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Tesis de grado para optar por el titulo de Médico Veterinario, 2013.
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UNIVERSIDAD DE LA SALLE
Facultad de Ciencias Agropecuarias
Programa de Medicina Veterinaria
DETERMINACIÓN DE LA PREVALENCIA SEROLOGICA DE Brucella abortus, Toxoplasma gondii, Sarcocystis spp Y LOS FACTORES DE RIESGO ASOCIADOS EN ESTUDIANTES
DE MEDICINA VETERINARIA DE LA UNIVERSIDAD DE LA SALLE
Trabajo de Grado
JUAN CAMILO ÁVILA ZAMORA
LUIS FERNANDO FORERO PEÑA
BOGOTÁ, COLOMBIA
2012
UNIVERSIDAD DE LA SALLE
Facultad de Ciencias Agropecuarias
Programa de Medicina Veterinaria
DETERMINACIÓN DE LA PREVALENCIA SEROLOGICA DE Brucella abortus, Toxoplasma gondii, Sarcocystis spp Y LOS FACTORES DE RIESGO ASOCIADOS EN ESTUDIANTES
DE MEDICINA VETERINARIA DE LA UNIVERSIDAD DE LA SALLE
Trabajo de Grado
JUAN CAMILO ÁVILA ZAMORA
Código: 14071076
LUIS FERNANDO FORERO PEÑA
Código: 14071002
DIRECTOR
Dr. RICARDO LEÓN VEGA ARAGÓN
BOGOTÁ, COLOMBIA
2012
i
HOJA DE APROBACIÓN
DIRECTOR _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
Dr. Ricardo León Vega Aragón
JURADO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
Dr. Nicolás Hernández Gallo
JURADO _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _
Dr. Nelson Cifuentes Ávila
ii
DIRECTIVOS
RECTOR
VICERRECTOR ACADÉMICO
VICERRECTOR DE PROMOCIÓN Y DESARROLLO HUMANO
VICERRECTOR ADMINISTRATIVO
VICERRECTOR DE INVESTIGACIÓN Y TRANSFERENCIA
DECANA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
DIRECTOR PROGRAMA DE MEDICINA VETERINARIA
Hno. CARLOS GÓMEZ RESTREPO
Hno. FABIO HUMBERTO CORONADO PADILLA
Hno. FRANK LEONARDO RAMOS BAQUERO
Dr. EDUARDO ÁNGEL REYES
Hno. MANUEL CANCELADO JIMÉNEZ
Dra. CLAUDIA AIXA MUTIS BARRETO
Dr. JUAN FERNANDO VELA JIMÉNEZ
iii
COMPROMISO
Los trabajos de grado no deben contener ideas que sean contrarias a la doctrina católica en
asuntos de dogma y moral.
Ni la universidad, ni el director, ni el jurado calificador son responsables de las ideas
expuestas por el graduando.
iv
AGRADECIMIENTOS
A nuestro director y co-director del Trabajo de Grado, doctores Ricardo León Vega y José
Luis Azumendi, por su constante orientación y apoyo durante el desarrollo del mismo y sus
aportes a nuestra formación como Médicos Veterinarios.
A los doctores Nicolás Hernández, Nelson Cifuentes y Diego Soler, por su valiosa ayuda y
orientación durante el desarrollo de este trabajo.
A la Microbióloga y Bacterióloga Luz Ángela Díaz Moyano, y a Nathalya Martínez Luna por
su constante disposición y apoyo durante el desarrollo de la toma de muestras sanguíneas
realizadas para este trabajo.
A los estudiantes que voluntariamente se presentaron y participaron en la toma de muestras
sanguíneas.
A nuestras familias por su apoyo incondicional en cada una de las fases de este trabajo.
v
DEDICATORIA
Primero a Dios, por darme la salud y las fuerzas para salir adelante, el jamás rendirme, por
darme una familia que me apoya, me quiere y cree en mí.
A mis padres, Miguel Ávila y Amparo Zamora por enseñarme a que nunca debo dejar de
hacer lo que me gusta, el ser constante y no dejar de seguir mis metas así existan tropiezos
en el camino, agradezco su amor y sacrificio para que yo pueda cumplir mis sueños; a mis
hermanos Iván Andrés Ávila Zamora, Miguel Fernando Ávila Zamora y Juliana Ávila Zamora
por brindarme, además de una familia, una amistad y el orgullo de tenerlos como ejemplo
para ser una persona de bien.
A mis futuros colegas, profesores y personas que hicieron que fuera posible mi formación
como persona y como Médico Veterinario y, a mi colega y amigo Fernando Forero por su
amistad.
“La vida tiene muchos caminos y el camino más largo es el que vale la pena recorrer. “
Juan Camilo Ávila Zamora
A Dios, porque siempre habrá algo que no podremos explicar, pero que nos guía en cada
paso que damos.
A mis padres Álvaro Forero Arias e Inés Constanza Peña, quienes no solo me dieron la vida,
sino que han estado presentes en cada una de las etapas de mi crecimiento personal y
profesional, siendo un ejemplo a seguir de unión, fortaleza y constancia. A mi hermano
Andrés Julián Forero, que siempre será alguien digno de admirar.
A mi colega y amigo Juan Camilo Ávila, quien fue un constante apoyo y compañero durante
muchos procesos de esta carrera que hoy culminamos juntos.
A cada una de las personas que han estado presentes durante mi vida, pues sin ellos no
sería quien soy.
“Si la felicidad se encuentra por un segundo cada mil años, entonces habrá valido la pena
vivir.”
Luis Fernando Forero Peña
vi
TABLA DE CONTENIDO
RESUMEN............................................................................................................................................ xi
ABSTRACT ......................................................................................................................................... xii
INTRODUCCIÓN .................................................................................................................................. 1
OBJETIVOS .......................................................................................................................................... 2
Objetivo General ............................................................................................................................. 2
Objetivos Específicos ................................................................................................................... 2
1. MARCO TEÓRICO ...................................................................................................................... 3
1.1 ZOONOSIS ............................................................................................................................ 3
1.2 TOXOPLASMOSIS .............................................................................................................. 6
1.2.1 Ciclo de vida ................................................................................................................ 7
1.2.2 Factores de riesgo ...................................................................................................... 9
1.2.3 Diagnóstico ................................................................................................................ 10
1.3 BRUCELOSIS ..................................................................................................................... 10
1.3.1 Ciclo de vida .............................................................................................................. 11
1.3.2 Factores de riesgo .................................................................................................... 13
1.3.3 Diagnóstico ................................................................................................................ 14
1.4 SARCOCYSTOSIS ............................................................................................................ 15
1.4.1 Ciclo de vida .............................................................................................................. 15
1.4.2 Factores de riesgo .................................................................................................... 17
1.4.3 Diagnóstico ................................................................................................................ 18
1.5 PRUEBAS DIAGNÓSTICAS DE LABORATORIO ....................................................... 18
1.5.1 Rosa de Bengala ....................................................................................................... 18
1.5.2 2-Mercaptoetanol ...................................................................................................... 19
1.5.3 Prueba de ELISA ....................................................................................................... 19
1.6 SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD ................................................................................ 20
1.6.1 Sensibilidad ............................................................................................................... 20
1.6.2 Especificidad ............................................................................................................. 20
vii
1.7 EPIDEMIOLOGIA SEROLOGICA ................................................................................... 21
1.8 PREVALENCIA .................................................................................................................. 21
1.9 FACTORES DE RIESGO .................................................................................................. 22
1.10 ESTUDIOS OBSERVACIONALES.................................................................................. 23
1.10.1 Tipos de estudios observacionales ..................................................................... 23
1.11 VALOR PREDICTIVO POSITIVO Y VALOR PREDICTIVO NEGATIVO ................... 24
1.12 ODDS RADIO ..................................................................................................................... 25
2. MATERIALES Y MÉTODOS .................................................................................................... 26
2.1 LOCALIZACIÓN ................................................................................................................. 26
2.2 POBLACIÓN Y MUESTRA ............................................................................................... 26
2.3 VARIABLES ........................................................................................................................ 27
2.4 ANALISIS ESTADÍSTICO ................................................................................................. 27
2.5 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS .................................................................................. 28
2.5.1 Sujetos de estudio .................................................................................................... 28
2.5.2 Toma de muestra sanguínea.................................................................................. 28
2.5.3 Diligenciamiento de la encuesta ........................................................................... 29
2.5.4 Realización del cuadro hemático .......................................................................... 30
2.5.5 Extracción del suero ................................................................................................ 31
2.5.6 Almacenamiento de la muestra ............................................................................. 31
2.5.7 Prueba de Rosa de Bengala ................................................................................... 31
2.5.8 Prueba de 2-Mercaptoetanol .................................................................................. 32
2.5.9 Test de ELISA para detección de IgG contra Toxoplasma gondii ................ 33
2.5.10 Test de ELISA para detección de antígeno de Sarcocystis spp. .................. 34
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN ................................................................................................. 35
3.1 BRUCELLA ABORTUS .................................................................................................... 35
3.1.1 Prevalencia y valores predictivos ......................................................................... 35
3.1.2 Factores de riesgo hipotéticos para Brucella abortus .................................... 37
3.2 TOXOPLASMA GONDII .................................................................................................... 38
3.2.1 Prevalencia y valores predictivos ......................................................................... 39
3.2.2 Factores de riesgo hipotéticos para Toxoplasma gondii ............................... 39
3.3 SARCOCYSTIS SPP. ........................................................................................................ 45
3.3.1 Prevalencia y valores predictivos ......................................................................... 45
viii
3.3.2 Factores de riesgo hipotéticos para Sarcocystis spp. .................................... 46
4. CONCLUSIONES ....................................................................................................................... 51
5. RECOMENDACIONES.............................................................................................................. 53
6. BIBLIOGRAFIA .......................................................................................................................... 55
ANEXOS .............................................................................................................................................. 59
ANEXO A. Resultados serológicos para las pruebas de Rosa de Bengala para
Brucella abortus, test de ELISA para detección de anticuerpos IgG para Toxoplasma
gondii y test de ELISA para detección de antígeno para Sarcocystis spp. ................... 59
ANEXO B. Resultados cuadros hemáticos realizados a las muestras sanguíneas
tomadas. ......................................................................................................................................... 71
ANEXO C. Montajes placas de ELISA para Toxoplasma gondii. ...................................... 85
ANEXO D. Consentimiento informado mostrado a los estudiantes participantes. ...... 87
ANEXO E. Encuesta de recopilación de información sobre la exposición o no de los
factores de riesgo planteados en Microsoft® Access 2013. ............................................. 89
ix
LISTA DE TABLAS
Tabla 1 Tabla de contingencia construida en estudios observacionales ................................... 24
Tabla 2 Tabla de contingencia de 2x2 para la validación prueba rosa de bengala .................. 35
Tabla 3 Recopilación presencia y ausencia factores de riesgo hipotéticos para Brucella
abortus ................................................................................................................................................. 37
Tabla 4 Desviación Estándar y coeficiente de variación de los micropocillos controles del test
HUMAN TOXO ANTI-IgG .................................................................................................................. 38
Tabla 5 Tabla de contingencia de 2x2 para validación de la prueba de ELISA para
Toxoplasma gondii ............................................................................................................................. 39
Tabla 6 Tablas de contingencia y odds radio de los factores de riesgo planteados para
Toxoplasma gondii ............................................................................................................................. 40
Tabla 7 Tabla de contingencia de 2x2 para la frecuencia Siempre en el lavado de vegetales
que consume ....................................................................................................................................... 44
Tabla 8 Tabla de contingencia de 2x2 para la validación de la prueba ELISA para
Sarcocystis spp. .................................................................................................................................. 45
Tabla 9 Tablas de contingencia de 2x2 y odds radio para los factores de riesgo planteados
para Sarcocystis spp. ......................................................................................................................... 46
Tabla 10 Tablas de contingencia de 2x2 y odds radio para la frecuencia del consumo de
carne mal cocida ................................................................................................................................ 49
Tabla 11 Resultados de las pruebas serológicas para Brucella abortus, Toxoplasma gondii y
Sarcocystis spp. .................................................................................................................................. 59
Tabla 12 Resultados cuadros hemáticos........................................................................................ 71
Tabla 13 Montaje primera placa de ELISA para Toxoplasma gondii .......................................... 85
Tabla 14 Montaje segunda placa de ELISA para Toxoplasma gondii ........................................ 85
Tabla 15 Montaje tercera placa de ELISA para Toxoplasma gondii ........................................... 85
Tabla 16 Montaje cuarta placa de ELISA para Toxoplasma gondii ............................................ 86
Tabla 17 Montaje quinta placa de ELISA para Toxoplasma gondii ............................................ 86
x
LISTA DE FIGURAS
Figura 1 Ejemplos de transmisión directa de agentes infecciosos ............................................... 5
Figura 2 Ejemplos de transmisión indirecta de agentes infecciosos ............................................ 6
Figura 3 Folleto convocatoria estudiantil ........................................................................................ 28
Figura 4 Toma de muestra sanguínea ............................................................................................ 29
Figura 5 Estudiante diligenciando la encuesta .............................................................................. 30
Figura 6 Maquina Human Count® para cuadros hemáticos........................................................ 30
Figura 7 Congelamiento de muestras ............................................................................................. 31
Figura 8 Montaje y mezcla manual de la prueba Rosa de Bengala ........................................... 32
Figura 9 Tubos de prueba de 2-mercaptoetanol encubando ...................................................... 33
Figura 10 Micropocillos de ELISA después de detener la reacción ........................................... 34
Figura 11 Frecuencia del lavado de manos después de las prácticas ...................................... 43
Figura 12 Captura de pantalla de la encuesta realizada a los estudiantes participantes. ....... 89
xi
RESUMEN
Las enfermedades zoonóticas son enfermedades transmitidas entre animales
vertebrados y el humano debido al contacto directo o indirecto de las personas con los
animales, sus productos o la interacción con su ambiente. Es por esta razón que los
estudiantes de Medicina Veterinaria de la Universidad de La Salle, debido a que dentro del
pensum realizan prácticas donde tienen contacto directo con animales o material biológico
potencialmente peligrosos, son una población de riesgo para el contagio de enfermedades
zoonoticas. En este estudio se determinó la prevalencia serológica de tres agentes
infecciosos zoonóticos que fueron Brucella abortus (debido a su importancia como
enfermedad de riesgo laboral), Toxoplasma gondii (debido a que se encuentra dentro de las
enfermedades zoonóticas priorizadas en el país) y Sarcocystis spp. (debido a su alta
prevalencia hallada en los estudios realizados), y los factores de riesgo asociados en esta
población. Se obtuvo como resultado una prevalencia serológica (teniendo en cuenta
verdaderos positivos y falsos negativos) de 5% para Brucella abortus hallando un solo caso
positivo en el estudio y que estadísticamente no fue significativo, aunque se encontró una
exposición importante a los factores de riesgo planteados en la literatura para este agente.
Así mismo, se halló una prevalencia serológica de 23% para Toxoplasma gondii y una
prevalencia serológica de 56% para Sarcocystis spp. lo cual permitió realizar un análisis de
los factores de riesgo planteados para estos el contagio de estos dos agentes infecciosos y
evaluados mediante el hallazgo del odds radio y que para este estudio, se observó una
relación directa entre la realización de prácticas con animales y el riesgo de contacto con
estos agentes zoonóticos. De igual manera, se realizó un asociamiento entre del lavado
adecuado de las manos y el lavado de los vegetales que se consumen, teniendo en cuenta
la importancia de realizar estas actividades con la frecuencia y la calidad del agua
adecuadas, como un factor de riesgo importante. Se encontró que el consumo de carne mal
cocida, factor importante descrito en la literatura, tiene prácticas de almacenamiento que
pueden llevar a asociarlo como un factor protector o como factor de riesgo, según sea el
caso de la realización de estas prácticas. Además, se encontró que el poseer a un perro y/o
gato de mascota no tiene relevancia de asociación con la presentación o no de
seropositividad a estos agentes. Por último, se concluye acerca de la importancia de realizar
campañas de promoción de medidas preventivas dentro de la institución educativa, así como
de realizar más estudios en diferentes poblaciones sobre Sarcocystis spp. debido a que es el
agente infeccioso con mayor prevalencia serológica hallada en este estudio, sumado al
desconocimiento general que se tiene sobre este.
xii
ABSTRACT
Zoonotic diseases are diseases transmitted between vertebrate animals and man due to
direct or indirect contact of people with animals, their products or interaction with their
environment. For this reason, the students of Veterinary Medicine at the University of La
Salle, because within the curriculum practices which have made direct contact with animals
or potentially hazardous biological material, are a population at risk for transmission of
zoonotic diseases. In this study we determined the serological prevalence of three zoonotic
infectious agents were Brucella abortus (due to its importance as a business risk disease),
Toxoplasma gondii (because it lies within priority zoonotic diseases in the country) and
Sarcocystis spp. (Due to its high prevalence found in studies) and associated risk factors in
this population. The result was a serological prevalence (considering true positives and false
negatives) from 5% to Brucella abortus finding a single positive case in the study and was not
statistically significant but found significant exposure to risk factors posed in the literature for
this agent. Likewise, we found a 23% serological prevalence for Toxoplasma gondii and
serological prevalence of 56% for Sarcocystis spp. This allowed an analysis of the risk factors
for these contagion posed these two infectious agents and evaluated by finding the odds ratio
and that for this study, there was a direct relationship between the experiments with animals
and the risk of contact with these zoonotic agents. Similarly, aliasing is performed between
the proper hand washing and washing the vegetables consumed, taking into account the
importance of these activities with the frequency and suitable water quality as an important
risk factor. It was found that the consumption of undercooked meat factor described in the
literature, has storage practices that can lead to associate as a protective factor or a risk
factor, as the case of the implementation of these practices. Furthermore, we found that
owning a dog and / or pet cat has no relevance in association with the presentation or not
seropositivity to these agents. Finally, we conclude about the importance of carrying out
promotion of preventive measures within the school, as well as further studies in different
populations of Sarcocystis spp. because it is the most prevalent infectious agent serological
found in this study, coupled with general ignorance that we have about this.
1
INTRODUCCIÓN
Los seres humanos, dentro de su vida normal tiene la posibilidad de ser un hospedador
definitivo o intermediario de algún agente causal de una enfermedad zoonótica como lo
puede ser la brucelosis, la toxoplasmosis o la sarcocistosis; aun así, personas que tienen
contacto constante con animales o productos provenientes de animales tiene un riesgo
mayor de ser portadores de alguno de estos agentes causales debido a sus condiciones
laborales o sus actividades diarias.
Dentro del desarrollo de su carrera, los estudiantes de medicina veterinaria, realizan
prácticas estipuladas dentro del programa académico, en las cuales se tiene un contacto con
modelos animales vivos o material biológico, los cuales se consideran potencialmente
peligrosos. Esto puede originar el contagio de enfermedades de carácter zoonótico, como lo
son toxoplasmosis, sarcocistosis y brucelosis, las cuales tienen como hospederos animales
de producción (bovinos) en el caso de la Brucella abortus y animales de compañía (perros y
gatos) para Toxoplasma gondii y Sarcocystis spp; animales que se pueden ser manejados
normalmente dentro de las prácticas de la universidad y/o el entorno de los estudiantes fuera
de esta.
Considerando lo anteriormente mencionado, las probabilidades de tener contacto y adquirir
la enfermedad por parte de los estudiantes de Medicina Veterinaria de la Universidad de La
Salle son altas. Por esta razón se realizó este proyecto con el objetivo de identificar los
factores de riesgo y los factores protectores presentes en los estudiantes del programa para
cada enfermedad, y la determinación de prevalencia serológica de cada uno de los agentes
causales estudiados; todo esto contrastando nuestros resultados frente a lo reportado en la
literatura y otros estudios realizados, determinando la relevancia o no, en nuestro estudio, de
cada factor estudiado. De igual manera se realizó el análisis de la relevancia del desarrollo
de prácticas estudiantiles incluidas en el pensum académico en las asignaturas de anatomía
I, semiología, ginecología y obstetricia y clínicas de grandes y pequeños animales, dentro de
la presencia de anticuerpos o antígenos en los estudiantes.
El presente estudio busca ser una base para la realización de nuevas investigación en otras
universidades que busquen reforzar la disponibilidad de datos de enfermedades zoonóticas
en poblaciones de riesgo y su estado actual y real en el país, de igual manera con este
estudio se busca que puedan realizarse campañas de prevención y concientización frente al
uso de las normas de bioseguridad y la adopción de medidas preventivas por parte de los
estudiantes.
2
OBJETIVOS
Objetivo General
Determinar la prevalencia serológica de tres agentes causales de enfermedades
zoonóticas (Brucella abortus, Toxoplasma gondii, Sarcocystis spp) en estudiantes del
programa de Medicina Veterinaria de la Universidad de La Salle, así como la determinación
de los factores de riesgo y factores protectores presentes.
Objetivos Específicos
Determinar mediante pruebas de laboratorio la presencia de anticuerpos frente a
Brucella abortus y Toxoplasma gondii en los estudiantes.
Determinar mediante pruebas de laboratorio la presencia de antígeno de Sarcocystis
spp en los estudiantes.
Determinar las asignaturas de riesgo dentro del pensum del programa de Medicina
Veterinaria de la Universidad de La Salle en las cuales se puede presentar mayor
contacto con estas enfermedades zoonoticas, mediante el análisis de la realización o
no de prácticas universitarias dentro del desarrollo de estas.
Determinar los factores de riesgo y factores protectores presentes para el contagio de
brucelosis, toxoplasmosis y sarcocistosis, en los estudiantes de Medicina Veterinaria
de la Universidad de La Salle, mediante la aplicación de una encuesta a los
estudiantes participantes.
Determinar la relevancia de los factores de riesgo y los factores protectores
encontrados mediante el uso de medidas estadísticas y su análisis junto a la
prevalencia hallada.
3
1. MARCO TEÓRICO
1.1 ZOONOSIS
Las enfermedades zoonóticas son un grupo de enfermedades infecciosas que son
transmitidas naturalmente entre animales vertebrados y humanos. Los agentes infecciosos
involucrados incluyen bacterias, virus, parásitos, hongos y rickettsias, entre otros.
(Organización Mundial de la Salud, 2010)
La mayoría de las enfermedades infecciosas emergentes en las últimas tres décadas son
zoonosis. Estas infecciones, según su ciclo, pueden ser clasificadas como sinantrópicas
cuando tienen un ciclo urbano o exoantrópicas, cuando el ciclo es selvático. Algunas
zoonosis pueden presentar ambos ciclos como por ejemplo la enfermedad de Chagas.
(Rabinowitz & Conti, 2010) (Dabanch, 2003)
Los agentes infecciosos necesitan un lugar para residir si van a sobrevivir y esparcirse en el
ambiente. Un reservorio es un objeto animado o inanimado que sirve como un hábitat de
larga duración y que se concentra en la diseminación del agente infeccioso. Los animales,
plantas, granos y agua, pueden servir de reservorio a patógenos humanos. Es necesario
tener en cuenta que un reservorio no es lo mismo que una fuente de infección. La fuente de
infección es un individuo u objeto del cual una infección es realmente adquirida. En algunos
casos, el reservorio y la fuente de infección son el mismo (como en el caso de la sífilis en
que el reservorio y la fuente de infección es el cuerpo humano) y en otros casos el reservorio
y la fuente de infección son diferentes (como en el caso del Cryptosporidium parvum en que
el reservorio puede ser el ternero y la fuente de infección es el agua) (Amundson Romich,
2008)
Los reservorios vivientes incluyen humanos, animales y artrópodos. Los humanos son el
reservorio más importante de las enfermedades infecciosas humanas. Sin embargo, los
animales silvestres y domésticos también sirven como reservorios de enfermedades
humanas. Los artrópodos, que consisten en insectos (moscas, pulgas y mosquitos),
arácnidos (garrapatas, ácaros y arañas), y crustáceos (cangrejos de mar y de rio) también
pueden transmitir enfermedades zoonóticas. Cuando los artrópodos transmiten una
enfermedad, se refiere a ellos como vectores, término que se le da a cualquier animal vivo
que transmite un agente infeccioso de un hospedador al siguiente. Los vectores se clasifican
en dos categorías (Amundson Romich, 2008):
4
Vectores biológicos: Aquellos vectores que participan activamente en el ciclo de vida
del patógeno.
Vectores Mecánicos: Aquellos vectores que no son necesarios en el ciclo de vida del
patógeno y que son participantes pasivos en la transmisión de la enfermedad.
