Validación de Métodos y determinación de la incertidumbre de la medición_1

8/12/2019 Validacin de Mtodos y determinacin de la incertidumbre de la medicin_1

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Validacin de mtodosy determinacin de la

incertidumbre de la medicin:

Aspectos generales sobre lavalidacin de mtodos


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C E

Boris DffaFabiola RojasIsabel GerreroLis RoaLis RodrgeMarcelo SooMarisol AgileraSoraa Sandoal

Se agradece la colaboracin presada por el Sr. Leonardo Merino de la Naional FoodAdminisraion de Secia, para la elaboracin de esa Ga

C E

Soraa SandoalSeccin Merologa Ambienal de AlimenosDeparameno de Sald Ambienal

EAo 2010

S, D 2010.


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I: INTRODUCCION

El Insio de Sald Pblica de Chile, como Laboraorio Nacional de Referencia colaboraconinamene con la Red de Laboraorios del Ambiene de las SEREMIs de Sald.

La presene ga iene como objeio, enregar recomendaciones a los laboraorios para realiarla alidacin de los modos analicos e inrodcir a esos en el concepo de inceridmbre de

la medicin.


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CCOONNTTEENNIIDDOO

I: INTRODUCCION 2

II: TERMINOLOGA 4

II: ESTADISTICA BASICA 8

IV: VALIDACION 21

A) esablecer plan de alidacin 24B) Desarrollo de prebas de parmeros de alidacin 25C) Ealacin de reslados de la alidacin 25D) Informe de alidacin 26

SELECTIVIDAD 27LINEALIDAD 28SENSIBILIDAD 33LIMITES 34EXACTITUD 37ROBUSTEZ 45APLICABILIDAD 49

V: INCERTIDUMBRE 50

VI: ANEXOS 54

VII: BIBLIOGRAFA 66


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II: TERMINOLOGA:

A : Es el grado en qe la aplicabilidad de n modo se ajsa a los crierios oreqerimienos acordados enre el analisa el sario final (cliene) qe hace so de los informes odaos generados a ras de n modo de ensao. Es decir es la adapacin de n modo para n finpreiso.

A: Ssancia (qmica, fsica o biolgica)bscada o deerminada en na mesra, qe debe serrecperada, deecada o canificada por el modo.

A: Los analios, marices concenraciones para los cales pede iliarsesaisfacoriamene n modo de anlisis con el fin de deerminar s conformidad con na norma.(Referencia: Manal 16 Ed.)

Noa: La declaracin de aplicabilidad (mbio o campo de aplicacin), adems de na declaracindel margen de fncionamieno saisfacorio para cada facor, pede inclir ambin aderenciasacerca de la inerferencia conocida de oros analios, o de la inaplicabilidad a deerminadasmarices siaciones. (Referencia: Manal 18 Ed.)

B :Mari qe no coniene el analio de iners objeio para el modo seleccionado.

C: Operacin qe, en condiciones especificadas, esablece primero na relacin enre losalores con inceridmbres de medicin proporcionados por las normas de medicin las indicacionescorrespondienes con las inceridmbres de medicin asociadas, ilia lego esa informacin paraesablecer na relacin a fin de obener n reslado de medicin a parir de na indicacin.

(Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

Noa1 : La calibracin se pede epresar por medio de na declaracin, na fncin, n diagrama,na cra o na abla. En algnos casos pede consisir en na correccin adiia o mliplicaiade la indicacin con la inceridmbre de medicin asociada. (Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

Noa 2: La calibracin no debe confndirse con el ajse de n sisema de medicin qe a mendose denomina errneamene aocalibracin, ni ampoco con la erificacin de la calibracin.

A mendo se percibe como calibracin solamene el primer paso mencionado en la definicinanerior. (Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

Es decir, es n procedimieno de comparacin enre lo qe indica n insrmeno s "alorerdadero" de acerdo a n de referencia con alor conocido.

C I: Cada na de las conribciones a la inceridmbre.

C : Eigencias de na caracersica de fncionamieno o comporamieno enfncin de las cales se pede deerminar qe n modo analico es adecado para la finalidadpersegida ofrece reslados confiables.


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E: Operacin cnica realiada de acerdo a n procedimieno especifico, qe consise en ladeerminacin caliaia /o canificacin de na o ms caracersicas (propiedades o analios) enndeerminado prodco, proceso o sericio.

E : Es aqel error ineiable qe se prodce por eenos nicos imposibles de conrolardrane el proceso de medicin. Se conrapone al concepo de error sisemico. Las fenes de loserrores aleaorios son difciles de idenificar o ss efecos no peden corregirse del odo. Sonnmerosos peqeos. Ese error ocrre o esa dado por el aar. Ejemplo: Errores de apreciacin, alescomo el paralaje, qe depende del obserador s capacidad en cano al lmie separador del ojo.

E S:Es aqel qe se prodce de igal modo en odas las mediciones qe se realian dena magnid. El error sisemico esa condicionado por algn facor disino al aar. Ejemplo: el errorde las masas parn del laboraorio se ransfiere sisemicamene al momeno de calibrar la balana.El VIM, lo define como componene del error de medicin qe al reierar las mediciones se maniene

consane o bien aria de manera predecible.

I : La medida en qe los daos obenidos en n proceso de medicinpermien al sario adopar decisiones correcas, ano desde el pno de isa cnico comoadminisraio, para alcanar n fin esablecido.

I: Parmero asociado al reslado de na medicin qe caraceria la dispersin de losalores qe podran raonablemene ser aribidos al mensrando.

I : Parmero no negaio qe caraceria la dispersin de la canidad dealores qe se ariben a na mensrando, basndose en la informacin iliada. (Referencia: VIM,JCGM 200:2008)

Noa: La inceridmbre de medicin comprende, en general, mchos componenes. Algnos deesos peden ser ealados por ipo de na ealacin de: la disribcin esadsica de la canidadde alores de na serie de mediciones se peden caraceriar por las desiaciones.

I : Es el ineralo enre el niel ms bajo ms alo de concenracin qe ha sidodemosrado qe pede ser deerminado con la precisin eacid reqeridas para na deerminadamari.

L ((((LMP)))): Niel mimo o olerancia esablecida para n analio en nareglamenacin.

L R (LMR): Concenracin mima de residos de na ssancia (plagicida omedicameno) qe se permie legalmene s so en la sperficie o pare inerna de n prodcoalimenicio.

M:Es el ipo de ssancia compesa (liqida, slida, gaseosa) qe pede o no conener al analiode iners, ejemplo: mari de alimeno, mari ambienal, ec.


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M R C (MRC): Maerial de referencia acompaado de docmenacin,emiida por n rgano aoriado, en la qe se indican no a ms alores de propiedades especificadasas como la inceridmbre rasreabilidad asociadas, con el so de procedimienos lidos. (Referencia:

VIM, JCGM 200:2008)

Es decir, es n maerial de referencia, al qe se le ha asignado n conenido de analio especificadoen n cerificado a ras de n modo raable.

M R (MR): Maerial sficienemene homogneas esables con propiedadesespecificadas, qe se ha esablecido es idneo para so en la medicin o en el anlisis de laspropiedades nominales. (Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

Noa: Maerial homogneo qe iene definidas ss propiedades, a ras de n modo alidado

qe pede sarse para fines analicas (calibracin de eqipos, comprobacin de n modo, ec.).

M:Canidad desinada a la medida. (Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

M : Modo de ensao acepado para el qe se han lleado a cabo esdiosde alidacin (desempeo) con el fin de deerminar s precisin fiabilidad para n propsioespecfico. (Referencia: ICCVAM Gidelines for he nominaion and sbmission of ne, reised andalernaie es mehods, 2003).

M :Es el modo especificado por los organismos reglamenarios de n pas, con fines deaplicaciones de normas (ejemplo; reglameno saniario de alimenos) o esiplados por organiacionescomerciales (Referencia: FAO).

M : Modo apropiado para el ensao denro de s alcance, pblicado pororganismos de normaliacin inernacional, nacional o regional (ISO, EN, NM, ASTM, BS, DIN, IRAM,ec.) o por organiaciones reconocidas en diferenes mbios ( AOAC, FILIDF, EPA, USP ec.)

M : Modo qe permie deerminar la presencia o asencia de n analio en namesra o mari.

M :Modo qe permie deerminar la concenracin de n analio presene en namesra o mari.

M: Ciencia de la medicin s aplicacin. (Referencia: VIM, JCGM 200:2008), es decir, es la

ciencia de las mediciones o campo de los conocimienos relaios a las mediciones. Incle calqieripo de medicin del campo cienfico o ecnolgico.

N: Es la concenracin de na ssancia de iners en na solcin esndar o mari..generalmene, se habla en rminos de niel de concenracin.

P V: Docmeno ipo proocolo en el cal se definen las prebas o parmeros dealidacin necesarios el diseo eperimenal a desarrollar en base a los reqerimienos del modo.

R : Corresponde a aqellas caracersicas del modos qe son esencialespara poder aplicarlo para el fin preiso. Cando no esn esablecidas por el cliene o sario, debe

definirlas el responsable del ensao de manera confiable cienfica.


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R: Parmero cromaogrfico qe permie deerminar la capacidad de separacin enre 2picos, de manera qe se pedan diferenciar adecadamene de la cromaografa los analios de iners.

R ():El alor final noificado de na canidad medida o calclada, ras aplicar nprocedimieno de medicin, inclidos odos los procedimienos secndarios las ealaciones.(Referencia: Manal 16 Ed.)

S I U (SI): Sisema de nidades, basado en el Inernacional Sisema decanidades, ss nombres smbolos, inclendo na serie de prefijos ss nombres smbolos, ascomo las normas para s so, aprobada por la Conferencia General de Pesas Medidas (CGPM).(Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

S: Porcin de na mesra para anlisis.

T : Es la solcin qe coniene odos los reacios sados en los mismosolmenes concenraciones, qe son iliados en el procesamieno de la mesra. Ese blanco debesegir odos los pasos indicados en la cnica ada a deecar raas de conaminacin proenienesdel maerial o reacios sados.

T : Propiedad de n reslado de medicin, mediane el cal el reslado pedeesar relacionado con na referencia a ras de n cadena conina docmenada de calibraciones,cada qe conriben a la inceridmbre de medicin. (Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

Propiedad del reslado de na medicin o del alor con s inceridmbre, qe pede a ras dena cadena ininerrmpida de comparacin relacionarse a na referencia esablecida,generalmene parones de referencia nacionales o inernacionales. (Referencia: IUPAC

Nomenclare In Ealaion Of Analical Mehods Inclding Deecion And QanificaionCapabiliies).

