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Universidad Nacional Autónoma de Nicaragua
Facultad de Ciencias Médicas
Departamento de Bioquímica
Bioanálisis Clínico
III Año
PRUEBAS DIAGNÓSTICAS DE LABORATORIO PARA LA DETECCIÓN DE
VIH-SIDA.
Autores:
Lester Iván Gutiérrez Pérez
Roberto José Herrera García
Profesor: Dr. Felipe Urbina.
23 Julio de 2012
¡A la libertad por la Universidad!
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
Índice
1. Resumen ................................................................................................................................... 1
2. Introducción ............................................................................................................................. 2
3. Objetivos ................................................................................................................................... 3
4. Pruebas Diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-SIDA .................... 4
4.1. ELISA: .................................................................................................................................... 4
4.2. Western Blot (WB): ............................................................................................................ 6
4.3. Inmunofluorescencia. ........................................................................................................ 7
4.4. Pruebas Cromatografías ó Rápidas .............................................................................. 8
4.5. Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) ........................................................... 10
5. Importancia del diagnóstico del VIH-Sida. .................................................................... 11
6. Resultados de artículos científicos. ................................................................................ 12
7. Discusión ................................................................................................................................ 16
8. Conclusión: ............................................................................................................................ 18
9. Bibliografía. ............................................................................................................................ 19
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
1
1. Resumen
El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) causa el SIDA. Este virus ataca al
sistema inmunitario y deja al organismo vulnerable a una gran variedad de
infecciones y cánceres potencialmente mortales; por tal razón es necesario poder
realizar un buen diagnóstico de dicha enfermedad. Un diagnóstico a tiempo del
VIH reduce la transmisión de la infección y mejora la salud del afectado. Por lo
que, la prueba debería ofrecerse de forma rutinaria como parte de la asistencia
médica.
Para el diagnóstico del VIH-Sida existen diversas pruebas tales como ELISA,
Western Blot, Inmunofluorescencia, Reacción en Cadena de la polimerasa y las
pruebas rápidas, cada una de las pruebas presenta sus ventajas y desventajas y
cada una debe ser utilizada de manera adecuada y de acuerdo a diversos
parámetros (si es una prueba de rutina, si es de confirmación, si se desea buscar
anticuerpos ó antígenos, etc.). La prueba de ELISA y las pruebas rápidas son
pruebas confiables para un diagnóstico inicial y deben ser confirmadas por otras
pruebas, la inmunofluorescencia y el Western Blot son las pruebas de
confirmación y confiables para brindar resultados finales. Las cuatros pruebas
antes mencionadas son pruebas que detectan anticuerpos en el paciente, no
obstante, existen pruebas modernas capaces de detectar la presencia del virus o
fragmentos del mismo, la PCR; esta técnica es muy confiable por tener contacto
directo con el virus, y es de gran utilidad en la detección del VIH-Sida en niños
menores de 18 meses.
Todas estas pruebas resultan de gran utilidad para el diagnóstico del VIH, y si son
implementadas de la manera adecuada se pueden obtener resultados confiables.
Un Resultado de ELISA confirmado con Western Blot o inmunofluorescencia es
una excelente combinación para obtener resultados 100% confiables.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
2
2. Introducción
El SIDA (Síndrome de Inmuno Deficiencia Adquirida) es causado por un virus
llamado VIH, Virus de Inmunodeficiencia Humano (4).
Este virus es transmitido por distintas maneras, una persona puede infectarse con
el VIH de una persona que esté infectada, aún cuando no parezcan estar
enfermas o aunque no hayan obtenido aún un resultado positivo del análisis del
VIH. La sangre, los fluidos vaginales, el semen y la leche materna de personas
infectadas con el VIH contienen suficiente cantidad de virus para infectar a otras
personas (4). La mayoría de la gente se infecta con el VIH al:
Mantener relaciones sexuales con una persona infectada
Compartir agujas (para inyectarse drogas) con una persona infectada
Nacer de una madre infectada o al tomar leche materna de una mujer
infectada
Transfusión de sangre infectada por el virus (actualmente los bancos de
sangre analizan la sangre cuidadosamente y el riesgo es muy bajo)
Existen diferentes métodos para el análisis del VIH. El análisis del VIH se refiere a
las pruebas que determinan si usted está o no infectado con el virus de
inmunodeficiencia humana (VIH), que causa el SIDA. Las técnicas de detección de
VIH buscan anticuerpos. Si una persona se infecta con el VIH, su cuerpo tratará
de combatir la infección y producirá "anticuerpos", Los anticuerpos son proteínas
producidas por el sistema inmune para combatir a un germen específico. Los
análisis más nuevos buscan signos del virus mismo en la sangre (3, 4, 8).
