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Sensibilidad de las pruebas de alternancia espontánea y alternancia retardada para la evaluación de daño en el estriado de la rata albina El estriado participa en el control del movimiento y también en el aprendizaje. En particular el estriado participa en el aprendizaje de hábitos y de tareas que requieren información sobre la posición corporal. En el laboratorio estamos interesados en contar con una batería conductual que nos permita discernir si la exposición a ciertas sustancias presentes en el medio ambiente incide sobre la función de este núcleo cerebral. Con esta finalidad evaluamos si las lesiones del estriado dorsolateral usando neurotoxinas como son el ácido kaínico (AK) y el ácido nitropropiónico (NTP) afectan el aprendizaje de tareas de alternancia usando un laberinto en T. Evaluar si el aprendizaje de las tareas de alternancia espontánea y retardada se modifica sustancialmente después de una lesión excitotóxica del estriado dorsolateral. Se utilizaron 24 ratas macho Wistar mantenidas en un ciclo de luz oscuridad (12:00-12:00 h) invertido, con acceso libre a agua y alimento. Se formaron tres grupos (n=8), un grupo control (CN) al que se le inyectó vehículo, un grupo con AK (5nmoles) y otro grupo con NTP (500 nmoles). Se inyectó un volumen de 1µl en cada estriado (coordenadas: AP+1.0 mm y L+;-2.6 mm de bregma; DV -5.5 mm de la dura). Resultados A los 7 días posteriores a la lesión en las variables de Distancia total y Número de movimientos verticales, hubo interacción significativa entre el grupo y la muestra [F (7.8, 82.51)= 2.71, P<0.05] y [ F (9.58, 100.60)= 2.45, P<0.05] respectivamente, se encontró un efecto significativo de grupo en las Variables de Distancia total Número total de movimientos, Número de Estereotipias y Número de movimientos verticales [F(2,21)=9.32-12.50, P<0.05.]. Al medir la actividad locomotora espontánea a los 30 días posteriores a la cirugía, se encontró un efecto significativo de grupo sólo en las variables de Distancia total y Número total de movimientos [F(2,21)=4.63,7.12] siendo el grupo KA más activo que los otros grupos. En todas las variables a los 7 y 30 días posteriores a la lesión se encontraron resultados significativos de muestra (datos no mostrados) En la prueba de alternancia retardada no se encontró un efecto significativo de grupo en el número de errores totales cometidos a lo largo de las 10 sesiones. En cuanto a la variable de tiempo el grupo KA fue significativamente más lento al momento de realizar la tarea. Pacheco Reyes C.A., Mendoza-Trejo M.S., Rodríguez V.M. Giordano M. Departamento de Neurobiología Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiología UNAM Campus Juriquilla, Querétaro, México. Introducción Objetivo Método Actividad Locomotora Conclusiones Intervención Quirúrgica Actividad Locomotora Exploración Alternancia Espontánea Alternancia Retardada Actividad Locomotora Perfusión Histología Tinción de Nissl Reacción de Citocromo-Oxidasa 30 días posteriores a la cirugía 10 sesiones 10 ensayos 1 sesión de 10 ensayos 1 sesión de 5 minutos 7 días posteriores a la cirugía Figura 1.- Promedio de la distancia total recorrida (centímetros) y número total de movimientos a lo largo de 24 horas a los 7 días posteriores a la lesión. Cada punto representa el promedio por grupo en cada hora. El análisis estadístico se llevó a cabo considerando solamente las 12 horas de oscuridad. El grupo KA mostró una mayor actividad en comparación con el grupo NTP y el grupo CN para ambas variables Figura 2.- Tiempo promedio (segundos) en el que cada grupo realizó la tarea de alternancia espontánea durante los 10 ensayos que duró la única sesión. Hubo un efecto significativo de grupo [F =4.68, p<0.05], el grupo NTP (2,21) resolvió en menor tiempo la tarea. Figura 3.- Promedio del número de errores totales cometidos durante la prueba de alternancia espontánea realizada en una sesión de 10 ensayos. Hubo un efecto significativo de grupo [F =5.22, p<0.05], el grupo KA (2,21) cometió el mayor número de errores. *Diferencia significativa con respecto al grupo control, p<0.05. Figura 5.-Número total de errores totales cometidos por grupo a lo largo de las 10 sesiones de entrenamiento en la prueba de alternancia retardada. Figura 4.- Tiempo promedio (segundos) en el que cada grupo realizó la tarea de alternancia retardada durante las 10 sesiones de entrenamiento. Hubo un efecto significativo de grupo [F =6.21, p<0.05], el grupo KA requirió más tiempo para resolver la tarea y (2,21) también hubo un decremento significativo del tiempo con cada sesión [F =17.60, p<0.05], pero no hubo una (9, 189) interacción significativa entre grupo y sesión. Pruebas de Aprendizaje El aprendizaje de las tareas de alternancia espontánea y retardada se ven parcialmente afectadas por la lesión del estriado dorsolateral con ácido kaínico pero no con ácido nitropropiónico. A pesar de que los animales lesionados con AK comenten más errores en la prueba de alternancia espontánea, no cometen más errores en la tarea de alternancia retardada, aunque tardan más en resolver esta tarea. En términos de la actividad locomotora espontánea, los animales lesionados con AK son más activos que los otros grupos durante la fase de oscuridad, sobre todo a los 7 días después de la lesión.A la dosis usada en el presente estudio el ácido nitropropiónico no causó una lesión significativa del estriado, ni alteró la conducta locomotora espontánea, ni el aprendizaje de tareas de alternancia espontánea. Se sugiere hacer un estudio para encontrar la dosis adecuada para que estas lesiones sirvan como control positivo de daño al estriado. Estos resultados indican que las pruebas de alternancia retardada y espontánea no son suficientemente sensibles para detectar daño estriatal y es necesario buscar otras pruebas que sean más sensibles. . Por su asesoría y colaboración durante la estancia a: Dr. Jorge Humberto Limón Pacheco, M. en C. Isela Hernández Plata, QFB. Andrea Ariadna Ríos Ramírez, IBQ. G. Marcela Sánchez González, M. en C. Ulises Pacheco Bardullas, Victor Hugo Pérez Romero, Agradecimientos Método Histología Figura 6.- Fotografías representativas de secciones coronales teñidas con violeta de cresilo y citocromo oxidasa, A la derecha de los cortes se presentan la tinción de citocromo oxidasa y a la izquierda la tinción de Nissl. La barra indica 50µu Controles KA NTP * *

