modificados.c) Microscopios de contraste de fases.Los microorganismos también pueden observarse con un microscopio de contraste de fase, que es especialmente útil porque permite la observación detallada de estructuras internas en los microorganismos vivos. Además, no es necesario fijar (adherir los microbios al portaobjeto) ni teñir la muestra, procedimientos que podrían distorsionar o destruir a los microorganismos.El principio de la microscopía de contraste de fase se basa en la naturaleza ondulatoria de los rayos de luz y en el hecho de que esos rayos pueden estar en fase (sus picos y sus valles coinciden) o fuera de fase. Si el pico de la onda de los rayos de luz de una fuente coincide

con el pico de la onda de los rayos de luz de otra fuente, los rayos interactúan para producir un reforzamiento (brillantez relativa). En cambio, si el pico de la onda de una fuente de luz coincide con la depresión de la onda de otra fuente de luz, los rayos interactúan para producir interferencia (oscuridad relativa). En un microscopio de contraste de fase un conjunto de rayos luminosos proviene directamente de la fuente de luz. El otro conjunto proviene de la luz que se refleja o difracta por una estructura particular de la muestra. (La difracción es la dispersión de los rayos Je luz cuando los tocan el borde de una muestra. Los rayos difractados se separan de los rayos paralelos de luz que atraviesan la muestra.) Cuando los dos conjuntos de rayos de luz -rayos directos y rayos reflejados o difractados- se unen forman una imagen de la muestra en el ocular, que contiene áreas que van desde relativamente luminosas (en fase) a matices de gris hasta el negro (fuera de fase). En la microscopía de contraste de fases las estructuras internas de una célula se definen con mayor claridad.d)Microscopio electrónico.Los objetos de menos de 0.2 Um, como los virus o las estructuras celulares internas, deben observarse con un microscopio electrónico, en el que se utiliza un haz de electrones en lugar de luz; los electrones libres viajan en formo de ondas. El poder de resolución del microscopio electrónico es mucho mayor que el de los otros microscopios descritos debido a que la longitud de onda de los electrones es alrededor de 100000 veces menor que la de la luz visible. Por ende, los microscopios electrónicos se utilizan para examinar estructuras demasiado pequeñas para ser discriminadas con la resolución del microscopio óptico. Las imágenes producidas por los microscopios electrónicos siempre son negras y blancas, si bien pueden colorearse de forma artificial para acentuar ciertos detalles.En lugar de lentes de vidrio el microscopio electrónico posee lentes electromagnéticas para enfocar un haz de electrones sobre una muestra. Hay dos tipos de microscopios electrónicos: el microscopio electrónico de transmisión y el microscopio electrónico de barrido.

Diferencia entre el microscopio electrónico de barrido y el de transmisión.Para comenzar primero tendríamos que definir a ambos.a)Microscopio electrónico de transmisión.En el microscopio electrónico de transmisión (MET) un hazde electrones precisamente enfocado proveniente de un cañón de electrones atraviesa un corte ultradelgado especialmente preparado de la muestra. El haz se enfoca sobre un área pequeña de la muestra mediante un condensador electromagnético que cumple más o menos la misma función que el condensador del microscopio óptico, es decir dirige el ha: de electrones en una línea recta para iluminar la muestra.El microscopio electrónico contiene lentes electromagnéticas para controlar la intensidad del haz de electrones, el enfoque y los aumentos. En lugar de colocar la muestra en un portaobjetos de vidrio» como en el microscopio óptico, suele utilizarse una rejilla de cobre. El ha; de electrones atraviesa primero la muestra y después las lentes electromagnéticas del objetivo, con lo cual aumenta el tamaño de la imagen. Por último, los electrones son enfocados por las lentes electromagnéticas proyectoras (en lugar de las del ocular del microscopio óptico) sobre una pantalla fluorescente o una placa fotográfica. La imagen final, denominada microfotografía electrónica de transmisión, aparece en forma de zonas claras y oscuras de acuerdo con el número de electrones absorbidos por las diversas áreas de la muestra.En la práctica el microscopio electrónico de transmisión puede resolver objetos separados por una distancia tan corta como 2,5 nm y suele ampliarlos de 10000 a 100000 x. Dado que la mayoría de las muestras microscópicas son muy delgadas, el contraste entre sus ultraestructuras y el fondo es débil. El contraste se puede aumentar de forma notoria mediante el empleo de una “tinción” que absorba electrones y produzca una imagen más oscura en la región teñida. Por lo general se utilizan sales de metales pesados como plomo,