V: Verificacin de deerminados parmeros de n modo en la qe los reqisiosespecificados para esos, demesran qe el modo es idneo para n so preiso. (Referencia: VIM,Inernaional Vocablar for Basic and General Terms in Merolog: 2007)

V : El grado de concordancia enre la media de n nmero infinio de alores reieradosde canidad n alor de canidad de referencia.

V: El grado de concordancia enre la epecaia relaia al reslado de n ensao o de namedicin el alor erdadero.(Referencia: Manal 18 Ed.)

V R: Valor caniaio qe se ilia como base para la comparacin con alorescaniaios del mismo ipo. (Referencia: VIM, Inernaional Vocablar for Basic and General Terms inMerolog: 2007)

V: Sminisro de preba(s)objeia(s)de qe n elemeno dado saisface el (los)reqisio(s)especificado(s). (Referencia: VIM, JCGM 200:2008)

Es decir, es la comprobacin eperimenal de qe n modo esablecido fnciona de acerdo conlas especificaciones, en las condiciones disponibles en el laboraorio sario. Se eniende comoerificacin a las prebas realiadas por n laboraorio en la rina de rabajo qe permien

comprobar docmenar la aplicabilidad so adecado del modo por pare del laboraorio.


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II: ESTADISTICA BASICA

Para los fines de na alidacin, se ilian normalmene cieras mediciones esadsicas, qe nosadan a esablecer si el modo se encenra denro de n parmero acepable, normalmene sedeerminan las sigienes:

M: Conocida ambin como media arimica o promedio, es la canidad oal de la ariable(mesra o medida) disribida a pares igales enre cada obseracin. En rminos maemicos, esigal a la sma de odos ss alores diidida enre el nmero de smandos

X = nxin

Siendo:xi = alor de na lecra.n = nmero de lecras

D (, ):Es el promedio de lejana de los alores obenidos (lecras) respeco delpromedio.

S=ni=1 (xiX)2n1

Siendo:xi = alor de na lecra.

X= promedio de la oalidad de lecras.n = nmero de lecras

C V (CV):Desiacin esndar diidida por la media. Tambin es conocida comodesiacin esndar relaia (RSD). El coeficiene de ariacin pede ser epresado en porcenaje:

%CV = S100X

Siendo:= desiacin esndar de las lecras.X = promedio de la oalidad de lecras.

V:Es na medida de dispersin definida como el cadrado de la desiacin esndar.

S2= ni=1 (xiX)2

n1Siendo:xi = alor de na lecra.X= promedio de la oalidad de lecras.n = nmero de lecras


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C V H (CV ): Es el coeficiene de ariacin definido por W. Hori, aras de la ecacin obenida de n esdio esadsico. En dicho esdio, Hori desps de renirna serie de daos (proenienes de 150 ensaos de inerlaboraorios organiados por AOAC), obser

qe el coeficiene de ariacin de los alores medios dados por los diferenes laboraorios amenabana medida qe dismina la concenracin del analio. Comporndose como mesra la sigienegrfica, conocida como la rompea de Hori.

La ecacin de Hori, esa definida como:

CVh= 2(10.5.log c) H= 0.02 c

0,8495Dnde:CV h= Coeficiene de ariacin de Hori

H= Desiacin esndar calclada conforme al modelo de precisin de Hori.C= concenracin del analio epresado en poencia de 10 (Ver abla N 1).

Ese coeficiene de ariacin (CVh) esa epresado en poencia de 2, la concenracin media delanalio epresado como poencia de 10, de esa forma independiene del analio el modo iliadose pede esimar el CV esperado para la precisin.

Tabla N 1:C R

(P 10)U

100 1 100% (100 g/100 g)> 10 10

1 > 10 % (10 g/100 g)

> 1 102

> 1 % (1 g/100g)> 0,1 10

3> 0,1 % (1 mg/g 0,1 g/100 g)

0,01 104

100 mg/kg0,001 10

510 mg/Kg

0,0001 106

1 mg/Kg0,00001 10

7100 g/Kg

0,000001 108

10 g/Kg

0,0000001 10

9

1 g/Kg


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D N: Disribcin conina onocida ambin como disribcin Gassiana, ladisribcin de na ariable normal es compleamene deerminada por dos parmeros, s media

s desiacin esndar, denoadas generalmene por . La disribcin normal se caraceria por

ener na nica moda, qe coincide con s media s mediana. S epresin grafica es na cranormal, ca forma es similar a los hisogramas con forma de campana, es conocida como campana degass qe es simrica respeco a s media asinica al eje de abscisas, eso hace qe calqier alorenre es ericamene posible. El rea oal bajo la cra es, por ano, igal a 1. Para eseipo de ariables eise na probabilidad de n 50% de obserar n dao maor qe la media, n 50%de obserar n dao menor.

- 3 - 2 - + +2 +3 La probabilidad de qe Xocaiga en el ineralo comprendido enre + es aproimadamene 0,687

68,27%.

La probabilidad de qe Xo caiga en el ineralo comprendido enre + 2es aproimadamene0,9545 95,45%.

La probabilidad de qe Xo caiga en el ineralo comprendido enre + 3es aproimadamene

0,9973 99,73%.

N (A,):Es el niel de significacin iliado para calclar el niel de confiana. Elniel de confiana es igal a 100% (1 ), es decir, n alfa () de 0,05 indica n niel de confiana de95%.

F : Nmero maor qe no por lo qe na combinacin de inceridmbre en lamedicin esndar se mliplica a obener na inceridmbre epandida de medida. Un facor decoberra sele ser simboliada k. (Referencia: VIM, JCGM 200:2008)


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P S

Es frecene iliar prebas de significancia esadsicas drane el proceso de alidacin de los modosanalicos en ese senido, se aplican comnmene las sigienes:

1. Preba sden para idenificar errores sisemicos (sesgo).2. Preba FFisher para idenificar errores aleaorios (precisiones).

,

(1, ,) (0, ).

. , . , . (: )

1. La media es igal al alor dado (0: = 0) erss la media no es igal al alor dado (H1: 0) doscolas

2. La media es igal al alor dado (0: = 0) erss la media es menor qe el alor dado (H1: < 0) nacola

3. La media es igal al alor dado (0: = 0) erss la media es maor qe el alor dado (H1: > 0) nacola

Una forma pracica de decidir es respondiendo a dos pregnas:

Tes1. Son las medias igales? D2. Son las medias diferenes (pede na media ser maor o menor a la ora)? U

FTes1. Son las arianas diferenes? D2. Es la ariana 1 maor qe la ariana 2? U


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P S

Esa preba permie comparar las medias de dos grpo de daos deerminar si enre esos parmeroslas diferencias son esadsicamene significaias.

En la preba , se procede a deerminar el alor de sden calclado, obenido de la eperienciaanalica, ese alor poseriormene se compara con el llamado alor crico, ese alor criico se obienede la abla de sden para n deerminado porcenaje de confiabilidad (normalmene se ilia el 95%

de confiana, es decir, n alor de 0,05). Si no eisen diferencias significaias enre 2 grpos, el calclado debera ser inferior al criico (o conocido ambin como de abla).

El sigiene ejemplo, raa de eplicar la afirmacin realiada aneriormene: Un alea desea realiar nsalo con garrocha, para lo cal, l realia n calclo de con qe elocidad con qe fera ( calclado)debe realiar la preba de aleismo, a fin de salar correcamene la alra esablecida para lacompeencia ( criico).

Si el calclado es inferior al crico, enonces, qe permiasperar al criico, el alea no podr realiar el salo.


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Si el alor calclado es sperior al crico, enonces, eisir na qepermiir sperar al crico, el alea podr realiar el salo.

Para eplicar de mejor manera la preba de Sden, hemos inclido los sigienes ejemplos:

EJEMPLO 1: P S 2

Se realia el anlisis de na mesra de flor en aga bajo el modo de cromaografa inica enLaboraorio 1 por EIS en Laboraorio 2. Los reslados obenidos en mg/L de F, feron:

N G/E

O 1 2

1 4,5 5,3

2 5,2 6,8

3 5,0 6,9

4 6,4 7,1

5 6,0 7,7

6 7,1

Eperiencia 1: n1=6 Media X1=5,70 Desiacin esndar S1= 0,9716 grados de liberad gl1= 5

Eperiencia 2: n2=5 Media X2= 6,76 Desiacin esndar S2= 0,8877 grados de liberad gl2= 4

Se deermina el alor calclado ( calc):

= X1 X2 .

S12(11) +S2

2(21) . 1 + 11+22 1 2


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calc= 5,70 6,76 .

(0,9716)2(61) + (0,8877)

2(51) . 1 + 1

6 + 5 2 6 5

calc= 1,06 .

(0,93524) . (0,1667 + 0,2)

calc= 1,06 = 3,09.0,34292

Se desea deerminar si son igales las medias de la eperiencia 1 2. Para eso se procede lego a

deerminar el criico en la abla sden para =0,05.

En la inerseccin se lee: alor crico para , qe es cri= 2,262.

2 colas 80% 90% 95%

/2

v

0.10 0.05 0.025

1 3.078 6.314 12.706

2 1.886 2.920 4.303

3 1.638 2.353 3.182

4 1.533 2.132 2.776

5 1.476 2.015 2.5716 1.440 1.943 2.447

7 1.415 1.895 2.365

8 1.397 1.860 2.306

9 1.383 1.833 2.262

10 1.372 1.812 2.228

Se procede a comparar el crico el calclado, calc= 3,09.

Se obsera. calc > cri .Conclimos qe . Por lo cal el reslado seacepa.


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EJEMPLO 2: P 2

Se realia el anlisis de na mesra de rbiedad en aga, el modo iliado es el rbidimrico, la

eperiencia se realia en 2 das diferenes:

N G/E

O A B

x

1 4 3 1

2 5 2 3

3 6 1 5

4 6 2 4

5 4 3 1

Eperiencia : obseraciones pareadas n=5

Media X = 2,8Desiacin esndar S= 1,789grados de liberad gl= 4


X = (xAxB) calc= X .

n (S/n)

Se calcla: X = 1 +3 +5+ 4+1 = 2,8 lego se deermina el calclado;5

calc= 2,8 .= = 3,481,789/ 5

Se desea demosrar si eisen diferencias significaias enre la eperiencia A B. Enonces, se procede

lego a deerminar el criico en la abla sden para =0,05 para 2 colas.


2 colas 80% 90% 95%

/2

v

0.10 0.05 0.025

1 3.078 6.314 12.706

2 1.886 2.920 4.303

3 1.638 2.353 3.182

4 1.533 2.132 2.776

5 1.476 2.015 2.571

Se procede a comparar el crico el calclado, calc= 3,48. Se obsera qe calc> cri. Conclimos qe . Por lo cal no es acepable.