Sensibilidad de las pruebas de alternancia espontánea … · Sánchez González, M. en C. Ulises Pacheco Bardullas, Victor Hugo Pérez Romero, Agradecimientos Histología Figura

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Sensibilidad de las pruebas de alternancia espontánea y alternancia retardada para la evaluación de daño en

el estriado de la rata albina

El estriado participa en el control del movimiento y también en el aprendizaje. En particular el estriado participa en el aprendizaje de hábitos y de tareas que requieren información sobre la posición corporal. En el laboratorio estamos interesados en contar con una batería conductual que nos permita discernir si la exposición a ciertas sustancias presentes en el medio ambiente incide sobre la función de este núcleo cerebral. Con esta finalidad evaluamos si las lesiones del estriado dorsolateral usando neurotoxinas como son el ácido kaínico (AK) y el ácido nitropropiónico (NTP) afectan el aprendizaje de tareas de alternancia usando un laberinto en T.

Evaluar si el aprendizaje de las tareas de alternancia espontánea y retardada se modifica sustancialmente después de una lesión excitotóxica del estriado dorsolateral.

Se utilizaron 24 ratas macho Wistar mantenidas en un ciclo de luz oscuridad (12:00-12:00 h) invertido, con acceso libre a agua y alimento. Se formaron tres grupos (n=8), un grupo control (CN) al que se le inyectó vehículo, un grupo con AK (5nmoles) y otro grupo con NTP (500 nmoles). Se inyectó un volumen de 1µl en cada estriado (coordenadas: AP+1.0 mm y L+;-2.6 mm de bregma; DV -5.5 mm de la dura).

Resultados A los 7 días posteriores a la lesión en las variables de Distancia total y Número de movimientos verticales, hubo interacción significativa entre el grupo y la muestra [F (7.8, 82.51)= 2.71, P<0.05] y [ F (9.58, 100.60)= 2.45, P<0.05] respectivamente, se encontró un efecto significativo de grupo en las Variables de Distancia total Número total de movimientos, Número de Estereotipias y Número de movimientos verticales [F(2,21)=9.32-12.50, P<0.05.]. Al medir la actividad locomotora espontánea a los 30 días posteriores a la cirugía, se encontró un efecto significativo de grupo sólo en las variables de Distancia total y Número total de movimientos [F(2,21)=4.63,7.12] siendo el grupo KA más activo que los otros grupos. En todas las variables a los 7 y 30 días posteriores a la lesión se encontraron resultados significativos de muestra (datos no mostrados) En la prueba de alternancia retardada no se encontró un efecto significativo de grupo en el número de errores totales cometidos a lo largo de las 10 sesiones. En cuanto a la variable de tiempo el grupo KA fue significativamente más lento al momento de realizar la tarea.

