PRODUCCION DE ALEVINESDE RODABALLO(Scophthalmus maximus)

MARIO RODRIGUEZ ALVARIÑODoctor Ingeniero AgrónomoDepartamento Producción Animal, E.T.S.I. Agrónomos Madrid

ORLANDO DIAZ MARTINEZIngeniero AgrónomoConsellería de Agricultura, Xunta de Galicia

^TrMINISTERIO DE AGRICULTURA PESCA Y AUMENTACION

SECRETARIA GENER.AI DE ESTRUCTURAS AGRARIAS

PRODUCCION DE ALEVINES DE RODABALLO(Scophthalmus maximus)

La producción de especies marinas a través de su cultivo haexperimentado un importante crecimiento en los últimos años,basado en técnicas de obtención y engorde de alevines. Nuestropaís. se ha incorporado a este proceso, desarrollando técnicasadaptadas a nuestras condiciones específicas. En el caso delrodaballo, la producción se ha basado, en gran medida, en elengorde de alevines obtenidos mayoritariamente fuera de España,aprovechando los buenos crecimientos que permiten las aguas delas costas gallegas.

La producción de alevines de rodaballo ha sido objeto deinvestigación sistemática desde 1970 en centros de Gran Bretaña.Hoy día se puede decir que los trabajos experimentales realizadosen varios países permiten su producción en gran escala, aunquesiguen existiendo limitaciones técnicas que impiden un rendi-miento satisfactorio. Una consecuencia inmediata ha sido la proli-feración de empresas dedicadas exclusivamente al engorde derodaballo, especialmente a partir de 1985. La tendencia actual esla especialización, bien como hatchery productora de alevines obien como granja de engorde.

En los siguientes apartados se describen, de modo general, lastécnicas que son utilizadas hoy de modo rutinario para producciónde alevines de rodaballo.

PRODUCCION DE GAMETOS

EI ciclo de producción del rodaballo en granjas marinas semuestra esquemáticamente en la figura 1, partiendo de reproduc-tores capturados en el mar o de los obtenidos cerrando el cicloen las granjas.

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Núcleo reproductor

Hembras Machos

Huevos

Renovación10-30% anual

•

Selección

^

^

1

Venta

Esperma

1

Vida útil entre4 y 12 años

ManipulaciónFotoperíodo

Día 0

6 días a 16°C.

Día 6

Alimento vivoRotíferos/Artemia

Se inicia entre los15 v 35 días a 22°C.Tamaño final: 22-45 mm.

Alevines de I-2 g. de40-90 días. Piensoseco o ^cmihúmedo

Desde 2 a 40-100 g.

F,n[re 100 g. y I-2 kg.

Fig. l.- Esquema de la producción de Rodaballo en granjas marinas con ciclo cerrado.

Fecundación

Incubación

Hatching

♦

Desarrolloembrionario

♦

Metamorfosis

1

Destete

Preengorde

Engorde

3

El rodaballo alcanza la madurez sexual entre el tercer yquinto año de vida, con un peso entre dos y tres kilos. La varia-ción se debe, fundamentalmente, a distintas velocidades de creci-miento según la temperatura del agua en que se desarrollan losfuturos reproductores.

La época de puesta depende, fundamentalmente, del fotope-ríodo. En condiciones naturales la maduración sexual está poten-ciada por fotoperíodos crecientes de primavera y es inhibido porel fotoperíodo decreciente del otoño. El estímulo luminoso desen-cadena el desarrollo de huevos y esperma, de modo que unos tresmeses más tarde se encuentran reproductores preparados para laemisión de gametos. El período de puesta varía entre abril y julioen las costas de Escocia y entre mayo y agosto en las costas deGalicia.