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EJEMPLO 3: P

Se analia de n maerial de referencia cerificado de hierro en cereal, se realian 4 replicas, el modo

iliado es absorcin amica llama, los reslados obenidos en mg/Kg son:

O V

1 5,8

2 6,1

3 6,4

4 6,2

El alor asignado, informado en el cerificado del MRC es; = 6,3 mg/Kg

Eperiencia :

Obseraciones pareadas n=4 Media X = 6,05

Desiacin esndar S= 0,387 grados de liberad (o gl)= 3


calc= X .(S/n)

= 6,05 6,3 .= = 1,2920,387/ 4

Se procede lego a deerminar el criico en la abla sden para =0,05.


2 colas 80% 90% 95%

/2

v

0.10 0.05 0.025

1 3.078 6.314 12.706

2 1.886 2.920 4.3033 1.638 2.353 3.182

4 1.533 2.132 2.776

Se procede a comparar el crico el calclado, calc= 1,292.

Se obsera qe: calc < cri . Conclimos qe . Por lo cal elreslado se acepa.


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P F ( F)

Preba en la qe el esadsico iliado sige na disribcin F si la hipesis nla no pede serrechaada. En esadsica aplicada se preban mchas hipesis mediane el es F, enre ellas: Lahipesis nla=Ho de qe las medias de mliples poblaciones normalmene disribidas con la mismadesiacin esndar son igales. Esa es, qis, la ms conocida de las hipesis erificada mediane eles F el problema ms simple del anlisis de ariana. Y la hipesis de qe las desiaciones esndar dedos poblaciones normalmene disribidas son igales.

Para eplicar de mejor manera la preba de Fischer, hemos inclido el sigiene ejemplo:

Se realia la medicin de slfaos en na mesra de aga en dos das diferenes.

N G/EO 1 2

1 C1,1 C2,1

2 C1,2 C2,2

3 C1,3 C2,3

4 C1,4 C2,4

5 C1,5 C2,5

6 C1,6 C2,6

7 C1,7 C2,7

8 C1,8 C2,8

9 C1,9 C2,9

10 C1,10 C2,10

11 C2,11

12 C2,12

13 C2,13

14 C2,14

E 1: 1=10 M 1=14,9 V 1= 26,4E 2: 2=14 M 2= 16,2 V 2 = 12,7

Si se inena n es de sden con esos alores ha qe erificar si las 2 arianas no sonsignificaiamene diferenes; por qe si son diferenes, el es de sden no podr ser iliado. Qese hace?

1) Deerminar los grados de liberad de la eperiencia 1: n1 = 101=9

2) Deerminar los grados de liberad de la eperiencia 1: n2 = 141=13


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3) Diidir la ariana ms grande por la ms peqea:

F= Variana maor = Variana 1 = 26,4 = 2.079

Variana menor Variana 2 12,7

4) Para saber si 2,079 indica qe la ariana obenida en la eperiencia 2 es menor qe la obenida en laeperiencia 1, no a a la Tabla F (Ver Aneo n 4) coloca los grados de liberad (gl) del nmerador (9)

en la fila horional, del denominador (13) en la colmna, para n alor de = 0,05, 1 cola:

gl 1 2 3 4 5 6 7 8 9

1 161.44622 199.49948 215.70668 224.58335 230.16037 233.98752 236.76694 238.88424 240.54316

2 18,51 19,00 19,16 19.24673 19.29629 19.32949 19.35314 19.37087 19.384743 10,13 9,55 9,28 9.11717 9.01343 8.94067 8.88673 8.84523 8.81232

4 7,71 6,94 6,59 6.38823 6.25607 6.16313 6.09421 6.04103 5.99880

5 6,61 5,79 5,41 5.19216 5.05034 4.95029 4.87586 4.81833 4.772466 5,99 5,14 4,76 4.53369 4.38737 4.28386 4.20667 4.14681 4.099017 5,59 4,74 4,35 4.12031 3.97152 3.86598 3.78705 3.72572 3.676678 5,32 4,46 4,07 3.83785 3.68750 3.58058 3.50046 3.43810 3.388129 5,12 4,26 4,07 3.63309 3.48166 3.37376 3.29274 3.22959 3.17890

10 4,96 4,10 3,86 3.47805 3.32584 3.21718 3.13547 3.07166 3.0203811 4,84 3,98 3,71 3.35669 3.20388 3.09461 3.01233 2.94798 2.89622

12 4,75 3,89 3,59 3.25916 3.10587 2.99612 2.91335 2.84857 2.7963813 4,67 3,81 3,49 3.17912 3.02543 2.91527 2.83210 2.76691 2.71436

En la inerseccin se lee: alor crico para F, qe es F cri= 2,71.

Se procede a comparar el F crico el F calclado, F calc= 2,079,

Se obsera. F cri > F calc.

Conclimos qe las dos arianas . Por lo ano, hacer el es de es na decisin legima.


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A V

El anlisis de ariana, ambin conocido como ANOVA, es el anlisis esadsico en el cal se comparams de dos medias enre s.

Para ese fin, se debe proceder a comparar las diferencias enre cada grpo las obseracionesrealiadas.

E:

E

= O M A M B M C

1 8,5 9,9 7,42 9,2 10,0 8,0

3 7,8 11,1 8,6

N= nmero de obseraciones oales = 3 3 = 9

Se procede a calclar la smaoria de las obseraciones de eperiencia (o grpo):

C M A M B M C

xi 25,5 31,0 24,0 xi = 25,5 + 31,0+24,0= 80,5

xi2 217,73 321,22 192,72 xi2= 217,73 + 321,22 +192,72= 731,67

S :

SCT= xi2 ( x)2 = 731,67 (80,5)2= 11,642N 9

Grados de liberad oales = gl oal= N1 =91 =8

S :

SCB= (xA)2 + (xB)2 + (xC)2 ( x)2 = (25,5)2+ (31,0)2+ (24,0)2 (80,5)2 = 9,0553A B C N 3 3 3 9

Grados de liberad enre grpos (ej.: modos) = gl B= n1 = 31 = 2


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S , , :

Se realia por simple resa, es decir:

SC = SCT SDCB = 11,642 9,05553 = 2,58647

Grados de liberad denro del grpo = gl oal gl B = 8 2 = 6

Resmiendo obimos:

O V G () S (SC) C (CM)

E (B) 2 9,0553 4,5278

D (W) 6 2,58647 0,4311

T (T) 8 11,642

A F, :

F calc = ( SCB/glB) = ( 9,05553/2) = 4,5278 = 10,5(SC

/ gl

) ( 2,58647/6) 0,4311

Se deermina el alor F crico de Tabla F (Ver Aneo n 4) coloca los grados de liberad (gl) del

nmerador (2) en la fila horional, del denominador (6) en la colmna, para n alor de = 0,05, 1cola:

gl 1 2 3 4 5 6 7 8 9

1 161.44622 199.49948 215.70668 224.58335 230.16037 233.98752 236.76694 238.88424 240.54316

2 18,51 19,00 19,16 19.24673 19.29629 19.32949 19.35314 19.37087 19.38474

3 10,13 9,55 9,28 9.11717 9.01343 8.94067 8.88673 8.84523 8.812324 7,71 6,94 6,59 6.38823 6.25607 6.16313 6.09421 6.04103 5.99880

5 6,61 5,79 5,41 5.19216 5.05034 4.95029 4.87586 4.81833 4.772466 5,99 5,14 4,76 4.53369 4.38737 4.28386 4.20667 4.14681 4.09901

En la inerseccin se lee: alor crico para F, qe es F cri= 5,14.

Se procede a comparar el F criico el F calclado. F calc= 10,50

Se obsera qe F calc> F cri . Se concle qe 3 .


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IV: VALIDACION

La alidacin de n modo analico es n paso fndamenal para asegrar qe los resladosenregado por dicho modo son confiable. Cando se realia la alidacin de n modo por pare dellaboraorio, lo qe se bsca es poder deerminar con fndameno esadsico qe el modo esadecado para los fines preisos.

En ese senido, es imporane qe para el proceso de alidacin se asigne a n responsable de realiardicha area. De manera qe, la alidacin se efece en forma medica, ordenada, raable confiable.

Es imporane qe el laboraorio enga claridad anes de iniciar la alidacin de cales son losreqerimienos del modo para esablecer el alcance de la alidacin.

Es esencial, enonces conocer el modo a alidar s aplicabilidad, es decir, el analio, sconcenracin (niel, LMP, LMR, ec.) la mari (o marices) en las cales se desea iliar.

En general, se esablece qe el laboraorio DEBEalidar:

1. Modos no normaliados: Corresponden a modos desarrollados por el laboraorio o modoneos (ejemplo: pblicado en reisa cienfica), o bien, a modos qe radicionalmene sehan iliado en el laboraorio pero qe no esn normaliados.

2. Modo normaliado con na modificacin significaia.

Cando se raa de n modo empleado radicionalmene por el laboraorio qe no ese normaliado,

se pede realiar na V R, es decir, en base a los daos eperimenales qe ellaboraorio dispone, para la cal se realiar la recopilacin de la maor canidad de daos hisricosdisponibles, para lego realiar n proceso de ordenamieno seleccin de los daos recopilados, esosdaos peden ser: cras de calibracin, reslados de ensaos, caras de conrol, ensaos de apid,ec. A ras de esos, se debern deerminar los parmeros de alidacin, ealar si los resladosobenidos para los fines de la son acepable.

En caso de ser n modo neo (o no anigo del qe no se dispongan de daos sficienes) se deberealiar na V P, generando a ras de anlisis daos eperimenales.

En algnos casos se pede realiar lo qe se conoce como alidacin menor o cando se

rae de:

1. Modos normaliados.2. Modos normaliados sados fera de s alcance propeso. Ejemplo: so en ora mari.3. Ampliaciones modificaciones menores de modos normaliados. Ejemplo: so en oros

analios.4. Cando se rae de modos preiamene alidados, qe haa sfrido algna aleracin

significaia por lo cal deben oler a ealarse. Esas ariaciones peden ser; cambio deeqipo, cambio de componenes de eqipo como colmnas, deecores, cambio analisa,cambio de la mari qe coniene la mesra o de niel de concenracin del analio deiners, enre oros.


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La , iene generalmene como objeio, el comprobar qe el laboraorio domina el modode ensao normaliado lo ilia correcamene, en caso de raarse de n modo normaliado

modificado para la erificacin se reqiere solo realiar aqellas prebas qe indiqen qe la ariacinrealiada no afeca el ensao.

En ocasiones, lo qe se bsca a ras de na alidacin es r qe n modo es eqialene aoro.

El objeio de la alidacin la erificacin, es demosrar qe el modo iliado por n laboraorio esadecado para la aplicacin en la qe se propone iliar, as, como ambin demosrar qe lasmodificaciones qe pdieron haberse realiado no afecan s desempeo, ni la confiabilidad de losreslados por ese enregado.


