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UNNERSIDAD AUTONOMA METROPOLITANA
UNIDAD IZTAPALAPA
/ DIVISION: Ciencias Biológicas y de la Salud.
'CARRERA: Biología Experimental.
SERVICIO SOCtAL
'TITULO: ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE LA 2-
IIETILTIO-7-@-CLOROFENlL) 8-FEMOXI4,5-BENZO-3-AZA
SONEM (1,5-BDZ-CI) SOBRE EL MÚSCULO LISO UTERINO
)E LA RATA.
Fecha de entrega: 04/ 05/ 99
/Alumna: Peiáez Garcia Luz Elena
Matricula: 903365555
fÁsesor: Prof. A. Efraín Campos Sepú
/I999
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UNIVERSIDAD AUTONOMA METROPOLE'Z'ANA
ACTIVIDAD BIOLÓGICA DE LA
2-NIETILTIO-7-( p-CLOROFENIL)
8-FENOXt4,5-BENZ0-3-AZA NONEM
(1 ,o-BDZ-CI) SOBRE
EL MÚSCULO LISO UTERINO
DE LA RATA.
INDICE
Pag.
I. lNTRODUCCl6N .................................................................................... 1
,, .
....
. ,
I . .
It. OBJETIVOS ......................................................................................... 8
1 _- Objetivo generat 2.- Objetivos particulares
111. METODOLOGíA. ................................................................................. .9
1 .- Preparación del &oüs vaginal 2.- Aislamiento y montaje de la preparación
IV. RESULTADOS Y DiSCUSi6N ........................................................... 12
V. CONCLUSIÓN .................................................................................... 18
VI. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS .................................................. 19
I. INTRODUCCI~N Desde la antigüedad el hombre ha usado numerosos productos naturales para
modifcar el pensamiento, los sentimientos y la conducta; así como para provocar un
estado de sedación y promover el sueño (16). Los primeros elementos que se
introdujeron como sedantes y después como hipnóticos, tales como: hidrato de cloral,
paraldehído, uretano y sulfonal; posteriormente, a principios de este siglo surgieron los
barbitúricos (16, 36, 37).
En 1903 se introdujo el barbital y en 1912 el fenobarbital, fármaco que por sus
efectos sedante, hipnótico, anestésico y anticonvulsivo motivó la búsqueda de agentes
más selectivos para modificar las funciones del Sistema Nervioso Central (SNC).
Posteriormente se descubrió que este grupo de fármacos inducen tolerancia y
dependencia física. Por lo anterior, se hizo necesario el desarrollo de dierentes
sedantes-hipnóticos, a pesar de los ya disponibles, con el propósito de evitar algunos
de los efectos indeseables de los barbitúricos (15,22).
Un avance muy importante en el área de la neuropsicofarmacología fue el
descubrimiento de las benzodiazepinas, las cuales presentaban efectos ansiolíticos y
tranquilizantes, la primera benzodiazepina clínicamente útil se originó en los
laboratorios Roche por el grupo Stembach asignándosele el nombre genérico de
clordiazepóxido, este compuesto indujo un efecto tranquilizante en modelos
experimentales animales; en 1961 se introdujo a la práctica clínica (16,36, 37).
Desde entonces se han sintetizado mas de 3000 compuestos de estructura
benzodiazepinica y se han sometido a pruebas de actividad biológica más de 120 de
ellos, y cerca de 35 se encuentran ya disponible para su aplicación clínica en diversas
partes del mundo. La mayoría de las 1,4 benzodizepinas (1,4 BDZ) que han logrado
entrar al mercado tales como el: Triazolam, Diazepam, Flurazepam, Midazolam entre
otras, se seleccionaron por su alta potencia ansiolítica en relación con su efecto
depresor del SNC; sin embargo todas poseen propiedades sedantes hipnóticas en
grado variable, estas propiedades se aprovechan ampliamente en clínica sobre todo
para inducir el sueño (15, 16, 36,37).