En los reservorios no vivientes se incluyen el aire, suelo, polvo, comida, leche, agua y
fómites (objetos que son capaces de transferir organismos infecciosos). El contacto directo
con un organismo zoonótico por vía de un reservorio no viviente puede transmitir la
enfermedad del animal al humano, por ejemplo la transmisión de endosporas de Bacillus
anthracis por medio de aire contaminado. (Amundson Romich, 2008)
La transmisión de organismos zoonóticos puede ocurrir a través de la piel y las membranas
mucosas por vía de mordiscos, rasguños u otros tipos de contactos directos con animales; a
través de contacto con tejidos del animal, saliva, orina y otras secreciones corporales; por
ingestión de comida, bebidas o materiales del ambiente compartido contaminados por heces
fecales; por inhalación de aerosoles o partículas provenientes de animales infectados; y a
través de artrópodos y otros vectores invertebrados. Las zoonosis pueden infectar a
personas saludables, pero la mayoría de los riesgos de enfermedad son para personas
inmunocomprometidas, ancianos, neonatos y mujeres embarazadas. (Mani & Maguire, 2009)
El mayor riesgo para la transmisión de las enfermedades zoonóticas ocurre en la interacción
humano-animal que puede ser por una exposición directa o indirecta del humano con el
animal, sus productos y/o su ambiente. Más del 60% de los nuevos agentes infecciosos
identificados que han afectado a las personas durante las últimas décadas han sido
causados por patógenos originados por animales o productos animales. (Organización
Mundial de la Salud, 2010)
La transmisión de un agente infeccioso puede clasificarse como transmisión directa (Figura
1) y transmisión indirecta (Figura 2). La transmisión directa es en la que la transmisión del
agente infeccioso del reservorio a un hospedero susceptible es inmediata, y la transmisión
indirecta es en la cual hay un transporte para la transmisión del agente infeccioso desde el
reservorio al hospedero susceptible. De igual manera la transmisión de un agente infeccioso
puede clasificarse en transmisión horizontal y transmisión vertical; siendo la transmisión
horizontal aquella en la que la enfermedad es propagada a través de una población de un
individuo infectado a otro (esta transmisión horizontal puede ser directa o indirecta), y la
transmisión vertical es aquella en la que la enfermedad es propagada de los padres a su
descendencia a través de la placenta, esperma, leche o el óvulo (esta transmisión es
siempre directa). (Amundson Romich, 2008)
Es imperativo que los profesionales veterinarios se mantengan informados acerca de los
diferentes tipos de enfermedades zoonóticas y sus vías de propagación. Las heridas más
comunes en los trabajadores de las clínicas veterinarias son las mordidas que ocurren al
momento de inmovilizar a los animales. Estas mordidas pueden transmitir zoonosis, por lo
cual es necesario el uso de técnicas adecuadas para la inmovilización de los animales. Así
mismo, la sangre, material de laboratorio y animales infectados, pueden servir como fuentes
de infección. Es por esto que cada trabajo debe tener un determinado nivel de equipamiento
protector y entrenamiento en la realización de las tareas. Guantes de examen, tapabocas,
5
gafas de seguridad, delantales, botas o zapatos de trabajo, estaciones para el lavado de ojos
y otros tipos de equipos protectores pueden ser necesitados en la medida en que la actividad
realizada la justifique. Los Médicos Veterinarios también deben reportar aquellas
enfermedades que puedan afectar la salud pública humana. Es por esto que el ser capaces
de reconocer la transmisión de zoonosis e identificar las medidas de prevención, así como la
educación a la comunidad acerca de las zoonosis son funciones importantes de ellos.
(Amundson Romich, 2008)
“El control y la prevención de estas enfermedades pueden ser alcanzados solo mediante el
mejoramiento de métodos para reducir la transmisión de enfermedades entre humanos y
otros animales.” (Rabinowitz & Conti, 2010)
Adaptado de: Amundson Romish (2009)
Figura 1 Ejemplos de transmisión directa de agentes infecciosos
6
Adaptado de: Amundson Romish (2009)
1.2 TOXOPLASMOSIS
Es una enfermedad parasitaria e infecciosa que cursa con linfadenopatía, fiebre,
linfocitosis, reviste especial interés en salud pública (materna y perinatal), causado por el
toxoplasma gondii, un protozoario coccidio intracelular que completa la fase sexual de su
ciclo en el gato. Su periodo de incubación es de 10-23 días y su periodo de transmisión
puede cursar si se encuentra en el medio (agua o tierra) de hasta un año. (Organización
Mundial de la Salud, 2008)
En el contexto de Colombia, existe una falta de conocimiento sobre los factores de riesgo
asociados a la presentación de casos de toxoplasmosis y los efectos que puede llegar a
causar, siendo una enfermedad zoonótica y con impacto en salud pública. Las encuestas
efectuadas en diferentes países, indican un índice de infección de 40 a 50% en individuos
adultos entre los 30 y los 40 años de edad. (Diaz-Suarez, 2003)
Las infecciones por el parásito protozoario Toxoplasma gondii son altamente prevalentes en
humanos y animales en todo el mundo. La toxoplasmosis generalmente es asintomática,
excepto en adultos inmunodeprimidos y niños con infección congénita. Los seres humanos
adquieren la infección posnatal principalmente por la ingestión de alimentos y agua
Figura 2 Ejemplos de transmisión indirecta de agentes infecciosos
7
contaminada con ooquistes eliminados por las heces de los gatos infectados o por ingestión
de quistes viables de tejido en carne cruda o poco cocida y el contacto directo con la tierra.
(Jaguarib, 2012)
La toxoplasmosis es altamente prevalente en el mundo y cuando es adquirida por primera
vez en el embarazo puede causar serios daños en el feto. Las consecuencias en el niño
pueden ser tan diversas como hidrocefalia, microcefalia, calcificaciones cerebrales,
coriorretinitis, o terminar en un aborto, dependiendo de la fecha en que la madre se infectó.
La infección puede ser adquirida de varias formas. Las principales vías de transmisión varían
entre humanos, dándose por la cultura socia y factores ambientales. (Putignani, 2011)
En Colombia, en los últimos 12 años, se han realizado estudios seroepidemiológicos de la
toxoplasmosis adquirida durante el embarazo, pero aún no se ha establecido un protocolo
para la promoción y la prevención, solo para el diagnóstico y control de la enfermedad,
siendo de mayor importancia llegar a la prevención. Según el estudio nacional de salud de
1980, la tasa de positividad es de 47,1%, con títulos altos, predominantemente en la zona
Atlántica. En este mismo estudio, el 1,8% de las mujeres embarazadas presentó títulos altos
de anticuerpos, IgM e IgG, lo cual es probablemente indicativo de infección reciente.
Particularmente, en el departamento del Quindío, se han reportado tasas entre 0,7 y 1,6% de
gestantes con marcadores serológicos de infección aguda. En el municipio de Armenia, la
prevalencia de la toxoplasmosis es del 60%, constituyéndose esta parasitosis en una
prioridad en salud pública en la localidad. De acuerdo con estas cifras, en el Quindío se
calculaban 30 a 120 nuevos casos en embarazadas en 1997, siendo evidentes los altos
gastos de bolsillo, en razón a que esta enfermedad no está incluida en las priorizadas por el
ministerio de salud y protección social. (Putignani, 2011)
Para la toxoplasmosis ocular, la relación por sexo fue 63.2% en las niñas y 38.8% en los
niños con un promedio de edad al ingreso de 2 años 9 meses y un rango de edad de 6
meses a 6 años (con un promedio de solicitudes de ingreso de dos por año desde 1993
hasta 1999, pasó a 3 entre 1999 y 2004). (Zuluaga, 2005)
1.2.1 Ciclo de vida
El toxoplasma gondii, se encuentra en la naturaleza en tres formas infecciosas: los
taquizoitos presentes en la forma aguda de la enfermedad a nivel sanguíneo generalmente;
los bradizoitos contenidos en los quistes tisulares y los esporozoitos que se encuentran en
los ooquistes. (Perez, 2011).
El taquizoito ingresa de manera activa al interior de varias células del huésped, que en él se
humano puede ser cualquier célula nucleada, entre las que se encuentran: leucocitos
mononucleares, células endoteliales, células intersticiales, fibras musculares, neuronas,
células pulmonares y hepáticas; por medio de una vacuola parasitofora que le confiere
protección contra la respuesta inmune del huésped, en el interior de dichas células, se
multiplican por endodiogenia celular de la célula continente. (Perez, 2011).
8
Luego de dividirse, el taquizoito dará origen a los quistes tisulares intracelulares que se
localizan en múltiples tejidos, pero más comúnmente en tejido nervioso y muscular; estudios
en gatos muestran que la lengua es un órgano altamente parasitado incluso en mayor
medida que el cerebro, aunque también se han encontrado en ganglios linfáticos y otras
vísceras conteniendo a cientos de bradizoitos, que pueden persistir en estos tejidos por largo
tiempo, siendo esto de gran importancia en la transmisión tanto para huéspedes definitivos,
como intermediarios, debido a que cada uno de los estadios puede ser infectante, pero
muestran ciertas diferencias en cuanto a la eficiencia con que infectan a los huéspedes
definitivos o intermediarios y en la severidad de las manifestaciones clínicas en ambos.
(Perez, 2011).
Cuando los quistes tisulares son ingeridos por los gatos, la pared de estos sufre proteólisis y
los bradizoitos se liberan en el estómago e intestino delgado, algunos penetran la lámina
propia y vuelven a su estado de taquizoito para multiplicarse y luego diseminarse; otros
penetran la célula epitelial y se transforman en esquizontes (asexuales), que liberan
merozoitos, que posteriormente, darán lugar a gametos femeninos y masculinos, estos
últimos penetran en el gameto femenino y lo fertilizan iniciando así la reproducción sexual
con la formación de la pared del ooquiste alrededor del gameto fertilizado; al madurar el
ooquiste ira a la luz intestinal, rompiendo la membrana celular del enterocito. (Perez, 2011).
La fase sexual del ciclo solo se lleva a cabo en los huéspedes definitivos y. por ello, los
ooquistes solo se forman en los felinos, constituyendo una fuente de infección para los
huéspedes, tanto definitivos, como intermediarios, los ooquistes que expulsa el gato no son
esporulados, es decir, no infectantes y para que esporulen y se tornen infectantes, deben
pasar por fuera del gato entre 1 a 7 días según las condiciones ambientales. Cada ooquiste
esporulado contiene 2 esporoquistes con 4 esporozoitos cada uno, es decir, 8 esporozoitos
por ooquiste esporulado. Los huéspedes se infectan por consumir tejidos animales
infectados con quistes tisulares, alimentos o agua con ooquistes esporulados; tras la
ingestión los bradizoitos o esporozoitos liberados de quistes tisulares u ooquistes, penetran
el tejido intestinal, se transforman en taquizoitos y se diseminan por vía sanguínea y
linfática; luego de nuevo, dan origen a bradizoitos localizándose en diferentes tejidos;
aunque la conversión a bradizoitos depende de la respuesta inmunológica del huésped;
cuando hay estados de inmunocompromiso, el taquizoito persiste y no dará origen a los
bradizoitos (quistes tisulares). (Perez, 2011)
Los taquizoitos, importantes en la transmisión vertical, también pueden transmitirse por vía
oral y aunque tiene una menor resistencia al acido gástrico, pueden sobrevivir por algún
tiempo en soluciones acidas de pepsina; esta vía de transmisión se puede producir por
situaciones especiales, como en los niños pequeños, donde las enzimas proteolíticas no se
han desarrollado bien o en personas adultas, cuando estas consumen alimentos sólidos que
pueden elevar considerablemente el pH gástrico. (Perez, 2011)
9
1.2.2 Factores de riesgo
A pesar de ser un problema de salud pública en Colombia, solamente la ciudad de
Armenia, realiza un programa de tamizaje para la toxoplasmosis congénita durante el
embarazo debiéndose realizar para el 100% de las gestantes obligatorio. Desde el 2000 a la
fecha, cada año, aproximadamente 600 madres son analizadas y 2 a 5 casos de
toxoplasmosis congénita son detectados. Este estudio “Investigation of toxoplasma gondii
presence in farmed shellfish by nested -prc and real time PCR fluorescent amplicon
generation assay” . encontró que por lo menos el 42% de los casos de toxoplasmosis
gestacional en Armenia estuvieron asociados a factores de riesgo conocidos, tales como el
contacto con gatos y el consumo de carne poco cocida, siendo la ¾ o de menos cocción,
factores hacia los cuales se debe continuar la recomendación a la población de gestantes
para evitarlos. Este estudio también sugiere que recomendar el consumo de agua de bolsa o
de botellón puede ser una medida protectora para toxoplasmosis en el embarazo en la
ciudad de Armenia. (Putignani, 2011)
Cuando se realiza la determinacion de los factores relacionado a la transmision el principal
pensamiento que se tiene es la transmision por los ooquistes en las heces de animales
domesticos principalmente gatos de compañía, siendo principalmente por las heces de los
gatos una parte importante de la transmision de la toxoplasmosis a humanos, pero no el
unico factor de riesgo. El agua se ha determinado en estudios realizados “Prevalence of
toxoplasma gondii infection in myocastor cpypus in protected italian wetland”. Que el agua no
tratada o no potable puede ser un factor de riesgo para la transmision ya que pueden poseer
ooquistes y asi causar una transmision del parasito. (Nardoni, Angelici, Mugnaini, &
Mancianti, 2011)
La carne mal cocida o cruda, el lavado de los alimentos (verduras y frutas) y el contacto con
la tierra, tambien son factores de riesgo que pueden llegar a prevenirse con medidas de
seguridad ademas de buenas practicas de sanidad. como lavado de manera adecuada si se
tiene un contacto con la tierra o con trabajo de jardineria previniendo con el uso de guantes,
lavado adecuado de manos antes y despues, el manejo con los alimentos y evitar el
consumo de leche crudo, ya que en la leche tambien ocurre la transmision. (Jaguarib, 2012)
(Yanely, 2013)
El lavado de tablas para cortar, fregaderos, cuchillos y otros materiales despues de preparar
carne o despues lavado con agua y con jabon para matar todos las etapasdel parasito, el
cocinar la carne a fondo a una temperatura de 160°F (67°C) o congelarla a -13°C, el uso de
los guante mientras se hace la jardineria l limpieza de la caja de arena de los gatos es
importante en menor medida que lo haga una mujer en estado de embarazo, la comida que
se le da a los gatos que solo sea seca, enlatados o comida cocinada. (Amundson Romich,
2008)
10
1.2.3 Diagnóstico
La infección humana está ampliamente distribuida en el mundo y se encuentra una
mayor prevalencia en regiones tropicales. Como lo es Venezuela donde se estima un 60%
de la población adulta aparentemente sana, presenta anticuerpos contra toxoplasma. Se
quizo realizar el establecimiento del manejo de pacientes, pero para ello se tiene que
determinar la pueba mas eficiente para la deteccion de la toxoplasmosis; por lo tanto, se han
realizado estudios donde la prueba de ELISA-Avidez-igG es una valiosa ayuda para la
deteccion de una infeccion reciente o cronica, debido a que este criterio ayuda a la
planeacion del tratamiento precoz para la toxoplasmosis. (Maekelt, Mauriello, & Diaz, 2000)
La precisión de las pruebas utilizadas para el diagnóstico de toxoplasmosis aguda en
mujeres embarazadas en un estudio multicéntrico, que incluyeron 276 sueros de pacientes
(mujeres embarazadas y no embarazadas) en los que se diagnosticó toxoplasmosis aguda
de menos de 3 meses de diferencia, de 3 a 12 meses de diferencia y más de 12 meses de
diferencia. Se evaluaron los resultados de diagnóstico en un solo suero con pruebas para
IgM anti-toxoplasma específica, IgA, IgG y anticuerpos IgE, todos los ensayos de ELISA
IgM, excepto uno, mostraron sensibilidad >98% la sensibilidad de la IgA fue menor, con una
variación importante (50-90%), se alcanzaron excelentes resultados diagnosticas mediante el
uso secuencial de los ensayos de IgM. (Cortes, 2012)
En los laboratorios están especialmente interesados en desarrollar un test que pueda
distinguir entre las formas de infección aguda y crónica, dándole la importancia a la forma de
transmisión congénita. La IFI y ELISA son particularmente apropiadas para este propósito
porque ellas hacen posible la determinar la presencia de anticuerpos para IgM, que aparecen
y desaparecen antes de los anticuerpos IgG. En la toxoplasmosis adquirida de forma aguda,
el pico de anticuerpos IgM dura el primer mes de la enfermedad y persiste en promedio por
8 meses, anqué en algunos pacientes ellos puede estar presente por años. En el caso del
infección aguda, se cree que el estudio de avidez (de la combinación total y del poder de la
molécula de anticuerpos y del antígeno que depende del número de sitios y de cada
afinidad), la presencia de anticuerpos IgA dan mejores resultado que simplemente verificar la
presencia de anticuerpos IgM (Acha, 2003).
1.3 BRUCELOSIS
La brucelosis bovina esta difundida a nivel mundial, aunque en las últimas décadas se
está viendo erradicada de la mayoría de los países merced a un actuación veterinaria bien
programada (Blaha, 1995).
La brucelosis humana es causada por una bacteria intracelular denominada brucella
especies, donde el primer reservorio lo constituyen los animales. De estas especie como
11
zoonoticas: B. melitensis (caprinos), B. abortus (bovinos), B. suis (porcinos), B. canis
(caninos). Este agente representa un importante riesgo ocupacional en las personas que
trabajan con derivados pecuarios o que consumen subproductos crudos provenientes de
animales infectados. La brucelosis es una enfermedad zoonoticas que afectan grupos de
contacto directo o indirecto con animales (canales, secreciones, etc.) sin la adecuada
protección. (Sbriglio, 2007)
“Una de las enfermedades ampliamente estudiadas desde la óptica ocupacional es la
brucelosis, de acuerdo con Constable, en su estudio se evidencian tasa de incidencia de 795
casos por cada 100.000 personas/año en actividades relacionadas con animales, con 37 de
419 casos positivos en veterinarios, relacionados especialmente con la exposición a la
vacuna viva cepa 19 Brucella abortus. Recientemente, se reportaron seroprevalencia usando
rosa de bengala de 4.5% entre 22 veterinarios examinados en noreste de áfrica,
concluyendo que la baja prevalencia del grupo, se debe a que estos profesionales raramente
se involucran con tratamiento individuales que impliquen contacto con secreciones de
abortos o manipulación de neonatos, ya que sus actividades principales son de programas
de vacunación de enfermedades clásicas.” (Cediel, 2004)
“La brucelosis se mantiene como una de las principales zoonosis a nivel mundial y es una de
las causas de fiebre de origen desconocido en el humano, con más de 500.000 nuevos
casos anuales. Datos de la organización mundial de sanidad animal (OIE) considera,
tradicionalmente, a américa del sur como área endémica para brucelosis humana. En la
nueva distribución global de la enfermedad, según. (Pappas et al 2006)” (Tique, 2009)
Sudamérica debería ser excluida de la zona de alta endemicidad, con expresión de países
como Perú y argentina, que reportar una incidencia de 34.9 y 8.4 casos, respectivamente. La
incidencia en Colombia es de 1.85 casos, cifra que requieren ser estudiadas y
correlacionadas con la enfermedad en animales, para estimar la prevalencia de la brucelosis
(Tique, 2009).
En el estudio “seroprevalencia de brucelosis en trabajadores de mataderos de municipios del
Tolima (Colombia)”. Se detectó una prevalencia de anticuerpos antibrucella cercana al 4% en
la población evaluada, con una llamativa correlación entre condiciones de higiene del trabajo
y seropositividad (Morales, 2004).
1.3.1 Ciclo de vida
Los reservorios naturales de la B. abortus, B. suis, B. melitensis son respectivamente
ganado, porcinos y carbas y ovejas. El hospedero natural de B. canis y de la B. ovis es la
oveja.
La infección en humanos, el hombre se infecta por animales a través de contacto directo o
indirectamente por ingestión con animales de producción y por inhalación por agentes
transportados en el aire, la importancia relativa en el agente etiológico es el modo de
transmisión y vías de penetración varían con el are epidemiológico, los animales
12
reservorios, y los grupos de riesgo ocupación. La leche cruda y los quesos frescos de vaca
infectados con B. abortus pueden darse los casos esporádicos. Los organismos rara vez
sobreviven en leche agria, crema agria y mantequilla o queso fermentado (mayores por 3
meses) (Acha, 2003).
Las fuentes principales de contagio son las novillas o vacas en trance de parto, puesto que
con el feto y productos del aborto se vierten al medio ambiente cantidades masivas de
brucella, que contaminan camas de paja, piensos y utensilios. La principal vía de contagio es
la oral, por ingestión de piensos contaminados, aunque también puede transmitirse el
germen mediante inhalación de polvo vehiculador de Brucella, y por contacto directo. En los
efectivos exentos de brucelosis la B. abortus suele ingresar con novillas y vacas con la
infección latente, pero todavía sin síntomas clínicos; también con toros infectados o esperma
contaminado. Ocasionalmente, la enfermedad puede tener su origen en otros animales
infectados y en el hombre con brucelosis cuando la gestación y el pato son normales, en las
novillas y vacas infectadas no se produce ninguna transmisión intrauterina. Pero el ternero
recién nacido vivo puede infectarse en fase pero o postnatal. Debido a los largos plazos de
incubación latencia en las terneras y novillas jóvenes. (Blaha, 1995)
La Brucella abortus es especialmente hospedad en el bovino pero el contagio a personas
especialmente expuestas son los veterinarios ordeñadores y otros operarios que trabajen en
contacto con los efectivos bovinos. El contagio alimentario del hombre pierde importancia
allá, donde la leche y sus productos se llevan a centrales lecheras, donde son pasteurizados.
Entonces el contagio directo con las vacas eliminadoras de gérmenes. (Blaha, 1995)
Las especies B. abortus, B. melitensis, B. canis, se transmiten generalmente entre animales
por contacto con la placenta, líquidos fetales y las descargas vaginales de un animal
infectado. Los animales eliminan brucella después de un aborto o de un parto a término.
Aunque los rumiantes generalmente no presentan síntomas después de su primer aborto,
pueden convertirse en portadores crónicos y continuar eliminando brucella en la leche y en
las descargas uterinas durante las preñeces posteriores.
La mayoría de las especies de brucella se encuentran también en el semen. Los machos
pueden eliminar estos organismos durante periodos prolongados o durante toda la vida. La
importancia de la transmisión venérea varía según la especie también se propagan
rápidamente por esta vía. Se puede encontrar Brucella abortus y Brucella melitensis en el
semen, aunque no es común la transmisión venérea de estos organismos. Ademan han
detectado algunas especies de brucella en otras secreciones y excreciones, como la orina,
heces, líquidos, saliva y en secreciones nasales y oculares.
La brucella puede propagarse por fómites, como los alimentos y el agua. En condiciones de
humedad alta, temperaturas bajas y de poca luz solar, estos organismos pueden permanecer
viables durante varios meses en el agua, fetos abortados, estiércol, lana, heno, materiales de
trabajo y ropa. La brucella resiste la desecación en particular cuando existe material orgánico
y puede sobrevivir en el polvo y el suelo. La supervivencia es más prolongada cuando la
temperatura es baja, especialmente cuando está por debajo del punto de congelación. En
general, los huéspedes accidentales se infectan después de tener contacto con los
huéspedes de mantenimiento. Aunque es usual que la ubre del rumiante sea colonizada
13
durante el curso de una infección, también puede infectarse por contacto directo como
bacterias en las manos de los ordeñadores.
Los humanos pueden contaminarse por la ingestión o por la contaminación de las
membranas mucosas y la piel lastimada. En el laboratorio y probablemente en los
mataderos, la brucella puede transmitirse en aerosoles. Las fuentes más comunes de
infección en las personas incluyen el contacto con productos de abortos de animales;
ingestión de producto lácteos no pasteurizados de vacas, ingestión de carne cruda u otros
productos cárnicos con poca cocción (University, 2009)
1.3.2 Factores de riesgo
Para la Brucella abortus se identificaron como factores de riesgo las variables
correspondientes a: uso inadecuado de guantes (OR: 3.11; IC 1.09-11.52) y uso inadecuado
del delantal (OR: 2.94; IC 95% 1.12-43.03). Algunas variables que no se identificaron como
factores de riesgo se analizan de forma descriptiva (Benavides, 2012).
Esta estimado que el 85% de vacas recientemente contaminadas y más del 15% de las
vacas infectadas crónicamente, eliminan la brucella durante el parto. La eliminación a través
de la leche puede ser constante o intermitente, siendo esta un excelente material para el
aislamiento de brucella; si las examinaciones son repetidas, deben realizarse con la misma
frecuencias los test a toros usando suero sanguíneo y fluidos seminales y
bacteriológicamente la examinación del semen. Estos exámenes deben hacerse
repetidamente si los resultados son negativos, debido a que la brucella pueda estar de forma
intermitente.
La protección en la planta de refrigeración y trabajos en planta de sacrificio es importante
debido a que ellos constituyen el grupo ocupacional de más alto riesgo. La protección se ha
alcanzado por la separación del área de sacrificio de otras secciones y controlando la
circulación de aire. En otros países la protección con el uso de desinfectantes de ropa
protectora. Una solución al 5% de cloramina o una solución del 8% a 10%de soda caustica
debe ser usada para desinfectar instalaciones después del sacrificio. Los instrumentos
deben ser esterilizados en un autoclave por 30% en una solución 2% de soda caustica.
La vacunación es recomendada para el control de la brucelosis bovina en áreas enzootias
con altos rangos de prevalencia. La vacunación escogida es B. abortus cepa 19, confirmada
y usada en la vida salvaje, la protección dada por el uso en el tiempo de vida del animal, es
de bajo costo. El efecto antiabortivo de las vacunas es pronunciado así reduciendo un de las
principales causas de infección (Acha, 2003)
14
1.3.3 Diagnóstico
Los test serológicos para la detección de anticuerpos que miden la habilidad del suero
para aglutinar y estandarizar la cantidad de Brucella abortus, reflejando la presencia contra
anticuerpos. La brucella especifica IgM aparece al final de la primera semana de
enfermedad seguido por la IgG que sigue siendo comúnmente usada para medir para el
diagnóstico laboratorio, estos test de aglutinación no son usualmente usados en el
diagnostico e infección causado por B. canis el test de aglutinación es referido como el test
estándar de aglutinación en tubo STT es comúnmente usado en el diagnóstico de la
brucelosis aguda sin embargo el 2-mercaptoetanol y test complementario de fijación usando
diluciones inactivando los anticuerpos de inmunoglobulina M y permitiendo que solo la
aglutinación de la brucella por la inmunoglobulina g resistente a la disrupción por el 2-
mercaptoetanol siendo estas pruebas usadas para la brucelosis crónica está siendo usada
como una prueba complementario para la confirmación por la prueba de aglutinación rosa
de bengala 8RB).