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Definicin del modo a Validar:

Cali o CaniaioAnaliomariConcenracinPrincipio

Tipo de Modo

Normaliado NormaliadoModificado No NormaliadoTradicional :

sado por elLaboraorio hace

aos

Validacin Pros eciaValidacin

RerospeciaVerificacin

Esablecer Parmeros a Ealar

Esablecer Prebas Eperimenales

Esablecer Crierios de Acepabilidad

S NSe raa de n modo normaliado?

Tiene na modificacinsignificaia?

N

S

No Normaliado:Neo o

Desarrollado por ellaboraorio

Desarrollar Prebas Eperimenales

Ealar reslados

INFORME DE VALIDACIN

REVISIN DE INFORME

Comparar resladoserss crierios


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En relacin a los parmeros de alidacin o erificacin esos debern deerminarse de acerdo al ipode modo. Para ese fin la sigiene abla pede ser iliada como ga:

Tabla N 2

METODO CUANTITATIVOPARAMETROA EVALUAR CARACTERISTICA(S)

METODOCUALITATIVO NORMALIZADO MODIFICADO NUEVO

SELECTIVIDADI I

S N S S

LINEALIDADR

N S S S

SENSIBILIDADP

N S N S S

LIMITESC (LC)D (LOD)C (LOQ)

SS N

S S

PRECISIONRR

N S S S

VERACIDADS ()R (R)

N S NS N

S

ROBUSTEZT Y S

N NS N

S

APLICABILIDAD S S S S

De acerdo a los anecedenes aneriormene mencionados, el responsable de la alidacin oerificacin deber as elaborar el P Vqe se a a realiar.

) ESTABLECER PLAN DE VALIDACIN

Se eniende como P V, a n docmeno (ipo proocolo) en el cal se definenpreiamene a la eperiencia; las prebas o parmeros de alidacin necesarios el diseoeperimenal a desarrollar en base a los reqerimienos del modo.

El Plan de Validacin deber conener a lo menos:

Alcance de la alidacin (modo, analio, marices reqerimienos del modo

Diseo eperimenal:Esablecer la(s) mesra(s) a ser analiada(s): esigos reacios, blanco mari, maerialcerificados, maerial conrol, maerial(es) de referencia cerificado, marices de las mesras,mesras sin forificar, mesras forificadas, ec.El (los) parmero(s) prebas a desarrollar, en caso, de qe la preba no sea naconencional, sino diseada por el responsable, ambin deber indicarse en el docmeno.Nmero de anlisis reqeridos para cada preba /o parmero.Crierios de acepabilidad para cada parmero de alidacin.Analisa(s) responsable de realiar la(s) preba(s) analica(s).


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Maeriales, insmos eqipos necesarios para desarrollar la alidacin.

Responsable de la Validacin, fecha o iempo programado para realiar la alidacin fecha deelaboracin del plan.

Calqier modificacin realiada al plan de alidacin, drane el proceso, debe qedar debidamenedocmenada.

En aneo N 1, Se mesra n formao de plan de alidacin. En el aneo N 6, se incle n ejemplo deesqema de rabajo de cmo se desarrolla n plan de alidacin para n modo normaliado.

) DESARROLLO DE PRUEBAS DE PARMETROS DE VALIDACIN

Para el desarrollo de las prebas de alidacin, los analisas a cargo debern conocer el procedimieno

de modo de ensao el nmero de ensaos o mediciones a realiar de acerdo a lo esablecido en elplan de alidacin.

( , .)

Los reslados obenidos en cada preba deben ser debidamene regisrados almacenados.

Los ensaos o mediciones realiadas sern con el fin de poder realiar las sigienes prebas deparmeros de alidacin:

SeleciidadLinealidadSensibilidadLimiesEacidPrecisinRobseAplicabilidad

El analisa o responsable de la alidacin deber con los reslados obenidos de cada preba realiarlos clclos maemicos, comparaios /o esadsicos correspondienes a cada ensao para lo calpodr iliar para ese fin n sofare esadsico, calcladora o na planilla de clclo (ejemplo: Ecel).

C) EVALUAR RESULTADOS DE LA VALIDACIN

Se deber ealar para cada parmero de alidacin, si los reslados de las prebas sonsaisfacorios, es decir, si cmplen con los crierios de acepabilidad esablecidos en el plan, seconsidera qe el modo es acepable.


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D) INFORME DE VALIDACIN

El responsable de la alidacin, deber realiar n informe en el cal presenar los reslados

obenidos conclsiones. El informe debe conener la declaracin de la aplicabilidad del modo.

En el aneo N 2, se enrega n modelo ipo de informe de alidacin.

El laboraorio debe ener disponible el procedimieno sado para la alidacin, na declaracinacerca de qe el modo se ajsa para el so propeso.

Ese informe deber ser reisado por na ercera persona qe enga conocimieno en el rea, qe nohaa formado pare del proceso de alidacin. En dicha reisin se deber esablecer si los crierios deacepabilidad esablecidos en el plan son acepables, si el modo es idneo para el fin preiso.


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SELECTIVIDAD

La seleciidad es el grado en qe n modo pede canificar o calificar al analio en presencia deinerferenes. Esos inerferenes normal o frecenemene se encenran en la mari de iners.

La preba de seleciidad pede disearse de acerdo al modo, en el caso de cromaografa laresolcin enrega informacin sobre la seleciidad del modo, en el caso de especrofoomera elespecro de absorcin o n especro de masas enrega informacin al respeco, en especial cando escomparado en presencia de na inerferencia.

Una preba de Seleciidad comnmene iliada, consise en analiar n mnimo de res esigoreacios, res blancos de mari res mesras o esndares de concenracin conocida del analio deiners.

Se deben comparar las lecras (seales de medicin) obenidas para cada caso, obserar si eisenariaciones enre los esigos reacios, blancos de marices esndares o mesras con analio. Si seencenran diferencias significaias debern ser idenificadas en lo posible eliminadas.


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LINEALIDAD

La linealidad es la capacidad de n modo de anlisis, denro de n deerminado ineralo, de dar narespesa o reslados insrmenales qe sean proporcionales a la canidad del analio qe se habrde deerminar en la mesra de laboraorio.

Con el fin de deerminar el se pede realiar mediane n grfico de concenracin erssrespesa, qe se conoce como F R(normalmene llamada reca de calibrado). sa seesablece cada da con na ciera canidad de alores formados por n blanco los parones derabajos limpios de alor erico conocido, qe cbran el ineralo de rabajo. En ese senido serecomienda abarcar alores desde cercano al cero alores speriores al LMP o al alor de iners. Elnmero de pnos a analiar deber ser esablecido por el analisa (en general, se ilia n mnimo de

4 alores).

Lego de realiar el grafico se pede obserar el comporamieno de la cra esablecercaliaiamene el rango lineal (fig.1). Desps de esablecer el comporamieno lineal del modo sedeber realiar la Cra de rabajo o cra de calibracin (fig.2).Graficar los daos de concenracin delos esndares de calibracin esimados (X) /s la lecra obserada (Y).

F. 1 F.2

Ealar los esimadores de regresin lineal del grfico: la pendiene (m), el coeficiene de correlacin (r

) el pno de core (inercepo) con el eje de las Y (L0).

Y= X m + Lo


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En general el crierio de acepacin caliaio qe se sa para deerminar la linealidad es el coeficienede correlacin:

El coeficiene de correlacin indica el grado de relacin enre la ariable concenracin (X) la ariablerespesa (Y) de la cra de calibracin. Los alores mimos qe pede alcanar son 1 1. El alormimo de 1 indica na correlacin posiia perfeca (enre X e Y) con na pendiene posiia. Cando=0, no eise correlacin algna, independencia oal de los alores X e Y

En la prcica si iene n alor cercano a no (1), eso significa qe eise correlacin con naprobabilidad eleada. Para na cra de calibracin o rabajo, es recomendable qe el coeficiene decorrelacin obenido sea maor o igal a 0.999, anqe para el caso de raas se admie n alor igalo maor qe 0.99.

= _S S S

S = i = 1 n i i ( pr om prom )

n

S = ( ( i2 / n) ( p r o m

2 ) )

S = ( ( i2 /n) ( p r o m

2 ) )

Coeficiene de correlacin (o ): > 0.99

Coeficiene de correlacin al cadrado 2> 0.99.

Se pede realiar na ealacin de cra de calibracin global (consrida con ms de na cra decalibracin de las mismas caracersicas) en la cal se pede realiar na ealacin esadsica depreba , como n mejor indicador del modelo lineal.

Se calcla n alor de con n2 grados de liberad se compara con el alor ablado de para el nielde confiana reqerido ( = 0.05), doscolas, en ese caso para n n qe depende de los nieles decalibracin.

Se desea probar si eise enonces na correlacin significaia: La hipesis nla H0es qe no eisecorrelacin enre Xe Y. Si el alor obserado de es maor qe cri, se rechaa la hipesis nla H0,siendo la correlacin lineal significaia con la probabilidad calclada.

r= (n2) (1 2)

Donde:

r = Valor del esimador Sden obenido parael coeficiene de correlacin = Valor absolo del coeficiene de correlacinn 2 = Nmero de grados de liberad

2= Valor del coeficiene de deerminacin


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El alor criico obenido de la abla para: 3 grados de liberad, n = 0.05 2 colas es:

2 colas 80% 90% 95%/2

v

0.10 0.05 0.025

1 3.078 6.314 12.706

2 1.886 2.920 4.303

3 1.638 2.353 3.182

4 1.533 2.132 2.776

cri= 3,182

Se obsera qe el alor obserado de r (es decir el calclado) es maor qe cri (99,85 > 3,182),

por lo cal se rechaa la hipesis nla Ho, siendo la correlacin lineal significaia con la

probabilidad calclada.

En cano al rango de aplicabilidad, el ha esablecido qe respeco al LMP elIneralo mnimo aplicable es:

Respeco de n LMP 0,1 ppm, [LMP 3 R, LMP + 3 R].

Respeco de n LMP < 0,1 ppm, [LMP 2 R, LMP + 2 R].

Siendo R la desiacin esndar de la reprodcibilidad.

Ejemplo:

El LMP para mercrio en sal es de 0,1 mg/Kg, por lo cal se aplicara la ecacin de Hori paradeerminar la Rpreisa a ese niel qe es igal a 10

7

CVR (%) = 100 R= 2 0,1505

c

Al despejar la ecacin obendramos lo sigiene:

R= c 2 0,1505

100

c= Es el LMP en mg/Kg es decir; 0,1C= Es cociene de concenracin es decir la concenracin epresada en poencia de 10.


