VIII CONGRESO INTERAMERICANO DE
PEDIATRIADEL COLEGIO DE PEDIATRIA
DE NUEVO LEON A.C.
CLONACION TERAPEUTICACELULAS TRONCALES
? EL FUTURO DE LA PEDIATRIA ?
DR. RICARDO GARCIA CAVAZOS
LOS CONOCIMIENTOS OBTENIDOS DEL
PROYECTO GENOMA HUMANO SON RICOS
PERO COMPLICADOS, SU DESARROLLO ES
PROMISORIO LO QUE CULMINARA EN EL
ESTUDIO DEL GENOMA COMPLETO LO
QUE PERMITIRIA CONOCER LA
LOCALIZACION, FUNCION Y DETERMINAR
PRODUCTOS GENICOS PARA EL
DIAGNOSTICO Y TRATAMIENTO DE LAS
ENFERMEDADES HUMANAS EN UN TIEMPO
MUY CERCANO
LOS CONOCIMIENTOS OBTENIDOS DEL
PROYECTO GENOMA HUMANO SON RICOS
PERO COMPLICADOS, SU DESARROLLO ES
PROMISORIO LO QUE CULMINARA EN EL
ESTUDIO DEL GENOMA COMPLETO LO
QUE PERMITIRIA CONOCER LA
LOCALIZACION, FUNCION Y DETERMINAR
PRODUCTOS GENICOS PARA EL
DIAGNOSTICO Y TRATAMIENTO DE LAS
ENFERMEDADES HUMANAS EN UN TIEMPO
MUY CERCANO
7000
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AÑOSAÑOS
MIM
MIM
# ‘ S# ‘ S
CELULAS TRONCALES- MADRES
El siglo XXl nos ha permitido incursionar a un paradigma de la Medicina Celular y Molecular y la posibilidad de una nueva Terapia que involucra la practica de la Medicina Moderna, con grandes controversias eticas.
� Los Genes, la Genética y Epigenética son una correspondencia que permite entender hasta donde es posible llegar a modificar o manejar las enfermedades humanas.
STEM CELL´S
CELULAS Y LIMITACIONES EN LA TERAPIA CELULAR-GENETICA
� BLASTOMEROS� CELULAS DEL EMBRIOBLASTO� STEM CELL´S EMBRIONARIAS� STEM CELL´S FETALES� STEM CELL´S DE ADULTOS� CELULAS SOMATICAS DE ADULTO
STEM CELL´S
XCelulas definidasLimitado crec.
CEL. SOMATICAS DEL ADULTO
XAlotransplantesFuente ilimitada de células
STEM CELL´SFETALES
EticaAlotransplantesXenotransplantes
Fuente ilimitada de células
STEM CELL´SEMBRIONARIAS
EticaExperimentalMismo
CEL. EMBRIOBLASTO
ExperimentalLimitado elnúmero de células
BLASTOMEROS
CELULAS TRONCALES
� CELULAS TRONCALES EMBRIONARIAS � CELULAS TRONCALES FETALES
Que son ?Que diferencia existe entre los dos tipos?Porque no se utilizan las celulas del adulto?Que problemas éticos se han presentado?Que enfermedades pueden o podrian ser tratadas?Como se adquiere la muestra ideal?
INTERCONVERSION ENTRE TIPOS CELULARES PARA TERAPIA CELULAR
1999 BJORNSONGeneró una interconversión entre celulas
stem neurales a hematopoyéticasScience
1999STEM CELL´S Mesenquimatosas pueden
diferenciarse en :Tejido adiposoCondroblastos-condrocitosOsteoblastos-osteocitos
PLURIPOTENCIALIDADPodrian ser utilizadas stem cells en la
terapia celular de diabetes-Parkinson...?
Stem cell´sMultipotente
Célula progenitora
Célula diferenciada
Célula madura
Estímulo FC
microambiente
REPROGRAMACION EPIGENETICA
Incluye:Integracion y longitud de Telómeros SE AJUSTA
POSZIGOTICARegulación de la Inactivación del cromosoma “X”Fundamental la regulación por Imprinting en
Gametos
La reprogramación en animales clonados se asocia multiples loci por lo cual se presenta una disregulacion transcripcional lo que genera anormalidades epigeneticas que resultan en letalidad.
