HematologaLa sangre es una suspensin de eritrocitos, leucocitos y plaquetas en el plasma. Fuera delsistemavascular la sangre coagula entre 5 y 8 minutos y si se le agrega algn anticoagulante suestadode suspensin persiste.Para las pruebas de laboratorio una muestra que puede ser de alguno de los tres tipos siguientes, segn la determinacin que debamos efectuar: Sangre total con anticoagulante. Suero. Plasma.Suero y Plasma.Centrifugando sangre coagulada se separa unamasa celular"A" y un fluido sobrenadante "B":el suero.BACentrifugando una sangre adicionada de un anticoagulante se obtendrn tres capas: una masa celular, que queda en el fondo del tubo y una sobrenadante que es el plasma. Entre ambas capas A y B, habr una tercera capa C, ms pequea, de color grisceo rosado, llamadacrema de leucocitos, cuyo principal integrante, como su nombre lo dice, son los leucocitos, pero adems contiene plaquetas y eritrocitos nucleados. La zona inmediatamente inferior a la capa C (si los hay) contienereticulocitos y parsitos delpaludismo.BContiene FibringenoReticulocitosCCrema de leucocitos,Parsito del plaquetas y eritrocitos.paludismoANota:La diferencia entre suero y plasma es que el plasma contiene fibringeno y el suero carece de l.Obtencin de Muestra de Sangre.Para efectuaranlisisclnicos, las muestras de sangre pueden ser: Sangre capilar o perifrica. Sangre venosa. Sangre arterial.Un caso especial se da en losniosrecin nacidos en los que se solicitamuestra del cordn umbilical.Sangre capilar o perifrica.La sangre de flujo es llamada comnmente capilar o perifrica y es la quefluyedespus de aplicar una puncin superficial cutnea. Cuando no es posible obtener una muestra de sangre venosa o no se desea puncionar la vena, algunas pruebas pueden realizarse con sangre capilar o perifrica obtenida del lbulo de la oreja o de la yema del dedo. En los nios recin nacidos por puncin del taln.No es aconsejable utilizar sangre capilar para la cuenta de plaquetas por la rapidez con la que las mismas se adhieren y agregan en el lugar de puncin y se obtienendatosfalsos decuentasbajas de plaquetas; encambiopara preparar extendidos en laminillas esmejorhacerlo con sangre capilar, ya que el anticoagulante puede provocar alteraciones en los leucocitos.Sangre venosa.La muestra de este tipo se obtiene por puncin de una de las tres venas del pliegue del codo:la baslica, la ceflica o la mediana cubital(observardibujode la siguiente pgina) empleando jeringas desechables, con agujas de tipo 21x32, 20x32 o similar, previa limpieza del rea elegida con torunda yalcohol; antes de puncionar coloque el torniquete aproximadamente de 8 cm de distancia arriba del pliegue del codo. Soltarlo tan pronto empiece a obtenerse la muestra.La toma de muestra de nios pequeos es preferible en las venas yugulares externas o de las manos.Anticoagulantes.Se consideran como anticoagulantes: Mezcla de oxalatos. Citrato de sodio. Oxalato de sodio. EDTA. Heparina. ACD. CPD.Mezcla de Oxalatos.Tambin llamada anticoagulante de Wintrobe. Contiene oxalato de amonio, oxalato de potasio, formol y agua.Para 5ml de sangre se utilizan 0.5ml de la mezcla de anticoagulante (desecado en estufa a 37C o atemperaturaambienteantes de utilizarlo); esta solucin anticoagulante acta como tal para fijacin de calcio y debe usarse siempre desecado para no diluir la sangre.Mezcla de oxalatos de sodio y potasio.Es otro anticoagulante conocido como "Mezcla de Paul Heller".Citrato de sodio al 3.8% y oxalato de sodio al 1.4%.Se usa en relacin de una parte de anticoagulante por cada nueve partes de sangre, habitualmente se usan 0.25ml de la solucin para completar a 2.5ml devolumentotal con la muestra de sangre.Actan en la misma forma que la solucin anticoagulante de Wintrobe, es decir, por fijacin de calcio.Son los anticoagulantes de eleccin paratiempode protrombina (TP) y tiempo de tromboplastina parcial (TTP).EDTA(cido etilen-diamino-tetra-actico).Las sales de sodio y potasio en este cido se comportan como poderosos anticoagulantes y son anticoagulantes de eleccin parael trabajode rutina y Hematologa (se utiliza al 10%). No afecta lamorfologade lasclulashemticas. No modifica la velocidad de sedimentacin globular. Sus sinnimos son versenato y secuestreno.Se le llama secuestreno ya que secuestra al calcio y lo separa de la cascada de la coagulacin, impidiendo que la sangre coagule. Se utilizan 0.05ml por cada 3ml de muestra de sangre. Dada la pequea cantidad de solucin, no es necesario desecarla, ya que prcticamente no diluye la sangre a analizar; en exceso afecta adversamente tanto a los eritrocitos como a los leucocitos, causando su encogimiento y provocando cambios en su forma; por ello debe cuidarse de agregar la cantidad correcta de sangre al anticoagulante. Se prefiere lasaltripotsica a la disdica, ya que es ms soluble (10 veces ms) y ello hace efectiva la mezcla del anticoagulante con la sangre.Heparina(heparina sdica de 1,000 unidades).La fina capa de solucin de heparina de 1,000 unidades: Se utiliza para las gasomeras. La heparina es un excelente anticoagulante. No altera el tamao de los eritrocitos. Acta inhibiendo la actividad de la trombina sobre el fibringeno y es este mecanismo, el que la hacediferentea los dems anticoagulantes mencionados.ACD y CPD.Son los principales anticoagulantes utilizados en losbancosde sangre (en las bolsas para la recoleccin de sta).ElACDcontiene cido ctrico, citratos y dextrosa. En este anticoagulante la sangre se mantiene hasta 21 das.ElCPDcontiene citratos, fosfatos y dextrosa. El radical es un amortiguados que favorece elpHde la sangre normal (7.4) permanezca as durante ms tiempo, por lo que este anticoagulante hace que las bolsas duran 21 das + 7, siempre y cuando el plasma no presente una coloracin rojiza (hemlisis) ni tome un color verdusco debido a la panaglutinibilidad ocontaminacinbacteriana.Manejo y Conservacin de la Muestra.El tipo de anlisis que haya de efectuarse influye sobre las recomendaciones que para cada uso corresponde.Algunas muestras se deben analizar de inmediato, un ejemplo de esto es la determinacin del pH y gases en la sangre; otras pueden ser mantenidas enrefrigeracin(previa separacin del suero o del plasma).Las determinaciones de: Conteo de plaquetas. Conteo de leucocitos. Determinacin de la velocidad de sedimentacin.Deben de hacerse lo ms pronto posible despus de obtenida la muestra.Durante este lapso las muestras deben tenerse refrigeradas entre 4 y 8C, y antes de ser analizada deben dejarse 15 minutos en rotador (agitador mecnico para asegurar trabajar con una muestra homognea y que haya adquirido la temperatura ambiente).Criterios de rechazo de una muestra. Identificacin inadecuada. Volumen inadecuado. Uso de tubo inadecuado. Hemlisis. Transporte inadecuado.Razones para solicitar una prueba de laboratorio. Para descubrirenfermedadessubclnicas. Ratificar un diagnstico sospechado clnicamente. Obtenerinformacinpronstico de una enfermedad. Establecer un diagnstico en una sospecha no bien definida. Reconocer la respuesta teraputica. Precisar factores deriesgo.Alteracin de Algunas Pruebas de Laboratorio por Estasis Venosa ProlongadaPrueba o DeterminacinEfectoMecanismo de Efecto

1) Plaquetas>Debe recordarse el papel de las plaquetas en lahomeostasis. Estasis venosa; liberacin de agentes procoagulantes, agregacin, etc.

