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Rw. sci. tech. Off. int. Epiz., 2000,19 (3), 800-809
Primera descripción de infección concomitante de tuberculosis y paratuberculosis en ovinos lecheros en Argentina
M.C. Jorge(1), D.M. Schettino(1) , P. Torres ( 2 ) & A. Bernardelli ( 3 )
(1) Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Centra de la Provincia de Buenos Aires, Pinto 399, (7000) Tandil, Buenos Aires, Argentina (2) Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria, Paseo Colón 367,4° piso, (1063) Ciudad de Buenos Aires, Argentina (3) DILACOT-SENASA, Avenida Alexander Fleming 1653, (1640) Martínez. Buenos Aires, Argentina
Remitido el 15 de noviembre de 1999
Aceptado el 6 de julio de 2000
Resumen Los autores presentan los resultados de la prueba tuberculínica comparativa administrada por vía intradérmica en ovinos lecheros con el objetivo de determinar reaccionantes a derivado proteico purificado (PPD) de tuberculina bovina y aviar. La lectura de las pruebas se realizó por palpación y medición con calibre. El análisis de los resultados se evaluó mediante un diagrama de puntos. También se efectuaron pruebas de inmunodifusión en agar, cultivo y examen histopatológico para hacer el diagnóstico diferencial entre tuberculosis y paratuberculosis. En la primera prueba tuberculínica realizada en 288 ovinos, se observaron 74 animales positivos a PPD aviar (25,69%), dos animales positivos a PPD bovino (0,69%) y un animal positivo a ambas tuberculinas (0,34%); en la segunda prueba realizada en 247 ovinos, se observaron 55 animales positivos a PPD aviar (22,26%) y ningún animal reaccionante a PPD bovino. Se confirmó la presencia de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis por cultivo y serologia y s e observaron lesiones compatibles con las ocasionadas por M bovis en la histopatologìa. Este hallazgo debe alertar sobre la necesidad de realizar un diagnòstico correcto de la tuberculosis y paratuberculosis para controlar eficazmente a ambas enfermedades.
Palabras clave Argentina - Diagnòstico - Ovinos - Paratuberculosis - Tuberculosis.
Introducción
Situación en Argentina y marco legal
Desde 1993 se encuentra vìgente en Argentina el Plan Nacional de Control y Erradicación, de la Tuberculosis Bovina, implementado por la R e s o l u c i o n N° 1287/93 del Se r ado Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria(SENASA), y derogado en 1999 por la Resolucion N° 115/99.
En el mismo periodo se produjo el auge en la instalación de
tambos ovinos cuya producción láctea se destina a elaborar
quesos artesanales con leche no pasteurizada.
Partiendo de l is exigencias que surgen del mercado
internacional, que impone límites en la comercializacion de
los productos, existe una tendencia entre los medianos y pequeños productores, de agruparse formando significativas
cuencas lecheras, lo que valoriza la importancia de la
Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 19 (3) 801
aplicación del Plan de Control y Erradicación de la
Tuberculosis Bovina, elaborado por el SENASA y la Comisión
Nacional de Lucha contra Brucelosis y Tuberculosis creada
por la Resolución 831/93 (17) .
La necesidad de mejorar los esquemas técnicos de producción
debe ir unida a un correcto manejo sanitario de los rodeos
bovinos, con el doble objetivo de aumentar el rendimiento y
de atender las crecientes exigencias de control de calidad de
los alimentos para consumo humano.
En el marco del comercio internacional, el proceso de
integración económica subregional en desarrollo (Mercosur),
y la consiguiente necesidad de mejorar la producción
ganadera en términos competitivos, hacen indispensable el
establecimiento de procedimientos sanitarios que limiten al
máximo el riesgo de introducción de enfermedades y mejoren
la sanidad integral de los rebaños nacionales, cumpliendo los
requerimientos sanitarios que los importadores exigen en
forma creciente.
Surge entonces la necesidad de detectar la presencia de otros
animales que podrían ser posibles reservorios y/o
diseminadores del agente de la tuberculosis en especies que
no están sujetas a control, y así evaluar su impacto como
reservorio y en salud pública, lo que permite determinar si
sería necesario incluir a estas especies en los planes nacionales
de control y erradicación (15) .