1
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En relación a su estructura química, el término benzodiazepina se refiere a la
parte de la estructura compuesta por un anillo de benceno (A) fusionado a un anillo de
diazepina de siete miembros (6) y un sustituyente 5 arilo (C), (Fig 1 ) (15).
9
6
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Fig I. Estructura general de las 1,4-benzodiazepinas
2
La mayor parte de las 1,4-BD2 comparten el mismo perfil de actividad biológica,
tanto a nivel de SNC como a nivel periférico; y en la mayoría de los casos solo difieren
en sus características farmamineticas, así podemos identificar a las benzodiazepinas
de vida media corta, intermedia o larga; lo que hace preciso tomar en cuenta este
aspecto en la elección de una benzodiazepina para una determinada aplicación
clínica. Posteriormente se demostró que el Diazepam actúa en áreas del sistema
Iímbico (hipocampo, amígdala, tálamo, fornix y cuerpo estriado), zonas que se sabe
participan en la modulación de las emociones. De esta manera se explican sus
propiedades farmacológicas como son: ansiolitico, tranquilizante menor, sedante,
hipnótico, anticonvulsivante, relajante muscular y efecto amnésico (1 1,13, 16).
Más recientemente se sintetizo una nueva generación de 1, 5 benzodiazepina
cuyo prototipo esta representada por el Clobazam (Fig 2), única 1,5-benzodiazepina
(1,5-BDZ) que difiere de la estructura de las l,4-BDZ clásicas utilizadas en el
tratamiento de la ansiedad, y cuadros convulsivos . Este compuesto ha sido estudiado
ampliamente en diversos modelos experimentales como: ansiolítico, anticonvulsivante,
en modelos de estudio electroencefalográficos y en estudios psicométricos. Se ha
demostrado que el Clobazam presenta una actividad ansiolítica eficaz, sin interferir
con la función psicomotora que normalmente se produce con la administracich de las 1,rl-BDZ ansiolíticas. Con base en estos estudios, el Clobazam se util i actualmente
en algunas patologías del SNC como la ansiedad y la epilepsia. (17, 19, 23, 24).
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CH2
Fig 2. Estructura del Clobazam.
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El mecanismo de acción de las benzodiazepinas fue propuesto en 1974 por
Haefely y Costa (16), dichos autores informaron que las benzodiazepinas facilitan la
acción de una molécula clave de la comunicación química del cerebro, el ácido gamma
aminobutírico (GABA); Krnjevic y Schratz demostraron en 1967 que el GABA es un
neurotransmisor inhibidor cuyo mecanismo de acción depende se su unión a
receptores específicos de la membrana, en la superficie de las neuronas. Se han
caracterizado tres subtipos de receptores distintos llamados A, 6 y C; el receptor de
las benzodiazepinas esta situado en la membrana neuronal, inmerso en el mismo
complejo macromolecular que el receptor al GAM,, acoplado a el canal de cloro que
se abre al activar el dicho receptor. La estructura de este complejo se caracteriza por
tener dos subunidades alfa y dos subunidades beta, estando el canal de cloro rodeado
por las subunidades. El canal de cloro se abre cuando el receptor GABA, es activado
por sus agonistas, lo cual permite la entrada de iones cloro. En reposo, en ausencia de
GABA el canal esta cerrado. Cuando el GABA se fija al receptor, el complejo cambia
de conformación: el canal se abre y aumenta la permeabilidad al cloro, quedando el
estado eléctrico de la neurona modificado, se vuelve menos excitable y por
consiguiente menos sensible a estímulos de los demás neurotransmisores (2, 3, 4, 16,
17, 21, 26).