El test de aglutinación sérica revela ambas inmunoglobulinas M y G. En general es aceptado
que en el estado activo de la brucelosis siempre este presente la IgG. Así, cuando se
encuentran títulos de aglutinación bajos, el test detecta la presencia de la IgG, y se debe
realizar los test de 2-mercaptoetanol y fijación de complemento, estos test son en especial
para la brucelosis crónica. (Acha, 2003)
Cuando la infección continua activa, retornan los títulos bajos de aglutinación, el test
intradermal con células no alergénicas es útil en los estudios epidemiológicos, pero no en
diagnóstico clínico, el test de 2-mercaptoetanol también es útil seguido del tratamiento y
cura del paciente (Acha, 2003)
El diagnostico depende principalmente de la examinación clínica una historia adecuada con
una posible explicación, incluyendo viajes y el aislamiento del organismo. La presentación
clínica puede estar con una alta variabilidad y lesiones focales que pueden presentarse
después de la exposición a la bacteria haciendo difícil el diagnóstico de la brucelosis. Un
equivocado diagnostico requiere el aislamiento del organismo usando hemocultivo como un
método a elegir. (Amundson Romich, 2008)
La serología es el método preferido en el laboratorio para el diagnóstico en humanos pero la
interpretación de los resultados resulta difícil. El test estándar de aglutinación por suero
(SAT) y Coombs han sido usadas para la identificación los organismos de la brúcela. Los
casos de brucelosis son a menudo investigados tarde en su curso o creciente, de títulos de
anticuerpos que pueden estar perdidos. Por la variabilidad en la respuesta individual y la
frecuencia de infecciones subclínicas haciendo la interpretación por solo altos títulos es
difícil. (Amundson Romich, 2008)
15
1.4 SARCOCYSTOSIS
En los animales domésticos y de laboratorio, con una rata de prevalencia del 96-98% en
bovinos y de 1% al 24% en primates
La prevalencia en Norteamérica del sarcocystis en perros y gatos indican que menos de un
5% de estos hospedadores pueden encontrarse eliminado esporoquistes; otros reportes
indican que el S. tenella y S. arieti-canis se han aislado en los estados unidos. Así mismo
75% al 98% de los corazones bovinos examinados en los mataderos se encontraron
infectados presumiblemente con S. cruzi.
El sarcocystis se comporta como una enzoonosis que ha sido reportada en todo el mundo
como el agente causal de muchas patologías en el hombre y los animales, el principal
problema es el desconocimiento de su patogénesis.
Por ejemplo, el hecho de que la infección con Sarcocystis spp. en el hombre sea usualmente
un hallazgo accidental en los exámenes histológicos post-mortem y no un diagnostico ante-
mortem, es una de las principales causas que motivaron la escritura de este libro, pues
creemos que un parasito que tiene tantas características que lo vuelven muy patógeno, no
es sensato no tenerlo en cuenta dentro del abanico de patógenos que afectan al humano y a
los animales
Se le considera un protozoario coccidial de la familia Sarcocystinae, de la subfamilia
Sarcocystiade, del genero sarcocystis y se le conocen más de 120 especies, de las cuales
hay un alto porcentaje de las que no se conoce uno de sus dos hospedador.
De acuerdo con este tipo de información se sabe que al nombrar el género sarcocystis está
hablando de un parasito unicelular que necesita de una célula superior para poder
reproducirse, que realiza su fase sexual las células del epitelio intestinal de aquellos
animales que son carnívoros u omnívoros y su reproducción asexual en las células del
epitelio vascular y muscular de las presas
Las especies del genero se nombre según sus hospedadores diciéndose primero el nombre
del hospedador intermediario y después el definitivo (Azumendi, 1997)
1.4.1 Ciclo de vida
En el humano la infección es encontrada en el intestino y en más partes en el mundo,
con una incidencia del 6% al 10% (WHO, 1981). De igual forma estos afectados figuran por
el consumo de carne cruda. Por ejemplo, en la República Democrática de Lao la prevalencia
de S. hominis fue superior del 10% en adultos, y en el Tíbet el rango de S. hominis fue
21.8% mientras que para la S. suihominis está en un rango de 0.06% a 7%. Cerca de 30
casos en humanos han sido reportados con sarcocistosis muscular, más de ellos en malasia.
16
Donde la prevalencia de sarcocistosis en general fue del 21% en las autopsias rutinarias
(Acha, 2003).
El ciclo de vida indica que el parasito es ingerido por los carnívoros que consumen el
musculo del hospedado intermediario contaminado, para posteriormente eliminar
esporoquistes con la materia fecal y hemorragias uterinas, contaminando así el medio
ambiente, y a través del agua indirectamente a los alimentos de consumo humano y animal,
aquí hay que incluir los aceites comestibles
En todos los casos se considera que la principal fuente de contaminación es oral; sin
embargo, es de tener en cuenta puntos tales como la conjuntiva y las heridas contaminadas
Otra posible vía de contaminación para el hospedero definitivo es la ingestión de
esporozoitos viables provenientes de otros huéspedes definitivo que este eliminando
sarcocystis de una especie que sea viable en el nuevo huésped definitivo
Cuando el HD ingiere alimentos contaminados crudos o mal cocinados que contiene el
parasito, los cystozoitos son puestos en libertad e invaden el tejido intestinal,
transformándose directamente en gametocitos masculinos (microgametos) y femeninos
(macrogametos), este proceso se completa de 18 a 24 horas post-ingestión. Posteriormente
sobreviene la fertilización de los macrogametos por los microgametos biflagelados, para que
por esporogonia y esporulación entreguen como resultado la formación de dos esporoquistes
ovales
Los macrogametos poseen forman ovoide, con un citoplasma homogéneo, rosa pálido,
ligeramente vacuolado en la periferia y una pequeña área nuclear basófila cerca al centro.
Se observan granulo spas-positivos por primera vez al día 5, estos son progresivamente más
grandes y numerosos en los días 6,7, los macrogametos medidos en secreciones tisulares
aumentan entre los días 2 y 6 y alcanzan u máximo número alrededor del día 13.
La división nuclear en los macrogametocitos uninucleados y multinucleados está
caracterizada por la formación de cuadro lóbulos
El DNA aparece como un anillo que rodea el núcleo y como gránulos dentro el núcleo de los
zoitos, microgametocitos, macrogametocitos y oocystos. Una vez que los macrogametos
maduran, el DNA eventualmente copa todo el núcleo. El RNA aparece como un granulo
simple, en el núcleo de los zoitos y macrogametos y como uno o dos gránulos en el núcleo
de los microgametos jóvenes, pero no se observa en los microgametocitos adultos ni en los
oocystos.
Además, gránulos de proteína aparecen en los macrogametos que pueden tomar parte en la
formación de la pared del oocysto.
El ooquiste maduro o más comúnmente los esporoquistes libres son expulsados
espontáneamente con las heces en un periodo patente prolongado y un periodo prepatente
que varía entre 3 a 30 días. El mecanismo de expulsión desde las células de la lámina propia
del intestino hacia la luz intestinal, aun no es conocido
17
Los esporocystos parecen ser estructuras con una gran capacidad de supervivencia,
pudiendo permanecer vivos por muchas semanas en temperaturas que entre los 18 grados
centígrados y los 35 grado centígrados con una humedad relativa del 10% o más alta. Los
esporocystos son ingeridos por el hospedador intermediario bovinos, luego se liberan en el
intestino delgado donde penetran la mucosa, entran a las células endoteliales y alcanzan las
arterias del mediano y pequeño calibre de todo el organismo.
Las heces de perros inoculados experimentalmente sugieren que el estado de esporocysto
inicia una infección orientada a la producción de esporozoitos en este huésped
Después que los esporocystos salen al medio ambiente a través de las heces de los
carnívoros, contaminan los pastos y cuando el hospedador intermediario (herbívoros) ingiere
los esporocystos con la hierba estos dentro del rumen invaden la mucosa intestinal seguido
de tres generaciones asexuales: la primera y la segunda son esquizontes. La tercera
generación es el estado quístico, la cual se desarrolla dentro de las miofibrillas del músculo
cardiaco y esquelético y en ocasiones también en el tejido nervioso. Macrogametos,
oocystos y esporocystos se hallan en la lámina propia subepitelial de las vellosidades del
duodeno, yeyuno e íleon del huésped definitivo (Azumendi, 1997)
El Sarcocystis que forma quites en el musculo bovino, los cuales hay que diferenciarlos de
los quistes de toxoplasma y de otros parásitos (tamaño, forma y estructura). (Azumendi,
1997)
1.4.2 Factores de riesgo
En Sarcocystis la contaminación de las pasturas o fuentes de alimentos y agua en las
granjas con esporozoitos fecales provenientes de hospedadores definitivos infectados, el
consumo de carne cruda o sin cocinar de manera adecuada, evitar que los perros u otros
depredadores consuman carne de animales muertos los cuales pueden estar contaminados,
evitar que animales como los perros o gatos, o los mismos humanos contaminen las fuentes
de alimento del ganado.
El congelamiento de la carne por 3 días o cocinada durante un tiempo adecuado ayuda a
reducir su infectividad para los hospedadores definitivos (Azumendi, 1997).
El ganado o los cerdos se debe hacer la prevención para evitar la infección por heces
infectadas de humano, no se debe consumir carne cruda o no conocida de manera
adecuada, en primer caso se debe tener una disposición adecuada de las heces en zonas
donde exista largos números de ganado o de cerdos, excepto en zonas donde exista un
bajo rango de infección humana. La población debe estar educada acerca del riesgo de
infección cuando la carne cruda es consumida, y la inspección veterinaria en mataderos
debe ser mejorada, la refrigeración de la carne reduce de número de quistes viables (Acha,
2003).
18
1.4.3 Diagnóstico
La sarcocistosis intestinal humana puede estar diagnosticada y confirmada por la
presencia de oocystos o esporocystos maduros en heces iniciando sobre el día 8 o 9
seguido de la ingestión de carne contaminada. La pared exterior de los oocystos es muy
delgada y a menudo se rompe, lo cual se considera para la presencia de esporocystos en
heces. El camino más eficiente para recuperar esto de las heces es por flotación por sulfató
de zinc.
Los quistes musculares en ganado son encontrados bajo de la lengua o en las fibras
muscules con un color blancuzco, los test serológicos inmunofluorescencia y ELISA no son
considerados útiles en el diagnóstico de la infección intestinal, pero estudios han comenzado
la evaluación de su efectividad en el diagnóstico de la infección muscular (Acha, 2003).
1.5 PRUEBAS DIAGNÓSTICAS DE LABORATORIO
El diagnóstico es la etiqueta que se le pone a una enfermedad con determinadas
características clínicas y patológicas, y se aplica a cada caso en particular. La palabra
diagnóstico procede el griego dia, que significa entre, y de gignoskein, que significa saber.
Su traducción literal es: reconocer una enfermedad y conocer la diferencia con otras
enfermedades. (Radostits, Mayhew, & Houston, 2002)
Los objetivos del diagnóstico son poder recomendar un tratamiento específico, proporcionar
un pronóstico acertado y hacer las recomendaciones necesarias para realizar un control y
prevenir la aparición de nuevos casos cuando se trate de grupos de población. Para esto
existen varios tipos de métodos de pruebas diagnósticas. (Radostits, Mayhew, & Houston,
2002)
Una prueba diagnóstica es definida por como cualquier procedimiento que sirva para
diferenciar un estado normal de otro alterado, siendo las pruebas de laboratorio las pruebas
diagnósticas más utilizadas para tejidos y líquidos. (Radostits, Mayhew, & Houston, 2002)
Las pruebas utilizadas en este estudio fueron Rosa de Bengala para Brucella abortus
realizando la confirmación mediante 2-mercaptoetanol; y la prueba de ELISA para la
detección de anticuerpos IgG contra Toxoplasma gondii y la detección de antígeno de
Sarcocystis spp.
1.5.1 Rosa de Bengala
La prueba de la ATA (Rosa de bengala) consisten en una prueba de aglutinación en
placa, donde el antígeno está tamponada a pH bajo. Esta acidificación del antígeno recude la
19
actividad de IgM, realizando la prueba selectiva para la identificación de la subclase IgG1.
Proporciona una aproximación diagnóstica en pocos minutos con una sensibilidad y
especificidad muy altas. Presenta elevado grado de correlación con la seroaglutinación y, por
su simplicidad, es muy útil como prueba de despistaje inicial o screening. Sus falsos
negativos se limitan a enfermos con procesos de pocos días de evolución y a algunos casos
de enfermedad de curso muy prolongado. El examen se utiliza como prueba de cribado, se
recomienda que los sujetos que resulten como positivos de esta prueba se vuelvan a probar
en la evidencia adicional. (Megid, Ribeiro, Marcos Junior, & Crocci, 2000) (Ministerio de
Salud y Protección Social, 2012)
1.5.2 2-Mercaptoetanol
El 2-mercaptoetanol se utiliza como una prueba complementaria a las pruebas de ATA,
SAR y SAT. La prueba se basa en la acción de ciertos compuestos que contienen tiol (2-
ME), que degradan la configuración del pentámero IgM, determinando de este modo la
perdida de actividad de unión. Este proceso hace que la prueba sensible a grupos
establecidos por la IgG, que no sufre ningún cambio en su actividad en la presencia de este
reactivo. La prueba de 2-ME genera reacciones positivas falsas en cantidades más
pequeñas que las pruebas SAT, SAR y ATA (rosa de bengala). (Megid, Ribeiro, Marcos
Junior, & Crocci, 2000)
1.5.3 Prueba de ELISA
El propósito de esta prueba es el de determinar si hay presencia de una proteína en
particular en una muestra. Existen dos variaciones de esta prueba, la primera es para
determinar cuánto anticuerpo hay en una muestra y la segunda es para determinar cuanta
proteína se une a un anticuerpo. La diferencia está dada en si se desea cuantificar un
anticuerpo o una proteína. (Davidson College, 2002)
La prueba ELISA se basa en varias teorías: 1)El antígeno y anticuerpo pueden enlazarse a
una superficie portadora insoluble y retener su reactividad inmunológica; 2)las enzimas
tienen actividad específica alta y convierten una cantidad relativamente grande de sustrato
en producto detectable, lo que permite detectar concentraciones muy bajas del ligando; 3) la
actividad enzimática o reactividad inmunológica de los conjugados se preserva y permanece
estable durante el análisis y el almacenamiento; y 4) las enzimas no están presentes en el
líquido biológico que se va a analizar. Los anticuerpos utilizados en el método ELISA son de
origen monoclonal o policlonal que se suministran como antisuero no fraccionado o
fracciones de inmunoglobulina purificada, pueden ser solubles o estar inmóviles en un
soporte sólido, son empleados como conjugados no marcados o enzimáticos y por ultimo
reaccionan con determinante antigénico específico de un antígeno o de un anticuerpo
ligando-específico (anticuerpo primario) según el protocolo de análisis. (Guzman-Vasquez,
2004)
20
Las combinaciones de enzima y sustrato que se emplean en los diversos métodos ELISA
incluyen: 1) peroxidasa de rábano y su sustrato, peróxido de hidrógeno que en presencia de
cromógeno o-fenilendiamina produce un producto color amarillo-naranja medible; 2)
galactosidasa beta y su sustrato o-nitrofenil-beta-Dgalactopiranósido que se transforma en
un producto nitrofenolado amarillento medible; o 3) fosfatasa alcalina y su sustrato p-
nitrofenilfosfato que también se transforma en nitrofenolato. Se utiliza ácido sulfúrico para
inhibir la actividad enzimática y estabilizar el producto final de reacción que tiene color.
(Guzman-Vasquez, 2004)
1.6 SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD
La sensibilidad y la especificidad son indicadores de la validez de los test diagnósticos
siendo la sensibilidad de un método diagnostico la proporción de verdaderos positivos que
son detectados por el método; y la especificidad del método es la proporción de verdaderos
negativos que son detectados (Thrusfield, 2007)
1.6.1 Sensibilidad
Una prueba sensible rara vez pasará por alto a los animales con una enfermedad. Las
pruebas sensibles son útiles al iniciar el trabajo diagnóstico, cuando se están considerando
un gran número de posibilidades diagnósticas, para reducir el número de las mismas. Las
pruebas diagnósticas pueden utilizarse en estas enfermedades, por ejemplo para establecer
que algunas de ellas son improbables. Las pruebas sensibles también son útiles cuando la
probabilidad de una enfermedad es relativamente escasa y el propósito de las pruebas es
detectarla. (Radostits, Mayhew, & Houston, 2002)
En las pruebas para excluir la enfermedad, prima la elevada sensibilidad. Estas pruebas
pueden ser inespecíficas, y producir un gran número de falsos positivos y seguir siendo
herramienta diagnosticas útiles. Este problema introduce el concepto de especificidad.
(Radostits, Mayhew, & Houston, 2002)
1.6.2 Especificidad
Una prueba específica rara vez clasificara como enfermo a un animal que no tiene la
enfermedad. Las pruebas específicas son útiles para confirmar un diagnostico que ha sido
sugerido por otros datos. Ello se debe a que una prueba altamente especifica rara vez es
positiva a la ausencia de la enfermedad, es decir, da pocos resultados falsos positivos. Por
21
tanto, las pruebas de confirmación de enfermedad suelen realizarse más tarde en el proceso
diagnóstico. (Radostits, Mayhew, & Houston, 2002)
1.7 EPIDEMIOLOGIA SEROLOGICA
La epidemiologia serológica es la investigación de enfermedades e infecciones en
poblaciones, mediante la medición de variables presentes en el suero. Uno de los principales
constituyentes que es frecuentemente medidos son los anticuerpos específicos y esta
investigación de anticuerpos lo que comúnmente se conoce como comprensión serológica.
Los anticuerpos proveen evidencia de exposiciones previas o actuales a agentes infecciosos
su estudio es comúnmente empleado en la medicina veterinaria como un método
relativamente eficiente y de bajo costo para detectar la exposición tanto en individuos como
poblaciones. (Thrusfield, 2007).
La presencia de anticuerpos detectables indica que el sujeto ha estado expuesto al antígeno
y se estimula la producción de anticuerpos. En la ausencia de nuevos desafíos, los niveles
de anticuerpo van a reducirse. La tasa de reducción, usualmente medida en términos de la
vida media del anticuerpo, varía según el anticuerpo. Los títulos de algunos anticuerpos
persisten debido a que los anticuerpos tienen una larga vida media o que existe una afección
persistente o un estímulo repetido. La posesión de una vida/media larga explica porque unas
vacunas pueden producir una inmunidad prolongada después de una simple dosis, por lo
tanto la vida/media de los anticuerpos vacúnales son un aspecto importante en la eficacia de
una vacuna y de la inmunidad pasiva adquirida en animales jóvenes. La vida/media de los
anticuerpos que siguen a una infección natural es estimada raramente (Thrusfield, 2007).
1.8 PREVALENCIA
La prevalencia P es el número de casos de una enfermedad o atributos relacionados en
una población conocida, en un tiempo designado y sin la distinción entre casos nuevos y
antiguos. Cuando el tiempo no es especificado, la prevalencia normalmente se refiere a un
punto d prevalencia; esto es la cantidad de casos de enfermedad en una población en un
punto en particular en el tiempo. El periodo de prevalencia de refiere al número de casos que
han ocurrido en un periodo de tiempo específico, por ejemplo un año. Esta es la suma del
punto de prevalencia al principio del periodo y el número de casos nuevos que han ocurrido
durante el periodo, y pude por lo tanto ser usada cuando el tiempo exacto del comiendo de
una condición no es conocido (Thrusfield, 2007).
22
Aunque la prevalencia puede ser definida simplemente como el número de animales
infectados es más significativo cuando se expresa en términos del número de sujetos
enfermos en relación con el número de sujetos de la población que tienen el riesgo de
presentarla.
P = Número de individuos enfermos en un punto particular del tiempo
Número de individuos en la población en riesgo en ese punto del tiempo
La prevalencia puede tomar valores entre cero y uno, pero a veces esta es expresada como
porcentaje al ser multiplicado el valor dado por cien. (Thrusfield, 2007)
1.9 FACTORES DE RIESGO
Los factores de riesgo son características, atributos, eventos o fenómenos variables que
pueden estar asociados a la presentación de una enfermedad. Estos factores de riesgos
pueden ser causales o no causales, aunque algunos autores denominan factores de riesgo
únicamente a los causales e indicadores de riesgo a aquellos no causales. (Thrusfield, 2007)
Un factor de riesgo causal es algún fenómeno de naturaleza física, química, orgánica,
psicológica o social, en el genotipo o en el fenotipo, o alguna enfermedad anterior al efecto
que se está estudiando, que por la variabilidad de su presencia o su ausencia está
relacionada con la enfermedad investigada o es la causa de esta. Se puede hablar de dos
tipos de factores de riesgo: factores de riesgo del ambiente externo, que son aquellos que
pueden ser considerados como asociados con la enfermedad, y factores de riesgo internos,
que son aquellos que pueden ser considerados como predictores de una enfermedad. Se
debe tratar entonces de establecer la relación de los factores de riesgo, externos e internos,
los cuales forman un conjunto de factores responsables de la enfermedad en la comunidad y
en el individuo. La variación en la exposición, tanto en calidad como en cantidad, hacia los
factores de riesgo internos y externos, así como la interacción entre ellos, puede explicar por
qué determinados sujetos expuestos a un factor de riesgo desarrollan una enfermedad,
mientras que otros igualmente expuestos y no presentan dicha enfermedad. (Colimon, 1990)
Un factor de riesgo no causal o indicador de riesgo son aquellos factores que ponen en
manifiesto la presencia temprana o tardía de una enfermedad. Puede estar asociada a la
producción de una enfermedad, como la ictericia está asociada a la hepatitis, pero no es un
factor responsable o causal de esta; por esta razón la supresión de un factor de riesgo no
causal no sirve para la eliminación de una enfermedad, mientras que la eliminación de un
factor de riesgo causal puede ser seguido de una disminución de frecuencia de una
enfermedad en un área dada. (Colimon, 1990)
23
Aun así, no debe olvidarse que la presencia o la exposición a un factor de riesgo no siempre
producen la enfermedad, y que esta puede ser producida por otros factores de riesgo
distintos a aquel que se está estudiando. (Colimon, 1990)
1.10 ESTUDIOS OBSERVACIONALES
Los estudios observacionales son usados para identificar factores de riesgo y estimar los
efectos cuantitativos de varios componentes causales que pueden contribuir a la ocurrencia
de una enfermedad. La investigación se basa en el análisis de la ocurrencia de
enfermedades naturales en poblaciones mediante la comparación de grupos de individuos
respecto a la ocurrencia de la enfermedad y exposición de los factores de riesgo hipotéticos.
Estos estudios difieren de los estudios experimentales en la forma en que el investigador no
es libre de aleatorizar la exposición de los factores en los individuos cosa que si sucede en
los estudios experimentales (Thrusfield, 2007).
1.10.1 Tipos de estudios observacionales
Existen tres tipos principales de estudios observacionales: estudios de cohorte, estudios
de casos y controles y estudios de prevalencia. Cada uno clasifica los sujetos en aquellos
con o sin la enfermedad y aquellos expuestos o no expuesto a un factor hipotético. Cada uno
genera una tabla de contingencia de 2x2 por cada relación enfermedad/factor (Tabla 1). Sin
embargo, los métodos de generación difieren entre los tipos de estudios (Thrusfield, 2007).
Estudios de cohorte: en un estudio de cohorte un grupo de sujetos expuestos a un
factor de riesgo hipotético y un grupo no expuesto a ese factor son seleccionados y
observados para registrar el desarrollo de una enfermedad en cada grupo.
Estudios de casos y controles: en un estudio de casos y controles, un grupo de
sujetos enfermos (casos) y un grupo de sujetos no enfermos (controles), son
seleccionados y comparados respecto a la presencia de un factor de riesgo
hipotético.
Estudios de prevalencia: un estudio de prevalencia conlleva a la selección de una
muestra de n individuos de una población más amplia, y luego se determina, para
cada individuo, de manera simultánea la presencia o ausencia de una enfermedad y
del factor de riesgo; la prevalencia es registrada.
24
Tabla 1 Tabla de contingencia construida en estudios observacionales
Sujetos
enfermos Sujetos No enfermos
Total
Factor de Riesgo Hipotético Presente
a b a + b
Factor de Riesgo Hipotético Ausente
c d c + d
Total a + c b + d a + b + c + d = n
En estudios de cohorte (a+b) y (c+d) están predeterminados.
En estudios de casos y controles (a+c) y (b+d) están predeterminados.
En estudios de prevalencia solo n puede ser predeterminado.
Adaptado de: Thrusfield (2007)
1.11 VALOR PREDICTIVO POSITIVO Y VALOR PREDICTIVO NEGATIVO
Cuando se usan tanto test serológicos para determinar la presencia de una enfermedad
de una población, es importante saberla probabilidad de que un sujeto “positivo” según el
test es realmente positivo; igualmente que un animal negativo en el test es realmente que
negativo. Estas probabilidades son los valores predictivos del test. Los valores predictivos
dependen de la especificidad, sensibilidad y prevalencia. La sensibilidad y especificidad son
características innatas de un test dadas por una población de referencia y son relativamente
estables, pero la prevalencia de una enfermedad en una población que va a ser muestreada
puede afectar la proporción de los animales positivos en el test, PT, con los que realmente
están enfermos. Existen dos componentes de PT: (Thrusfield, 2007).
Los verdaderos positivos.
Los falsos positivos.
