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Pruebas bioquímicas
para identificación de
enterobacterias
Práctica 11
Agar triple azúcar y hierro (TSI)
• Color: rojo ladrillo
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: rojo fenol
• Sustratos Principales:Lactosa, sacarosa y glucosa
Agar triple azúcar y hierro (TSI)
Carbohidratos: ácido
•Lactosa
•Sacarosa
•Glucosa
Gas
Sulfuro de hidrogeno
• Superficie inclinada:
▫ fermentación de lactosa o sacarosa amarillo
Indicador: Rojo de fenol
• Profundidad:
▫ Fermentación de glucosa amarillo
▫ Gas burbujas o fragmentación del medio
• Sulfuro de hidrógeno negro
Sin inocular
K/K - - K/A - - A/A + - A/A + + K/A - +
Agar lisina hierro (LIA)
• Color: lila
• Inhibidores: no tiene
• Indicador: púrpura de bromocresol
• Sustratos principales: lisina y glucosa
Agar lisina hierro (LIA)
• Descarboxilación de la lisina
• Positiva color purpura
• Negativa
▫ Superficie: purpura
▫ Fondo: amarillo
K/K - - K/A - - R/A + - K/A + +
SIM
• Color: crema
• Indicador: no tiene
• Inhibidor: no tiene
• Sustrato principal: peptona
• Sustrato secundario: tiosulfato sodico, hierro y amanio
SIM
• Ácido sulfhidrico
▫ Positivo: negro
▫ Negativo: del color del medio
S
• Indol
▫ Positivo: anillo rojo (Reactivo de Kovacs)
▫ Negativo: anillo amarillo
I
• Movilidad
▫ Positiva medio opaco
▫ Negativa crecimiento en la linea del inoculo
M
MIO
• Movilidad
• Indol
• Ornitina▫ detección de la enzima
ornitina decarboxilas
CITRATO
• Color: verde
• Inhibidor: no tiene
• Indicador: azul de bromocresol
• Sustrato principal: citrato de sodio
CITRATO
• Citrato de sodio
• Indicador: azul de bromotimo
▫ Positiva: azul
▫ Negativo: verde
Urea
• Olor: rosado
• Indicador: rojo fenol
• Inhibidor: no tiene
• Sustrato principal: urea
Urea
• Detecta enzima ureasa
• Indicador: rojo de fenol
• Positivo: a
Urea amoniaco
Negativa
Procedimiento
• Rotular tubos
▫ TSI
▫ LIA
▫ MIO o SIM
▫ Citrato
▫ Urea
• TSI: 1 picadura + superficie
• LIA: 2 picaduras + superficie
• MIO: 1 picadura en el centro
• Citrato: superficie
• Urea: superficie o en el caldo