En lo que se refiere a ovinos, la Resolución N° 66 /94 del
Mercosur para las Normas Sanitarias y Certificado
Zoosanitario único para el intercambio regional de ovinos, en
su Capítulo IV sobre pruebas diagnósticas y certificaciones
sanitarias para animales morivo de exportación, no considera
la tuberculosis ni la paratuberculosis como enfermedades que
requieran diagnóstico previo al movimiento de origen. Es
más, todavia no se ha acordado el método de diagnòstico de
paratuberculosis y tuberculosis para los ovinos, que ha de ser
utilizado por los países integrantes del Mercosur.
Tuberculosis
La prevalencia de la tuberculosis en pequeños rumiantes es
baja. A pesar de que las cabras y ovejas son susceptibles a la
infección, los casos naturales son raros (11) , siendo las cabras
más susceptibles que las ovejas. Sin embargo, la tuberculosis
puede ser confundida con otras enfermedades respiratorias
por falta de diagnóstico (1) .
La exposición de los ovinos a fuentes de infección
provenientes de animales enfermos es limitada por el tipo de
explotación que se realiza con los mismos, lo que explica que
la tuberculosis sea poco común m esta especie (1) ,
Sin embargo, en lo últimos años se han multiplicado los
tambos ovinos con tendencia a la semíestabulacíón, dejando
de lado el manejo tradicional extensivo, lo que incrementa la
tasa de contacto entre animales y favorece la transmisión del
agente por vía aerógena y digestiva (12) .
En rebaños ovinos de un área de Buller en Nueva Zelanda,
sobre un total de 596 ovejas, 108 (18%) resultaron positivas a
la prueba de tuberculina bovina con derivado proteico
purificado (PPD) bovino, encontrándose lesiones
macroscópicas compatibles con la tuberculosis en 4 3 (61%)
de los 70 ovinos reaccionantes a PPD sacrificados en
matadero. La ubicación de las lesiones sugiere infección por
ingestión en el 5 1 % y por inhalación en el 4 8 % de las ovejas.
Mycobacterium bovis fue recuperado por cultivo en 32
(74 ,4%) de los 4 3 animales con lesiones tuberculosas (14) . En
otros rebaños del mismo país se reportan prevalencias de
hasta un 5% (12) . En Alemania, en un rebaño de 4 8 0 ovejas se
detectó un 5 5 % de animales reaccionantes positivos a la
prueba de tuberculina (19) .
En Argentina existen muy pocos datos, a excepción de un
estudio efectuado en un rodeo de cabras que arrojó 1,58% de
anímales reaccionantes positivos a PPD bovino ( 1 0 ) .
Paratuberculosis
La paratuberculosis en cambio está muy difundida en los
ovinos. Estudios realizados en Europa, blandía, Reino Unido,
República Sudafricana, Nueva Zelanda y Australia, donde la
ganadería ovina es más importante que en América del Norte,
lo confirman. Aunque hay escasos estudios epidemiológicos
en España, se encontró que el 3 1 , 4 % de los rebaños (n: 2 2 6 )
estaban infectados, y un 2 % a 5% de las ovejas examinadas
(n: 4 .504) resultaron positivas a la prueba inmimoenzimátíca
(ELISA) y a la inmunodifusión en gel de agar (18 ) . Otra
técnica empleada con mucha frecuencia para el diagnóstico de
la paratuberculosis ovina es la histopatología, dado que las
cepas de origen ovino son díficiales de aislar; el examen
histopatológíco permite clasificar en tres tipos principales y en
tres subtipos a los animales enfermos, de acuerdo con las
lesiones, tipo celular, localización y extensión ( 7 , 1 8 ) .
La principal vía de transmisión en los ovinos, como en los
bovinos, es la fecal-oral, aunque también se han observado
casos de transmisión por leche, por calostro y congénita (18) ;
otra posible fuente de infección es por consumo de alimento
peleteado con harina de carne proveniente de animales
enfermos (16) .
En Argentina, la paratuberculosis ovina ha sido diagnosticada,
aunque no hay datos sobre su prevalencia (13) .
I n f e c c i ó n c o n c o m i t a n t e y d i a g n ó s t i c o
d i f e r e n c i a l
Los informes acerca de la incidencia individual de
tuberculosis y paratuberculosis son numerosos, pero existen
pocas referencias de presentaciones concomitantes de ambas
enfermedades, en especial en el ganado ovino (1 ,6) ,
802 Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 19 (3)
Por lo tanto, la prueba comparativa intradérmica, la
observación clínica y los diagnósticos de laboratorio son útiles
para diferenciar la paratuberculosis de la tuberculosis,
siempre que se proceda con cautela ( 3 , 1 8 ) .