Pacheco Reyes C.A., Mendoza-Trejo M.S., Rodríguez V.M. Giordano M. Departamento de Neurobiología Conductual y Cognitiva, Instituto de Neurobiología

UNAM Campus Juriquilla, Querétaro, México.

Introducción Objetivo

Método

Actividad Locomotora

Conclusiones

Intervención Quirúrgica

Actividad Locomotora

Exploración AlternanciaEspontánea

Alternancia Retardada

Actividad Locomotora

Perfusión Histología

Tinción de Nissl

Reacción de Citocromo-Oxidasa

30 días posteriores a la

cirugía

10 sesiones10 ensayos

1 sesión de10 ensayos

1 sesión de5 minutos

7 días posteriores a la cirugía

Figura 1.- Promedio de la distancia total recorrida (centímetros) y número total de movimientos a lo largo de 24 horas a los 7 días posteriores a la lesión. Cada punto representa el promedio por grupo en cada hora. El análisis estadístico se llevó a cabo considerando solamente las 12 horas de oscuridad. El grupo KA mostró una mayor actividad en comparación con el grupo NTP y el grupo CN para ambas variables

Figura 2.- Tiempo promedio (segundos) en el que cada grupo realizó la tarea de alternancia espontánea durante los 10 ensayos que duró la única sesión. Hubo un efecto significativo de grupo [F =4.68, p<0.05], el grupo NTP (2,21)

resolvió en menor tiempo la tarea.

Figura 3.- Promedio del número de errores totales cometidos durante la prueba de alternancia espontánea realizada en una sesión de 10 ensayos. Hubo un efecto significativo de grupo [F =5.22, p<0.05], el grupo KA (2,21)

cometió el mayor número de errores. *Diferencia significativa con respecto al grupo control, p<0.05.

Figura 5.-Número total de errores totales cometidos por grupo a lo largo de las 10 sesiones de entrenamiento en la prueba de alternancia retardada.

Figura 4.- Tiempo promedio (segundos) en el que cada grupo realizó la tarea de alternancia retardada durante las 10 sesiones de entrenamiento.

Hubo un efecto significativo de grupo [F =6.21, p<0.05], el grupo KA requirió más tiempo para resolver la tarea y (2,21)

también hubo un decremento significativo del tiempo con cada sesión [F =17.60, p<0.05], pero no hubo una (9, 189)

interacción significativa entre grupo y sesión.

Pruebas de Aprendizaje

El aprendizaje de las tareas de alternancia espontánea y retardada se ven parcialmente afectadas por la lesión del estriado dorsolateral con ácido kaínico pero no con ácido nitropropiónico.

A pesar de que los animales lesionados con AK comenten más errores en la prueba de alternancia espontánea, no cometen más errores en la tarea de alternancia retardada, aunque tardan más en resolver esta tarea.

En términos de la actividad locomotora espontánea, los animales lesionados con AK son más activos que los otros grupos durante la fase de oscuridad, sobre todo a los 7 días después de la lesión.A la dosis usada en el presente estudio el ácido nitropropiónico no causó una lesión significativa del estriado, ni alteró la conducta locomotora espontánea, ni el aprendizaje de tareas de alternancia espontánea. Se sugiere hacer un estudio para encontrar la dosis adecuada para que estas lesiones sirvan como control positivo de daño al estriado.

Estos resultados indican que las pruebas de alternancia retardada y espontánea no son suficientemente sensibles para detectar daño estriatal y es necesario buscar otras pruebas que sean más sensibles.

.

Por su asesoría y colaboración durante la estancia a: Dr. Jorge Humberto Limón Pacheco, M. en C. Isela Hernández Plata, QFB. Andrea Ariadna Ríos Ramírez, IBQ. G. Marcela Sánchez González, M. en C. Ulises Pacheco Bardullas, Victor Hugo Pérez Romero,

Agradecimientos

Método

Histología

Figura 6.- Fotografías representativas de secciones coronales teñidas con violeta de cresilo y citocromo oxidasa, A la derecha de los cortes se presentan la tinción de citocromo oxidasa y a la izquierda la tinción de Nissl. La barra indica 50µu

Controles KA NTP

*

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