2) Electrolitos# Debido a que se encuentran intercelularmente.

6) Hemlisis de elementos>Al romperse el eritrocito libera todos los solutos.

7) Caso grave=En tiempos prolongados de falsos esquistocitos.

8)Estrs, pH>Debido a una disminucin parcial en lapresinde CO.

9) Estrs, leucocitos, catecolaminas>La elevacin de catecolaminas provoca un aumento en loscidosgrasos no esterificados.

Nota:

> - incremento< - decremento# - en la mayora de los casos.

Toma de Muestra de Sangre Arterial.Tcnica Antigua para laFuncinArterial1. 2. Material: Jeringa devidriode 10ml con pivote de metal lubricado con grasa siliconizada estril, impregnada en su interior con 2.5ml de heparina de 1,000 unidades. Tapn metlico que rosque perfectamente en el pivote de metal. Agujas hipodrmicas estriles de nmero 21 o de mayor calibre (desechables). Rin o palangana con hielo y agua. Agujas y jeringas hipodrmicas estriles para infiltracin. Xilocana al 1% sin hepinefrina. Agua y jabn.1. Evaluar, seleccionar y localizar el pulso arterial. Radial. Humeral. Femoral. Pedia. Hacer el aseo de la regin con agua y jabn. Roscar perfectamente la aguja en el pivote de metal para impedir durante la puncin la entrada de aire al interior de la jeringa. Si es necesario infiltrar, con xilocana al 1% sin hepinefrina, en el sitio seleccionado para la puncin cuidando de no picar la arteria. Efectuar puncin perpendicular a la arteria y obtener aproximadamente 5ml de sangre. Hacer compresin a la arteria por arriba del sitio de la puncin un mnimo de 10 a 15 minutos para evitar la formacin de hematoma. Quitar la aguja hipodrmica, sacar las burbujas de aire, si penetraron y cerrar hermticamente el pivote con el tapn de metal. Rotule la jeringa con el nombre del paciente y nmero de cama. Anotar en la orden la condicin en que fue tomada la muestra (respiracinde aire ambiental,oxgenopor catter, con asistencia ventilatoria, etc.).Se utilizan jeringas preferentemente de vidrio ya que con las deplsticoes necesario arrastrar el mbolo, maniobra que puede permitir la entrada de burbujas de aire. Las muestras para determinacin de gases arteriales se transportan en hielo y agua, ya que la sangre, como tejido vivo, sigue consumiendo oxgeno y formando anhdrido carbnico aunque ya est en la jeringa. Al reducir la temperatura se deprime elmetabolismocelular y no hay cambios considerables, por lo que puede retardarse el procesamiento de la muestra hasta por una hora.La cantidad de heparina de 1,000 unidades que queda en el espacio muerto de la jeringa es suficiente para anticoagular de 4 a 5ml de sangre.El exceso de heparina altera las determinaciones de pH, oxgeno y bixido decarbono.Invariablemente se debe utilizar una aguja para picar el tapn de hule del frasco de heparina y otra para puncionar la arteria.La sangre destinada a este tipo de estudio essangre totaly obtenida en formaanaerbica.

Leer ms:http://www.monografias.com/trabajos/muestrasang/muestrasang.shtml#ixzz3AxS8zC3e

ExmenesV.S.G (Velocidad de segmentacin globular)Por qu hacer el anlisis?Para detectar la presencia de infecciones, tumores, inflamacin y otras situaciones que conducen a disfuncin orgnica (degeneracin), y/o para monitorizar la progresin de una enfermedad o la eficacia de un tratamiento.

Cundo hacer el anlisis?Cuando el mdico piensa que se puede estar padeciendo algunos de los trastornos citados anteriormente y para monitorizar el tratamiento y la evolucin de una arteritis de la temporal, de una polimialgia reumtica o de una artritis reumatoide.

Qu muestra se requiere?La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa.

Es necesario algn tipo de preparacin previa?Para esta prueba no se necesita ninguna preparacin especial.

Contaje de plaquetasPor qu hacer el anlisis?Para determinar el nmero de plaquetas en una muestra de sangre en el curso de un examen rutinario.; para detectar, diagnosticar o monitorizar situaciones que afectan al nmero de plaquetas, como trastornos por sangrado, enfermedades de la mdula sea u otras condiciones.

Cundo hacer el anlisis?Rutinariamente, como parte de un hemograma; cuando se presentan episodios inexplicables de sangrado u otros sntomas que puedan obedecer a alteraciones de las plaquetas.

Qu muestra se requiere?La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa; a veces por puncin en un dedo (adultos) o en el taln (bebs).

Es necesario algn tipo de preparacin previa?Para esta prueba no se necesita ninguna preparacin especial.

Grupo sanguneo Y Factor RHPor qu hacer el anlisis?Para determinar el grupo sanguneo ABO y el tipo Rh.

Cundo hacer el anlisis?Cuando a una persona se le ha de realizar una transfusin de sangre o de alguno de sus componentes, o cuando se dona sangre. En las mujeres embarazadas se realiza para determinar el riesgo de incompatibilidad Rh entre la madre y el feto.

Qu muestra se requiere?La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa o, en los bebs, por puncin en el taln.

Tiempo de protombinaLa protrombina (factor II de coagulacin) es una protena plasmtica producida por el hgado y forma parte de la cascada de la coagulacin. El hgado produce 11 de los factores de la coagulacin, por lo que frecuentemente su disfuncin se asocia a trastornos de la coagulacin. Los factores de coagulacin se miden habitualmente en forma indirecta mediante la determinacin del tiempo de protrombina, que mide un conjunto de factores de coagulacin del plasma. Por lo anterior, una alteracin del tiempo de protrombina puede deberse a diversas causas, no siempre a una disfuncin heptica.

Tiempo parcial de tromboplastina (TPT)Es una prueba de sangre que examina el tiempo que le toma a la sangre coagularse y puede ayudar a establecer si uno tiene problemas de sangrado o de coagulacin.

Forma en que se realiza el examenEl mdico utiliza una aguja para extraer la sangre de una de las venas y la recoge en un recipiente hermtico. A usted se le puede colocar un vendaje para detener cualquier sangrado. Si est tomando un medicamento llamado heparina, se lo vigilar para ver si hay signos de sangrado.El especialista del laboratorio agregar qumicos a la muestra de sangre y observar cuntos segundos tarda la sangre en coagularse.

Preparacin para el examenEl mdico le puede solicitar que deje de tomar ciertos medicamentos antes del examen. Los medicamentos que pueden afectar los resultados de un examen TPT abarcan antihistamnicos, vitamina C (cido ascrbico), cido acetilsaliclico (aspirin) y clorpromazina (Thorazine).No deje de tomar ningn medicamento sin hablar primero con el mdico.

Lo que se siente durante el examenCuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.

Razones por las que se realiza el examenEl mdico puede ordenar este examen si usted tiene problemas de sangrado o coagulacin de la sangre. Cuando uno sangra, el cuerpo inicia una serie de actividades que ayudan a que la sangre se coagule, lo cual se denomina cascada de la coagulacin. Hay tres rutas para este evento y el examen de TPT examina protenas especiales, llamadas factores, que se encuentran en dos de estas rutas.El examen igualmente se puede utilizar para vigilar pacientes que estn tomando heparina, un anticoagulante.Este examen generalmente se hace junto con otros exmenes, como un examen de protrombina.