Por otra parte, recientemente en el Instituto de Química de la UNAM, se
sintetizaron una serie de rnolbculas de estructura 1,5-benzodiazepínica diferentes al
clobazam (Fig 3.) (9) y que requieren ser sometidas a estudios sistematizados para
determinar su perfil de actividad biológica y poder caracterizar algún efecto que
pudiera tener importancia para su aplicación terapéutica. En este sentido la 1,5
benzodiazepina clorada fue estudiada en íleon aislado de cobayo y se observo que
este compuesto aumento notablemente la intensidad y frecuencia de las contracciones
del músculo liso intestinal lo que indica que la actividad biológica de la 1,5 BDZ-CI es
claramente diferente a la reportada para las 1,4 BDZ como el Diazepam.
Por lo anterior el presente trabajo pretende caracterizar la actividad biológica de
la 1 5 BDZ-CI sobre otro músculo liso: el uterino (8, 9, 28).
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Fig 3. Estructura de la 1,5-Benzodiazepina Clorada
(2-Tiometil-7-[p-Ci-fenil]4,5-üenzo-3 am-2-nonem).
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Serotonina (5-Hidroxitriptamina)
La serotonina, químicamente conocida como 5hidroxitriptamina (SHT), es una
monoamina biogénica, con un peso molecular de 176. Esta ampliamente distribuida en
el reino animal y vegetal. En los mamíferos, la 5HT se encuentra principalmente en
las plaquetas, en las &Mas enterocmmafines del tram gastrointestinal y en el
sistema nervioso central (SNC), donde desempeña un papel importante como
neurotransmisor. En el cuerpo humano el 90% esta localizado en las &ulas
cromoafines del tracto gastrointestinal, el resto se encuentra en plaquetas y en el SNC
(40). La 5-HT esta involucrada en numerows eventos fisiok5gicos como son, a nivel
periférico: interviene en fibras musculares lisas causando constricción o relajación y
así ejerce un mayor efecto sobre la capa vascular y el tracto digestivo (31). La 5-HT
también participa en varias funciones del SNC como es: sueno (m), termoregulación
(30), aprendizaje y memoria (1, 27), el dolor (25) en el comportamiento como la
agresividad, la ingesta de alimento (5, 6, IO), actividad sexual (29, 14). Reguiación
neuroendocrina (12), actividad motora (38) y ritmos biológicos. Así mismo la 5-HT e$ta
involucrada en distintos tipos de condiciones patoldgicas como en: desordenes
psiquiátricos similares a la ansiedad, depresión, agresividad, pánico, desorden
obsesiva, compulsiva, esquizofrenia, comportamiento suicida y autismo; desordenes
neurodegenerativos como enfermedades de Alzheimer, Parkinson y Huntington,
migraña y alcoholismo (18).
Una variedad de observaciones moleculares, bioquímicas y fisiológicas sugieren
la presencia de múltiples receptores específicos para la 5-HT. Los receptores se han
clasificado en siete clases: 5-HT1, 5-HTZ, 5-HT3, 5-HT4, 5-HT5. 5- i iT~ y 5-HT7 y diversos
isomoríos (8, 32, 42)
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11. OBJETNOS
1.- OBJETIVO GENERAL.
Estudiar el perfil de actividad biológica de una nueva molécula de estructura 1,5
benzodiazepínica clorada sobre el músculo liso uterino in vitro.
2.- OBJETIVOS PARTICULARES.
1 .- Realizar Curvas Dosis-Respuesta a la serotonina en el útero aislado de rata.
2.- Establecer el efecto de la 13 benzodiazepina clorada sobre la actividad del
músculo liso uterino in vifro.
3.- Determinar la interacción farmacología entre la 1,5 benzodiazepina clorada y
la serotonina en esta preparación.
8
1 .- PREPARACI6N E L FROTIS VAGINAL
Se utilizaron ratas hembra de la cepa Wistar con un peso corporal de 250 a 300
g, a las cuales se les realizó un frotis vaginal para determinar en qué estadio del ciclo
estral se encontraba el animal (metaestro, diestro, proestro, estro). Con una pipeta
Pasteur se introduce en la vagina 0.1 ml de solución fisiológica salina al 0.9% y se
succiona de inmediato, se colocan unas gotas en el portaabjetas y se agrega una
gota de lugol, enseguida se coloca el cubreobjetos para después ser observado al
microscopio. El estadio se determina de acuerdo a las caracteristicas morfolágicas
que presentan las dlulas epiteliales (Fig 4). Para el presente estudio se utilizaron las
ratas que se encontraban en estro.