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Ssiendo obendramos:

R= 0,1 2 (0,0000001)0,1505= 0,0233

100

Enonces:

Para n LMP 0,1 ppm se aplica el crierio: [LMP 3 R, LMP + 3 R].

Es decir: LMP + 3 R= 0,1 + (30,0233) = 0,1 + (0,07)0,1 + 0,07 = 0,17 mg/Kg0,1 0,07 = 0,03 mg/kg

Enonces el rango qe se reqera del modo para qe fera acepable debera esar a lo menos enre0,03 0,17 mg/Kg.

Para coeficienes de concenracin < 107, se aplica la eora de Thompson, eso es, CVR% = 22 %por lo ano, R= 0,22 LMP

Ejemplo:

El seala qe para n LMP = 0,01 mg/kg , es decir, para na concenracin de 108,es decir < 107:

El rango de acepabilidad seria:

LMP + 2 R= 0,01 2 R= 0,01 2 (0,22 LMP) = 0,01 0,44 0,01 = 0,01 0,0044 mg/kg

El rango mnimo aplicable para n LM de 0,01 mg/kg es, por lo ano, 0,0060,014 mg/kg.


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SENSIBILIDAD

La sensibilidad es el cociene enre el cambio en la indicacin de n sisema de medicin el cambiocorrespondiene en el alor de la canidad objeo de la medicin.

En na regresin lineal la sensibilidad corresponde a la pendiene (m) de la reca de calibracin.

Se calcla como:

m = XiYi (XiYi/ n)X2i ((Xi)

2/n)

El alor de sensibilidad obenido [m] debe permiir na adecada discriminacin de los alores deconcenracin en base a la lecra.

En figra N 3, se pede obserar qe mienras ms prima al eje de las Y es la reca, significa qe aligeros cambios en las concenraciones esperadas habr grandes ariaciones en los reslados de laslecras obseradas [m2] En el caso de [m3] grandes cambios en la concenracin no son significaiospara la lecra.

F. 3

Se dice, qe n modo es sensible cando na peqea ariacin de concenracin deermina nagran ariacin de respesa.La sensibilidad permie obserar la capacidad de respesa insrmenalfrene a na deerminada canidad de analio. En el iempo, isalia como se compora elinsrmeno.


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LIMITES

Se debe ener en consideracin los sigienes parmeros: Valor criico, limie deeccin (LOD) limiede canificacin (LOQ).

V (LC): El alor de la concenracin o canidad nea qe en caso de sperarse da lgar, parana probabilidad de error dada , a la decisin de qe la concenracin o canidad del analio preseneen el maerial analiado es sperior a la conenida en el maerial esigo (Referencia: ).

Se recomienda para s clclo a lo menos seis mediciones de blanco mari o esigo reacio.

LC = (1;) S : ( 0.05,) 1,645 LC = 1,645

Donde: = Sden1= probabilidad b= Grados de liberad= Desiacin esndar de las lecras del blanco mari o esigo reacio.

Un reslado inferior al LC qe deermine la decisin no deecado no deber inerprearse comodemosracin de qe el analio es asene. No se recomienda noificar al reslado como cero ocomo < LOD. Deber hacerse consar en odo los casos el alor esimado s inceridmbre.

L (LOD): Concenracin o canidad real del analio presene en el maerial objeo deanlisis qe llear, con na probabilidad (1), a la conclsin de qe la concenracin o canidad delanalio es maor en el maerial analiado qe en el maerial esigo (Referencia del Manal del CodeAlimenaris ).

Se recomienda para s clclo a lo menos seis mediciones de blanco mari , esigo reacio oconcenracin esimada cercana al blanco.

LOD = 2 (1;) o S : ( 0.05,) 1,645 LOD = 3,29 o

LOD = 3,29o, cando la inceridmbre del alor medio (esperado) del maerial esigo es insignificane,= = 0,05 el alor esimado iene na disribcin normal con na ariana consane conocida.

Un crierio de acepacin adecado es LC < LOD < LMP. En general ambin se sgiere, para n LMP >0,1 ppm n LOD < 1/10 LMP para n LMP


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Se recomienda para s clclo a lo menos seis mediciones de blanco mari , esigo reacio oconcenracin esimada cercana al blanco.

En ese caso, el LOQ es eacamene 3,04 eces el lmie de deeccin, dada la normalidad = =0,05. En el LOQ es posible lograr na idenificacin posiia con n niel de confiana raonable.

Un crierio de acepacin adecado es LC < LOD


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Para n LMP de 0,5 ppm n LOQ < 1/5 LMP , es decir , se debe deerminar el (LMP/5) , qe es : 0,5/5de 0,1 mg/Kg.

Por lo cal no se esara cmpliendo el crierio pes 0,13mg/Kg es maor 0,1 mg/Kg. El LOQ no seraacepable para el campo de aplicabilidad qe le qiere dar al modo.

En ese senido se pde omar la decisin de bscar oro modo qe cmpla con esos reqisios paraese fin preiso o acepar s aplicabilidad, considerando en la declaracin de la aplicabilidad esasreseras obseraciones en cano a s LOQ.

Es imporane realiar poseriormene la eperiencia analica de la deerminacin del analio en el

niel de concenracin deerminado para el LOD o LOQ, es decir eidenciar reslados eperimenales,qe demesren la alide del reslado obenido.


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EXACTITUD

El manal del define la eacid como el grado de concordancia enre el resladode n ensao el alor de referencia.

El rmino eacid, esa aplicado a n conjno de reslados de n ensao, spone nacombinacin de componenes aleaorios n componene comn de error sisemico o sesgo.

Cando se aplica a n modo de ensao, el rmino eacid se refiere a na combinacin deeracidad precisin. En el sigiene esqema de Tiro al Blanco, ampliamene iliado paraejemplificar eso, los pno orificios eqialdran a los reslados analicos el circlo rojo al cenroel rango en el cal se espera ese el alor de referencia (o erdadero).

Como se pede obserar enre ms era preciso sea n reslado analico, es ms eaco.


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VERACIDAD: Deermina el grado de coincidencia eisene enre el alor medio obenido de na seriede reslados n alor de referencia acepado.

La eracidad pede ser deerminada por sesgo o recperacin.

a) S (): La diferencia enre la epecaia relaia a los reslados de n ensao o namedicin el alor erdadero. En la prcica el alor conencional de canidad pede ssiir el alorerdadero. El sesgo es el error sisemico oal en conraposicin al error aleaorio.

Para deerminar el sesgo pede iliarse maerial de referencia, maerial forificado, maerial conrol,maerial ensao de apid: Para ese fin, se debe medir n analio de concenracin conocido sedeermina la diferencia en alor absolo enre el alor conocido la media del alor obenido .Unadiferencia sisemica imporane en relacin al alor de referencia acepado se refleja en n maoralor del sesgo, cano ms peqeo es el sesgo, maor eracidad indica el modo.

= X X

Donde:s= sesgoX = lecra obenida o alor promedio de las lecras obenidas.Xa= alor asignado, alor cerificado del maerial de referencia o alor esperado.

Para ealar el sesgo, se debe realiar la preba , en la cal el obs< cri:

calc= [ XaX] n

Donde : calc= obserado o calcladoXa= Valor esperado o alor cerificado en concenracinX= Promedio de alores ledos obserados en concenracin= Desiacin esndar

n= Nmero de lecras o alores obserados.

Bscar Sden erico en abla ( Aneo II) para grados de liberad () el porcenaje de segridad

deseado ( 1) para n error . Usalmene se rabaja con n alor de 0,05.


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Ejemplo ejercicio de sesgo:

Para n alor asignado de n maerial de referencia cerificado de 20,1 mg/L de NNO2, losalores obenidos son:

L R/L

(XX)S

1 20,4 20,420,1 0,3

2 20,8 20,820,1 0,7

3 20,6 20,620,1 0,5

4 20,0 20,020,1 0,1

5 20,4 20,420,1 0,3

6 20,6 20,620,1 0,5

7 20,5 20,520,1 0,48 19,9 19,920,1 0,2

9 20,3 20,320,1 0,2

10 20,3 20,320,1 0,2

Desiacin esndar = 0,27 Promedio de las lecras X= 20,38Valor asignado a la mesra Xa= 20,1 Nmero de lecras n= 10 n = 10 = 3,162

calc= [ XaX] = [20,120,38] = 0,32

0,27 10

Se desea esablecer si eise na diferencia significaia enre el alor obenido de la eperienciaanalica el alor de referencia. Enonces, para deerminar el erico o criico para grados de liberad

de n1 ( es decir de 101=9) , n alor =0,05 2 colas, se erae de abla el criico qe es de 2,262,cmplindose qe calc< cri , a qe 0,32 < 2,262. Es decir; no ha diferencias significaias.

2 colas 80% 90% 95%

/2

v

0.10 0.05 0.025

1 3.078 6.314 12.706

2 1.886 2.920 4.303

3 1.638 2.353 3.182

4 1.533 2.132 2.7765 1.476 2.015 2.571

6 1.440 1.943 2.447

7 1.415 1.895 2.365

8 1.397 1.860 2.306

9 1.383 1.833 2.262

10 1.372 1.812 2.228

A ras del ejercicio se pede obserar qe para la medicin de Nirios en aga el sesgo obenidopara el modo iliado es acepable, por lo ano s eracidad es acepable.


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) R (R):Es la fraccin de la ssancia agregada a la mesra (mesra forificada) anes delanlisis, al ser analiadas mesras forificadas sin forificar.

La recperacin permie er el rendimieno de n modo analico en cano al proceso de eraccin la canidad del analio eisene en la mesra original. Por lo cal, la recperacin esainrnsecamene relacionada a las caracersicas de la mari de la mesra.

Se recomienda realiar a lo menos 6 mediciones de cada no en lo posible en res nieles. Se debeconsiderar al elegir esos nieles el rango de la cra de calibracin del modo, el LOD el LMPesablecido. De manera qe los nieles seleccionados permian enregar la mejor informacin posiblerespeco a la capacidad de recperacin del modo, en cano a esos alores criicos.

Se calcla de la sigiene manera:

R = CeCoCa

Siendo:R= RecperacinCe = es la concenracin de analio de la mesra enriqecida.C0= es la concenracin de analio medida en la mesra sin adicionar.Ca= es la concenracin de analio adicionado a la mesra enriqecida.

Se pede igalmene epresar en (%R): se calcla de la sigiene manera:

%R = [ R ] 100

En caso de ealar la recperacin, se deber realiar preba , en la cal el calc cri( ), los reslados reporados debern ser

corregidos.


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Si el calc cri( ), no es necesario ningna correccin.