ALGUNAS APLICACIONES POTENCIALES DE LA CLONACION TERAPEUTICA
ENFERMEDAD CELULAS DE TRANSPLANTE
NeuronasNeuronasNeuronasOligodendrocitosNeuronasNeuronas motorasNeuronasNeuronasCélulas β de los islotes pancreáticosCardiomiocitosCéluas muscularesHepatocitosCélulas renalesCélulas hematopoyéticasCélulas de la pielCondrocitosCondrocitos
Enfermedad de AlzheimerEnfermedad de ParkinsonEnfermedad de HuntingtonEsclerosis múltipleEpilepsiaEsclerosis lateral amiotróficaLesiones de la médula spinalEmbolias cerebralesDiabetesInfartos del corazónDistrofia muscularEnfermedades del hígado (cirrosis)Enfermedades renalesLeucemiaQuemadurasOsteoartitisArtritis reumatoide
ESQUEMA DE LA METODOLOGIA PARA LA CLONACION TERAPEUTICA
Cultivo en presencia de activadores de la divisióncelular, hasta la formación del BLASTOCISTO, que contiene las CELULAS TRONCALES
Extracción delmaterial genético
Inyección del mat. genéticode la célula donadora
OVULO
Extracción, cultivo ydiferenciación de lascélulas troncales
ESQUEMA DE LACLONACION TERAPEUTICA ENHUMANOS A PARTIR DE UNA CELULA ADULTA, PARA GENERAR TEJIDOS PARA TRANSPLANTESIN RECHAZOINMUNOLOGICO
Science, nov. 1998Músculode ratóninyectadocon CThumanas
Estructuraintestinal
Epitelio neural
CartílagoHueso
Músculo Riñón
CELULA TRONCALEMBRIONARIA
CULTIVO YDIFERENCIACION
En el mal de Parkinsondegeneran las neuronasque funcionan condopamina, en unaregión específica delinterior del cerebro
NEUROBLASTOS(PRECURSORESDE NEURONASQUE FABRICANDOPAMINA)
APLICACIÓN DE LOSNEUROBLASTOS ENLA ZONA DAÑADADEL CEREBRO
Nature, julio 2002
Se forman neuronas quefabrican dopamina apartir de las CT (neuronasmarcadas con rojo)
La conducta de tipo parkinsónico en larata desaparece después del transplantede las neuronas dopaminérgicas
Proc. Nat. Acad. Sci. USA, Feb. 2002
Las ratas con transplantede células troncales disminuyen drásticamentesu conducta parkinsónica
ENFERMEDAD DE ALZHEIMERPLACAS AMILOIDES FORMADAS POR LA AGREGACION DE
FRAGMENTOS DE LA PROTEINA β-AMILOIDE
Nat Rev Nsci 3, 824 (2002)
CORTEZA CEREBRAL EN LA ENFERMEDAD DE ALZHEIMER,QUE MUESTRA PLACAS SENILES Y NEURONAS DEGENERADAS
LAS NEURONAS QUE MUEREN PRODUCEN ACETILCOLINA (ChAT)
Nature Neurosci., dic. 2002
CEREBRO
MEDULA ESPINAL
Células troncales de embriones humanos generan en el cerebro de la rata las neuronas del tipo que muere en la enfermedad de Alzheimer, y en la médula espinal las neuronas que mueren en la esclerosis lateral amiotrófica(ALS) (neuronas tipo ChAT)
EN LA ALS LAS NEURONAS MOTORAS DE LA MEDULAESPINAL MUEREN PROGRESIVAMENTE, HASTAPRODUCIR PARALISISCOMPLETA. LA ACTIVIDADMENTAL NO SE AFECTA
STEPHEN HAWKIN, EL FISICO Y COSMOLOGO QUE OCUPA LACATEDRA NEWTON EN LAUNIVERSIDAD DE CAMBRIDGE,PARALITICO DURANTE MAS DE 20 AÑOS, CON ALS
MODELO DE ALSLab. de R. Tapia
RATAS CONTROLTRATADAS CON SOLUCIONSALINA: LAS NEURONASMOTORAS ESTAN INTACTASY LOS MOVIMIENTOS DELANIMAL NO SE AFECTAN
Neuronas motoras(tipo ChAT)
RATA INYECTADA EN LAMEDULA ESPINALCON UNCOMPUESTO TOXICOQUE DESTRUYEESPECIFICAMENTE LAS NEURONAS MOTORAS:LA PATA TRASERA DELLADO INYECTADO QUEDAPARALIZADA
Hemos generado así un nuevo modelo de ALS, que es muy adecuado para ensayar las células troncales embrionarias como procedimiento para reemplazar las neuronas motoras muertas, o bien para salvarlas o para proteger a las sobrevivientes.
