Uso de disoluciones de Bixa Orellana (achiote) como ... · APROBACIÓN DE LA TUTORA DELTRABAJO DE TITULACIÒN Yo, MARÍA ISABEL ZAMBRANO GUTIÉRREZ, en mi calidad de tutora del trabajo

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE ODONTOLOGÍA

CARRERA DE ODONTOLOGÍA

Uso de disoluciones de Bixa Orellana (achiote) como

revelador natural de placa dental frente a revelador

convencional estandarizado.

Proyecto de investigación presentado como requisito previo a la obtención del Título de

Odontòloga

AUTOR: Molina Barriga Karen Gabriela

TUTORA: Dra. María Isabel Zambrano Gutiérrez

Quito, Febrero 2017

DERECHOS DE AUTOR

Yo, KAREN GABRIELA MOLINA BARRIGA, en calidad de autor del

trabajo de investigación “USO DE DISOLUCIONES DE BIXA ORELLANA

(ACHIOTE) COMO REVELADOR NATURAL DE PLACA DENTAL

FRENTE A REVELADOR CONVENCIONAL ESTANDARIZADO.”,

autorizo a la UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR a hacer uso del

contenido total o parcial que me pertenecen , con fines estrictamente

académicos o de investigación.

Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente

autorización, seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido

en los artículos 5, 6, 8, 19, y demás pertinentes de la Ley de Propiedad

Intelectual y su Reglamento.

También autorizo a la Universidad Central del Ecuador realizar la

digitalización y publicación de este trabajo de investigación en el repositorio

virtual, de conformidad a lo dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de

Educación Superior.

Karen Gabriela Molina Barriga

CI 2300198096

ii

APROBACIÓN DE LA TUTORA DELTRABAJO DE TITULACIÒN

Yo, MARÍA ISABEL ZAMBRANO GUTIÉRREZ, en mi calidad de tutora del trabajo de

titulación, modalidad Proyecto de Investigación, elaborado por KAREN GABRIELA

MOLINA BARRIGA; cuyo título es: Uso de disoluciones de Bixa Orellana (achiote)

como revelador natural de placa dental frente a revelador convencional

estandarizado, previo a la obtención de Grado de Odontóloga; considero que el mismo

reúne los requisitos y méritos necesarios en el campo metodológico y epistemológico, para

ser sometido a la evaluación por parte del tribunal examinador que se designe, por lo que lo

APRUEBO, a fin de que el trabajo sea habilitado para continuar con el proceso de

titulación determinado por la Universidad Central del Ecuador.

En la ciudad de Quito, a los 8 días del mes de febrero del 2017.

Dra. María Isabel Zambrano Gutiérrez

DOCENTE-TUTORA C.C. 1713722120

iii

APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL

El tribunal constituido por : Dr. Jorge Muñoz, Dr. Juan Pablo Jaramillo y Dra. Sonia Vaca.

Luego de receptar la presentación oral del trabajo de titulación previo a la obtención del

título de ODONTÓLOGA presentado por la señorita KAREN GABRIELA MOLINA

BARRIGA.

Con el título :

Uso de disoluciones de Bixa Orellana (achiote) como revelador natural de placa dental

frente a revelador convencional estandarizado.

Emite el siguiente veredicto (aprobado)

Fecha: 22 de Febrero del 2017

Para constancia de lo actuado firman:

Nombre Apellido Calificación Firma

Presidente Dr. Jorge Muñoz 18

Vocal 1 Dr. Juan Jaramillo 17

Vocal 2 Dra. Sonia Vaca 19

iv

Dedicatoria

A mi Señor por su compañía y auxilio en vida personal,

académica y regalarme “LA VIDA”.

A mis padres y hermanos por ser mi fuente de motivación e

inspiración, para luchar por un sueño más, quienes con sus

palabras de aliento me animaban cuando sentía decaer.

Y a todos mis amigos, compañeros con quienes compartí

Conocimientos, alegrías, tristezas y a todas aquellas

personas que durante mi vida universitaria estuvieron

apoyándome, haciendo que este sueño se haga realidad.

v

Agradecimiento

Gracias a Dios por permitirme tener y disfrutar de mi

familia.

Gracias a mi familia por apoyar mis decisiones y

proyectos.

Gracias a mi querida universidad por haber abierto sus

puertas y formarme profesionalmente.

Gracias a aquellos docentes que compartieron de sus

conocimientos sin egoísmo.

Gracias a quien tutorió éste proyecto y a todas aquellas

personas que de alguna manera u otra fueron participes

de este sueño.

vi

INDICE DE CONTENIDO

AUTORIZACIÓN DE LA AUTORÍA INTELECTUAL

APROBACIÓN DEL TUTOR

HOJA DE APROBACIÓN DE LA TESIS

DEDICATORIA

AGRADECIMIENTO

INDICE DE CONTENIDOS

LISTA DE TABLAS

LISTA DE GRÀFICOS

LISTA DE FIGURAS

LISTA DE ANEXOS

RESUMEN

ABSTRACT

INTRODUCCIÓN

CAPÍTULO I

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.2 OBJETIVOS

1.2.1 OBJETIVO GENERAL

1.2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

1.3 JUSTIFICACIÓN

1.4 HIPÓTESIS

1.4.1 HIPÓTESIS DE INVESTIGACIÓN

1.4.2 HIPÓTESIS NULA

CAPÍTULO II

2. MARCO TEÓRICO

2.1PLANTAS TINTÓREAS

2.1.1 RESEÑA HISTÓRICA

2.2 LOS COLORANTES

2. 3 CAROTENOIDES

2.3.1BIXINA

vii

2.4 BIXA ORELLANA

2.4.1GENERALIDADES

2.4.2 CARACTERÍSTICAS BOTÁNICAS

2.4.3 ASPECTOS FISIOLÓGICOS

2.4.3.1 CRECIMIENTO

2.4.3.2 PRODUCCIÓN DE HOJAS, FRUTOS, MADERA Y/O SEMILLAS

2.4.4 COMPOSICIÓN QUÍMICA

2.4.5 EXIGENCIAS AGROCLIMÁTICAS

2.4.5.1 CLIMA

2.4.5.2 SUELOS

2.4.5.3 REQUERIMIENTOS DE AGUA

2.4.5.4 PODA PARA FORMACIÓN DE LA PLANTA

2.4.6 CULTIVO

2.4.7 TOLERANCIAS

2.4.8 INTOLERANCIAS

2.4.9 INTERACCIÓN BIOLÓGICA

2.4.10 USOS

2.4.10.1 ADHESIVO

2.4.10.2 COLORANTE

2.4.10.3 COMBUSTIBLE

2.4.10.4 CONDIMENTO / ESPECIAS

2.4.10.5 CONSTRUCCIÓN/MADERABLE

2.4.10.6 FIBRAS

2.4.10.7 INSECTICIDA / TÓXICA

2.4.10.8 MEDICINAL

2.4.11 ESTUDIOS FARMACOLÓGICOS

2.4.11.1 ACCIÓN CICATRIZANTE

2.4.11.2 ACCIÓN ANTIOXIDANTE

2.4.11.3 ACCIÓN ANTIMICROBIANA Y ANTIPARASITARIA

2.4.11.4 ACCIÓN ANALGÉSICA

2.4.11.5 ACCIÓN ANTIDIARREICA Y ANTIDISCENTÉRICA

2.4.11.6 ACCIÓN HIPOGLICEMIANTE

2.4.11.7 ACCIÓN COMO REVELADOR DE PLACA DENTOBACTERIANA

2.4.12 ESTUDIOS TOXICOLÓGICOS

2.4.13 PRECAUCIONES Y CONTRAINDICACIONES

2.4.14 SEGURIDAD

2.4.15 OBTENCIÓN DEL COLORANTE, ANNATTO O “ACHOTE”

2.4.15 EXTRACIÓN RUDIMENTARIA

2.4.16 PLACA DENTOBACTERIANA

2.4.16.1 NATURALZA DE LAS BIOPELÍCULAS

2.4.16.2 BIOPELÍCULA O PLACA DENTAL

2.4.16.3 HIPÓTESIS DE LA PLACA INESPECÍFICA

2.4.16.4 HIPÓTESIS DE PLACA ESPECÍFICA

2.4.16.5 COMPOSICIÓN DE LA BIOPELÍCULA

2.4.16.6 MATRIZ DE LA PLACA

2.4.16.7 FORMACIÓN DE LA PLACA

2.4.16.8 PELÍCULA ADQUIRIDA

2.4.16.9 MECANISMO DE ADHERENCIA DENTOBACTERIANA

2.4.16.10 ADHERENCIA A LA PELÍCULA ADQUIRIDA

2.4.16.11 COLONIZACIÓN SECUNDARIA: AGREGACIÓN INTERBACTERIANA

CAPÍTULO III

3. METODOLOGÍA

3.1 TIPO DE DISEÑO DE INVESTIGACIÓN

3.2 TAMAÑO DE LA MUESTRA

3.3 DEFINICIÓN DE VARIABLES

3.3.1 VARIABLES DEPENDIENTES

3.3.2 VARIABLES INDEPENDIENTES

3.4 CRITERIOS DE INCLUSIÓN

3.5 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN

3.6 MÉTODOS DE RECOLECCIÓN DE INFORMACIÓN

3.7ANÁLISIS ESTADÍSTICO

3.8 RESULTADOS ESPERADOS

3.9 RECURSOS FINANCIEROS

3.10 ASPECTOS ÉTICOS

3.11 ESTANDARIZACIÓN

3.12 ASPECTOS JURÍDICOS

CAPÍTULO IV

4. RESULTADOS

4.1 ANÁLISIS DE DATOS

4.2 INTRODUCCIÓN ESTADÍSTICA

CAPÍTULO IV

5.1 CONCLUSIONES

5.2 RECOMENDACIONES

BIBLIOGRAFÍA

ANEXOS

LISTA DE TABLAS

TABLA NO 1 PIGMENTOS SINTÉTICOS AUTORIZADOS

TABLA NO 2 CAROTENOIDES

TABLA NO 3 COMPOSICIÓN NUTRICIONAL DE LAS SEMILLAS DEL ACHIOTE

TABLA NO 4 COMPOSICIÓN QUÍMICA DE LAS SEMILLAS DEL ACHIOTE

TABLA NO 5 ACTIVIDAD FARMACOLÓGICA DE LA BIXA ORELLANA Y SU

RELACIÓN CON SU COMPOSICIÓN QUÍMICA

TABLA NO 6 EFECTOS MEDICINALES DEL ACHIOTE

TABLA NO 7 EFECTO DEL EXTRACTO DE HOJAS DE BIXA ORELLANA EN DIARREA

INDUCIDA POR ACEITE DE RICINO EN RATONES

TABLA NO 8 EFECTO DEL EXTRACTO DE HOJAS DE BIXA ORELLANA EN EL

TRÁNSITO GASTROINTESTINAL

TABLA NO 9 ÍNDICES NUMÉRICOS DETERMINADOS A DE LAS SEMILLAS DE B.

ORELLANA

TABLA NO 10 ESTABILIDAD DEL EXTRACTO DE B. ORELLANA

TABLA NO 11 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DEL EXTRACTO DE LA BIJA

TABLA NO 12 PRUEBA DE PREFERENCIA Y ACEPTACIÓN ANTE FORMULACIONES DE

LA BIXA O.

TABLA NO 13 ESTABILIDAD DE LA FORMULACIÓN DE B. ORELLANA

TABLA NO 14 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LA FORMULACIÓN DE LA BIJA

TABLA NO 15 ZONAS DE ACUMULACIÓN DE LA PLACA DENTAL

TABLA NO 16 OPERACIONALIZACIÓN DE VARIABLES

TABLA NO 17 CRONOGRAMA DE TRABAJO

TABLA NO 18 RECURSOS HUMANO Y MATERIALES

TABLA NO 19 PRESUPUESTO

TABLA NO 20 SOLUBILIDAD DE LAS SUSTANCIAS

TABLA NO 21 COLOR DE LAS SUSTANCIAS

TABLA NO 22 TINCIÓN DE LAS SUSTANCIAS

TABLA NO 23 CALIDAD DE TINCIÓN DE LAS SUSTANCIAS

viii

LISTA DE GRÁFICOS

GRÁFICO NO 1 RESULTADO DE PESO CORPORAL

GRÁFICO NO 2 NIVEL DE AZÚCAR EN LA SANGRE

GRÁFICO NO 3 CURVA DE GLUCOSA EN SANGRE

GRÁFICO NO 4 SOLUBILIDAD DE LAS SUSTANCIAS

GRÁFICO NO 5 COLOR DE LAS SUSTANCIAS

GRÁFICO NO 6 TINCIÓN DE LAS SUSTANCIAS

GRÁFICO NO 7 CALIDAD DE TINCIÓN DE LAS SUSTANCIAS

ix

LISTA DE FIGURAS

FIGURA N° 1 ÁRBOL DE BIXA ORELLANA

FIGURA N° 2 HOJAS DE BIXA ORELLANA

FIGURA N° 3 FLOR DE BIXA ORELLANA

FIGURA N° 4 FRUTO DE BIXA ORELLANA (CÁPSULA)

FIGURA N° 5 FRUTO DE BIXA ORELLANA (SEMILLAS)

FIGURA NO 6 MÉTODO DE OBTENCIÓN DEL EXTRACTO DE B. ORELLANA

FIGURA NO 7 CROMATOGRAFÍA DE LA FORMULA REVELADORA DE PLACA DENTAL

FIGURA N° 8 PREPARACIÓN DE LA PASTA DE ACHIOTE

FIGURA N° 9 4 TROQUELES DE 10 PIEZAS DENTALES CADA UNO

FIGURA N° 10 ELABORACIÓN DE LOS 4 TROQUELES

FIGURA N° 11 RESULTADO FINAL DE LA ELABORACIÓN DE TROQUELES Y

COLOCACIÓN DE COMIDA CON EL FIN DE CREAR PLACA BACTERIANA

FIGURA N°12 PASTA DE ACHIOTE + AGUA

FIGURA N° 13 PASTA DE ACHIOTE + ACEITE DE COCINA

FIGURA N° 14 PASTA DE ACHIOTE + ACEITE DE COCO

FIGURA N° 15 MEZCLA SOLUCIÓN #1



FIGURA N° 18 AGITACIÓN DE CADA SOLUCIÓN

FIGURA N° 19 SOLUBILIDAD DE LA SOLUCIÓN #1



FIGURA N° 22 SOLUBILIDAD DE LAS 3 FORMULACIONES

FIGURA N° 23 COLOCACIÓN DE LA SOLUCIÓN #1 EN JERINGAS DE 5 ML

FIGURA N° 24 SOLUCIÓN OBTENIDA (#1)

FIGURA N° 25 APLICACIÓN DE LA SOLUCIÓN #1

FIGURA N° 26 ENJUAGUE TROQUEL #1




x




FIGURA N° 33 REVELADOR CONVENCIONAL “PROQUIDENT”

FIGURA N° 34 APLICACIÓN DEL REVELADOR CONVENCIONAL


FIGURA N° 36 RESULTADO DE LA TINCIÓN DE LAS 3 SOLUCIONES

FIGURA N° 37 RESULTADO DE LA TINCIÓN DE LAS 3 SOLUCIONES

LISTA DE ANEXOS

ANEXO #1 CERTIFICADO DE DONACIÓN DE ÓRGANOS DENTARIOS.

ANEXO #2 MANEJO DE DESECHOS.

ANEXO #3 FICHA DE RECOLECCIÓN DE DATOS.

ANEXO #4 RENUNCIA AL TRABAJO ESTADÍSTICO.

ANEXO #5 OFICIO EMITIDO AL DIRECTOR EJECUTIVO DEL INEN.

ANEXO #6 CARTA DE DECLARACIÓN DE CONFLICTO DE INTRESES POR

PARTE DEL TUTOR.


PARTE DEL INVESTIGADOR.