En el presente documento se señalan distintas pruebas diagnósticas para la
determinación del VIH-SIDA. Dentro de estas pruebas encontramos ELISA,
Western Blot, Inmunofluorescencia, PCR y las pruebas de cromatografías o
pruebas rápidas.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
3
3. Objetivos
General
o Describir las pruebas diagnósticas para la detección del VIH-Sida
Especifico
o Describir el principio de las pruebas de diagnóstico
o Comparar las diferentes pruebas de diagnóstico
o Explicar la importancia biológica del diagnóstico del VIH.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
4
4. Pruebas Diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-SIDA
4.1. ELISA:
A nivel mundial, en 1985 se desarrollaron las primeras pruebas para
detectar anticuerpos contra el VIH y se comenzaron a utilizar en los productos
sanguíneos en E.U.A. y Japón. Los análisis de anticuerpos contra el VIH tienen un
99.5% de precisión (3). En la actualidad, se usan de un modo rutinario en los
laboratorios de microbiología clínica y en los bancos de sangre o centros de
transfusiones en varios países del mundo. El test ELI SA (enzyme-linked Inmuno
sorbent assay- ensayo Inmuno-absorbente ligado a enzimas), se basa en la
reacción antígeno-anticuerpo, uno de los cuales debe ser de reactividad conocida.
Los ensayos inmunológicos son procedimientos en los cuales se utilizan
anticuerpos o antígenos como reactivos enlazantes “específicos”. ELISA ha sido el
más utilizado para la detección de anticuerpos anti-VIH que el organismo genera
como respuesta a la infección (5).
Los tamizajes para VIH son altamente sensibles, detectan mínimas cantidades de
anticuerpos, por lo que pequeñas interferencias de substancias similares podrían
conducir a un resultado falso positivo, cuya probabilidad es mayor cuanto más
baja es la prevalencia del VIH en la población estudiada. Por ello, es obligatorio
que los exámenes con resultados positivos sean repetidos para reafirmar la
positividad. Cuando la positividad se repite, se confirman los resultados con otras
técnicas de alta especificidad, usual mente con técnicas de inmunoblot o
inmunofluorescencia indirecta (IFI) y Western Blot de las que hablaremos más
adelante. Además, se debe solicitar una segunda muestra de sangre para
confirmar la identidad del paciente y evitar posibles equivocaciones en la
manipulación de las muestras de sangre o suero que conduzcan a confusión de
los resultados entre una persona y otra (3, 5, 8, 10).
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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El valor predictivo positivo del test de ELISA es más bajo en el embarazo, al ser
aplicado a una población de baja prevalencia, alcanzando aproximadamente a
50%, por lo que se requieren los estudios de confirmación para asegurar la
condición de infección por VIH de la madre. Sin embargo, en situaciones de
embarazo avanzado o parto en que los resultados confirmatorios no se obtendrán
en forma oportuna, el beneficio de la aplicación de los protocolos supera
ampliamente los riesgos de su uso en caso de falsos positivos. Estas
consideraciones aplican también para los test rápidos (1).
4.1.1. Aplicación:
La prueba de ELISA es la técnica de determinación de VIH-SIDA más utilizada
para la detección de anticuerpos anti-VIH que el organismo genera como
respuesta a la infección (3,5). Es una prueba que permite obtener resultados
cualitativo y semi-cuantitativo de una muestra.
4.1.2. Ventajas:
Alta Sensibilidad (99.5%)
Rapidez del proceso.
Reproducibilidad.
4.1.3. Desventajas:
La elevada sensibilidad de esta prueba implica que tiene una especificidad
ligeramente baja. Esto significa que en algunas ocasiones puede dar un
resultado "falso positivo".