En condiciones controladas el núcleo reproductor puede sermanipulado para producir gametos en otras épocas del año. Lamanipulación se realiza modificando el ciclo anual de luz, demodo que la estimulación debida a fotoperíodos crecientes nocoincida con la primavera. Si, por ejemplo, se obliga a que elintervalo entre el día más corto y el más largo sea de tres meses(en lugar de los seis propios de un ritmo anual), las hembrascomienzan la puesta en diciembre en lugar de marzo, comoocurre en condiciones naturales. De acuerdo con las necesidadesde los centros de producción, se utilizan distintos métodos paramodificar la época de puesta:

- Retrasar la puesta manteniendo los reproductores bajofotoperíodos cortos (ocho horas de luz/día), pasando a 18 horasde luz/día unos tres meses antes de la época deseada de puesta.El método es fiable cuando el retraso no supera en seis meses ala época natural de puesta. La eficacia mejora si se eleva la tem-peratura del agua a 15-16° C.

- Someter a los reproductores a fotoperíodos largos perma-nentemente (18 horas de luz/día), con lo que la puesta ocurreaproximadamente cada ocho meses. Si se comienza con dosnúcleos reproductores desfasados cuatro meses se pueden conse-guir gametos casi permanentemente.

- Comprimir el ritmo de luz anual en un ritmo cíclico con

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variación cada nueve meses. Disponiendo de tres núcleos repro-ductores (al menos con 15 hembras cada uno), desfasados entre sícuatro meses, es posible disponer de gametos prácticamente todoel año, tal como se refleja en el organigrama de la figura 2.

Modificación de Puesta a intervalos de 9 mesespuesta inicial Primer año Segundo año Tercer año

Puesta temprana Marzoinducida por y Septiembre Juniofotoperíodo largo diciembre

MarzoPuesta normal Junio y Septiembre

diciembre

Puesta tardía Marzoretrasada por Septiembre Junio yfotoperíodo corto diciembre

Fig. 2.-Esyuema para control de la producción de gametos de rodaballo, comprimiendo elfotoperíodo anual en un ciclo de 9 meses.

FECUNDACION CONTROLADA

La madurez de los gametos al llegar la época de puesta pro-voca engrosamiento del ovario y testículo, lo que se traduce enuna hinchazón visible externamente. La región ovárica o testiculares flexible, cediendo a la presión de la mano. Un masaje suave,dirigido hacia el orificio genital, permite liberar huevos oespermatozoides.

Los reproductores son mantenidos normalmente en tanques,donde se los recoge para realizar in situ el masaje genital. Ellíquido expulsado por la hembra es abundante y blanquecino, conuna alta concentración de huevos. La puesta media es de 165.000

huevos de 1 mm de diámetro, alcanzándose en puestas óptimasla cifra de 300.000 huevos. No obstante, la producción de cadahembra está asociada a su peso, habiéndose dado cifras de unmillón de huevos por kilogramo de peso vivo en la temporada dereproducción, con puestas separadas entre sí unos tres días. Elcolor claro del líquido es un indicador de buena calidad de la

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puesta. Si el color es oscuro, la recogida se ha hecho demasiadotarde, los huevos están sobremaduros y la capacidad de serfecundados muy disminuida. La recogida se realiza en una cubetade plástico que contiene varios litros de agua del tanque, con lamisma temperatura a que se encuentran los reproductores. Tam-bién se puede realizar la fecundación en seco, sin añadir agua ini-cialmente, siempre que se asegure una buena mezcla de los hue-vos y espermatozoides.

La emisión del macho es de escaso volumen, 2 a 4 ml, conun color blanquecino. El eyaculado se recoge en jeringas de 1 mly se diluye inmediatamente en un litro de agua. Una proporciónrazonablemente segura es emplear dos machos para cada hembra,recogiendo 2 ml a cada uno. Otra posibilidad es mezclar la reco-gida de todos los machos y repartirla entre las cubetas de lasdiferentes hembras.

Realizada la mezcla de huevos y espermatozoides, la fecunda-ción tendrá lugar en diez minutos. La capacidad de los huevospara ser fecundados se pierde si transcurren más de 20 minutostras la puesta. Unos 15-20 minutos después de la mezcla se pro-cede a completar las cubetas con agua de los tanques hasta diezlitros, para permitir la separación de los huevos en mal estado, decolor blanco, que se hunden y son retirados sifonando el fondode la cubeta.

