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Pol I Pol II pol III
gen pol A polB polC
PM (kDa) 103 90 130
mol/cél. 400 100 10
Vmax 20 nt/s 3 nt/s 750 nt/s
3' exonucl. + + +
5' exonucl + no no
procesiv. 3-200 10000 500000
DNA polimerasas en E. coli
DNA polimerasa I
La DNA pol I rellena los espacios entre fragmentos de Okazaki
Utiliza actividad exonucleasa 5’3’ para eliminar cebador de RNA
DNA ligasa
La replicación causa superenrollamiento
La topoisomerasa Girasa alivia
la tensión
Terminación de la replicación
Topoisomerasa IV
participa en la
terminación de la
replicación de
moléculas circulares.
Cómo se asegura la célula que su DNA se
replica solo una vez?
Patrones de metilación del DNA
Las enzimas Dam metilasas regulan el inicio en el origen de replicación
ADN polimerasas en células eucariontes
Replicativas
Reparativas
Los cromosomas eucariontes tienen múltiples
origenes de replicación
Cantidad de DNA, pb/ cél. 4.2 106 109
Velocidad avance horquilla mm/min 30 3
Velocidad de replicación, nt / seg 750 60-90
Número de orígenes de replicación
/ célula 1 103-104
Tiempo 1 replicación genómica (hs) 0.27 8
Tiempo 1 división celular (hs) 0.33 24
E. coli Cél humanas
Replicación del ADN:
E. coli vs. células humanas
1. Formación de un complejo pre-replicativo (comienza a finales de la fase M)
Activación de los orígenes de replicación en
eucariontes
CycA/Cdk
2. Activación de pre-RC en el punto de control G1/S
Hebra Retrasada
Topoisomerasa
DNA ligasa I
Rnasa HEN 1
Primasa
CDC 45
MCM 2 Helicasa
Topoisomerasa
Cebador ARN
PCNA
RFC
PCNA
RFC
Hebra Guía
DNA pol
DNA pol
RPA (SSB)
Horquilla de replicación en eucariontes
DNA pol
DNA pol : elonga cebadores de ARN DNA pol : elonga la cadena continua DNA pol : elonga la cadena discontinua
Re-formación de cromatina durante la
replicación
Hay complejos encargados de posicionar
los nucleosomas en las cadenas hijas
Consultar el Artículo3 en el AMYD
La modificación de histonas en los
nucleosomas se hereda a las cadenas
hijas (herencia epigenética)
Existen varios modelos propuestos para la transmisión de marcas epigenéticas en la cromatina
Se heredan patrones de metilación de citosinas en el ADN
Se heredan patrones de acetilación y metilación de las histonas
CMC= Chromatin Modifying Complex
Planta de A. thaliana defectuosa en
metilación del DNA (Zhang lab, University of Georgia)
¿Cómo completar la replicación de genomas lineales?
Cada uno de los dos
extremos 5’ en cada
cromosoma queda
incompleto al remover el
último cebador de RNA
3’ 5’
Solución: Elongar los telómeros
Telomerasa
Las células controlan el tamaño de su telómero