PlaquetasTambin conocido como:Trombocitos; Recuento de PlaquetasNombre sistemtico:PlaquetasPruebas relacionadas:Extensin de sangre,Factores de la coagulacin,Funcin plaquetaria,Hemograma,Tiempo de Protrombina (TP) y Ratio Internacional Normalizada (INR),Tiempo de Tromboplastina Parcial (TTP)

Aspectos GeneralesPor qu hacer el anlisis?Para determinar el nmero de plaquetas en una muestra de sangre en el curso de un examen rutinario.; para detectar, diagnosticar o monitorizar situaciones que afectan al nmero de plaquetas, comotrastornos por sangrado, enfermedades de lamdula seau otras condiciones.Cundo hacer el anlisis?Rutinariamente, como parte de unhemograma; cuando se presentan episodios inexplicables de sangrado u otros sntomas que puedan obedecer a alteraciones de las plaquetas.Qu muestra se requiere?La determinacin se realiza a partir de una muestra de sangre venosa; a veces por puncin en un dedo (adultos) o en el taln (bebs).Es necesario algn tipo de preparacin previa?Para esta prueba no se necesita ninguna preparacin especial.En qu consisteQu es lo que se analiza?Las plaquetas, tambin conocidas como trombocitos, son minsculos fragmentos de citoplasma de clulas muy grandes llamadas megacariocitos. Las plaquetas se forman a partir de estas clulas grandes en lamdula sea, se liberan hacia la circulacin sangunea y son esenciales para asegurar una coagulacin normal de la sangre. El recuento de plaquetas es una prueba que determina el nmero de plaquetas presentes en la muestra de sangre obtenida.

