UNIVERSIDAD NACIONAL DEL LITORALFACULTAD DE Cs. VETERINARIASCÁTEDRA DE FISIOLOGÍA- AÑO 2009TRABAJO COMPLEMENTARIO N° 3

TEMA: HEMATOLOGIA. RECUENTOS GLOBULARES. F.L.R Y F.L.A.

Remisión de la muestraEl recuento de células requiere usar sangre anticoaguladaEl anticoagulante que preserva mejor el detalle celular es a EDTAEl tubo de recolección debe llenarse correctamente y en su justa medida ya que un exceso de sangre puede conducir a la coagulación de la misma y un llenado incompleto determina una concentración excesiva de EDTA que produce contracción de GR y reduce hematocrito. Además puede conducir a recuentos celulares más bajos debido al efecto de dilución que produce en la sangre.Si la sangre con EDTA no se analiza en el término de 2 a 3 hs debe ser refrigerada a 4° y puede ser conservada de esa manera hasta 24 hs.Los frotis de sangre deben prepararse de manera inmediata y secar al aire para evitar los artefactos causados por la exposición de las células a los anticoagulantes y su deterioro durante al almacenamiento y transporte.

ERITROGRAMAMicrohematocritoEl método de microhematocrito se utiliza para estimar la masa eritroide. El hematocrito se determina centrifugando la sangre anticoagulada en un tubo de microcapilar para separar las células del plasma. Los tubos se llena hasta las dos terceras a tres cuartas partes de su volumen total, después de la centrifugación los GR se aglomeran en el fondo y los GB y las plaquetas aparece como una delgada línea blanca (placa flogística) entre los GR y el plasma. Los tubos se llenan se sellan y se deben ser centrifugados durante 5 minutos a 12.000 RPM en centrifuga de plato. Luego se realiza la lectura sobre la tabla de KANEKO haciendo coincidir el extremo superior del plasma con la línea del 100 y el extremo inferior de la columna de rojos con el 0 tomando como valor el punto de separación entre los GR y el plasma. El valor obtenido se expresa en %.

RECUENTOS CELULARES TOTALES

RECUENTO DE HEMATÍES:Se puede realizar mediante contadores automáticos o manualmente utilizando un instrumento calibrado, la cámara de Neubauer.Si no se posee contadores automáticos el cálculo se realiza aplicando la siguiente fórmula.

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GR = HTO * 10 7 VCM

El valor obtenido se expresa en mm3 (VCM= propio de cada especie, ver tabla)

DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINAEl pigmento hemoglobina, responsable del color rojo de la sangre, es el encargado del transporte del oxígeno de los pulmones a los tejidos y el CO2 de éstos a los plumones, por medio de la circulación sanguínea. Existen dos procedimientos para la determinación de la hemoglobina que se emplean comúnmente con fines clínico, tanto directos como indirectos, ambos son colorimétrico. En el directo el color de la sangre total se compara con un color patrón. En el indirecto, la hemoglobina es convertida primero en hematina ácida y entonces comparada con un patrón.

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TÉCNICAS DE CUANTIFICACIÓN

RECUENTO MANUAL DE GR

MATERIALES:

1 - Pipeta para glóbulos rojos: (perla de vidrio roja) el volumen de la ampolla es 100 veces mayor que el volumen del capilar. El volumen total indicado por la marca superior es 100+1=101. La dilución que se obtiene con la pipeta de glóbulos rojos es de 1:200 cuando la sangre es cargada hasta la marca 0,5 y de 1:100 cuando la sangre llega hasta la marca 1.

2- Diluyentes

A- Para glóbulos rojos: * solución salina al 0,85% * liquido de Hayem. * solución de Gower.