Para estos estudios lo mejor es usar las células embrionarias humanas, pues sólo así se podrá ver su capacidad de diferenciarse en neuronas motoras o de proteger o salvar las neuronas dañadas. Esto es lo que nos puede dar seguridad para su uso futuro en pacientes.
DR. RICARDO TAPIA IBARGUANGOYTIAUNAM
RECIENTE AVANCE FUNDAMENTAL EN LA METODOLOGIA PARA LA CLONACION TERAPEUTICA
Cultivo en presencia de activadores de la divisióncelular, hasta la formación del BLASTOCISTO, que contiene las CELULAS TRONCALES
Extracción delmaterial genético
Fusión del mat. genéticode la célula donadora
OVULO
Extracción, cultivo ydiferenciación de lascélulas troncales
Tejidos formados por las células humanas clonadas por transplante nuclear, 12 semanas después de su inyección en el testículo de ratón
Neuroepitelio Epitelio retiniano
Hueso Cartílago
Epitelio glandular con músculo liso
CONCLUSIONESLas enfermedades que se caracterizan por la degeneración celularno tienen hasta la fecha un tratamiento efectivo. En el mejor de los casos es sustitutivo, eficaz sólo parcialmente y por tiempo limitado. Estas enfermedades son discapacitantes y su frecuencia tiende aaumentar, especialmente en el caso del Alzheimer.
La clonación terapéutica tiene como objetivo generar tejidos de reemplazo, o células que protejan o salven a las dañadas, a partir de las células troncales.
Los resultados experimentales hasta ahora obtenidos con las célulastroncales son extraordinariamente prometedores para el futuro terapéutico en estas enfermedades. Estos resultados indican que las células de origen embrionario (totipotenciales) son mejores que lasobtenidas de organismos adultos (pluripotenciales).
En México se está haciendo investigación sobre este tema y existen las condiciones y el propósito de continuarla y ampliarla. Méxicono puede quedarse atrás en el desarrollo de estas investigaciones.
Nuestro país votó a favor de una moratoria por dos años para discutir este tema en la ONU y, por lo tanto, votó en contra de la prohibición de la investigación con células troncales humanas que propusieron varios países. Esta moratoria fue aprobada en noviembre de 2003 por 80 votos contra 79 y 15 abstenciones.
También en noviembre de 2003, el Parlamento Europeo aprobó, por 300 votos contra 210, la investigación con células troncales extraídas de embriones humanos, así como la investigación médica encélulas humanas clonadas siguiendo la misma técnica con la quese clonó la oveja Dolly (y que ya desarrollaron los coreanos).
La Academia Mexicana de Ciencias firmó el documento que elInter Academy Panel -una asociación de más de 70 academias deciencias de todo el mundo- envió a la ONU pidiendo que no seprohibiera la clonación terapéutica, incluyendo en este términola investigación con células troncales embrionarias humanas.
NOS ENFRENTAMOS A UNA
REFLEXION PROFUNDA SOBRE
LA TRASCENDENCIA DE LO QUE
HOY HACEMOS Y QUE
TRANSFORMARA EL MAÑANA
NOS ENFRENTAMOS A UNA
REFLEXION PROFUNDA SOBRE
LA TRASCENDENCIA DE LO QUE
HOY HACEMOS Y QUE
TRANSFORMARA EL MAÑANA
¿ HABRA ALGUNA IDEA QUE
MEREZCA NO SER PENSADA DE
NUEVO ?
¿ HABRA ALGUNA IDEA QUE
MEREZCA NO SER PENSADA DE
NUEVO ?
ELIAS CANETTI
“Las Fronteras en la Salud de la Mujer, el Feto y el Neonato”
TERAPIA GENICA IN UTERO REALIDAD DE NUESTRO TIEMPO?...