La proporción de animales, PT, es entonces:
{P x sensibilidad} + {(1 – P) x (1 – especificidad)}
Entre más baja sea la prevalencia, mayor será la sobreestimación proporcional, que es, un
valor predictivo más bajo. (Thrusfield, 2007)
El valor predictivo positivo del test está dado por:
(1 – P) x sensibilidad
{(1 – P) x sensibilidad} + {P x (1 – especificidad)}
25
El valor predictivo negativo del test está dado por:
(1 – P) x especificidad
{(1 – P) x especificidad} + {P x (1 – sensibilidad)}
Teniendo en cuenta la Tabla 1, el cálculo de estos valores puede ser expresado de manera
más sencilla. (Thrusfield, 2007)
Sensibilidad = a/(a + c).
Especificidad = d/(b + d).
Valor Predictivo Positivo = a/(a + b).
Valor Predictivo Negativo = d/(c + d).
Es necesario tener en cuenta lo siguiente en la tabla de contingencia a realizar para el
hallazgo de los valores predictivos:
a: Verdaderos Positivos (VP)
b: Falsos Positivos (FP)
c: Falsos Negativos (FN)
d: Verdaderos Negativos (VN)
1.12 ODDS RADIO
El odds radio, ψ (psi), es una medición relativa basada en “odds”: el radio de una
probabilidad de un evento ocurrido con la probabilidad de uno no ocurrido. Así mismo el
odds radio tiene diferentes derivaciones dependiendo del estudio observacional en el que es
usado, pero al ser simplificadas las formulas logarítmicas, la fórmula general y simplificada
de odds radio, tomando en cuenta nuevamente la Tabla 1, es:
ad/bc
Este odds radio estima de manera indirecta la relatividad de un riesgo. No existe evidencia
de asociación entre el factor y el daño si (Ψ = 1); Es un factor de riesgo (aumenta el riesgo
de aparición del daño) si (Ψ > 1); y es un factor protector (disminuye el riesgo de aparición
del daño) si (Ψ < 1). (Thrusfield, 2007)
26
2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1 LOCALIZACIÓN
La investigación se realizó en la ciudad de Bogotá D.C, localidad Usaquén, barrio el
Codito, en las instalaciones de la Universidad de La Salle Sede Norte y en las instalaciones
de la Fundación Colombiana de Estudios Parasitológicos (FUNCEP) localizadas en el barrio
Cedritos de la ciudad de Bogotá D.C.
2.2 POBLACIÓN Y MUESTRA
Los datos estimados al inicio de la realización de este proyecto fueron:
Total de estudiantes programa de Medicina Veterinaria: 1140 (Universidad de La Salle)
Prevalencias estimadas: Sarcocystis 68%; Toxoplasma 45% (Becerra, 1992); Brucella
4%. (Morales, 2004)
Prevalencia estimada máxima: 68% para Sarcocystis. (Becerra, 1992)
Error máximo permitido: 4%
Confianza: 95%
Porcentaje de pérdidas y error: 5%
Tamaño total de la muestra: 376 Estudiantes (Epi Info™ 2000)
Al finalizar la toma de muestras y el procesamiento de estas, se tomaron 376 muestras sanguíneas de las cuales se descartaron 4 muestras de las cuales; 3 muestras presentaron proceso de hemólisis y 1 muestra, al realizarse el cuadro hemático, se observó un aumento significativo de más de 14 x 10^9/µl en la línea blanca, lo cual podía llevar a una interferencia en el desarrollo y los resultados de las pruebas a practicar. Por estas razones el total de muestras procesadas fue de 372 muestras.
27
2.3 VARIABLES
Las variables que se manejaron fueron determinadas por la encuesta realizada, dentro
de la cual se encuentran los diversos factores de riesgo hipotéticos dados por la literatura
investigada contra Brucella abortus, Toxoplasma gondii y Sarcocystis spp; Así mismo se
tomó la presencia o no de anticuerpos contra Toxoplasma gondii, y Brucella abortus, y la
presencia de antígeno de Sarcocystis spp.
Por último, fueron tomadas las asignaturas de:
Anatomía
Semiología
Ginecología y Obstetricia
Clínicas de pequeños y grandes animales
Las asignaturas anteriores fueron escogidas debido a la realización de prácticas con
modelos animales vivos y/o muertos, material biológico como sangre, orina, heces, entre
otros; todas estas dentro del pensum universitario de cada una.
2.4 ANALISIS ESTADÍSTICO
Se realizó un estudio de prevalencia, en el cual, según Martin (1997) “se examinan las
relaciones entre las enfermedades o entre las características relacionadas con la salud y
otras variables de interés, del modo en que existen en una población y momento
determinados. La presencia o ausencia de la enfermedad y de las otras variables se
determinan en cada miembro de la población estudiada o en una muestra representativa en
un momento dado.” De igual manera, “los estudios transversales ayudan a valorar las
necesidades de asistencia sanitaria de esas poblaciones estudiadas”. (Beaglehole, 1994)
Para lo anterior, se va a realizó un muestreo por conveniencia voluntario basado en los
parámetros mencionados anteriormente de población y muestra y en el cual se manejaron
las variables descritas.
Se determinó la prevalencia serológica general, teniendo en cuenta los verdaderos positivos
y los falsos negativos, de cada uno de los agentes infecciosos, así como los valores
predictivos positivos y negativos de cada prueba realizada en este estudio.
Frente a los factores de riesgo hipotéticos planteados en la encuesta, se utilizó la medida
estadística Odds radio, para determinar la correlación entre el factor de riesgo hipotético y la
presentación serológica de anticuerpos o antígenos de los agentes infecciosos descritos en
el estudio, según correspondiera; todo esto realizando cuadros de contingencia de 2x2,
28
utilizando el programa Microsoft® EXCEL 2013 para Windows™ 7 Starter, y basados en las
fórmulas dadas por Thrusfield (2007) y correlacionándolos en su análisis con la prevalencia
serológica de la presentación del agente infeccioso para cada uno de los factores de riesgo
hipotéticos planteados en el estudio.
2.5 MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS
2.5.1 Sujetos de estudio
Se realizó una convocatoria a los estudiantes del programa de Medicina Veterinaria de la
Universidad de La Salle, por medio del correo institucional y la publicación de un folleto
(Figura 3) a través de un grupo creado en la red social Facebook®. Lo anterior sumado a la
realización de la convocatoria en los salones de clase de Medicina Veterinaria de la
Universidad de La Salle Sede Norte, con lo cual 376 estudiantes asistieron al sitio de la toma
de la muestra de manera voluntaria, y de las cuales 372 muestras fueron aceptadas para su
procesamiento.
2.5.2 Toma de muestra sanguínea
Las muestras sanguíneas fueron tomadas por una Microbióloga-Bacterióloga posterior a
la firma por parte del estudiante de un consentimiento informado de las posibles
implicaciones que puede llevar una toma de muestra sanguínea. Al mismo tiempo, a cada
Figura 3 Folleto convocatoria estudiantil
29
estudiante participante, se le asignó un número según el orden en que fue tomada la
muestra y que correspondió a la identificación de cada estudiante dentro de la investigación.
Para la toma de muestra, inicialmente se realizó la antisepsia de la zona a puncionar, la cual
fue elegida por criterio de la profesional que realizó la toma de la muestra sanguínea. (Figura
4)
Mediante el uso de una camisa de vacutainer, la profesional realizó la toma de dos muestras
de sangre (una en frasco sin anticoagulante y una en frasco con anticoagulante EDTA), las
cuales fueron necesarias para los análisis laboratoriales en los que se incluyeron un cuadro
hemático, prueba de ELISA, rosa de bengala y 2-Mercaptoetanol (Azumendi, 1997). De igual
manera, siguiendo el manual para la toma de muestras para análisis microbiológico de la
Secretaria Distrital de Salud de Bogotá (2008), se obtuvieron entre 8 y 10 ml de sangre por
estudiantes, divididos en ambos tubos anteriormente mencionados.
Fuente: Autores 2013
2.5.3 Diligenciamiento de la encuesta
Una vez que la muestra de sangre fue tomada, el estudiante diligenció una encuesta
desarrollada en Microsoft® Access 2013, en la que se le preguntó acerca de su exposición o
no a los factores de riesgo hipotéticos planteados y escogidos, según la literatura consultada,
para este estudio. (Figura 5)
Figura 4 Toma de muestra sanguínea
30
Fuente: Autores 2013
2.5.4 Realización del cuadro hemático
Por medio de la maquina Human Count®, utilizando la muestra del tubo con
anticoagulante EDTA, se procedió a realizar el cuadro hemático respectivo a cada muestra
sanguínea tomada, con el objetivo de realizar un parámetro de control inicial, para descartar
aquellas muestras que presentaran un aumento en la línea blanca superior a 14 x 10^9/µl,
debido a que esto podía causar interferencia y por lo tanto resultados erróneos en las
pruebas a realizar. (Figura 6)
Fuente: Autores 2013
Figura 6 Maquina Human Count® para cuadros hemáticos
Figura 5 Estudiante diligenciando la encuesta
31
2.5.5 Extracción del suero
Después de haber realizado la toma de la muestra sanguínea en el tubo sin
anticoagulante, cada muestra fue centrifugada en la maquina Kokusan® a 2000rpm durante
10 minutos. Posteriormente, a cada muestra se le tomó el suero mediante el uso de una
micro pipeta y fue colocado en un vial marcado con el número correspondiente a la
identificación de cada muestra.
2.5.6 Almacenamiento de la muestra
Después de la extracción del suero, éste se congeló en las instalaciones de FUNCEP a
una temperatura entre -18°C y -22°C hasta que se completó el número total de muestras
requeridas para el desarrollo del estudio. (Figura 7)
Fuente: Autores 2013
2.5.7 Prueba de Rosa de Bengala
Para la detección de títulos de anticuerpos frente a Brucella abortus mediante la prueba
de Rosa de Bengala, se llevó a cabo el siguiente descrito por el Ministerio de Salud y
Protección Social (2012):
Descongelamiento de los sueros a temperatura ambiente, posteriormente en una placa de
vidrio seccionada de 12x6, se colocaron, por cada sección utilizando una micro pipeta, 20µl
de rosa de bengala y 20µl de cada suero sin diluir; Utilizando un palillo de madera para cada
una de las secciones, se realizó la mezcla del suero con la Rosa de Bengala hasta obtener
una mezcla homogénea, este proceso se llevó a cabo por filas individuales de 12 secciones.
Figura 7 Congelamiento de muestras
32
Al finalizar cada fila, de forma manual con un movimiento circular de la placa de vidrio
durante 3 minutos (Figura 8), se realizó de forma continua la reacción entre los dos
componentes mezclados. Finalizado este proceso, la placa de vidrio fue observada a luz de
un bombillo en búsqueda de la formación de una aglutinación la cual toma un color blanco
grisáceo dando a conocer la presencia de la de anticuerpos contra Brucella abortus en el
suero muestreado.
Los sueros que tuvieron un resultado positivo a la prueba de Rosa de Bengala, fueron
sometidos a la prueba de 2-Mercaptoetanol para realizar una confirmación tal y como lo
recomienda Megid et. al (2000)
Fuente: Autores 2013
2.5.8 Prueba de 2-Mercaptoetanol
A aquellos sueros que mostraron seroaglutinación en la prueba de Rosa de Bengala, les
fue practicada la prueba de 2-mercaptoetanol. Para realizar esta prueba, en 4 tubos de
ensayo fueron colocados para cada tubo 100µl de 2-mercaptoetanol más una cantidad de
suero colocado de la siguiente manera: para el primer tubo se colocaron 5µl de suero,
segundo tubo se colocó 10µl de suero, en el tercer tubo 20µl de suero y cuarto tubo 40µl de
suero. (Figura 9)
Las mezclas se encubaron durante 1 hora y luego se agregó 100µl de antígeno de 2-
mercaptoetanol. Se encubó durante 40 horas después de las cuales se confirmó los títulos
de Brucella abortus por la presencia de aglutinación en cada tubo. Al observar en que tubo
se presentó aglutinación se determinaron los títulos.
Figura 8 Montaje y mezcla manual de la prueba Rosa de Bengala
33
Fuente: Autores 2013
2.5.9 Test de ELISA para detección de IgG contra Toxoplasma gondii
Se utilizó la prueba HUMAN ELISA TOXO IgG la cual está basada en la clásica técnica
ELISA. Los micropocillos ELISA son recubiertos con antígenos de toxoplasma (TOXO-Ag)
preparados con parásitos toxoplasma gondii (taquizoitos). El procedimiento realizado fue el
procedimiento indicado por la Empresa Farmacéutica HUMAN® para el kit ELISA TOXO IgG
en placas de 98 micropocillos, de las cuales se montaron 6 micropocillos controles por placa.
Para la primera etapa de incubación, los anticuerpos anti-TOXO (anti-TOXO-Ac) contenidos
en la prueba o el control se fijan específicamente a los antígenos inmovilizados. Al final de la
incubación, la cual tiene una duración de 30 minutos, los componentes excesivos fueron
eliminados por lavado, el cual fue realizado en la maquina Serono®.
En la segunda etapa de incubación, se añadió un conjugado anti-IgG (anticuerpos anti-IgG-
humana, marcados con peroxidasa), que se fija específicamente a los anticuerpos IgG y se
forman inmunocomplejos típicos. Después de eliminar el conjugado excesivo por lavado
(segunda etapa de lavado), se añadió TMB/substrato (etapa 3), el cual toma un color azul
que se transforma a amarillo después de detener la reacción (Figura 10); la intensidad de
este color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos anti-TOXO IgG en la
muestra. La absorbancia de los controles y muestras se determinó haciendo uso de un lector
de micropocillos ELISA completamente automatizado (instrumentos de las líneas
HUMAREADER®). Los resultados de los pacientes se obtuvieron por estimación cuantitativa
en UI/ml basándose en una curva de calibración construida con el valor del control de punto
de corte y 3 controles positivos.
Los procedimientos de lavado son críticos, debido a que un lavado insuficiente produciría
una mala precisión o absorbancias falsamente elevadas: Para el Lavado 1 se removieron las
tiras adhesivas protectoras colocadas para la incubación inicial, se aspiró el contenido (en un
envase con solución de hipoclorito de Sodio al 5%), agregando WHAS (solución de lavado
Figura 9 Tubos de prueba de 2-mercaptoetanol encubando
34
incluida en el kit), aspirando después de aproximadamente 30 segundos y repitiendo el
lavado 4 veces. Para el Lavado 2, se llenaron y enjuagaron con WASH los pocillos 5 veces.
En todo momento se aseguró que los pocillos eran llenados completamente y aspirados
después de 30 segundos (líquido remanente < 15µl). El Lavado 3 se realizó la eliminación de
los micropocillos después de que fueron obtenidos sus valores de absorbancia, para esto se
removió el líquido remanente invirtiendo los micropocillos sobre papel absorbente.
Fuente: Autores (2013)
2.5.10 Test de ELISA para detección de antígeno de Sarcocystis spp.
El procedimiento del test de ELISA para la detección de antígenos contra Sarcocystis
spp. fue realizado por el doctor José Luis Azumendi, director científico de FUNCEP.
El procedimiento indicado por el Dr. Azumendi fue la preparación de una solución de
Acetilcisteina (Acc) con el doble de la concentración de saturación; posterior a ello se mezcló
en un tubo de ensayo por partes iguales de cada suero problema sin diluir y la solución de
Acetilcisteina (Acc). Esta mezcla se incubó a 37°C durante una hora. Pasada la hora, se le
añadió 50µl de esta mezcla a los micropocillos y se incubó nuevamente a 37°C durante 1
hora. Transcurrido ese tiempo se realizó un lavado 5 veces con PBS-tween al 0.5%. Se
añadió la solución reveladora y se dejó incubar a una temperatura ambiente y en oscuridad
por 10 minutos; al finalizar el tiempo se frenó la reacción y se leyó la absorbancia a 630
nanómetros contra blanco aire.
Figura 10 Micropocillos de ELISA después de detener la reacción
35
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
3.1 BRUCELLA ABORTUS
Para la prueba Rosa de bengala, se aceptó como positivo aquella muestra que mostrara
evidencia de seroaglutinación. De 372 muestras procesadas para Brucella abortus se obtuvo
un resultado de 371 muestras negativas al test de Rosa de Bengala y 1 muestra positiva al
test de Rosa de Bengala, muestra que dio un resultado de 1/100 incompleto a la
confirmación en 2-mercaptoetanol y que confirma la presencia de anticuerpos. Esta lectura a
la prueba de 2-mercaptoetanol, puede entenderse con lo descrito por Thrusfield (2007) quien
explica que algunos anticuerpos son incompletos y por esta razón no pueden tomar parte de
la reacción antígeno/anticuerpo del test, además, ocasionalmente anticuerpos bloqueantes
previenen la reacción antígeno/anticuerpo, lo cual es llamada efecto prozono.
3.1.1 Prevalencia y valores predictivos
Se realizó una tabla de contingencia de 2x2 (Tabla 2) para la validación de la prueba
realizada y teniendo en cuenta la sensibilidad de 95% y la especificidad del 95% dados por el
fabricante, se hallaron los valores de prevalencia, sensibilidad, especificidad, valor predictivo
positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN), usando las formulas establecidas por
Thrusfield (2007).
Tabla 2 Tabla de contingencia de 2x2 para la validación prueba rosa de bengala
Rosa de Bengala Enfermedad
presente Enfermedad
ausente Totales
Positiva 0.95 0.05 1
Negativa 18.55 352.45 371
Total 19.5 352.5 372
36
Los valores hallados fueron:
Debido a que solo se halló 1 caso positivo de las 372 muestras estudiadas, se obtuvo una
prevalencia de 1 estudiante positivo por cada 500 estudiantes (1:500); por esta razón se
realizó el hallazgo de la prevalencia teniendo en cuenta los verdaderos positivos (0.95) y los
falsos negativos (18.55), hallados matemáticamente con los datos de sensibilidad y
especificidad dados por el fabricante de la prueba Rosa de bengala, obteniendo de esta
manera una prevalencia serológica hallada del 5%. Por esta razón, y adicionando que el
número de muestras positivas es sólo de 1, estadísticamente, su análisis y el hallazgo del
odds radio para los factores de riesgo hipotético no tiene validez, ya que como lo describe
Thrusfield (2007): “El odds radio no puede ser calculado cuando una tabla de contingencia
contiene valores de cero”; razón por la cual, solo se realizó la recopilación de la presencia o
ausencia de los factores de riesgo hipotéticos planteados en la encuesta realizada. Aun así,
es necesario analizar medicamente la muestra positiva hallada en el estudio.
En el hombre la brucelosis es una enfermedad sistémica en la que cualquier órgano del
cuerpo puede estar afectado, el periodo de incubación varía entre 1 y 5 semanas y la
infección puede ser sintomática o asintomática. El establecimiento de los síntomas puede ser
agudo o insidioso. Una vez en el organismo la Brucella induce la activación de los
mecanismos de defensa que se inician con la participación de algunos componentes de la
inmunidad innata y adaptativa. Dentro de los mecanismos innatos se enumeran: El
complemento, los neutrófilos y los macrófagos y dentro de los mecanismos adaptativos se
cuentan con los linfocitos CD4 t, CD8 t, linfocitos B, y producción de citoquinas, en ese
sentido, el agente puede desarrollar mecanismos de solapamiento inmunológico y persistir
durante años en el huésped, con mayor facilidad las cepas lisas, incluyendo aquellas que se
usan en la inmunización de bovinos y bufalinos. (Spplitter, 2003) Al ser el hombre un
huésped accidental que no desempeña ningún papel en el mantenimiento de la enfermedad,
la brucelosis humana se contrae por contacto directo con el animal infectado y por ingestión
de leche o derivados del animal enfermo; el grupo de edad más afectado es el entre los 20 y
60 años, o sea el correspondiente a la edad laboral (Ashford et al., 2004; Doganay y
Bilgehan, 2003; Jaramillo y Gómez, 1985). En el ser humano la enfermedad y sus trastornos
acortan la esperanza de vida y la capacidad de trabajo. Por sus secuelas, sobre todo las
articulares, provoca un gran número de incapacidades laborales, a las que se añaden las
posibles indemnizaciones. (Doganay, 2003) Es por esto que los tamizajes ocupacionales son
requeridos permanentemente para ejercer vigilancia epidemiológica sobre este grupo
específico, ya que la sintomatología clínica es poco frecuente entre los individuos positivos y
las infecciones tempranas se podrían detectar precozmente, por medio de pruebas
diagnósticas de un bajo costo. (Reyes, Sanchez , A lotero, Restrepo, & G palacio, 2010)
Prevalencia 0.05
Sensibilidad 0.05
Especificidad 1.00
VPP 0.95
VPN 0.95
37
3.1.2 Factores de riesgo hipotéticos para Brucella abortus
Frente a los factores de riesgo hipotéticos planteados en la encuesta para Brucella
abortus (Tabla 3), se encontró que un porcentaje importante de los estudiantes participantes
han realizado prácticas con bovinos dentro del pensum universitario; de igual manera se
observa la realización de palpación de bovinos por parte de los estudiante, aunque es
preocupante que más de la mitad de los estudiantes que han realizado palpación en bovinos
hacen uso de una manga de palpación en varios animales. Así mismo, es importante resaltar
el hecho de que la mayoría de los estudiantes en caso de una ruptura de la manga de
palpación realiza el cambio de esta.
Tabla 3 Recopilación presencia y ausencia factores de riesgo hipotéticos para Brucella abortus
Porcentaje estudiantes
Factor de riesgo hipotético Si No
Practicas con bovinos 85.2 14.8
Palpación de bovinos 60.8 39.2
Uso de manga de palpación en varios animales 55.7 44.3
Cambio de manga de palpación por ruptura 97.1 2.9
Lavado adecuado de manos después de las practicas
37.2 62.8
Consumo de leche cruda 34.9 65.1
Consumo de lácteos y derivados 99.5 0.5
El lavado adecuado de manos después de las prácticas, teniendo en cuenta que este lavado
se determina como el enjuague con jabón durante 3 minutos, incluyendo la limpieza en las
yemas de los dedos y debajo de las uñas, es un ítem preocupante debido al gran porcentaje
de estudiantes que no lo realiza. De igual manera, se observa con interés la presencia de un
porcentaje importante de estudiantes que reportan el consumo de leche cruda.
Teniendo en cuenta lo mencionado anteriormente, es interesante el hecho de observar una
presentación relativamente alta en los factores de riesgo planteados, frente a una
prevalencia serológica baja de Brucella abortus. Lo anterior puede explicarse debido a que el
ICA en el programa nacional de control y de erradicación de la brucelosis bovina ha
establecido la vacunación obligatoria de las terneras entre 3 y 8 meses de edad, con las
vacunas cepa 19 o cepa RB51, en dos ciclos de vacunación anual. (Tique 2009)
38
La Universidad de La Salle, ha reportado de manera verbal a los autores de este estudio,
que las fincas donde son realizadas las practicas universitarias con bovinos, poseen los
certificados de ser libres de Brucella, lo cual podría explicar el hecho de que la presentación
de los diversos factores de riesgo no estén relacionados con el hallazgo de anticuerpos en
las muestras serológicas. De igual manera, la vacunación contra Brucella no es por
estudiantes, por lo cual, en este estudio, no fue tenido en cuenta como factor de riesgo, el
realizar vacunación en bovinos.
3.2 TOXOPLASMA GONDII
El montaje de cada una de las pruebas de ELISA fue inicialmente validado con el
cumplimiento de 4 criterios dados por el fabricante que son:
Absorbancia de Blanco < 0.150
Control Negativo (NC) < Control Positivo (CC)
Control Positivo Medio (PCM) > 0.750
Control Positivo Medio (PCM) : Control Negativo (NC) > 5
Debido a que el montaje de las 372 muestras fue realizado usando 5 kits de HUMAN TOXO
ANTI-IgG se halló la Desviación Estándar (S) y el Coeficiente de Variación (CV) para los
micropocillos controles que consisten en Blanco, Control Negativo (NC), Control Positivo
(CC), Control Positivo Bajo (PCL), Control Positivo Medio (PCM) y Control Positivo Alto
(PCH) respectivamente (Tabla 4).
Tabla 4 Desviación Estándar y coeficiente de variación de los micropocillos controles del test HUMAN TOXO ANTI-IgG
Montaje
1 Montaje
2 Montaje
3 Montaje
4 Montaje
5 Promedio S CV
Blanco 0.143 0.062 0.041 0.038 0.037 0.064 0.045 70%
NC 0.050 0.128 0.055 0.049 0.034 0.063 0.037 59%
CC 0.273 0.208 0.268 0.252 0.239 0.248 0.026 11%
PCL 0.857 0.681 0.815 0.755 0.762 0.774 0.067 9%
PCM 1.718 1.130 1.787 1.546 1.501 1.536 0.256 17%
PCH 2.158 1.596 2.195 2.007 2.167 2.025 0.251 12%
Se analizó el CV de los 4 micropocillos de los controles positivos, aceptándose un CV menor
a 20% lo cual permitió el análisis de las 372 muestras procesadas de manera conjunta. Se
aceptó como positivo aquella muestra que presentara una absorbancia mayor o igual a 0.1,
de las cuales se obtuvo un resultado de 299 muestras negativas y 73 muestras positivas al
test de ELISA para detección de Anticuerpos IgG contra Toxoplasma gondii.
39
3.2.1 Prevalencia y valores predictivos
Se realizó una tabla de contingencia de 2x2 (Tabla 5) para la validación de la prueba
realizada, y teniendo en cuenta la sensibilidad de 95% y la especificidad del 95% dados por
el fabricante, se hallaron los valores de prevalencia, sensibilidad, especificidad, valor
predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN), usando las formulas establecidas
por Thrusfield (2007)
Tabla 5 Tabla de contingencia de 2x2 para validación de la prueba de ELISA para Toxoplasma gondii
ELISA
Enfermedad presente
Enfermedad ausente
Totales
Positiva 69.35 3.65 73
Negativa 14.95 284.05 299
Total 84.3 287.7 372
Los valores hallados fueron:
Prevalencia 0.23
Sensibilidad 0.82
Especificidad 0.99
VPP 0.95
VPN 0.95
Se observa una prevalencia serológica de 23% para anticuerpos IgG de Toxoplasma gondii
con un total de 73 muestras positivas por lo cual se realizó el hallazgo del odds radio y su
correspondiente análisis para los factores de riesgo hipotéticos planteados en la encuesta.