La eficacia de la fecundación se valora observando los huevoscon lupa (diez aumentos) a las 2-2,5 horas. La primera divisiónhabrá tenido lugar y debe alcanzar al 80-90% de los huevos. Si ladivisión es observada en menos del 50% de los huevos, la totali-dad de la puesta de esa hembra será desechada. Por otra parte, serealizan observaciones sobre la forma de los huevos, aspecto, gotade grasa (que asegura la flotabilidad)..., que contribuyen a califi-car la calidad de la puesta.

En la figura 3 se muestran huevos recogidos en septiembreprocedentes de hembras que han sufrido manipulación del fo-toperíodo, y que han experimentado ya la primera división, treshoras después de la mezcla con el eyaculado. Algunos huevos noestán divididos, ya que la fecundación no ha tenido lugar y dege-nerarán en corto período de tiempo.

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Un dato de interés es la cantidad total de huevos producidospor hembra y puesta, que permite comparar la eficacia de fecun-dación, eclosión y desarrollo de larvas y alevines. Se puededeterminar, aproximadamente, tomando una muestra de 100 mlde la cubeta de fecundación después de homogeneizar su contenidoagitando suavemente. Esta muestra se diluye hasta 1 litro y setoman 100 ml, cuyo contenido en huevos se determina porconteo al trasluz en tubos de ensayo. El número así determinadose multiplica por 1.000 y se obtiene el número total de huevos dela puesta. El número de huevos en desarrollo se obtiene al restarlos que no flotan y se extraen por sifonado.

INCUBACION

Los huevos en desarrollo son transferidos a las incúbadoras,donde permanecerán hasta la eclosión, que tiene lugar seis díasdespués. Los tanques de incubación suelen tener una capacidad de

a

J

Fig. 3.-Huevos de rodaballo en su primera división. Los huevos no fecundados muestranindicios de degeneración en la periferia de la célula.

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30 a 140 litros. En 80 litros se puede realizar la incubaciónsimultánea de hasta 500.000 huevos. Existen diversos diseños detanques, con modificaciones sobre el modelo que se describe acontinuación y que se muestra esquemáticamente en la figura 3:

- Cubeta de polietileno con fondo cónico, de 80 litros, pre-parada para salida del contenido por la parte inferior.

- Entrada de agua al nivel superficial, con drenaje a travésde una tubería central perforada y protegida por una red de 300 µ.Una segunda tubería dentro de la anterior obliga al agua a undrenaje a nivel superficial regulando el nivel de recirculación.

- Aireación a través de un anillo perforado situado en labase del tanque, con lo que se crea una corriente de burbujas queevita la adhesión de los huevos al 61tro de drenaje.

Recirculación de agua por una bomba sumergible situadaen un tanque de 500 litros y con un filtro de 5 µ, que abastecea ocho tanques de incubación. En algunos modelos no se recir-cula el agua, siendo conveniente la adición de antibióticos.

- Regulación de la temperatura del agua a 15-16°C medianteun calentador de inmersión controlado por un termostato.

Fig. 4.-Esquema de un incubador (A) y detalle del sistema de aireación y drenaje (B). Lasflechas con[inuas indican flujos de agua, y las discontinuas, flujos de aire.

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Este sistema permite una limpieza diaria del tanque, retirandolos huevos muertos (blancos y que no flotan), sifonando el fondotras permitir su decantación al cortar la aireación unos minutos.Otra posibilidad es elevar el sistema de drenaje hasta permitir lasalida de los huevos muertos por arrastre a través del orificio delfondo del tanque.

La salinidad debe ser regulada para asegurar la flotabilidad,pudiendo ser incrementada hasta 35-36°/,N,. No obstante, algunosautores encuentran buenas tasas de eclosión con salinidades del15-20°%^„ si bien las mejores tasas de larvas viables se alcanzanpara salinidades del 25-35"/,x,. Una salinidad del 5°%x^, resultaletal para los huevos.