Cuando se produce una lesin en un vaso sanguneo o en un tejido y tiene lugar un sangrado, las plaquetas contribuyen a controlar el sangrado por tres mecanismos: se adhieren en el lugar de la lesin, se agregan entre ellas y liberan compuestos qumicos que estimulan la agregacin de ms plaquetas. Todo ello conduce a la formacin de un tapn de plaquetas no muy slido en el foco de la lesin por un mecanismo conocido como hemostasia. Simultneamente, las plaquetas activadas propician la cascada de la coagulacin, consistente en una serie de etapas que suponen la activacin secuencial deprotenasllamadasfactores de la coagulacin. Este proceso de hemostasia secundario tiene como consecuencia la formacin de hebras de fibrina que se entretejen entre el tapn de plaquetas, formando una malla de fibrina comprimindose hasta formar un cogulo estable que permanece en el lugar de la lesin hasta que sta cicatriza. En el momento en que el cogulo ya no es necesario, otros factores se encargan de destruirlo y eliminarlo.Para un proceso normal de la coagulacin es necesario que cada componente de la hemostasia primaria y de la secundaria est presente, se active en el momento adecuado y adems funcione correctamente. Si el nmero de plaquetas es insuficiente o si no funcionan adecuadamente, es posible que no se pueda formar un cogulo estable y el individuo presentar un elevado riesgo de sangrado.Las plaquetas sobreviven en la circulacin sangunea entre 8 y 10 das, de manera que la mdula sea debe estar continuamente produciendo plaquetas nuevas para sustituir las que se degradan, se utilizan o se pierden con los sangrados. La determinacin del nmero de plaquetas en sangre con un contador celular es de ayuda en el diagnstico de una gran variedad de trastornos asociados a una cantidad disminuida o aumentada de plaquetas.Cmo se obtiene la muestra para el anlisis?Extraccin de la muestra por puncin de una vena del antebrazo; a veces por puncin en el dedo (adultos) o en el taln (bebs)Se requiere alguna preparacin previa para asegurar la calidad de la muestra?Para esta prueba no se requiere ninguna preparacin especial.NOTA: En el apartado,El laboratorio por dentro, encontrar informacin sobre la recogida y procesamiento de las muestras de sangre y loscultivosde esputo.Acerca de la pruebaCmo se utiliza?Cundo se solicita?Qu significa el resultado?Hay algo ms que debera saber?Cmo se utiliza?El recuento de plaquetas es til para detectar disminuciones o aumentos del nmero de plaquetas en sangre. La prueba se incluye en elhemograma, que frecuentemente se solicita en los controles mdicos.El recuento de plaquetas puede emplearse para detectar o diagnosticar distintos trastornos y enfermedades con repercusin sobre estos elementos de la sangre. Puede solicitarse en el contexto de un estudio de los trastornos de la coagulacin cuando existen sangrados o estados dehipercoagulabilidad, o en enfermedades de lamdula seapor citar algunos ejemplos.Esta prueba tambin puede ser til en la monitorizacin de enfermedades o de tratamientos con frmacos que pueden afectar a las plaquetas. Tambin se utiliza en la monitorizacin del tratamiento de enfermedades de las plaquetas para verificar si el mismo est siendo efectivo.El recuento de plaquetas puede acompaarse de otras pruebas, como por ejemplo pruebas defuncin plaquetariay pruebas asociadas a la coagulacin, como el tiempo de protrombina (TP) y el tiempo de tromboplastina parcial (TTP). En caso de que estas pruebas resulten alteradas sern necesarias otras pruebas para establecer el diagnstico final.[Volver]Cundo se solicita?El recuento de plaquetas suele solicitarse como parte de un hemograma, que suele realizarse en un chequeo habitual. Casi siempre se solicita cuando una persona presenta signos y sntomas asociados a un nmero disminuido de plaquetas o a sangrados como: Hematomas sin causa aparente o de fcil aparicin Sangrados prolongados an cuando la herida es pequea Sangrados nasales frecuentes Sangrados gastrointestinales (pueden detectarse en el anlisis de las heces) Sangrados importantes durante la menstruacin Pequeas manchas en la piel (petequias) - a veces recuerdan una erupcin cutnea Pequeas manchas de color prpura en la piel (prpura) causadas por sangrados justo debajo de la pielTambin se realiza la prueba si se sospecha que existen demasiadas plaquetas. Un exceso de plaquetas puede suponer una coagulacin excesiva o a veces, si las plaquetas no funcionan correctamente, sangrados. Sin embargo, a menudo las personas con un elevado nmero de plaquetas no presentan signos ni sntomas, y es por este motivo que puede detectarse la alteracin fortuitamente al realizarse un anlisis de sangre por algn otro motivo.[Volver]Qu significa el resultado?Son varias las enfermedades y trastornos en los que puede existir un bajo nmero de plaquetas (trombocitopenia). Las causas normalmente se agrupan en alguna de las siguientes dos categoras: Trastornos en los que la mdula sea no es capaz de producir una cantidad suficiente de plaquetas Situaciones en las que las plaquetas se consumen o se destruyen ms rpidamente de lo normalAlgunos ejemplos de trombocitopenia incluyen: Trombocitopenia idioptica, debida a la presencia de un anticuerpo dirigido contra las plaquetas; es una de las formas ms frecuentes de trombocitopenia, en ausencia de otras enfermedades Infecciones vricas como mononucleosis,hepatitis,infeccinporVIHo sarampin Atribuible a frmacos como acetaminofeno, quinidina, sulfamidas,digoxina,vancomicina, diacepam o nitroglicerina (entre otros) Trombocitopenia inducida por heparina (TIH), que se manifiesta cuando personas a las que se les administra o se les ha administrado heparina, desarrollan un tipo de anticuerpo (si desea ms informacin acceda a esteenlace) Leucemia,linfomau otros cnceres que se hayan propagado (metastatizado) a la mdula sea - las personas con cncer suelen experimentar sangrados excesivos atribuibles a un nmero disminuido de plaquetas. A medida que la cantidad de clulas cancerosas en la mdula sea aumenta, las clulas normales quedan desplazadas, y por lo tanto, quedan menos clulas productoras de plaquetas Anemiaaplsica - la produccin de clulas sanguneas est disminuida de manera significativa Problemas de sangrado de larga evolucin, por ejemplo sangrados crnicos por lceras gastroduodenales (estmago yduodeno) Sepsis, especialmente por infecciones causadas porbacteriasgram-negativas Cirrosis Trastornos autoinmunes comolupus, en los que el sistemainmunedel organismo fabrica anticuerpos que atacan a rganos y tejidos propios y en los que tambin aumenta la destruccin de plaquetas Quimioterapia o radioterapia, que repercuten sobre la mdula sea En ciertas enfermedades puede asistirse a un consumo aumentado de plaquetas. Por ejemplo, en lacoagulacin intravascular diseminada(CID), la prpura trombocitopnica y el sndrome hemoltico-urmico (SHU) el nmero de plaquetas circulantes en sangre puede estar disminuidoSi el nmero de plaquetas es inferior a 20.000 por microlitro, pueden aparecer sangrados espontneos con el subsiguiente riesgo para la vida del individuo. En los casos graves, el nmero de plaquetas se hace aumentar con transfusiones de sangre (si desea ms informacin, acceda a esteenlace).Cuando el nmero de plaquetas est aumentado se habla de trombocitosis y suele ser consecuencia de algn trastorno subyacente; por este motivo recibe el nombre de trombocitosis secundaria o reactiva: Cncer, ms frecuentemente de tipo gastrointestinal, de ovario, de mama o un linfoma Anemia, especialmente la anemia por dficit de hierro o la anemia hemoltica Trastornos inflamatorios como laenfermedad inflamatoria intestinalo laartritisreumatoide Enfermedades infecciosas comotuberculosis En personas a las que se les ha extirpado el bazo Toma de contraconceptivos oralesEn algunas ocasiones, la trombocitosis puede ser transitoria, por ejemplo: Fase de recuperacin despus de sangrados graves, como en caso de traumatismos o ciruga mayor Despus de un ejercicio fsico extenuante Despus de un consumo abusivo de alcohol o en dficits de folato yvitaminaB12Ms raramente, una trombocitosis puede deberse a un trastorno de la mdula sea, como en la trombocitemia primaria o esencial; ste es un trastorno mieloproliferativo en el que la mdula sea produce un nmero exagerado de plaquetas. No suelen existir signos ni sntomas de la enfermedad de manera que la alteracin se detecta al realizar un control mdico por alguna otra causa. Las personas con esta enfermedad presentan mayor riesgo de formar cogulos (trombosis) debido al exceso de plaquetas, aunque tambin pueden tener problemas de sangrado ya que las plaquetas no funcionan adecuadamente. Esta enfermedad se asocia a menudo a unamutacinen elgenJAK2. En caso de sospecharse esta enfermedad, el mdico seguramente solicitar el estudio del gen JAK2. Ms de la mitad de individuos con trombocitemia esencial presenta la mutacin JAK2. Las personas con otrostrastornos mieloproliferativoso mielodisplsicos, como leucemia mieloide crnica,policitemiavera o algunas otras formas de sndromes mielodisplsicos tambin pueden tener un elevado nmero de plaquetas.Normalmente, el nmero de plaquetas enadultososcila entre 150.000 y 450.000 por microlitro de sangre.[Volver]Hay algo ms que debera saber?Vivir en grandes altitudes puede causar un aumento en el nmero de plaquetas en la sangre. El nmero de plaquetas tambin puede aumentar tras un ejercicio fsico extenuante y despus del parto. Entre los frmacos que pueden hacer aumentar el nmero de plaquetas se incluyen losestrgenosy los contraceptivos orales.Puede observarse una disminucin leve del nmero de plaquetas en las mujeres antes de la menstruacin, y hasta un 5% de mujeres embarazadas presenta un nmero de plaquetas disminuido en el momento de dar a luz.Algunas enfermedadeshereditariascausadas por alteraciones genticas de las plaquetas incluyen la tromboastenia de Glanzmann, la enfermedad de Bernard-Soulier y los sndromes de Chediak-Higashi, de Wiskott- Aldrich, de May-Hegglin y elsndrome de Down. Sin embargo la incidencia de estas enfermedades es relativamente poco frecuente.En algunas personas, las plaquetas quedan acantonadas o almacenadas en su bazo de manera que el nmero de plaquetas en sangre est disminuido, aunque normalmente los individuos no manifiestan signos ni sntomas asociados a esta peculiaridad.[Volver]References to Laboratory TestPreguntas comunes1. Existen signos o sntomas que indiquen aumento o disminucin del nmero de plaquetas a los que se deba atender?2. En el informe de resultados constan datos como VPM (volumen plaquetar medio) y PDW (anchura de distribucin de las plaquetas). Qu significan estos trminos?3. En el informe de resutados consta "plaquetas gigantes". Qu significa?4. Qu otras pruebas deben realizarse si el nmero de plaquetas es anmalo?1. Existen signos o sntomas que indiquen aumento o disminucin del nmero de plaquetas a los que se deba atender?La aparicin de hematomas sin causa aparente, las hemorragias nasales, de la boca o del recto sin una lesin evidente, perodos menstruales excesivos o demasiado prolongados o la incapacidad de detener la hemorragia de un pequeo corte o herida pueden indicar una deficiencia de plaquetas.[Volver]2. En el informe de resultados constan datos como VPM (volumen plaquetar medio) y PDW (anchura de distribucin de las plaquetas). Qu significan estos trminos?El VPM y la PDW son clculos realizados por analizadores automticos. El VPM refleja el tamao promedio de las plaquetas en la muestra analizada mientras que la PDW indica el grado de uniformidad en el tamao de las plaquetas. Estos datos pueden proporcionar informacin adicional al mdico acerca de la causa de un nmero aumentado o disminuido de plaquetas. Cuanto ms jvenes son las plaquetas, ms pronto se habrn liberado desde lamdula seay mayor suele ser su tamao. Las plaquetas pequeas suelen ser ms viejas y ya llevan unos das en la circulacin.Si existe un elevado nmero de plaquetas grandes (VPM elevado) en una persona con un nmero total de plaquetas disminuido, puede ser que la mdula sea est produciendo plaquetas y liberndolas a la circulacin rpidamente. Un VPM bajo en personas con un nmero disminuido de plaquetas puede reflejar un trastorno de produccin de las mismas en la mdula sea. Si la PDW es normal las plaquetas son homogneas en cuanto a tamao, mientras que una PDW elevada indica que el tamao de las plaquetas es muy variable, indicio de que puede existir un trastorno plaquetar.A menudo unos resultados alterados se completan con otros estudios adicionales. En algunas situaciones las plaquetas pueden agruparse de manera que parece que existan menos y que sean de mayor tamao. Por este motivo, puede estar indicado realizar unaextensin de sangrepara examinarlas al microscopio.[Volver]3. En el informe de resutados consta "plaquetas gigantes". Qu significa?Se habla de "plaquetas gigantes" para describir plaquetas aumentadas de tamao, por ejemplo, del mismo tamao que un hemate. Estas plaquetas pueden verse en algunos trastornos como en la prpura trombocitopnicainmuneo en un raro trastornohereditariocomo el sndrome de Bernard-Soulier. No obstante, como se ha comentado en el punto anterior, la evaluacin directa de una extensin de sangre al microscopio permite saber si las plaquetas son realmente gigantes o si se han agrupado. Si se observan agrupaciones de plaquetas, est indicado repetir la prueba empleando un tipo de tubo con unanticoagulantedistinto al utilizado previamente y que obvie o minimice los fenmenos de agrupacin plaquetar.[Volver]4. Qu otras pruebas deben realizarse si el nmero de plaquetas es anmalo?Si la causa no est clara y no puede determinarse por los datos de la historia clnica y la exploracin fsica, es posible que el mdico solicite alguna de las siguientes pruebas (adems delhemogramay de la extensin de sangre): Pruebas asociadas a trastornos inflamatorios comoprotena C reactiva,velocidad de sedimentacin globular(VSG) o anticuerpos especficos frente a plaquetas Pruebas asociadas a enfermedades infecciosas bacterianas o vricas Pruebas asociadas a trastornos de la coagulacin como tiempo de protrombina (TP), tiempo de tromboplastina parcial (TTP),fibringeno Pruebas para detectar enfermedad renal Estudios relacionados con elmetabolismodel hierro o niveles devitaminaB12 y folato Pruebas para detectar enfermedad heptica A veces,biopsiade mdula seaAprendiendo de los errores: fenmeno EDTA

