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técnicamente válidos
SEGUNDAS JORNADAS DE
ACTUALIZACIÓN ANALÍTICA
Rafaela – 12 de junio de 2015
Pablo Álvarez
1. Validación de métodos analíticos
2. Evaluación de la incertidumbre de medición
3. Control de calidad de los resultados
Pilares del aseguramiento de la calidad en laboratorios
Confirmación, mediante el examen y el aporte de
evidencias objetivas, de que se cumplen los requisitos
particulares para un uso específico previsto.
ISO/IEC 17025:2005
Validación de métodos
Definición
Validación de métodos
¿Por qué es necesario validar un método analítico?
Millones de mediciones son llevadas a cabo en miles de laboratorios de todo el mundo por diferentes motivos.
Mediciones con fines comerciales, relacionadas con la salud, ambientales, forenses, etc.
El costo de realizar tales mediciones es alto y costos adicionales pueden aparecer a partir de la toma de decisiones incorrectas basadas en los resultados de esas mediciones.
Por lo tanto es muy importante determinar el resultado correcto de una medición y ser capaz de demostrar que ese resultado es correcto.
Validación de métodos
¿Por qué es necesario validar un método analítico?
Validación de métodos
¿Cómo se valida un método analítico?
Ensayo colaborativo
“Collaborative Testing”
Un solo laboratorio
“In-house validation”
“Single-laboratory validation”
Validación de métodos
validar el método
FIN SI
ajustar el
método
NO ¿apto para el propósito?
elaborar protocolo
establecer requisitos
¿Cómo se valida un método analítico?
Validación de métodos
Acreditación de laboratorios
5.4.5.2 Validación de los métodos
El laboratorio debe validar los métodos no normalizados, los
métodos que diseña o desarrolla, métodos normalizados
empleados fuera del alcance previsto, así como las ampliaciones
y modificaciones de los métodos normalizados, para confirmar
que los métodos son aptos para el fin previsto.
ISO/IEC 17025:2005
Requisitos generales para la competencia de los
laboratorios de ensayo y de calibración
Validación de métodos
Acreditación de laboratorios
Publicados por organismos de normalización
internacionales, regionales o nacionales (normas), ej.: ISO,
EN, NM, ASTM, DIN, BS, IRAM, etc.
Publicados por organizaciones reconocidas en diferentes
ámbitos (métodos oficiales), ej: AOAC, EPA, SMW&W, USP,
FIL, etc.
¿Qué métodos se consideran “normalizados”?
Validación de métodos
Acreditación de laboratorios
5.4.2 Selección de los métodos
... El laboratorio debe confirmar que puede aplicar
correctamente los métodos normalizados antes de
utilizarlos para los ensayos. Si el método normalizado
cambia, se debe repetir la confirmación...
ISO/IEC 17025:2005
verificación
del método
Validación de métodos
Acreditación de laboratorios
¿Qué es la verificación de un método?
La verificación de un método es el proceso de asegurar que
las características de desempeño de un método,
establecidas en el documento de referencia, pueden ser
alcanzadas por el laboratorio.
Las características que suelen ser verificadas son la
precisión y la veracidad del método y, en algunos casos
particulares, el límite de detección.
Validación de métodos
Características de desempeño de un método
Selectividad (Especificidad)
Rango de trabajo instrumental (Linealidad)
Límite de Detección
Límite de Cuantificación
Precisión
Veracidad (Exactitud)
Robustez
Rango de trabajo del método
Incertidumbre de medición
Validación de métodos
¿Qué características evaluar según el método?
Característica de desempeño Métodos
cualitativos
Análisis de trazas
o ultra-trazas
Componentes
mayoritarios
Métodos
Físico-Químicos
Selectividad -
Rango de trabajo instrumental - ? ?
LD - -
LQ - - -
Precisión -
Veracidad -
Robustez
Rango de trabajo del método -
Incertidumbre de medición -
Parámetro, asociado con el resultado de una medición,
que caracteriza la dispersión de los valores que podrían
ser razonablemente atribuidos al mesurando
JCGM 100:2008
Evaluación de la incertidumbre de medición
Definición
Evaluación de la incertidumbre de medición
Es un indicador de la “calidad” de una medición.
Pero esto no significa que una medición con una menor
incertidumbre vaya a tener una valor del mesurando con
mayor exactitud:
•
•
valor
verdadero
lab. 1
lab. 2
Evaluación de la incertidumbre de medición
Evaluación del “fitness for purpose” de un método de ensayo
en una validación
Comparación de resultados entre laboratorios
Comparación de resultados contra especificaciones
o límites regulatorios
¿Por qué es importante evaluar la incertidumbre?
Evaluación de la incertidumbre de medición
5.4.6.2 Los laboratorios de ensayo deben tener y
deben aplicar procedimientos para estimar la
incertidumbre de la medición.
ISO/IEC 17025:2005
Requerimiento normativo
Evaluación de la incertidumbre de medición
¿Cuándo se debe informar la incertidumbre?