40
3.2.2 Factores de riesgo hipotéticos para Toxoplasma gondii
Se realizó una tabla de contingencia de 2x2 para cada uno de los factores de riesgo
hipotéticos planteados y se halló el odds radio. Los resultados hallados son presentados en
la
Tabla 6
Tabla 6 Tablas de contingencia y odds radio de los factores de riesgo planteados para Toxoplasma gondii
Factor Descripción
Factor Positivo Negativo
Prevalencia (%)
Odds Radio
Genero Sexual
Femenino 47 215 17.9
0.7 Masculino 26 84 23.6
Practicas Anatomía 1
Si 66 269 19.7 1.1
No 7 30 18.9
Practicas Semiología
Si 49 188 20.7 1.2
No 24 111 17.8
Practicas Ginecología y
Obstetricia
Si 34 139 19.7 1.0
No 39 160 19.6
Prácticas Clínicas
Si 20 80 20.0 1.0
No 53 219 19.5
Practicas Pensum
Si 67 256 20.7 1.9
No 6 43 12.2
Practicas con Perros y/o Gatos
Si 62 241 20.5
0.8 No 5 15 25.0
Realiza el lavado adecuado de
manos después de practicas
Si 27 91 22.9
1.2
No 40 165 19.5
Tiene contacto Si 70 289 19.5 0.8
41
Factor Descripción
Factor Positivo Negativo
Prevalencia (%)
Odds Radio
con animales fuera de la Universidad
No 3 10 23.1
Realiza trabajos en clínicas veterinarias
Si 50 219 18.6 0.8
No 23 80 22.3
Posee un gato como mascota
Si 24 107 18.3 0.9
No 49 192 20.3
Realiza la limpieza de las heces del gato
Si 21 100 17.4 1.0
No 3 14 17.6
Realiza actividades de
Jardinería
Si 16 45 26.2
1.6
No 57 254 18.3
Consumo de Carne Mal
Cocida
Si 45 158 22.2 1.4
No 28 141 16.6
Consumo de agua No potable
Si 42 162 20.6 1.1
No 31 137 18.5
Realiza el lavado de los vegetales
que consume
Si 72 286 20.1 3.3
No 1 13 7.1
Consumo de comidas Rápidas
Si 69 276 20.0 1.4
No 4 23 14.8
Realiza el lavado de manos antes
de comer
Si 65 271 19.3 0.8
No 8 28 22.2
Se encontró que para este estudio, el cursar las asignaturas de Ginecología y obstetricia, y
clínicas, así como el realizar la limpieza de las heces fecales del gato, no tiene asociación
con la presentación de anticuerpos IgG contra Toxoplasma gondii.
Se observó una prevalencia menor en las mujeres, lo cual se asocia de igual manera al
hallazgo de Ψ=0.7 que asocia al género femenino como un género con menor riesgo a
presentar seropositividad frente a T. gondii. Lo anterior es mencionado por Cortes (2012)
quien reporta: “Por genero se ha encontrado evidencia acerca de diferencias significativas en
la prevalencia de anticuerpos contra T. gondii entre hombres y mujeres. Sin embargo, el
aumento del riesgo de seropositividad en los hombres encontrado en un estudio de
prevalencia con 134 personas es explicado por los autores por una menor atención en el
momento de la limpieza y preparación de los alimentos.”
42
Se observa en los resultados obtenidos, que el cursar Anatomía I y Semiología, representan
un factor de riesgo para la presentación de anticuerpos IgG. Lo anterior puede relacionarse
con el aumento del número de prácticas con animales o modelos biológicos que se llevan a
dentro del pensum de estas asignaturas. De igual manera, cabe destacar que el realizar
prácticas con animales que están incluidas dentro del pensum universitario, sin tener
asociación con las materias que el estudiante pueda estar cursando, se puede asociar con la
presentación de anticuerpo IgG al presentar un Ψ=1.9, lo cual lleva a determinar que la
presencia serológica de anticuerpo contra Toxoplasma gondii esta mayormente asociada a
las practicas universitarias con animales y no a las asignaturas que el estudiante se
encuentra cursando.
Aun así, es de resaltar el resultado obtenido al planteamiento de las practicas realizadas
específicamente con perros y gatos, la cual muestra un resultado de Ψ=0.8 y que contrario a
lo esperado, para este estudio es un factor protector. Teniendo en cuenta lo descrito por Lora
(2007): “La prevalencia del parásito en las distintas especies, puede guardar relación con
factores como la edad del animal, las condiciones sanitarias y de bioseguridad de la granja,
el tipo de producción, el sexo, la presencia de insectos, animales silvestres y foráneos,
especialmente, gatos seropositivos y la cantidad de roedores infectados; además, el sistema
de control empleado, el tipo de protección utilizada para las fuentes de agua, el tamaño de la
granja, la cercanía a las poblaciones urbanas y el uso de productos concentrados fabricados
con materias primas de origen animal deben tenerse en cuenta”, debe decirse que las
practicas realizadas en fincas y con animales de producción, pueden llevar a que el
estudiante tenga contacto con diferentes factores de riesgo como el consumo de agua no
potable, consumo de carne mal cocida y consumo de comidas rápidas, que para este estudio
tuvieron un Ψ=1.1, Ψ=1.4 y Ψ=1.4 respectivamente. Esto se relaciona con los estudios
realizados por Cortes et. al (2012) en que se afirma que: “el consumo de agua de la llave o
agua sin filtrar aumenta el riesgo de infección, comparado con el consumo de agua de
botella o filtrada. Así mismo al realizar la admisión de gatos callejeros o que salgan a la calle,
se tiene más riesgo que el animal adquiera por consumo de carne cruda o por el consumo de
roedores y aves el toxoplasma”. El consumo de agua de no potable, la admisión de gatos
callejeros en las instalaciones de la finca que puedan contaminar el agua o la comida, y el
consumo de alimentos mal preparados, son situaciones que se presentan en las
explotaciones pecuarias a las que los estudiantes son llevados para realizar sus prácticas;
situaciones que no ocurren en las practicas realizadas con perros y gatos exclusivamente, ya
que estas últimas son desarrolladas dentro de las instalaciones universitarias, donde el
estudiante tiene a su disposición facilidades para el consumo de agua potable y el consumo
de alimentos preparados adecuadamente, lo cual podría explicar el hecho de que la
realización de prácticas con animales en general, sea un factor de riesgo, y que la
realización de prácticas exclusivamente con perros y gatos, siendo estos animales
normalmente asociados con la presentación de toxoplasma, sea un factor protector.
El realizar un lavado adecuado de las manos después del desarrollo de las prácticas, dio
como resultado para este estudio un Ψ=1.2. Siendo el lavado de manos, una de las
recomendaciones realizadas para la prevención de toxoplasma, tal y como lo describe
Urueña (2003) “se debe informar sobre la importancia que tiene el lavado de las manos
43
después de tener contacto con tierra, animales, carne cruda o personas que han tenido
contacto con lo anteriormente descrito, para la prevención de contagio con Toxoplasma
gondii”, es necesario correlacionar este resultado con la frecuencia en que se realiza este
lavado (Figura 11Figura 11 Frecuencia del lavado de manos después de las prácticas).
Aunque 161 estudiantes contesta que siempre realiza el lavado de sus manos, la suma de la
cantidad de estudiantes que no lo hace con esta misma frecuencia es de 162, lo cual puede
explicar el hecho de que el realizar el lavado adecuado de manos después de las practicas
tenga un Ψ=1.2 que lo asocia como factor de riesgo en este estudio, pues este lavado de
manos no se realiza con la frecuencia debida por parte de la mayoría de los estudiantes y
por ende, los efectos esperados al realizar esta medida preventiva no se observan en el
resultado de un odds radio que lo califique como protector. Lo anterior demuestra que la
manera de realizar el lavado de manos después de las prácticas y la frecuencia con la que
este lavado es realizado, están altamente relacionadas.
El contacto con animales fuera de la universidad, el trabajo en clínicas particulares y el
poseer un gato como mascota poseen un Ψ=0.8, Ψ=0.8 y Ψ=0.9 respectivamente. Lo
anterior asocia, en este estudio, a estos tres factores como protectores. Según lo descrito
por Thrusfield (2007) “algunos sujetos puede mostrar una tolerancia inducida a los antígenos
y por lo tanto pueden no producir anticuerpos cuando entran en contacto con el agente”, esta
tolerancia puede explicarse debido a que los 3 factores mencionados, conducen a un
contacto constante con animales posiblemente portadores de Toxoplasma gondii, lo cual
podría dar como resultado la aparición de falsos negativos en el test de ELISA para
detección de IgG. Así mismo, no puede descartarse la posibilidad de que el trabajo en las
clínicas veterinarias particulares por parte de los estudiantes los lleve al uso de medidas de
bioseguridad que realmente los protejan del contacto con este agente infeccioso; así como el
17
51
92
161
2
Frecuencia Lavado de Manos Déspues de Practicas
Pocas Veces Algunas Veces Casi Siempre Siempre Nunca
Figura 11 Frecuencia del lavado de manos después de las prácticas
44
hecho de que las persona que poseen como mascota a un gato, en la mayoría de los casos,
poseen mayor información acerca de cómo prevenir una infección por Toxoplasma gondii, y
que manejen la tenencia del gato restringiendo su salida y evitando de esta manera el
contacto directo por consumo de roedores y aves contaminadas o quistes en el suelo, tal
como lo describe la OMS (2008). Lo anterior explica el por qué el odds radio hallado de estos
tres factores los asocia como factores protectores.
Es necesario lavar completamente todos los utensilios que están en contacto con la carne
cocida, usar guantes al cultivar en un huerto o cuando se trabaje teniendo contacto con el
suelo. Si es posible, mantenga a los gatos en el interior del domicilio durante todo el
embarazo y no los alimente con carne sin cocer (PAHO/WHO, 2008). De igual manera, las
labores de jardinería, deben realizarse usando medidas de protección como lo son guantes
(Cortes, y otros, 2012). Lo anterior plantea como factor de riesgo para el contagio de
Toxoplasma gondii las actividades de jardinería; factor de riesgo que se presenta dentro de
los resultados de este estudio con un Ψ=1.6, y que lleva a la necesidad de profundizar la
manera en que los estudiantes están realizando este tipo de actividades.
El último factor de riego planteado fue el lavado de vegetales que se consumen por parte del
estudiante; se halló un Ψ=3.3 lo cual lo asocia como un factor de riesgo y que dentro de los
resultados de este estudio es el más significativo. Nuevamente al ser el lavado de los
vegetales una de las medidas de prevención altamente propuestas por organismos como la
OMS y la PAHO, se entró a analizar la frecuencia con la que se realiza el lavado de estos.
Para lo anterior se realizó una tabla de contingencia de 2x2 tomando en cuenta como factor
el lavado en una frecuencia de Siempre de los vegetales y como ausencia de este factor,
cualquier frecuencia diferente. Los resultados hallados se exponen en la Tabla 7.
Tabla 7 Tabla de contingencia de 2x2 para la frecuencia Siempre en el lavado de vegetales que consume
Factor Descripción Positivo Negativo Prevalencia
(%) Odds Radio
Lava siempre los vegetales que
consume
Si 53 227 18.9
0.8 No 20 72 21.7
Relacionando los resultados de la Tabla 7, podemos observar que el realizar siempre el
lavado de los vegetales a consumir, se puede asociar como un factor protector frente a la
aparición de anticuerpos IgG contra Toxoplasma gondii, lo cual permite concluir que la
frecuencia en el lavado de los vegetales es determinante para que el consumo de estos sea
un factor de riesgo o un factor protector. De igual manera, cabe resaltar que este estudio no
tuvo en cuenta la calidad del agua con la que los vegetales eran lavados y que relacionado
con el consumo de agua no potable, podría ser otro factor influyente en la presentación de
un Ψ=3.3 en el factor planteado del lavado de los vegetales que se consumen por parte de
los estudiantes.
45
Desde el criterio profesional que un estudiante de medicina veterinaria va adquiriendo
durante el desarrollo de su carrera, en los resultados de este estudio se observan falencias
en el apropiamiento, por parte de los estudiantes, de las medidas de bioseguridad y su
importancia para evitar el contacto y contagio con agentes infecciosos. Para el caso
específico de Toxoplasma gondii, se observa que en este estudio, los estudiantes tienen
unos criterios de prevención alto para aquellos factores que estén relacionados con el
manejo de gatos, animal mayoritariamente relacionado con este agente zoonótico, pero que
no tienen cuenta aquellos factores que pueden llevar a un contacto con este agente y que no
requieren de un contacto directo con el gato.
Continuando con lo mencionado anteriormente, siendo los médicos veterinarios aquellos
profesionales con mayor conocimiento y manejo acerca de las zoonosis, y siendo
profesionales que se encuentran en riesgo debido a sus actividades laborales, se encontró
en este estudio un déficit en la adopción de medidas preventivas básicas como lo es el
lavado de manos, vegetales o el consumo de alimentos debidamente preparados. Esto lleva
a analizar que los estudiantes de medicina veterinaria no solo presentan un mayor riesgo
para el contacto con el Toxoplasma gondii debido a la realización de prácticas universitarias
con animales o modelos biológicos, si no que la realización de estas prácticas, los lleva a un
aumento en la exposición a los factores de riesgo a los que puede exponerse la población en
general.
3.3 SARCOCYSTIS SPP.
Se aceptó como positiva a aquellas muestras que presentaron una cantidad de antígeno
mayor o igual a 30. De 372 muestras procesadas para Sarcocystis spp. se obtuvo un
resultado de 163 muestras negativas y 209 muestras positivas al test de ELISA para la
detección de antígeno.
3.3.1 Prevalencia y valores predictivos
Se realizó una tabla de contingencia de 2x2 (Tabla 8) para la validación de la prueba
realizada, y teniendo en cuenta la sensibilidad de 95% y la especificidad del 95% dados por
el fabricante, se hallaron los valores de prevalencia, sensibilidad, especificidad, valor
predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN), usando las formulas establecidas
por Thrusfield (2007).
46
Tabla 8 Tabla de contingencia de 2x2 para la validación de la prueba ELISA para Sarcocystis spp.
ELISA
Enfermedad presente
Enfermedad ausente
Totales
Positiva 198.55 10.45 209
Negativa 8.15 154.85 163
Total 206.7 165.3 372
Los resultados obtenidos fueron:
Prevalencia 0.56
Sensibilidad 0.96
Especificidad 0.94
VPP 0.95
VPN 0.95
Se observa una prevalencia serológica de 56% para antígeno de Sarcocystis spp. con un
total de 209 muestras positivas por lo cual se realizó el hallazgo del odds radio y su
correspondiente análisis para los factores de riesgo hipotéticos planteados en la encuesta.
3.3.2 Factores de riesgo hipotéticos para Sarcocystis spp.
Se realizó una tabla de contingencia de 2x2 para cada uno de los factores de riesgo
hipotéticos planteados y se halló el odds radio. Los resultados hallados son presentados en
la Tabla 9.
Tabla 9 Tablas de contingencia de 2x2 y odds radio para los factores de riesgo planteados
para Sarcocystis spp.
Factor Descripción
Factor Positivo Negativo
Prevalencia (%)
Odds Radio
Genero Sexual Femenino 150 112 57.3
1.2 Masculino 59 51 53.6
Prácticas Anatomía 1
Si 188 147 56.1 1.0
No 21 16 56.8
47
Factor Descripción
Factor Positivo Negativo
Prevalencia (%)
Odds Radio
Prácticas Semiología
Si 137 100 57.8 1.2
No 72 63 53.3
Prácticas Ginecología y
Obstetricia
Si 104 69 60.1
1.3 No 105 94 52.8
Prácticas Clínicas
Si 59 41 59.0 1.2
No 150 122 55.1
Practicas Pensum
Si 184 139 57.0 1.3
No 25 24 51.0
Practicas con Perros y/o Gatos
Si 174 128 57.6 1.5
No 10 11 47.6
Realiza el lavado adecuado de
manos después de practicas
Si 69 49 58.5
1.1
No 115 90 56.1
Tiene contacto con animales
fuera de la Universidad
Si 200 159 55.7
0.6 No 9 4 69.2
Realiza trabajos en clínicas
Si 155 114 57.6 1.2
No 54 49 52.4
Posee un Perro y/o Gato como
mascota
Si 165 130 55.9 1.0
No 44 33 57.1
Realiza la limpieza de las
heces de la mascota
Si 149 124 54.6 0.6
No 25 12 67.6
Realiza actividades de
Jardinería
Si 34 27 55.7 1.0
No 175 136 56.3
Consumo de Carne Mal
Cocida
Si 107 96 52.7 0.7
No 102 67 60.4
Consumo de agua No potable
Si 116 88 56.9 1.1
No 93 75 55.4
Realiza el lavado de vegetales que
consume
Si 207 160 56.4 1.9
No 2 3 40.0
48
Factor Descripción
Factor Positivo Negativo
Prevalencia (%)
Odds Radio
Consumo de comidas Rápidas
Si 198 246 44.6 1.2
No 11 17 39.3
Realiza el lavado de manos antes
de comer
Si 52 36 59.1 1.2
No 157 127 55.3
Se encontró que para este estudio, el cursar la asignatura de Anatomía I, el tener perros y/o
gatos como mascota y el realizar actividades de jardinería, no tienen asociación con la
presentación de antígeno de Sarcocystis spp.
Aunque las prevalencias encontradas, tanto para hombres como para mujeres, fueron
superiores al 50%, se encontró una prevalencia mayor en las mujeres que se relaciona con
un Ψ=1.2 asociando a el género femenino como un género con mayor riesgo de
seropositividad a antígeno de Sarcocystis spp. Cabe resaltar que no existen estudios
anteriores que relacionen el género sexual con la presentación de sarcocistosis o el hallazgo
de antígeno de Sarcocystis spp.
Las asignaturas de semiología, ginecología y obstetricia y clínicas presentaron un Ψ=1.2,
Ψ=1.3 y Ψ=1.2 respectivamente, los que las asocia como un factor de riesgo para la
presentación de seropositividad frente a Sarcocystis spp. y que al igual que en el análisis de
Toxoplasma gondii, se observa una relación entre la asignatura y el aumento de la
realización de prácticas dentro del pensum universitario. De igual manera se halló un Ψ=1.3
para el factor planteado de la realización de prácticas con animales dentro del pensum
universitario. Lo anterior lleva a concluir que nuevamente el riesgo de presentación de
antígeno de Sarcocystis spp. está relacionado mayoritariamente con la realización de
prácticas sin importar la asignatura que se esté cursando.
Dentro de las prácticas desarrolladas en el pensum universitario, se encuentran las practicas
realizadas exclusivamente con perros y/o gatos en las cuales se obtuvo un Ψ=1.5; esto se
contrasta con la no asociación de presentar antígeno de Sarcocystis spp si se posee como
mascota a un perro y/o gato por parte del estudiante. Teniendo en cuenta que “el perro
(Canis familiaris) es el hospedero definitivo de S. aucheniae y el S. lamacanis. Éste
constituye una fuente contaminante de los pastos al eliminar los ooquistes por medio de sus
heces. (Parra, Velez, & Casallas, 2012) y los experimentos reportados por Jurado (2009) en
donde los perros alimentados con carne congelada (-10x10dias), cocida por 5 minutos y
deshidratada (charqui), no eliminaron esporoquistes, se puede deducir que la ausencia de
relevancia del factor mascotas, se debe a los cuidados dados por los dueños y las
restricciones que estos pueden imponer dentro de su alimentación previniendo el contagio
con estos agentes infecciosos, esto sumado a que la gran parte de los animales (perros o
gatos) con los que los estudiantes realizan sus prácticas, son animales sin un lugar de
vivienda definido o que no son alimentados con las restricciones necesarias y que pueden
tener contacto con el agente infeccioso y convertirse en una fuente de infección.
49
Teniendo en cuenta que el realizar un lavado de manos adecuado presentó un Ψ=1.1 y que
lo asocia como factor de riesgo, nuevamente se correlaciona este factor con lo descrito
anteriormente en la Figura 11 y lo descrito por Parra, Velez y Casallas (2012) donde
mencionan que los alimentos contaminados con restos fecales a través de las manos sucias
pueden causar la infección por consumo de los ooquistes; por tal motivo, se reitera la
importancia de la frecuencia con la que se realiza el lavado de manos adecuado, y que
demuestra que estos dos factores (frecuencia y lavado), están directamente relacionados en
la presentación de seropositividad frente al antígeno de Sarcocystis spp, relación que puede
asociarse también con el factor de lavarse las manos antes de comer y que obtuvo un
Ψ=1.2, reforzando la hipótesis planteada frente a esta asociación.
Se observa que el contacto con animales fuera de la universidad tiene una asociación como
factor protector con un Ψ=0.6 mientras que el trabajo en clínicas veterinarias particulares
tiene una asociación como factor de riesgo con un Ψ=1.2. Esto puede estar relacionado al
modo de transmisión del agente infeccioso (eliminación por heces fecales), dándose a
entender que el contacto con animales no está obligatoriamente relacionado con el manejo
de heces fecales, mientras que el trabajo en clínicas veterinaria particulares si conlleva el
contacto directo con heces fecales u otros fluidos de animales posiblemente portadores del
Sarcocystis spp y que pueden actuar como fuente de infección.
En este estudio se obtuvo un Ψ=0.7 para el consumo de carne mal cocida, lo cual lo asocia
como un factor protector. Esto es explicado debido al proceso de almacenamiento que sufre
la carne ya que como es descrito por Jurado (2009) “Los tratamientos físico de cocción,
horneado y congelación se han demostrado que pueden tener un efecto saneante de la
carne” y que se reflejado en el hecho de que aunque “el hombre se infecta por carnivorismo,
al ingerir carne insuficientemente cocida de vacuno o porcino infectado respectivamente con
sarcoquistes maduros de S. bovihominis o S. suihominis” (Parra, Velez, & Casallas, 2012)
existen estudios en modelos animales los cuales evidencias “que la cocción, congelación y
deshidratación de carne infectada con micro y macro quistes de sarcocystis constituyen
medios efectivos para la destrucción e inactivación de este parásito” (Jurado, 2009).
Aun así, analizando los resultados obtenidos en este estudios al preguntar sobre la
frecuencia del consumo, se observa que un aumento en la frecuencia del consumo de carne
mal cocida, aunque sigue siendo asociado como un factor protector, estadísticamente su
protección va disminuyendo al acercarse su odds radio a 1, tal y como se muestra en la
Tabla 10
Tabla 10 Tablas de contingencia de 2x2 y odds radio para la frecuencia del consumo de carne mal cocida
Frecuencia Consumo
Descripción Factor
Positivo Negativo Prevalencia
(%) Odds Radio
Pocas veces al
año
Si 107 96 52.7 0.7
No 102 67 60.4
Pocas Si 58 57 50.4 0.7
50
Frecuencia Consumo
Descripción Factor
Positivo Negativo Prevalencia
(%) Odds Radio
veces al mes
No 151 106 58.8
2 o menos veces a la semana
Si 25 25 50.0 0.8
No 184 138 57.1
3 o más veces a la semana
Si 21 21 50.0 0.8
No 188 142 57.0
Todos los días
Si 6 5 54.5 0.9
No 203 158 56.2
El consumo de comidas rápidas dio como resultado un Ψ=1.2, esto puede deberse también a
puntos relacionados con el aseo y la contaminación de los alimentos mencionados
anteriormente. Además, el consumo de comidas rápidas está relacionado con los sitios
donde estas son consumidas y que pueden llevar a deficiencias en la cocción y el
almacenamiento, pues aunque el congelamiento reduce la viabilidad de los quistes, estudios
realizados por Jurado (2009) demuestran que “la refrigeración (4°C x 30 días) no tuvo ningún
efecto sobre la viabilidad de los quistes ya que los perros inoculados de este grupo
eliminaron esporoquistes entre 10 y 12 días post infección”
Al igual que en el análisis para Toxoplasma gondii, el lavado de los vegetales que se
consumen tiene un Ψ=1.9 que lo asocia en este estudio como un factor de r iesgo.
Nuevamente es necesaria una correlación con la manera en que este lavado es realizado, ya
que el uso de agua no potable, la cual tuvo un Ψ=1.1 para su consumo, y que como es
mencionado por Parra et. Al (2012) “El vehículo de transmisión del Sarcocystis spp. Puede
ser el agua”, hecho que puede llevar a que el realizar una acción posiblemente preventiva,
se convierta en un factor de riesgo como en este estudio.
Desde el criterio profesional del médico veterinario obtenido durante el proceso de formación
académica que se lleva a cabo, se obtuvo conocimiento de enfermedades y sus respectivos
factores de riesgo y medidas que ayuden a la prevención y tratamiento de estas. En este
estudio se observó que el Sarcocystis spp es una enfermedad zoonotica que puede llegar a
ser de alto impacto, por las posibilidades, que los estudiantes de medicina veterinaria, tienen
de entrar en contacto directo, debido a que en las practicas del pensum académico se
interactúa con perros, gatos o bovinos que pueden transmitir la enfermedad, lo cual sumado
a el manejo de las medidas de bioseguridad, hábitos de alimentación y manejo adecuado de
vegetales de cada estudiante, los resultados pueden variar entre cada uno.