La duración de la incubación puede ser modificada por latemperatura a que se desarrolla el proceso. Si se toma comopunto de referencia la temperatura de 16°C, se ha observado unretraso de la eclosión de 130 horas cuando se incuba a 10°C, asícomo un adelanto de 33 horas cuando la temperatura de incuba-ción es de 20°C. Las mejores tasas de eclosión se obtienen contemperaturas de incubación entre 14,5 y 17,5°C. Por debajo de] 0°C se produce un rápido aumento de la mortalidad de loshuevos.

Las incubadoras pueden ser sometidas a iluminación natural oa iluminación artificial (1.500-2.000 lux) durante un tiempo de 8a 10 horas diarias.

Durante el período de incubación se pueden transportar loshuevos sin daños durante períodos de hasta 24 horas. El trans-porte se realiza en bolsas de plástico, selladas y con oxígeno, auna densidad de 500 huevos por litro. El período más favorablees en mitad de la incubación (días 3-4), cuando se ha superado elestado de mórula y se alcanzan los de gástrula y neúrula. No obs-tante, ello implica una pérdida importante de huevos, que puedealcanzar el 66% tras enfriamiento a 5°C durante 48 horas, ade-más de sufrir un retraso de 44 horas en la eclosión.

En la figura 5 se pueden observar huevos que han expe-rimentado la segunda división, presentando cuatro células con unadisposición simétrica. En la figura 6 la tercera división hatenido lugar y pueden observarse huevos con 6 u 8 células, con

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Fig. 5. -Huevos de rodabalio en segunda Fig. 6.-Huevos de rodaballo en tercera di-división, presentando cuatro células. Se ob- visión. Se observan grupos de 6 células yueservan algunos huevos que no han sido fe- corresponden a núcleos embrionarios de 8

cundadn;. células.

una disposición irregular a causa de la falta de uniformidad en lavelocidad de división de las células hijas. Las fases de segunda ytercera división se alcanzan aproximadamente 5 y 7 horas despuésde la fecundación.

Las figuras 7 y 8 muestran fases del desarrollo embriona-rio correspondientes a los días 4 y 5 de incubación, en los que esposible identificar órganos como corazón, ojos y sistema nervioso.

La figura 9 muestra la eclosión (hatching) por ruptura dela membrana externa del huevo y salida de la larva, que conservaun voluminoso saco vitelino que le permite alimentarse en losprimeros días de su vida.

DESARROLLO DE LARVAS Y ALEVINES

Las larvas de rodaballo recién eclosionadas alcanzan unalongitud de 2,2 a 3,0 mm. El saco vitelino posee un glóbulo sim-ple de grasa que asegura la flotabilidad de la larva cabeza abajo,

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cerca de la superficie del agua durante las primeras 6-12 horas devida. En este período las larvas son bastante inactivas, aunyueocasionalmente realizan enérgicos movimientos de contracción dela cola.

La larva es inicialmente simétrica. El saco vitelino dura 3-4días tras la eclosión, durante los que es reabsorbido y transfor-mado en tejido corporal, dando lugar a cambios morfológicos encabeza, ojos, branquias e intestinos. A partir de aquí, consumidoel vitelo, la larva se denomina alevín. En una segunda fase dedesarrollo, de 8-10 días de duración, se produce el desarrollo delintestino y de la vejiga natatoria, apareciendo espinas óseas en losopérculos y en torno a la órbita de los ojos. En una tercera fase,con una duración de 2-3 días, aparecen las espinas de la aletacaudal (las larvas miden menos de 6 mm). En la cuarta fase seinicia la metamorfosis, que implica asimetría y emigración del ojoderecho hacia arriba para situarse en posición dorsal, al tiempoque se desarrollan las espinas de las aletas caudal, anal y dorsal.La fase cuarta dura unos 10-15 días y es seguida por una quinta

Fig. 7.- Aspecto embrionano en el día 4 de incubacióa Se otuervan 2 huevcn en degeneración.