Implicaciones en salud pública La propagación de la tuberculosis desde los animales al
hombre la convierte en una importante zoonosis. La
transmisión al hombre puede evitarse casi por completo
mediante la pasteurización de la leche, aunque persiste el
riesgo de transmisión a personas que trabajan en contacto con
animales enfermos, como por ejemplo tamberos, veterinarios,
empleados rurales, matarifes y otros grupos expuestos (14).
La información sobre el impacto de esta zoonosis en la salud
pública en los países de América Latina y el Caribe es escasa.
Esto se debe fundamentalmente al hecho que, en la mayoría
de estos países, el diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis
en el hombre se limita, en general, al examen microscópico
directo, con lo cual no es posible diferenciar M. tuberculosis de
M. bovis y de otras micobacterias. De ahí que la magnitud real
de este problema no pueda ser completamente conocida, ya
que la información con que se cuenta es limitada, y que
además no incluye los casos de tuberculosis infantil (2, 11 ,
17).
Recientes estudios muestran que la paratuberculosis es una
probable zoonosis emergente de origen alimentario, dado que
un alto porcentaje de personas con enfermedad de Crohn,
una enfermedad intestinal crónica, están infectados con
M. avium subsp. paratuberculosis; sin embargo, no ha habido
confirmación de esta aparente asociación entre dicho agente y
la enfermedad de Crohn (4).
El tiempo de reducción decimal de todas las cepas de
M. avium subsp. paratuberculosis es más alto que los que han
sido observados en Listeria, Salmonella, Coxiella y M. bovis, lo
que demuestra una mayor resistencia térmica de M. avium
subsp. paratuberculosis. Otros estudios indican que este bacilo
puede sobrevivir a la pasteurización a alta temperatura-corto
tiempo, cuando la concentración de organismos iniciales es
mayor de 101 células/ml (5, 8, 9 ) .
El objetivo de este estudio es determinar las tasas de animales
reaccionantes a PPD bovino y PPD aviar en la especie ovina y
evaluar su impacto en las formas de producción intensiva
como en salud pública.
Materiales y métodos Área de trabajo Se trabajó con un rodeo lechero ovino cuya raza proviene de
cruzas Ideal X Frisona, Corriedale x Frisona y Texel X Frisona,
absorbiendo con Frisona. El rodeo está formado por las
siguientes categorías: carneros, ovejas adultas (en ordeño y
secas), borregas y corderas.
El rodeo del estudio está ubicado en el partido de Benito
Juárez (provincia de Buenos Aires) y contaba con 288 ovinos
adultos en la primera prueba intradérmica y 247 en la
segunda. El manejo de este rodeo es semiestabulado, los
animales permanecen encerrados durante la noche en corrales
destinados a tal fin, y durante el día son alimentados en
pastoreos rotativos por categorías (en ordeño, recría y seca).
La alimentación está basada en pasturas permanentes (verdeos
de invierno y de verano), concentrados (alimento balanceado
y silo de grano húmedo) y reservas forrajeras (rollos).
La crianza de los corderos se realiza a media leche: durante el
día los corderos permanecen con la madre y durante la noche
son separados y encerrados en corrales. Luego de transcurrido
un tiempo empiezan a consumir ración y suero proveniente
de la fábrica de quesos. Estos animales en ningún momento
son alimentados con leche de otra especie o proveniente de
otro establecimiento.
El ordeño se realiza en un tambo mecánico, dos veces al día, y
la leche es enviada a la fábrica de quesos mediante una línea
que descarga en un tanque donde es refrigerada.
Materiales y metodología Para la determinación de reaccionantes se utilizó la prueba
comparativa con PPD de tuberculina bovina elaborada con la
cepa AN5 de M. bovis de 1 mg/ml de concentración, serie 58 y
60, y con PPD de tuberculina aviar, elaborada con una cepa
D 4 de M. avium de 0,5 mg/ml de concentración, serie 11.
Ambas tuberculinas fueron elaboradas y provistas por el
laboratorio oficial del SENASA y controladas mediante el
estándar internacional para cada una de ellas, distribuido por
el National Institute for Biological Standards and Control
(Reino Unido).