ANEXO #8 CARTA DE IDONEIDAD Y EXPERTICIA DEL TUTOR

ANEXO #9 CARTA DE IDONEIDAD Y EXPERTICIA DEL INVESTIGADOR.

xi

TEMA: “Uso de disoluciones de Bixa Orellana (achiote) como revelador natural de placa

dental frente a revelador convencional estandarizado.”

Autora: Karen Gabriela Molina Barriga

Tutora: Dra. María Isabel Zambrano Gutièrrez

RESUMEN

La Bixina es el carotenoide principal extraído de las semillas de achiote (80 %), utilizado

actualmente como aditivo de color en una gran variedad de alimentos, medicamentos y

cosméticos, constituyéndose así fuerte fuente económica en varios países del mundo, cuyos

datos toxicológicos tras varios experimentos en animales y humanos son muy escasos. El

diseño de la investigación es de tipo Experimental: se formaron 4 troqueles de 10 piezas

dentarias de seres humanos cada uno, donadas para el estudio. Una vez obtenido el

colorante en pasta a base de Bixa Orellana es colocada en 3 tubos de ensayo, 5 gr

respectivamente con el fin de realizar la mezcla con 3 diferentes solventes a 5 ml cada uno.

El experimento es realizado a temperatura ambiente, agitando cada tubo de ensayo con su

soluto y solvente respectivo y compararlas finalmente con un revelador sintético de placa

dentobacteriana (PROQUIDENT), escogido de entre varios tipos dado su color rojizo

semejante al obtenido de las semillas del achiote.

Palabras clave: BIXA ORELLANA / PLACA DENTAL / PROQUIDENT

xii

THEME: "Use of solutions of Bixa Orellana (achiote) as a natural dental plaque developer

against conventional standardized developer."

Author: Miss Karen Gabriela Molina Barriga

Tutor: Dr. María Isabel Zambrano Gutièrrez

SUMMARY

Bixina is the main carotenoid extracted from achiote seeds (80%), currently used as a color

additive in a wide variety of foods, medicines and cosmetics, making it a strong economic

source in several countries around the world, whose toxicological data after several

experiments in animals and humans are very scarce. The objective of this study is to

evaluate the efficacy of solutions of Bixa Orellana (achiote), as a possible natural agent

that reveals bacterial plaque. The estudio design was experimental: four dies of 10 human

teeth each were donated for the study. Once the paste dye based on Bixa Orellana is

obtained, it is placed in 3 test tubes, 5 grams respectively, in order to make the mixture

with 3 different solvents at 5 ml each The experiment is performed at room temperature,

shaking each test tube with its respective solute and solvent and comparing them with a

synthetic developer of dentobacterial plaque (PROQUIDENT), chosen from several types

given its reddish color, similar to that obtained from achiote seeds.

Keywords: BELL ORELLANA / DENTAL PLATE / PROQUIDENT

INTRODUCCIÓN

Santo Domingo de los Colorados es una de las provincias de nuestro país

constituida gran productora y consumidora de Bixa Orellana a nivel mundial, gran parte

de esta producción se destina al mercado nacional y una pequeña a la exportación, en

cuatro presentaciones: polvo, pasta, extracto líquido y en semilla. Su importancia radica en

el tinte de la pulpa que hay dentro de los frutos.

El achiote (mu en tsáfiqui) es la planta que veneran diferentes pueblos indígenas

como los Tsáchilas, porque según sus ancestros fue el fruto que los protegió de la malaria

hace 50 décadas cuando esta enfermedad azotaba la región, Hoy por hoy El cultivo de

ONOTO, (achiote) es uno de los proyectos más ambiciosos en el orden económico

llevados a cabo en varios países del mundo, en el campo de la industria de alimentos,

medicina textiles, tras el Censo Agropecuario llevado a cabo en el año 2000, se determinó

que en la provincia existió 454 hectáreas de achiote cultivadas, de las cuales 424 estaban en

cosecha. Las estadísticas reveladas por el INEC indicaron que el rendimiento era de 130

toneladas anuales.34

Los indígenas Tsáchilas son un ejemplar de individuos que acuden estrictamente a

las plantas y sus beneficios en la prevención o curación de enfermedades que afecten a su

comunidad cultivan y procesan la Bixa Orellana “achiote”, utilizada en su alimentación,

tinción de textiles y como colorante base en el cabello de los hombres, de donde proviene

su nombre “Colorados” Desde tiempos ancestrales han utilizado el pigmento obtenido de

las semillas del achiote en el campo estomatológico dada su acción hemostática y

cicatrizante, sin asumir efectos colaterales.

El propósito de obtener nuevos conocimientos ha sido uno de los esfuerzos más

importantes del ser humano, utilizando medios empíricos en un camino esencial en la

mejora de la salud, tanto en el diagnóstico, pronóstico tratamiento de enfermedades,

basándose en la observación experimentación e investigación

Hoy, se pretende evaluar y analizar si el achiote es capaz de detectar depósitos

bacterianos en las superficies dentales y reunir las características ideales de un revelador de

placa dentobacteriana. Estudio realizado “in vitro “.

CAPÍTULO I

1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Ecuador ha sido considerado como uno de los países con mayor biodiversidad. Su

rica y variada flora, son utilizadas sólo por los pobladores indígenas. Dentro de la búsqueda

de recursos naturales, el aprovechamiento de otros productos diferentes a la madera o leña

como los colorantes, se convierte en una alternativa para utilizar la selva tropical, ya que

mediante el uso de éste subproducto del bosque se puede garantizar la permanencia del

recurso, generar ingresos y mejorar el nivel de vida de la comunidad.

Aprovechar el uso de las plantas con principios tintóreos, se justifica con el hecho de

que muchas de éstas han sido destinadas a la dieta humana actualmente, considerándose de

menor peligrosidad con relación a los de origen sintético.

Conocedora del campo de la odontología, su importancia y responsabilidad que se

asume con la sociedad, me siento comprometida y deseo aportar a través de la

investigación bibliográfica y experimental, acerca de la utilización del achiote, en el campo

estomatológico para detectar la placa bacteriana al diluirla en tres sustancias diferentes que

son el agua, aceite de coco y aceite de cocina.

¿Bixa Orellana, realmente revela la placa dentobacteriana?

1.2 OBJETIVOS

1.2.1 OBJETIVO GENERAL

• Evaluar la eficacia de disoluciones de Bixa Orellana (achiote), como posible

agente natural revelador de placa bacteriana.

1.2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

• Obtener disoluciones del colorante a base de achiote (pasta) en los tres diferentes

solventes que son: agua, aceite de coco y aceite de cocina, a concentraciones 0.5 gr

/5 ml.

• Aplicar en 4 troqueles de 10 piezas cada uno las concentraciones en agua, aceite de

coco, aceite de cocina a concentraciones de 0.5 gr/ 5 ml.

• Comparar el grado de tinción de placa dental entre el revelador convencional

“PROQUIDENT” el achiote diluido en tres formas, agua, aceite de coco y aceite de

cocina, a concentraciones 0.5 gr /5 ml.

1.3 JUSTIFICACIÓN

La selva tropical ha contado desde siempre con una amplia gama de

especies vegetales, muchas de las cuales desde épocas remotas han sido ya

utilizadas sobre todo por los pobladores indígenas en la tinción de alimentos y

vestido, identificación étnica e incluso medicina en nuestro país.

Muchas de las plantas reportadas como fuentes de tintes, solo son conocidas

por algunas tribus, que relegadas a la selva, han conservado de alguna manera las

costumbres o tradiciones de sus antepasados.

A nivel mundial existe población bastante selectiva, su cultura, tradición y

la ideología de condiciones naturistas hace que rechacen el uso de productos

sintéticos, sobre todo aquellos destinados al uso terapéutico, dado que para la

curación o prevención de múltiples afecciones utilizan solamente la naturaleza

que los rodea.

La utilización de colorantes naturales como Bixa Orellana en la industria,

actualmente es aprobada por la FDA (Food and Drug Administration), por el

hecho de catalogarla como inofensiva frente a la salud humana aún a dosis diarias

y reconocido como seguro, como consta en “La Química e Alimentos” de

Salvador Bagüi y más documentación, por el contrario, la elaboración de

colorantes sintéticos, pues muchos de ellos que tienen grupo amino (NH2), nitro (-

NO) y nitroso (-NO2) son potencialmente tóxicos, han salido del comercio e

industria por sus efectos nocivos.

Las especies tintóreas han ido perdiendo cierta vigencia, no así el caso del

“achiote”, constituyéndose una de las grandes fuentes económicas con que

cuentan varios países. Naturalmente a través de este trabajo se hará énfasis sobre

el uso de Bixa Orellana, seleccionado de entre varios colorantes naturales por

presentar altos rendimientos, buena intensidad del color, estabilidad a la luz, fácil

extracción de colorante, no nocivo para la población.

Actualmente la BIXA ORELLANA (ACHIOTE) por sus excelentes

características antes mencionadas se espera pueda convertirse en un revelador

natural de placa dental para prevenir enfermedades orales cuyo origen sea el

recolecto de depósitos bacterianos.

1.4 HIPÓTESIS

1.4.1 HIPÓTESIS DE INVESTIGACIÓN

El uso de Bixa Orellana diluida en agua, aceite de coco y aceite de cocina actúa

como revelador de placa bacteriana.

1.4.2 HIPÓTESIS NULA

El uso de Bixa Orellana diluida en agua, aceite de coco y aceite de cocina no

actúa como revelador de placa bacteriana.

CAPÍTULO II

2. MARCO TEÓRICO

2.1 PLANTAS TINTÓREAS

Jorge Torres 9 ( p11) menciona:

‘se consideran como plantas tintóreas todas aquellas especies que contienen en uno

o en sus diferentes órganos (raíz, tallo, ramas, hojas, flores, frutos, semillas) altas

concentraciones de principios colorantes’.

El término colorante se define en el común de los casos como todo cuerpo o

substancia capaz de comunicar a otros una determinada coloración en forma más o menos

permanente. Se distingue de la materia coloreada en que aquella, aunque posee color, por

efecto de los rayos reflejados y refractados sobre ella, es incapaz de transmitirlo.9

Según la química moderna, los colorantes están divididos en dos grupos bien

definidos: inorgánicos y orgánicos.9

Los colorantes de origen vegetal son encontrados con mayor o menor grado de

concentración en casi todas las plantas del planeta. Los colorantes vegetales, que en alguna

medida aluden a los “pigmentos”, no son otra cosa que el resultado de procesos muy

complejos logrados a través de la acción fotosintética de las partes verdes de las plantas

mediante la síntesis.9

En relación con lo anterior Jorge Torres 9 (p12) menciona

‘….se tienen pigmentos clorofílicos, pigmentos carotenoides, pigmentos

antociánicos y pigmentos flavónicos.’

Los colorantes vegetales se encuentran mayormente concentrados en las células o

“vacuolas” de un sinnúmero de plantas, en donde a su vez sin encontrarse en estado puro se

asocian con otros principios como aceites, resinas y en particular con los taninos, estos

últimos de carácter astringente.9

2.1.1 Reseña Histórica

El empleo de principios tintóreos de plantas se remonta a épocas muy antiguas,

dado los hallazgos que se han hecho a través de los siglos, por los dibujos realizados en

cuevas, cavernas, etc. Los egipcios hace más de 4000 a.C conocían con propiedad un

sinnúmero de colorantes que incluían una variada gama de tonalidades; al parecer las

pirámides o al menos algunas de ellas pudieron haber estado pintadas de rojo, según

investigadores recientes.9

Hace unos 2000 a.C los colorantes empezaron a destacarse en la realización de

manuscritos, hecho trascendental en la historia de la humanidad. Estos escritos bellamente

ejecutados en papiro o pergaminos, son un legado que nos han dejado nuestros antepasados

y por ellos sabemos las costumbres, hábitos, cultura y muchos otros aspectos de una

civilización en una determinada época. 9

Jorge Torres 9 ( p13) menciona:

‘……[existe] valiosos comentarios de naturalistas como Humboldt, Bondpland,

Triana, sobre las costumbres de nuestros antepasados, especialmente en lo

concerniente a la utilización de tintes, provenientes de plantas y sus métodos de

preparación’

2.2 LOS COLORANTES

Linger B. William et al 4 (p 28) ‘ menciona:

‘Los colorantes son sustancias de color intenso que pueden usarse para producir un

alto grado de coloración cuando se dispersan en otros materiales o se hacen

reaccionar con ellos…..’

Según la norma técnica ICONTEC 409 el término colorante se define como toda

sustancia química que tiene la propiedad de transferir color al material sobre el cual se

aplica. 4

Los colorantes pueden ser de origen natural, artificial o sintético y presentarse en

forma de polvo, pasta, solución, extractos o lacas inocuas de dispersión, emulsiones o

granulados.4, 9

Linger B. William et al 4 (p29) menciona:

‘Como colorantes naturales se conoce una buena variedad de materiales orgánicos e

inorgánicos obtenidos de fuentes vegetales, animales o minerales. Con la actual

tendencia naturista los colorantes naturales parecen adquirir cada vez más

popularidad, debido principalmente a su probada inocuidad, especialmente en

productos alimenticios, farmacéuticos, cosméticos y artesanales. ’

Los colorantes naturales son certificados por la FDA (Food and Drug

Administration), para el uso respectivo en cada una de las industrias.4

Salvador Badui 1 (p402) :

‘según la FDA ( Administracion de alimentos y fármacos de Estados Unidos)…..,

un pigmento es cualquier material que imparte color a otra sustancia obtenida por

síntesis o artificio similar, extraída o derivada, con o sin intermediarios …, a partir

de un vegetal, animal, mineral u otra fuente y que cuando es añadida o aplicada a

alimentos, medicamentos o cosméticos, es capaz de impartir color por sí misma…..’

Los pigmentos pueden dividirse en dos grupos, los sintéticos y naturales. Los

sintéticos requieren una certificación, y debido a la preocupación por la seguridad en el uso

de estos pigmentos, se han estudiado exhaustivamente con respecto a su efecto sobre la

salud, ante lo cual se les ha atribuido daños en el comportamiento conductual de los niños,

aunque no se ha comprobado pues queda duda sobre su posible participación en otras

alteraciones de la salud.1

Su utilización ha ido decreciendo en algunos países de Europa, además que

actualmente se aceptan 9 pigmentos sintéticos, con severas restricciones en su uso.1

Tabla No 1 Pigmentos sintéticos autorizados. 1

Tartracina Autorizado por más de 60 países, puede producir alergia en

10%de consumidores

Amarillo anaranjado S. Utilizados en bebidas no alcohólicas, repostería.

Azorrubina Empleado especialmente en confitería

Rojo ponceau Se emplea en productos cárnicos, repostería.

Negroo brillante Se emplea solamente en Europa

Amarillo de quinoleina Se utiliza en todo tipo de industria alimenticia

Eritrosina Alto contenido en yodo, puede ser nocivo por su acción sobre la

tiroides.

Indigotina Autorizado en todo el mundo.

Azul V Utilizado en industria alimenticia para lograr tonos verdes

Fuente: Badui Dergal Salvador. Química De Alimentos.4aed. México: editorial

PEARSON; 2010

Eleborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Los pigmentos sintéticos tienen ventajas como, firmeza en el color, amplio

intervalo de tinte, bajo costo, alta efectividad, no presentan olores ni sabores. 1

Los pigmentos naturales son generados por microorganismos, vegetales, animales o

minerales es decir aquellos obtenidos de fuentes presentes en la naturaleza, usados para

impartir color a algunos productos. Son sujetos a la misma prueba de calidad y seguridad

toxicológica que los sintéticos, pero la FDA y otras agencias gubernamentales no requieren

que se certifique su pureza química y por tanto se refiere a estos como aditivos de color no

certificados.1

Sin embargo, algunos de estos pigmentos si están sujetos a restricciones en su uso

en cuanto al nivel máximo permitido o el uso en animales y/o humanos.1

Cabe señalar que la Bija, es uno de los pocos colorantes permitidos en la

elaboración de derivados lácteos dado que no altera las condiciones organolépticas de los

mismos, así también se le utiliza en Europa y Asia para la coloración de embutidos,

margarinas, conservas de pescados, etc.3

Entre los colorantes de naturaleza orgánica hay varios grupos químicos, de los

cuales hare referencia a los CAROTENOIDES ya que están presentes en la Bixa Orellana.

