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2. Diagnstico ind
Se utilizan pruebas serolg
Del esquema expuesto ant
Cultivo e identificaciny,
CULTIVO E IDE
Los hongos pueden crecerhongo dimrfico aplicabltambin Agar Sabouraucloranfenicol u otros antiutilizar diferentes medios o
a)
Medio de PIM.Es un medio de aislamientque inhibe a las levaduras
b) Medio de DIXON.
Tiene el tween que represCon este medio, se detecta
c) CHROMAgar Ca
.
. .
Jorge Perea A
recto.
icas, deteccin de anticuerpos antimicelo y e
eriormente, lo ms importante es explicar
por ello, se va a profundizar principalmente
TIFICACIN.
n Agar Sangrepero hay que tener en cuena determinados hongos. Sin embargo,en diferentes variantes: slo, con ciclo
acterianos. Para la identificacin de un htcnicas.
de Prototecas. El componente esencial es lpermite el crecimiento de dicho hongo.
nta alrededor del 80% del medio y es comfundamentalmente Malassezia.
dida.Se trata de un medio cromognico.
(
. .
+
mijo 2014-2015
-D-glucano.
os apartados de
en stos.
a el concepto dee suele utilizareximida y conngo, se pueden
5-Fluorcitosina
onente esencial.
).
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d) Sistemas enzimtnitrato-reductasa y
e) Auxonograma.
Consiste en la adiccin deEn esta prueba, se aade al30C durante 24-72 horas.es transparente, negativo.
Los pocillos se distribuyenesta agrupacin, su puntuavale 1 punto, si es el del mde 7 puntos cada tro.
f) Fungigrama (Sens
Consiste en una microd(concentracin mnima inhlos hongos y el inoculo n
medio.
Es importante destacar elen que, a una determinadste no crece pero hay cashongo s puede crecer. Adla concentracin, el hongo
Se utiliza un indicador qurosasi es positivo. Esta pr
:
:
Jorge Perea A
cos. Por ejemplo, Cryptococcus Neoforenol oxidasa positivos.
nutriente y observar si el microorganismo lorededor de 100 microlitos a cada pocillo y si el contenido del pocillo se vuelve turbio, s
en tros y, dependiendo de la posicin delin ser diferente. As, si el primer pocillo
edio 2 puntos y, si es el tercero, 4 puntos, si
titre Yeast-One).
ilucin en placa que nos permite deteibitoria). El medio empleado es el RPMI doecesario es 05 escala de Mac Farland el
fecto paradjicoque ocurre en esta pruebaconcentracin, el antifngico es eficaz co
os en los que a mayor concentracin de esms, tambin puede suceder que si aumentano crece.
es el Azul de Alamar el cual aparece azuleba viene representada la siguiente forma:
:
. :
.
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ans es ureasa,
s consume o no.mantiene a 28-
er positivo y, si
ocillo dentro dese vuelve turbio,ndo un mximo
minar la CMIde crecen todosual se aade al
el cual consistetra ese hongo y
antifngico, elos nuevamente
si es negativo y
(
)
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A1:Control (aparecer rosa). A2-A11:Anidulafungina. B1-B11:Micafungina. C1-C11:Caspofungina.
D1-D11:5-Fluorcitosina. E1-E11:Posaconazol. F1-F11:Voriconazol. G1-G12:Itraconazol. H1-H12:Fluconazol. 12A-12F:Anfotericina B.
PRCTICAS 20: DIAGNSTICO DE LAS AMEBAS Y
FLAGELADOS INTESTINALES.
1. ENTAMOEBA HISTOLYTICA.
Su forma de trofozoito presenta unectoplasma hialino con pseudpodos. Esmvil y tiene un ednoplasma con restostisulares y hemates. El ncleo es excntricocon grumos de cromatina en disposicin en
rueda de carro. Se puede observar en fresco,con lugol o con tincin tricrmica que nospermite diferenciarla deEntamoeba Coli.
La forma de trofozoito puede sufrir una disminucin del ectoplasma y del endoplasma,dando lugar a un prequiste el cual terminar formando el quiste, responsable de lapatogenia la cuales suele ser la como disentera amebiana o amebiosis intestinal. Elquiste es esfrico, carece de ectoplasma, con 1-4 nucleos (no ms de 4) que depende dela madurez. Adems, tienen grumos de glucgeno que se disponen en forma de barras,denominadoscuerpos cromatoidales.