Ambas tuberculinas fueron transportadas en heladeras de
telgopor y conservadas en frío (+2°C a +8°C) y protegidas de
la luz solar directa durante el trabajo de campo.
Las pruebas tuberculínicas fueron realizadas el 8 de julio de
1997 y el 1 de septiembre de 1998 respectivamente,
inoculando 0,1 ml de cada una de las tuberculinas en forma
intradérmica en la piel de la zona axilar, con jeringas de
precisión automáticas. Se inoculó el PPD de tuberculina
bovina en la axila izquierda y el PPD de tuberculina aviar en la
derecha. En algunos animales se utilizó esta prueba en el
pliegue anocaudal derecho e izquierdo, para evaluar una
probable segunda zona de inoculación en esta especie.
La lectura de las pruebas se realizó a las 72 horas
post-inoculación por palpación y medida con un calibre de
plástico o metálico graduado en décimas de milímetro. El
análisis de los resultados se evaluó mediante un diagrama de
puntos (Scatterdiagram), clasificando al rodeo en
reaccionantes positivos a PPD de tuberculina bovina,
Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 19 (3) 803
sospechosos y negativos y en reaccionantes a PPD de
tuberculina aviar, sospechosos y negativos.
Dado el elevado número de reaccionantes positivos a PPD
aviar, se completó el estudio para establecer el diagnóstico
diferencial entre tuberculosis y paratuberculosis, mediante la
prueba de inmunodifusión en gel de agar. Se trabajó con una
modificación del método original de R.S. Merkal, utilizando
placas de Petri de vidrio de 6 cm de diámetro, en las que se
colocó 3 ml de una suspensión al 1% de agar noble Difco en
solución amortiguada de borato de sodio. Se dejó solidificar el
agar y se cortó el gel con un accesorio que permite la
distribución de seis orificios externos y uno central. En el
pocilio central se colocó el antígeno y en forma alternada
suero positivo y negativo y los sueros del estudio; luego de
dejar difundir 48 horas a temperatura ambiente se observaron
las bandas de precipitación.
También se realizó cultivo de hígado, bazo, pulmón y
linfonodos mediastínicos y mesentéricos de ambos animales
necropsiados en los medios de Löwenstein-Jensen,
Stonebrink para el diagnóstico de M. bovis y cultivo de
materia fecal, intestino y leche en medio de Herrold con y sin
micobactina para el diagnóstico de M. avium subsp.
paratuberculosis.
Para ello se realizó un muestreo a partir de 24 ovinos
reaccionantes a PPD aviar (suero y materia fecal) y en la sala de
necropsia del Área de Patología de la Facultad de Ciencias
Veterinarias de la Universidad Nacional del Centro, se efectuó
la necropsia de los dos animales reaccionantes a PPD bovino.
Las muestras de lesiones compatibles con tuberculosis se
fijaron en una solución de formol amortiguada al 10%, y se
procesaron utilizando la técnica de parafina estándar.
Secciones de cada muestra fueron cortadas y teñidas con
hematoxilina y eosina y también con el método de
Ziehl-Neelsen.
Resultados En la primera prueba intradérmica cuya lectura se realizó el
día 11 de julio de 1997, se detectaron 74 animales (25 ,69%)
positivos a la prueba de tuberculina con PPD aviar, 2 animales
(0,69%) positivos a la prueba con PPD bovino, con lecturas de
18 mm y 22 mm respectivamente, y 1 animal (0 ,34%)
positivo a ambas pruebas. Los demás animales arrojaron
resultados negativos. Todos los animales que reaccionaron a
las pruebas pertenecían a la categoría ovejas adultas (en
ordeño y secas) (Fig. 1 y 2) .
La prueba de inmunodifusión en gel de agar, realizada a partir
de 24 muestras de suero de animales reaccionantes a la prueba
con PPD aviar, dio resultados positivos en 6 de ellos. No se
aislaron micobacterias en ninguno de los cultivos de materia
fecal de estos animales.