2.3 CAROTENOIDES

Salvador Badui 1(p 406) menciona:

‘Los carotenoides son un grupo numeroso de pigmentos muy difundidos en el reino

vegetal y animal, producen colores que van desde el amarillo hasta el rojo intenso.

Se han identificado en la naturaleza más de 600 de estos compuestos, y se estima

que anualmente se sintetiza 100.000 toneladas de carotenoides de fuentes naturales’

Estos pigmentos son esenciales para que las plantas realicen la fotosíntesis ya que

actúan como captadores de la luz solar.1

El nombre genérico deriva de la zanahoria “Daucus carota” debido a que de esta

hortaliza se hallaron por primera vez.1

A continuación, una tabla de productos o estructuras en las que podemos encontrar

este tipo de pigmentos.

Tabla No 2 Carotenoides

Frutas y verduras Jitomates, zanahorias, piñas y cítricos

Flores Cempasúchil y girasol

SEMILLAS ACHIOTE

Animales

Plumaje de flamencos, canarios

Musculo de peces como trucha , salmón

Crustáceos como camarón, langosta y cangrejo

Bacterias como Corynebactrium poinsettiae

Hojas Cuando la clorofila desaparece (durante el invierno)

Fuente: Badui Dergal Salvador. Química De Alimentos.4aed. México: editorial

PEARSON; 2010

Eleborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

2.3.1 Bixina

Debido a la presencia de carotenoides, de sobre manera apocarotenos, presentes en

las semillas de la bija, es que el color característico del achiote es rojo. La bixina se ha

convertido en el compuesto más cotizado cuya codificación a nivel industrial es E-160b.31

Se trata de una sustancia de color rojizo oscuro que dada la característica del achiote

(aceitoso) tiende a ser más compatible con aceites, grasas y alcohol, a diferencia del agua

con la que tiende a ser ligeramente insoluble.24

Contenido de bixina según la forma de la baya: esféricas (5,5% de bixina) y

alargadas (entre 3,5 y 4,5% de bixina).3

Porcentaje de bixina según la coloración de la baya: negras (6% de bixina), rojas

(8% de bixina), amarillas ( 10,5% de bixina).3

2.4 BIXA ORELLANA

2.4.1 Generalidades

Especie botánica arborescente de las regiones intertropicales de América, cultivada

específicamente en Costa Rica, México, Panamá, Colombia, Ecuador, Venezuela y Perú,

desde la época precolombina.3, 11

La Bixa Orellana es conocida a lo largo de los países americanos bajo distintos

nombres entre ellos: Abujo, Carayurú, Ejuseima, Pirrimapa, Uñaño, Urucú, Urucurana,

Paipai, Achote, Achiote, Bija, Bijo, Onoto, Acafrán, Annato, Anotto, Attalo, Caituco,

Acanguarica, Auaú, Ornato, Uruca, Cuypuc, Uchuviá etc. Es una planta originaria para

ciertos investigadores, de América Tropical, aunque muchas las tienen como nativa del

Africa.3, 4, 14

Durante la conquista española se descubrió gran cantidad de productos derivados de

las plantas utilizadas desde entonces por algunas civilizaciones como los aztecas y los

mayas. Uno de aquellos productos fue el achiote, un pigmento a base de carotenoides

(bixina/norbixina) extraido de las semillas de la especie vegetal Bixa orellana.’11

La procedencia del nombre de ésta plantación corresponde a Bixa que es el latín del portugués bija y Orellana, en virtud al explorador español Francisco de Orellana.11

Los pueblos aborígenes de América central y América del sur emplean el achiote como pintura corporal y facial para sus ceremonias religiosas, para defenderse de las picaduras de insectos, cambios del clima e incluso en la cicatrización de las heridas11

Al ser un pigmento inocuo para el organismo humano y reconocido por su nula toxicidad actualmente se recomienda utilizarlo para reemplazar a los colorantes sintéticos. La dosis diaria que se ha permitido y recomendado por la OMS es de 0-0,065 mg/kg de peso corporal.’11

El achiote ha reemplazado a los colorantes sintéticos en la coloración de múltiples alimentos como los quesos, manteca, mantequilla, arroz, fideos, dulces, caramelos, etc. Inclusive sirve como condimento de cocina, por ejemplo, en platos típicos venezolanos como la "hallaca”, también sirve en la tinción de maderas, telas, marfiles, pieles, lacas, jabones, entre otros.11

Cada diferente estructura de la planta del achiote proporciona muchas propiedades medicinales, algunas de ellas evidenciadas científicamente y otras conocidas por las creencias de los pueblos originarios que la emplean, entre las cuales puedo mencionar: antitumoral, luxurioso, antiinflamatorio, antiséptico, antibacteriano, antioxidante, emoliente, cicatrizante, diurético, hipoglicemiante,, febrífugo, fuente de vitaminas, caída del cabello, infecciones bacterianas de forma general, inflamación de la conjuntiva, dermatosis, diabetes, epilepsia, glaucoma, dolor de cabeza, hemorroides, hipertensión arterial, mordidas de serpientes, dolor de estómago, estomatitis, tonsilitis, quemaduras, etc.’11

2.4.2 Características Botánicas

Nombre científico: Bixa Orellana 4

Nombre común y/o indígena: achote, onoto, paipai, abujo 4

Subdivisión: angiosperma 22

Clase: dicotiledóneas 22

Familia: Bixaceae 4

Género: Bixa 22

Bixa Orellana, característica de la zona tropical de América, presenta un desarrollo rápido y solo en 2 años de haberse cultivado puede llegar a producir un equivalente de 135-270 Kg por árbol.3

B. Orellana es un arbolito cuyo tamaño oscila entre 2 a 6 m (hasta 10 m) de altura, cuya copa es baja y vasta; tallo café o marrón, la ramificación es a poca altura del suelo. Las hojas son grandes, verdosas claras, de bordes lisos, acabado brillante, forma oval, de punta alargada y una base en forma de corazón, muestra puntos de color marrón en su revés, longitud puede ser de 9 a 19 cm de largo y 6 a 11 cm de ancho. 3

Figura N° 1: Árbol de Bixa Orellana. Figura N° 2: Hojas de Bixa Orellana. Fotografía tomada por: Karen Molina Fotografía tomada por: Karen Molina

Hay 2 tipos de achiote, clasificadas así según las características de la flor: las de flores blancas, presenta una capsulas amarillo verdosas, con similar coloración del tinte, y tiene un 10.4% de colorante; y la de flores rojizas a rosadas que proporciona capsulas rojizas tienen un 8,2% de colorante, grandes, cáliz de 5 sépalos libres, corola de 5 pétalos anchos y redondeados, estambres numerosos libres o un poco connados en la base, vistosas, dispuestas en corimbos terminales, de 4 a 5.5 cm de diámetro, verde castaño que pronto se caen y florece mayormente en agosto a diciembre. Sexualidad: hermafrodita.3,

14, 22

Figura N° 3: Flor de Bixa Orellana. Fotografía tomada por: Karen Molina

El fruto es una especie de envoltura semi-achatada, color rojo y de 2 a 6 cm de longitud, con pelos gruesos y espinosos que pueden ser largos o cortos, puede ser verdoso oscuro a morado según las variedades, en estado tierno mantienen una coloración amarillenta-rojiza que al madurar pasa a pardo rojizo oscuro. Al madurar la baya se abre y deja ver en su interior las semillas, en cada capsula suele haber 10 a 70 semillas, dependiendo de su tamaño. Los meses de maduración suelen ser octubre a diciembre y durante marzo o abril puede cosecharse. 3, 4, 9, 11

Figura N° 4: Fruto de Bixa Orellana (cápsula). Fotografía tomada por: Karen Molina

Las semillas son rojas muy intenso, carnosas y voluminosas, casi triangulares y pequeñas, de 5 a 5.5 mm de largo por 4 a 5 mm de ancho. 3, 4, 9, 10

El pigmento lo encontramos en la superficie de la semilla, como una cubierta viscosa y aceitosa, formado principalmente por bixina, norbixina , éster de dimetil y otros apocarotenoides.11

El tronco de la planta de onoto es por lo general delgado, cilíndrico, y al realizarle una incisión desprende una sustancia viscosa que es un látex. Ramas jóvenes café claro, delgadas; las puntas verduscas.11, 14

Figura N° 5: fruto de Bixa Orellana (semillas). Fotografía tomada por: Karen Molina

Guzmán Eduardo 3 (p 14) menciona:

‘el colorante de la semilla es lo que realmente hace que el cultivo presente importancia económica debido a que las restricciones que ya hemos señalado en materia de colorante para la industria de alimento y farmacéutica, obliga a utilizar colorantes vegetales como sustitutos de sustancias químicas de ya comprobada acción nociva a las vías digestivas en los seres humanos’

Torres Jorge 9 (p 124) menciona:

‘Dentro de todas las especies de plantas fanerógamas, el “Achote”, Bixa Orellana., y especies afine, constituyen una de las principales fuentes de colorantes naturales de mayor demanda y consumo en el mundo. El principio colorante o “Bixina”, que suele expenderse en el comercio en forma de pasta o polvo, se extrae de la carnosidad que envuelve las semillas, técnicamente denominada arilo.’

La corteza externa es de color café claro con hendiduras longitudinales que se desprende de manera sencilla en largas tiras. Y la corteza interna amarilla, con savia de color naranja, la misma que es pegajosa y ligeramente desagradable y amarga. La raíz es de tipo pivote con un sistema radicular secundario muy bien desarrollado lo que le permite un excelente aprovechamiento de la humedad y los nutrientes, y fuerte sujeción al suelo cuando se le cultiva en zonas de topografía irregular. La raíz puede penetrar en estado adulto (4 años), hasta 3 mts de profundidad extendiéndose en forma horizontal aún en suelo arcillosos; en suelo francos tiene excelente expansión lateral, lo que le permite lograr una buena aireación del sistema de raíces secundarias.3, 14

Al inicio del invierno, por lo general en mayo, las raíces entrar en una fase de expansión y crecimiento y por consecuencia se generan nuevas raíces que absorberán más nutrientes, aire y humedad lo que incide en la aparición de nuevas yemas de las ramas, actividad que es intensa durante los meses de agosto, septiembre y octubre, disminuyendo al pasar las lluvias.3

Estas actividades del sistema de raíces procuran a la planta de agua, nutrientes y oxigeno permitiendo así la función fotosintética de las hojas y formación de compuestos orgánicos.3

Los elementos minerales más requeridos por las plantaciones de Onoto cuya deficiencia puede restringir severamente su producción son: nitrógeno, potasio, fosforo, micro elementos como cobre, zinc y boro. Y el uso de potasio es vital para lograr una elevada fructificación y desarrollo de las capsulas contentivas de la semilla.3

El ciclo fisiológico de fructificación del onoto se lleva cerca de 24 meses, a partir de los 30 meses la planta entra a producir cerca de 3 a 5 Kg de semilla.3

El “achiote” presenta un sabor insípido, altamente adecuado para dar color a todo tipo de comida y bebida y productos de cosmetología y farmacéutica. En un principio rico en carotenoides por lo que tiene un gran significado cuando se lo utiliza en la dieta humana. 9

2.4.3 Aspectos Fisiológicos

2.4.3.1 Crecimiento

Los arboles crecen de manera pausada, cuando empiezan a brotar y aparecer las primeras hojas alcanzan ya a los 4 meses 15 a 20 cm de longitud .’3

2.4.3.2 Producción De Hojas, Frutos, Madera Y/O Semillas.

Si la plantación ha sido bien cuidada el árbol puede empezar a producir semillas a los 2 años, pero su producción normal comienza a los cuatro, pudiendo alcanzar una cosecha de 4.5 a 5 kg de capsulas y 272 kg de semillas.’3

Tabla No 3 Composición nutricional de las semillas del achiote. 22

COMPOSICIÓN NUTRICIONAL

(mg/100g)

Calcio 7

Fósforo 10

Hierro 1.4

Vitamina A 45

Riboflavina 0.2

Niacina 1.46

Tiamina 0.39

Ácido ascórbico 12.5

Fuente: Jorge Enrique Devia Pineda, Liliana Saldarriaga Calderón. Planta piloto para

obtener colorante de la semilla del achiote (Bixa Orellana) 2003, Vol. 39 (131)

Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

2.4.4 Composición Química

La bixina es el apocaroteno mayoritario presente en el achiote (80%) ,en la

cubierta exterior de sus semillas, también encontramos isobixina y norbixina, beta-caroteno, criptoxantina, luteína, orellina, lípidos como el ácido linoleico, y en menor

cantidad el alfa-linoléico y oleico; aminoácidos como el glutamato, aspartato y leucina; altas concentraciones de fósforo, hierro y zinc y bajas de calcio.’11-22

Las semillas contienen celulosa del 40 al 45%, 3.5 a 5.5 % de sucrosa, 0.3 a 0.9 % de

aceite esencial, 3 % de aceite, 4.5 a 5.5 % de pigmentos, 13 a 16 % de proteína. 3

Tabla No 4 Composición química de las semillas del achiote. 22

COMPOSICIÓN QUÍMICA ( % )

Humedad 8.00-13.00

Proteína 13-14.24

Celulosa 13.8

Fibra cruda 18.48

Almidones 11.45

Carbohidratos

totales

39.91

Ceniza 4.50-7.97

Energía 54 kcal




Los componentes principales de la semilla del achiote son: resina, orellina (materia

colorante amarilla), bixina (materia colorante roja), aceite volátil y aceite graso. 22

Tabla No 5 Actividad farmacológica de la Bixa Orellana y su relación con su

composición química. 22

Propiedad Medicinal Sustancias Responsables

Antibacteriana Ácido elágico, lignina, ácido salicílico

Antiinflamatoria Ácido elágico, glucósido de 7-luteolina-,

ácido salicílico

Antiviral Ácido elágico, glucósido de 7-luteolina-

Inhibidora de la COX- 2 ácido salicílico

Inhibidora de la aldosa reductasa Ácido elágico, glucósido de 7-luteolina-,

ácido salicílico

Antioxidante Bixina, crocetina, cianidina, lignina, luteína,

ácido salicílico

Antiperoxidante Ácido elágico




2.4.5 Exigencias Agroclimáticas

2.4.5.1 Clima

Puede adaptarse a diferentes climas pero preferentemente a los de tipo cálido-

húmedo, a pesar de que se encuentra cultivado en una variedad de climas desde el nivel del

mar hasta los 1300 msnm. Por lo general desarrolla sin mayores problemas en altitudes no

mayores de los 800 msnm, con temperaturas que fluctúen entre los 25 y 30o C y con

humedad atmosférica igualmente elevada.3

La planta de Onoto tiene gran resistencia a la sequía, condición que se debe en gran

medida a su tipo de raíz (pivote) y a lo ramificado de la misma, lo que le permite un mayor

aprovechamiento de la humedad, extrayéndola de las capas más profundas del sub-suelo.3

De lo anterior Guzmán Eduardo 3 añade

‘los climas excesivamente secos en regiones de baja pluviosidad exponen a la

planta a varias situaciones entre ellas: la baya logra menor tamaño, la producción de

grano es menor, la concentración de [bixina] es por debajo del 4% y todos los

procesos vitales de la planta se alteran. ’

El viento excesivo también es perjudicial, condición que predomina en muchas

zonas del país, esto provoca por lo general daños mecánicos a la plantación, este efecto

negativo se controla plantando barreras cortaviento con plantas como tipos de pino, ficus,

etc.. pueden plantarse a una distancia de 250-350 mts entre una barrera y otra, y una

distancia entre planta y barrera de 3-4 mts.3

2.4.5.2 Suelos

Guzmán Eduardo 3 (p 25) añade:

‘Por lo general el onoto se cultiva en suelos pobres y es una planta que por su

rusticidad tiene una gran resistencia a la deficiencia de elementos minerales del

suelo. Su adaptación es muy plástica en cuanto a los tipos de suelo, desarrollándose

bien en los de mucha composición de arena hasta los arcillosos de buen drenaje, [y]

no soporta el encharcamiento.’