Learning from errors: EDTA phenomenon

C Sarasa Bosque a, C Arruga Mombiela b, S Denizon Arranz b

a Mdico Interno Residente. Unidad Docente de Medicina Familiar y Comunitaria. Sector Zaragoza II. Zaragoza. Espaa.b Mdico de Familia. Tutor de Residentes del Centro de Salud Actur Sur. Zaragoza. Espaa.Artculo

Sr. Director: La pseudotrombocitopenia inducida por EDTA (cido etilendiamino tetraactico) es un fenmeno de aglutinacin in vitro de las plaquetas. Esta aglutinacin es mediada por autoanticuerpos que reconocen antgenos de las plaquetas modificados por el EDTA1.

El fenmeno se ha descrito tanto en pacientes enfermos como en poblacin sana, y su prevalencia vara, segn las series, desde el 0,1% hasta el 0,29%1.

El diagnstico se debe sospechar ante la ausencia de clnica hemorrgica y de alteraciones en la hemostasia primaria, siendo la confirmacin mediante el estudio de extensin de sangre perifrica. En la extensin se observan agregados de plaquetas generalmente de menos de 35 fl1.

La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA es un fenmeno causado por anticuerpos IgG antiplaqueta EDTA dependientes. Estos anticuerpos inducen la aglutinacin in vitro de los trombocitos, dando como resultado una dramtica disminucin de los recuentos plaquetarios.

De las distintas causas de pseudotrombocitopenia, la inducida por EDTA es la ms frecuente. La pseudotrombocitopenia por EDTA se ha descrito asociada a enfermedades como la mononucleosis infecciosa, enfermedad por crioaglutininas, cirrosis heptica, sepsis, y a la administracin de frmacos de uso extendido2,8: cido valproico, anticoagulantes orales, antibiticos (ceftriaxona, levofloxacino), olanzapina, abciximab, etc.

Consideramos que es interesante tener en cuenta este fenmeno en pacientes que presentan trombocitopenia sin clnica; podremos evitar diagnsticos errneos y la realizacin de pruebas complementarias y tratamientos innecesarios que iran en detrimento del paciente.

Caso clnico

Paciente varn de 24 aos, visto en consulta en junio por un cuadro febril de 4 das de evolucin, compatible con parotiditis vrica epidmica, que fue confirmada serolgicamente durante el seguimiento.

Entre los antecedentes personales destacaban: buen estado vacunal, migraas con aura en tratamiento intermitente con zolmitriptn, aftas orales frecuentes y epistaxis ocasionales. No refera intervenciones quirrgicas, otras enfermedades mdicas, ni alergias medicamentosas conocidas.

En un hemograma de control durante la parotiditis se observ por vez primera trombocitopenia (38.000 plaquetas/ l), que fue atribuida a infeccin vrica. Sin embargo el paciente aport un hemograma realizado en febrero del mismo ao, en el cual presentaba trombocitopenia de 52.000 plaquetas/ l. Fue remitido a Urgencias del hospital de referencia para valoracin por Hematologa, atribuyndose tambin all el cuadro a infeccin vrica; al estar el paciente asintomtico, fue dado de alta para seguimiento en Atencin Primaria. No disponemos de controles posteriores de plaquetas.

En noviembre del mismo ao nuestro paciente acudi a la consulta por presentar un episodio de hematuria de aparicin sbita durante toda la miccin, sin cogulos hemticos, clnica miccional, ni dolor en fosas lumbares. No refera traumatismos previos, ni toma de frmacos. Los episodios se repitieron durante una semana, por lo que el paciente fue remitido a Urgencias, donde se observ en tira reactiva de orina: proteinuria ++ y sangre 4+. La coagulacin fue normal. Las plaquetas mostraron de nuevo valores bajos (12.600 plaquetas/ l).

Ante la observacin de trombopenia y los antecedentes del paciente, el hematlogo consider repetir un nuevo hemograma con tubo de citrato, siendo el resultado de 201.000 plaquetas/ l, lo que permiti diagnosticar un fenmeno de pseudotrombocitopenia por EDTA.

Durante la estancia del paciente en Urgencias no se repiti la hematuria y, dado su buen estado general, fue remitido a consulta externa de Urologa para estudio.

Un mes ms tarde el paciente fue diagnosticado por cistografa de proceso ocupante de espacio en vejiga, sugestivo de papiloma.

En el hemograma preoperatorio con tubos de citrato las cifras de plaquetas resultaron estrictamente normales.

La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA fue descrita en 1969 por Gowland como una falsa trombocitopenia en autoanalizadores, debida a la formacin de agregados plaquetarios, siendo ms frecuente en sangre anticoagulada con EDTA.

Al realizar el recuento en una extensin de sangre tras puncin o en tubos en los que se utilizan otros anticoagulantes, el nmero de plaquetas es normal.

Se sospecha que la causa de este fenmeno est en relacin con la presencia de anticuerpos antiplaquetarios de tipo IgG, IgM e IgA. La diana de estos anticuerpos seran antgenos de superficie plaquetaria, ms especficamente la glucoprotena IIb/IIIa (receptor plaquetario para el fibringeno). El EDTA modificara la estructura bsica de estos antgenos, permitiendo la unin antgeno-anticuerpo.

La aglutinacin plaquetaria est condicionada por la variable tiempo, es decir, la falsa disminucin del recuento, una vez hecha la mezcla sangre-EDTA, es mayor al dejar reposar el tubo. Tambin se ve condicionada por la temperatura entre 4 y 20 C.

Es necesario para los mdicos clnicos considerar siempre la posible presencia de este fenmeno ante casos de pacientes que presentan cifras recurrentemente bajas de plaquetas, sin ninguna ditesis hemorrgica objetivable, ya que no solo genera un importante malestar en el paciente y sus familiares, sino que puede llevar a acciones iatrognicas: existen casos en la literatura de pacientes que presentando este fenmeno, han recibido transfusiones urgentes de plaquetas e incluso han sido esplenectomizados.

El diagnstico diferencial se realiza mediante la repeticin del hemograma, especificando la sustitucin del habitual tubo para hemograma con EDTA por un tubo de citrato.Pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA1) La descarga del recurso depende de la pgina de origen2) Para poder descargar el recurso, es necesario ser usuarioregistrado en Universia

Descargar recursoDetalles del recursoPertenece a:BOLETN DE PEDIATRADescripcin: Resumen Introduccin. La pseudotrombocitopenia dependiente del cido etilendiamino tetraactico (EDTA) es el hallazgo de un recuento bajo de plaquetas en muestras anticoaguladas con EDTA y procesadas en autoanalizadores, por la formacin de agregados plaquetarios in vitro. Poco frecuente en poblacin peditrica. Es importante su identificacin ya que carece de significacin patolgica y se evitarn procedimientos diagnsticos y teraputicos innecesarios. Caso clnico. Nia de 13 aos remitida a nuestro Hospital por trombocitopenia sin clnica hemorrgica. Recuento inicial de plaquetas 77x109/L. En la extensin de sangre perifrica se hallaron gran cantidad de agregados plaquetarios. El recuento de plaquetas en sangre citratada fue normal confirmndose el diagnstico de pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA. Discusin. La pseudotrombocitopenia dependiente de EDTA se produce por la formacin de agregados plaquetarios en presencia de anticuerpos IgG, IgM e IgA, que actan sobre el antgeno de superficie plaquetar GpIIb/IIIa tras sufrir este un cambio en su conformacin en presencia de EDTA, quedando expuesto un ?neoantgeno?.