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Fig 4. Características citológicas de los diferentes estadíos del ciclo estral en roedores.
9
2.- AISLAMIENTO Y MONTAJE DE LA PREPARACION
Los animates se pesaron y se sacrificaron por dislocación cervical, se extrajo el
Útero e inmediatamente se colocó en una caja de Petri, que contenía soluacKI De
Jalon (composkión ImM] NaCl 153, KCI 5.6, Glucosa 2.7, NaHC4 5.9, CaCh loo), el
útero se limpio de tejido adiposo y conectivo, se dividió en tres segmentos de 1.5 a 2.0
cm de longitud, los segmentos de útero fueron colocados en cámaras para órgano
aislado de 30 ml que contenían sdución De Jalon, burbujeada con carbógeno (5% de
COZ y 95% de Oz), manteniéndolo a una temperatura constante de 32OC y un pH de 7.4
(Fig 5). Cada segpento se sometió a una tensi6n inicial de 1 g (10, 17), la actividad
basal y la respuesta del músculo liso a los fármacos de prueba, se registro a &ads de
un transductor FTO3, conectado a un polígrafo Grass 79D. Después de un período de
15 minutos de estabilización, bajo perfusión continua con sdución De Jalon
(10mm/min) se realizaron curvas dosis-respuesta (CDR) a la serotonina soia (IxlOB a lxlOsM), a la BDE-CI sola suspendida en dimetilsulfoxido ai 1 % ( I x ~ O - ~ a l x l O d M) y a la serotonina en presencia de difefentes concent~aciones de la 1 3 BDZ-CI.
Los registros obtenidos en las diferentes condiciones experimeníales, se
midieron con un planimetro (Burreti Co~p.) y se expreswón como el promedio dd &ea
bajo la curva (ABC) de la actividad del músculo liso. Los resuliadas se sometieron al análisis estadístik ' de la prueba de t-student y se consideró estadísticamente
significativos los valores de ~$0.05.
10
TRANSDUCTOR
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Fig 5. Montaje de la prepsación de útero in vitro, perfundido con sokición
de 32' C con un pH 7 4. nutriiente De Jalon burbujeada con carbwno y manteMdo ' a una temperdurn
11
IV. RESULTADOS Y DtSCUSlON
De acueFd0 a la informacron ’I disponible, la serotonina modifica la actividad
espontanea del Útero aislado de la rata, en la Fig 6. se muestran los trazos
representativos de la actividad contradi ‘I, inducida por la serotmii a las diferentes Wncentraci ‘ones ensayadas ( 1 x I O a a 1 x IOd M ), se aprecja que la respuesta contradjl
es dependiente de la concentración, 8s decira mayorconcentraci ’ónmayorlarespuesta
(A). En el panel €3, se muestra que la actividad uteiMaeqxnhwaen presencia de ias
diferentes concentraciones de la 1,5 BDZ-CI (1 a 300 x 10 -7M) induce una inhibición de la
actividad uterina, fenómeno Claramente opuesto al inducido por la SerOtoMna . sobreesia
preparación. Se puede apreciar que a las concentras ‘ones inhibe totalmente la actividad espontanea
( 1 0 0 ~ 3 0 0 ~ 1u7 M), se
La curva dosis respuesta de la adividad con!Wil indmida por la SeFOtonina
demuestra que es dependiente de la concentración molar (Fig 7) Se observa que la
respuesta del tejido control se mantiene constante.
En relación a la capacidad inhibitMia del compuesto en la Fig 8. obse~amos que la 1,5
BDZ-CI inhibe significativamente las contFacciones espontaneas del rmiscUlo liso uterino,
fendmeno dependiente de la concentma ‘ón del fármaco. invariabiemente la actividad
espontanea del músculo liso se mantiene por arriba de la respuesta inducida por la 1,5
BDZ-CI.