2.4.5.3 Requerimientos De Agua

Los cultivos llevados a cabo en suelos de ladera (quebradas), la humedad se

mantiene por mayor tiempo en el suelo debido a que la eliminación de maleza se realiza

manualmente y el suelo conserva cierta protección, no queda desvestido, en este caso la

evapotranspiración es mucho menor que en aquellos suelos donde se emplea la rastra para

eliminar la maleza. Cuando se corta con machete la maleza, beneficia la conservación de la

humedad.3

La excesiva deficiencia de humedad aparte de perjudicar la absorción radical

impide el aprovechamiento de los elementos minerales propios del suelo y de los

fertilizantes incorporados.3

2.4.5.4 Poda Para Formación De La Planta

Esto tiene por objetivo lograr que desde la etapa inicial de crecimiento, la planta

consiga desarrollar una armazón fuerte y de buen equilibrio en la ramazón. Que haga

posible el sostener adecuadamente su carga de frutos. 3

Con esto se provee a la planta de un “esqueleto” fuerte apto para sostener cargas

elevadas de frutos sin que afecte la estructura de las ramas menores de la misma, conseguir

una buena distribución de ramas productivas, de tal manera que no se sobrepongan y

permanezcan los frutos la mayor parte del tiempo a la luz del sol y procurar buenos

rendimientos de frutos.3

Si se poda en épocas muy jóvenes podemos dañar la plantación en lugar de

favorecerla, ocasionar un retraso en la floración y por consiguiente en la fructificación y

reducir el desarrollo del sistema de raíces.3

2.4.6 Cultivo

La siembra de cada semilla debería ser a 35 cm de distancia una de la otra, a una

profundidad de 2.5 cm y cada fila se semillas separada por 22 cm. Una vez que las

plántulas presentan un tamaño de 20 a 25 cm se las trasplantan colocándolas a una

distancia de 3 a 4 m entre si, además es recomendable hacer 2 a 4 deshierbes en la época

lluviosa.3

2.4.7 Tolerancias

Es un árbol firme, muy resistente al viento y al fuego y no se ve afectado

bruscamente ante las plagas y enfermedades.3

2.4.8 Intolerancias

Se trata de un árbol intolerante a la sombra total, pero puede resistir la sombra

parcial, tampoco puede tolerar la sequía extrema, heladas y la inundación temporal, las

plántulas 3

la luz solar directa afecta la plantación.3

2.4.9 Interacción Biológica

Existe una estrecha relación entre el árbol de achiote y las hormigas debido a que

éstas cuidan a la siembra de daños extensos al controlar las poblaciones de insectos y

parásitos.3

2.4.10 Usos

2.4.10.1 Adhesivo

De las ramas del árbol de achiote se consigue una especie de “goma” , una

sustancia de color amarillento a pardo, químicamente hablando es un polisacárido de

origen natural que se extrae de la resina (secreción orgánica que producen muchas plantas)

como parte del proceso de cicatrización de éstos conocido como gummosis. Esta resina de

color ámbar se recolecta normalmente a mano una vez seca.3

2.4.10.2 Colorante

De la porción carnosa de las semillas (arilo rojo-naranja) se extrae un colorante

mismo que es apreciado industrialmente por dar color a productos alimenticios, aceites,

ceras, barnices, pinturas, cosméticos, fármacos y fibras textiles (de seda y algodón), etc.3

2.4.10.3 Combustible

A partir del tronco o leña.3

2.4.10.4 Condimento / Especias

Pues a partir de la semilla se obtiene el pigmento ya sea en pasta o polvo,

empleándose así como condimento y saborizante de platos exóticos como por ejemplo, el

tan mencionado “cochinita pibil”.3

2.4.10.5 Construcción/Maderable

Construcción de viviendas en el sector rural y elaboración de muebles, utilizando la

madera. 3

2.4.10.6 Fibras

De la corteza externa se extrae fibras, adecuadas para cordelería.3

2.4.10.7 Insecticida / Tóxica

Ciertos indígenas de América del Sur emplean el achiote agregándole grasa y luego

refregar la mezcla sobre la piel y defenderse de los mosquitos. 3

2.4.10.8 Medicinal

Tabla No 6 Efectos medicinales del achiote

Analgésico Antineoplásico Anticarcinogénico Cicatrizante

Anticoagulante Antioxidante Antiveneno Purgante

Antibacteriano Antiparasitario Astringente Antihipertensivo

Antidiarreico Diurético Febrífugo Sedante

Antifúngico Hipoglucémico Afrodisíaco antiinflamatorio

Elaboración : Karen Gabriela Molina Barriga

2.4.11 Estudios Farmacológicos

La existencia de datos y evidencias que apoyan el capacidad terapéutica del achiote

hacen de este producto realmente interesante para la industria farmacéutica Algunos de los

más representativos se describen a continuación.11, 18, 19, 23, 25, 33

2.4.11.1 Acción Cicatrizante

El extracto alcohólico de Bixa Orellana ha sido clasificado como una formulación

no irritante dérmico primario al haber sido empleado sobre piel intacta de conejos

durante una experimentación, pero siendo que en el ser humano su uso sería en zonas donde exista lesiones epidérmicas y no sobre piel intacta, hace necesario tener un

conocimiento sobre la toxicidad del producto en piel dañada, de manera que se empleó

el extracto en piel afectada de conejos Nueva Zelanda lográndose una completa

recuperación de la herida a los 3 días de su aplicación.11, 18

Un segundo estudio sobre piel de ratas (4 grupos) en el que se empleó extracto oleoso de achiote en la cicatrización de heridas abiertas, consistía en tratar diariamente

con: extracto de achiote 0,1% (0,1% U), extracto de achiote 0,01% (0,01% U), vaselina

(V) y solución salina (SF) respectivamente, para un máximo de 21 días. A los 4, 7, 14 y

21 días se evalúa clínicamente la presencia de exudado, la corteza y la epitelización. Clínicamente, todos los grupos de tratamiento mostraron la evolución de la cicatriz

fisiológica.19

Se recogieron muestras de la piel, el hígado y los riñones para su evaluación

histológica. A los 21 días, se recogieron muestras de piel para análisis tensiométrico y se

llegó a la conclusión de éste estudio que el extracto oleoso de achiote acelera el proceso

de curación en los primeros días, pero proporciona una cicatriz de baja calidad. 19

S.O. Capella et al 19 menciona:

‘se sugiere el uso del extracto oleoso de achiote para el tratamiento de heridas grandes abiertas donde hay riesgo de contaminación, a fin de acelerar la fase

inicial de la cicatrización de heridas y la rápida formación de tejido de

granulación [formando] una barrera protectora. ’

2.4.11.2 Acción Antioxidante

En el estrés oxidativo los radicales libres actúan sobre el ADN mitocondrial, produciendo también oxidación de las proteínas y desfiguración estructural de las mismas, mientras que a nivel de lípidos, induce a la peroxidación lipídica conllevando al daño y muerte celular debido a la alteración de la permeabilidad de su membrana.33

Para este estudio se utilizaron cepas derivadas de E. coli. Las células se cultivaron durante la noche a 37 ° C en medio rico LB que contiene, o no, norbixina.23

Las células se centrifugaron a continuación tres veces, se resuspendieron en solución salina (0,9% NaCl) y se irradió con diferentes dosis de UVC, se recogieron muestras (0,1 ml), apropiadamente diluida en solución salina, y la propagación en medio LB solidificado con 1,5% de agar. Las colonias se contaron después de la incubación durante la noche a 37 ° C.

Ante el daño del ADN inducido por radiación UV, peróxido de hidrógeno (H2O2) y anión superóxido sobre las células de Escherichia coli, se evaluó el efecto que tuvo la norbixina, determinándose que era capaz de proteger a la célula ante estos agentes, aumentando su supervivencia.23

Mediante absorbancia es decir una intensidad de luz especifica que será pasada por una muestra a diferente longitud de onda en el espectrofotómetro, son analizados los resultados de ésta experimentación. En la que la norbixina también dio absorción a las longitudes de onda más cortas de la radiación UVC (<300 nm), la protección norbixina inducida contra UV lejano podría ser debido a la absorción UV por la norbixina. 23

2.4.11.3 Acción Antimicrobiana Y Antiparasitaria

Por lo general las personas de bajos ingresos como los agricultores y/o comunidades nativas usan la medicina popular para el tratamiento de infecciones comunes. Las plantas suelen ser ingeridas como decocciones, infusiones , preparaciones de zumo o en forma de cataplasma aplicando directamente sobre las heridas o quemaduras infectadas.25

Los curanderos tradicionales afirman que la medicina ancestral resulta más barata y más eficaz que la medicina moderna y que algunas plantas medicinales como Bixa y otras son más eficientes para el tratamiento de enfermedades infecciosas que los antibióticos sintéticos. 25

Debido a lo antes mencionado es necesario evaluar, en una base científica, el potencial de la medicina popular en el tratamiento de enfermedades infecciosas producidas por patógenos comunes. Las plantas medicinales pueden representar una alternativa de tratamiento en casos no graves de enfermedades infecciosas y ser una posible fuente de nuevos antibióticos potentes ante patógenos resistentes. 25

El Staphilococcus. aureus, S . ßeta-hemolítico, Bacillus cereus, Pseudomona aeruginosa, Escherichia . coli y Candida . albicans fueron los organismos de ensayo los mismos que se obtuvieron del laboratorio de microbiología de la Facultad de Medicina de la Universidad de Antioquia. 25

El medio usado para la activación de los microorganismos era caldo de caseína de soja (SBCB) y los medios de agar selectivos que se utilizaron para la prueba antimicrobiana fueron: Baird-Parker para el Stafilococcus . aureus, cetrimida para Pseudomona . aeruginosa , McConkey para Escherichia. coli , Blood para S . Βeta- hemolítico, nutritivo para Bacillus cereus , y Saboraud-dextrosa para Candida albicans.25

En la preparación de los extractos de las plantas se empleó tres porciones de 100 g

de la planta seca en polvo, se empaparon por separado en 500 ml de agua destilada, etanol

(98%) y η-hexano (99%), por 72 h. A continuación, cada mezcla se calentó a reflujo

seguido de agitación a 200 rpm durante 1 h. Los filtrados obtenidos se concentraron al

vacío a 40 ° C para obtener los extractos. 25

Cada medio selectivo se inoculó con el microorganismo suspendido en SBCB.

Una vez que se solidificó el agar, se perforó con pocillos de seis milímetros de diámetro y

se llenó con 25 μl (0.025 ml) de extractos de plantas y blancos (etanol, agua destilada y

hexano). 25

Al mismo tiempo se empleo , sulfato de gentamicina para el Staphilococcus

aureus , Pseudomona . aeruginosa , Escherichia. coli , y Bacillius . cereus ; clindamicina

para S . Βeta- hemolítico , y nistatina para C. albicans como controles positivos a una

concentración de 1,0, 0,3 y 1,0 mg / ml respectivamente. El medio de dilución para los

controles positivos fue agua destilada estéril. El ensayo se llevó a cabo por triplicado. Las

placas se incubaron a 35 ± 2 ° C durante 24 h, a excepción de C. albicans que se incubó a

29 ± 2 ° C. 25

Los resultados de esta investigación con respecto a los efectos de la Bixa Orellana

muesta que los extractos de etanol exhiben un mayor grado de actividad antimicrobiana en

comparación con agua y hexano.25

E. coli, B. cereus y S. aureus fueron las bacterias más susceptibles a los extractos

de la bija probablemente por los esteroides y antocianinas presentes en sus semillas y por el

contrario, S. β hemolítica, P. aureginosa y C. albicans fueron los microorganismos más

resistentes. Pero aunque los extractos revelan cierto grado de actividad antimicrobiana

resulta muy bajo su potencial en comparación con el estándar de antibióticos. 25

Estas plantas podrían ser una fuente de nuevos compuestos antibióticos. Es

necesario seguir trabajando para aislar los metabolitos secundarios de los extractos

estudiados con el fin para probar la actividad antimicrobiana específica.

Jhon J Rojas et al 25 menciona:

‘Estas plantas podrían ser una fuente de nuevos compuestos antibióticos. Es necesario seguir trabajando para aislar los metabolitos secundarios de los extractos estudiados con el fin para probar la actividad antimicrobiana específica.’

2.4.11.4 Acción Analgésica

Para determinar el efecto analgésico de la Bixa Orellana se utilizó el modelo de contorsión inducido por ácido acético, para lo cual se administró extracto metanólico crudo de la bija a ratones (n=6) a dosis de 125, 250 y 500 mg/kg v.o 45 minutos antes de la inyección de ácido acético al 0,6% a una dosis de 10 ml / kg. 15

Jamil A. Shilpi et al 15 menciona:

‘Cuando se administra intraperitonealmente a ratones, el ácido acético causa algesia mediante la liberación de sustancias nocivas endógenas, serotonina, histamina, prostaglandina, bradiquinina y sustancia P que sensibilizan las terminaciones nerviosas del dolor. ’

Bixa Orellana a dosis de 125, 250 y 500 mg/kg mostró un efecto analgésico al inhibir la frecuencia de contracciones abdominales en los ratones inducida por ácido acético. Por lo tanto, la actividad observada del extracto de la bija podría deberse a su capacidad para interferir con la síntesis y/o la liberación de esas sustancias endógenas o la desensibilización de las fibras nerviosas implicadas en la vía de transmisión del dolor. 15

2.4.11.5 Acción Antidiarreica Y Antidiscentérica.

Para evaluar la actividad antidiarreica y antidiscentérica se realizó la prueba de diarrea inducida por aceite de ricino y la prueba de motilidad gastrointestinal en ratones. 15

Para la primera prueba los animales se dividieron en tres grupos: grupo control, control positivo y grupo de ensayo (n = 6 por grupo). El grupo de control recibió Tween 80 al 1% en agua a una dosis de 10 ml / kg v.o, el grupo control positivo recibió loperamida a dosis de 3 mg / kg v.o y el grupo de ensayo recibió el extracto metanólico bruto de la bija a dosis de 125, 250 y 500 mg / kg v.o. 15

Esto se llevó a cabo 30 minutos antes de Administración oral del aceite de ricino inductor de diarrea (0,5 ml a cada ratón). Cada animal se colocó en una jaula individual, el suelo del cual estaba cubierto de papel secante y cambiada cada hora. 15

Durante un período de observación de 4 h, se registró el número total de salida fecal y el número de diarreas que se crearon por los animales. Se asignó una puntuación numérica basada en la consistencia de las heces. 15

Tabla No 7 Efecto del extracto de hojas de Bixa orellana en diarrea inducida por aceite de ricino en ratones. 15

Tratamiento Dosis Número total de

heces en 4h

Número total de heces húmedas en

4h

control 10 15.83 ± 0.87 11.33 ± 0.76

Loperamida 3 2.33 ± 0.56 0.83 ± 0.31

Extracto de Bixa Orellana

125 11.83 ± 0.95 4.67 ± 0.49

250 7.50 ± 0.62 2.83 ± 0.40

500 5.67 ± 0.71 1.67 ± 0.42

Fuente: Jamil Ahmad Shilpia, Md. Taufiq-Ur-Rahmanb, Shaikh Jamal Uddinc,Md.