2. ENTAMOEBA COLI.
Su forma de trofozoitose presenta como una masaameboide incolora. Sus movimientos sontpicamente lentos con formacin de pseudpodosanchos y cortos. En el interior de su endoplasma,se pueden apreciar vacuolas y el ncleo sin ladisposicin de rueda de carro. Su forma de quistese diferencia deE. Histolyticaen que presenta ms
de 4 ncleos.
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3. IODAMOEBA BTSCHLII.
Su forma de trofozoitotiene un ncleo compacto sin cromatina perifrica mientras queel quistepresenta una nica vacuola y un nico ncleo compacto.
4. ACANTHAMOEBA CASTELLANI.
En la fase de trofozoito, presenta proyecciones fusiformes finas y otras caractersticassimilares a los anteriores. En su forma de quiste, ste tiene una doble pared en el que elendocistoes la interna y la exocistoes la externa y arrugada. Puede producir queratitis omeningoencefalitis granulomatosa crnica.
5. NAEGLERIA FOWLERI.
El trofozoito tiene pseudpodos hemisfricos lisos y presenta una etapa biflageladamientras que el quiste es similar a los anteriores. Puede producir meningoencefalitis
fulminante.
6. GIARDIA LAMBLIA.
El trofozoito tiene forma piriforme y,lateralmente, de cuchara. Tiene 4 parejas deflagelos en su porcin inferior lo que le da unaspecto de careta o medusa. El quiste, tieneforma de elipse, con 2-4 ncleos y unelemento central en forma de barra.
7. TRICHOMONAS VAGINALIS.
Tiene forma de pera con un ncleo, un axoestilo, un penacho de flagelos y unamembrana ondulante.
8. BALANTIDIUM COLI.
Su forma de trofozoito tiene protoplasma con una vacuola digestiva y est rodeado decilios. Presenta un citostoma, citofaringe y citopigio. Tiene 2 ncleos, uno gradearrionado y otro pequeo redondeado. El quiste no tiene cilios pero s el ncleoarrionado.
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TRIPANOSOMI
1. TRIPANOSO
o T. Brucei G
o
T. Brucei R
o T. Brucei B
2. TRIPANOSO
T. Cruzi. El vector se trespecie hematfaga de lReduvidae y que puedTriatoma, Rhodnius Estproduce la enfermedad de
APICOMPLEXA.
En este grupo enconBabesia, que pertenece a lPiroplasma, y Plasmodiuengloba dentro de laCoccidia.
COCCIDIOS IN
Se incluyen Ciclospora, Isltimo es monoxeno, produ
PRCTICAS 2
1. PLASMODIU
Pertenece a la subclase Cotrata de protozoos hemexclusivamente intdurante casi todo su cicloEn su ciclo metagentihaber generacin(esquizogonica en el hsexual (esporogonica enhembra).
Produce el paludismo eaparece, tras un perio
hepatoesplenomegalia L
Jorge Perea A
SIS
IASIS AFRICANA. Com
ambienseGlosina Palpalis (Enfermedad
odesienseGlosina Morsitans.uceiNo patgeno.
IASIS AMERICANA CENTRAL Y
ta de unaa familiae ser el
protozoohagas.
ramos aa subclasem que se
subclase
ESTINALES.
ospora (produce enteritis benigna) y Crypt ce diarrea y se detectan sus ooquistes en las
: DIAGN STICO DE ESPOROZ
.
cidiay seicos. Sonacelularesbiolgico.o, puede
asexualmbre) ynopheles
n el queo de incubacin de 2-3 semanas,
fiebre se produce tras la liberacin de los p
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lex T. Brucei
el sueo).
DEL SUR
sporidium. steeces
RIOS.
fiebre, anemia,
lasmodios por la
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ruptura de los hemates infectados. Estos plasmodios vuelven a infectar a otros hematesy as sucesivamente. La fiebre tiene una periodicidad segn el Plasmodium:
P. Knowlesi: Cada 24 horas. P. Oval y P. Vivax:Cada 48 horas. Es una fiebre terciaria.
P. Malariae:Cada 72 horas y es una fiebre cuaternaria. P. Falciparum:Irregular.
El diagnstico se puede realizar mediante gota gruesa y extensin en porta, deteccinde antgeno por inmunocromatografa o PCR. El tratamiento es cloroquina oprimaquina. A continuacin, se observa una tabla de diagnstico diferencial entre lasdistintas especies de Plasmodium segn las caractersticas del eritrocito infectado.