Cuando se realizo la CDR a la serotonina en presencia de las diferentes
concentraciones de la 1,5 BDZ-CI (Fig 9), se observó que la 1,5 BDZCI antagonlza
parcialmente la actividad contractil inducida por la monoamina, fenómeno que fue
depandiente de la concentración de la 1,5 BDZ-CI, sin embargo no ocurrió un
desplazamiento paralelo a la derecha de la CDR a la serotonina, lo que sugiere que el
antagonismo presentado por la interacción farmacológica no es de tipo competitivo
12
Por otra parte amrde a lo planteado en el proyedo, el prapósito del presente
trabajo fue estudiar la infkiencia de la 1,5 BDZ-CI .sobe la actividad inducida por de la
setutonina en el músculo liso uterino, ya que existe infomiacibn . que señala que la 1,5
BDZ-CI, en el músculo liso intestinal, produce un aumento en la -cia e intensidad de
las contracciones (28). Sin embargo en el músculo liso uterino se observó una respuesta
contraria a la obtenida en el músculo liso intestinal, ya que al adicionar las diferentes
concentraciones de la 1,5 BDZ-CI, se induce una disminución de Las cantracciories uterinas, lo que indica un perti1 de actividad simiiar a la que presentan las 1,4 BDZ como el
diazepam el que indw un efecto relajante en músculo liso intestinal (28).
Lo anter.Nx no es soqxendenk, si consideramos que el útero aun cuando también es músculo liso, tiene funciones fisiológicas diferentes y la densidad de receptores BS
diferente para los distintos newotransmisores, en relación a otros músados lisos; lo
antetior hace suponer que la 1,5 BDZ-CI esta interactwdo diredamente sotre el
receptor especifico del GABA tipo A, io que da lugar a un poknctal postsinaptico
inhibitorio (PPSI) que determina una rela@aón muscular; en el caso de íleon se collsidera que posiblemente este involucrado otro mecanismo de acción, postblemante un efecto
probablemente mediado por la aCetilcolina a traves de receptores muscarinicos,
interacción que da lugar a la contracción muscular, propiciada por una alta concentración
de calcio intracelular (28).
Finahnente, con el propósito de estaMecer si el mecanismo de acción de la 1,5
BDZ-CI que da lugar a la inhibición de la actividad motora uterina espantanea y deJ
antagonismo de la actividad uterine inducida por la serotonina, esta mediada’por
receptores específicos, es necesario la realización de estudios de radioreceptores
(binding) y de estudios bioquímicos para la determinación de los mecanismos de
tranducción de &lales (proteína G), y de segundos mensajeros involucrados en tales
efectos no obstante la propuesta del mecanismo de acción a través de receptor espeafica
no excluye otras posibilidades. Lo anterior implica el someier a estudios formales la
actividad bidógca de esta m o k u i a sobre otros modelos experimentales..
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V. CONCLUWN
La 1,5 BDZ-CI inhibe de manera dependiente de la concentración, las contracciones
del músculo liso uterino.
La I ,5 BDZ-CI antagonim parcialmente la action de la semtonina en esta preparación.
La actividad biológica de la 1 3 BDZ-CI en el músculo liso uterino aislado de la rata, fue
contraria a la adwidad observada en el músculo liso intestinal.
18
VI. BIBUOGRARA
1.- Aitman, H.J., and Nmile, H.J. Serotonin, learning and memory; Hnpkcations for the treatment of dementia in treaúnent detielopment stmtegm for Aizhm's disease, Ed. by T. Crook, R. Bartus, S. fenis and S. gershon, pp.361-381.1986.
2.- Bolton T. B. Mechanisms of adion of transmitters and other substances on smooth muscie. Physioi Rev, 59:606-718.
3.- Bormann, J. Electrophysidogy of GA6& and GpwAereOeptar subtypes. Trends.