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Fig. 8.-Desarrollo embrionario en día 5 de Fig. 9. Eclosión en día 6 de incubación.incubación.

fase en la que se completa la metamorfosis, caracterizada por lasituación del ojo derecho en la cara dorsal, pérdida de pigmenta-ción de la cara ventral, extensión de la aleta dorsal hasta la alturade los ojos, reabsorción de la vejiga natatoria y reabsorción de lasespinas de la cabeza, al tiempo que se osifican los huesoscraneales.

El período que transcurre hasta la metamorfosis está en partebajo control genético y en parte afectado por factores ambientales,como temperatura, dieta y calidad del agua. En consecuencia, sehan encontrado distintas edades (45-90 días) y tamaños (22-45milímetros) para que se complete la metamorfosis. Para tempera-turas elevadas de cría (22°C) la metamorfosis se inicia entre ISy 35 días, mientras que a 13-18°C comienza a 45-75 días deedad, con una gran variabilidad individual.

Una vez culminada la metamorfosis y los cambios de pigmen-tación, el alevín se limita a incrementar su tamaño, sin cambiarde apariencia.

La portada muestra una larva de rodaballo dos días después

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de la eclosión, correspondiente a la primera fase de desarrollo. Lafigura 10 corresponde a un alevín que ha iniciado la metamorfosisy la 11 a un alevín en una fase avanzada de metamorfosis.

ALIMENTACION DE ALEVINES

La transferencia desde las incubadoras a los tanques de cría serealiza antes de dos días después de la eclosión. La temperaturadel agua está regulada para mantenerla a 20°C (18-24°C). Se

aporta iluminación continua o 18 horas de luz/día (300-2.000lux).

Un tanque de 2.000 a 3.000 litros permite la cría de larvasprocedentes de una misma fecundación, pudiendo albergar a los35 días a un máximo de 60.000 alevines. No es necesario reno-var el agua, siempre que se eliminen los sedimentos y alevinesmuertos y que la aireación asegure una saturación de oxígeno al95-100%. Los tanques de color negro parecen facilitar la captura

del alimento.El saco vitelino asegura la nutrición de la larva durante 2-3

días, por lo que se hace imprescindible suministrar alimento parala supervivencia del alevín a partir del día tres.

La alimentación se basa en el aporte de presas vivas. En unaprimera fase se suministran rotíferos ( Brachionus plicatilis), co-menzando el día 3 y finalizando entre los días ]0-15 tras laeclosión. Esta fase puede reducirse hasta el día 8-9 o retrasarsehasta el día 20 en función del crecimiento de los alevines. En una

Fig. 10.- rAlevín en inicio de mctamorfosis. Fig. I I.- Alevín en fase avanzada de meta-morfosis.

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segunda fase los rotíferos son sustituidos por Artemia nauplii,que se introduce en la dieta a partir del día 8-10, con una susti-tución progresiva.

El desarrollo de los rotíferos requiere el cultivo de algascomo fuente de alimentación. Las más utilizadas son Isochrysisgalvana y Nannochloris atomus. Las algas se multiplican a partirde cultivos originales durante períodos de 7 semanas en matracesde un litro, para ser transferidos posteriormente a matraces de 5litros y a bolsas de plástico de gran tamaño (400 litros) conaireación, desde donde se utiliza. Además de servir como ele-mento nutritivo, las algas permiten el oscurecimiento de los rotí-feros, facilitando su identificación por parte de los alevines. A lavez se añaden 4 litros de cultivo de algas/día al tanque de críapara mantener la calidad del agua, reciclando el amoníaco y elanhidrido carbónico.

La cantidad de rotíferos a administrar se determina en funcióndel número de larvas presentes y de los restos de alimento noconsumido, procurando ofrecer una concentración de 3-5 rotíferospor ml. Los rotíferos deben ser enriquecidos con ácidos grasos decadena larga, que son añadidos junto con el cultivo de algas doshoras antes de la alimentación de los alevines. Ello se debe a queel rodaballo es incapaz de desaturar los ácidos grasos linoleico ylinolénico, precursores del araquidónico y docosahexanoico, ácidosgrasos insaturados de 20 y 22 átomos de carbono. Por tanto, ladieta (en este caso rotíferos) debe aportar estos elementos, ya queel alevín no puede utilizar directamente los contenidos en lasalgas.