DIAGNOSTICO DIFERENCIAL
ERITROCITO P. Ovale y P. Vivax
P. Ovale P. Vivax
P. Vivax (1), P. Malariae y P. Falciparum P. Ovale y P. Vivax
P. Falciparum
2. TOXOPLASMA.
El hospedador es el gato mientras que el hospedador intermedio es el hombre u otro
animal. Produce un cuadro discreto con fiebre pero adquiere relevancia en embarazadasy en inmunodeprimidos El diagnstico se realiza mediante deteccin de anticuerpos oPCR del lquido amnitico en embarazadas.
3. BABESIA.
Parasitan aves, mamferos y hombre. La fase sexual se produce en garrapatas del gneroIxodes. La clnica es parecida al paludismo pero si periodicidad de la fiebre, siendo eltratamiento similar. En relacin al examen microscpico, se utiliza Giemsa.
PRCTICAS 23: DIAGNSTICO DE NEMATODOSINTESTINALES.
1. ENTEROBIUS VERMICULARIS.
Presenta una extremidad oral con una cpsula bucal con 2 aletas ceflicas y 3 labios.
Macho. Es ms pequeo. El extremo posterior incurvado y tiene una espculacopulatoria sin gobernculo.
Hembra. Es ms grande. Extremo posterior recto y afilado. La vulva se
encuentra en el tercio medio. Huevos. Ovoides, asimtricos e incoloros. Tienen un lado plano y otro cncavo.
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El ciclobiolgicoconsiste en la ingestin de los huevos por parte del ser humano y, enel intestino delgado, las larvas aparecen, dando lugar a hembras y machos. La hembrapermanece en el tubo digestivo y, durante la noche, sale por el orificio anal para lapuesta de huevos, Luego, asciende nuevamente por el tubo digestivo.
2. ASCARIS LUMBRIOCOIDES.
Presenta una cavidad bucal con 3 labios finamente dentiagudos. Tiene tendencia aformar ovillos en el tubo digestivo que puede dar lugar a una obstruccin intestinal.
Macho. Mide 15-30 cm, el extremo posterior est incurvado y tiene 2 espculascopulatoria dentro de una vaina.
Hembra. Mide 20-35 cm (es ms grande) y tiene una vulva mediocentral. Huevos. Capa externa mamelonada y de color amarillento.
El ciclo biolgicoconsiste en que el huevo infestante penetra en el tubo digestivo. Salela larva y atraviesa la pared del tubo digestivo. Tras esto, llega al pulmn, rompe loscapilares, llega a los alveolos y el esputo deglutido vuelve al tubo digestivo. All, yamaduro, se reproduce, produciendo huevos en el interior del intestino y no saliendo alexterior.
3. TRICHURIS TRICHURA.
Es asimtrico con una porcin anterior fina y otra posterior gruesa.
Macho. Mide 30-45 mm con un extremo caudal enrollado. Hembra. Mide 35-50 mm (ms grande) con un extremo caudal redondo y romo. Huevos. Simtrico con forma de barril o de limn con un color amarillento.
Tiene 2 prominencias bipolares sin teir con apariencia de tapn mucoidal.
El ciclo biolgicoconsiste en la entrada del huevo en el tubo digestivo y las larvas seliberan. Luego, ponen los huevos en el intestino delgado, por lo que s se detectan enheces.
4. ANCYLOSTOMA DUODENALE.
Presenta una boca con ganchos para fijarse en la mucosa. El macho(6-8mm) tiene unabolsa copuladora en el extremo posterior con espculas. La hembra tiene un extremoposterior afilado. En relacin al huevo, ste tiene la superficie lisa y, en su interior, 4-10blastomeras.
El ciclo biolgicoconsiste en la entrada por va cutnea (heridas) y, a travs del sistemalinftico, llega al tubo digestivo donde pone los huevos, por lo que tambin se detectanlos huevos en las heces.
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5. ANISAKIS
Tiene labios anchos sin dentculos. Las hembras son ms grandes y los huevosesfricos. El ciclobiolgicoconsiste en la ingesta de pescado cruda.
