Cinética EnzimáticaCinética Enzimática
Las funciones de las proteínas son específicas de cada tipo de proteína y permiten a las células defenderse de agentes externos, mantener su integridad, controlar y regular funciones, reparar daños… Todos los tipos de proteínas realizan su función de la misma forma: Por unión específica de otra molécula o ión (ligando o ligante)
Funciones de las Proteínas
De la unión se derivan:
Formación de estructuras celulares (Proteínas fibrosas)
Transporte y almacenamiento
Reactividad específica (catálisis)
Cambios conformacionales (alosterismo, motores moleculares, transmisión y transducción de señales)
• Las enzimas son catalizadores biológicos que disminuyen la energía de activación de las reacciones que catalizan, pero no modifican la constante de
equilibrio.
• Por tanto aceleran en igual proporción la velocidad de la reacción en las dos direcciones.
Enzimas
Reacciones catalizadas por enzimas
Reversible
Irreversible simplificada
Curva de Evolución de los componentes de la reacción
Maud Menten (izq) Leonor Michaelis (der)
Variables de la ecuación de velocidad
Variable dependiente: velocidad inicial
Variables independientes:
A) Concentración de enzimaB) Concentración sustrato
Bajo qué condiciones aplica la ecuación de Michaelis-Menten
Velocidad inicial
No añadir producto al medio de ensayo
Concentraciones de sustrato muy superior a la concentración de la enzima
La concentración de sustrato debe permanecer “casi” constante durante el
periodo de tiempo en que se mide la reacción
Representación gráfica de la ecuación de Michaelis-Menten
Transformación de la ecuación de Michaelis-Menten
Paramétros cinéticos
Son las constantes que aparecen en la ecuaciones de velocidad
Están compuestos por las constantes de velocidad de los pasos que constituyen la reacción catalizada
Unidades
Velocidad máxima
Constante catlítica (kcat)
Constante de Michaelis-Menten (Km)
Constante de especificidad
Concentración de sustrato o sustratos (cofactores)
Concentración de enzima
Inhibidores
Activadores
pH
Temperatura
Factores que afectan la velocidad
Determinación de los parámetros cinéticos
Regulación de la actividad enzimática por union a la enzima de ligandos que
no son sustratos
Tipos de Inhibidores
Sólo se afecta la Km
Afecta la Km y Vmax