3- Cámara de Neubauer: es una placa de cristal con una depresión centra de 0,1mm de profundidad limitada por dos surcos perpendiculares al eje mayor de la misma y dividida en dos plataformas por un tercer surco central. Sobre la superficie de cada plataforma encontramos un área rayada: retículo, sobre el cual se encontrarán las células.Las dos barras laterales sirven de apoyo a cubre cámara, que al ser colocado limita una cámara de 0,1 mm de altura. El retículo es una zona cuadriculada de 3 mm de lado ( 9 mm3 ) dividida en 9 cuadrados de 1 mm de lado denominados cuadrados primarios.El cuadrado primario central es el que se utiliza para el recuento de GR. Esta técnica ha quedando en desuso debido al alto margen de error. En la actualidad se utiliza la formula citada anteriormente.

LEUCOGRAMA

El leucograma representa el equilibrio vigente entre la producción medular, las demandas histicas y la distribución de los glóbulos blancos en el sistema vascular. Cada tipo de leucocito debe ser analizado en forma individual mediante sus valores absolutos. Los mismo derivan de la multiplicación del porcentaje de cada tipo celular por el recuento leucocitario total.

RECUENTO TOTAL DE GLÓBULOS BLANCOS

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Materiales

B- Pipeta para glóbulos blancos: (perla de vidrio blanca). El volumen de la ampolla es 10 veces mayor que el volumen del capilar. El volumen total indicado es 10+1= 11. La dilución que se obtiene con la pipeta de glóbulos blancos es de 1:20 cuando la sangre es cargada hasta la marca 0,5 y de 1:10 cuando la sangre llega hasta la marca 1.

B- Para glóbulos blancos: * CLH al 1% * ácido acético al 2-3%

3- Cámara cuenta glóbulos

El retículo posee una zona cuadriculada de 3 mm de lado; 9 mm2, dividida en nueve cuadrados de 1mm de lado; 1mm2 cada una, denominados cuadrados primarios.Los cuadrados primarios de las esquinas: I, II, IV, V utilizados en el recuento de glóbulos blancos, están divididos a su vez en 16 cuadrados secundarios. (Ver dibujos adjuntos).El cuadrado primario central: a, b, c, d, tiene un milímetro de lado y es usado para el recuento de glóbulos rojos. Cada lado del cuadrado esta dividido en 20

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partes iguales por medio de líneas que al entrecruzarse determinan la formación de 400 cuadrados de 1/20mm de lado y una superficie de 1/400 mm2. Para orientarse mejor, este cuadrado central ha sido subdividido en 16 cuadrados secundarios separados entre si por triples líneas, cada uno de los cuales contiene 16 cuadrados terciarios de 1/400 mm2 cada uno.

Reticulado de la cámara de Neubauer.

I 3mm II

1 2 3 4

5 6 7 8

9 10 11 12

13 14 15 16a b

d c

IV 1mm V 0,25mm

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RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS

Técnica

1-

Ensamblaje del equipo: aplicar la boquilla a la pipeta de dilución.

2- Homogeneización de la muestra de sangre con anticoagulante

a) Rotación del tubo sobre su eje longitudinal.

b) Inversión.

Ambas maniobras deben ser realizadas con suavidad, durante 2' como mínimo (20 veces). Deben evitarse los movimientos bruscos y la formación de espuma.

3- Llenado de la pipeta:

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a) Sostenga el frasco con sangre y anticoagulante en la mano izquierda e inclínelo hasta que su contenido alcance el borde del mismo.

b) Tome la pipeta de glóbulos blancos, en la mono derecha, insertando su pico en la superficie de la sangre y succionando con cuidado por la boquilla.

La boquilla debe ajustarse entre los dientes incisivos. Se aspira suavemente hasta que la sangre alcance la marca 0,5 y se obtura el orificio de la boquilla con la lengua.

b) Se retira la pipeta del tubo y se limpia la parte externa de la misma con un algodón humedecido, gasa o papel absorbente.

4- Aspirar el liquido diluyente correspondiente, girando al mismo tiempo la pipeta con suavidad hasta que la mezcla llegue a la marca 11. Se obtiene la dilución 1:20 para glóbulos blancos. 5- Mezclar, girando suavemente la pipeta manteniéndola horizontal. La mezcla debe ser homogénea.

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6- Dejar caer una o dos gotas que se desechan, porque corresponde al liquido de dilución que ha quedado en el capilar.