osmio, tungsteno o uranio. Estos metales pueden fijarse sobre la muestra (tinción positiva) o utilizarse para aumentar la opacidad a los electrones del campo circundante (tinción negativa). Esta última es útil para el estudio de muestras muy pequeñas, como partículas virales, flagelos bacterianos y moléculas de proteína.Además de las tinciones positivas o negativas, la observación de los microorganismos puede valerse de una técnica denominada proyección Je sombras. Este procedimiento consiste en el rociado de la muestra con un metal pesado como platino u oro que se aplican desde un lado y con una angulación de alrededor de 45° con respecto a la muestra. El metal se acumula sobre lado de la aplicación y la superficie contraria sin depósito metálico produce una claridad que se distribuye como un sombreado. El efecto de un aspecto tridimensional a la muestra y una idea general de su tamaño y forma.La microscopía electrónica de transmisión tiene una alta resolución y es extremadamente útil para examinar capas distintas de una muestra. No obstante, presenta ciertas desventajas. Dado que los electrones tienen un poder de penetración limitado, sólo pueden estudiarse con eficacia corres muy delgados de la muestra (de alrededor de 100 nm). Por consiguiente, la muestra no tiene un aspecto tridimensional. Además, los preparados deben ser fijados, deshidratados y observados en condiciones de vacío estricto. Estos tratamientos no sólo destruyen la muestra sino que también provocan algo de contracción y distorsión, en ocasiones de tal magnitud que pueden aparentar estructuras adicionales en una célula preparada. Las estructuras que aparecen como consecuencia del método de preparación se denominan artificios (“artefactos”).b)Microscopio electrónico de barrido.El microscopio electrónico de barrido (MEB) soluciona el problema de los cortes asociado con la microscopía electrónica de transmisión y proporciona imágenes tridimensionales sorprendentes de las muestras. En la microscopía electrónica de barrido un cañón de electrones produce un haz de electrones enfocado con precisión, denominado haz primario. Estos electrones atraviesan lentes electromagnéticas y son dirigidos sobre la superficie de la muestra. El haz primario de electrones elimina electrones de la superficie externa de la muestra; éstos, emitidos en forma secundaria, son transmitidos hasta un colector, luego amplificados y utilizados para formar una imagen sobre una pantalla o sobre una placa fotográfica. La imagen se denomina microfotografíá electrónica de barrido. Este microscopio, que es especialmente útil para estudiar las estructuras superficiales de las células intactas y de los virus, en la práctica puede discriminar objetos separados por una distancia de apenas 20 nm y suele producir un aumento de 1 000 a 10 (XX) x.

Diferencias entre poder de resolución y aumento en el microscopio.La diferencia es que, el aumento de un instrumento óptico permite conocer hasta cuantas veces más grande se observar un objeto dado, mientras el poder de resolución hace referencia a la capacidad del instrumento óptico para diferenciar dos puntos entre si; es decir, un instrumento puede aumentar una imagen sin que en ella puedas reconocer figura alguna (una imagen aumentada pero distorsionada), pero si a ello se le agrega cierto poder de resolución, el instrumento además de aumentar un objeto, permite verlo con mucha nitidez y claridad.

Técnicas para hacer preparaciones microscópicas.Las siguientes preparaciones responden a una técnica más elemental:Montajes al aire: El material para observar se coloca directamente sobre el porta y se tapa con el cubreobjetos sin ningún otro requisito, o bien, si queremos hacerlo con más cuidado, se colocan cuatro gotas de bálsamo en cada una de las esquinas del cubreobjetos para facilitar su estabilidad sobre el porta.Montajes con agua o glicerina: En muchos casos el material puede colocarse directamente con una gota de agua o de glicerina, según el tipo de material que se trate, y a continuación se pasa a la observación.