PSEUDOTROMBOCITOPENIA EDTA-DEPENDIENTE: ROL DEL LABORATORIO CLNICO EN LA DETECCIN Y EL CORRECTO CONTAJE PLAQUETARIOM Morales1, A Moreno2, M Meja2e Y Bustamante2.1 Servicio de Bioanlisis del Hospital Jos G. Hernndez I.V.S.S.2 Escuela de Bioanlisis UCVRESUMENLa pseudotrombocitopenia EDTA dependiente (PTCP-EDTA) es definida como una falsa disminucin del contaje plaquetario producto de un artefacto de laboratorio, que ocurre cuando en muestras sanguneas extradas con EDTA y procesadas en un autoanalizador hematolgico se produce una agregacin plaquetaria progresiva en el tiempo por efecto de la accin de anticuerpos fros. La falta de reconocimiento de ste fenmeno se traduce en diagnsticos errados, realizacin de exmenes adicionales y terapias inadecuadas. En este trabajo se estudian casos de PTCP-EDTA en pacientes que asistieron al Servicio de Bioanlisis del Hospital Jos Gregorio Hernndez del I.V.S.S., durante el periodo del 01/01/99 al 31/07/00 proponindose diversas alternativas para correctos contajes de plaquetas en las muestras en que se observ este fenmeno. Sangre de cinco pacientes fue tratada con diversos anticoagulantes (EDTA, citrato y oxalato) y se conservaron a temperatura ambiente (T.A.) y 37C, en tres de ellos se tomaron muestras adicionales en EDTA para suplementarla con Kanamicina a fin de observar los efectos de este antibitico sobre los parmetros hematolgicos. De un total de 25.390 hematologas procesadas se detectaron 9 casos de PTCP-EDTA (incidencia 0,04%). CONCLUSIONES: el citrato no es el anticoagulante recomendado para el correcto contaje plaquetario en estos pacientes; una buena alternativa pudiese ser la incubacin inmediata de la muestra, a 37C, despus de ser extrada. La pre-suplementacin con Kanamicina, de muestras extradas con EDTA se presenta como mtodo ideal para el correcto contaje automatizado de plaquetas en casos de PTCP-EDTA conocida, debido a que evita la agregacin plaquetaria sin afectar otros parmetros hematolgicos, de igual modo el realizar contajes manuales (Unopette), es una buena alternativa para llevar a cabo un correcto contaje de plaquetas en estos pacientes.Palabras Claves:Plaquetas, Trombocitopenia, Pseudotrombocitopenia, EDTA.ABSTRACTPseudothrombocytopenia is defined as a low platelet count resulting from a laboratory artifact to occur in specimens extract with EDTA and perform in automated cell-count cause progress platelet clumping in the time for effect of platelet cold agglutinins. If you dont recognize the phenomenon may lead to erroneous diagnosis, unnecessary and costly additional laboratory examinations, and inappropriate medical o surgical therapy. This study marks pseudothrombocytopenia EDTA-induced (PTCP-EDTA) in patients of Bioanlisis Service of "Dr. Jos Gregorio Hernndez" Hospital-IVSS (Venezuelan Institute of Social Security), in the period of 01-01-99 to 31-07-00 propose variety alternative for correct platelet count in specimens with this phenomenon. The blood of five patients was treaty with differents anticoagulants (EDTA, citrate, oxalate) and keep a room temperature and 37C.The methodology studioused was extract an additional sample with EDTA for supplementary with kanamicin in three of those five patients, to analyze the effect of kanamicin about hematology parameters. Through 25.390 hematology performs was detect nine cases of PTCP-EDTA. Conclusion: The citrate isnt the anticoagulant recommend for correct platelet count in this patients; other alternative can be keep the specimens to 37C, right after collect. The supplementary kanamicin in the collect blood sample in EDTA is the ideal method for correct platelet count in automated cell-count in cases of previous diagnostic PTCP-EDTA. Because avoid platelet clumps and it doesnt show changes hematology parameter. Another method is collect a finger-stick blood by using an ammonium oxalate Unopette and to count the blood cells by phase microscopy.Key Words:Platelet, Pseudothrombocytopenia, Thrombocytopenia, EDTA.__________________INTRODUCCINLa pseudotrombocitopenia es definida como una falsa disminucin en el contaje plaquetario producto de un artefacto de laboratorio(1). Entre los factores que pueden ocasionarla se han descrito: coagulacin parcial de la muestra(1-5), fallas en la tcnica de extraccin(1-5), satelitismo plaquetario(6-12), presencia de plaquetas gigantes(1-5)y la existencia de anticuerpos antiplaquetarios en presencia de anticoagulantes(1-5,9,13-20). Las Pseudotrombocitopenias representan aproximadamente el 49% de las trombocitopenias que se presentan en muestras analizadas en autoanalizadores hematolgicos. De ellas, el 72% es debido a la agregacin por cido Etilen-diamino-tetra-actico (EDTA)(5), que es el anticoagulante recomendado por la International Council for Standardization in Haematology (ICSH) para la realizacin de hematologas(21).Inicialmente el fenmeno fue reconocido por Gowland et al. en 1969(13)y Watkins y Shulman en 1970(14), quienes describieron un factor en el suero que provocaba aglutinacin de las plaquetas in vitro, en presencia de EDTA y a temperaturas menores de 37C. La formacin de estos agregados es dependiente del tiempo por lo que una progresiva reduccin del contaje plaquetario puede ser observado al procesar las muestras en distintos momentos.La presencia de pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente (PTCP-EDTA), no se ha relacionado con alteraciones en la morfologa y funcin plaquetaria(1,13). Se ha llegado a afirmar que este fenmeno no est asociado a enfermedades autoinmunes ni hemorrgicas. No existiendo correlacin alguna entre la pseudotrombocitopenia EDTA dependiente, el estado salud-enfermedad y la edad(4,5,19,22); curiosamente la pseudotrombocitopenia EDTA dependiente prevalece en las mujeres con un 65%.La deteccin de este fenmeno es sumamente importante ya que la falta de reconocimiento de este falso contaje plaquetario puede provocar la realizacin de costosos exmenes adicionales, diagnsticos errados y largas terapias con corticoesteroides, suspensin de tratamientos e incluso un cambio de vida del paciente por temor al sangrado; por todo esto es importante que exista una buena comunicacin entre el clnico y el personal del laboratorio para que, en casos de trombocitopenias, sean descartadas y/o detectadas las pseudotrombocitopenias y dentro de stas las debidas a EDTA.Hasta ahora no est totalmente dilucidado el mecanismo por el cual se forman los agregados plaquetarios en presencia de EDTA. Diversos estudios demuestran que los anticuerpos en pacientes pseudotrombocitopnicos reconocen un determinante antignico en la GPIIb de la membrana plaquetaria lo cual es una expresin estrictamente dependiente de la presencia de anticoagulantes quelantes de Ca2+. Otro estudio plantea la posibilidad que la unin anticuerpo-GPIIb provoca la activacin y posterior agregacin plaquetaria(23).Sakurai et al.(24)en 1997, propusieron dos nuevas hiptesis para explicar la agregacin plaquetaria inducida por EDTA. Ellos observaron que los pacientes que exhiban un contaje normal de plaquetas en la admisin y que luego desarrollaban pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente haban recibido tratamiento con antibiticos de 4 a 10 das antes de la deteccin de pseudotrombocitopenia. Por lo que su hiptesis primaria fue que los anticuerpos antiplaquetario de los pacientes pseudotrombocitopnicos en un principio eran originados contra los antibiticos con los cuales ellos haban sido tratados, sin embargo, en este mismo estudio se observ que no haba una relacin especfica entre los antibiticos usados para el tratamiento del paciente y aquellos que fueron demostrados como efectivos en la prevencin de la agregacin plaquetaria, sugiriendo que esta hiptesis es improbable. Una explicacin alternativa sera que la adicin de EDTA previene la agregacin en pacientes normales por un incremento de la carga de la superficie plaquetaria; los anticuerpos antiplaquetarios que inducen PTCP-EDTA dependiente pudiesen entonces disminuir la carga de superficie de las plaquetas y antagonizar los efectos anticoagulantes del EDTA, explicando la agregacin.MATERIALES Y MTODOSDel total de hematologas procesadas en el laboratorio del Hospital "Dr. Jos Gregorio Hernndez" del Seguro Social de Caracas, durante el perodo comprendido entre el 01 de enero de 1999 y el 31 de julio de 2000, se reestudiaron aquellos pacientes a quienes se les haba reportado un contaje bajo de plaquetas y en cuyos extendidos sanguneos mostraban agregados plaquetarios; as como aquellos que en dos o ms hematologas se les haban reportado contajes plaquetarios discordantes.En total se evaluaron cinco (05) pacientes en los que se presuma la existencia de PTCP-EDTA dependiente.COMPORTAMIENTO DEL CONTAJE PLAQUETARIO CON DIVERSOS ANTICOAGULANTES Y A DIFERENTES TEMPERATURASSe recolectaron las muestras en cuatro (4) tubos al vaco (Vacutainer Systems Becton Dickinson), dos de los tubos contenan 0.057ml de EDTA-K3 al 15% para un volumen total de 5ml, uno se incub a 37C durante todo el ensayo yel otro se mantuvo a temperatura ambiente, un tercer tubo con 0.3ml de citrato de sodio dihidratado al 3.8% para un volumen total de 3ml se dej a temperatura ambiente y de un cuarto tubo sin aditivo se obtuvo suero para la realizacin de pruebas bioqumicas.A cada uno de los pacientes se les tom muestra capilar para el contaje manual por el mtodo de Brecher-Cronkite utilizando Unopette; este contaje se llev a cabo por triplicado(25).Cada muestra fue mezclada veinte (20) veces por inversin completa manual y/o en un mezclador de muestras (Coulter Electronic INC Hialeah Florida) antes de ser procesada e inmediatamente se elabor su respectivo frotis por duplicado, estos frotis sanguneos fueron teidos con colorantes tipo Romanoswky(Giemsa y Wright).Cada 5 minutos, durante una hora se procesaron las muestras en un contador electrnico automatizado Coulter T-890 (Coulter Electronic INC Hialeah Florida), en la siguiente secuencia:1. Muestra anticoagulada con EDTA-K3 conservada a temperatura ambiente.2. Muestra anticoagulada con EDTA-K3 conservada a 37C.3. Muestra anticoagulada con Citrato de Sodio 3,8% conservada a temperatura ambiente.En los datos de la muestra citratada se realiz una correccin por la dilucin.Para el anlisis de los datos: el contaje de plaquetas y leucocitos se utiliz el programa Excel del Office 98.EFECTO DE LA SUPLEMENTACIN DEL EDTA CON KANAMICINA EN LOS PARMETROS HEMATOLGICOS(suplementacin inmediatamente despus de extrada la muestra)En tres de los cinco pacientes evaluados (3, 4 y 5) se tom una muestra adicional con EDTA-K3 al que se le agreg inmediatamente kanamicina. Estas muestras se mantuvieron a temperatura ambiente y se procesaron paralelamente con las muestras anteriormente sealadas.RESULTADOSDe un total de 25.390 hematologas procesadas se detectaron nueve casos (09) de PTCP-EDTA dependiente, siendo la incidencia observada de 0,04%.De los nueve casos reconocidos en ms de ao y medio todos fueron del sexo femenino, ocho (08) pacientes ambulatorios y uno (01) se encontraba hospitalizado. De los casos hallados en este perodo, slo cinco (05) aprobaron participar en este protocolo con edades comprendidas entre 14 y 63 aos (media 43 aos).El comportamiento del contaje de plaquetas y leucocitos, con diversos anticoagulantes y a diferentes temperaturas en uno de los pacientes se observa en laGrfica 1.El efecto de la suplementacin del EDTA con kanamicina sobre los parmetros hematolgicos se muestra en laTabla 1.