Para Sarcocystis spp. se observó un desconocimiento general dentro de la población
estudiantil, lo cual lleva a que no se implementen las medidas de bioseguridad necesarias,
pero que debido a su parecido con el Toxoplasma gondii, se puede observar un
comportamiento similar en lo que respecta a presencia o ausencia de los principales factores
de riesgo. El médico veterinario debe aumentar su conocimiento frente a este agente
51
zoonótico, lo cual le permitirá obtener las capacidades y habilidades necesarias para
colaborar en la prevención y mitigación del contacto con Sarcocystis spp.
52
4. CONCLUSIONES
Los estudiantes de medicina veterinaria, al estar en contacto constante con animales
o modelos biológicos que pueden ser potenciales fuentes de infección, presentan un
mayor riesgo de tener contacto con agentes infecciosos zoonóticos que la población
que no desarrolla actividades con animales o modelos biológicos. A esto se suma el
hecho de que actividades que pueden ser un factor de riesgo para el contagio de
enfermedades zoonóticas para la población en general, se pueden ver estimuladas
debido a los lugares y las condiciones en las que se llegan a realizar algunas de las
practicas universitarias contempladas en el pensum, lo cual lleva a un aumento del
riesgo de contagio con enfermedades zoonóticas en la población estudiantil.
La realización de prácticas universitarias con modelos animales vivos, es un factor de
riesgo importante presente en los estudiantes de Medicina Veterinaria de la
Universidad de La Salle, sin discriminar la especie animal en que estas son
realizadas. Esto es debido a que el estudiante no solo tiene contacto directo con las
especies involucradas en la cadena de transmisión, sino porque durante el desarrollo
de estas prácticas, puede encontrarse expuestos a factores de riesgo que están
involucrados en la cadena de transmisión, incluso de enfermedades que no están
relacionadas con la especie en la que se esté llevando a cabo la práctica. Es por esto
que se deben tener en cuenta la manera y frecuencia con las que los estudiantes
realizan las medidas de bioseguridad y medidas de higiene personal durante y
después de las prácticas, para poder determinar el verdadero riesgo que se tiene.
El consumo de carne como factor de riesgo para el contagio de estas enfermedades
zoonóticas, se ve ampliamente afectado en su relevancia, debido a la frecuencia de
consumo, tipo de carne, lugar donde se consume y el almacenamiento de la carne
que se consume. Por esta razón, los resultados obtenidos muestran una marcada
variabilidad, ya que varias de estas condiciones asociadas mencionadas, no fueron
tenidas en cuenta para el desarrollo de este estudio y por lo tanto el resultado
obtenido no puede ser tomado como concluyente para todas las situaciones en las
que pueda presentarse el consumo de carne mal cocida. De igual manera debe
tomarse en cuenta lo mencionado anteriormente, acerca de las circunstancias a las
que los estudiantes se ven expuestos dentro de sus prácticas universitarias.
53
El lavado de vegetales y el lavado de manos de manera adecuada después del
desarrollo de las prácticas, no se realiza de manera rutinaria, por tal razón, se
presentan como un factor de riesgo asociado a esta enfermedad y deben tenerse en
cuenta para la transmisión de estos agentes infecciosos.
Aunque se halló una presencia importante de los factores de riesgo planteados en la
literatura para el contagio de Brucella abortus, la prevalencia hallada en los
estudiantes de Medicina Veterinaria de la Universidad de La Salle no fue significativa
estadísticamente, esto debido a que los diferentes sitios de práctica habilitados por la
Universidad, cumplen el requerimiento exigido por el Instituto Colombiano
Agropecuario (ICA), de ser libres de Brucella. Por lo tanto, los bovinos que son
usados dentro de las prácticas universitarias no son reservorio de Brucella abortus y
por ende no hay transmisión de este agente infeccioso dentro de las prácticas
universitarias.
La presencia de seropositividad frente a anticuerpos IgG contra Toxoplasma gondii,
puede relacionarse con la realización de prácticas con animales dentro del pensum
universitario, sin importar la especie animal con que se realice ni la asignatura en que
se puedan estar realizando estas prácticas; aun así, es necesario tener en cuenta
que a medida que se va avanzando en el desarrollo del programa de la carrera, hay
un aumento en el número de prácticas realizadas por el estudiante, y por esta razón
puede haber un aumento de este riesgo a medida que se avanza en el desarrollo de
la carrera.
El poseer como mascota a un gato, no es un factor de riesgo relevante para la
presentación de anticuerpos IgG contra Toxoplasma gondii. Por esta razón es
importante analizar las condiciones en que el gato es mantenido, los hábitos
alimenticios, y las restricciones de salida fuera del domicilio donde el gato vive.
En la comunidad educativa existe un desconocimiento general acerca del Sarcocystis
spp, y por ende, no se toman las medidas necesarias para su prevención, que
aunque muchas pueden ser las mismas que para Toxoplasma gondii, aquellas
medidas preventivas adicionales, no son realizadas ni tenidas en cuenta, por parte de
los estudiantes, lo cual se ve reflejado en una prevalencia serológica alta.
54
5. RECOMENDACIONES
Se recomienda realizar campañas de divulgación y educación acerca de las medidas
preventivas para evitar el contagio de cualquier enfermedad zoonótica en la
institución educativa, pues en este estudio, se observa una exposición alta a los
factores de riesgo estudiados y reportados en este y en otros estudios.
Se recomienda que la Universidad de La Salle, por medio del programa de Medicina
Veterinaria y sus semilleros de investigación, realice nuevas investigaciones en el
área de la salud pública en las cuales se pueda tener una mayor cooperación por
parte de las directivas, lo cual se vería reflejado en la posibilidad de realizar
muestreos estadísticos que permitan la obtención de resultados con menor
variabilidad y por ende, resultados con mayor significancia estadística.
Los estudiantes de medicina veterinaria, se encuentran constantemente en riesgo de
contacto con agentes infecciosos zoonóticos, debido a que dentro del desarrollo de
sus actividades durante la carrera, se recomienda que los estudiantes se realicen de
manera individual exámenes de laboratorio de control, no solo frente a los agentes
zoonóticos presentes en este estudio, sino a cualquier enfermedad zoonótica
relacionada directa o indirectamente con el área de trabajo en la que el estudiante se
pueda estar desempeñando. Lo anterior debe realizarse con el apoyo de la institución
educativa la cual se debe encargar de la coordinación y puesta a disposición de
facilidades para llevar a cabo la realización de estos exámenes, mediante convenios
con instituciones prestadoras de salud.
Se recomienda realizar este estudio en otras instituciones educativas que ofrezcan el
programa de Medicina Veterinaria en el país, para poder obtener un panorama más
amplio y acertado, acerca de la situación real de las enfermedades zoonóticas en una
población en riesgo como son los estudiantes de Medicina Veterinaria. Así mismo, se
recomienda la realización de este tipo de estudios con otras enfermedades
zoonóticas y tomando modelos de estudios observacionales como el estudio de
cohorte, que podrían llevar a resultados con mayor precisión.
El Médico Veterinario tiene un papel importante en la promoción de medidas
preventivas y prevención de contagio frente a todo de enfermedades zoonóticas, por
lo cual, es necesario que desde la formación del estudiante como futuro profesional,
55
este se empodere de la importancia de estas acciones en el ámbito de la Salud
Publica.
Siendo la prevalencia serológica de Sarcocystis spp. la prevalencia más alta
encontrada en este estudio, sumado al desconocimiento general frente a este agente
zoonótico, se recomienda realizar más estudios que ofrezcan mayor disponibilidad de
datos para este agente infeccioso en diferentes tipos de poblaciones, y que puedan
llevar al planteamiento de medidas de prevención adecuadas.
Se recomienda realizar nuevamente un estudio en el cual se tenga en cuenta todas
las sepas de Brucella reportadas por la literatura que sean pertinentes para el Médico
Veterinario.
56
6. BIBLIOGRAFIA
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60
ANEXOS
ANEXO A. Resultados serológicos para las pruebas de Rosa de Bengala para Brucella abortus, test de ELISA para detección de anticuerpos IgG para Toxoplasma gondii y test de ELISA para detección de antígeno para Sarcocystis spp.
Tabla 11 Resultados de las pruebas serológicas para Brucella abortus, Toxoplasma gondii y Sarcocystis spp.
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
1 Negativo 0.026 Negativo 0.00 Negativo
2 Negativo 0.124 Positivo 47.40 Positivo
3 Negativo 0.072 Negativo 104.50 Positivo
4 Negativo 0.097 Negativo 84.80 Positivo
8 Negativo 0.080 Negativo 18.13 Negativo
9 Negativo 0.098 Negativo 0.00 Negativo
10 Negativo 0.070 Negativo 23.20 Negativo
11 Negativo 0.084 Negativo 44.20 Positivo
12 Negativo 0.053 Negativo 18.50 Negativo
13 Negativo 0.075 Negativo 0.00 Negativo
14 Positivo 1/100 Incompleto 0.074 Negativo 3.40 Negativo
15 Negativo 0.078 Negativo 47.40 Positivo
16 Negativo 0.204 Positivo 53.30 Positivo
17 Negativo 0.094 Negativo 64.50 Positivo
18 Negativo 0.058 Negativo 60.70 Positivo
19 Negativo 0.050 Negativo 107.30 Positivo
20 Negativo 0.203 Positivo 0.00 Negativo
21 Negativo 0.067 Negativo 31.30 Positivo
22 Negativo 2.208 Positivo 50.40 Positivo
23 Negativo 0.058 Negativo 90.20 Positivo
24 Negativo 0.123 Positivo 12.60 Negativo
25 Negativo 0.084 Negativo 81.50 Positivo
26 Negativo 0.057 Negativo 11.00 Negativo
61
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
27 Negativo 0.063 Negativo 25.70 Negativo
28 Negativo 0.099 Negativo 33.40 Positivo
29 Negativo 0.099 Negativo 0.00 Negativo
30 Negativo 0.138 Positivo 0.00 Negativo
31 Negativo 0.085 Negativo 331.60 Positivo
33 Negativo 0.049 Negativo 0.00 Negativo
34 Negativo 0.044 Negativo 0.00 Negativo
35 Negativo 0.044 Negativo 5.00 Negativo
37 Negativo 0.077 Negativo 49.40 Positivo
38 Negativo 0.072 Negativo 53.70 Positivo
39 Negativo 0.088 Negativo 62.50 Positivo
40 Negativo 0.098 Negativo 0.00 Negativo
41 Negativo 0.079 Negativo 47.40 Positivo
42 Negativo >3.00 Positivo 104.50 Positivo
43 Negativo 0.068 Negativo 84.80 Positivo
44 Negativo 0.055 Negativo 63.60 Positivo
45 Negativo 0.111 Positivo 59.30 Positivo
46 Negativo 0.077 Negativo 114.50 Positivo
47 Negativo 0.074 Negativo 81.50 Positivo
48 Negativo 0.072 Negativo 7.30 Negativo
49 Negativo 0.065 Negativo 38.20 Positivo
50 Negativo 0.063 Negativo 100.00 Positivo
51 Negativo 0.054 Negativo 0.00 Negativo
52 Negativo 0.074 Negativo 23.60 Negativo
53 Negativo 0.051 Negativo 91.80 Positivo
54 Negativo 0.054 Negativo 40.40 Positivo
55 Negativo 2.063 Positivo 17.00 Negativo
56 Negativo 0.066 Negativo 29.30 Negativo
57 Negativo 0.159 Positivo 44.30 Positivo
58 Negativo 0.098 Negativo 19.30 Negativo
59 Negativo 0.059 Negativo 76.70 Positivo
60 Negativo 0.050 Negativo 64.50 Positivo
62
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
61 Negativo 0.066 Negativo 144.90 Positivo
62 Negativo 0.053 Negativo 82.30 Positivo
63 Negativo 0.067 Negativo 99.10 Positivo
64 Negativo 0.064 Negativo 18.50 Negativo
65 Negativo 0.078 Negativo 0.00 Negativo
66 Negativo 0.084 Negativo 3.40 Negativo
67 Negativo 0.064 Negativo 47.40 Positivo
68 Negativo 0.100 Positivo 53.30 Positivo
69 Negativo 0.059 Negativo 64.50 Positivo
70 Negativo 0.043 Negativo 60.70 Positivo
71 Negativo 0.064 Negativo 107.30 Positivo
72 Negativo 0.043 Negativo 0.00 Negativo
73 Negativo 0.048 Negativo 70.90 Positivo
74 Negativo 0.069 Negativo 0.00 Negativo
75 Negativo 0.067 Negativo 0.00 Negativo
76 Negativo 1.932 Positivo 0.00 Negativo
77 Negativo 0.044 Negativo 0.00 Negativo
78 Negativo 0.040 Negativo 0.00 Negativo
79 Negativo 0.088 Negativo 0.00 Negativo
80 Negativo 0.098 Negativo 16.00 Negativo
81 Negativo 0.052 Negativo 36.50 Positivo
82 Negativo 0.051 Negativo 3.00 Negativo
83 Negativo 0.056 Negativo 0.00 Negativo
84 Negativo 0.056 Negativo 25.60 Negativo
85 Negativo 0.031 Negativo 36.00 Positivo
86 Negativo 0.112 Positivo 90.40 Positivo
87 Negativo 0.047 Negativo 0.00 Negativo
88 Negativo 2.712 Positivo 10.00 Negativo
89 Negativo 0.044 Negativo 33.80 Positivo
90 Negativo 0.163 Positivo 41.60 Positivo
91 Negativo 0.056 Negativo 130.50 Positivo
92 Negativo 0.045 Negativo 51.60 Positivo
63
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
93 Negativo 0.062 Negativo 22.60 Negativo
94 Negativo 0.051 Negativo 36.60 Positivo
95 Negativo 0.114 Positivo 58.00 Positivo
96 Negativo 0.101 Positivo 41.60 Positivo
97 Negativo 0.084 Negativo 35.70 Positivo
98 Negativo 0.069 Negativo 10.00 Negativo
99 Negativo 0.072 Negativo 29.50 Negativo
100 Negativo 0.067 Negativo 0.00 Negativo
101 Negativo 0.056 Negativo 20.40 Negativo
102 Negativo 0.066 Negativo 0.00 Negativo
103 Negativo 0.060 Negativo 36.40 Positivo
104 Negativo 0.055 Negativo 0.00 Negativo
105 Negativo 0.106 Positivo 0.00 Negativo
106 Negativo 0.091 Negativo 24.50 Negativo
107 Negativo 0.069 Negativo 38.40 Positivo
108 Negativo 0.064 Negativo 36.00 Positivo
109 Negativo 0.051 Negativo 65.60 Positivo
110 Negativo 0.062 Negativo 41.00 Positivo
111 Negativo 0.093 Negativo 61.30 Positivo
112 Negativo 1.530 Positivo 63.00 Positivo
113 Negativo 0.085 Negativo 47.40 Positivo
114 Negativo 0.188 Positivo 78.40 Positivo
115 Negativo 0.128 Positivo 0.00 Negativo
116 Negativo 0.064 Negativo 84.40 Positivo
117 Negativo 0.056 Negativo 70.50 Positivo
118 Negativo 0.118 Positivo 85.50 Positivo
119 Negativo 0.120 Positivo 60.70 Positivo
120 Negativo 0.053 Negativo 0.00 Negativo
121 Negativo 0.075 Negativo 0.00 Negativo
122 Negativo 0.081 Negativo 0.00 Negativo
123 Negativo 0.070 Negativo 12.00 Negativo
124 Negativo 0.080 Negativo 0.00 Negativo
64
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
125 Negativo 0.089 Negativo 7.70 Negativo
126 Negativo 0.091 Negativo 37.10 Positivo
127 Negativo 0.395 Positivo 82.70 Positivo
128 Negativo 0.067 Negativo 37.80 Positivo
129 Negativo 0.269 Positivo 50.50 Positivo
130 Negativo 0.056 Negativo 0.00 Negativo
131 Negativo 0.097 Negativo 58.00 Positivo
132 Negativo 2.255 Positivo 0.00 Negativo
133 Negativo 0.046 Negativo 120.00 Positivo
134 Negativo 0.047 Negativo 0.00 Negativo
135 Negativo 0.041 Negativo 0.00 Negativo
136 Negativo 0.058 Negativo 0.00 Negativo
137 Negativo 0.066 Negativo 0.00 Negativo
138 Negativo 0.076 Negativo 20.50 Negativo
139 Negativo 0.075 Negativo 0.00 Negativo
140 Negativo 0.150 Positivo 68.40 Positivo
141 Negativo 0.058 Negativo 169.30 Positivo
142 Negativo 0.059 Negativo 70.60 Positivo
143 Negativo 0.236 Positivo 82.30 Positivo
144 Negativo 0.056 Negativo 25.60 Negativo
145 Negativo 0.053 Negativo 13.00 Negativo
146 Negativo 0.060 Negativo 0.00 Negativo
147 Negativo 0.941 Positivo 29.00 Negativo
148 Negativo 0.098 Negativo 73.00 Positivo
149 Negativo 0.091 Negativo 215.80 Positivo
150 Negativo 0.067 Negativo 170.50 Positivo
151 Negativo 0.080 Negativo 144.50 Positivo
152 Negativo 0.055 Negativo 16.80 Negativo
153 Negativo 0.06 Negativo 104.00 Positivo
154 Negativo 2.163 Positivo 99.60 Positivo
155 Negativo 2.959 Positivo 126.90 Positivo
156 Negativo 0.054 Negativo 137.50 Positivo
65
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
157 Negativo 0.047 Negativo 241.50 Positivo
158 Negativo 0.083 Negativo 203.40 Positivo
159 Negativo 0.059 Negativo 58.00 Positivo
160 Negativo 0.062 Negativo 0.00 Negativo
161 Negativo 0.059 Negativo 130.10 Positivo
162 Negativo 0.067 Negativo 0.00 Negativo
163 Negativo 0.084 Negativo 35.40 Positivo
164 Negativo 0.065 Negativo 0.00 Negativo
165 Negativo 0.104 Positivo 153.70 Positivo
166 Negativo 2.056 Positivo 0.00 Negativo
167 Negativo 0.059 Negativo 46.70 Positivo
168 Negativo 1.024 Positivo 0.00 Negativo
169 Negativo 0.043 Negativo 0.00 Negativo
170 Negativo 0.071 Negativo 289.00 Positivo
171 Negativo 0.112 Positivo 152.70 Positivo
172 Negativo 2.143 Positivo 280.30 Positivo
173 Negativo 0.059 Negativo 209.60 Positivo
174 Negativo 1.914 Positivo 190.90 Positivo
175 Negativo 0.090 Negativo 293.40 Positivo
176 Negativo 0.060 Negativo 277.00 Positivo
177 Negativo 0.071 Negativo 133.60 Positivo
178 Negativo 0.086 Negativo 183.60 Positivo
179 Negativo 0.064 Negativo 311.60 Positivo
180 Negativo 0.067 Negativo 253.40 Positivo
181 Negativo 0.077 Negativo 362.00 Positivo
182 Negativo 2.362 Positivo 284.50 Positivo
183 Negativo 0.205 Positivo 389.00 Positivo
184 Negativo 0.080 Negativo 304.70 Positivo
185 Negativo 0.047 Negativo 236.60 Positivo
186 Negativo 1.080 Positivo 343.50 Positivo
187 Negativo 1.216 Positivo 260.20 Positivo
188 Negativo 0.094 Negativo 144.50 Positivo
66
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
189 Negativo 0.081 Negativo 257.00 Positivo
190 Negativo 0.783 Positivo 399.60 Positivo
191 Negativo 0.146 Positivo 156.70 Positivo
192 Negativo 0.076 Negativo 136.00 Positivo
193 Negativo 0.042 Negativo 281.50 Positivo
194 Negativo 0.059 Negativo 327.40 Positivo
195 Negativo 0.066 Negativo 119.40 Positivo
196 Negativo 0.103 Positivo 25.00 Negativo
197 Negativo 0.073 Negativo 73.80 Positivo
198 Negativo 0.058 Negativo 96.30 Positivo
199 Negativo 0.052 Negativo 162.70 Positivo
200 Negativo 0.051 Negativo 95.20 Positivo
201 Negativo 0.072 Negativo 66.60 Positivo
202 Negativo 0.282 Positivo 183.40 Positivo
203 Negativo 0.052 Negativo 0.00 Negativo
204 Negativo 0.053 Negativo 0.00 Negativo
205 Negativo 0.084 Negativo 23.80 Negativo
206 Negativo 0.064 Negativo 59.40 Positivo
207 Negativo 0.054 Negativo 21.60 Negativo
208 Negativo 0.067 Negativo 0.00 Negativo
209 Negativo 0.047 Negativo 48.80 Positivo
210 Negativo 0.029 Negativo 87.90 Positivo
211 Negativo 0.096 Negativo 22.50 Negativo
212 Negativo 0.116 Positivo 15.30 Negativo
213 Negativo 0.073 Negativo 37.50 Positivo
214 Negativo 0.050 Negativo 132.90 Positivo
215 Negativo 0.071 Negativo 24.60 Negativo
216 Negativo 0.038 Negativo 0.00 Negativo
217 Negativo 0.058 Negativo 39.40 Positivo
218 Negativo 0.035 Negativo 22.40 Negativo
219 Negativo 2.314 Positivo 2.00 Negativo
220 Negativo 0.060 Negativo 5.00 Negativo
67
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
221 Negativo 0.056 Negativo 47.00 Positivo
222 Negativo 0.048 Negativo 29.30 Negativo
223 Negativo 2.013 Positivo 36.60 Positivo
224 Negativo 0.045 Negativo 51.50 Positivo
225 Negativo 0.038 Negativo 64.60 Positivo
226 Negativo 0.052 Negativo 18.50 Negativo
227 Negativo 0.054 Negativo 174.40 Positivo
228 Negativo 0.066 Negativo 0.00 Negativo
229 Negativo 0.085 Negativo 184.70 Positivo
230 Negativo 0.064 Negativo 4.60 Negativo
231 Negativo 0.078 Negativo 36.60 Positivo
232 Negativo 0.054 Negativo 0.00 Negativo
233 Negativo 0.053 Negativo 0.00 Negativo
234 Negativo 0.045 Negativo 0.00 Negativo
235 Negativo 0.064 Negativo 4.70 Negativo
236 Negativo 0.096 Negativo 0.00 Negativo
237 Negativo 0.068 Negativo 0.00 Negativo
238 Negativo 0.056 Negativo 27.60 Negativo
239 Negativo 1.273 Positivo 0.00 Negativo
240 Negativo 0.039 Negativo 19.10 Negativo
241 Negativo 0.055 Negativo 117.40 Positivo
242 Negativo 0.048 Negativo 98.50 Positivo
243 Negativo 0.093 Negativo 20.60 Negativo
244 Negativo 0.163 Positivo 50.60 Positivo
245 Negativo 0.084 Negativo 142.40 Positivo
246 Negativo 0.052 Negativo 0.00 Negativo
247 Negativo 0.089 Negativo 85.30 Positivo
248 Negativo 1.912 Positivo 0.00 Negativo
249 Negativo 0.059 Negativo 0.00 Negativo
250 Negativo 2.075 Positivo 39.70 Positivo
251 Negativo 0.068 Negativo 162.70 Positivo
252 Negativo 0.048 Negativo 64.20 Positivo
68
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
253 Negativo 0.144 Positivo 28.60 Negativo
254 Negativo 0.050 Negativo 0.00 Negativo
255 Negativo 0.043 Negativo 12.50 Negativo
256 Negativo 0.074 Negativo 82.10 Positivo
257 Negativo 0.049 Negativo 47.90 Positivo
258 Negativo 0.045 Negativo 151.10 Positivo
259 Negativo 0.031 Negativo 36.00 Positivo
260 Negativo 0.028 Negativo 0.00 Negativo
261 Negativo 0.054 Negativo 6.30 Negativo
262 Negativo 0.028 Negativo 108.50 Positivo
263 Negativo 0.028 Negativo 123.40 Positivo
264 Negativo 0.039 Negativo 116.00 Positivo
265 Negativo 0.078 Negativo 163.60 Positivo
266 Negativo 0.026 Negativo 84.30 Positivo
268 Negativo 0.087 Negativo 96.60 Positivo
269 Negativo 0.073 Negativo 148.00 Positivo
270 Negativo 0.074 Negativo 67.20 Positivo
271 Negativo 0.042 Negativo 59.00 Positivo
272 Negativo 2.765 Positivo 61.60 Positivo
273 Negativo 0.048 Negativo 8.80 Negativo
274 Negativo 0.057 Negativo 27.30 Negativo
275 Negativo 0.043 Negativo 80.40 Positivo
276 Negativo 0.059 Negativo 64.70 Positivo
277 Negativo 0.075 Negativo 21.70 Negativo
278 Negativo 0.049 Negativo 148.20 Positivo
279 Negativo 0.054 Negativo 37.80 Positivo
280 Negativo 0.049 Negativo 50.00 Positivo
281 Negativo 0.042 Negativo 128.40 Positivo
282 Negativo 1.840 Positivo 64.50 Positivo
283 Negativo 0.062 Negativo 142.50 Positivo
284 Negativo 0.051 Negativo 84.60 Positivo
285 Negativo 0.052 Negativo 90.30 Positivo
69
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
286 Negativo 0.047 Negativo 51.70 Positivo
287 Negativo 0.947 Positivo 82.30 Positivo
288 Negativo 0.061 Negativo 39.90 Positivo
289 Negativo 0.069 Negativo 28.00 Negativo
290 Negativo 0.048 Negativo 7.70 Negativo
291 Negativo 0.072 Negativo 0.00 Negativo
292 Negativo 0.07 Negativo 191.80 Positivo
293 Negativo 0.056 Negativo 103.40 Positivo
294 Negativo 0.964 Positivo 183.00 Positivo
295 Negativo 1.534 Positivo 111.40 Positivo
296 Negativo 0.091 Negativo 43.30 Positivo
297 Negativo 0.048 Negativo 29.90 Negativo
298 Negativo 0.051 Negativo 83.70 Positivo
299 Negativo 0.038 Negativo 0.00 Negativo
300 Negativo 0.063 Negativo 8.30 Negativo
301 Negativo 0.054 Negativo 42.70 Positivo
302 Negativo 0.048 Negativo 0.00 Negativo
303 Negativo 1.720 Positivo 5.00 Negativo
304 Negativo 0.189 Positivo 0.00 Negativo
305 Negativo 0.105 Positivo 24.50 Negativo
306 Negativo 0.149 Positivo 16.40 Negativo
307 Negativo 0.071 Negativo 36.50 Positivo
308 Negativo 0.053 Negativo 40.30 Positivo
309 Negativo 0.050 Negativo 69.30 Positivo
310 Negativo 0.036 Negativo 44.20 Positivo
311 Negativo 0.041 Negativo 137.00 Positivo
312 Negativo 0.060 Negativo 51.00 Positivo
313 Negativo 0.037 Negativo 26.40 Negativo
314 Negativo 0.044 Negativo 70.20 Positivo
315 Negativo 0.041 Negativo 158.30 Positivo
316 Negativo 0.043 Negativo 86.20 Positivo
317 Negativo 0.077 Negativo 20.10 Negativo
70
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
318 Negativo 0.051 Negativo 21.30 Negativo
319 Negativo 0.093 Negativo 0.00 Negativo
320 Negativo 0.082 Negativo 0.00 Negativo
321 Negativo 0.058 Negativo 38.10 Positivo
322 Negativo 0.081 Negativo 46.30 Positivo
323 Negativo 0.084 Negativo 127.30 Positivo
324 Negativo 0.059 Negativo 17.30 Negativo
325 Negativo 0.049 Negativo 35.20 Positivo
326 Negativo 1.842 Positivo 0.00 Negativo
327 Negativo 0.127 Positivo 94.40 Positivo
328 Negativo 0.055 Negativo 4.00 Negativo
329 Negativo 0.171 Positivo 92.60 Positivo
330 Negativo 0.168 Positivo 1.00 Negativo
331 Negativo 0.053 Negativo 0.00 Negativo
332 Negativo 0.051 Negativo 59.40 Positivo
333 Negativo 0.051 Negativo 27.30 Negativo
334 Negativo 0.068 Negativo 0.00 Negativo
335 Negativo 0.071 Negativo 0.00 Negativo
336 Negativo 0.057 Negativo 63.30 Positivo
337 Negativo 0.050 Negativo 0.00 Negativo
338 Negativo 0.125 Positivo 16.50 Negativo
339 Negativo 0.042 Negativo 0.00 Negativo
340 Negativo 0.053 Negativo 0.00 Negativo
341 Negativo 0.067 Negativo 20.40 Negativo
342 Negativo 0.049 Negativo 19.00 Negativo
343 Negativo 0.077 Negativo 173.40 Positivo
344 Negativo 0.057 Negativo 21.00 Negativo
345 Negativo 0.041 Negativo 173.40 Positivo
346 Negativo 0.052 Negativo 0.00 Negativo
347 Negativo 0.082 Negativo 26.30 Negativo
348 Negativo 0.172 Positivo 34.40 Positivo
349 Negativo 0.047 Negativo 45.30 Positivo
71
Brucella abortus Toxoplasma gondii Sarcocystis spp.