Shahanur Alamc, Samir Kumar Sadhud,Véronique Seidel. Preliminary pharmacological

screening of Bixa orellana L. leaves 2006 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Durante la segunda prueba los ratones fueron privados de comida 24 h antes del experimento, pero se les permitió el libre acceso a agua. De la misma manera se dividieron 3 grupos (n = 6 por grupo). El grupo de control recibió el vehículo Tween 80 al 1% en agua a una dosis de 10 ml / kg v.o, el grupo control positivo recibió sulfato de atropina a la dosis de 0,1 mg / kg v.i y el grupo de ensayo recibió el extracto metanólico bruto de la bija a dosis de 125, 250 y 500 mg / kg v.o. 15

Después de 30 min, los ratones de cada grupo fueron alimentados con 1 ml de harina de carbón (suspensión al 3% de carbón desactivado en metilcelulosa acuosa al 0,5%). Después de 30 minutos de la administración de la harina de carbón a cada animal sacrificado se midió la longitud del intestino (esfínter pilórico a cae-cum) y la distancia recorrida por el carbón como una fracción de esa longitud. El movimiento del carbón en el intestino se expresó como un porcentaje. 15

Tabla No 8 Efecto del extracto de hojas de Bixa orellana en el tránsito gastrointestinal. 15

Tratamiento Dosis (mg/kg, vía de

administración) Distancia recorrida por la

harina de carbón

Control 10 54.92 ± 3.45

Sulfato de atropina

0.1 26.89 ± 2.05

Extracto de Bixa Orellana

125 50.04 ± 3.26

250 46.74 ± 2.25

500 39.81 ± 2.32

Fuente: Jamil Ahmad Shilpia, Md. Taufiq-Ur-Rahmanb, Shaikh Jamal Uddinc,Md.

Shahanur Alamc, Samir Kumar Sadhud,Véronique Seidel. Preliminary pharmacological

screening of Bixa orellana L. leaves 2006 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Se encontró que el extracto reducía el movimiento de la harina de carbón en ratones a un nivel estadísticamente significativo sólo a la dosis más alta probada (500 mg / kg). Por lo tanto, se podría interpretar que la actividad antidiarreica observada del extracto de hojas de Bixa Orellana puede atribuirse a una posible inhibición de la biosíntesis de prostaglandinas y, en menor grado, a la liberación del tránsito gastrointestinal. 15

2.4.11.6 Acción Hipoglucemiante

Se evaluó el efecto de la Bixa Orellana analizando los niveles de glucosa en sangre en un modelo experimental de diabetes mellitus, pues ratas Wistar machos de un peso aproximado de 240 mg se hicieron diabéticos mediante una sola dosis de estreptozotocina (60 mg / kg) diluido en un tampón de citrato, después de la anestesia con tiopental de sodio, inyectada por vía intraperitoneal.26

Los animales se dividieron en tres grupos experimentales con ocho animales por grupo: CN (grupo de control no diabéticos, no tratados con achiote), DM (grupo de diabéticos, no tratada con achiote.), DMA (grupo diabético tratado con achiote, con una dosis diaria de 540 mg / kg, administrado por sonda nasogástrica.). 26

Todos los animales tuvieron libre acceso al agua y comida estándar. Ninguno de los animales se trató con insulina durante todo el período de estudio y durante los doce días de duración del experimento, se realizaron mediciones diarias de peso corporal (Grafico No 1 ) y de nivel de azúcar en la sangre (Grafico No 2 ) de cada animal a través de un glucosimeter digitales - One Touch ® Ultra TM / Lifescan. 26

El experimento fue dividido en 2 fases, la primera que duró 10 días, los animales fueron tratados con achiote midiendo los niveles de azúcar en sangre en la mañana del día siguiente. En la segunda fase, a los once días del tratamiento, el achiote se administró en la mañana y se trazó una curva de glucosa en sangre, con las mediciones del nivel de azúcar antes de su administración, y luego a las dos, seis y doce horas después de la ingestión del achiote. A las 8:00 am del día siguiente, el nivel de glucosa en sangre se midió por última vez (12 º día).26

Como resultado del experimento los animales diabéticos mostraron pesos corporales significativamente más bajos que los controles. Sin embargo, no hubo una diferencia significativa de los niveles de peso corporal entre la DM y DMA.

Gráfico No 1 resultado de peso corporal. 26

Fuente: Flavio Teles, Felipe Silveira dos Anjos, Tarcilo Machado, Roberta Lima Bixa

orellana (annatto) exerts a sustained hypoglycemic effect in experimental diabetes mellitus

in rats 2014 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Los niveles de azúcar en la sangre de los animales diabéticos eran considerablemente más altos que los del grupo de control. Sin embargo, los animales diabéticos tratados con achiote mostraron significativamente más bajos niveles de azúcar en sangre que los animales diabéticos no tratados, pero había una diferencia altamente significativa de los niveles de azúcar en sangre entre el grupo control y el grupo diabético tratado con achiote. 26

CN 276 ± 21 g

DM 255 ± 15 g

DMA 262 ± 17 g

Gráfico No 2 nivel de azúcar en la sangre. 26



in rats 2014.


La curva de glucosa en sangre se realiza en el día 11 (Gráfico No 3 ), demuestra que el efecto de glucosa en sangre de reducción de achiote persistió durante las doce horas de la evaluación. Sin embargo, la reducción más significativa de los niveles de azúcar en la sangre se produjo dos horas después de la administración del fármaco. 26

Gráfico No 3 Curva de glucosa en sangre. 26



in rats 2014


CN 100 ± 2 mg / dL

DM 507 ± 48 mg / dl

DMA 423 ± 18 mg / dl

CN 100 ± 2 mg / dl

DM 529 ± 32 mg / dL

DMA 380 ± 43 mg / dL

Concluyendo que el extracto de la Bixa Orellana, redujo la glucosa en animales diabéticos. Estos resultados están de acuerdo con los de investigaciones previas en animales no diabéticos y diabéticos. 26

La dinámica detrás de la reducción del azúcar en sangre por el uso de achiote aún no se comprenden por completo, pero Russel et al 27 demostró la reducción de azúcar en la sangre con el uso del achiote en perros no diabéticos, poniendo de manifiesto un aumento significativo de los niveles de insulina en suero durante el período de mayor reducción de los niveles de azúcar en sangre, así como un aumento de la afinidad entre la insulina y su receptor.26,27

2.4.11.7 Acción Como Revelador De Placa Dentobacteriana

Un estudio que se realizó en perros de raza Beagle demostró el poder del achiote

para la tinción de la placa dental, cuyos resultados fueron muy similares a la tinción

alcanzada con el revelador convencional denominado PLACDENT utilizado durante esta

experimentación, cuya formulación es completamente artificial.11

Durante otro estudio se desarrolló una sustancia líquida homogénea como

reveladora de placa dentobacteriana compuesta fundamentalmente por el extracto de la

bija, además de glicerina, metil y propil parabenos, esencia de frutas y agua destilada,. 10

El análisis estadístico de los resultados mostró un comportamiento estable del

producto en cuanto a la humedad, microbiología y cromatografía, al no presentar

diferencias estadísticamente significativas entre los valores encontrados tanto al iniciar la

experimentación como a los 3, 6, 9 y 12 meses de estudio.10

Solamente en cuanto a la humedad residual se reveló diferencias significativas, lo

cual se dedujo que puede estar relacionadas con la absorción de la humedad presente en el

ambiente, no afectando así la estabilidad microbiológica del producto, pues no se constató

proliferación de microorganismos, por encima de los límites que se establecieron. 10

Tabla No 9 Índices numéricos determinados a de las semillas de B. Orellana10

Tiempo

(meses)

Humedad

Residual

(% ± DS)

Agua

Sustancias solubles (% ± DS) Cenizas

totales (% ±

DS) Etanol 30% Etanol 50% Etanol 80%

0 6,03 ± 0,92 23,93 ± 0,75 20,65 ± 1,53 27,48 ± 0,30 31,13 ± 0,30 3,53 ± 0,32

3 6,09 ± 0,35 23,03 ± 1,53 21,85 ± 0,00 26,82 ± 1,38 30,42 ± 2,28 3,95 ± 0,64

6 6,20 ± 0,84 23,78 ± 0,74 19,96 ± 0,76 27,10 ± 2,22 31,58 ± 0,22 4,25 ± 0,65

9 6,30 ± 0,00 23,39 ± 0,86 21,24 ± 0,76 26,38 ± 0,76 31,48 ± 2,35 4,55 ± 0,85

12 6,50 ± 0,71 24,91 ± 1,17 21,39 ± 0,55 27,30 ± 2,35 30,90 ± 1,96 3,01 ± 0,23

DS – Desviación Estándar.

Fuente: Casado Martín, Celia Magaly, Gutiérrez Gaiten, Yamilet, Miranda, Martínez,

Migdalia, Bilbao Revoredo, OfeliaDiseño Y Desarrollo De Una Formulación Con Bixa

Orellana L. Como Revelador De Placa Dentobacteriana 2009 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Para obtener el extracto se diseñó un método de extracción por reflujo utilizando

una manta eléctrica, a una temperatura de entre 50 y 60ºC, a partir de 100 g de semilla de

achiote (semillas enteras y previamente secadas a la sombra), empleando como disolvente

10 ml de alcohol etílico a concentraciones del 30%, 50% y 80% 10

Figura No 6 Método de obtención del extracto de B. orellana.10


Migdalia, Bilbao Revoredo, Ofelia, Díaz San Miguel, Margarita, Mena, Irma. Diseño Y

Desarrollo De Una Formulación Con Bixa Orellana L. Como Revelador De Placa

Dentobacteriana 2009

El extracto obtenido fue analizado mediante la evaluación de sus propiedades

organolépticas en un lapso de 0 a 12 meses (color, olor, sabor) también el pH, densidad,

sólidos totales, además del análisis microbiológico a los 12 meses de estudio.10

Tabla No 10 Estabilidad del extracto de B. Orellana.. 10

Tiempo

(meses) pH ± DS

Sólidos

Totales

(% ± DS)

Densidad

Relativa ±

DS

Altura

Capilar

(cm ± DS)

Contenido

Alcohólico (%

± DS)

0 5,70 ± 0,10 1,56 ± 0,141 0,943 ± 0,003 9,2 ± 0,02 55,48 ± 2,86

3 5,18 ± 0,03 1,47 ± 0,361 0,939 ± 0,042 9,3 ± 0,06 53,71 ± 1,27

6 5,84 ± 0,20 1,53 ± 0,103 0,941 ± 0,003 9,4 ± 0,01 51,94 ± 2,16

9 5,32 ± 0,13 1,50 ± 0,017 0,938 ± 0,014 9,5 ± 0,02 50,19 ± 2,11

12 5,77 ± 0,13 1,48 ± 0,050 0,941 ± 0,013 9,8 ± 0.03 48,45 ± 2,23

.Fuente: Casado Martín, Celia Magaly, Gutiérrez Gaiten, Yamilet, Miranda, Martínez,





Tabla No 11 Resultados del análisis microbiológico del extracto de B. orellana a 12

meses de estudio10

Análisis Límites microbiológicos permisibles Resultados

Conteo de bacterias < 107 Ausente

Conteo de hongos < 103 Ausente

Salmonellas Ausencia Ausente

Eschericia coli Máx. 102 Ausente

Staphylococcus aureus Ausencia Ausente

Pseudomona aerugenosa Ausencia Ausente

Fuente: Casado Martín, Celia Magaly, Gutiérrez Gaiten, Yamilet, Miranda, Martínez, Migdalia,

Bilbao Revoredo, Ofelia, Díaz San Miguel, Margarita, Mena, Irma. Diseño Y Desarrollo De Una

Formulación Con Bixa Orellana L. Como Revelador De Placa Dentobacteriana 2009 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Una vez desarrollada las 2 formulaciones a base de Bixa Orellana, se realizó un

estudio hedónico o también llamado de placer, para evaluar su aceptabilidad, diseñando

una prueba momentánea, con valoración de atributos individuales y elementos de

preferencia. Se escogió la escala Hedónica de 5 puntos, en la que participaron un total de

62 personas.10

También se analizó microbiológicamente la formulación a los 12 meses de estudio. 10

Tabla No 12 Resultados de la prueba de preferencia o aceptación realizada a 62 jueces no adiestrados. 10

Opciones

Número de individuos

olor Color sabor

Muestra 1 Muestra 2 Muestra 1 Muestra 2 Muestra 1 Muestra 2

1. Me gusta mucho 21 8 1 2 4 1

2.Me gusta 32 32 44 33 15 14

3.Ni me gusta ni me

disgusta 8 17 16 24 29 35

4.Me disgusta 1 5 1 3 14 10

5.Me disgusta mucho 0 0 0 0 0 2

Media (puntos) 4.18 3.69 3.72 3.55 3.14 3.03

Muestra 1:Formulación con presencia de esencia de

frambuesa

Muestra 2:Formulación con presencia de esencia

de naranja




Dentobacteriana 2009 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Tabla No 13 Estabilidad de la formulación de B. Orellan. 10

Tiempo

(meses) pH ± DS

Índice de refracción ±

DS Densidad Relativa ± DS

0 5,63 ± 0,011 1,348 ± 0,000 1,029 ± 0,001

3 5,43 ± 0,041 1,346 ± 0,004 1,027 ± 0,110

6 5,62 ± 0,024 1,347 ± 0,001 1,030 ± 0,000

9 5,60 ± 0,190 1,346 ± 0,030 1,024 ± 0,017

12 5,41 ± 0,023 1,347 ± 0,000 1,027 ± 0,001

DS – Desviación Estándar.




Dentobacteriana 2009 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

Tabla No 14 Resultados del análisis microbiológico a la formulación de B. orellana a

12 meses de estudio.10

Análisis Límites microbiológicos permisibles Resultados

Conteo de bacterias < 107 Ausente

Conteo de hongos < 103 Ausente

Salmonellas Ausencia Ausente

Eschericia coli Máx. 102 Ausente

Staphylococcus aureus Ausencia Ausente

Pseudomona aerugenosa Ausencia Ausente






Estadísticamente la formulación reveladora de placa dental mostró un

comportamiento estable, al no ponerse de manifiesto diferencias significativas entre los

valores encontrados anteriormente. Igualmente pudo corroborarse, desde el punto de vista

organoléptico y microbiológico, su estabilidad. 10

Durante todas las etapas de la investigación diseñaron ensayos para poder hallar

carotenos , para lo cual se utilizó 10 ml de muestra evaporados al aire y disueltos en

acetona mediante calentamiento suave sobre baño maría, luego se emplea el residuo que se

obtiene en el primer ensayo, para filtrarlo y redisuelto en 2 ml de cloroformo, y el reactivo

de Carr-Price y posteriormente puntear el producto obtenido y valorar su estabilidad

cromatográfica.10

Figura No 7 Comportamiento cromatográfico de la formulación reveladora de placa dentobacteriana, en su evaluación inicial (I) y al concluir el estudio (II) a los 12 meses 10

Fuente: Casado Martín, Celia Magaly, Gutiérrez Gaiten, Yamilet, Miranda,

Martínez, Migdalia, Bilbao Revoredo, Ofelia, Díaz San Miguel, Margarita, Mena, Irma.

Diseño Y Desarrollo De Una Formulación Con Bixa Orellana L. Como Revelador De

Placa Dentobacteriana 2009

Este estudio hizo posible desarrollar una formulación reveladora de placa

dentobacteriana, como una alternativa viable, para reemplazar los colorantes artificiales,

mismos que podrían provocar daños a la salud humana al mostrar estabilidad térmica,

física y cromatografía, condiciones que son evaluadas para considerar la aparición de

fármacos nuevos en el mercado.10

Han sido múltiples las ideas de limpieza dental practicados a lo largo de la historia

tanto por los aborígenes como gente civilizada, siendo en la actualidad necesaria la

identificación de placa dentobacteriana con productos específicos, ya que a menos que la

encontremos en cantidades exageradas no la podremos visualizar debido a que

clínicamente es invisible.

Los productos reveladores de placa facilitan la visualización de su presencia en las

superficies dentales, siendo grandes auxiliares en la higiene bucal constituyéndose incluso

en una herramienta educativa y de automotivación para mejorar el cepillado dental y

consecuentemente disminuir las patologías orales cuyo origen sea el acumulo de placa

bacteriana.