El Crierio de acepacin en base al alor obenido para el porcenaje de recperacin pede iliarselos crierios de AOAC. En caso de iliar crierio de AOAC ( Ver Aneo III), se debe bscar en abla deacerdo a la concenracin esperada del analio si el % R obenido de la eperiencia analica, seencenra denro del rango de %R ericos esperados.

En caso qe se cene con n MRC iliar el rango de acepabilidad sealado en el cerificado comocrierio de acepabilidad. Es decir, el alor deerminado analicamene deber enconrase denro delrango de olerancia esablecido a ras de cerificado, es decir, del limie sperior (LS) o limie inferior(LI).

Cabe sealar qe el seala qe eisen direcrices relaias a los ineralos preisos

de recperacin en reas especficas de anlisis, como por ejemplo: Residos de plagicidas (RP) oresidos de medicamenos eerinarios (RMV). En casos en los qe se haa demosrado qe larecperacin es na fncin de la mari, podrn aplicarse oros reqisios especificados.

E E R:

Se ilio forific na mesra de carne de marisco a na concenracin 15 mg/100g de Cadmio seanalio por foomera de absorcin amica.

L C C C R %R

1 0,1 15,0 15,00,993

99,32 0,0 15,0 14,0 0,933 93,3

3 0,1 15,0 13,0 0,860 86,0

4 0,1 15,0 16,0 1,060 106,0

5 0,0 15,0 14,0 0,933 93,3

6 0,2 15,0 13,0 0,853 85,3

El promedio obenido del porcenaje de recperacin es de : %R = 93,9

i) De acerdo a abla de AOAC al niel de 10 ppm el alor acepable es de 80 a 110 %R por lo cal elalor obenido en la eperiencia seria acepable para el niel medido en la mari analiada.

ii) En caso de iliar como crierio de acepabilidad la preba , enonces, la deerminacin del alorde calclado, sera:

Desiacin esndar del % R, %= 7,90

Mediciones, n=6

calc= [ 100 93,9] =0,315

7,90 6


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Se desea deerminar si eise diferencia significaia enre el alor de % recperacin deerminado el

10% de Recperacin. Para deerminar el criico para grados de liberad de = n1 ( es decir de 61=5), 2 colas n alor =0,05 , se erae de abla sden:

2 colas 80% 90% 95%

/2

v

0.10 0.05 0.025

1 3.078 6.314 12.706

2 1.886 2.920 4.303

3 1.638 2.353 3.182

4 1.533 2.132 2.776

5 1.476 2.015 2.571

6 1.440 1.943 2.447

El erico o criico es de 2,015, cmplindose qe calc< cri , a qe 0,315 < 2,571. Es decir no eisendiferencias significaias.

PRECISION: La precisin podr esablecerse en rminos de repeibilidad reprodcibilidad. Elgrado de precisin se epresa habialmene en rminos de imprecisin se calcla comodesiacin esndar de los reslados (Referencia: Manal Code Alimenaris 18 Ed.).

) R: Es la precisin bajo las condiciones de repeibilidad, es decir, condiciones dondelos reslados de anlisis independienes se obienen con el mismo modo en ems de anlisis

idnicos en el mismo laboraorio por el mismo operador iliando el mismo eqipamienodenro de ineralos coros de iempo.

Se pede deerminar regisrando a lo menos 6 mediciones bajo las mismas condiciones (mismooperador, mismo aparao, mismo laboraorio en coro ineralo de iempo) de n analio en nMaerial de Referencia. Calclar la Desiacin Esndar (Sr) el porcenaje de coeficiene deariacin (CVr%).

) R: Es la precisin bajo las condiciones de reprodcibilidad, es decir, condicionesdonde los reslados de los anlisis se obienen con el mismo modo en em idnicos deanlisis en condiciones diferenes a sea de laboraorio, diferenes operadores, sando disinos

eqipos, enre oros.

Para deerminar la precisin de la reprodcibilidad inralaboraorio (Ri) ( es decir, la precisindenro de n laboraorio), se sgiere realiar 3 mediciones de n Maerial de Referencia (MRC omaerial conrol) na e por cada semana o el comporamieno de la cra de calibracin en 3das disinos.

Tambin, se pede deerminar regisrando a lo menos 10 mediciones en das disinos, o en nmismo da cambiando a lo menos na condicin analica (ejemplo: operador, aparao, reacios largo ineralo de iempo) de n analio en n Maerial de Referencia. Calclar la desiacinesndar (SRi) el porcenaje de coeficiene de ariacin (CVRi%).


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Cando se desea deerminar la reprodcibilidad inerlaboraorios para fines de alidacin de nmodo, deben paricipar diferenes laboraorios, se debe ener en consideracin qe esos

ilicen el mismo modo misma mesra, en n ineralo de iempo preferenemeneesablecido, se deermina de ese modo la desiacin esndar de los reslados obenidos porlos diferenes laboraorios (SR).

El crierio de acepabilidad para la precisin se pede hacer en base a coeficiene de ariacin deHori :

CV% = 2(10.5)log C ambin se epresa como; CVh%= 0,02 c

0.8495

Donde:C= alor nominal del analio epresado en poencia de 10, ejemplo 1ppm = 1mg/L =106

En ese senido se esablece para la repeibilidad, el CVr% obenido debe ser < (CVh%/2).

En el caso de la reprodcibilidad inerlaboraorio el CVR%


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Si el alor asignado es de 1 mg/Kg , para el calclo de Coeficiene de ariacin porcenal de hori ,el alor nominal del analio es eqialene a 0,00000120, es decir a 1,2 106. el CV% pararepeibilidad es la miad del alor calclado del CV%h.

CV% = 2(10.5)log 0,0000012= 7,78%

2

De acerdo a Hori el CV% para repeibilidad es de 7,78%. Por lo cal se cmple el crierio deacepabilidad esablecido.

En caso qe se desee se pede realiar el esdio de reprodcibilidad repeibilidad, a ras de n (er aneo N III). El esdio ANOVA (de facores oalmene anidados homogneos) consise en el anlisis simple de ariana de las desiaciones esndar para cada no delos nieles de ensao, para s deerminacin se podr iliar si se dispone de n sofare esadsico o

na planilla Ecel.

Ejemplo de esdio de reprodcibilidad:

Se reali el anlisis de ariana a 10 mesras de slfaos en agas 1 mg/L en n oal de 10eperiencias.

L F C /L

1 da 1 1,08

2 da 1 1,07

3 da 2 1,004 da 3 1,10

5 da 4 0,99

6 da 5 1,00

7 da 6 1,02

8 da 8 1,05

9 da 8 1,06

10 da 8 1,09

Promedio obenido X= 0,95 mg/Kg

La desiacin esndar obenida es de SRi= 0,041 mg/Kg

El coeficiene de ariacin porcenal obenido es CVRi% =3,88%

El coeficiene de ariacin porcenal de Hori es:

CV% = 2 2(10.5)log 0,0000010= 10,67%

3De acerdo a Hori el CV% para reprodcibilidad es de 10,67%. Por lo cal se cmple el crierio de

acepabilidad esablecido, a qe . CVRi% < CV%


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ROBUSTEZ

La robse es na medida de la capacidad de n procedimieno analico de no ser afecado porariaciones peqeas pero deliberadas de los parmeros del modo; proporciona na indicacin de lafiabilidad del procedimieno en n so normal. En ese senido el objeio de la preba de robse esopimiar el modo analico desarrollado o implemenado por el laboraorio, describir bajo qecondiciones analicas ( inclidas ss olerancias), se peden obener a ras de ese resladosconfiables.

Un modo de ensao es ms robso enre menos se ean afecados ss reslados frene a namodificacin de las condiciones analicas.

Enre las condiciones analicas qe podran afecar a n modo se encenran:

Analisas

Eqipos Reacios pH emperara. Tiempo de reaccin. Esabilidad de la mesra. Oros.

Para esa deerminacin se aplica el T Y Spara la ealacin de la robse de nmodo qmico analico. Ese procedimieno permie ealar el efeco de siee ariables con sloocho anlisis de na mesra.

Para proceder a realiar el esdio de robse se deben idenificar aqellos facores del modo qeposiblemene afecaran los reslados finales obenidos a ras de ese.

Esas facores esn presenes habialmene en el modo (ejemplo: emperara, composicin defase mil o solciones reacias, pH de solcin, amao de celda especrofoomrica, fljo gascarrier, spli, ec.). Para esdiar la robse se procede a eponer a cada facor a n esdio deariable, es decir se epone a na ariacin respeco de la esablecida en el modo, es decir, cadaariable se esdia mediane n alor alo (A, B,...,G) oro bajo (a,b,...,g). Una e esablecidos esosalores se disean ocho prebas de ensao como, por ejemplo, mesra la abla N 3.

Los facores a esdiar no deben ser necesariamene siee; pede considerarse n nmero menor deariables. Eso no afecar el balance del diseo del eperimeno, pero es imporane considerar qesiempre se den llear a cabo los ocho prebas de ensao indicado.

Los reslados de la eperiencia analica obenidos con las ariaciones realiadas en esas 8 prebas serepresenan con las leras s hasa la .


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A parir de los reslados pede calclarse el efeco de cada na de las ariables haciendo la media delos caro anlisis qe conienen la ariable en s alor ms alo (mascla) aqellas qecorresponden al alor ms bajo (minscla). As, para ealar el efeco de la primera ariable obsrese

qe:

(s + + +) = 4A = A ( + + +) = 4a = a4 4 4 4

Es decir, la media de los reslados (s + + + ) eqialen a A porqe las seis resanes ariablespresenes en esos caro reslados se anlan enre s como consecencia de qe eisen siempre dosmasclas dos minsclas de cada ariable. Anlogamene, la media de los reslados ( + + + )eqialen a a.

Para calqier ora ariable se pede proceder de manera similar, al como mesra la abla sigiene:

Tabla N 3: Preba de Robse de Yonden Seiner

Se deben esablecer las siee comparaciones posibles, es decir las diferencias enre la ariable de maoralor erss la de menor alor:

(A a), (B b), (C c), (D d), (E e), (F f) (G g)

De ese modo se pede conocer el efeco de cada ariable. En ese senido, cano maor sea ladiferencia de los reslados enre el alor maor el alor menor (= X), maor inflencia endrdicha ariable en el modo analico.

Como crierio deacepacin para la robse del modo se considera qe la diferencia enre el aloralo el alor bajo sea sperior a 2 de la desiacin esndar de la precisin del modo (), es decir:

( X ) < 2 .

ANALISISV

1 2 3 4 5 6 7 8

A,a A A A A a a a a

B,b B B B b B b b b

C,c C c C c C c C c

D.d D D d d d d D D

E,e E e E e e E e E

F,f F f f F F f f F

G,g G g g G g G G g

RESULTADOS


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Una informacin adicional de ese es de Yoden es qe la desiacin esndar de los reslados s a consie na medida ecelene de la imprecisin preisible del modo cando se ilia para elanlisis de rina, a qe ese procedimieno inrodce deliberadamene el ipo de ariacin en las

ariables qe pede esperarse qe ocrra drane el empleo normal del modo.