No creemos necesario insistir en que ninguna de estas preparaciones puede ser considerada como permanente sino tan sólo como elaborada para el momento concreto de la práctica.EjemplosProponemos algunos ejemplos de material susceptible de ser utilizado en observaciones realizadas con la técnica elemental aquí explicada.Montajes al aire

• Tricomas vegetales: Los tejidos de las hojas están recubiertos de diferentes tipos de pilosidades. Rascando suavemente las hojas aterciopeladas de algunas plantas, podemos obtener ejemplos diversos de pilos-dad vegetal (por ejemplo olivo, ortiga o menta).-Plumas de pájaro: Pequeñas secciones de plumas de pájaro proporcionan interesantes observaciones de estructuras finas muy regulares Características similares presenta la observación de las escamas de las alas de una mariposa.-Pelos o fibras animales y vegetales de todo tipo: Podemos observar cabellos humanos, pelos de animales, fibras de algodón o lino, fibras artificiales...Para la observación de las estructuras animales resulta beneficioso dejarlas previamente en KOH al 1% durante 24 horas y aclararlas después durante 30m. en agua. Se pueden observar así mismo cortes muy finos de madera obtenidos de virutas.

• Piezas de insectos: Una gran cantidad de piezas quitinosas de insectos pueden proporcionar la ocasión de realizar observaciones muy curiosas: piezas alares, bucales, genitales, de las extremidades, de las antenas, etc.Montajes con una gota de aguaEn una gota de agua se pueden observar diatomeas, protozoos diversos obtenidos en aguas «sucias», algas sencillas, hojitas de Elodea, esporangios o esporas de helechos u hongos, polen (especialmente de pino). Podemos observar también epitelios de hojas vegetales, cortes finos de corcho, etc.Montajes con glicerinaCon una gota de glicerina pueden observarse hifas y esporangios de los hongos (los mohos en particular). La misma técnica puede utilizarse para la observación de los cristales de oxalato de calcio que se encuentran en las hojas externas de los bulbos de la cebolla y del ajo. En este caso conviene utilizar las hojas externas del bulbo, siempre que sean jóvenes.La mayor parte de las preparaciones microscópicas necesitan procedimientos detallados de elaboración, de los cuales el primero consiste en la obtención de un corte lo suficientemente delgado como para que permita ser atravesado por la luzLa obtención de cortes histológicos supone la utilización de técnicas que en ocasiones resultan ser de alta precisión. Nosotros proponemos tan sólo un sencillo ejercicio de obtención de cortes vegetales con la navaja histológica: esta experiencia representa la manipulación técnica de menor dificultad pero, a la vez, es suficiente para practicar el tema propuesto.

• El material que debemos cortar (tallos, raíces, hojas, etc.) se ha de incluir o englobar en alguna sustancia consistente y no excesivamente dura, que nos permita obtener una «pieza» de tamaño y consistencia adecuados para ser cortada con una navaja histológica. Las sustancia idóneas para englobar el material de corte son. o bien la médula de saúco (en la actualidad difícil de obtener), o zanahoria, rábano, patata, etc. Si queremos cortar una estructura más o menos cilíndrica (talo, raíz) prepararemos dos piezas de la sustancia englobante con un canalón central; si se trata de una hoja, podemos preparar una especie de «bocadillo».La «pieza» así obtenida se puede ir dividiendo en cortes muy linos con la navaja histológica (una navaja de afeitar muy afilada). Lo más correcto es utilizar un micrótomo de mano o micrótomo de Ranvier, pequeño instrumento dotado de un dispositivo central que al desplazarse hace aparecer la pieza a cortar en el centro de una superficie plana sobre la que

se desplaza en sentido inclinado la navaja para hacer el corte. Al deslizar a navaja por encima de la superficie del micrótomo es preciso lubrificar ambas con alcohol de 70° (se pasa un pequeño pincel por las superficies citadas). Los cortes obtenidos se dejan en un vidrio de reloj con agua, y se manejan con la ayuda de un pincel fino. Con estos cortes se puede pasar a la observación de las estructuras que nos interesen, o bien, pasar directamente al proceso de tinción.

• Resulta conveniente resaltar que además de la observación de los cortes vegetales del tallo, hojas, etc. puede aprovecharse la ocasión para observar también los cortes del material englobante (médula, zanahoria, patata, etc.) que presentan así mismo estructuras vegetales. Si el englobante es médula de saúco, podremos notar que en las membranas celulósicas se distinguen con claridad las punteaduras. Objetivo.Lograr que el alumno reconozca el uso. manejo y conservación del microscopio como un instrumento necesario de trabajo y con el cual puede lograr adquirir conocimientos trascendentales en su vida profesionalMaterial.Microscopio compuesto.Papel periódico. Portaobjetos. Cubreobjetos. TijerasHojas blancas LápizProcedimiento.Preparativos para el uso del microscopio1.-Coloque el objetivo de menor aumento en su posición de enfoque. Usted escuchara y sentirá un “clic“ cuando este encaje en su sitio.2.-Presione el botón de encendido de la fuente do luz de su microscopio. La mayoría de los microscopios están equipados con un diafragma de iris para regular la cantidad de luz. Obtenga la cantidad correcta de luz para visualizar el objetivo. Algunos materiales se observan mejor con la luz opaca; otros, con la luz brillante3.- Cerciórese que las lentes estén limpias. Pata su limpieza utilice solamente un paño de algodón 100% natural y agua destilada.