4.- Bowery, N., GAB& reoeptofs and their sigtnfimce in mammeka ' n pharmacohgy. TiPS, I O : 401407,1989.
NW~DSC. 11(3)~11~-116, 1988.
-.
. ...
5.- Blundell,J.E. Is there a role for WRkoxSryptwiHne in feeding? Int. J Obestty 13542, 1977.
6.- Blundell. J.F. Serotonin and appetite. Newophamiacdogy23:1537-1551,1984.
Myiecharane, E.J., R B.P., and Saxem, P.R. Proposals for the clrissiftcation and nomenclature of fumF& for !%hydroxytryptamine. Neuropharmacology 25:563- 576,1986.
€%.-Campos sepúlveda, A€., Ayaia-Guerrero, F., Taboede, J., Sanwcelae, t. and Martinez, R. Antiamvulsant eñect of the 7-(pChiorophens)~4,5-benz0-3-aza- m m . Proc. West. Pharmacol. Soc. 35191-193,1992.
7.-BradlW, P.B., Engel, G., feni, W., FOZ&, J.R., Humphrey, P.P.A., Middlemiss, D.N.,
9.- Cortes, E. and Martinez,R. S- Fragmentation of 2- Methyi-thi0-7ap-R-p~~l)~~,5-berizo3aza-nonem . . J.H&WOC@IC Chem. 20:
Syrdhests and Mass
161, 1983.
10.- CURM, G. SerotoneFgiC mechmismS Of *-. C h . P(ewophenaco1 Il(~ppl):511-520.1988.
11.- Disayavanish, C., MahatnKunkul, S. and Disayavanish, P. Merentia4 E M S of Three Benzodiazepines in the Treatment of Newptic Patients. Royal Society of Medicme. International Congress and Symposium Series. 74: 8188,1985.
12.- Fuller, R.W. CeFotonin recBptors and neuroendocn 'ne responses. Neuropsychophamiacology 3:495502,1990.
13.- Gnwsman S. P., El hipotalamo y el sistema límbico: las bases neuronales de la emoción y la motivación. Cap. 16 Wilwy619, NewYork, 1973.
19
14.- Gorzalka, B.B., Iiilledelson, S.D. and v\Eatson, N.V. serotonin receptor SuMyPes and sexual behavior. Ann N. V. Acad Sci 600: 435-445, 1990.
15.-Haef@iy, W.E. Benzodiazepines. int. Anesthe. Ciin. 26(4):262-272, 1988.
16.- Hardman, J.G., Limbird, L.E., Motinoff, P.B. and Riddon, R.W. The Phannacoiogicai Basis of Therapeutics. Ed. McGrawHill. 9th ed. U.S.A. pp. 362473,1996.
17.- Hindmarch, I. The Psychophanwdogy of Clobazam. Royal Society of Nledicme. International Congress and Symposium Series. 743-10,1985.
18- Hoyer Daniel, Clarke DE., Fozard J.R., Wi .p.R., Mar&* G;R., mykhwane E.J., Saxena P.R., end Humphrey P.P.A. MI. l n t m a l union of ptiannacology classification of receptors for SHydroxytryptamine (serotonin). Phannatd Rev 46(2):157-204,1994.
19.- Huilihan, J.P., Spedor, S., Taniguchi, T. and Wang, J. The binding of [ 3H- diazepam to guinea-pig ileal longitudinal musde and the in vitro of conkaction by benzodiazepines. Br. J. Phamacol. 78: 321327.1983,
20.- Jouvent, M. Neurophysiolcgy of the states of sleep. Physiol Rev 47:117-177.1967.
21.- Kamm, K.E.and Stull, J. T. Regutation of smooth mude cmtmetile etenents by second messengers. Annu Rev. Physid, 61: 294313,1989.
22.- Katzung, B. G. Fanmdogia BBsica y Clínica. El Manual Moderno. 5a. ed. México. PP. 380389,1994.