Grfica 1:Contaje de plaquetas con diversos anticoagulantes y a diferentes temperaturasTabla 1: Variaciones de los parmetros hematolgicos en 3 pacientes del Hosp. JGH, con PTCT-EDTA dependiente en EDTA a diferentes temperaturas y suplementado con kanamicina. Agosto 2000.ParmetroEDTA a Temperatura ambienteEDTA a 37CEDTA + Kanamicina

Media*2DS%Coeficiente de VariacinMedia*2DS%Coeficiente de VariacinMedia*2DS%Coeficiente de Variacin

Glbulos Blancos x109/l

Paciente 310.71.04.99.80.21.29.80.21.3

Paciente 49.51.05.88.80.21.58.70.21.4

Paciente 58.41.010.36.92.12.16.00.21.9

Coulter T-890(4.0-11.5)x109/LCoeficiente de Variacin = menor o igual al 2%

Glbulos

Rojos x109/L

Paciente 34.490.040.504.470.040.504.390.060.60

Paciente 44.800.040.504.800.060.704.700.080.80

Paciente 54.600.060.704.600.060.704.500.040.50

Coulter T-890(3.00-6.00)x109/LCoeficiente de Variacin = menor o igual al 1.5%

Hemoglobina (Gr/Dl)

Paciente 311.40.20.711.40.20.711.10.20.6

Paciente 414.60.20.914.60.20.514.50.20.8

Paciente 514.50.20.714.40.20.714.40.20.7

Coulter T-890(12.0-18.0)Gr/DlCoeficiente de Variacin = menor o igual al 0.8%

Hematocrito (%)

Paciente 336.60.40.736.60.60.936.00.81.1

Paciente 445.10.80.845.11.01.244.71.01.2

Paciente 544.20.40.544.00.80.943.60.60.8

Coulter T-890(24.0-70.0)%Coeficiente de Variacin = menor o igual al 1%

Vcm (fL)