Ejemplo: Robse para rbiedad.

CONDICIN VARIABLE ANALISIS

T CVA X

VB 1 2 3 4 5 6 7 8

Temperara, C A, 22 15 22 22 22 22 15 15 15 15

Cbea, ipo B, 1 2 1 1 2 2 1 1 2 2

Tiempo Agiacin, seg C, 60 30 60 30 60 30 60 30 60 30

Tiempo Lecra, seg D, 30 0 30 30 0 0 0 0 30 30

Siliconado E, si no si no si no no si no si

Volmen, mL F, 30 25 30 25 25 30 30 25 25 30

Esabiliacin eqipo, h G, 1 0 1 0 0 1 0 1 1 0

RESULTADOS (NTU) 20,1 20,7 22,0 21,3 22,3 22,2 20,6 21,1

Para las ariables A a :

Donde el promedio de A se calcla: 20,1 + 20,7 + 22,0 + 21,3 = 21,04

Donde el promedio de a se calcla: 22,3 + 22,2 + 20,6 + 21,1 = 21,64

Para las ariables B b :

Donde el promedio de B se calcla: 20,1 + 20,7 + 22,3 + 22,2 = 21,34

Donde el promedio de b se calcla: 22,0 + 21,3 + 20,6 + 21,1 = 21,34

Condicin Variable Resultados Diferencia ComparacinV A X V B P X P (X) < 2 DS

A a 21,0 21,6 0,525 No Sensible a Variable

B b 21,3 21,3 0,075 No Sensible a Variable

C c 21,3 21,3 0,075 No Sensible a Variable

D d 20,6 22,0 1,325 Sensible a Variable

E e 21,4 21,2 0,125 No Sensible a Variable

F f 21,2 21,4 0,175 No Sensible a Variable

G g 21,1 21,5 0,475 No Sensible a Variable


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: 0,813 2 : 1,150

Por lo ano las ariables sensibles, no debern modificarse las ariables qe se esablecieron como

sensibles en el esdio de robse, se deber manener el alor nominal esablecido en el modo,para dicha condicin.


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APLICABILIDAD

Se ilia el rmino de A, cando n modo de anlisis pede iliarse saisfacoriamenepara los analios, marices concenraciones preisas. La declaracin de aplicabilidad (o ), adems de na declaracin del margen de fncionamieno saisfacorio para cada facor,pede inclir ambin aderencias acerca de la inerferencia conocida de oros analios, o de lainaplicabilidad a deerminadas marices siaciones.

Es decir, la aplicabilidad consise en na declaracin de las especificaciones del rendimieno delmodo, qe se enrega en el informe de alidacin qe normalmene incle la sigieneinformacin:

La idenidad de la ssancia analiada, inclendo en s caso, de especiacin (por ejemplo, "elarsnico oal",meilmercrio).

El ineralo de concenraciones cbiero por la alidacin (por ejemplo, "050 ppm")

Una especificacin de la gama de las marices del maerial de preba cbiero por la alidacin (porejemplo,"marisco", prodcos lceos, ec.).

La aplicacin preisa de ss reqisios de inceridmbre cricos. (ejemplo: anlisis de residos deplagicidas en fras cricas de acerdo al reglameno saniario de alimenos).

En ese senido, la preba de aplicabilidad, consise en el mbio de aplicacin del modo declaradopor el responsable de la alidacin, na e conclida esa.

En aqellos casos qe se rae de n modo normaliado oficialiado, esa declaracin se realia deacerdo a los anecedenes bibliogrficos o normaios del modo.


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V: INCERTIDUMBRE

La inceridmbre de na medicin es el parmero asociado al reslado, es decir, caraceria ladispersin de los alores qe raonablemene peden ser aribidos al mesrando.

En ese senido, es imporane qe para n modo alidado o erificado por el laboraorio, se realicela deerminacin de las diferenes fenes o componenes de la inceridmbre de la medicinpresenes:

) Mesreo) Efecos de la mesra: ipo de mari, almacenamieno, ec.) Sesgos Insrmenales: Las debidas a las caracersicas de los eqipos iliados para realiar lasmedidas ales como: deria, resolcin, magnides de inflencia. Ejemplo: emperara) Prea de Reacios: maeriales de referencia, preparacin de esndares.) Analisa: Las debidas a la serie de mediciones: ariaciones en obseraciones repeidas bajocondiciones aparenemene igales. Ejemplo: paralelaje) Condiciones de medicin: Las debidas al cerificado de calibracin: en l se esablecen lascorrecciones las inceridmbres asociadas a ellas, para n alor de deerminado, en las condicionesde calibracin. Ejemplo: maerial olmrico, ec.) Condiciones de medicin: emperara, hmedad, ec.) Oras: Modo (por ejemplo al inerpolar en na reca), ablas (por ejemplo las consanes), pesada,alcoa, efecos compacionales, ec.

Generalmene para el anlisis de las fenes de inceridmbre se ilia el diagrama de espina depescado oro ipo de diseo esqemico qe permia con facilidad idenificar las fenes de

inceridmbre presenes drane el proceso analico. Ejemplo:


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La inceridmbre de la medicin comprende, en general, mchos componenes. Algnos de esospeden ser ealados por ipo.

Para ese fin el laboraorio deber realiar na ealacin de las inceridmbres ipo A B qeesn presenes en el modo:

E A:Ealacin de n componene por n anlisis esadsico de losalores de mediciones obenidos en condiciones de medicin definidas. Ejemplo: realiar ariasmediciones en condiciones de repeibilidad.

E B: Ealacin de n componene inceridmbre de la medicinrealiada por oros medios disino a los del ipo A. Ejemplos: La ealacin basada en la informacin,obenidos a parir de n cerificado de calibracin, obenidos a parir de los lmies dedcirse a rasde personal la eperiencia, ec.

En general, la inceridmbre esa dada por los errores sisemicos aleaorios presenes en el ensaoanalico.

Fene: Naional Food Adminisraion of Seden.


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La deerminacin de la inceridmbre incle generalmene 4 pasos, el primero como se ha dichoaneriormene corresponde a la deerminacin de las fenes, el segndo en epresar loscomponenes en na inceridmbre esndar , el ercero combinar las diferenes inceridmbres el

caro paso es la deerminacin de la inceridmbre epandida es decir, mliplicar la inceridmbrecombinada por n facor de coberra de k= 2, a fin de enregar n 95% de confiana, as esablecerel ineralo enorno al reslado de la medicin en el cal se pede esperar qe se incla la maorfraccin de la disribcin de los alores qe se peden aribir raonablemene al mesrando.

Los reslados obenido se epresaran como por ejemplo: 178 g/L + 14 g/L , qe corresponde a 178g/L + ( 27 g/L), es decir, el reslado enregado, corresponde a n ineralo de a 2 qerepresena n niel de confiana del 95 % denro del cal se enconrara el alor real.

En algnos casos peden eisir maores eigencias en cano al alor del facor de coberra iliadopara obener la inceridmbre epandida, pdindose soliciar o reqerir n k= 3, a fin de enregar n

99,7 % de confiana, eso generalmene se pede soliciar frene a deerminados conaminanes oresidos.

La deerminacin de la inceridmbre realiada por el laboraorio debe esar debidamenedocmenada.

Para demosrar qe n modo analico es adecado para el fin preiso, el laboraorio deberdemosrar a ras de na eidencia objeia qe el modo analico ha sido adecadamene alidadoo erificado.

En ese senido, el laboraorio debe demosrar qe las caracersicas de desempeo del modoanalico iliado, son adecadas para el so desinado:


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Fene: Naional Food Adminisraion of Seden.


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VI: ANEXOS

ANEXO N 1: FORMATO TIPO DE PLAN DE VALIDACION

PLAN DE VALIDACION

N:

1) Alcance de la alidacin:

Modo:

Analio:

Marices:

Reqerimienos del modo:

Tipo: Validacin rerospecia Validacin prospecia Verificacin

Procedimieno de alidacin:

2) Diseo eperimenal:

[Sealar Marices de las mesras:, Tesigos reacios, Blanco mari, Maerial dereferencia /o Maerial de referencia cerificado, Mesras forificadas nieles deforificacin.

Indicar las preba(s) parmero(s) de alidacin a ealar, nmero de anlisisreqeridos segn preba(s) crierios de acepabilidad para cada parmero dealidacin

Sealar analisa(s) responsable de realiar la(s) preba(s) analica(s) Fecha(s)

programadas]

pgina de

:


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3) Maeriales, insmos eqipos necesarios para desarrollar la alidacin:

P F F E

Nombre:Cargo:

C, : F F

Pgina de


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ANEXO N 2: FORMATO TIPO DE INFORME DE VALIDACION

INFORME DE VALIDACION DE MTODO DE ENSAYO

N V:

N :

T M: Caliaio Caniaio Normaliado Normaliado modificado No Normaliado Neo A:U:M ( ):

R V:

F:F:

,

E : (, , , , , , .)

S / : (, , , ,, .)

M R: (, , , , , .)

M R C: (, , . , , , , , .)

pgina de


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P :SeleciidadLinealidad Sensibilidad LmiesEacid: Veracidad PrecisinRobseOros:

Descripcin : ( ).

T :Calibracin eerna Calibracin en mari

Calibracin eerna esndar inerno (SI) Calibracin en mari esndar inerno (SI)

E : I :IC.: .:

ICL.: .:V C A

R L:

C C ():C:

Descripcin : ( ).

V C A

, :

C :

C:

pgina de


60/70

Descripcin ( ).

V () C A

L , LC:

L , LOD:

L , LOQ:

C:

Descripcin ( ).

V () C A

Longid de onda (m.)

Longid de onda (em)/ (e)

Masa monioreada

Transicion(es) monioreda (s)

% Falsos posiios

% Falsos negaios

Inerferencia(s) Conocida(s): Correccin(es) a Inerferencias:

C:

Descripcin ( ).

P RN/ () SD % CV C A

C:

pgina de


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P C R

N/ () SD % CV C A

C:

V () C A

Precisin del modo %RSDHorra

C:

Descripcin ( ).

V () C A

L , XS, :

S, :

C:

R

N/ () R % R C() A

C:

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ROBUSTEZ

Descripcin ( ).

Variables

A,a B,b C,c D.d E,e F,f G,g

Reslados

s S s

(X) V () C A

A,a

B,b

C,cD.d

E,e

F,f

G,g

APLICABILIDAD

( : , , ,

).