Muestra Rosa de Bengala
2-Mercaptoetanol
Absorbancia Interpretación Cantidad
de Antígeno
Interpretación
350 Negativo 0.049 Negativo 40.00 Positivo
351 Negativo 0.069 Negativo 18.50 Negativo
352 Negativo 0.768 Positivo 0.00 Negativo
353 Negativo 0.093 Negativo 173.60 Positivo
354 Negativo 0.173 Positivo 27.30 Negativo
355 Negativo 0.042 Negativo 12.00 Negativo
356 Negativo 1.265 Positivo 28.40 Negativo
357 Negativo 0.062 Negativo 39.30 Positivo
358 Negativo 0.044 Negativo 19.20 Negativo
359 Negativo 0.061 Negativo 0.00 Negativo
360 Negativo 0.089 Negativo 20.50 Negativo
361 Negativo 0.063 Negativo 68.40 Positivo
362 Negativo 0.062 Negativo 73.60 Positivo
363 Negativo 0.054 Negativo 6.00 Negativo
364 Negativo 0.063 Negativo 0.00 Negativo
365 Negativo 0.070 Negativo 0.00 Negativo
366 Negativo 0.039 Negativo 0.00 Negativo
367 Negativo 2.730 Positivo 0.00 Negativo
368 Negativo 0.064 Negativo 75.60 Positivo
369 Negativo 0.091 Negativo 18.50 Negativo
370 Negativo 2.606 Positivo 165.80 Positivo
371 Negativo 0.063 Negativo 157.00 Positivo
372 Negativo 0.043 Negativo 28.00 Negativo
373 Negativo 0.038 Negativo 33.00 Positivo
374 Negativo 0.080 Negativo 0.00 Negativo
375 Negativo 0.051 Negativo 5.50 Negativo
376 Negativo 0.079 Negativo 26.00 Negativo
377 Negativo 0.045 Negativo 42.30 Positivo
378 Negativo 0.066 Negativo 49.30 Positivo
72
ANEXO B. Resultados cuadros hemáticos realizados a las muestras sanguíneas tomadas.
Tabla 12 Resultados cuadros hemáticos.
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
1 4.76 1.14 0.27 3.34 24 5.7 70.3 5.85 165 55.67 95 28.2 296 12.7 239
8 7.17 2.36 0.3 4.51 33 4.1 62.9 6.07 161 52.54 87 26.5 306 13.2 209
9 6 1.66 0.15 4.2 27.6 2.4 70 4.83 139 44.9 93 28.8 309 12.4 307
10 5.1 1.64 0.26 3.2 32.2 5.1 62.6 5.08 138 44.92 88 27.2 308 12.8 264
11 7.19 2.52 0.2 4.47 35.1 2.8 62.1 5.54 150 48.88 88 27.1 307 12.3 244
21 7.64 2.4 0.45 4.78 31.5 5.9 62.6 4.87 142 45.7 94 29.2 311 12.1 382
22 6.58 2.1 0.69 3.8 31.9 10.4 57.7 5.73 160 52.38 91 27.9 305 12.5 260
23 5.29 2.16 0.25 2.87 40.9 4.7 54.4 4.93 138 45.59 92 28 303 11.9 331
25 4.43 1.62 0.27 2.55 36.5 6 57.4 6.2 175 56.45 91 28.2 310 12.6 306
26 5.92 1.28 0.34 4.3 21.6 5.8 72.7 5 147 48.09 96 29.4 305 13 327
27 7.82 2.69 0.34 4.8 34.4 4.3 61.3 5.06 148 47.17 93 29.3 315 12.1 347
28 6.09 2.22 0.31 3.56 36.5 5.1 58.4 4.61 127 42.25 92 27.6 301 12.6 217
29 6.84 2.12 0.37 4.35 31 5.4 63.6 5.23 152 49.58 95 29.1 307 12.7 266
30 7.99 3.07 0.18 4.73 38.5 2.3 59.2 5.18 146 48.19 93 28.2 303 12.1 352
31 9.11 2.76 0.4 5.95 30.3 4.4 65.3 5.15 151 50.5 99 29.4 300 12.6 315
33 9.75 3.07 0.34 6.34 31.5 3.5 65 6.46 180 60.67 94 27.9 297 12.8 287
34 5.86 1.65 0.54 3.67 28.2 9.1 62.7 5.95 170 56.12 94 28.5 302 12.8 271
35 7.83 2.96 0.36 4.51 37.8 4.6 57.6 4.83 138 45.76 95 28.4 300 12.4 329
37 7.14 1.31 0.33 5.5 18.4 4.6 77 4.89 140 45.84 94 28.7 306 13 236
38 7.05 2.71 0.35 3.99 38.4 5 56.6 4.71 133 43.24 92 28.2 307 12 262
39 7.33 2.82 0.2 4.32 38.4 2.7 58.9 5.32 147 48.99 92 27.7 301 12.6 313
40 8.28 1.8 0.32 6.17 21.7 3.8 74.5 4.74 137 46.62 98 29 295 12.7 240
41 4.62 1.66 0.18 2.78 35.9 4 60.1 5.78 164 54.63 94 28.4 301 12.5 185
73
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
42 8.3 3.74 0.33 4.23 45 4 51 5.62 158 50.61 90 28.2 313 12.4 263
43 8.8 3.22 0.39 5.19 36.6 4.4 59 5.59 162 54.46 97 29 297 13 286
44 7.5 2.63 0.39 4.48 35.1 5.1 59.7 4.72 137 45.28 96 29 302 12.8 268
45 7.29 1.59 0.13 5.58 21.7 1.8 76.5 5.21 135 46.15 89 25.9 293 13 366
46 10 4.00 0.45 5.45 40 4.5 55.4 4.82 141 46.41 96 29.2 303 12 416
47 5.01 1.77 0.22 3.01 35.4 4.5 60.1 5.37 153 49.26 92 28.5 311 12.4 249
48 7.03 1.76 0.46 4.8 25.1 6.6 68.3 5.3 140 45.25 85 26.4 309 12.2 307
49 5.15 1.74 0.18 3.23 33.8 3.5 62.8 4.55 129 41.15 90 28.2 312 12.1 278
50 6.29 2.63 0.42 3.23 41.8 6.7 51.4 4.84 138 45.5 94 28.6 304 12.9 250
51 7.18 1.39 0.42 5.37 19.3 5.8 74.8 5.50 151 49.98 91 27.4 302 12.3 255
52 7.62 1.9 0.43 5.28 25 5.6 69.4 5.05 134 44.24 88 26.4 302 13.6 369
53 5.51 2.6 0.25 2.65 47.3 4.6 48.1 4.71 138 45.3 96 29.3 305 12.6 267
54 7.27 2.02 0.42 4.83 27.8 5.7 66.4 5.10 129 43.53 85 25.3 297 12.9 400
55 6.61 1.56 0.41 4.64 23.6 6.2 70.2 4.90 143 47.89 98 29.2 298 12.3 266
56 6.12 2.14 0.33 3.65 34.9 5.5 59.6 5.12 137 46.1 90 26.9 298 12.6 279
57 7.79 1.32 0.54 5.93 16.9 6.9 76.2 5.92 166 54.51 92 28 304 12.8 208
58 9.82 2.89 0.48 6.46 29.4 4.9 65.7 5.26 146 48.16 92 27.7 302 12.3 263
59 4.27 1.8 0.35 2.13 42.1 8.1 49.8 4.27 129 42.48 100 30.2 303 12.4 164
60 7.72 2.59 0.27 4.86 33.5 3.5 62.9 4.96 140 46.46 94 28.1 300 12.8 339
61 6.35 2.75 0.38 3.12 43.4 6 50.6 5.02 140 46.34 92 27.8 302 12.1 145
62 8.25 2.45 0.58 5.22 29.7 7 63.3 4.75 140 46.05 97 29.5 304 12.7 307
63 8.39 3.1 0.56 4.72 36.9 6.7 56.3 5.72 139 45.76 80 24.3 304 13 452
64 7.05 2.22 0.31 4.51 31.5 4.4 64.1 4.59 135 43.99 96 29.3 306 12.4 256
65 8.18 2.08 0.48 5.62 25.4 5.9 68.7 5.05 144 46.46 92 28.5 310 12.3 232
66 6.51 1.8 0.34 4.38 27.6 5.2 67.3 5.06 146 48.37 96 28.9 303 12.9 309
67 6.18 2.23 0.41 3.54 36.1 6.7 57.2 4.90 140 45.38 93 28.6 309 12.5 343
68 7.17 2.74 0.38 4.05 38.2 5.3 56.5 4.70 137 46.27 98 29.2 297 12 304
74
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
69 6.69 2.58 0.23 3.87 38.6 3.5 57.9 5.54 152 51.54 93 27.4 294 12.6 291
70 4.42 1.95 0.36 2.11 44.1 8.2 47.7 4.44 119 39.31 88 26.7 302 12.7 295
71 10.02 3.87 0.48 5.67 38.6 4.8 56.6 4.97 142 47.24 95 28.6 301 12 318
72 9.73 2.5 0.36 6.87 25.7 3.7 70.6 5.77 145 49.25 85 25.1 294 13.8 301
73 11.85 3.49 0.85 7.51 29.5 7.1 63.4 4.56 135 43.69 96 29.6 309 12.4 356
74 6.2 1.68 0.19 4.34 27 3.1 69.9 6.37 170 56.51 89 26.6 300 13.1 225
75 6.22 1.94 0.05 4.23 31.2 0.8 68 5.26 153 50.07 95 29.1 306 12.3 287
76 6.46 1.51 0.57 4.37 23.4 8.9 67.7 4.14 115 37.88 91 27.8 304 12.8 571
77 6.32 1.55 0.16 4.16 24.5 2.6 72.9 5.90 173 55.97 95 29.3 309 12.9 306
78 6.75 1.68 0.30 4.76 24.9 4.4 70.6 5.99 167 54.56 91 27.9 307 12.7 214
79 6.28 1.71 0.26 4.31 27.3 4.2 68.5 4.99 134 43.14 86 26.8 310 14.2 250
80 6.35 1.4 0.54 4.42 22.0 8.5 69.5 5.84 162 53.2 91 27.7 304 12.8 225
81 6.55 2.27 0.32 3.96 34.7 4.9 60.4 5.53 158 52.49 95 28.6 301 12.6 143
83 8.94 2.58 0.5 5.86 28.8 5.6 65.6 4.87 138 44.14 91 28.3 312 12.1 294
84 7.96 2.96 0.51 4.49 37.1 6.5 56.4 5.56 150 50.92 92 27.0 295 12.4 368
85 8.75 3.05 0.58 5.11 34.9 6.7 58.4 5.10 146 47.86 94 28.5 304 12.3 203
86 6.55 2.63 0.51 3.41 40.2 7.8 52.0 4.90 128 44.38 91 26.2 290 12.5 366
87 5.72 1.93 0.24 3.55 33.8 4.2 62.0 4.85 133 44.85 92 27.4 296 12.3 320
88 8.74 2.63 0.41 5.70 30.1 4.6 65.3 5.41 160 51.71 96 29.6 309 12.4 219
89 8.72 3.44 0.61 4.66 39.5 7.0 53.5 4.81 132 44.84 93 27.5 295 12.9 313
90 6.77 2.39 0.39 3.99 35.3 5.7 59.0 4.75 131 43.27 91 27.6 302 12.6 252
91 6.88 3.18 0.34 3.36 46.3 4.9 48.9 6.31 166 54.42 86 26.3 305 12.8 193
92 5.93 2.02 0.31 3.60 34.0 5.2 60.8 4.89 142 47.15 96 29.1 301 12.5 347
93 6.44 1.87 1.14 3.43 29.0 17.7 53.2 4.86 142 46.25 95 29.3 308 12.5 328
94 7.91 2.66 0.32 4.93 33.6 4.1 62.3 5.61 158 52.70 94 28.2 300 12.6 233
95 6.86 2.57 0.43 3.86 37.5 6.2 56.3 5.28 144 48.88 92 27.3 295 12.4 353
96 8.75 2.89 0.19 5.67 33.1 2.1 64.8 6.16 164 55.03 89 26.6 298 12.6 283
75
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
97 5.86 1.73 0.65 3.49 29.5 11.1 59.5 4.95 141 46.57 94 28.5 304 12.6 297
98 7.85 2.42 0.38 5.05 30.8 4.8 64.4 5.85 169 55.62 95 29.0 305 12.4 275
99 6.17 2.38 0.29 3.50 38.6 4.6 56.7 5.33 157 51.36 96 29.4 305 12.2 358
100 8.50 2.66 0.31 5.53 31.3 3.6 65.1 5.09 144 48.01 94 28.3 300 12.6 299
101 8.93 1.40 0.35 7.18 15.7 3.9 80.4 5.18 143 46.83 90 27.7 306 12.1 422
102 5.83 2.05 0.34 3.44 35.1 5.8 59.1 5.42 143 49.41 91 28.3 310 12.4 188
103 6.88 2.17 0.42 4.29 31.6 6.1 62.3 5.02 130 43.18 86 26.0 302 14.7 384
104 9.44 2.23 0.40 6.80 23.7 4.3 72.1 5.56 153 49.82 90 27.5 307 12.2 432
105 7.60 2.09 0.48 5.03 27.5 6.3 66.2 5.05 138 46.73 93 27.3 295 11.7 295
106 6.36 2.36 0.34 3.67 37.0 5.3 57.7 5.11 134 45.34 89 26.3 297 12.2 208
107 5.77 1.92 0.35 3.50 33.3 6.1 60.6 4.62 132 43.30 94 28.6 305 12.5 324
108 8.06 3.03 0.48 4.55 37.6 6.0 56.4 5.26 151 48.79 93 28.7 310 12.6 368
109 8.32 3.15 0.64 4.53 37.8 7.7 54.4 5.31 146 48.89 92 27.6 300 12.1 257
110 9.83 3.18 0.75 5.90 32.4 7.6 60.0 4.77 133 43.35 91 28.0 308 13.0 312
111 7.76 2.74 0.79 4.24 35.3 10.2 54.6 5.23 149 47.85 92 28.4 310 12.0 318
112 6.14 1.72 0.54 3.88 28.0 8.7 63.2 6.10 171 55.60 91 28.1 308 12.3 231
113 7.07 1.91 0.55 4.61 27.0 7.8 65.2 6.18 169 55.68 90 27.3 303 12.8 220
114 6.54 2.64 0.46 3.44 40.3 7.1 52.6 5.43 147 49.60 91 27.1 297 12.7 229
115 7.01 1.76 0.25 5.00 25.1 3.6 71.3 4.85 140 45.73 94 28.9 306 12.2 359
116 5.49 2.29 0.29 2.91 41.7 5.2 53.1 5.15 150 48.75 95 29.1 308 12.0 369
117 7.42 2.63 0.54 4.25 35.4 7.2 57.3 5.34 147 49.14 92 27.5 299 12.4 378
118 10.70 2.07 0.62 8.02 19.3 5.8 74.9 5.52 150 50.57 92 27.2 297 12.8 346
119 9.91 3.26 0.59 6.06 32.9 5.9 61.2 4.94 132 44.12 89 26.7 299 12.4 399
120 7.93 1.52 1.96 4.46 19.1 24.7 56.2 5.99 158 52.12 87 26.5 304 12.4 311
121 7.73 2.24 0.50 4.98 29.0 6.5 64.5 5.25 148 48.39 92 28.3 307 12.3 312
122 7.42 1.31 0.39 5.73 17.6 5.2 77.2 4.71 134 43.32 92 28.4 309 12.4 248
123 5.77 1.73 0.35 3.69 30.0 6.1 63.9 4.96 141 46.93 95 28.5 301 12.1 280
76
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
125 6.62 2.53 0.24 3.85 38.2 3.7 58.1 5.37 154 52.14 97 28.6 295 12.9 330
126 9.25 1.81 0.49 6.95 19.6 5.3 75.1 4.66 135 43.38 93 29.1 312 11.8 288
127 8.24 3.61 0.25 4.38 43.9 3.0 53.1 4.88 136 44.41 91 27.8 306 13.0 238
128 7.37 2.73 0.36 4.28 37.0 4.9 58.1 5.03 146 48.05 96 29.0 304 12.1 269
129 5.40 2.26 0.48 2.65 41.9 8.9 49.2 6.32 158 53.21 84 25.1 298 12.9 302
130 8.84 2.09 0.61 6.14 23.7 6.9 69.5 5.10 131 43.38 85 25.6 301 13.8 376
131 9.27 3.17 0.54 5.55 34.2 5.9 59.9 4.79 146 47.25 99 30.5 310 12.4 423
132 5.29 1.52 0.29 3.48 28.7 5.5 65.8 5.96 173 59.04 99 29.1 293 12.5 259
133 6.46 2.83 0.18 3.45 43.9 2.8 53.4 5.47 153 51.36 94 28.0 298 12.0 291
134 9.11 2.53 0.68 5.90 27.8 7.4 64.8 4.75 144 46.76 99 30.4 309 12.0 243
135 8.70 2.61 0.40 5.68 30.1 4.6 65.4 5.00 138 44.17 88 27.5 312 12.7 156
136 8.15 1.13 0.22 6.80 13.8 2.7 83.4 5.02 152 48.87 97 30.2 311 12.5 272
137 5.12 1.21 0.37 3.54 23.6 7.2 69.2 5.83 163 54.87 94 28.0 298 12.5 189
138 7.61 1.84 0.27 5.50 24.1 3.6 72.3 4.80 145 47.28 98 30.2 307 12.3 295
139 7.11 1.94 0.50 4.66 27.4 7.0 65.6 5.01 152 49.87 99 30.4 305 12.0 365
140 6.60 2.61 0.44 3.56 39.5 6.6 53.9 4.71 137 45.25 96 29.2 304 12.9 354
141 6.38 2.28 1.84 2.27 35.6 28.9 35.5 4.86 137 44.74 92 28.2 306 12.3 245
142 8.48 2.32 0.49 5.67 27.3 5.8 66.8 4.81 142 46.29 96 29.5 306 12.2 381
143 8.4 3.02 0.35 5.03 35.9 4.1 59.9 6.16 158 52.81 86 25.7 300 12.2 253
144 4.73 1.28 0.44 3.06 26.0 9.3 64.7 6.27 161 54.70 87 25.6 294 12.8 210
145 9.48 2.44 0.71 6.33 25.8 7.5 66.8 5.28 141 47.46 90 26.7 297 12.1 297
146 8.12 2.68 0.44 5.00 33.0 5.5 61.6 6.18 138 49.00 79 22.4 282 14.3 706
147 7.63 1.67 0.49 5.47 21.9 6.5 71.7 6.53 152 57.84 89 23.3 263 12.6 655
148 5.59 2.17 0.29 3.12 38.8 5.3 55.9 4.75 144 44.92 94 30.3 321 12.3 336
149 12.06 8.51 0.33 3.22 70.6 2.7 26.7 5.18 152 49.25 95 29.4 309 11.9 397
150 5.88 3.19 0.31 2.39 54.2 5.3 40.6 5.64 168 54.23 96 29.9 310 12.1 287
151 10.49 4.80 0.40 5.28 45.8 3.9 50.3 5.15 146 47.79 93 28.4 306 12.1 268
77
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
152 11.30 1.70 0.38 9.22 15.1 3.3 81.6 5.09 146 46.89 92 28.7 312 11.9 297
153 7.45 3.00 0.29 4.16 40.3 3.8 55.9 5.03 119 39.99 79 23.6 297 13.5 365
154 9.11 2.88 0.54 5.68 31.6 5.9 62.4 5.09 142 46.16 91 27.9 308 12.8 349
155 5.84 2.30 0.26 3.28 39.4 4.5 56.1 5.83 166 51.57 89 28.5 321 12.6 280
156 7.07 3.03 0.43 3.61 42.8 6.1 51.0 5.58 163 52.36 94 29.2 311 12.5 279
157 7.41 3.09 0.41 3.91 41.7 5.5 52.7 5.46 158 51.76 95 28.9 305 12.6 292
158 4.98 2.06 0.33 2.60 41.4 6.6 52.1 5.24 147 47.18 90 28.0 311 11.8 264
159 8.23 2.29 0.51 5.42 27.9 6.2 65.9 5.65 153 51.53 91 27.0 296 12.5 333
160 5.53 1.34 0.30 3.89 24.2 5.5 70.3 5.50 162 52.84 96 29.5 307 13.2 147
161 7.40 3.31 0.38 3.71 44.7 5.2 50.1 6.43 169 56.91 89 26.3 298 13.0 204
162 6.98 1.78 0.43 4.77 25.5 6.2 68.3 5.40 141 48.21 89 26.1 293 12.9 345
163 7.86 2.44 0.38 5.03 31.1 4.9 64.0 5.09 141 46.73 92 27.8 302 12.3 318
164 5.48 1.63 0.35 3.50 29.9 6.3 63.8 4.64 137 46.04 99 29.4 297 11.9 309
165 9.45 3.79 0.52 5.14 40.1 5.5 54.4 5.29 143 47.90 91 27.1 299 12.9 396
166 6.48 1.94 0.37 4.18 29.9 5.6 64.5 5.09 141 47.45 93 27.7 298 11.8 228
167 5.22 1.72 0.49 3.02 32.9 9.3 57.8 4.69 135 45.54 97 28.9 297 12.0 303
168 11.74 2.28 0.71 8.75 19.4 6.1 74.5 5.57 151 50.58 91 27.1 298 12.5 73
169 6.00 1.53 0.54 3.92 25.5 9.1 65.4 5.30 147 47.21 89 27.7 311 12.6 285
170 7.83 2.07 2.07 3.69 26.5 26.4 47.2 5.03 140 45.62 91 27.7 306 12.4 263
171 7.94 2.09 1.21 4.64 26.3 15.2 58.5 4.78 135 46.48 97 28.3 291 13.1 368
172 5.69 2.65 2.09 0.95 46.6 36.7 16.7 7.66 198 64.47 84 25.9 308 12.2 166
173 9.52 6.08 0.71 2.73 63.9 7.4 28.7 5.10 139 46.46 91 27.3 300 12.4 378
174 6.11 1.59 2.42 2.10 25.9 39.6 34.4 5.75 159 51.05 89 27.7 312 12.9 244
175 5.31 2.09 1.05 2.17 39.3 19.8 40.9 5.83 163 52.33 90 27.9 311 12.2 216
176 8.22 2.72 2.79 2.71 33.1 33.9 33.0 5.14 142 45.45 88 27.7 313 12.7 382
177 5.13 2.13 1.52 1.47 41.6 29.7 28.7 5.83 170 56.74 97 29.2 300 12.7 261
178 6.10 1.72 1.33 3.05 28.2 21.8 50.0 4.51 127 41.79 93 28.2 304 12.1 258
78
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
179 3.53 1.53 3.32 2.68 20.4 44.1 35.5 5.08 121 40.84 80 23.9 297 15.1 378
180 5.79 2.00 1.76 2.03 34.5 30.4 35.1 5.39 144 47.45 88 26.7 303 13.7 356
181 4.59 1.72 1.12 1.75 37.4 24.5 38.1 3.45 100 31.78 92 29.1 316 12.2 190
182 6.88 2.10 1.40 3.38 30.5 20.4 49.1 6.45 169 56.99 88 26.2 297 12.9 254
183 5.66 2.10 2.07 1.48 37.2 36.6 26.2 4.50 131 43.79 97 29.2 300 12.4 263
184 5.47 1.54 2.21 1.71 28.1 40.5 31.4 4.41 129 42.18 96 29.3 306 12.4 324
185 9.42 1.38 1.9 6.14 14.7 20.2 65.2 4.83 141 45.67 95 29.2 308 12.6 280
186 4.80 2.21 1.39 1.20 46.0 29.0 25.0 4.58 136 43.71 95 29.7 311 11.9 303
187 4.63 2.30 1.15 1.19 49.6 24.7 25.7 5.26 133 44.59 85 25.3 298 13.0 271
188 7.86 2.73 1.17 3.96 34.7 14.9 50.4 5.09 139 45.90 90 27.4 304 12.8 318
189 7.17 1.98 2.33 2.86 27.6 32.5 40.0 5.17 145 47.22 91 28.1 308 12.5 270
190 6.06 1.87 2.35 1.84 30.9 38.8 30.3 5.47 151 48.78 89 27.6 310 12.9 329
191 3.72 1.31 0.59 1.82 35.3 15.9 48.8 4.63 113 37.46 81 24.4 301 14.6 358
192 4.09 1.62 1.22 1.24 39.7 29.8 30.4 4.71 132 43.23 92 28.1 306 12.3 241
193 6.20 2.65 1.00 2.55 42.7 16.1 41.2 4.93 142 46.89 95 28.8 303 12.4 385
194 6.07 2.52 1.82 1.73 41.6 30.0 28.4 5.84 159 52.87 90 27.2 301 12.5 272
195 8.66 2.35 0.44 5.86 27.2 5.1 67.7 5.55 146 48.24 87 26.4 304 12.5 350
196 9.53 1.84 0.61 7.07 19.4 6.4 74.2 4.28 123 39.85 93 28.8 310 12.2 313
197 6.50 2.10 0.26 4.14 32.3 4.0 63.7 5.47 142 46.5 85 25.9 305 13.2 283
198 6.65 2.28 0.58 3.79 34.3 8.7 56.9 4.80 136 43.98 92 28.3 309 12.4 310
199 8.07 2.03 0.83 5.21 25.1 10.3 64.6 5.49 162 53.28 97 29.5 304 12.8 176
200 7.50 2.43 0.66 4.41 32.4 8.8 58.8 4.72 129 42.75 91 27.3 301 12.7 288
201 9.14 3.61 0.64 4.89 39.5 7.0 53.5 4.59 125 40.64 89 27.2 307 12.3 280
202 6.56 2.27 0.49 3.80 34.6 7.5 58.0 5.88 157 52.14 89 26.8 302 12.9 290
203 7.37 2.71 0.38 4.29 36.7 5.1 58.2 4.86 137 43.19 89 28.2 318 12.6 257
204 7.03 2.12 0.35 4.56 30.2 5.0 64.8 5.01 123 41.92 84 24.5 293 13.7 251
