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1 RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS DE CINÉTICA ENZIMÁTICA REPRESENTACIÓN DE EADIE-HOFSTEE Es más sencilla esta representación que la de Lineweaver-Burke porque se tienen que hacer menos cálculos y no se tiene que calcular cuánto espacio dejar a la izquierda del eje y. En el eje y se representa la velocidad inicial (v 0 ), mientras que en el eje x se representa la velocidad inicial dividida entre la concentración de sustrato (v 0 /[S]). El punto de corte con el eje y es el valor de la velocidad máxima (v máx ). [ ] El punto de corte con el eje x nos da el cociente entre v máx y la K M . Por tanto, el valor de K M se puede calcular dividiendo la velocidad máxima entre el punto de corte con el eje x. [ ] NÚMERO DE RECAMBIO (k cat ) El número de recambio (k cat ) es el número de moléculas de sustrato convertidas por segundo, por lo que su unidad es s -1 . Para calcularlo se utiliza la fórmula: [ [] ] Donde v máx es la velocidad máxima y [E] T es la cantidad de enzima (en moles). ACTIVIDAD ENZIMÁTICA ESPECÍFICA La v máx mide la actividad enzimática, por lo que la actividad enzimática específica será el cociente entre v máx y la masa (en gramos o múltiplos). [ ] CÁLCULO DE V MÁX AP Y DE KM AP Ambos parámetros cinéticos aparentes se calculan de la misma manera que sus análogos no aparentes (véase apartado de REPRESENTACIÓN DE EADIE-HOFSTEE), pero se utilizan los datos de la recta obtenida a partir de los valores en presencia del inhibidor.

Resolución de Problemas

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Resolución de problemas de enzimática perteneciente a la asignatura de Bioquímica I.

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  • 1

    RESOLUCIN DE PROBLEMAS DE CINTICA ENZIMTICA

    REPRESENTACIN DE EADIE-HOFSTEE

    Es ms sencilla esta representacin que la de Lineweaver-Burke porque se tienen que hacer menos clculos y no se tiene que calcular cunto espacio dejar a la izquierda del eje y.

    En el eje y se representa la velocidad inicial

    (v0), mientras que en el eje x se representa la velocidad inicial dividida entre la concentracin de sustrato (v0/[S]).

    El punto de corte con el eje y es el valor de la velocidad mxima (vmx).

    [ ] El punto de corte con el eje x nos da el

    cociente entre vmx y la KM. Por tanto, el valor de KM se puede calcular dividiendo la velocidad mxima entre el punto de corte con el eje x.

    [

    ]

    NMERO DE RECAMBIO (kcat)

    El nmero de recambio (kcat) es el nmero de molculas de sustrato convertidas por segundo, por lo que

    su unidad es s-1. Para calcularlo se utiliza la frmula:

    [ [ ]

    ]

    Donde vmx es la velocidad mxima y [E]T es la cantidad de enzima (en moles).

    ACTIVIDAD ENZIMTICA ESPECFICA

    La vmx mide la actividad enzimtica, por lo que la actividad enzimtica especfica ser el cociente entre

    vmx y la masa (en gramos o mltiplos).

    [

    ]

    CLCULO DE VMXAP Y DE KMAP

    Ambos parmetros cinticos aparentes se calculan de la misma manera que sus anlogos no aparentes

    (vase apartado de REPRESENTACIN DE EADIE-HOFSTEE), pero se utilizan los datos de la recta obtenida a

    partir de los valores en presencia del inhibidor.

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    TIPO DE INHIBICIN

    Tipo de inhibicin

    Qu pasa con KM?

    Qu pasa con vmx?

    Representacin grfica

    Inhibicin competitiva

    La KMap aumenta.

    La vmxap se

    mantiene constante.

    Inhibicin acompetitiva

    La KMap

    disminuye. La vmx

    ap disminuye.

    Inhibicin no competitiva pura

    La KMap se

    mantiene constante.

    La vmxap disminuye.

  • 3

    CLCULO DE K I

    Inhibicin competitiva. Se cumple que:

    (

    [ ]

    )

    [ ]

    [

    [ ]

    ]

    Inhibicin acompetitiva. Se cumple que:

    [ ]

    [ ]

    [

    [ ]

    ( )

    ]

    Tambin se cumple que:

    [ ]

    [ ]

    [

    [ ]

    ( )

    ]

    Inhibicin no competitiva pura. Se cumple que:

    [ ]

    [ ]

    [

    [ ]

    ( )

    ]

    Resolucin de problemas de Cintica enzimticaRepresentacin de Eadie-HofsteeNmero de recambio (kcat)Actividad enzimtica especficaClculo de Vmxap y de KMapTipo de inhibicinClculo de KI