El valor predictivo positivo del test de ELISA es más bajo en el embarazo.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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4.2. Western Blot (WB):
Es una prueba sensitiva de laboratorio que determina la presencia de anticuerpos
de VIH en una muestra. El Western Blot es una técnica analítica usada para
detectar proteínas específicas en una muestra determinada (una mezcla compleja
de proteínas, como un extracto tisular). Mediante una electroforesis se separan las
proteínas atendiendo al criterio que se desee.
La prueba de Western Blot es una prueba muy específica para la detección de
VIH-SIDA. Este método es muy recomendado y permite discriminar, por la
aparición de bandas reactivas, frente a qué antígenos víricos se dirigen los
anticuerpos presentes en la muestra. La interpretación del WB se puede realizar
según diversos criterios aunque el más aceptado es el de la OMS que exige la
presencia de al menos dos bandas de la envoltura. La muestra negativa implica
una ausencia de bandas reactivas y cualquier situación intermedia se interpreta
como reacción indeterminada (9).
La reactividad indeterminada del WB puede ocurrir en determinadas situaciones
relacionadas con la infección por el VIH. En casos de seroconversión reciente en
las que aún no han aparecido todas las bandas, en recién nacidos de madres
seropositivas, estén infectados o no, y en pacientes con enfermedad avanzada y
grave deterioro inmunológico (2).
4.2.1. Aplicación
En el diagnóstico para la detección del VIH, comúnmente el primer test que se
aplica es el ELISA. Cuando el resultado del ELISA es positivo, se repite el análisis
con el test Western Blot para confirmar los resultados con más seguridad, esta es
una prueba utilizada como una confirmación final para la prueba reactiva de
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
7
ELISA. Si el Western Blot es también reactivo, la prueba es considerada “positiva”
para la infección con VIH (9,10).
4.2.2. Ventajas.
Prueba muy especifica.
Es sensitiva.
Reproductividad
4.2.3. Desventajas
Precio relativamente elevado.
Complejidad del procedimiento.
Subjetividad inevitable durante la lectura e interpretación de los resultados
4.3. Inmunofluorescencia.
La Inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcación que hace uso de
anticuerpos unidos químicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la
presencia de una determinada molécula. Es una técnica que tiene variantes
cualitativas y cuantitativas. Las pruebas de Inmunofluorescencia son muy
específicas para detectar anticuerpos al VIH, por lo que pueden descubrir casi
siempre los resultados falsos positivos de la ELISA. (10)
Las técnicas de Inmunofluorescencia Indirecta son utilizadas únicamente como
prueba de confirmación debido a su subjetividad y complejidad técnica,
respectivamente, no se consideran adecuadas para el uso rutinario como método
confirmatorio (2)
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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4.3.1. Aplicación
La aplicación de la inmunofluorescencia tiene una aplicación muy similar al
Western Blot. Cuando el resultado del ELISA es positivo, se repite el análisis con
la prueba de inmunofluorescencia para confirmar los resultados con más
seguridad, esta es una prueba utilizada como una confirmación final para la
prueba reactiva de ELISA. (2,10).
4.3.2. Ventajas:
Prueba muy especifica.
Es sensitiva.
Reproductividad
4.3.3. Desventajas
Precio relativamente elevado.
Complejidad del procedimiento.
Subjetividad inevitable durante la lectura e interpretación de los resultados
4.4. Pruebas Cromatografías ó Rápidas
Son pruebas que determinan ambos tipos VIH 1 y 2, se basa en la absorción de
muestra que se sitúa en la superficie absorbente. Las pruebas rápidas también
conocidas como prueba inmunocromatográfica para la detección cualitativa de
anticuerpos anti-VIH-1 y VIH-2 con sensibilidad y especificidad cercanas a 100%.
En la que se suministra 50 μl de sangre obtenida por punción digital sobre una tira
reactiva. La presencia de anticuerpos anti-VIH se evidencia por la formación de
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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una línea roja en la “ventana” del paciente. En cada test se incluye una “ventana
de control”, donde se forma una línea roja validante del resultado. La lectura se
efectúa a los 15 minutos en forma visual. Las alternativas de resultado son:
positivo, negativo o inválido. Los resultados positivos tienen que ser confirmados
mediante técnicas de ELISA y Western Blot o Inmunofluorescencia en el
Laboratorio (6).