Práctica En El Uso Del Microscopio.1.-Recorte la letra "H" colóquela en un porta objetos limpio encima de una gota de agua Esto se llama montaje húmedo.2.-Espere un momento antes de colocar el cubre objetos, para que el papel se moje Mantenga el cubre objetos en un ángulo de 45" respecto al porta objetos, entonces bájelo lentamente Una ligera presión eliminará las burbujas de aire que pudieran haber quedado.3.- Coloque el porta objetos sobre la platina y sujételo con las pinzas de ajusto Con los tomillos de la platina (mandos coaxiales X Y), mueva el porta objeto de tal manera que la letra quede en el centro del orificio de la platina Cerciórese que el objetivo do menor aumento esté colocado en posición de enfoque. Viendo por un lado de la platina, use el tomillo macrométrico (mando coaxial macrométrico) para bajar lentamente hasta que el objetivo llegue al tope o hasta que el objetivo esté aproximacamente a dos mm del cubre objetos4.-Mirando a través de los oculares, suba el objetivo con el tomillo macrométrico (mando coaxial macrométrico) hasta que la letra esté enfocada Use el tornillo micrometrico (mando coaxial micrometrico) para afinar el enfoque. Compare cómo se ve la letra a través del microscopio y a simple vista.5.-Recorte la letra “A” y haga un montaje húmedo para examinarla con menor aumento.

Describa la posición de la letra tal como usted la ve a simple vista y a través del microscopio.6.-lgualmente haga un montaje húmedo de la letra “P”, describa la posición de la letra. Mire a través del ocular y mueva el porta objetos hacia delante lentamente7.-¿Que parece sucederle a la letra?, Ahora mueva el porta objetos a la derecha ¿En que dirección se desplaza la imagen?, ¿Que puede decir acerca de la posición relativa y el movimiento de los objetos cuando estos se ven a través del microscopio compuesto?8.- Haga un montaje húmedo de dos hilos de cabello de distinto color cruzados uno sobre otro. Obsérvelos con el objetivo de menor aumento y describa su apariencia. Coloque el porta objetos de modo que el cruzamiento de los cabellos quede en el centro del campo Gire el revolver hasta que el objetivo de mayor aumento esté en posición de enfoque9.- El mejor medio para llevar un registro preciso de lo que se ve a través del microscopio es la fotografía. Sin embargo, un medio más simple es la elaboración cuidadosa de un esquema a lápiz (no use bolígrafo o tinta). Haga un dibujo de cada una de las letras tal como usted la ve con el objetivo de menor aumento (10x) Haga lo mismo con los cabellos cruzados tal como usted los ve bajo el objetivo de mayor aumento10.- Si el tiempo lo permite, examine otros materiales Describa la apariencia de cada uno.

Resultados.Como resultado de la primera instrucción se obtuvo que al observar las letras del periódico, a éstas era posible observarles los trazos de impresión. Parecidos a pincelazos color negro que formaban toda la letra, del mismo modo se pudieron observar que las letras poseían pequeñas manchas de otros colores.Al mover el porta objetos con los montajes, era posible observar toda la tinta que constituía a las letras. Es preciso decir que al mover los objetos en el microscopio, éstos con un ligero movimiento se veían ampliamente desplazados, lo que nos indica que en el microscopio un ligero movimiento nos hace mover considerablemente el porta objetos.Al observar a los cabellos notamos a gran detalle el grueso y color de cada uno de ellos, pudiendo hacer una mejor comparación al observar la parte en la cuál ambos se cruzaban. Uno de ellos era más ancho y de color más claro(castaño) mientras que el otro era muy delgado y de un color más intenso que el anterior mencionado. Al observarlos con el objetivo de mayor aumento fue posible observar a mayor detalle la textura de cada cabello.