El aporte de artemia se realiza a partir de cultivos diarios dehuevos (cistes) que se incuban a 26-30°C en agua de mar conaireación. La eclosión se produce unas 26 horas después y debenser utilizados antes de 6 horas, para aprovechar al máximo suvalor nutritivo. La incubación de 30 gramos de huevos de arte-mia se traduce en la eclosión de unos 4 millones de nauplios. Loshuevos no eclosionados se retiran antes de suministrar la artemia.El suministro se realiza contando previamente los restos paraofertar una concentración de 2-3 nauplios por inl. Por debajo deun nauplio por mi se observa un drástico descenso del consumo.

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La supervivencia de alevines desde la eclosión al fln de lametamorfosis es muy variable. Se han obtenido supervivenciasentre el 0% y el 50% para idénticas condiciones, sin que las razo-nes de esta variabilidad sean conocidas. Una tasa media del 5%de supervivencia puede ser considerada como satisfactoria.

La mortalidad se distribuye en dos períodos críticos; en tornoal inicio de la alimentación (días 2 a 7) y en torno al período detransición rotíferos-artemia (días 12 a 15). Sobre una mortalidadmedia de un 95%o se encuentra que un 30% de larvas muerenjusto después de la transferencia al tanque de cría (días 2 y 3),un 20% no aceptan los rotíferos y mueren entre los días 4 y 7, yun 45% perecen por no aceptar la artemia entre los días 12 y 15.

El transporte de los alevines puede ser realizado sin problemas,después de la metamorfosis, en bolsas de polietileno conteniendo2-4 litros de agua, infladas con oxígeno y selladas. Se .debe evitarla formación de rincones en los que los alevines puedan quedaraprisionados. Normalmente el transporte se realiza tras el destete,cuando los alevines alcanzan un peso de 2 gramos y un tamañode 4 a 5 cm, siendo aconsejable dejar de suministrar alimento 2a 3 días antes para que se vacíe el aparato digestivo y se reduzcala expulsión de heces y metabolitos contaminantes. Los alevinesse transfieren en grupos de 200 a bolsas de 4-6 litros, donde pue-

den permanecer sin comer 4-5 días sin problemas, siendo alimen-tados a la llegada al punto de destino.

MEJORA DE LA TECNICA

Si bien la producción de alevines de rodaballo es hoy unatécnica rutinaria utilizada a escala masiva. los resultados distan deser satisfactorios. Por una parte, la mortalidad es muy elevada.Por otra, la repetibilidad de los resultados para las mismas condi-ciones de cultivo es muy baja, lo que indica que no se controlanfactores que inciden de modo importante en la supervivencia.

Los esfuerzos para mejorar los resultados deben orientarsehacia los siguientes apartados, algunos de los cuales se han tradu-cido ya en líneas de investigación:

IS

- Manipulación de reproductores combinando fotoperíodo einducción hormonal de la maduración y puesta, mejorando lacalidad de huevos y esperma.

Conservación de gametos por refrigeración y criopreser-vación.

Reducción de la mortalidad mejorando la dieta porsuplemento de ácidos grasos.

- Incorporación de copépodos (Eurytemora affmis) en lugarde rotíferos y artemia, a causa de su mayor contenido en ácidosgrasos insaturados de 20 y 22 carbonos.

- Desarrollo de dietas secas microencapsuladas, reduciendo 0eliminando la utilización de alimento vivo.

La investigación en estas áreas es una vía para la obtenciónautóctona de alevines en buenas condiciones de rentabilidad.España está objetivamente interesada en cerrar el ciclo de estaproducción prometedora, controlando directamente la oferta dealevines para granjas de engorde y neutralizando su dependenciade las técnicas desarrolladas fuera de nuestro país.

^Tr̂MINISTERIO DE AGRICULTURA PESCA Y ALIMENTACION

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