En los dos animales positivos a la prueba de tuberculina con
PPD bovino que fueron sacrificados y necropsiados, se
observaron lesiones macroscópicas encapsuladas de 1 cm a
4 cm de diámetro, duras y redondeadas, con proyecciones
hemisféricas por encima de la superficie, que a la sección
presentaban contenido seco-caseoso y calcificado en hígado,
bazo, pulmón y linfonodos mediastínicos y mesentéricos de
ambos animales. Mycobacterium bovis no pudo aislarse,
debido a la intensa calcificación de las lesiones; la
histopatología (granuloma, necrosis central, mineralización y
presencia de células gigantes) fue compatible con estas
observaciones. Se aisló M. avium subsp. paratuberculosis en el
intestino de uno de ellos y en leche extraída antes del sacrificio
del segundo animal (Cuadro I).
Se aconseja como estrategia de saneamiento la eliminación de
los animales cuyos resultados a ambas pruebas tuberculínicas
son positivos.
En la segunda prueba intradérmica, cuya lectura se efectuó el
4 de septiembre de 1998, se detectaron 55 animales (22,26%)
reaccionantes a la tuberculina con PPD aviar y ningún animal
reaccionante a la prueba con PPD bovino; tampoco se
detectaron animales cuya reacción a ambas tuberculinas fuera
sospechosa. Los animales reaccionantes fueron en su mayoría
ovejas adultas (en ordeño y secas), dos cameros que en la
primera prueba tuberculínica habían dado resultados
negativos y una borrega (Fig. 3 y 4) .
De los 55 animales reaccionantes positivos, 16 eran animales
que no fueron eliminados luego de la primera prueba
intradérmica. Las lecturas de la primera y segunda prueba
intradérmica en estos animales se muestran en el Cuadro II.
Discusión Dado el desarrollo regional en la producción de quesos
elaborados con leche ovina, sería de gran utilidad controlar los
rodeos para evitar serios impactos en salud pública y los
consiguientes efectos negativos sobre la comercialización de
estos productos artesanales, y facilitar de esta manera el
control sanitario total de la cadena de producción. Este
control se justifica además por el hecho que M. avium subsp.
paratuberculosis no parece ser completamente inactivado en la
leche con los tratamientos térmicos de rutina (9).
El impacto epidemiológico negativo se expresaría por la
posible presencia de portadores y/o reservorios, quienes en
contacto con animales susceptibles de la misma o de otras
especies podrían actuar como diseminadores de la
enfermedad en los rodeos (15). Por lo tanto son
imprescindibles el control y la erradicación de la tuberculosis
y paratuberculosis en los rodeos lecheros, asegurando la
calidad total del producto final desde el rodeo de origen.
804 Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 19(3)
• Reacciones positivas a la prueba con PPD aviar (detección de paratuberculosis): 25,69%
• Reacciones positivas a la prueba con PPD bovino (detección de tuberculosis): 0,69%
• Reacción sospechosa a ambas pruebas: 0,34%
Fig. 1 Resultados de la primera prueba tubercul ín ica del estudio
En los animales que reaccionaron a la prueba con PPD
aviar en la primera prueba intradérmica, se confirmó la
presencia de M. avium subsp. paratuberculosis por serologia y
cultivo; sin embargo, no pudo aislarse M. bovis en los
dos animales que reaccionaron a la prueba con PPD
bovino, posiblemente debido a que las lesiones halladas
compatibles con tuberculosis eran muy antiguas y
presentaban un alto grado de calcificación, siendo la
histopatología compatible con tuberculosis por la presencia
de granuloma típico, células gigantes, linfocitos, macrófagos,
células epitelioides, necrosis central y mineralización del
tejido.
Se ha demostrado en ovinos que animales positivos a la
prueba con PPD aviar, en un distinto estadio de la infección
no eliminan bacilos y resultan negativos a la inmunodifusión;
esto se explica por la inmunidad mediada por células que se
determina con la inoculación de PPD aviar y corresponde a
una situación primaria del desarrollo de la enfermedad con
eliminación posterior de bacilos por materia fecal y
producción de IgG, detectable por la técnica de
inmunodifusión en gel de agar.
En la segunda prueba tuberculínica no se observaron animales
reaccionantes a PPD bovino, lo que sugiere que desapareció la
fuente de infección por M. bovis, y que probablemente la
infección haya tenido origen en años anteriores por contacto
con bovinos infectados.