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7- Cargar

la cámara: Se requiere que tanto la cámara como el cubreobjetos estén perfectamente limpios y libres de grasa. Colocar el cubreobjetos sobre la zona en que se halla grabado el retículo., de tal forma que en toda su dimensión sea paralela a la cámara (manipular el cubreobjetos por sus bordes con el fin de evitar mancharlos). Mantener la cámara horizontal y bien apoyada. Colocar la punta de la pipeta en la hendidura que separa el borde del cubreobjetos con la cámara, dejando que el líquido llene por capilaridad la totalidad de la misma. No debe permitirse que el líquido fluya por las juntas que circundan al área elevada.Llene el otro lado de la cámara en igual forma. Para obtener un control cuidadoso de la cantidad de líquido expelido por la pipeta, cierre el extremo abierto de la pipeta con el dedo. 8- Coloque la cámara sobre la platina del microscopio y dejar reposar 3 minutos para que sedimenten los glóbulos. 9- Recuento de células blancas y cálculo. Enfoque el objetivo seco débil (10x) sobre el cuadrado grande situado en la esquina superior izquierda (Cuadrado I del esquema de la cámara). Ajústese la iluminación de tal modo que las líneas divisorias se vean plenamente y los núcleos de los leucocitos aparezcan opacos.Cuéntense los leucocitos que se encuentren en el primer cuadrado pequeño y a continuación en el segundo, progresando de izquierda a derecha por la hilera

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superior. En la segunda hilera proceder de derecha a izquierda. Continuar de la misma forma hasta cubrir la totalidad del área. Solo deben contarse aquellas células que estén en contacto con cualquier parte de las líneas divisorias superior e izquierda. Prescindir de las que toquen las líneas inferior y derecha. Estas serán contadas en la hilera próxima.Cuéntense los leucocitos existentes en los tres cuadrados restantes por el mismo procedimiento (B, C y D).Anótese el total de cada cuadrado grande en una hoja de papel.

Ejemplo: 120 + 124 + 122 + 118= 484 x50= 24200 leucocitos por milímetro cúbico. Explicación: cada cuadrado grande de la esquina tiene un área de 1 milímetro cuadrado y su profundidad es de 0,1 mm. Por lo tanto habremos contado 4/10 de milímetro cúbico, puesto que la dilución en la pipeta de glóbulos blancos es de 1/20 tendremos 10/40 x 20/1= 50.

FORMULA LEUCOCITARIA RELATIVA - F.L.R. Una vez obtenido el frotis, procedemos a colorearlo, esto permite la identificación de los distintos tipos celulares sanguíneos. COLORACION: MAY GRUNWALD-GIEMSA 1- Realizar un frotis 2- Fijarlo al aire 3- Colocar 5 gotas de MAY GRUNWAL, dejar 3' 4- Colocar 5 gotas de agua destilada sin volcar el colorante, dejar 3' 5- Volcar sobre un recipiente sin lavar 6- Cubrir con 5 gotas de GIEMSA, dejar 15' 7- Lavar con agua destilada 8- Secar al aire y observar al microscopio en 100 X EXAMEN MICROSCOPICO DEL FROTIS Realizar el examen sobre las características morfológicas y tintoriales de las células sanguíneas como así también su distribución porcentual y la presencia de estructuras o formas anormales de las mismas.Se observa con objetivo de poco aumento para ver la distribución de las células y seleccionar la porción del frotis que este cerca de la zona más delgada. Con el objetivo SECO de 10 X se verifica: * Grado de variación del tamaño, forma y color de las células.* Existencia de un número alto o bajo de LEUCOCITOS.* Presencia y distribución relativa de las plaquetas.