4.4.1. Aplicación.
Esta prueba inmunocromatográfica es utilizada especialmente para la detección
de VIH de tipo 1 y 2. Es una prueba rápida que idealmente sólo debería usarse
como orientación inicial y el paciente debería someterse a la prueba nuevamente
lo antes posible en un laboratorio de rutina.
4.4.2. Ventajas:
Es una prueba rápida. (aproximadamente 20 minutos)
Es de alta sensibilidad.
Especifica.
Bajo costo económico.
Fácil manipulación.
4.4.3. Desventaja:
No es muy recomendable para brindar una resultado final y solo debe ser
tomada como prueba de escrutinio.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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4.5. Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR)
La prueba de PCR (prueba de la Reacción en Cadena de Polimerasa) puede
detectar el material genético del VIH antes que los anticuerpos contra el virus y, de
esta forma, puede identificar el VIH en la sangre a las dos o tres semanas de
haberse producido la infección. La prueba también se conoce como prueba de
carga viral y prueba de amplificación del ácido nucleico del VIH.
Este test detecta la presencia de material genético del virus, y por lo tanto es
inmediata e inequívoca, es decir, se confirma o excluye el contagio desde el
primer análisis de sangre, no existe el "periodo ventana" que tienen los análisis
que detectan anticuerpos. Sin embargo, el test PCR es muy caro y difícil de
realizar, por lo que se reserva para casos especiales (8)
A los bebés que nacen de madres VIH positivo a menudo se les realizan las
pruebas de PCR debido a que estos niños retienen los anticuerpos de la madre
durante varios meses. En consecuencia, la prueba de anticuerpos arroja
resultados imprecisos. En la mayoría de los países desarrollados, se examina el
suministro de sangre para detectar el virus del VIH a través del uso de las pruebas
de RCP. Sin embargo, éstas no se utilizan con frecuencia para detectar el virus del
VIH en las personas, ya que suelen ser muy costosas. Además, su realización y
posterior interpretación presentan más complicaciones que una prueba de
anticuerpos estándar (7)
4.5.1. Aplicación
Detección del antígeno viral en una persona, su aplicación es muy común en el
diagnóstico del VIH-SIDA en mujeres embarazadas y niños recién nacidos.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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4.5.2. Ventaja.
Específica
Reproducible
Detecta el virus aún durante el periodo de ventana
4.5.3. Desventaja
Alto costo
Complejidad del procedimiento.
5. Importancia del diagnóstico del VIH-Sida.
El virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) causa el SIDA. Este virus ataca al
sistema inmunitario y deja al organismo vulnerable a una gran variedad de
infecciones y cánceres potencialmente mortales; por tal razón es necesario poder
realizar un buen diagnostico de dicha enfermedad. Un diagnóstico a tiempo del
VIH reduce la transmisión de la infección y mejora la salud del afectado. Por lo
que, la prueba debería ofrecerse de forma rutinaria como parte de la asistencia
médica.
El diagnóstico precoz y tratamiento del VIH facilitan una mayor recuperación del
sistema inmunológico del paciente, permiten frenar la progresión del SIDA y
reducen las posibilidades de fallecer y desarrollar enfermedades asociadas.
También hay evidencias de que si uno sabe que está infectado evitará las
prácticas de riesgo contribuyendo a detener la propagación del virus.
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6. Resultados de artículos científicos.
Primer Artículo: Los autores Boshell J., Álvarez C., Marrugo S., Gómez B; realizaron
un estudio titulado: “La Inmunofluorescencia indirecta como prueba de
suplementaria para confirmar infección por VIH-1” (11); Es un estudio con el fin de
comparar las técnicas de IFI y WB para VIH-1, se seleccionaron todas las
muestras remitidas al Instituto Nacional de Salud (INS) para confirmación de su
reactividad con el VIH-1, disponibles en el banco de sueros del laboratorio de
virología, que tuvieran resultados doblemente reactivo por ELISA, sin tener en
cuenta su procedencia de población de alto o bajo riesgo. Tales muestras
reactivas integraron un panel de estudios que incluyo, además, sueros negativos
en las pruebas ELISA y WB que procedían de pacientes sin riesgo de infección
por VIH y suero indeterminados en la prueba WB. Estos sueros provenían de
diferentes regiones de Colombia, se almacenaron a -20ºc y se procesaron con una
prueba WB preparada en el INS (WB1) o mediante un WB comercial (WB2), la
sensibilidad, especificada y reproducibilidad del WB1 se validó periódicamente con
el model performance evalutation program (MPEP) para VIH-1 del centro para
control de enfermedades de Atlanta, EE.UU. (CDC) mientras que para el segundo
se tuvo en cuenta la información dada por la casa productora.