Es cierto que el acceso limitado a las fuentes de infección
debido a las nuevas condiciones de manejo de los animales así
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Derivado proteico purificado (PPD) bovino
Rev. sa teck Off. int. Epiz., 19 (3) 805
Fig.2
Ovino reaccionante a las pruebas con derivado proteico purificado
bovino y aviar
como la élimination de los ovinos reaccionantes, mejoraronel cuadro diagnôstico. Pero deberian considerarsecuidadosamente estos resuitados, ya que tratândose de unaenfermedad de évolution crônica, no se puede descartar que
otras pruebas tuberculînicas realizadas con PPD bovinopongan de manifiesto la apariciôn de nuevos animalesreaccionantes a lo largo del tiempo.
Se observa una levé disminuciôn en el porcentaje deanimales que reaccionaron a la prueba con PPD aviar, lo queindica que las estrategias de saneamiento llevadas acabo comenzaron a dar sus frutos, a pesar de quepermanecieron en el rebano los 16 animales reaccionantespositivos a PPD aviar detectados en la primeraprueba intradérmica, con la consiguiente contaminationdel ambiente que se manifiesta por la détection deanimales reaccionantes en borregas de 6 a 7 meses deedad.
A pesar de que la respuesta celular decrece a medida queevolucionan las enfermedades granulomatosas, la pruebatuberculinica es una importante herramienta diagnôsticacomo se demuestra en el Cuadro II, donde se observa que de16 animales reaccionantes que permanecieron en el rodeo, 13presentaron un aumento de la reacciôn mientras quesolamente en 3 animales se observé una disminuciôn.
Cuadro I
Resuitados de las diferentes pruebas diagnôsticas realizadas en 24 animales para detectar Mycobacteriumbovisy M. awumsubsp.
paratuberculosis
Oveja N2 IDGAPrueba
con PPDaviar
Pruebacon PPDbovino
Cultivo deM. bovis
Cultivo deMaTmsubsp.paratuberculosis
U s j o n e s
macroscôpicas
Lesionesmicroscôpicas
Am453
Am327
Am435
Am327
N72
N532
V508
Az530
Am4
N71
Az481
Am18
N1
V716BI51
N515
Az933
N199
N 150
Az591
Am49
N532
VmdrAm409
6 mm
15 mm
20 mm
15 mm
7 mm
7 mm
14 mm
7,5 mm
13,5 mm
14 mm
7 mm
8 mm
10,5 mm
16 mm
13,5 mm
16,5 mm
15,5 mm
4 mm
10 mm
16 mm
9 mm
7 mm
4 mm
3,5 mm
---
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18,5 mm
22 mm
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IDGA: inmunodifusiôn en gel de agarpPD : derivado proteico purificadoN/R :norealizado
806 Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 19 (3]
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17
16
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Derivado proteico purificado (PPD) bovino
Reacciones positivas a la prueba con PPD aviar (detecciôn de paratuberculosis): 22,26%
Fig.3Resultados de la segunda prueba tuberculinica del estudio
Fig.4Ovino reaccionante a la prueba con derivado proteico purificado aviar
Es deseable que los datos obtenidos orienten a futurosinvestigadores sobre infecciones naturales concomitantes,para clarificar los mecanismos de infecciôn y tambiénestimulen a los veterinarios a poner mayor atenciôn en eldiagnôstico de estas enfermedades, orientado a la prevenciôny erradicaciôn (1).
ConclusionesEn la primera prueba intradérmica realizada sobre un total de288 ovinos se encontraron 2 (0,69%) animales positivos a laprueba con PPD bovino, 1 (0,34%) animal sospechoso a laspruebas con PPD bovino y aviar, y 74 (25,69%) animalespositivos a la prueba con PPD aviar.
Rev. sci. tech. Off. int. Epiz., 19 (3) 807
Cuadro I I Evolución de la respuesta a la prueba int radérmica con derivado
proteico puri f icado aviar en 16 an ima les que permanec ieron en el
rodeo durante el estudio
Oveja N° Primera p r u e b a ( a ) Segunda p r u e b a ( b )
Am 4 13,5 mm 18 mm
Am 19 7 mm 10 mm
Am 31 15 mm 23 mm
Am 41 4,5 mm 11 mm
Am 49 9 mm 18 mm
Am 326 22,5 mm 14mm
Am 402 5,5 mm 3 mm
Am 414 4,5 mm 12 mm
Bl 51 13,5 mm 7 mm
Az481 7 mm 12 mm
Az503 4 mm 9 mm
Az 530 7,5 mm 9 mm
N1 10,5 mm 13 mm
N24 3 mm 10 mm
V716 16 mm 17 mm
Az477 11 mm 12 mm
a) realizada el 11 de julio de 1997
b) realizada el 4 de septiembre de 1998
En la segunda prueba intradérmica, realizada un año después
sobre 247 ovinos, no hubo animales reaccionantes a la prueba
con PPD bovino, mientras que 55 (22 ,26%) animales
reaccionaron a la prueba con PPD aviar.