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Con el objetivo de INMERSION (100X) y aceite de cedro se realiza el recuento leucocitario diferencial, contando y clasificando los mismos y examinando en detalle su morfología.Para realizar el recuento de los diferentes tipos de glóbulos blancos, utilizamos la técnica de guarda griega, que es la que da los valores mas reales.Los NEUTROFILOS por su peso migran al borde del frotis, los EOSINOFILOS y MONOCITOS se distribuyen por todo el campo y los LINFOCITOS en la parte central. Se deben contar 200 células de las cuales el valor que obtengamos de cada uno de los distintos glóbulos blancos (G.B.) se expresa en % del total. FORMULA LEUCOCITARIA ABSOLUTA - F.L.A. Es el número total de cada uno de los G.B. x mm3. Teniendo en cuenta el valor en % de cada uno de los G.B. de la F.L.R. y el recuento total de G.B. en cámara, se determina el número de cada uno de los distintos G.B. x mm3. Ejemplo: Un canino tiene un recuento total de G.B. de 11.000 x mm3 y una F.L.R. con: N 65% B 0% E 2% L 30% M 3% Teniendo en cuenta que el recuento de G.B. es de 100 o 200 células, se calcula a través del de cada uno, el valor x mm3. 100% G.B.----------- 11.000/mm3 65% x 11.000/mm3

N= 65% ----------- X = 7.500/mm3 N -----> 100% De este modo se logra conocer el valor absoluto de cada uno de los distintos G.B. /mm3 y determinar si el valor obtenido es normal o esta modificado. Ej.Bovino. Normal 7.700/mm3 TIPO DE CELULA F.L.A F.L.RNeutrófilos 2.000 26Linfocitos 4.500 58Monocitos 400 5Eosinófilos 750 10Basófilos 50 0.6Total 7.710

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CASO A 10.000/ mm3 TIPO DE CELULA F.L.A F.L.RNeutrófilos 5.530 53Linfocitos 2.500 25Monocitos 900 9Eosinófilos 1.200 12Basófilos 100 1Total 10.000

CASO B 20.000/ mm3

TIPO DE CELULA F.L.A F.L.RNeutrófilos 10.600 53Linfocitos 5.000 25Monocitos 1.800 9Eosinófilos 2.400 12Basófilos 200 1Total 20.000

ALGUNOS VALORES EN DIFERENTES ESPECIES

Especie VCM u3 hematocrito % glóbulos rojos 106/mm3 hemoglobina g

%Bovino 50 30 - 35 5.300.000 - 7.900.000 9,7 -13,7

Canino 70 37 - 55 5.500.000 - 8.500.000 12- 18Equino linfático 44 22 - 44 5.500.000 - 9.500.000 8- 14

Equino PSC 42 32 - 55 7.000.000 - 13.000.000 10 - 18

Felino 45 24 - 45 8.500.000 - 10.000.000 8-14

Ovino 32 24 - 55 5.000.000 - 10.000.000 8- 16

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Porcino 63 32 - 50 5.000.000 - 8.000.000 10-16

RECUNTO TOTAL DE BLANCOS

ESPECIE LEUCOCITOS mm3

CANINO 8 - 16.000

FELINO 10.000

EQUINO 11.500

BOVINO 12.500

OVINO 8.500

CAPRINO 11.000

PORCINO 18.000 FORMULA LEUCOCITARIA RELATIVA (%)

ESPECIE Neutrófilos Eosinófilos Basófilos Linfocitos MonocitosEQUINO 55 2 - 5 1 35 5 - 6BOVINO 24 10 0.05 60 6CANINO 69 2 - 5 raros 23 5FELINO 55 3 - 6 raros 32 3OVINO 27 2 - 5 1 63 5PORCINO 33 2 - 5 1 57 5GALLINA 27 3 - 8 2 57 10CONEJO 40 0.5 - 5 5 55 9

FORMULA LEUCOCITARIA ABSOLUTA (No/mm3)

ESPECIE Neutrófilos Eosinófilos Basófilos Linfocitos MonocitosEQUINO 4.900 400 50 4.400 200BOVINO 2.240 720 40 4.640 320CANINO 7.000 550 0 2.800 750FELINO 7.500 650 0 4.000 350OVINO 2.700 400 45 5.580 225CAPRINO 4.380 600 60 6.600 300

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PORCINO 5.920 560 80 8.480 800

CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS DE LOS LEUCOCITOS EN LAS DISTINTAS ESPECIES NEUTROFILO SEGMENTADO