En los cuadros 1 y 2 se muestran los valores de sensibilidad, especificidad,
valores de predicción y concordancia de la IFI comparada con las dos pruebas de
WB, la IFI presentó una especificidad del 100% y valores de sensibilidad
superiores al 97%. Los valores de predicción, teniendo en cuenta la prevalencia de
infección por VIH, calculada para Colombia en 0.2% fueron excelentes. Los
índices kappa de concordancia entre el IFI y los WB 1 Y WB 2 fueron de 0.92% y
0.94% espectivamente, sin embargo, en 88 (7.2%) sueros positivos y negativos
por WB 1, el resultado por IFI fue dudoso, mientras que los 120 sueros
indeterminados hubo concordancia en 75 y el resto fueron negativos. Por otra
parte, se encontraron 15 sueros positivos y negativos por WB 2 con resultado
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dudoso por IFI, en tanto que la concordancia con indeterminados fue del 33.4% los
restantes fueron negativos por IFI.
Segundo Artículo: María Belén Bouzas en su trabajo científico (12) hacer
referencia a la pruebas rápidas de diagnóstico del VIH. En donde hace
comparación entre distintas pruebas rápidas existentes en el mercado, a su vez
compara las pruebas rápidas con la prueba de ELISA. En general los resultados
que se obtuvieron entre las seis diversas pruebas rápidas estudiadas en este
documento tenemos que la sensibilidad de las pruebas rápidas oscila entre 98.8-
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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100%. La especificidad entre 97.6-100%. Aquí el gráfico de los resultados
obtenido:
En este mismo documento se apoya con un informe publicado por la OMS 1999
en donde plantea que existe una diferencia entre los Test rápidos y el ELISA de
referencia empleado de hasta ocho días. Es decir, había test rápidos que
detectaban una muestra positiva ocho días después que el ELISA de referencia.
Tercer Artículo: En el artículo publicado por Lorenzana I. y Murillo W. (13), se
realiza una comparación entre las técnicas de ELISA y la PCR en la detección del
VIH-Sida en infantes. Este documento nos dice que en adultos y niños mayores de
18 meses, la infección de VIH es diagnosticada generalmente por medio de
métodos serológicos (ELISA), además de que existen otras pruebas de tamizaje,
las cuales generalmente requieren confirmación.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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Para los niños menores de 18 meses el diagnóstico temprano de laboratorio es
muy difícil por los ensayos convencionales de anticuerpos debido a que no
discriminan los anticuerpos maternos (IgG) adquiridos trasplacentariamente, ya
que estos pueden circular hasta los 15 meses o más después del nacimiento.
La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es la técnica molecular que ha
emergido como el método más eficiente para la identificación del ADN del VIH-1
en niños menores de 18 meses nacidos de madres seropositivas. Esta técnica
tiene una sensibilidad de 98.4%, una especificidad de 98.3% y un nivel de
detección de 5-10 copias de VIH-1 en 5 μl de sangre cuando se utilizan muestras
por duplicado.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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7. Discusión
Para el diagnóstico del VIH-Sida existen diversas pruebas las cuales las hemos
detallado anteriormente, cada una de las pruebas presenta sus ventajas y
desventajas y cada una debe ser utilizada de manera adecuada y de acuerdo a
diversos parámetros (si es una prueba de rutina, si es de confirmación, si se desea
buscar anticuerpos ó antígenos, la edad del paciente en caso de ser un niño
recién nacido, etc.). La detección a tiempo y sobretodo confiable del VIH-Sida
sigue siento un estudio continuo y hasta la fecha se han publicado diversos
artículos científicos en donde se habla un poco sobre las distintas pruebas de
detección de dicha enfermedad.
En la mayoría de estos artículos especifican que la prueba comúnmente utilizada
es ELISA, pero esta prueba debe ser confirmada por otras pruebas tales como
Western Blot o por inmunofluorescencia.