De tal manera que con el avance de la medicina natural se pretende proponer como

posible fuente de formulación reveladora a la Bixa Orellana, dado sus diferentes

propiedades medicinales, buscando reemplazar una vez más los productos sintéticos por los

naturales.

2.4.12 Estudios Toxicológicos

Bautista AR et al 30 menciona:

‘El aumento del uso humano de achiote (Bixa Orellana L), un colorante alimentario

de color rojo amarillo, exige la generación de los datos de toxicidad.’

1.- Es realmente extraño encontrar cuadros de alergia al contacto con el achiote. Se hizo un estudio experimentando en ratas Wistar macho a las cuales se les administró una dosis 2 000 mg/kg/día de bija, demostrando su nula toxicidad.11, 30

2.- Se experimentó en mucosa oral de hámsteres al aplicar sobre ella un extracto a base de bija evaluando el grado de irritabilidad dando como resultado un índice de irritación de 0,0 y sin la aparición de otros signos clínicos.11

3.- Ante la administración oral de un extracto de achiote durante 13 semanas en ratas Sprague-Dawley (grupos de 10 machos y 10 hembras) tampoco presentaron signos tóxicos o letalidad.11, 28

Las ratas fueron alimentadas con extracto de achiote en niveles alimentarios de 0, 0,1, 0,3 y 0,9% durante las 13 semanas sin manifestar efectos adversos relacionados con el peso corporal, oftalmología y hematología .11,28

4.- Estudios realizados para determinar la acción cicatrizante del achiote clasificaron al extracto alcohólico de Bixa Orellana como una formulación no irritante dérmico primario, al realizar primero aquel ensayo en piel intacta de conejos Nueva Zelanda y posteriormente en piel dañada.11, 18

5.- Embriotoxicidad y toxicidad maternal: Durante un estudio realizado en ratas Wistar se administró Annatto, pigmento del achiote a dosis de 0, 31.2, 62.5, 125, 250 y 500 mg / kg de peso corporal / día por sonda, a los 6-15 de embarazo y las cesáreas se realizaron en el día 21.11, 20

Los fetos se pesaron y se examinaron en busca de anomalías externamente visibles. Un tercio de los fetos de cada camada fue examinado en busca de anomalías viscerales por una técnica de microsección. Los fetos restantes se limpiaron y se tiñeron con rojo de alizarina S para la evaluación esqueleto. No se observó ningún efecto adverso de achiote en las madres. 20

Francisco Paumgartten et al 20 menciona:

‘No hay un aumento de la mortalidad embrionaria y sin reducción del peso corporal fetal se observaron entre las ratas expuestas al achiote. El achiote no indujo ni incrementó ningún aumento en la incidencia de anomalías visibles externamente, viscerales o esqueléticas en la descendencia expuesta concluyendo que su toxicidad es nula tanto para el feto como la madre.’20

Por lo tanto, el estudio concluye que la dosis de achiote sin efectos adversos observados para la toxicidad materna y del embrión fue de 500 mg / kg de peso corporal / día por vía oral. 20

6.- Existe un reporte de caso de shock anafiláctico al extracto del achiote, con síntomas como la urticaria, angioedema e hipotensión severa 20 minutos después ingerir leche y cereal que contenía colorante annatto, de manera que se pensó que la reacción alérgica

fue causada por algunas impurezas proteicas más que el contacto con el pigmento en sí, de hecho, ese ha sido el único caso de anafilaxia conocido y reportado en la larga historia del achiote como colorante alimenticio.11, 29

La ingesta de colorantes naturales muestran un riesgo muy bajo de actividad adversa a diferencia de los sintéticos y que el achiote es una causa poco frecuente de anafilaxia potencial.11, 29

2.4.13 Precauciones Y Contraindicaciones.

Evitar en pacientes con alergia conocida/hipersensibilidad a la Bixa Orellana, sus constituyentes, ni ninguno de los miembros de la familia Bixaceae.12

Usar con precaución en los pacientes que toman agentes antihipertensivos, como el Achiote, teóricamente, puede potenciar los efectos de los medicamentos antihipertensivos. 12

Usar con precaución en pacientes con antecedentes de estreñimiento o aquellos que están utilizando, como laxante, basado en estudios en animales, el annatto puede tener actividad antidiarreicos y antagonizar los efectos.12, 15

Usar con cautela en pacientes que usan los depresores del SNC, sobre la base de un estudio en animales, el extracto de metanol de la Bixa Orellana ejerce efectos sedantes. 27

Usar con cautela en pacientes que usan medicamentos administrados oralmente, pues el extracto de metanol de la Bixa Orellana reduce la motilidad gastrointestinal en estudio en animales y teóricamente pueden alterar la absorción de los medicamentos.12, 15

Evitar en mujeres embarazadas o lactantes y niños en dosis mayores de las que normalmente se encuentran en los alimentos. No hay suficientes datos clínicos en humanos sobre su total seguridad en este momento, aunque el estudio animal en ratas sugieren que el achiote no fue tóxica para la madre o el embrión.11, 12, 20

El uso de la Bixa Orellana durante el embarazo y la lactancia no ha sido estudiado en ensayos clínicos en humanos, no lo suficiente sin embargo, es considerado seguro cuando se utilizan de forma oral en las cantidades presentes en los alimentos, debido a su larga historia de uso como aditivo alimentario. El uso de plantas medicinales a base de achiote durante el embarazo y la lactancia no es recomendable, debido a la insuficiencia de datos disponibles aun. 12

2.4.14 Seguridad

El Achiote generalmente es bien tolerado, aunque se han presentado raros reportes

de efectos adversos, los cuales están referidos a individuos sensibles. De acuerdo a la FDA

(siglas en inglés, Food and Drug Administration), el perfil toxicológico de las semillas de

Achiote y extracto han sido ampliamente investigados siendo uno de los 13 pigmentos

derivados de fuentes naturales que actualmente son permitidos por la US-FDA y la CEE al

ser reconocido como seguro para el consumo humano en el uso de productos alimentarios

pero aún hay poca información para su uso medicinal. 12, 31, 32

Probablemente segura: Cuando se usa por vía oral en cantidades de alimentos en

individuos que no sean sensibles y cuando se utilizan medicinalmente en pequeñas dosis de

10-20 mg de polvo de Bixa Orellana, basado en la opinión de expertos y estudio en

animales.12

Probablemente insegura: Cuando utilizada por personas que pueden ser o son

alérgicas o hipersensibles a los constituyentes de la Bixa Orellana o cualquier miembro de

la familia Bixaceae. 12

2.4.15 Obtención Del Colorante, Annatto O “Achiote”

Hay diferentes maneras de extraer el colorante, unas algo anticuadas pero con los

años se ha mejorado las técnicas.

Torres Jorge 7(p 126 menciona:

‘Una de las formas más sencillas de obtener el preciado colorante [Bixina] es

colocar las semillas seleccionadas en agua caliente hasta que desprendan el

colorante después de dejarlas en reposo algunos días se procede a filtrar, siendo la

parte asentada el colorante. Al prolongar la ebullición se consigue una pasta, que se

conserva muy bien después de secada, en hojas de plátano, maíz.’

2.4.15.1 Extracción Rudimentaria

Las semillas del achiote se colocan en agua hirviendo con el fin de que el tiente se

desprenda, después se filtra separando así las semillas y dejamos fermentar la pasta por lo

menos una semana, finalmente se elimina el agua quedando solamente la pasta, la cual

podemos modelar el para darle la forma que deseamos y ofrecer al consumidor.22

También uno de los procesos más arcaicos, consiste en machacar las semillas y a

la masa resultante agregarle una cantidad suficiente de agua, luego se deja hervir por un

lapso de 120 a 180 minutos. Al retirarla del fuego se exprime bien con una tela por

ejemplo, quedando lista para embolsar.22

La pasta de achiote para la experimentación de éste proyecto fue obtenida siguiendo

las costumbres y tradiciones del grupo étnico denominado los Tsáchilas, constituyéndose

un proceso sencillo y arcaico que no dificultó la obtención, el mismo que consiste

únicamente en frotar las semillas contra una hoja de la misma plantación o d cualquier tipo

o en las manos, quedando expresamente el colorante crudo.

Finalmente lo recolectamos con la ayuda de una espátula y lo colocamos en un

recipiente para posteriormente pesar (5gr) y hacer la mezcla con los solventes escogidos, a

temperatura ambiente, para esta experimentación.

Figura N° 8.- Obtención rudimentaria de la pasta de achiote . Fotografía tomada por: Karen Molina

2.4.16 Placa Dentobacteriana 2.4.16.1 Naturaleza De La Biopelícula

El termino biopelícula se describe como una estructura que constituye el modo de

crecimiento preferido de muchas o quizá de casi todas las especies bacterianas,

comunidades microbianas relativamente indefinibles que colonizan una amplia gama de

superficies húmedas, entre ellas la cavidad bucal, la cual es de nuestro interés. 5

La biopelícula consiste en una o más comunidades de microorganismos incluidos

en un glucocalix, asociada o fijada a una superficie dentaria o a cualquier otro material

duro no descamativo, cuya supervivencia a largo plazo de las especies de la biopelícula son

más probables si esas especies colonizan múltiples sitios.5,6

La biopelícula permite que los microorganismos se adhieran a las superficies y

proliferen. Por ende las bacterias fijadas (sésiles) que crecen en esta estructura poseen una

amplia serie de características que les otorgan muchas ventajas a diferencia de las células

bacterianas sueltas o libres. 5

Ventajas tales como: contacto físico, intercambio metabólico, comunicación

mediada por pequeñas moléculas señal, intercambio de información genética, protección

ante microorganismos competidores, protección ante factores ambientales y de sustancias

potencialmente toxicas como productos químicos o antibióticos letales (mecanismos de

defensa del huésped), facilitan el procesamiento y la ingesta de nutrientes, nutrición

cruzada (una especie proporciona nutrientes a otra ). 5

2.4.16.2 Biopelícula O Placa Dental

Debemos tener claro que las piezas dentales no son las únicas superficies con una

cubierta bacteriana, la adsorción de bacterias a superficies es un fenómeno natural

generalizado, pero en la cavidad bucal los depósitos bacterianos encontrados se han

denominado placa dental o placa bacteriana. 5

Barrancos 2 (p300) :

‘La biopelícula o placa dental que baña las superficies dentarias….. corresponde a

una entidad bacteriana proliferante con actividad enzimática que se adhiere

firmemente a las superficies dentarias y que por su actividad bioquímica y

metabólica ha sido propuesta como el agente etiológico principal de la caries

dental.’

Descrita como una acumulación heterogénea de una comunidad microbiana muy

variada, aerobia y anaerobia, rodeada por una matriz intercelular de polímeros de origen

salival y microbiano cuya composición varía según el tiempo de maduración y la región de

la pieza dentaria colonizada. 2

Los microorganismos pueden adherirse o depositarse sobre las paredes de las piezas

dentarias u otras superficies como encía o restauraciones, y si los microorganismos

consiguen los sustratos necesarios para sobrevivir y persisten mucho tiempo, pueden

organizarse y causar enfermedades y con el tiempo terribles consecuencias.5

La acumulación y el metabolismo de las bacterias en las superficies de la cavidad

oral se consideran causas principales de caries dental, gingivitis, periodontitis, infecciones

periimplantaria y estomatitis. Los depósitos abundantes suelen asociarse con la enfermedad

localizada en los tejidos blandos y duros subyacentes. 5

Las encías enrojecidas, inflamadas o que sangren pueden ser los primeros signos de

la presencia persistente de placa dental causante de gingivitis, si la enfermedad es ignorada,

los tejidos que mantienen a los dientes en su lugar pueden comenzar a destruirse y

eventualmente evolucionar a enfermedad periodontal cuyo fin radica en la perdida de

dientes.5

La placa dental difícilmente puede ser observada, a menos que sea teñida. Su

consistencia es blanda, mate, color blanco-amarillento y no puede ser eliminada con agua a

presión. Varía de un individuo a otro así como también su localización anatómica. Si la

placa dental se calcifica, puede dar lugar a la aparición de cálculos o tártaro. 5

Algunos estudios en los animales libres de gérmenes demostraron que la ausencia

de bacterias significaba salud dentogingival óptima. Así los estudios clínicos probaron que

la eliminación mecánica de la placa dental en la mayoría de los pacientes previene las

enfermedades orales.5

Al analizar el ecosistema de la cavidad oral 4podemos decir q la placa puede acumularse en

diversas zonas.

Tabla 15.- Zonas De Acumulación De La Placa Dental. 5

Supragingival

(superficies duras) Subgingival otros

Dientes bolsas periodotales Epitelio bucal

aditamentos de implantes bolsas periimplantares paladar

Restauraciones cemento radicular piso de la boca

Protesis Implantes dorso de la lengua

epitelio de la bolsa amígdalas

Fuente: Lindhe. Periodontología Clínica E Implantología Odontológica. 5a ed.

Argentina, Buenos Aires: editorial Médica Panmericana: 2009 Elaborado por: Karen Gabriela Molina Barriga

2.4.16.3 Hipótesis De La Placa Inespecífica

Se suponía que existía una relación directa entre la cantidad de microorganismos y

la intensidad del efecto patógeno, pero no se tomaba en consideración las diferencias

biológicas relevantes en la composición de la placa.5

Lindhe 5 (p184) menciona:

‘se demostró que esta masa bacteriana, denominada placa, producía numerosos

elementos irritantes, como ácidos, endotoxinas y antígenos, que con el tiempo

invariablemente disolvían los dientes y destruían los tejidos de sostén. ’

Según Lindhe 5 (p184):

‘no se conocía en detalle la necesidad de discriminar entre depósitos bacterianos de

distintos pacientes o entre sitios sanos o enfermos, [pues] se pensaba que las

personas con enfermedad periodontal avanzada tenían una resistencia débil a la

placa bacteriana en conjunto o se les culpaba de realizar cuidados higiénicos

inadecuados.’

Se suponía que la agresividad de distintos grupos bacterianos en diferentes zonas

era de la misma intensidad.

2.4.16.4 Hipótesis De Placa Específica

Según Lindhe 5(p184):

‘….se reconoció que la propensión de los sitios inflamados a sufrir una destrucción

tisular permanente era [ya] de una naturaleza más específica, porque no todas las

gingivitis parecían avanzar ….. hacia la periodontitis’

Ante la constante presencia de diferentes especies o cantidades bacterianas en una

periodontitis, no existía destrucción tisular activa evidente clínicamente ni pérdida de

inserción como se esperaría. 5

Entonces determinaron que no importa la cantidad de microorganismos presentes

sino que tipos de agente patógenos están involucrados, por tanto se hizo necesario realizar

un estudio de la composición biológica de la placa bacteriana en diferentes zonas de la

boca y condiciones del huésped.5

2.4.16.5 Composición De La Biopelícula

Según Barrancos 2 (p 300) :

‘La composición de la biopelícula varía según el tiempo de maduración y la región

de la pieza dentaria colonizada…… es una estructura formada por dos matrices: la

capa salival o cutícula acelular adquirida y la capa formada por microorganismos y

polímeros extracelulares’

Cutícula acelular adquirida

Barrancos 2 (p 301) :

‘Es una biopelicula delgada, amorfa y electrodensa adyacente a la superficie del

esmalte, cuyo grosor varia según el sitio pero se ha estimado en 1 a 2 um.’

La película adquirida del esmalte se forma en no más de dos horas en una superficie

dental limpia a la cual se la denomina cutícula o película temprana. Con el transcurrir del

tiempo sufre modificaciones y se transforma en una película tardía en donde se encuentran

componentes de la saliva, productos bacterianos y exudado gingival

El texto indica que se trata de una estructura carente de microorganismos y sus

productos están formados por proteínas y glucoproteinas. En las cutículas las

fosfoproteínas de la saliva participan en el proceso de remineralización - desmineralización

y asi controlan la solubilidad de las superficies mineralizadas y previenen la formación del

calculo.’