ISO/IEC 17025:2005 párrafo 5.10.3.1 c)
cuando lo solicite el cliente
cuando la incertidumbre afecte el cumplimiento
con los límites de una especificación
cuando sea pertinente para la validez o aplicación de los
resultados de los ensayos
Requerimiento normativo
Evaluación de la incertidumbre de medición
ERROR INCERTIDUMBRE
Se estima como desviación
estándar Se estima como valor medio
parámetro que caracteriza un
intervalo de valores
Diferencia entre un valor
individual y uno de referencia
Se calcula como un valor
positivo Puede ser un valor >, < ó = 0
No se puede corregir Se puede corregir
Se combinan cuadráticamente Se combinan linealmente
Error vs. incertidumbre
Evaluación de la incertidumbre de medición
Error vs. incertidumbre
valor verdadero
valor medio
determinado
x incertidumbre
• • error
Evaluación de la incertidumbre de medición
Principales fuentes de incertidumbre en el análisis químico
Definición incompleta del mesurando
Muestreo
Pureza de los reactivos
Calibración del instrumental
Efectos de matriz e interferencias
Extracción incompleta
Efecto de las condiciones ambientales
Error de apreciación en la lectura de instrumentos analógicos
Error de apreciación en la lectura de un menisco
Resolución de instrumentos
Materiales de referencia
Control de calidad de los resultados
Un aspecto importante del sistema de gestión de la calidad de
un laboratorio es la planificación y ejecución de actividades de
control de calidad con el objetivo de asegurar que los
resultados producidos por el laboratorio son de la calidad
requerida y aptos para el propósito. Estas actividades se
dividen en Control de Calidad Interno (CCI) y Evaluación
Externa de la Calidad (EEC).
El CCI consiste en una serie de operaciones llevadas a cabo
por el personal del laboratorio como parte del proceso de
medición.
Control de calidad de los resultados
Los resultados del CCI son utilizados para determinar si el
método de ensayo está operando correctamente y, por lo tanto,
si los resultados obtenidos a partir de las muestras de ensayo
pueden ser enviados al cliente.
LA EEC, en cambio, es llevada a cabo por una organización
independiente del laboratorio y es usada para evaluar el
desempeño del mismo.
Mientras que el CCI se realiza diariamente para aceptar o
rechazar resultados de ensayo individuales, la EEC provee una
“foto” periódica del desempeño del laboratorio.
Control de calidad de los resultados
Párrafo 5.9.1:
“El laboratorio debe tener procedimientos de control de la
calidad para realizar el seguimiento de la validez de los
ensayos llevados a cabo. Los datos resultantes deben ser
registrados en forma tal que se puedan detectar las tendencias
y, cuando sea posible, se deben aplicar técnicas estadísticas
para la revisión de los resultados”.
Requisitos normativos
ISO/IEC 17025:2005
Control de calidad de los resultados
Párrafo 5.9.2:
“Los datos de control de la calidad deben ser analizados y, si
no satisfacen los criterios predefinidos, se deben tomar las
acciones planificadas para corregir el problema y evitar
consignar resultados incorrectos”.
Requisitos normativos
ISO/IEC 17025:2005
Control de calidad de los resultados
Actividades de Control de Calidad Interno
Entre las actividades más importantes del Control de Calidad
Interno se encuentran:
Análisis de blancos: blancos de reactivos (“reagent blanks”) o
muestras blanco (“blank samples”)
Análisis repetido de muestras de ensayo
Análisis de muestras de control
Control de calidad de los resultados
Tipos de muestras de control
Materiales de Referencia Certificados (MRC)
Materiales formulados
Muestras reales
Muestras reales fortificadas
Materiales de interlaboratorios
Control de calidad de los resultados
Uso de gráficos de control
Gráficos de Shewhart
Gráficos de resultados individuales (X-chart)
Gráficos de medias (X-bar chart)
Gráficos de Rangos (R-chart)
Control de calidad de los resultados
GRÁFICO DE RESULTADOS INDIVIDUALES
87
92
97
102
107
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
Nº de muestra
Uso de gráficos de control
Control de calidad de los resultados
GRÁFICO DE RANGOS
0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25
Nº de muestra
Uso de gráficos de control
Control de calidad de los resultados
Evaluación Externa de la Calidad
La Evaluación Externa de la Calidad (EEC) se lleva a cabo a
través de la participación en Ensayos de Aptitud (“Proficiency
Testing”), los cuales tienen como objetivo proveer a un
laboratorio un monitoreo continuo e independiente de su
desempeño.
La Organización que lleva a cabo un Ensayo de Aptitud debe
proveer un valor de referencia (valor asignado) y un parámetro
estadístico que represente la variabilidad de los resultados
(desviación estándar). A partir de estos datos se determina un
valor de desempeño (por ejemplo, z-score) a través del cual se
evalúa a los laboratorios participantes.
Documentos de Referencia
The Fitness for Purpose of Analytical Methods – A Laboratory Guide to
Method Validation and Related Topics - EURACHEM 2nd
Edition (2014)
Harmonized Guidelines for Single-Laboratory Validation of Methods of
Analysis – IUPAC (2002)
JCGM 100:2008 – Evaluation of Measurement Data – Guide to the
expression of uncertainty in measurement - BIPM
Quantifying Uncertainty in Analytical Measurement - EURACHEM 3rd
Edition (2012)
Internal Quality Control - Handbook for Chemical Laboratories - Report
TR 569 – NORDTEST 4th Edition (2011)
ISO/IEC 17025:2005 General requirements for the competence of
testing and calibration laboratories
Colectora de Av. Gral. Paz 5445
San Martín, Buenos Aires
Argentina
(54 11) 4724-6289
¡Muchas Gracias!
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error aleatorio
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or
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tem
ático
requisito 1
requisito 2
precisión
vera
cid
ad
Exactitud = veracidad + precisión