Los autores Boshell J., Álvarez C., Marrugo S., Gómez B en su estudio
investigativo (11) dice: “El diagnóstico de la infección por el VIH-1 se hace
rutinariamente mediante la detección de anticuerpos anti-VIH-1 con la ayuda de
técnicas sensibles y especificas. La prueba del WB sigue siendo la prueba
suplementaria de confirmación de referencia internacional. Sin embargo múltiples
estudios en Latinoamérica, EE.UU. y Europa han demostrado la utilidad de la IFI
como prueba suplementaria para confirmación, algunos señalan que la IFI es aún
superior al WB para diferenciar infección entre VIH-1 y VIH-2”.
En este estudio se demuestra que la técnica de IFI estandarizada en el Instituto
Nacional de Salud, Colombia (IFI-VIH1–INS) y dice que se puede utilizarse con
confianza como prueba confirmatoria suplementaria, dada su alta eficiencia y
teniendo en cuenta su concordancia especificidad (100%) y sensibilidad (>97%),
comparada con la prueba WB.
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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Sin embargo, a pesar que el documento científico antes mencionado señala que
IFI es más eficaz para diferenciar entre VIH-1 y VIH-2, diferentes artículos científicos
prefieren utilizar Western Blot como prueba confirmatoria y aunque menciona a IFI como
prueba de confirmación establecen que WB es la más indicada para confirmar el VIH-Sida
(2, 3, 8).
Existen documentos donde especifican ciertas circunstancia en que algunas
pruebas no deberían ser utilizada ya que confieren mayor porcentaje de falsos
positivos, tal es el caso de los embarazo y niños menores de 18 meses. Según el
artículo publicado por una revista chilena (1), dice que no es recomendable utilizar
en este caso las pruebas rápidas ó ELISA, ya que es muy difícil debido a que no
discriminan los anticuerpos maternos (IgG) adquiridos trasplacentariamente, ya
que estos pueden circular hasta los 15 meses o más después del nacimiento, es
decir, a los bebés que nacen de madres VIH positivo a menudo se les realizan las
pruebas de PCR debido a que estos niños retienen los anticuerpos de la madre
durante varios meses. En consecuencia, la prueba de anticuerpos arroja
resultados imprecisos. Por lo tanto, a como se acaba de afirmar la técnica
recomendable es PCR más eficiente para la identificación del ADN del VIH-1 en
niños menores de 18 meses nacidos de madres seropositivas. Esta técnica tiene
una sensibilidad de 98.4%, una especificidad de 98.3% y un nivel de detección de
5-10 copias de VIH-1 en 5 μl de sangre cuando se utilizan muestras por duplicado
(13).
No obstante, existen documento que si consideran adecuada la implementación
de estas pruebas (ELISA y Pruebas Rápidas) en estos casos, de tal forma que se
han realizado investigaciones en mujeres embarazadas por medio de las pruebas
rápidas (6), donde afirman que es una prueba confiable, rápida y accesible; en el
estudio antes mencionado se utilizó Determine HIV 1/2® (Abbott Laboratories,
Abbott Park, Illinois USA), prueba inmunocromatográfica para la detección
cualitativa de anticuerpos anti-VIH-1 y VIH-2 con sensibilidad y especificidad
cercanas a 100%(6).
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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8. Conclusión:
Existen diferentes métodos de detección para el VIH-Sida, los cuales los hemos
detallado anteriormente. Como conclusión de este trabajo investigativo realizamos
una comparación entre estas pruebas:
La técnica más común y más utilizada es la prueba de ELISA que es una prueba
sensible, rápida y reproducible; ELISA por tener una alta sensibilidad, tiende a
tener una especificidad ligeramente baja, por lo que un resultado positivo tiene que
ser confirmado con otras pruebas antes de brindar un resultado final. Estas
pruebas confirmatorias pueden ser Western Blot ó Inmunofluorescencia, ambas
son pruebas muy específicas y reproducibles, pero sus respectivos procesos son
complicados y de alto costo económico por lo que no pueden ser utilizadas como
pruebas de rutinas sino como pruebas confirmatorias.