La permanencia de animales positivos a PPD aviar en el rodeo
y la consiguiente contaminación del ambiente explican que se
detectaran nuevos reaccionantes en borregas de 6 a 7 meses
de edad, en la segunda prueba tuberculínica efectuada un año
después.
Se considera que la prueba tuberculínica es una herramienta
de valor diagnóstico precoz, independiente del tiempo de
evolución de la enfermedad.
La utilización del pliegue anocaudal no fue de utilidad, dado
que a la mayoría de las razas de la especie ovina se les practica
caudotomía, lo que dificulta la inoculación y lectura, además
de la baja sensibilidad de la piel de la zona. La prueba
intradérmica doble comparativa en la zona axilar dio muy
buen resultado por ser una zona desprovista de lana y permite
diferenciar con claridad las reacciones debidas a la
inoculación de PPD bovino y PPD aviar.
El hallazgo de ambas enfermedades en rodeos ovinos debe
alertar sobre el correcto manejo sanitario y la importancia del
diagnóstico diferencial para cumplir con las actuales
exigencias de control de calidad de alimentos para consumo
humano desde el rodeo de origen.
Agradecimientos Los autores agradecen a los Doctores Daniel Morel y Eduardo
Martínez la colaboración prestada, que permitió llevar a cabo
esta experiencia.
First description of concomitant infection wi th tuberculosis and paratuberculosis in dairy sheep in Argentina
M.C. Jorge, D.M. Schett ino, P. Torres & A. Bernardell i
Summary The authors present the results of a comparative intradermal tuberculin test performed on dairy sheep to determine rates of reaction to bovine and avian purified protein derivative (PPD). Test reactions were interpreted by palpation and measurement with a calliper. Results were analysed by plotting the values obtained. Agar gel immunodiffusion tests, growth in culture and histopathological examinations were also performed to allow differential diagnosis between
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tuberculosis and paratuberculosis. In the first tuberculin test, performed on 288 sheep, 74 animals showed a positive reaction to avian PPD (25.69%), two animals showed a positive reaction to bovine PPD (0.69%), and one animal was positive with respect to both tuberculins (0.34%). In the second test, involving 247 sheep, 55 demonstrated a positive reaction to avian PPD (22.26%), whilst none reacted to bovine PPD. The presence of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis was confirmed by culture and serological testing. In addition, lesions compatible with those caused by M. bovis were found by histopathological examination. These findings highlight the importance of the accurate diagnosis of tuberculosis and paratuberculosis for the effective control of both diseases.
Keywords Argentina - Diagnosis - Paratuberculosis - Sheep - Tuberculosis.
Première description d'une infection concomitante de tuberculose et de paratuberculose chez des ovins d'élevages laitiers en Argentine
M.C. Jorge, D.M. Schett ino, P. Torres & A. Bernardell i
Résumé
Les auteurs présentent les résultats d'une épreuve de tuberculination intradermique comparative, afin de déterminer le taux de réaction à la tuberculine dérivée de protéine purifiée (PPD), bovine et aviaire, chez des ovins issus d'élevages laitiers. Les réactions aux épreuves ont été interprétées par palpation et par mesure au pied à coulisse. Les résultats ont été évalués au moyen d'un diagramme à points. Le test d'immunodiffusion en gélose, la mise en culture et un examen histologique ont également été effectués pour établir le diagnostic différentiel entre tuberculose et paratuberculose. À l'issue du premier test à la tuberculine, effectué sur 288 ovins, 74 animaux ont réagi à la tuberculine PPD aviaire (25,69 %) ; deux animaux ont réagi à la tuberculine PPD bovine (0,69 %) et un animal a réagi aux deux tuberculines (0,34 %) ; à l'issue du deuxième test, réalisé sur 247 ovins, 55 animaux ont réagi à la tuberculine PPD aviaire (22,26 %) tandis qu'aucun animal ne réagissait à la tuberculine PPD bovine. La présence de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis a été confirmée par la sérologie et la mise en culture, et des lésions histologiques compatibles avec celles occasionnées par M. bovis ont été observées. Ces observations devraient attirer l'attention sur la nécessité de diagnostiquer correctement la tuberculose et la paratuberculose pour une prophylaxie efficace de ces deux maladies.