23.- Kenakin, T. P. The classiftcétm of Drugs and Drug Receptors in isdated Tissues. Pharmacol. Rev. 36(3): 16222,1984.
24.- Kmse, H.J. Psychophwmacoiogy of Ciobazam with Spetiai Retkence to is its Anticonwlsivant Activity. Royal Society of Medicine. interpationai Congress and Symposium Series. 43:133140, 1983.
25.- Learn, D. Serotonin and pain. In neurorwil serotonin, ed. by N.N. osbome and M. Hamon, pp. 171-229. John Wiley and Sons Ltd., NewYork. 19ü8.
26.Macdonaid, R.L. Benzodiazepines, mediamsm ' of &ion. In: Antieptleptic Drugs. Levy, R.H.,Mattson,R.H.andMelchum,B.S.RavenPress.pp.695703,1996.
27.- McEntee, W.J. and Crook, T.H. Serotonin, memory and the aging brain. Psychophanacology 103: 14S149.1991,
20
'_..
28.Martínez Enríquez M.E., VBsquez Cervantes M., Vargas Gonzábz, J.A., M i n e t R., Teboada J., Lorenzana Jiménez M., Magos Guerrero G.A. y Campos sepulveda A.E.: Efecto de la atropina sobre la actividad biológica de la 1,5bemdiazepina dorada en el múscxllo liso intestinal del cobayo. XX Cmgfeso Nacional .de Farmacdogía, Oaxeca, Ow., 24al28dejuniode 1997.
29.- Meyerson, B.J. and Malmmnas, C.O. brain momowninas and sexual behavior in bmlogical detemiinants of sexual behavior, Ed. by J.S. Hutchinson, pp. 521-554, Wiley and Sons Ltd., New York, 1978.
30.- Myers, R.D. Serotonin and themioregulation: OH and new vW. J Physiol 77: 505- 513.1981
31 .- Parsons, AA. 5-HT receptors in human and animal carebrovasculature. Trends Phamacol Sci 12:310-315,1991.
32.- Peroutka, S.J. 5-hidroxytFyptamine receptors. J Neurochem 60:408416,1993.
33.- P W , W.L.M. phamiacological Ex@ITI&S On isolated preparations. E.S:S. LNingtone Edinburgh and London, pp. I-95,1970.
34.- Ponciano, E., Relvas, J., Memíes, F., Lameiras, A., Vazserra, A. and Hindmarch, I. Clinical effects and sedative activity of Bnmtazepam and Clobetam in the treetment of anxious outpatients. Royal society of M e d i i . lnteyiiational Congress and Symposium Series. 43:125-131, 1981.
35.- Shorvon, S.D. Benzodiazepines, Clobazam. in: Levy, R.H., Wson. R.H. ami Meldnnn, B., S. Antiepileptic Drugs. Raven Press. Fourth de. New Y&. 763-776,1996.
36.- Smith, M. C., Reinard, D.A. Fafmadogía. Ed Medica Panamericana. Buenos Aires, Argentina. pp. 27%28,1993.
37.- Stembach, L.H. The benzodiazepine story. In: Priest R.G., V i m F.U., Amrein R., Shta M. Bemodiazepines today and t-. LancaskMTP Press.
38.- Stembach, H. the serotonin syndrome. Am J Psychiatry 148:705713,1991.
39.-Van de Kar, L.D. Neuroendocn 'ne phwmaoology of serotoniine neurons. Ann Rev PharrnaailTher31:289-320.1991.
5-18, 1980.
40.- Villalon C., Terron J., Hong E , Saxena Pramod Efedos cardiovascuiares de egonistas y antagonistas de los meptorq a la serotonina, A& lnst Cardiol Mex., Vol 63: 441447, 1993
21
41 .-Wesemann.W., and Weiner, N. Circadian rhythm of serotonin b m d i in rat brain Progr Neurobiol35405428,1990.
42.- Ma Emilie and Fillion G k s . 5Hydroxytrypt~mine receptors. Phamiacol Rev 44(3):401-458,1992
,.