Observaciones.Al trabajar la parte de las letras esto fue lo observado. En general con el objetivo 10x pudimos observar claramente los trazos de tinta que conformaban a la letra.Cuando se hacían pequeños movimientos para mover a las letras, éstos eran significativos, pues se desplazaban bastante, se requirió de más precisión. Letra H.

Letra a.

Letra P.

Cabellos. Al observar los cabellos pudimos distinguir el grueso y color de cada uno. Uno de ellos era más grueso y de color más claro, mientras el otro era más oscuro y delgado.Al observarlos con el mayor de los objetivos pudimos llegar a distinguir la textura de los cabellos.

Nombres de las partes de microscopio compuesto.

Nombre de las partes del microscopio estereoscópico.

1.- Oculares2.- Tubo binocular3.- Soporte del microscopio.4.- Tornillo moleteado para bloqueo del tubo.5.- Control de brillo6.- Encendido / Apagado.7.- Tornillo micrométrico. 8.- Tornillo macrométrico.9.- Mando coaxial X.10.- Mando coaxial Y.11.- Diafragma de campo.12.- Condensador portador13.- Palanca para el ajuste de diafragma de apertura.14.- Condensador15.- Centrado tornillo del condensador.16.- Platina mecánica con porta objetos17.- Objetivo18.- Revolver.

1.- Objetivo.2.- Oculares.3.- Tubo.4.- Tornillo micrométrico.5.- Tornillo macrométrico. 6.- Regulador de luz.7.- Objetivos.8.- Condensador.9.- Platina.10.- Fuente de iluminación.

Cuestionario.

1.-¿Cómo se determina el grado de aumento con que se observa un objeto al microscopio?R= En términos generales se define al grado de aumento como la relación entre el diámetro aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto. Esto quiere decir que si el microscopio aumenta 100 diámetros un objeto, la imagen que estamos viendo es 100 veces mayor linealmente que el tamaño real del objeto (la superficie de la imagen será 1002, es decir 10.000 veces mayor). Para calcular el aumento que está proporcionando un microscopio, basta multiplicar los aumentos respectivos debidos al objetivo y el ocular empleados.2.¿Qué procedimiento seguiría usted para enfocar un objeto al microscopio?R= Primero me aseguraría de tener bien colocado el porta objetos con la muestra, rotaría el revolver para tener el más pequeño de los objetivos, lo siguiente sería subir la platina hasta el tope, (todo esto habiéndose asegurado desde antes que la luz esté encendida y regularla en el diafragma) lo siguiente sería bajarla poco a poco utilizando el tornillo macrométrico observando por los oculares hasta comenzar a notar pigmentos de la muestra, después utilizaría el tornillo micrométrico hasta tener el enfoque correcto. Movería la muestra con los mandos coaxiales de ser necesario.3.¿Cómo ajusta la luz para obtener una buena imagen?R= La luz la ajustaría en el diafragma a un punto no tan grande, pues no es necesario abrir todo el diafragma para tener buena iluminación, ya que si hacemos esto la iluminación es excesiva. Procuraría dejar solo un punto para iluminar la sección de interés.4.¿Por qué es mas fácil romper la lamina con el objetivo de mayor aumento que con el de menor aumento?R= Es más fácil porque el objetivo de menor aumento, aunque subamos la platina al máximo no alcanza a pegar con el porta objetos, mientras que con el más grande, si no se calcula bien, es posible romperlo.5. Realice una investigación sobre los tipos de microscopios que existen y la utilización de los mismos(En el fundamento).

Conclusiones.

El microscopio ha sido uno de los avances científicos mas importantes del hombre porque ha significado un gran avance para la ciencia y hoy en día lo sigue siendo, por que gracias a el se investigan y desarrollan muchas ciencias. En esta práctica se han aprendido las partes del microscopio su correcto uso, manipulación y mantenimiento. También se comprendió que sin este aparato seria imposible visualizar los microorganismos a simple vista, es fundamental en el avance de la citología, citogenética, microbiología, fitopatología virología, bacteriología, parasitología y demás ciencias que se trabaja con microorganismos.

Bibliografía.

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Gama Fuertes María de los Ángeles. Biología 1. Editorial Pearson Educación. México 2004. Pp. 33.

Ramón Ma. Nogués. La observación de los seres vivos. Editorial Limusa. México 1975. P.p. 13-19.