PRCTICAS 24 DIAGNSTICO NEMATODOS TISULARES.
1. TRICHINELLA SPIRALIS.
Este nematodo presenta una orbicular sin papilas y un esfago capilar con cloaca. Tantoel macho como la hembra presentan los rasgos generales de los nematelmintos perocabe destacar que son vivparas (no se vern huevos).
La ingesta de los quistes hace que las larvas se liberen en el tubo digestivo. De ah, sesuelen diseminar pero con cierto tropismo hacia el msculo estriado (diafragma,
lengua). El organismo responde llevando a cabo una reaccin alrededor de la larvacon el objetivo de encapsularla y aislarla.
2. MICROFILARIA.
La entrada se realiza por la picadura de un vector y, de ah, va por el sistema linftico,difundiendo por el resto del organismo. Sin embargo, se asienta en los vasos linfticos,produciendo una obstruccin con su correspondiente edema que se conoce comoelefantiasis.
PRCTICAS 25: DIAGNSTICO DE TREMATODES.
En esta prctica, se va a ver a los Platelmintos (helmintos planos) que forman unconjunto muy heterogneo desde el punto de vista biolgico. Tienen un cuerpo planolimitado por un tegumento variable con una cavidad, parnquima laxo y diferentesrganos con funciones del sistema nervioso, tubo digestivo o aparato genital.Concretamente, se van a estudiar a los TrematodosoDisgnidos.
1. FASCIOLA.
Tiene una ventosa oral y otraventral al igual que el resto deTrematodos. Presenta un tubodigestivo en Y cerrado al final quenos identifica la forma adulta.
F. Heptica. Cono ceflicoy forma folicea.
F. Buski.No cono ceflico.Tanto ste como el anterior,
el tero tiene huevos.
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Los Cestodos son planos y
monoicos. A diferencia de los
trematodes, son segmentados y
mu randes.
PRCTICAS 25: DIAGNSTICO DE CESTODES.
1. TAENIA.
Segmentacin anterior que es la cabeza o esclexen
la que tiene el rstelo y algunos ganchos. Tiene uncuello que es la zona metablicamente activa por laque crece y, el resto, presenta el estrbilo formadopor anillos denominados proglotideslas cuales son diferentes:
Sexualmente inmaduros.Prximos al cuello. Sexualmente maduros.En la zona central y a cada lado est el poro genital. Grvidos.Estructura final que contiene los huevos. Tiene un solo tero.
A travs de las heces, se liberan las progltides grvidas, pudiendo contaminar pastos.
De ah, puede llegar a los cerdos donde se forma la oncosferaque eclosiona y por vahemtica llega a los msculos estriados, cardacos Tambin, puede ocurrir en vacas yen el hombre, produciendo un parasitismo tisular y no intestinal.
Produce la teniasis y la cisticercosis. La primera suele ser asintomtica o conmanifestaciones digestivas mientras que la segunda destaca la Cistercosis Cellulosaepor T. Soliumy otras con cierto tropismo por msculo o SNC. El diagnstico se realizamediante visualizacin de los huevos, anlisis de anillos, deteccin de antgeno
T. SOLIUM T. SAGINATA T. ASIATICA
()()()() 2-8 4-12 4-8 700-1000 1000-2000 200-1000
Armado Inerme Inerme 4 4 4 Presente Ausente Presente/ausente Doble corona Ausente Ausente
Pasivamente Aislados Aislados
Alternancia regular
Alternanciairregular
ND
3 2 2 5-13 15-30 11-30
Hombre Hombre Hombre
Cerdo, jabal,hombre
BvidosCerdos, bvidos,
hombre?
Duodeno Duodeno-Yeyuno ND
Msc. esqueltico,
cardaco, cerebro,vsceras
Msc. Esqueltico,cardaco y vsceras Hgado
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2. EQUINOCOCCUS GRANULOSUS.
Presentan un menor tamao. El rstelo y la ventosa son iguales que T. Solium.Ademstiene un cuello y un estrbilo con 3 progltides: sexualmente inmadura, sexualmentemaduro y tero bilobulado. Este cestodo slo est presenta en el ser humano en su etapade quiste hidatdico.
El diagnsticoes clnico, radiogrfico y serolgico. El tratamientoes quirrgico.