Lara AN1; Martínez HDI*1, Carrasco GAA1, Flores CR2, Morales AF2 1 Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, Universidad Veracruzana, Veracruz, Ver. México.

2 CENID Microbiología, Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias, D.F. México.

Los ratones (Mus musculus) se han empleado para evaluar los daños por la infección de cepas conocidas de Brucella spp, para la obtención de anticuerpos monoespecíficos entre otros estudios de inmunidad contra brucelosis y para la evaluación de la potencia de las vacunas que se emplean en los animales; sin embargo, se adolece de información con respecto a si la inoculación de al menos 100 UFC podría ser suficiente para infectarlos y pueda reproducirse en los tejidos en cantidad suficiente para aislarse en medios selectivos y diferenciales.

Evaluar el uso de ratones, cepa NIH (Mus musculus) como modelo animal para favorecer el aislamiento de Brucella abortus a partir de leche de bovino artificialmente infectada con la cepa vacunal RB51 de Brucella abortus.

Se utilizaron 20 ratones hembras de la cepa NIH con un peso de 30 a 50 g. Grupo I (10), se inoculo intraperitonealmente con 0.5 ml de leche ultrapasteurizada infectada con la cepa RB51 a dosis de 100 a 120 unidades formadoras de colonias (UFC). Grupo II (10), se inoculo sólo con leche ultrapasteurizada como grupo control. Las hembras se mantuvieron en subgrupos de 2/10, 3/10, 3/10 y 2/10 para cada grupo. Se sangraron vía conjuntival para la obtención de suero y realizar pruebas de tarjeta para diagnóstico de brucelosis. Se sacrificaron por dislocación cervical en el mismo orden a los 10, 14, 21 y 30 días postinoculación. De cada hembra sacrificada, se extrajo hígado, bazo, riñón y médula ósea. Las muestras de los órganos se sembraron por duplicado en cajas de Petri con agar de soya tripticaseína (TSA). La mitad de las cajas se incubaron en aerobiosis y la otra mitad, bajo presión de CO2 en concentración del 5 al 10% durante ocho días.

Ninguna de las hembras de ambos grupos seroconvirtió a los 10, 14, 21 ó 30 días posinoculación. Se observaron signos de hepatomegalia, esplenomegalia y nefromegalia solamente en las hembras del grupo I a los 14, 21 y 30 días postinoculación, para un total de 8/10. Brucella abortus cepa RB51 se aisló e identificó en 3/10 de las hembras inoculadas del grupo I. Del grupo II no se aisló Brucella spp (Cuadro 1). La concentración de la cepa RB51 fue mayor a 100,000 UFC / g de órgano procesado a partir de las tres hembras con aislamiento exitoso. El modelo de infección de ratones hembras puede ser una alternativa viable para aumentar la concentración de Brucella abortus a partir de leche de bovinos infectados, lo que favorecería su aislamiento.

Ninguna de las hembras de los dos grupos inoculadas con la cepa RB51 de Brucella abortus seronconvirtió durante el periodo de observación. Se observó hepatomegalia, esplenomegalia y nefromegalia en todas las hembras del grupo I a los 14, 21 y 30 días postinoculación. Sólo se aisló Brucella abortus cepa RB51 en tres hembras del grupo I, de las cuales 2/3 ocurrió en las que se sacrificaron a los 14 días y 1/3 a los 21 días postinoculación a partir de riñón (Cuadro 1). Se obtuvo una concentración de más de 100,000 UFC de Brucella abortus cepa RB51 a partir de los riñones de las hembras de donde se logró el aislamiento.

UTILIZACIÓN DE RATONES NIH COMO MODELO ANIMAL PARA EL AISLAMIENTO DE Brucella abortus A PARTIR DE LECHE DE

BOVINO INOCULADA CON LA CEPA VACUNAL RB51

El presente trabajo fue financiado con recursos de los Fondos Sectoriales CONACYT–SAGARPA y forma parte del proyecto “Estudio comparativo de la eficacia de la cepa RB51 y

cepa 19 para prevenir la brucelosis en hatos con diferentes condiciones sanitarias” (SAGARPA-CONACYT-2004-23)

Cuadro 1. Aislamiento de Brucella abortus cepa RB51 a partir de hembras inoculadas

Días PI* 10 14 21 30 Total

Grupo I 0/2 2/3 1/3 0/2 3/10

Grupo II 0/2 0/3 0/3 0/2 0/10

* Postinoculación

OBJETIVO INTRODUCCIÓN

RESULTADOS

MATERIAL Y MÉTODO

CONCLUSIONES