Paciente 381.71.00.681.81.20.782.01.60.9

Paciente 494.00.80.594.51.60.894.61.60.8

Paciente 595.61.20.695.51.00.596.41.40.7

Coulter T-890(80.0-100.0)fLCoeficiente de Variacin = menor o igual al 1%

DISCUSINLa incidencia de PTCP-EDTA dependiente en este centro asistencial para el lapso comprendido entre 01-01-99 al 31-07-00 fue de 0,04%. Estos resultados estn por debajo de los reportados en la literatura mundial que van desde 0.07%(3)hasta 1.9%(1). Se infiere que la causa de esta diferencia puede ser debido a variaciones propias de la poblacin venezolana, ya que no conocemos incidencias de este fenmeno en la comunidad latina; o que se est presentando un subregistro de casos en este servicio.Todos los pacientes a quienes se le detect pseudotrombocitopenia EDTA-dependiente en el presente estudio fueron del sexo femenino, hecho que se corresponde con lo descrito en la literatura(3, 5,19, 26). En ninguno de los casos, el motivo de consulta se relacion con el desarrollo de este fenmeno. El total de los pacientes no presentaron patologas que se pudiesen asociar con trombocitopenias verdaderas (a excepcin de dos (02) casos de sndrome viral), la mayora de stos asistieron al laboratorio para exmenes de control o de rutina y slo uno estaba hospitalizado; encontrndose una mayor prevalencia en pacientes aparentemente sanos. La edad de los pacientes estuvo en un rango amplio de 14 a 63 aos, la ausencia de infantes en el presente estudio se explica por el hecho de que en este centro asistencial, se atienden en su mayora pacientes de edad avanzada y con enfermedades crnicas.Las muestras analizadas presentaron un contaje inicial de plaquetas dentro del rango de referencia normal (232-336)x109/l(27). En estos pacientes se observ una disminucin progresiva en el contaje de plaquetas de las muestras tomadas con EDTA y mantenidas a temperatura ambiente, llegando a ser sta hasta un 91% ms baja que el contaje inicial, a los sesenta (60) minutos despus de extrada la muestra. A pesar de que la disminucin fue homognea (77%-91%), la intensidad del decrecimiento a travs del tiempo fue diferente en cada uno de los pacientes. Paralelo a la disminucin del contaje plaquetario, se observ un aumento en el nmero de glbulos blancos registrados por el equipo, llegando a ser este incremento hasta un 130% del contaje inicial.La observacin microscpica de los extendidos sanguneos de estos pacientes mostraron la existencia de cmulos plaquetarios que iban aumentando en nmero y tamao gradualmente en el tiempo,(Figura 1). La formacin de estos cmulos explicara la disminucin progresiva del contaje plaquetario y el aumento paralelo del contaje leucocitario, ya que los mismos al llegar a tener un volumen mayor de 20fl no son detectados por el autoanalizador como plaquetas, sino que son registrados como leucocitos debido a su similitud con estos ltimos,(Figura 2). Estos resultados son compatibles con el diagnstico de PTCP-EDTA dependiente.

Figura 1:Agragados plaquetarios observados en muestra extrada a los 30 minutos y mantenidas a temperatura ambiente (100x).

Figura 2:Extendido sanguneo de muestra extrada con EDTA y mantenida a temperatura ambiente donde se compara el tamao de los agregados plaquetarios con el de un polimorfonuclear (100x).Los resultados obtenidos en muestras anticoaguladas con citrato exhibieron un fenmeno similar al observado en las muestras anticoaguladas con EDTA y mantenidas a temperatura ambiente, aunque la disminucin del contaje plaquetario se hace menos acentuada a travs del tiempo. Llama la atencin que en diversos reportes(1,3,15,20,28,29,30,31,32)se ha recomendado el uso del citrato como alternativa para confirmar la existencia de PTCP-EDTA dependiente e incluso lo sealan como el anticoagulante a utilizar para la realizacin del contaje plaquetario automatizado en pacientes que presentan este fenmeno.No es recomendable el uso del citrato para confirmar el diagnstico de PTCP-EDTA dependiente, as como tampoco el anticoagulante alternativo para el contaje de plaquetas en estos casos, debido a que en todos los pacientes el contaje fue disminuyendo en distintas proporciones y el coeficiente de variacin de dichos contajes estuvo en un rango de 14% al 49%, lo que resulta poco confiable para el uso en el laboratorio clnico de rutina. A diferencia de los contajes plaquetarios realizados bajo las condiciones antes descrita (EDTA y citrato mantenidas a temperatura ambiente), en los contajes plaquetarios de las muestras extradas con EDTA y conservadas a 37C se obtuvieron coeficientes de variacin con un rango de 1.7% al 8.8%, aunque ste es mucho menor que los obtenidos en EDTA y citrato mantenidas a temperatura ambiente, la mayora de los valores no estuvieron dentro del rango establecido por el fabricante del equipo (3%), solo dos (02) pacientes mostraron coeficiente de variacin aceptable. Estos resultados indican que el mecanismo por el cual se forman los agregados debe estar relacionado con un tipo de anticuerpo que reacciona a temperaturas menores de 37C.; debido a que en la mayora de los laboratorios clnicos de rutina cuentan con bao de Mara pareciera prctico y de bajo costo la implementacin de este protocolo para el correcto contaje de plaquetas, en pacientes a los que se les ha reconocido previamente este fenmeno. Cabe destacar, que en nuestros casos al igual que los reportados por Watkins(14)y Sheiner(15)la agregacin plaquetaria no se reverti al ser incubada la muestra a 37C.En los experimentos al suplementar inmediatamente con Kanamicina, las muestras de tres (03) pacientes extradas con EDTA, se observaron contajes plaquetarios que se mantuvieron constantes durante los sesenta (60) minutos de la prueba, correspondindose ste resultado con un bajo porcentaje de disminucin entre los contajes iniciales y finales (rango: 0-4%) y un coeficiente de variacin que se mantuvo entre el 2.2% y el 3.4%, lo que refleja una precisin vlida como para que este protocolo sea usado en el laboratorio clnico de rutina.Al realizar el contaje manual de plaquetas por el mtodo de referencia de Brecher-Cronkite encontramos valores entre 222-305 x109/l, observando un contaje comparable entre stos y aquellos realizados por el autoanalizador a las muestras suplementadas con Kanamicina (240-290 x 109/l), lo que evidencia la exactitud del protocolo propuesto. Los autores piensan que la suplementacin con este antibitico es efectiva no slo para evitar la agregacin sino, que adems, permite realizar contajes plaquetarios exactos y reproducibles a travs del tiempo en los pacientes con PTCP-EDTA dependiente. De igual forma se analizaron los posibles cambios que esta suplementacin pudiese ocasionar en el resto de los parmetros hematolgicos (glbulos blancos, glbulos rojos, hemoglobina, hematocrito y VCM), y observando que estos no se alteran, podemos concluir que la suplementacin con Kanamicina, sera el mtodo ideal para el correcto contaje automatizado de plaquetas, sin alterar los otros parmetros hematolgicos, en pacientes con PTCP-EDTA dependiente previamente diagnosticada.El mecanismo por el cual este antibitico es capaz de prevenir los cmulos plaquetarios es an desconocido, aunque Sakurai et al.(24)proponen dos hiptesis que explicaran la accin de la Kanamicina sobre los agregados.Como alternativa factible econmica y sencilla, se propone el uso de la Kanamicina para el diagnstico diferencial de la PTCP-EDTA dependiente. Sin embargo su uso no excluye la posibilidad de que se contine obviando en algunos pacientes este artefacto de laboratorio; queda de parte del personal del laboratorio el reconocer a tiempo y aplicar las alternativas que tenga a su alcance para elaborar un correcto contaje plaquetario.En este estudio se propone un mtodo alternativo para detectar la PTCP-EDTA dependiente y como realizar un correcto contaje plaquetario en estos casos.PROTOCOLO PARA DETECTAR CASOS DE PSEUDOTROMBOCITOPENIA EDTA DEPENDIENTEEn la rutina diaria del laboratorio clnico, al observar contajes plaquetarios por debajo del rango de referencia se debe revisar el extendido sanguneo, y si ste no se corresponde con el nmero de plaquetas arrojadas por el equipo y adems se observaron agregados plaquetarios, sugerimos citar nuevamente al paciente, para extender el estudio y descartar una PTCP-EDTA dependiente.ProcedimientoTomar tres muestras de sangre venosa con anticoagulante EDTA y mantener las siguientes condiciones: El tubo N 1 dejar a temperatura ambiente. El tubo N 2 dejar a 37C. inmediatamente despus de extrada la muestra. El tubo N 3 se suplementar con Kanamicina (20 mg/ml de sangre) inmediatamente despus de extrada la muestra.Analizar cada una de estas muestras en el autoanalizador hematolgico, cada 10 minutos durante una hora.Tomar muestra capilar para realizar contaje de referencia, Unopette (Brecher-Cronkite).