CANINOEl núcleo del neutrófilo canino es irregularmente lobulado. Ocasionalmente pueden observarse filamentos que unen los lóbulos, aunque lo común es la existencia de simples estrangulamientos. La cromatina se ubica en forma de grupo o placa. La membrana nuclear es irregular.El citoplasma es de color gris rosado pálido, aunque muy poco notorio, con pequeñas granulaciones difusas.Los neutrófilos de las hembras suelen presentar una estructura denominada cromatina sexual o Corpúsculo de Barr, en forma de palillo de tambor y es un cuerpo perfectamente definido, sólido, de cabeza redondeada de aproximadamente 1,5 un unido a los lóbulos nucleares por una fina hebra de cromatina. FELINOEl núcleo llena la célula y tiene aspecto de espiral retorcido, con estrechamiento de la membrana nuclear que le da aspecto lobular o con verdaderos filamentos que unen los lóbulos. La cromatina se distribuye en placas. El citoplasma grisáceo con granulaciones difusas ( no muy notorias).En algunos neutrófilos de las hembras puede notarse el lóbulo sexual en forma de palillo de tambor.

BOVINOEl tamaño de la célula varia entre unos 10 a 15 µm. El núcleo generalmente es un simple lóbulo unido a la porción principal del núcleo por un verdadero

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filamento. La membrana nuclear es lisa e irregular con verdaderas indentaciones ( una o dos ), sin formación de filamento, por lo que los núcleos son de forma muy distorsionada. El citoplasma es claro, con pequeñas granulaciones pulverulentas rosadas, bien notables, que bajo ciertas condiciones de coloración pueden aparecer rojas. EQUINOEl núcleo tiene aspecto multilobulado con la cromatina cargada de placas, lo cual hace que la membrana nuclear aparezca dentada. Los filamentos pueden existir pero son raros. En algunos neutrófilos aparece la cromatina sexual femenina. En el citoplasma se observan gránulos pulverulentos de color rosado. CERDOEl núcleo por lo general es muy espiralado y de contorno irregular. No suele presentar filamentos. La cromatina nuclear esta en forma de placa e intensamente teñida. El citoplasma es celeste pálido con granulaciones pulverulentas de color rosadas. Según la intensidad con que se colorean los gránulos, el citoplasma se ve celeste o rosado. NEUTROFILO EN BANDA

CANINOSe presenta en escaso número en la sangre periférica del animal sano. El núcleo adquiere forma curvada con la membrana nuclear lisa con bordes paralelos. La cromatina es menos aglutinada que en la célula madura y de coloración más suave. El citoplasma es semejante al de la célula madura. FELINOEn los animales sanos se presenta en número escaso. La célula es semejante al neutrófilo maduro pero su núcleo se presenta en forma de U y se delinea más suavemente.

BOVINONo suele presentarse en la sangre periférica de los bovinos. El límite normal de neutrófilos en banda en la sangre periférica de los bovinos es de 1 a 2 % pero

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con frecuencia faltan por completo. El núcleo es más grueso que el del neutrófilo maduro. La membrana nuclear es lisa, sin constricciones. El citoplasma es semejante al del neutrófilo maduro, aunque suele tener menor cantidad de gránulos. EQUINOEl núcleo es más grueso y menos nudoso que el maduro y no es espiralado. El citoplasma es igual al de la célula madura. CERDOSPueden aparecer en un 1 a 2 %. El núcleo tiene forma de U o S. La membrana nuclear es lisa. Por lo demás es semejante al neutrófilo maduro. EOSINOFILOS

CANINOSLa granulación de los eosinófilos es variable. Pueden ser gránulos pequeños y regulares o ser pocos y grandes. A veces aparecen 2 o 3 de gran tamaño ( 3 - 4 µm. ).Son de poca afinidad por la eosina por lo que se tiñen de rosado pálido (semejante al color del glóbulo rojo). El núcleo puede estar parcialmente oculto pero en general se observa en su totalidad. Pueden verse vacuolas dando la impresión de ser gránulos eliminados o lisados. El citoplasma es de color celeste. FELINOSLos gránulos son en forma de bastón, numerosos y sin refracción. El citoplasma es escaso porque está cubierto caso totalmente por los gránulos; su color es celeste. BOVINOSEl tamaño promedio es de 12 a 13 µm. Se identifica fácilmente por sus gránulos uniformemente pequeños, redondos, refráctiles, con aspecto de rubíes, son de una coloración fuerte (rosados o rojos) por su afinidad a la eosina. El

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citoplasma es celeste y el núcleo es bilobulado aunque es mas frecuente el núcleo en banda.