205 9.69 2.31 0.58 6.81 23.8 6.0 70.2 4.96 140 46.34 93 28.2 302 12.6 324
79
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
206 6.14 2.29 0.35 3.50 37.2 5.8 57.0 5.98 174 57.48 96 29.0 302 12.5 226
207 6.05 1.81 0.40 3.84 29.9 6.6 63.5 5.37 141 47.10 88 26.3 300 12.7 343
208 7.92 1.54 0.67 5.71 19.5 8.5 72.1 5.69 164 53.82 95 28.8 304 12.3 334
209 9.34 3.06 0.64 5.64 32.7 6.9 60.4 5.88 156 53.13 90 26.6 294 12.3 317
210 12.61 2.89 0.79 8.93 22.9 6.3 70.8 4.82 142 46.31 96 29.4 306 12.4 307
211 9.25 2.36 0.69 6.20 25.5 7.5 67.0 5.01 126 40.74 81 25.2 310 12.7 361
212 5.62 1.81 0.36 3.45 32.2 6.4 61.3 4.81 137 45.54 95 28.6 302 12.0 243
213 6.16 1.30 0.57 4.28 21.2 9.3 69.5 4.67 143 46.76 100 30.7 306 12.4 302
214 7.91 3.48 0.59 3.84 44.0 7.4 48.6 4.87 128 43.23 89 26.3 296 11.9 357
215 7.91 1.70 0.62 5.58 21.5 7.9 70.6 5.04 140 46.34 92 27.8 302 12.4 287
216 9.72 1.84 0.65 7.23 18.9 6.7 74.4 5.51 138 44.93 82 25.0 307 13.7 321
217 7.23 2.39 0.32 4.51 33.1 4.4 62.5 5.52 156 51.72 94 28.3 302 12.2 341
218 6.85 1.54 0.53 4.77 22.6 7.8 69.6 4.50 125 41.92 93 27.7 298 11.9 421
219 7.67 1.65 0.50 5.52 21.6 6.5 71.9 5.57 152 49.27 88 27.3 308 13.0 217
220 8.97 2.64 0.56 5.76 29.5 6.3 64.2 5.64 158 51.87 92 28.0 305 12.5 260
221 8.04 1.91 0.45 5.69 23.7 5.6 70.7 5.73 155 49.43 86 27.0 313 13.2 236
222 8.27 2.34 0.53 5.40 28.3 6.4 65.3 4.76 138 44.87 94 29.0 307 11.9 326
223 7.69 2.83 0.53 4.33 36.8 6.9 56.3 6.14 170 56.55 92 27.6 300 13.1 253
224 6.04 2.15 0.36 3.53 35.6 6.0 58.4 4.82 131 44.16 92 27.3 298 12.0 379
225 7.06 2.71 0.41 3.93 38.5 5.8 55.7 5.14 153 49.10 96 29.8 312 12.2 292
226 7.12 2.67 0.41 4.04 37.5 5.8 56.7 4.71 141 46.00 98 30.0 307 12.4 332
227 7.23 3.42 0.42 3.39 47.3 5.8 47.0 5.81 168 55.07 95 28.8 304 12.4 174
228 7.70 1.89 0.32 5.49 24.5 4.2 71.3 5.50 146 48.5 88 26.6 301 13.0 426
229 6.56 2.75 0.57 3.23 42.0 8.7 49.3 5.64 163 51.58 92 28.9 316 12.6 245
230 6.40 2.37 0.29 3.74 37.0 4.6 58.4 5.72 153 49.77 87 26.8 308 12.3 291
231 6.11 2.36 0.40 3.34 38.7 6.6 54.7 5.78 164 53.23 92 28.4 308 12.3 346
232 7.86 2.07 0.34 5.45 26.3 4.3 69.4 4.73 132 43.06 91 27.8 305 12.7 299
80
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
233 6.96 1.87 0.16 4.92 26.9 2.4 70.7 4.94 138 45.20 92 28.0 306 12.2 304
234 7.06 2.03 0.32 4.71 28.7 4.6 66.7 5.30 158 51.86 98 29.9 305 12.5 251
235 6.67 1.36 0.25 5.06 20.4 3.8 75.9 5.30 152 48.17 91 28.7 316 12.4 259
236 5.93 1.75 0.16 4.02 29.6 2.6 67.8 4.37 124 41.32 94 28.3 300 12.6 316
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238 8.70 2.51 0.55 5.64 28.9 6.4 64.8 5.89 163 53.47 91 27.7 306 12.4 258
239 8.01 2.00 0.39 5.63 24.9 4.8 70.3 5.46 144 47.97 88 26.4 300 12.7 271
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241 6.31 2.57 0.29 3.45 40.7 4.6 54.7 5.45 152 48.85 90 27.8 310 12.4 221
242 6.26 2.16 0.37 3.73 34.5 5.9 59.6 5.24 149 49.76 95 28.5 300 12.8 240
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245 8.16 3.32 0.46 4.39 40.7 5.6 53.8 5.30 143 46.82 88 26.9 305 12.7 309
246 8.60 1.91 0.40 6.29 22.2 4.7 73.2 5.36 141 46.16 86 26.2 305 12.5 365
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259 7.10 1.15 0.47 5.48 16.1 6.6 77.2 6.19 177 58.40 94 28.6 303 12.4 247
81
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
260 7.31 1.54 0.58 5.18 21.1 8.0 70.9 5.56 158 52.17 94 28.5 304 12.4 451
261 6.49 1.81 0.19 4.48 27.9 3.0 69.1 4.76 139 45.2 95 29.2 308 12.4 345
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279 6.42 2.08 0.43 3.92 32.4 6.7 61.0 5.49 147 48.32 88 26.8 305 12.3 384
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82
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
287 7.41 2.28 0.58 4.55 30.8 7.8 61.4 5.79 160 52.43 91 27.7 306 12.7 315
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289 8.61 2.62 0.55 5.44 30.4 6.4 63.2 5.48 167 51.54 94 30.4 324 13.1 225
290 8.21 1.33 0.48 6.40 16.2 5.9 77.9 6.31 174 57.72 91 27.5 301 12.5 238
291 7.81 1.92 0.54 5.35 24.5 6.9 68.5 5.47 162 53.32 98 29.6 304 12.4 180
292 7.04 4.13 0.47 2.44 58.6 6.7 34.7 5.51 156 50.59 92 28.3 308 12.7 331
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294 6.75 3.32 0.46 2.98 49.1 6.8 44.1 6.08 161 53.43 88 26.5 302 12.7 147
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302 6.49 1.41 0.27 4.81 21.7 4.2 74.0 5.58 151 49.70 89 27.1 304 12.4 307
303 6.89 2.05 0.31 4.53 29.8 4.5 65.8 5.08 141 46.06 91 27.7 306 12.2 299
304 8.12 2.24 0.27 5.60 27.7 3.3 69.0 5.17 145 47.31 92 28.1 306 12.1 345
305 6.37 2.12 0.27 3.99 33.3 4.2 62.5 5.89 156 51.24 87 26.5 305 13.0 265
306 5.77 1.68 0.30 3.78 29.1 5.3 65.6 6.00 158 52.66 88 26.3 300 12.0 209
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309 6.13 2.45 0.35 3.32 40.0 5.7 54.3 4.65 121 40.32 87 26.0 301 13.0 342
310 5.05 1.07 0.38 3.61 21.2 7.5 71.3 4.81 132 43.78 91 27.3 300 12.4 246
311 6.63 3.18 0.31 3.14 48.0 4.6 47.4 5.05 140 45.62 90 27.6 306 12.0 343
312 6.92 1.48 0.43 5.01 21.4 6.2 72.4 4.63 123 40.82 88 26.5 300 13.1 357
313 8.87 2.17 0.29 6.41 24.4 3.3 72.3 5.70 157 52.05 91 27.5 301 12.4 309
83
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
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317 9.64 2.43 0.41 6.8 25.2 4.3 70.5 6.02 163 54.64 91 27.1 299 12.2 284
318 6.69 1.54 0.41 4.74 23.0 6.1 70.8 5.56 136 46.51 84 24.5 293 13.0 297
319 7.08 1.69 0.45 4.94 23.8 6.4 69.8 5.27 145 48.15 91 27.5 301 12.4 264
320 7.77 1.14 0.45 6.18 14.7 5.8 79.5 4.87 124 42.35 87 25.4 292 13.5 261
321 7.39 2.79 0.63 3.97 37.8 8.5 53.7 4.47 119 39.84 89 26.7 300 12.2 399
322 5.69 2.24 0.28 3.17 39.4 5.0 55.7 6.10 162 54.76 90 26.6 296 12.5 321
323 6.25 2.56 0.36 3.33 40.9 5.8 53.3 5.41 149 50.17 93 27.9 297 12.9 231
324 8.30 2.49 0.38 5.42 30.0 4.6 65.4 5.26 142 48.18 92 27.0 295 12.3 347
325 8.47 2.96 0.36 5.15 34.9 4.3 60.8 4.66 130 45.34 97 28.0 288 12.3 340
326 7.17 1.59 0.33 5.26 22.1 4.6 73.3 5.40 136 44.09 82 25.2 308 13.0 314
327 6.33 3.03 0.39 2.91 47.8 6.2 46.0 5.02 145 46.87 93 28.8 309 12.3 372
328 7.77 1.82 0.40 5.56 23.4 5.1 71.5 5.50 140 44.34 81 25.4 315 14.0 274
329 7.48 3.03 0.31 4.13 40.6 4.2 55.2 4.98 143 46.80 94 28.6 305 11.9 273
330 7.75 2.09 0.33 5.33 26.9 4.3 68.8 5.14 139 45.90 89 27.0 302 12.5 342
331 7.98 1.81 0.24 5.93 22.7 3.0 74.3 5.06 134 44.03 87 26.6 305 12.3 302
332 6.48 3.12 0.29 3.07 48.1 4.5 47.4 5.19 154 48.81 94 29.6 315 12.6 269
333 6.97 2.61 0.18 4.18 37.4 2.6 60.0 5.02 142 48.55 97 28.3 292 12.6 340
334 8.54 2.67 0.56 5.31 31.3 6.5 62.2 4.92 139 43.74 89 28.3 319 12.2 270
335 6.75 2.03 0.38 4.34 30.1 5.7 64.3 5.96 160 51.67 87 26.9 310 12.4 257
336 4.63 2.12 0.14 2.36 45.8 3.1 51.1 5.67 158 50.72 90 27.9 311 13.4 313
337 6.32 1.47 0.40 4.45 23.2 6.3 70.5 4.66 131 42.73 92 28.1 307 11.9 362
338 6.54 2.26 0.54 3.74 34.5 8.3 57.2 5.11 149 48.08 94 29.1 310 12.3 392
339 6.17 1.64 0.36 4.17 26.5 5.9 67.5 5.65 157 51.51 91 27.9 306 13.3 233
340 8.95 2.38 0.35 6.22 26.5 3.9 69.5 4.97 139 45.59 92 27.9 305 12.3 316
84
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
341 5.13 1.83 0.19 3.11 35.6 3.7 60.7 5.10 151 47.51 93 29.6 317 12.1 259
342 6.40 2.15 0.27 3.98 33.6 4.2 62.2 5.24 146 48.67 93 27.9 300 12.3 319
343 5.09 2.58 0.29 2.22 50.6 5.7 43.7 4.76 135 43.97 92 28.2 306 12.1 311
344 8.74 3.08 0.51 5.15 35.2 5.9 58.9 4.64 121 40.20 87 26.0 300 12.5 425
345 6.36 2.91 0.42 3.02 45.7 6.7 47.6 5.06 153 49.83 99 30.2 306 11.9 294
346 10.14 3.37 0.39 6.38 33.2 3.9 62.9 5.42 142 46.35 86 26.3 307 12.5 451
347 7.94 2.81 0.36 4.78 35.3 4.5 60.2 6.01 163 52.69 88 27.1 309 12.2 256
348 8.16 2.19 0.70 5.27 26.9 8.6 64.5 6.02 163 53.65 89 27.1 304 12.4 266
349 8.66 2.48 0.63 5.54 28.7 7.3 64.0 5.22 139 45.63 87 26.7 305 13.1 316
350 6.40 1.69 0.50 4.22 26.3 7.8 65.9 4.82 130 42.29 88 27.0 308 12.3 279
351 9.52 3.55 0.54 5.42 37.4 5.7 57.0 5.59 154 50.89 91 27.6 303 12.7 254
352 7.66 1.99 0.52 5.15 26.0 6.7 67.3 5.70 167 54.59 96 29.2 305 12.4 179
353 6.08 3.08 0.33 2.67 50.7 5.5 43.9 5.90 165 53.97 91 28.0 306 12.4 191
354 7.88 2.13 0.23 5.52 27.0 3.0 70.1 5.46 154 51.00 93 28.2 302 12.5 273
355 9.73 3.08 0.20 6.44 31.7 2.0 66.3 4.98 145 47.63 96 29.1 305 12.3 268
356 4.85 1.91 0.11 2.84 39.4 2.2 58.5 4.73 133 42.89 91 28.1 309 11.9 328
357 6.67 2.58 0.25 3.84 38.7 3.7 57.6 5.12 140 45.86 90 27.3 305 12.2 293
358 5.43 1.51 0.19 3.63 28.3 3.6 68.1 5.15 126 41.53 81 24.4 302 14.0 270
359 4.96 1.56 0.12 3.28 31.4 2.4 66.1 4.75 136 44.16 93 28.6 307 12.8 230
360 9.91 2.55 0.32 7.04 25.8 3.2 71.0 5.02 143 46.88 93 28.4 305 12.9 307
361 7.16 2.85 0.41 3.90 39.8 5.7 54.5 5.43 142 46.97 86 26.1 302 12.7 383
362 6.98 2.53 0.47 3.98 36.2 6.8 57.0 4.30 129 42.01 98 30.1 308 12.0 294
363 6.22 1.70 0.53 3.99 27.3 8.6 64.1 5.71 159 51.39 90 27.9 310 12.4 314
364 7.81 2.11 0.34 5.36 27.0 4.4 68.6 5.08 145 46.91 92 28.5 308 11.9 255
365 8.25 2.87 0.30 5.08 34.8 3.6 61.6 6.17 171 57.02 92 27.6 299 12.5 304
366 7.59 1.99 0.33 5.28 26.2 4.3 69.5 5.78 148 48.55 84 25.6 304 13.0 245
367 7.18 1.96 0.34 4.88 27.3 4.7 67.9 4.91 139 46.75 95 28.3 298 12.5 248
85
ID WBC 10^9/l
LYM 10^9/l
MON 10^9/l
GRA 10^9/l
LYM% MON% GRA% RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDWc PLT
368 5.28 2.24 0.31 2.73 42.5 5.8 51.7 5.05 140 45.87 91 27.6 304 12.4 204
369 6.63 2.03 0.29 4.31 30.7 4.4 65.0 4.96 138 46.72 94 27.9 296 12.3 208
370 7.18 3.67 0.46 3.05 51.1 6.4 42.4 5.92 158 52.33 88 26.8 303 12.5 256
371 6.54 3.39 0.58 2.58 51.8 8.9 39.4 5.24 144 47.78 91 27.4 301 12.1 324
372 10.26 2.16 0.50 7.59 21.1 4.9 74.0 5.70 145 48.89 86 25.5 297 13.6 368
373 10.07 2.43 0.47 7.18 24.1 4.6 71.2 5.25 136 45.29 86 26.0 301 15.4 274
374 8.74 1.76 0.29 6.70 20.1 3.3 76.6 5.84 159 51.69 88 27.2 307 12.5 193
375 8.93 3.46 0.31 5.16 38.7 3.5 57.8 5.21 146 48.57 93 27.9 300 11.9 308
376 6.31 1.69 0.42 4.20 26.8 6.7 66.5 6.51 175 58.07 89 26.8 301 12.5 222
377 8.00 2.93 0.36 4.71 36.6 4.6 58.9 5.01 144 47.84 95 28.7 301 12.0 318
378 4.30 1.39 0.27 2.64 32.3 6.2 61.5 5.04 137 44.80 89 27.1 305 12.5 292
86
ANEXO C. Montajes placas de ELISA para Toxoplasma gondii.
Tabla 13 Montaje primera placa de ELISA para Toxoplasma gondii
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A Blanco 3 12 20 28 37 45 53 61 69 77 85
B CN 4 13 21 29 38 46 54 62 70 78 86
C CC 6 14 22 30 39 47 55 63 71 79 87
D PCL 7 15 23 31 40 48 56 64 72 80 88
E PCM 8 16 24 32 41 49 57 65 73 81 89
F PCH 9 17 25 33 42 50 58 66 74 82 90
G 1 10 18 26 34 43 51 59 67 75 83 91
H 2 11 19 27 35 44 52 60 68 76 84 92
Tabla 14 Montaje segunda placa de ELISA para Toxoplasma gondii
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A Blanco 95 103
119 127 135 143 151 159 167 175
B CN 96 104 112 120 128 136 144 152 160 168 176
C CC 97 105 113 121 129 137 145 153 161 169 177
D PCL 98 106 114 122 130 138 146 154 162 170 178
E PCM 99 107 115 123 131 139 147 155 163 171 179
F PCH 100 108 116 124 132 140 148 156 164 172 180
G 93 101 109 117 125 133 141 149 157 165 173 181
H 94 102 110 118 126 134 142 150 158 166 174 182
Tabla 15 Montaje tercera placa de ELISA para Toxoplasma gondii
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A Blanco 113 121 129 137 145 153 161 169 177 185 193
B CN 114 122 130 138 146 154 162 170 178 186 194
C CC 115 123 131 139 147 155 163 171 179 187 195
D PCL 116 124 132 140 148 156 164 172 180 188 196
E PCM 117 125 133 141 149 157 165 173 181 189 197
F PCH 118 126 134 142 150 158 166 174 182 190 198
G 111 119 127 135 143 151 159 167 175 183 191 199
H 112 120 128 136 144 152 160 168 176 184 192 200
87
Tabla 16 Montaje cuarta placa de ELISA para Toxoplasma gondii
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A Blanco 203 211 219 227 235 243 251 259 267 275 283
B CN 204 212 220 228 236 244 252 260 268 276 284
C CC 205 213 221 229 237 245 253 261 269 277 285
D PCL 206 214 222 230 238 246 254 262 270 278 286
E PCM 207 215 223 231 239 247 255 263 271 279 287
F PCH 208 216 224 232 240 248 256 264 272 280 288
G 201 209 217 225 233 241 249 257 265 273 281 289
H 202 210 218 226 234 242 250 258 266 274 282 290
Tabla 17 Montaje quinta placa de ELISA para Toxoplasma gondii
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
A Blanco 293 301 309 317 325 333 341 349 357 365 373
B CN 294 302 310 318 326 334 342 350 358 366 374
C CC 295 303 311 319 327 335 343 351 359 367 375
D PCL 296 304 312 320 328 336 344 352 360 368 376
E PCM 297 305 313 321 329 337 345 353 361 369 377
F PCH 298 306 314 322 330 338 346 354 362 370 378
G 291 299 307 315 323 331 339 347 355 363 371
H 292 300 308 316 324 332 340 348 356 364 372
88
ANEXO D. Consentimiento informado mostrado a los estudiantes participantes.
CONSENTIMIENTO INFORMADO PARA PARTICIPAR EN UN ESTUDIO DE INVESTIGACIÓN MEDICA
Determinación de Prevalencia de Brucelosis, Toxoplasmosis y Sarcocistosis y los factores de riego asociados en estudiantes de Medicina Veterinaria de la Universidad de La Salle
Investigador 1: Juan Camilo Ávila Zamora
Investigador 2: Luis Fernando Forero Peña
Sede donde se realiza el estudio: Fundación Colombiana de Estudios Parasitológicos
A usted se le está invitando a participar en este estudio de investigación médica. Antes de decidir participar o no, debe conocer y comprender cada uno de los siguientes apartados. Este proceso se conoce como consentimiento informado. Siéntase con absoluta libertad para preguntar sobre cualquier aspecto que le ayude a aclarar sus dudas al respecto.
Una vez que haya comprendido el estudio y si usted desea participar, entonces se le pedirá que firme esta forma de consentimiento.
JUSTIFICACIÓN DEL ESTUDIO
Este proyecto, el cual buscará identificar los factores de riesgo presentes en los estudiantes de la universidad, así como el tratar de determinar el momento en que se puede estar presentando el contacto con cada una de estas tres enfermedades (toxoplasmosis, brucelosis y sarcocistosis), esto debido a que el control y el diagnóstico en humanos es complicado y poco frecuente, además de que las autoridades sanitarias no realizan un control en estas poblaciones de riesgo
OBJETIVO DEL ESTUDIO
Determinar la presencia de toxoplasmosis brucelosis y/o sarcocistosis en estudiantes de la Universidad de La Salle y los factores de riesgo asociados a la presencia de estas enfermedades
PROCEDIMIENTO DEL ESTUDIO
En caso de participar en el estudio se le realizara una toma de dos muestras sanguíneas.
RIESGOS ASOCIADOS AL ESTUDIO
Flebitis, sangrado, hematomas, desmayo.
89
ACLARACIONES
Su decisión de participar en el estudio es completamente voluntaria
No habrá ninguna consecuencia desfavorable para usted, en caso de no aceptar la invitación
No tendrá que hacer gasto alguno durante el estudio
No recibirá pago por su participación
En el transcurso del estudio y final del mismo usted podrá solicitar los resultados del mismo
En caso de que usted desarrolle algún efecto adverso secundario no previsto, tiene derecho una indemnización, siempre que estos efectos sean consecuencia de su participación en el estudio.
Los resultados del estudio no serán publicados de manera personalizada y solo se realizará su análisis en conjunto para el desarrollo del Trabajo de Grado
_____________________________
Código del Estudiante:
______________________________
Firma:
90
ANEXO E. Encuesta de recopilación de información sobre la exposición o no de los factores de riesgo planteados en Microsoft® Access 2013.
Figura 12 Captura de pantalla de la encuesta realizada a los estudiantes participantes.