Mots-clés Argentine - Diagnostic - Ovins - Paratuberculose - Tuberculose.
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Bibliografía
1. Bernabé A., Gómez M.A., Navarro J.A., Gómez S., Sánchez J . , Sidrach J . & Menchén V. (1991). - Pathological changes of spontaneous dual infection of tuberculosis and paratuberculosis in goats. Small Rum. Res., 5, 377-390.
2. Centro Panamericano de Zoonosis (1991). - Situación de la tuberculosis bovina en América Latina y el Caribe (I.N. Kantor y E. Alvarez, edit.). Publicación especial N° 10. Centro Panamericano de Zoonosis, Buenos Aires, 1-47.
3. Collins M.T. (1996). - Diagnosis of paratuberculosis. Vet. Clin. N. Am. (Food Anim. Pract.), 12 (2), 357-371.
4. Collins M.T. (1997). - Mycobacterium paratuberculosis. A potential food-borne pathogen? J. Dairy Sci., 80, 3445-3448.
5. Collins M.T. & Sung N. (1998). - Thermal tolerance of Mycobacterium paratuberculosis. Appl. environ. Microbiol, 64 (3), 999-1005.
6. Gajendragad M.R., Krishnappa G., Gopalalrishna S., Prabhudas K. & Rao B.U. (1988). - Concomitant infection of tuberculosis and paratuberculosis in a cow and its importance. Indian vet. J., 65, 1047-1048.
7. Garcia Martin F., Perez V., Luco D.F. & Badiola J. J . (1994). -Relationship among pathology and serology in diagnosis and evaluation of ovine paratuberculosis. Paratuberc. Newsl., 5 (2), 62-68.
8. Grant I.R. (1998). - Does Mycobacterium paratuberculosis survive current pasteurization temperatures? Appl. environ. Microbiol, 64 (7), 2760-2761.
9. Grant I.R., Ball HJ. , Neill S.D. & Rowe M.T. (1996). -Inactivation of Mycobacterium paratuberculosis in cows' milk at pasteurization temperatures. Appl. environ. Microbiol, 62 (2), 631-633.
10. Herrera M. (1997). - Determinación de reaccionantes a PPD bovino y aviar en rodeos lecheros caprinos y ovinos. Tesis de grado. Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires, Tandil, 1-64.
11. Hines M.E., Kreeger J.M. & Herron A.J. (1995). -Mycobacterial infections of animals: pathology and pathogenesis. Lab. Anim. Sci., 45 (4), 334-351.
12. Morris R.S., Pfeiffer D.U. & Jackson R. (1994). - The epidemiology of Mycobacterium bovis infections. Vet. Microbiol, 40, 153-177.
13. Nader A. & Bemardelli A. (1986). - Utilización del test tuberculinico intradérmico comparativo en ovinos como prueba de screening en paratuberculosis. Rev. Med. vet, 67 (6), 335-338.
14. O'Reilly L.M. & Daborn C.J. (1995). - The epidemiology of Mycobacterium bovis infections in animals and man: a review. Tubercle Lung Dis., 76 (Suppl. 1), 1-46.
15. Rosenberg F.J. (1977). - Principios de epidemiología OPS-OMS. Centro Panamericano de Fiebre Aftosa, Río de Janeiro, 1-89.
16. Scott-Orr H. (1998). - Ovine Johne's disease. Aust. vet. J., 7 6 ( 1 ) , 31.
17. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA) (1993). - Plan Nacional de Control y Erradicación de la Tuberculosis Bovina. Resolución 1287/9. SENASA, Buenos Aires, 1-65.
18. Stehman S.M. (1996). - Paratuberculosis in small ruminants, deer, and South American Camelids. Vet. Clin. N. Am. (Food Anim. Pract.), 12 (2), 441-455.
19. Uhl W. & Muller B. (1995). - Mycobacterium bovis infection of a sheep flock. Prakt. Tierarzt, 76 (5), 415.