EQUINOSEl eosinófilo caracteriza la sangre del equino. Los gránulos son grandes, largos, ovoides y generalmente llenan el citoplasma celular de tal modo que del contorno celular se acomoda a ellos dándole a la célula el aspecto de una frambuesa. Son de color rojo -anaranjado brillante y a veces son tan numerosos que ocultan el núcleo. El citoplasma es celeste.

CERDOSLos gránulos son redondos u ovoides, pequeños, anaranjado oscuros y llenan el citoplasma celular con algunos gránulos que enciman el núcleo. El contorno celular puede ser irregular por la gran concentración de gránulos. El núcleo tiende a ser oval, arriñonado o en banda.

BASOFILOS

CANINOLos gránulos del basófilo canino varían en intensidad de color, número y tamaño y pueden encontrarse tanto sobre el núcleo como en el citoplasma. Los gránulos son oscuros. El citoplasma es azul grisáceo. Es una célula rara de encontrar en la sangre canina. FELINOEs raro encontrarlo en sangre periférica. El citoplasma es gris claro, repleto de gránulos pequeños, redondos y de coloración rosada.

BOVINO El tamaño de esta célula varia entre 11 y 14 µm. Se presenta como una estructura densa, muy tenida debido a que su núcleo es compacto, cubierto por gránulos azul negruzcos. EQUINO

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Los gránulos son de color púrpura, irregular en tamaño y forma. Pueden estar situados irregularmente en el citoplasma o conglomerados en algún sector. CERDOEl núcleo es de color azul violáceo; la cromatina pareja. Los gránulos tienen igual color que el núcleo o mas oscuros, son de forma cocoide o de clava y se presentan en el citoplasma y algunos sobre el núcleo. LINFOCITOS

CANINOEl que se encuentra más frecuentemente en sangre periférica es el linfocito pequeño. El núcleo es redondo, excéntrico y la cromatina esta apretada por lo que se tiñe fuertemente. El citoplasma es celeste y más claro en las cercanías del núcleo. Puede presentar en el citoplasma gránulos azurófilos color azul oscuro o rojizo.

FELINOEs frecuente el pequeño linfocito. El núcleo generalmente es redondo pero puede presentar una indentación, lo que le da aspecto reniforme. Se localiza en forma excéntrica. La cromatina se encuentra en forma uniformemente dispersa, sin mucha condensación. El citoplasma es de pequeño tamaño, hacia un costado el núcleo, de color azul y puede presentar un halo de condensación perinuclear. Los gránulos azurófilos son poco frecuentes pero cuando se ven son pequeños, irregulares, ubicados en el borde del citoplasma o agrupados en la indentación nuclear. BOVINOEl linfocito es el leucocito mas frecuente en la sangre de los bovinos. Su tamaño varía entre 8 y 15 µm. (milimicras).Las formas de mayor tamaño se llaman " tradicionales " pues pueden confundirse con monocitos. Cuando existen dudas en la clasificación de una célula como estas, deberá optarse por reconocerla como linfocito: pequeño, mediano, y grande. Linfocito pequeño: El núcleo es redondo, densamente tenido y llena la célula, por lo que no se observa prácticamente el citoplasma. Linfocito mediano: El núcleo se tiñe algo menos, es redondo o con una leve indentación de la membrana nuclear. La cromatina se

