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8/17/2019 Trabajo Semana 8 Lab Micro
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IMPORTANCIA
Las pruebas bioquímicas nos indican una serie de características metabólicas
que, en conjunto, nos permitirán diferenciar unas bacterias de otras). Existe un
gran número de estas pruebas, por lo que en un problema concreto nos
decantaremos por la realización de una u otra prueba bioquímica basándonos en
! "rigen de la cepa de dónde la #emos aislado. ! $ondiciones bajo las que #a
sido aislada. ! %orfología. ! &inción, especialmente la de 'ram. ! (osibilidad de
formación de esporos. ! (osibilidad de formación de cápsula. egún los
resultados obtenidos de la obser*ación de estos parámetros, una *ez consultada
la bibliografía sobre taxonomía bacteriana, el amplio espectro bacteriano, *a a
quedar restringido a unos pocos g+neros, por lo que el siguiente paso será
realizar las pruebas bioquímicas que nos auden a quedarnos con uno solo de
ellos, posteriormente llegar a la determinación de especie. Es mu importante
comprender que estas pruebas no #an sido elegidas al azar, sino siguiendo una
pauta detallada con objeto de escoger aquellas que nos *an a lle*ar a la
identi-cación de especie lo más rápidamente posible. on muc#as las pruebas
bioquímicas descritas, es e*idente que en cada caso intentaremos realizar las
menos posibles, siempre cuando +stas nos lle*en a una completa segura
identi-cación. En la realización de pruebas bioquímicas #a que tener en cuenta
que no todos los miembros de una determinada especie bacteriana reaccionarán
de la misma manera e producen *ariaciones, esto #abrá que recordarlo
cuando se interpreten los cuadros para identi-cación de bacterias. l comparar
los resultados obtenidos con un grupo tabulado de resultados patrón, se debe
utilizar el criterio de /aproximación máxima/ si un microorganismo se des*ía de
lo normal en uno o dos resultados de una batería de pruebas según la tabla
patrón, ello no supone que necesariamente #aa que descartarlo de esa especie.
Herbert Calderón Pérez
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OBJETIVOS
• $onocer los procedimientos de identi-cación bioquímica de las principales
bacterias gram negati*as.
• 0nterpretar los resultados de las pruebas bioquímicas correlacionarlas con
las diferentes especies de bacterias gram negati*as.
DISCUSIÓN – MARCO TEORICO
Medios diferenciales
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on empleados para detectar reacciones bioquímicas, con carácter diferencial de
grupos, g+neros o especies microbianas, mediante el *iraje de color del indicador
presente en el medio, demostrando algunas de sus características.
Estos medios son el &0, $itrato de immons, 0% $aldo úrea.TSI (Trile S!"ar Iron#
CARACTER$STICAS%COLOR% 1ojo ladrillo.
INHIBIDORES% 2o tiene.
INDICADOR% 1ojo fenol.
SUSTRATOS PRINCIPALES Lactosa, sacarosa glucosa.
SUSTRATOS SECUNDARIOS &iosulfato sodico, peptona, citrato f+rrico
amoniacal extractos.
Siembra (unción profunda con asa luego estrías en la parte de arriba.
En este medio se busca determinar la capacidad de la bacteria para degradar los
azucares, formación de gas sulfuros de #idrógeno.
La fermentación aerobica se produce en la parte de arriba del tubo la
anaerobica en el fondo del tubo. La presencia de gas se debe al $"3 producto de
la fermentación.
La degradación de la lactosa ocurre en la parte superior, la de la sacarosa en la
parte intermedia de la glucosa en la parte profunda produci+ndose un *iraje de
rojo a amarillo.
El tiosulfato es reducido a sulfuro de #idrógenos quien reacciona con el citrato
f+rrico amoniacal para dar formación a sulfuro de #ierro que es de color negro.
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MEDIO SIM (S!lf!ro&Indol&Mo'ilidad#
CARACTER$STICAS%
COOR $rema.
INDICADOR 2o tiene.
IN)IBIDOR 2o tiene.SUSTRATO PRINCIPA (eptona.
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SUSTRATO SECUNDARIO &iosulfato sódico, #ierro amonio.
Este medio se utiliza para comprobar la motilidad, formación de sulfuros de
#idrógeno la producción de indol por parte de la bacteria.
iembra por punción.
A* Mo'ilidad
B* )idr+"eno s!lf!rado
Estudia el metabolismo de la cisteina que posee dos mol+culas de azufre 4) que
serán liberados como 53 por acción de la cisteinasa con la presencia de sales
ferrosas formaran 36e que le dará un precipitado de color negro.
C* INDO
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e usa el reacti*o de 7obacs, que mani-esta la degradacion del triptofano por la
enzima triptofanasa en indol, que se combina con el alde#ído4dimetil
benzalde#ído) presente en el reacti*o de 7obacs, para producir un color rojo.
CITRATO DE SIMMONS
CARACTER$STICAS
COOR 8erde.
IN)IBIDORES 2o tiene.
INDICADOR zul de bromocresol.
SUSTRATO PRINCIPA $itrato de sodio.
SUSTRATO SECUNDARIOS 6osfato dipotasico, cloruro de sodio, sulfato de
magnesio fosfato monoamonico.
Sie,-ra (or estrías.
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Este medio nos permite comprobar la capacidad de la bacteria de utilizar el
citrato como unica fuente carbono.
La degradacion del citrato conlle*a a la alcalinizacion del medio el *iraje delindicador de *erde a azul prusia.
$on este medio podemos diferenciar entre las coliformes fecales citrobacter
como algunas especies de almonella.
A* Ci'ra'o osi'i.o
B* Ci'ra'o ne"a'i.o
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CONCUSION
• e logró determinar la presencia de determinados microrganismos capacesde fermentar azucares o no por medio de &0 o L0.
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• partir de otras pruebas bioquímicas 40%) se pudo determinar que la
muestra incógnita podría ser indol positi*o o negati*o, capaz de producir
ácido sulf#ídrico, si tenía motilidad.•
&odas estas pruebas bioquímicas, audan en la aserti*idad de diagnóstico,determinando la identidad del agente patógeno, a tra*+s de sus
propiedades bioquímicas, facilitarnos dar un tratamiento efecto contra
este mismo.
ANE/OS – METODO AUTOMATICO
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BIBIO0RA1IA – IN2O0RA1IA
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http://www.danival.org/microclin/antibiot/_madre_antibiot.htmlhttp://www.danival.org/microclin/antibiot/_madre_antibiot.html
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#am >?@?33A> $linical Laborator tandards 0nstitute 4$L0). (erformance
standards for antimicrobial susceptibilit testing@ eig#teent#
informational supplement. $L0 document %=BBC=>. Dane, (
$L0@ 3BB>. European $ommittee on ntimicrobial usceptibilit &esting
4E$&) Expert rules in antimicrobial susceptibilit testing, 3BBF.