Capa formada por microorganismos y polímeros extracelulares

Barrancos nos dice 2 (p301) :

‘En la colonización inicial de las superficies dentarias y en su desarrollo y

multiplicación son varios los mecanismos que intervienen dentro de la biopelícula o

placa dental: Adherencia a las película adquirida o colonización primaria,

agregación interbacteriana o colonización secundaria y multiplicación.’

2.4.17.6 Matriz De La Placa

Material presente entre las bacterias de la placa dental que constituye

aproximadamente el 25% del volumen de la placa. 5

Se trata de una estructura formada por muchas sustancias provenientes del huésped,

las bacterias y la dieta, sus principales componentes macromoleculares son las proteínas

salivales y los polisacáridos bacterianos, aunque también se encuentran lípidos y

nucleótidos. 5

Lindhe 5 (p191) dice:

‘….algunos polisacáridos de la matriz de la placa están bien identificados tales

como: fructanos (levanos) y glucanos; los fructanos son sintetizados en la placa a

partir de la sacarosa de la dieta y constituyen una reserva energética que puede ser

utilizada en situaciones de aporte escaso de azúcar [y] los glucanos también se

sintetizan a partir de la sacarosa.’

Entre los glucanos podemos mencionar el dextrano, que también sirve como reserva

energética, y el mutano que no se degrada con facilidad, actuando como esqueleto de la

matriz.5

En ausencia de carbohidratos en la dieta, los polímeros de la matriz de la placa

constan principalmente de glicoproteína salival, parcialmente degradada por bacterias

Muchas de las proteínas parecen derivar de la saliva, y algunas otras del suero, e

incluyen albumina, inmunoglobulinas (IgA, IgG e IgM), lisozimas y amilasa pero el

principal componente de la placa es el agua (80-85%), más en las células que en la matriz. 5

Según algunos estudios indican que tanto las proteínas y los hidratos de carbono

constituyen el grueso del material orgánico mientras que los lípidos aparecen en cantidades

inferiores. 5

Lindhe 5 (p189) menciona:

‘tres fuentes pueden contribuir a la matriz intermicrobiana: los microorganismos de

la placa [en degeneración o muertos también pueden contribuir], la saliva y el

exudado gingival.’

Las diferentes especies microbianas poseen vías metabólicas y capacidad para

sintetizar material extracelular bien diferenciadas, por lo que la matriz de la placa dental

varía de una región a otra. Por ejemplo varios estreptococos bucales sintetizan levanos y

glucanos a partir de la sacarosa de la dieta observándose un componente fibrilar en la

matriz entre los cocos Gram +, filamentos que se extienden desde la superficie bacteriana a

la superficie dental.5

En otras regiones las matriz tendrá un aspecto granular u homogéneo, pues al

presentar microorganismos Gram -, la matriz intermicrobiana se caracteriza por la

presencia de vesículas pequeñas rodeadas por una membrana trilaminar, y probablemente

estas vesículas contengan endotoxinas y enzimas proteolíticas y que participen en la

adhesión entre bacterias.5

2.4.16.7 Formación De La Placa

Según Lindhe 5 (p184):

‘La capacidad de adherirse a las superficies es una propiedad general de casi todas

las bacterias, [esto] depende de una serie…de interacciones, a veces muy

específicas, entre la superficie por colonizar, el microorganismo y el medio

líquido.’

Después de la inmersión de un sustrato sólido en el medio liquido de la cavidad

oral, o tras la limpieza de las superficies solidas de la boca, inmediatamente las

macromoléculas hidrófobas comienzan a adsorberse a la superficie para formar una

película condicionante, denominada película adquirida. 5

Esta película adquirida está compuesta por diversas glicoproteínas salivales

(musinas) y anticuerpos. La película condicionante altera la carga y la energía libre de la

superficie, aumentando así la eficiencia de la adhesión bacteriana. 5

Las bacterias se adhieren de diferentes maneras a estas superficies recubiertas, ya

sea por estructuras de adhesión especifica como polímeros extracelulares y fimbrias, que

les permite adherirse rápidamente a la superficie cubierta por la película adquirida,

mientras que otras cepas para unirse con firmeza necesitan una exposición prolongada.5

La masa bacteriana tiende a aumentar debido a la proliferación continua microbiana

adherida, adhesión de nuevas bacterias y síntesis de polímeros extracelulares. al aumentar

el espesor de la placa la difusión hacia adentro y afuera de la biopelícula es cada vez más

difícil, por ejemplo la difusión de oxígeno, elemento importante para la capacidad

bacteriana de crecer y multiplicarse, varía según los diferentes niveles ya que las cepas

bacterianas superficiales utilizan rápidamente este elemento, se genera una gradiente de

oxígeno y finalmente las condiciones de anaerobiosis total se dan en las capas más

profundas de los depósitos. 5

Los suministros de nutrientes proporcionados por la fase acuosa, es decir la saliva,

también decrecen.5

Los nutrientes provenientes de los productos de la dieta disueltos en la saliva,

constituyen una fuente importante para las bacterias de la placa supragingival, pero una vez

formada la bolsa periodontal profunda, las condiciones nutricias de las bacterias tienden a

cambiar ya que las sustancias disueltas en la saliva ya serán muy limitadas.5

Entonces estos microorganismos de la bolsa obtendrán sus nutrientes de los tejidos

periodontales y de la sangre, pues muchas bacterias halladas en estos sitios producen

enzimas hidrolíticas con las que pueden degradar las macromoléculas complejas del

huésped, a péptidos y aminoácidos simples, siendo estas enzimas factores importantes en el

proceso destructivo de los tejidos periodontales. 5

La colonización primaria está dado por cocos Gram+ anaerobios facultativos, estos

son adsorbidos sobre las superficies cubiertas por la película poco tiempo después de la

limpieza mecánica, a las 24 horas esta placa está compuesta principalmente por

estreptococos, donde el S. sanguis es el más destacado.5

Luego colonizaran bacilos Gram+, que en un inicio se encuentran en números muy

bajos pero que proliferarán gradualmente hasta incluso superar a la cantidad de cocos, en

esta etapa predomina las especies de Actynomices.5

Los receptores de superficie de los cocos y bacilos Gram+, permiten la adherencia

ulterior de microorganismos gramnegativos con menor capacidad de adherencia directa a la

película, así se unirán entonces Veillonella, las fusobacterias y otras especies Gram-

anaerobias, por ello con el tiempo se unen grandes cantidades de microorganismos Gram -

.5

2.4.16.8 Película Adquirida

La formación de ésta estructura es la primera etapa en la aparición de la placa

dental, pues sobre la superficie del esmalte empieza a depositarse una lámina delgada y

amorfa de 0,1 y 1,0 micrómetros de espesor, la misma que está compuesta por proteínas y

glicoproteínas de origen salival, fluido crevicular, desechos bacterianos y células de los

tejidos unidas a la hidroxiapatita del esmalte.’13

La película formada actúa como una cerca protectora proporcionando lubricación a

las superficies dentales, impidiendo que el tejido se seque. Posee moléculas que funcionan

como sitios de unión para la adherencia de microorganismos y enzimas de origen salival,

como las lizosimas, amilasas y peroxidasas, las mismas que favorecen la colonización

bacteriana sobre la superficie de esta película. 13

2.4.16.9 Mecanismo De Adherencia Dentobacteriana

La principal estructura para la adherencia [bacteriana] son las extensiones pilosas

de la pared celular, las cuales están formadas por polisacárido o proteína. 5

Muchas especies bacterianas presentan estructuras de superficie tales como

fimbrias y las fibrillas ayudando a su fijación a diferentes superficies. Se han detectado

fimbrias en varias especies bucales entre las cuales se encuentran Actinomyces naeslundii,

P. Gingivalis, A.actinomycetemcomitans y algunas cepas de estreptococo, como

S.salivarius, S.parasanguinis.5

Las fibrillas también pueden encontrarse en varias especies bacterianas bucales, las

mismas que son morfológicamente diferentes y más cortas que las fimbrias y pueden

distribuirse en forma densa o dispersa en la superficie celular. Las especies bucales que

poseen fibrillas incluyen S.salivarius, Pr.intermedia, S.mutans.5

2.4.16.10 Adherencia A La Película Adquirida (Colonización Primaria)

La característica clave de una biopelícula es que las microcolonias que habitan en su

interior se adhieren a una superficie solida no descamativa.5

Barrancos 2 (p301) nos dice:

‘Una vez establecida la película adquirida y con una falta de higiene oral adecuada

se depositan las primeras colonias bacterianas especificas [donde] el primero en

colonizar es especialmente Streptococcus sanguis.’

2.4.16.11 Colonización Secundaria: Agregación Interbacteriana

Barrancos 2 (p301) nos dice:

‘El desarrollo bacteriano en la biopelícula o placa dental es un proceso progresivo

[aumentando] su grosor y complejidad… [esta] etapa de colonización secundaria y

maduración, dependerá exclusivamente de la sacarosa y de la síntesis extracelular

de polímeros de glucosa a partir del desdoblamiento de la sacarosa en glucosa y

fructosa.’

En relación con lo anterior, Barrancos 1(p301) menciona:

‘En presencia de sacarosa [los] S.mutans sintetizan polisacáridos extracelulares

llamados mutános (glucanos insolubles) que actúan como adhesivos extracelulares

para unirlos entre si y al diente. A medida que la biopelicula crece, se observa un

cambio en los tipos morfológicos de las bacterias presentes en ella.’

Colonización secundaria: multiplicación

Barrancos 2 (p301) menciona:

‘Al principio la biopelicula estaba formada por cocos grampositivos, pero….

[posteriormente] se desarrolla una compleja población de cocos, bacilos y

filamentos grampositvos. Las condiciones acidogénicas creadas por los

colonizadores primarios facilitan el desarrollo de diferentes microorganismos como

Veillonella y Lactobacillus, que prefieren un medio acido para su desarrollo.’

Al producirse el aumento de grosor de la biopelícula con la incorporación y

proliferación de diversos microorganismos, el continuo depósito de proteínas salivales y

producción de mutano permite la maduración bacteriológica y estructural. 2

Estos microorganismos requerirán energía para persistir, la cual será tomada de los

hidratos de carbono fermentables provenientes de la dieta. Estos hidratos de carbono son

desdoblados por la vía glucolítica y se obtendrán: ATP, CO2, ácido láctico [y] otros ácidos

orgánicos en menor cantidad como el acético y el butírico….[los cuales] van a producir la

desmineralización de los cristales de hidroxiapatita y así se iniciaría el proceso carioso [y

demás patologías]”

CAPÍTULO III

3. METODOLOGÍA

Diseño experimental en 4 troqueles de 10 piezas dentarias de seres humanos

donadas para el estudio.

3.1 TIPO DE DISEÑO DE INVESTIGACIÓN

• Experimental: no me limito a observar y envuelve modelos experimentales (piezas

dentales naturales extraídas que son troqueladas )

Se formarán 4 troqueles de 10 piezas dentales cada uno en los que se aplicará 3

sustancias de diferentes concentraciones a base de Bixa Orellana y compararlas con un

revelador sintético de placa dentobacteriana.

3.2 TAMAÑO DE LA MUESTRA

Muestra no aleatoria conformada por 40 piezas dentales humanas donadas para el

estudio.

3.3 DEFINICIÓN DE VARIABLES

3.3.1 Variables Dependientes

• Revelar la presencia de placa dentobacteriana mediante el colorante obtenido de las

semillas del achiote diluido en agua, aceite de coco y aceite de cocina.

3.3.2 Variables Independientes

• Características del achiote

• Solubilidad del agua

• Solubilidad del aceite de coco

• Solubilidad del aceite de cocina

• Grado de tinción

Tabla 16.- Operacionalización de variables

VARIABLE

TIPO

CLASIFICACIÓN

ÍNDICE CATEGÓRICO

Piezas dentales

Independiente

Cuantitativa

Molares : 10

Premolares : 30

Color de las sustancias

obtenidas

Independiente

Cualitativa

rojizo u otro: si o no

Solubilidad del agua con

achiote

Independiente

Cualitativa

insoluble

poco soluble

muy soluble

no amerita

Solubilidad del aceite de

cocina con achiote

Independiente

Cualitativa

insoluble

poco soluble

muy soluble

no amerita

Solubilidad del aceite de

coco con achiote

Independiente

Cualitativa

insoluble

poco soluble

muy soluble

no amerita

Grado de tinción

Independiente

Cualitativa

mala

buena

excelente

Tinción de

placa bacteriana

Dependiente

Cualitativa

Si

no

Elaboración y Fuente: KAREN GABRIELA MOLINA BARRIGA

3.4 CRITERIOS DE INCLUSIÓN

• Piezas dentales definitivas

• Premolares y molares superiores e inferiores sanos extraídas bajo indicación

terapéutica.

3.5 CRITERIOS DE EXCLUSIÓN

• Premolares y molares superiores e inferiores sin presencia de caries, destrucciones

coronarias por trauma mecánico, hipoplasia.

• Piezas dentales temporales

3.6 MÉTODOS DE RECOLECCION DE INFORMACIÓN

Para obtener datos y resultados veraces del proyecto en curso, se ha diseñado una ficha de

“Recolección de datos” (Anexo #5).

Procedimiento

Primero limpiamos las piezas dentales donadas para el estudio, para la elaboración de los

troqueles.

Figura N° 9.- 4 Troqueles de 10 piezas dentales cada uno. Fotografía tomada por: Karen Molina

Figura N° 10.- Elaboración de los 4 troqueles. Fotografía tomada por: Karen Molina

Figura N° 11.- Resultado final de la elaboración de troqueles y colocación de comida con

el fin de crear placa bacteriana

Fotografía tomada por: Karen Molina

Son 4 troqueles de 10 piezas dentarias cada uno, codificados por fines metodológicos

en los cuales se procederá de la siguiente manera:

Una vez obtenido el colorante en pasta a base de Bixa Orellana es colocada en 3 tubos de

ensayo, 5 gr respectivamente con el fin de realizar la mezcla con 3 diferentes solventes a 5

ml cada uno. El experimento es realizado a temperatura ambiente, agitando cada tubo de

ensayo con su soluto y solvente respectivo.

Cada mezcla o solución es codificada de la siguiente manera:

#1: pasta de achiote + agua

#2: pasta de achiote + aceite de cocina

#3: pasta de achiote + aceite de coco

Figura N°12.- pasta de achiote + agua Figura N° 13.- pasta de achiote + aceite

de cocina

Fotografía tomada por: Karen Molina Fotografía tomada por: Karen Molina

Figura N° 14.- pasta de achiote + aceite de coco


Figura N° 15.- Mezcla solución #1 Figura N° 16.- Mezcla solución #2

Fotografía tomada por: Karen Molina Fotografía tomada por: Karen Molina

Figura N° 17.- Mezcla solución #3


Figura N° 18.- Agitación de cada solución


Al terminar las mezclas valoramos el grado de solubilidad de cada sustancia y lo

registramos en la ficha de “Recolección de datos” apreciando a la vez la coloración de la

misma.

Figura N° 19.- Solubilidad de la solución #1






Figura N° 22.- Solubilidad de las 3 formulaciones.


Cada troquel será rotulado y codificado para el análisis de resultados en la tinción de

placa bacteriana, y se procederá de la siguiente manera:

Troquel # 1: conformado por premolares preparados para la tinción con la solución #1

(5gr de pasta de achiote/ 5ml de agua), se distribuye la solución en las 10 piezas dentales y

se enjuaga para valorar su capacidad y calidad como revelador natural de placa bacteriana.

Figura N° 23.- Colocación de la solución #1 en jeringas de 5 ml.


Figura N° 24.- solución obtenida (#1).


Figura N° 25.- Aplicación de la solución #1.


Figura N° 26.- Enjuague troquel #1



(5gr de pasta de achiote/ 5ml de aceite de cocina), se distribuye la solución en las 10 piezas

dentales y se enjuaga para valorar su capacidad y calidad como revelador natural de placa

bacteriana.