ANEXOS

( ,

):

R : Validacin: F F

Nombre:

Cargo:AcepadaRechaada

OBSERVACIONES

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ANEXO N 3: TABLA DE LA DISTRIBUCIN Sden

2 colas 80% 90% 95% 98% 99%

/2

v

0.10 0.05 0.025 0,01 0,0015

1 cola 90% 95% 97.5% 99% 99,5%

v

0.10 0.05 0.025 0,01 0,0015

1 3.078 6.314 12.706 31.821 63.657

2 1.886 2.920 4.303 6.965 9.925

3 1.638 2.353 3.182 4.541 5.841

4 1.533 2.132 2.776 3.747 4.604

5 1.476 2.015 2.571 3.365 4.032

6 1.440 1.943 2.447 3.143 3.707

7 1.415 1.895 2.365 2.998 3.499

8 1.397 1.860 2.306 2.896 3.355

9 1.383 1.833 2.262 2.821 3.250

10 1.372 1.812 2.228 2.764 3.169

11 1.363 1.796 2.201 2.718 3.106

12 1.356 1.782 2.179 2.681 3.055

13 1.350 1.771 2.160 2.650 3.012

14 1.345 1.761 2.145 2.624 2.97715 1.341 1.753 2.131 2.602 2.947

16 1.337 1.746 2.120 2.583 2.921

17 1.333 1.740 2.110 2.567 2.898

18 1.330 1.734 2.101 2.552 2.878

19 1.328 1.729 2.093 2.539 2.861

20 1.325 1.725 2.086 2.528 2.845

21 1.323 1.721 2.080 2.518 2.831

22 1.321 1.717 2.074 2.508 2.819

23 1.319 1.714 2.069 2.500 2.807

24 1.318 1.711 2.064 2.492 2.797

25 1.316 1.708 2.060 2.485 2.78726 1.315 1.706 2.056 2.479 2.779

27 1.314 1.703 2.052 2.473 2.771

28 1.313 1.701 2.048 2.467 2.763

29 1.311 1.699 2.045 2.462 2.756

30 1.310 1.697 2.042 2.457 2.750

40 1.303 1.684 2.021 2.423 2.704

60 1.296 1.671 2.000 2.390 2.660

120 1.289 1.658 1.980 2.358 2.617

1.282 1.645 1.960 2.326 2.576


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ANEXO N 4: TABLA FF DISTRIBUCIN (= 0,05)

G F 2 3 4 5 6 7 8 9 10 20

1 161.44622 199.49948 215.70668 224.58335 230.16037 233.98752 236.76694 238.88424 240.54316 241.88193

2 18.51276 19.00003 19.16419 19.24673 19.29629 19.32949 19.35314 19.37087 19.38474 19.39588

3 10.12796 9.55208 9.27662 9.11717 9.01343 8.94067 8.88673 8.84523 8.81232 8.78549

4 7.70865 6.94428 6.59139 6.38823 6.25607 6.16313 6.09421 6.04103 5.99880 5.96435

5 6.60788 5.78615 5.40945 5.19216 5.05034 4.95029 4.87586 4.81833 4.77246 4.73506

6 5.98737 5.14325 4.75706 4.53369 4.38737 4.28386 4.20667 4.14681 4.09901 4.05996

7 5.59146 4.73742 4.34683 4.12031 3.97152 3.86598 3.78705 3.72572 3.67667 3.63653

8 5.31764 4.45897 4.06618 3.83785 3.68750 3.58058 3.50046 3.43810 3.38812 3.34717

9 5.11736 4.25649 3.86254 3.63309 3.48166 3.37376 3.29274 3.22959 3.17890 3.13727

10 4.96459 4.10282 3.70827 3.47805 3.32584 3.21718 3.13547 3.07166 3.02038 2.97824

11 4.84434 3.98231 3.58743 3.35669 3.20388 3.09461 3.01233 2.94798 2.89622 2.85362

12 4.74722 3.88529 3.49030 3.25916 3.10587 2.99612 2.91335 2.84857 2.79638 2.75339

13 4.66719 3.80557 3.41053 3.17912 3.02543 2.91527 2.83210 2.76691 2.71436 2.67102

14 4.60011 3.73889 3.34389 3.11225 2.95825 2.84773 2.76420 2.69867 2.64579 2.60216

15 4.54307 3.68232 3.28738 3.05557 2.90130 2.79046 2.70663 2.64080 2.58763 2.54371

16 4.49400 3.63372 3.23887 3.00692 2.85241 2.74131 2.65720 2.59109 2.53767 2.49351

17 4.45132 3.59154 3.19677 2.96471 2.81000 2.69866 2.61430 2.54796 2.49429 2.44992

18 4.41386 3.55456 3.15991 2.92775 2.77285 2.66130 2.57672 2.51016 2.45628 2.41170

19 4.38075 3.52189 3.12735 2.89511 2.74006 2.62832 2.54354 2.47677 2.42270 2.37793

20 4.35125 3.49283 3.09839 2.86608 2.71089 2.59898 2.51401 2.44707 2.39282 2.34787

21 4.32479 3.46679 3.07247 2.84010 2.68478 2.57271 2.48758 2.42046 2.36605 2.32095

22 4.30094 3.44336 3.04912 2.81671 2.66127 2.54906 2.46377 2.39650 2.34193 2.29669

23 4.27934 3.42213 3.02800 2.79554 2.64 2.52766 2.44223 2.37481 2.32011 2.27472

24 4.25968 3.40283 3.00879 2.77629 2.62065 2.50819 2.42263 2.35508 2.30024 2.25474

25 4.24170 3.38520 2.99124 2.75871 2.60299 2.49041 2.40473 2.33706 2.28210 2.23648

26 4.22520 3.36901 2.97516 2.74260 2.58679 2.47411 2.38831 2.32053 2.26545 2.21972

27 4.21001 3.35413 2.96035 2.72777 2.57189 2.45911 2.37321 2.30531 2.25013 2.20430

28 4.19598 3.34039 2.94668 2.71407 2.55812 2.44526 2.35926 2.29127 2.23598 2.19004

29 4.18297 3.32766 2.93403 2.70140 2.54538 2.43244 2.34634 2.27825 2.22288 2.17685

G

30 4.17089 3.31583 2.92228 2.68963 2.53355 2.42052 2.33435 2.26616 2.21070 2.16458


65/70

ANEXO N 4: TABLA DE % DE RECUPERACION

ANALITO UNIDAD RECUPERACIN ESTIMADO (%)

100 100% 98 102

10 10% 98 102

1 1% 97 103

0,1 0,10% 95 105

0,01 100 ppm 90 107

0,001 10 ppm 80 110

0,0001 1 ppm 80 110

0,00001 100 ppb 80 110

0,000001 10 ppb 60 115

0,0000001 1 ppb 40 120

F:


66/70

ANEXO N 5: TABLA DE HORWITZ

CONCENTRACIN REPETIBILIDADCV%r

REPRODUCIBILIDAD INTERNACV%R

1 pp 1 / 1012 1,00E12 64,0 85,3

10 pp 10 / 1012 1,00E11 45,3 60,3

100 pp 100 / 1012 1,00E10 32,0 42,7

1 ppb 1 / 109 1,00E09 22,6 30,2

10 ppb 10 / 109 1,00E08 16,0 21,3

100 ppb 100 / 109 1,00E07 11,3 15,1

1 ppm 1 / 106

1,00E06 8,00 10,7

10 ppm 10 / 106 1,00E05 5,66 7,54

100 ppm 100 / 106 1,00E04 4,00 5,33

1000 ppm 1000 / 106 1,00E03 2,83 3,77

1% 1 / 102 1,00E02 2,00 2,67

10% 10 / 102 1,00E01 1,41 1,89


67/70

ANEXO N 6: EJEMPLO DE ESQUEMA GENERAL PARA EL DESARROLLO DE UN PLAN DEVALIDACION DE UN MTODO NORMALIZADO

El sigiene es n esqema qe mesra n ejemplo de cmo se desarrollo el plan de alidacin de nmodo como se esablecieron los correspondienes crierios de acepabilidad.

L:Realiar 3 cras de calibracin con 4 esndares inclido el blanco, deerminar el alor decoeficiene de correlacin promedio de las 3 cras.Crierio de acepabilidad: > 0,99

L: Realiar 10 ensaos de medicin de na mari de mesra en n niel de concenracincercano al LOD esperado, deerminar la desiacin esndar de las concenraciones obenidas ( ) ,calclar el alor de LOD como LOD= 3,29 .Crierio de acepabilidad: para n LMP > 0,1 ppm n LOD < 1/10 LMP para n LMP


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VI: BIBLIOGRAFA

1. , . Validacin de modos analicos, Asociacin Espaola de Farmacicos deIndsria, Barcelona, 2001, pare II

2. Diseo eperimenal del Esdio de Validacin de Modos Analicos. Sedish NaionalFood Adminisraion. Research & Deelopmen Deparmen. Leonardo Merino.

3. Esdio de Validacin de Modos Analicos (Una ga prcica para laboraoriosQmicos). Sedish Naional Food Adminisraion. 2007.

4. Esadsica Qimiomera para Qmica Analica. James N. Miller, Jane C. Miller.

Pearson. 4a Ediion. 2002.

5. Gide o Qali in Analical Chemisr An Aid o Accrediaion. CITAC/EURACHEMGUIDE. 2002.

6. Handbook for calclaion of measremen ncerain in enironmenal laboraories.Ediion 2. B. Magnsson e al. NT TECHN REPORT 537.

7. Manal de Procedimieno Comisin del 19 Edicin OMS/FAO.

8. Llod A. Crrie, Nomenclare In Ealaion Of Analical Mehods Inclding Deecion AndQanificaion Capabiliies. IUPAC. Vol. 67, No. 10, pp. 16991723, 1995.

9. M. Thompson, S.L.R. Ellison and R. Wood. Pre Appl. Chem., 74, (5) 835 855(2002).

10.Official Mehods of Analsis of AOAC Inernaional. 18 h Ediion, 2005. Appendi E:Laboraor Qali Assrance.

11.Qanifing Uncerain in Analical Measremen. EURACHEM/CITAC Gide CG4.Second Ediion. QUAM:2000.1.

12.Validacin de Modos de anlisis qmicos Procedimieno NMKL No. 4 (1996). VersinEspaol 1 , febrero 1997

13.VAM Projec 3.2.1 Deelopmen and harmoniaion of measremen UncerainPrinciples. Par (d): Proocol for ncerain ealaion from alidaion daa. Janar2000. LGC/VAM/1998/088.


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C it Edit B i D f F bi l R j I b l G L i R L i R d M l S t M i l A il

Documents

Validación de Métodos y determinación de la incertidumbre de la medición_1