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distribuye en forma de pequeñas burbujas redondeadas oscura, separada por paracromatina de tinción más suave. El citoplasma es un angosto anillo ubicado al lado de la célula, pero puede rodear por completo al núcleo; es azul pálido y suele oscurecerse hacia el borde celular. Linfocito grande: Tanto el núcleo como el citoplasma se colorean con mucho menos intensidad. La cromatina se distribuye en forma muy pareja aunque puede haber algunas condensaciones oscuras. El núcleo es redondo y excéntrico. Algunos núcleos se presentan en forma de riñón y otros divididos en lóbulos (células tipo Reider ) que aparece con mayor frecuencia en las leucemias tipo linfocítica. El citoplasma es azul pálido, generalmente rodea por completo el núcleo. Se observan con frecuencia gránulos azurófilos que varían en tamaño, forma y cantidad, algunos en forma de bastones o redondeados, grandes o pequeños, tenidos de color rojizo o azul oscuro. Se distribuyen en forma de acúmulos. La presencia de los gránulos azurófilos en los linfocitos grandes identifica el origen linfocítico de la célula. EQUINOLa mayoría de los linfocitos son pequeños aunque también hay linfocitos grandes. El núcleo es intensamente tenido y redondo. El citoplasma escaso y azul pálido. Cuando hay gránulos azurófilos son escasos, pequeños, de forma irregular y dispersos desuniformemente. CERDOLinfocito pequeño: El núcleo es redondo y oval y llena la célula. Del citoplasma se ve solo una pequeña porción como un cuarto creciente de luna o simplemente un anillo que rodea todo el núcleo. Linfocito grande: El núcleo es mas claro y presenta algunas placas de cromatina. A veces hay estructuras anulares que son remanentes nucleolares. Pueden encontrarse gránulos azurófilos en los linfocitos medianos o pequeños, ubicados hacia el margen de la célula. MONOCITO

CANINO

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Es generalmente el leucocito maduro de mayor tamaño. El núcleo es variable, puede adoptar cualquier forma. Puede tener la forma de un núcleo en banda aunque generalmente tiende a ser grande y abultado o ameboide con prolongaciones que asemejan pseudópodos. La cromatina es difusa y cuando se condensa no lo hace en forma uniforme. Su característica más típica es el citoplasma basófilo con aspecto de vidrio esmerilado color azul grisáceo. Puede presentar vacuolas de tamaño variable. También puede presentar una vacuola intranuclear. A veces se encuentran presentes numerosos gránulos azurófilos pequeños que toman coloración rosada.

FELINOSEl núcleo es redondo o irregular. La cromatina es tenue, con algunos puntos de condensación. El citoplasma es azul y levemente granular. Pueden presentarse vacuolas y generalmente no se ven las granulaciones azurófilas. BOVINOSSu tamaño varía de las 13 a 19 µm. Los más pequeños son prácticamente no diferenciables de los linfocitos. La forma del núcleo varía desde redonda a convoluta, siendo esta la más común. La cromatina es difusa, de aspecto filamentosa, aunque también puede presentar gotas de cromatina oscura (como algunos linfocitos ).El citoplasma tiende a teñirse un poco menos que el del linfocito. Presenta vacuolas con mayor frecuencia. Suelen no verse los gránulos azurófilos.

EQUINOEl núcleo es generalmente de forma arriñonada, grande y ubicada hacia un lado de la célula. La cromatina es como un encaje, no siendo rara la presencia de aglutinaciones. El citoplasma es azul grisáceo y granular; pueden verse pequeñísimos gránulos azurófilos color rosados y presenta vacuolas. CERDOEl núcleo posee contorno irregular y su superficie es convoluta y plegada. La cromatina tiene aspecto de encaje. El citoplasma es bastante voluminoso, tiene color azul grisáceo y aspecto de vidrio despulido. En general, los gránulos azurófilos son abundantes.

BIBLIOGRAFIA

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Material ofrecido por la cátedra. William J. Reagan, Teresa G. Sanders, Denis B. DeNicola (Eds.), "Atlas de Especies Domésticas Comunes", Editorial Harcourt.Willard, Md; Tvedten, H. Diagnóstico clínico patológico práctico en los pequeños animales, Intermédica, 2004. Rebar, A.H. Interpretación del hemograma canino y felino. Nestlé Purina PetCare Company 2003

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