(5gr de pasta de achiote/ 5ml de aceite de coco), se distribuye la solución en las 10 piezas

dentales y se enjuaga para valorar su capacidad y calidad como revelador natural de placa

bacteriana.







Troquel # 4: conformado por molares preparados para la tinción con un revelador de

placa convencional estandarizado “PROQUIDENT”, se distribuye la solución en las 10

piezas dentales y se enjuaga para valorar su capacidad y calidad como revelador sintético

de placa bacteriana.

Figura N° 33.- Revelador convencional “PROQUIDENT”


Figura N° 34.- Aplicación del revelador convencional “PROQUIDENT”




Tras la tinción de los troqueles se observa los resultados, los mismos que serán

anotados en la ficha de “Recolección de datos”, tales como:

Capacidad de tinción de placa bacteriana bajo 2 índices categóricos: si o no

Calidad de la tinción bajo tres índices categóricos: mala, buena, excelente.

Figura N° 36.- Resultado de la tinción de las 3 soluciones.


Figura N° 37.- Resultado de la tinción con PROQUIDENT.


Tras la tinción de los troqueles se observa los resultados, los mismos que serán

anotados en la ficha de “Recolección de datos”, tales como:

Capacidad de tinción de placa bacteriana bajo 2 índices categóricos: si o no

Calidad de la tinción bajo tres índices categóricos: mala, buena, excelente.

Tabla 17.- Cronograma de trabajo.

HORA

ACTIVIDAD

12:00pm - 13:00 pm

Preparación de las soluciones liquidas

13:00 pm - 13:20 pm

Obtención de información fotográfica.

14:30 pm – 16:00 pm

Tinción de piezas dentales con cada colorante (revelador

convencional estandarizado PROQUIDENT, achiote + aceite

de coco, achiote + aceite de cocina y achiote + agua) y

Enjuague de las piezas dentales.

16:00 pm - 17:30 pm

recolección de la información fotográfica y análisis de

resultados

Elaboración Y Fuente: Karen Gabriela Molina Barriga

3.7 ANÁLISIS ESTADÍSTICO

Para el análisis de la presencia/ausencia de placa dental y grado de tinción y

solubilidad de cada sustancia se diseñó una ficha de recolección de datos tomando a

consideración tanto variables dependiente e independientes los mismos que son tabulados

en hojas electrónicas de Excel para los cuadros y gráficos estadísticos, para luego ser

analizada estadísticamente la relación mediante Prueba de Kruskal Wallis esto con ayuda

del programa SPSS 22 (anexo #5)

3.8 RESULTADOS ESPERADOS

Se pretende descubrir y otorgar un beneficio adicional a la Bixa Orellana en el

campo terapéutico como un revelador de placa dentobacteriana natural con la misma

eficacia que el revelador de placa convencional al encontrar la disolución adecuada y

trabajar con éste producto natural para la elaboración de un revelador de placa dental que

se encargue de detectar los depósitos bacterianos cuya acumulación desencadena

patologías gingivales y dentales.

Tabla 18.- Recursos Humano y Materiales

RECURSOS MATERIALES INSUMOS DESECHABLES

EQUIPOS PAPELERIA MATERIAL

DENTAL INSTRUMENTAL

DENTAL SUSTANCIAS

Campos

desechables

Guantes

Cartón

servilletas

Cámara

fotográfica

Computa-

dora

Equipo de

pulido

Vaso

dappen

Taza de

caucho

Mechero

tubos de

ensayo

Folder

lápiz

esferográ-fico

hojas de papel

bond

cinta adhesiva

Monómero

de acrílico

Polímero de

acrílico

Alginato

Cera base

Rueda de

trapo

Rueda cola

de caballo

Alcohol

industrial

Revelador

de placa

DITONOS

Espátula de

lecrón

Espátula de cera

Aceite de coco

Aceite de cocina

Agua

semillas de

achiote


3.9 RECURSOS FINANCIEROS

Este trabajo de investigación se realiza de manera autofinanciable.

Tabla 19.- Presupuesto

RUBRO CONCEPTO VALOR

Transporte

Gastos por obligaciones contraídas con terceros

para el transporte de personas. Ej. Alquiler de

furgoneta, autos, etc.

10 $

Impresión

Reproducción de un texto escrito o dibujo en un

papel por medio de procedimientos mecánicos o

eléctricos

40 $

Materiales dentales

Materiales utilizados para la elaboración de los

troqueles y tinción: alginato , acrílico , cera base,

rueda de trapo, Rueda cola de caballo, Alcohol

industrial, Revelador de placa DITONOS

25 $

Gastos por indumentaria y accesorios destinados

Vestuario, lencería

Y prendas de

protección

a la protección (guantes, mascarillas, baberos,

campos)

2$

Materiales de oficina

Gastos para la adquisición de suministros y

materiales necesarios para el normal desarrollo de

las labores institucionales. (Papelería, carpetas,

etc)

1$

Sustancias Sustancias utilizadas para la disolución del

achiote 3$

Total

81 $


3.10 ASPECTOS ÉTICOS

Según el Registro Oficial No 279, al ser un estudio que será ejecutado en

condiciones controladas, sin compromiso con seres vivos, se trabajará con muestras

biológicas (piezas dentarias) donadas y que serán troqueladas con material e

instrumental de laboratorio estandarizado.

Las muestras biológicas empleadas en la ejecución del estudio, han sido extraídas

previo la suscripción de consentimiento informado de cada paciente bajo indicación

terapéutica y con el respectivo registro de datos en las historias clínicas

correspondientes y donadas por el odontólogo que realizo el tratamiento (anexo#1).

Se trata de una investigación cuyo beneficio se traduce en la prevención de

enfermedades orales al reunir las características de un revelador de placa ideal,

pudiendo convertirse en un nuevo producto de origen natural al servicio de la

población beneficiando no solo desde el punto de vista terapéutico al reemplazar

colorantes sintéticos por un natural a base de achiote en la detección de placa dental

ya que cada día salen del mercado por su toxicidad, sino también en el orden

económico.

Con fines de identificación y poder establecer la eficacia de la sustancia colorante a

ser utilizada en cada muestra biológica se procede a codificar utilizando números

ordinales y de ésta manera obtener resultados veraces.

Para prevenir problemas ambientales y de salud ocasionados por una mala gestión

integral de los desechos infecciosos, una vez finalizado el experimento se procederá

al desecho de las piezas dentarias, consideradas como desechos infecciosos

cumpliéndose con las normas establecidas por el MSP "MANEJO DE DESECHOS

INFECCIOSOS PARA LA RED DE SERVICIOS DE SALUD EN EL

ECUADOR" y la Facultad de Odontología de la Universidad Central del Ecuador

en cuanto a "RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE INTERNO DE DESECHOS

INFECCIOSOS" (Anexo # 2)

Beneficiario directo del presente estudio es el profesional al disponer de un producto

de bajo costo, natural y aparentemente sin efectos secundarios que perjudiquen la

integridad de los pacientes.

Beneficiarios indirectos comprenden: los pacientes al disponer de un producto

natural, seguro y benéfico, la industria y el comercio al poder adquirir y ofrecer un

producto de bajo costo y nuestro país económicamente ya que Ecuador es gran

productor y consumidor del achiote mundialmente, generando empleo desde

aquellos que cultivan y cosechan el achiote hasta los que se encarguen de su

procesado en las grandes empresas.

3.11 ESTANDARIZACIÓN

Bixa Orellana (achiote) es un colorante avalado nacional e internacionalmente por

la FDA, utilizada durante ésta investigación bajo la expectativa de que en un futuro pueda

usarse en la elaboración de un revelador natural de placa dentobacteriana, por tanto se

diluye el colorante en pasta a base de achiote en tres solventes diferentes que son: agua,

aceite de cocina y aceite de coco, a las mismas concentraciones cada solución (5

mg/ 5ml) en tubos de ensayo respectivamente, se agita hasta conseguir soluciones liquidas

para la tinción de las piezas dentales naturales que son troqueladas.

Se usa también durante el estudio un revelador de placa bacteriana aprobado por el INEN y

comercializado en nuestro País denominado “PROQUIDENT” cuya composición es:

eritrosina al 2%, metil parabeno, sacarina sódica, sorbitol, glicerina, sabor y agua.

3.12 ASPECTOS JURÍDICOS

Las piezas dentales que son usadas en el presente estudio, al ser consideradas como

"DESECHOS INFECCIOSOS" es necesario proteger el ambiente y la salud de las

personas cumpliendo con las normas establecidas por el MSP y por la Facultad de

Odontología de la Universidad Central del Ecuador para la eliminación de

desechos infecciosos. (Anexo# 1)

El presente estudio al ser in vitro no compromete la integridad y demás derechos de

las personas. El objeto del estudio, el achiote, es un colorante avalado nacional e

internacionalmente por la FDA como inofensivo y seguro para el consumo humano,

por lo cual es utilizada hoy en día por la industria textil, cosmética, farmacéutica,

láctea y cerámica, bajo la expectativa de que en un futuro pueda usarse la Bixa

Orellana (achiote) en la elaboración de un revelador natural de placa

dentobacteriana.

Para lograr los objetivos de la investigación las piezas dentales naturales empleadas

en la ejecución de la misma, han sido extraídas previo la suscripción de

consentimiento informado de cada paciente bajo indicación terapéutica y con el

respectivo registro de datos en las historias clínicas de cada paciente y donadas por

el odontólogo que realizo el tratamiento . (Anexo # 1)

Por ser un estudio ejecutado en condiciones controladas, sin compromiso con seres

vivos, únicamente con piezas dentales naturales extraídas posteriormente

troqueladas, uso de material e instrumental de laboratorio estandarizado no es

necesario el pago de seguros de vida.

CAPÍTULO IV

4 RESULTADOS

4.1 ANÁLISIS DE DATOS

Para el análisis de la presencia/ausencia de placa dental y grado de tinción y

solubilidad de cada sustancia se diseñó una ficha de recolección de datos tomando a

consideración tanto variables dependiente e independientes los mismos que son tabulados en

hojas electrónicas de Excel para los cuadros y gráficos estadísticos, para luego ser analizada

estadísticamente la relación mediante Prueba de Kruskal Wallis esto con ayuda del programa

SPSS 22. (Anexo #5)

4.2 INTRODUCCIÓN ESTADÍSTICA:

ESTADÍSTICA NO PARAMÉTRICA: Son procedimientos estadísticos para

prueba de hipótesis que no requieren de la suposición de la normalidad de la población de

la cual fue extraída la muestra y se pueden aplicar a datos de tipo cuantitativo y cualitativo.

Tabla 21.- Solubilidad de las sustancias

Prueba de Kruskal-Wallis

Rangos

SUSTANCIAS N Rango

promedio

SOLUBILIDAD

5gr de pasta de achiote + 5ml de agua 10 5,50

5gr de pasta de achiote + 5ml de aceite de cocina 10 20,50

5gr de pasta de achiote/ 5ml de aceite de coco 10 20,50

Revelador De Placa Convencional Estandarizado

"PROQUIDENT" 10 35,50

Total 40

Estadísticos de prueba

SOLUBILIDAD

Chi-cuadrado 39,000

gl 3

Sig. asintótica 0,000

Elaborado por: Ing. Molina.

Fuente: Karen Gabriela Molina Barriga

Gráfico No 4 Solubilidad de las sustancias



De la Prueba de Kruskal-Wallis Sig. asintót. = 0,000 es menor a 0,05 (95% de

confiabilidad), luego existen diferencias respecto a la tendencia central de las poblaciones.

No todas son similares. PROQUIDENT es el valor No aumenta

Tabla 22.- Color de las sustancias


Rangos

SUSTANCIAS N

Rango

promedio

COLOR






Total 40


COLOR

Chi-cuadrado 39,000

gl 3




Gráfico No 5 Color de las sustancias





No todas son similares. PROQUIDENT tiene similares valores con 5gr de pasta de achiote

+ 5ml de aceite de cocina y 5gr de pasta de achiote/ 5ml de aceite de coco

Tabla 23.- Tinción de las sustancias


Rangos

SUSTANCIAS N

Rango

promedio

TINCIÓN






Total 40

Estadísticos de pruebaa,b

TINCIÓN

Chi-cuadrado 0,000

gl 3




Gráfico No 6 Tinción de las sustancias



De la Prueba de Kruskal-Wallis Sig. asintót. = 1,000 es mayor a 0,05 (95% de

confiabilidad), luego No existen diferencias respecto a la tendencia central de las

poblaciones. Todas son similares a PROQUIDENT.

Tabla 24.- Calidad de tinción de las sustancias


Rangos

SUSTANCIAS N

Rango

promedio

CALIDAD

DE LA

TINCIÓN






Total 40


CALIDAD DE LA TINCIÓN

Chi-cuadrado 39,000

gl 3




Gráfico No 7 Calidad de tinción de las sustancias





No todas son similares. PROQUIDENT es el valor No aumenta junto con 5gr de pasta de

achiote + 5ml de aceite de cocina

CAPÍTULO V

5.1 CONCLUSIONES

De la experimentación realizada puedo concluir que:

1. La solución de 5 gr de achiote/ 5ml de aceite de cocina manifestó buenos resultados

estadísticos y experimentales convirtiéndose así en la formulación más cercana a

las propiedades otorgadas por el revelador sintético “PROQUIDENT”.

2. La solución de 5 gr de achiote/ 5ml de agua no pudo proporcionar las bondades de

un revelador de placa dentobacteriana.

3. En virtud a las características propias del achiote (aceitoso), se alcanzó los

resultados deseados al combinar con aceites como el aceite de cocina y aceite de

coco.

5.2 RECOMENDACIONES

1. Con este trabajo propendo a que personas dedicadas a la investigación continúen

profundizando el conocimiento de las propiedades y características de la Bixa

Orellana (achiote) con la finalidad de que en un futuro esta especie vegetal pueda

constituirse en un producto idóneo para la identificación de placa dentobacteriana.

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UNIDAD DE GRADUACIÓN, TITULACIÓN E INVESTIGACIÓN

ANEXOS

ANEXO #1 CERTIFICADO DE DONACIÓN DE ÓRGANOS DENTARIOS.

ANEXO #2 MANEJO DE DESECHOS.

ANEXO #3 FICHA DE RECOLECCIÓN DE DATOS.



FICHA DE RECOLECCIÓN DE DATOS

Con el fin de tabular los resultados obtenidos con el uso de disoluciones de Bixa Orellana

como revelador natural de placa dental y compararlo con la efectividad del revelador

convencional estandarizado "PROQUIDENT" es diseñada ésta ficha de recolección de

datos

INSTRUCCIONES

1.- Marcar con una "x" la apreciación de los resultados en cada item.

Piezas: #piezas: código del troquel:

SUSTANCIA EMPLEADA EN LA TINCIÓN

______________________________________________

GRADO DE SOLUBILIDAD

Índice categórico

Insoluble ( )

Poco Soluble ( )

Muy soluble ( )

No amerita ( )

COLOR DE LA SUSTANCIA

Índice categórico

Rojizo si ( ) no ( )

Otro si ( ) no ( ) ¿Cuál? .....................

TINCIÓN DE PLACA BACTERIANA

Índice categórico

Tinción si ( ) no ( )

CALIDAD DE LA TINCIÓN

Índice categórico

Mala ( )

Buena ( )

Excelente ( )

ANEXO #4 RENUNCIA AL TRABAJO ESTADÍSTICO.

ANEXO #5 OFICIO EMITIDO AL DIRECTOR EJECUTIVO DEL INEN.


PARTE DEL TUTOR.


PARTE DEL INVESTIGADOR.

ANEXO #8 CARTA DE IDONEIDAD Y EXPERTICIA DEL TUTOR.

ANEXO #9 CARTA DE IDONEIDAD Y EXPERTICIA DEL INVESTIGADOR.

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Uso de disoluciones de Bixa Orellana (achiote) como ... · APROBACIÓN DE LA TUTORA DELTRABAJO DE TITULACIÒN Yo, MARÍA ISABEL ZAMBRANO GUTIÉRREZ, en mi calidad de tutora del trabajo