Otra prueba que es muy utilizada son las pruebas rápidas o cromatográficas, Esta
prueba al igual que las anteriores (ELISA, Western Blot e Inmunofluorescencia)
son pruebas que detectan la presencia de anticuerpo contra el VIH-Sida. Esta
prueba es rápida, de costo accesible y de fácil manipulación. Son sensibles y
específicas, pero un resultado positivo no debe ser tomado como resultado final,
sino que debe ser analizado por medio de ELISA y posteriormente por las pruebas
de confirmación. Es por eso que esta prueba es conocida como “Prueba de
Escrutinio” que es utilizada como orientación inicial.
Hay otros test más sofisticados que en lugar de detectar anticuerpos, lo que hacen
es detectar directamente el virus VIH o partes de él, mediante la técnica llamada
PCR o reacción en cadena de la polimerasa. Este test detecta la presencia de
material genético del virus, y por lo tanto es inmediata e inequívoca, es decir, se
confirma o excluye el contagio desde el primer análisis de sangre, no existe el
"periodo ventana" que tienen los análisis que detectan anticuerpos. Sin embargo,
el test PCR es muy caro y difícil de realizar, por lo que se reserva para casos
especiales. .
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
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9. Bibliografía.
1) Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida VIH/SIDA. Rev. chil.
infectol. [online]. 2010, vol.27, n.4, pp. 359-373. ISSN 0716-1018.
(http://www.scielo.cl/pdf/rci/v27n4/art17.pdf)
2) Genesca J, Wai-Kuo S, Alter JB, What do western blot indeterminate
patterns for HIV meanin EIA negative blood donors? Lancet 1989;
343:1023-6.
3) The Body “The complete HIV/AIDS Resource; Infored SIDA. Análisis
de VIH. Hoja Número 102E, 8 de julio de 2012. Content art6137
(http://www.aidsinfonet.org/uploaded/factsheets/4_spa_102.pdf)
4) The Body “The complete HIV/AIDS Resource; Infored SIDA. ¿Qué es el
SIDA? 22 de julio de 2011. Content art 6238. Disponible en:
http://www.thebody.com/content/art6238.html
5) Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida VIH/SIDA. Rev. Chil.
Infectol. [Online]. 2010, vol.27, n.3 [citado 2012-07-19], pp. 239-276 .(
http://www.scielo.cl/pdf/rci/v27n3/art13.pdf)
6) Quian R, Jorge et al. Detección de infección por VIH a través de test
rápido en mujeres embarazadas: Una estrategia exitosa para
disminuir su transmisión vertical. Rev. Chil. Infectol. [Online]. 2005,
vol.22, n.4, pp. 321-326. ISSN 0716-1018
(http://www.scielo.cl/pdf/rci/v22n4/art04.pdf)
7) Pérez S., Lautaro. Biología molecular del virus de la
inmunodeficiencia humana y los recientes progresos en el
tratamiento del SIDA. Rev. chil. pediatr. [online]. 2000, vol.71, n.2
[citado 2012-07-19], pp. 83-88. Disponible en:
<http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0370-
1062000000200002&lng=es&nrm=iso>. ISSN 0370-4106.
8) Enciclopedia de salud, dietética y psicología. Diagnóstico del VIH.
http://www.enciclopediasalud.com/categorias/enfermedades/articulos/di
agnostico-del-vih/
Pruebas diagnósticas de Laboratorio para la detección de VIH-Sida
20
9) World Health Organization. AIDS: proposed WHO criteria for
interpreting results from western blot assays for HIV-1, HIV-2, and
HTLV-I/HTLV-II. Wkly Epidemiol Rep 1990; 37:281-8.
10) Geosalud. Exámenes de Laboratorio (Pruebas) para VIH/SIDA.
AMERISOL digital marketing.
11) Boshell J., Alvarez C., Marrugo S., Gómez B. La inmunofluorescencia
indirecta como prueba suplementaria para confirmar infección por
VIH-1 experiencia del Instituto Nacional de Salud, 1993-2000.
Biomédica, marzo año/vol. 22, número 001 Bogotá, Colombia pp.30-38.
12) Bouzas Maria Belén. Infección por VIH: Una revisión sobre la
tecnología en el diagnóstico.
13) Lorenzana I. Murillo W. PCR for diagnosis of HIV-1 infection in
infants. Rev Med Hond 2003; 71:123-130