Dr. Ricardo Garcia Cavazos
LOS CONOCIMIENTOS OBTENIDOS DEL
PROYECTO GENOMA HUMANO SON RICOS
PERO COMPLICADOS, SU DESARROLLO ES
PROMISORIO LO QUE CULMINARA EN EL
ESTUDIO DEL GENOMA COMPLETO LO
QUE PERMITIRIA CONOCER LA
LOCALIZACION, FUNCION Y DETERMINAR
PRODUCTOS GENICOS PARA EL
DIAGNOSTICO Y TRATAMIENTO DE LAS
ENFERMEDADES HUMANAS EN UN TIEMPO
MUY CERCANO
LOS CONOCIMIENTOS OBTENIDOS DEL
PROYECTO GENOMA HUMANO SON RICOS
PERO COMPLICADOS, SU DESARROLLO ES
PROMISORIO LO QUE CULMINARA EN EL
ESTUDIO DEL GENOMA COMPLETO LO
QUE PERMITIRIA CONOCER LA
LOCALIZACION, FUNCION Y DETERMINAR
PRODUCTOS GENICOS PARA EL
DIAGNOSTICO Y TRATAMIENTO DE LAS
ENFERMEDADES HUMANAS EN UN TIEMPO
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AÑOSAÑOS
MIM
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PROYECTO GENOMA HUMANO
GENOMAGENOMA
• INICIA HACIA 1990• INCLUYE 3 BILLONES DE PARES DE
BASES• 60,000 GENES
• INICIA HACIA 1990• INCLUYE 3 BILLONES DE PARES DE
BASES• 60,000 GENES
FEBRERO 2001FEBRERO 2001 90 % SECUENCIAS GENOMICASSE COMPLETA EL AÑO 2003
90 % SECUENCIAS GENOMICASSE COMPLETA EL AÑO 2003
GENECADA CUANDO SE DESCUBRE UN GENECADA CUANDO SE DESCUBRE UN GENECADA CUANDO SE DESCUBRE UN GENE
� 1985 - 1990 - 20 hrs.� 1990 - 1998 - 15 hrs.� 1998 - 2001 - 8 hrs.
EL 3 % DE ADN - SECUENCIA PARA PROTEINAS
EL 97 % NO CODIFICA
150, 000 PROTEINA DIFERENTESY EL 30% SON ENZIMAS
CARIOTIPO CROMOSOMA
ADN SOUTHERN BLOTPCR, RFLP, VNTR,ST´S
ARN NORTHERN BLOT
POLIPETIDO WESTERN BLOT
ESTUDIO ENZIMATICO
GENE ADN
ARN NUCLEAR
ARNm
FUNCION PROTEICA
transcripción
procesamiento
AAAAAtraducción
ensamblaje
DOMINIO PROTEICO
DNA - RNAm - POLIPEPTIDO
DIAGNOSTICO YTRATAMIENTO DIAGNOSTICO YTRATAMIENTO GENOMAGENOMA
TECNOLOGIA AVANZADA
TECNOLOGIA TECNOLOGIA AVANZADAAVANZADA
CROMOSOMASCROMOSOMASCELULACELULA NUCLEONUCLEO
DNADNA
GENESGENES
RNARNA
POLIPETIDOSPOLIPETIDOS
NIVELES DE ORGANIZACION BIOLOGICA
NIVELES DE DETECCION DE ALTERACIONES GENETICAS
Detección de Cambios de BasesSecuencias de BasesHibridación de secuencia especifica.
Asp Val Thr LeuGAG GTC ACT TTA Normal
GAG GTC TCT TTA MutanteAsp Val Ser Leu
Detección de cambios en el ADNMarcadores Polimorficos-Southernblot, Microarreglos etc.
GEN< 1-100 Kpb
FISHCGHMARCADORES POLIMORFICOSLIGAMIENTO-HAPLOTIPO-PERDIDA DE Aa
SUBCROMOSOMAL1-10 MEGA pb
CARIOMA-CARIOGRAMA-CARIOTIPONo. De CromosomasEstructura del cromosoma
CROMOSOMAL130 MEGA pb
PROGRAMAS A DESARROLLAR
CONOCIMIENTO DEL GENOMA
PRUEBAS CONFIABLES CON BAJA TASA DE FALSOS NEGATIVOS
LO MAS SIMPLIFICADAS Y ACCESIBLES AL COSTO Y COBERTURA
RESULTADOS DISPONIBLES LO ANTES POSIBLE PARA PODER INICIAR MANEJO
Y TRATAMIENTO
CONOCIMIENTO DEL GENOMA
PRUEBAS CONFIABLES CON BAJA TASA DE FALSOS NEGATIVOS
LO MAS SIMPLIFICADAS Y ACCESIBLES AL COSTO Y COBERTURA
RESULTADOS DISPONIBLES LO ANTES POSIBLE PARA PODER INICIAR MANEJO
Y TRATAMIENTO
TERAPIAGENICA
GENOMA HUMANOGENOMA HUMANO
>30,000 GENES>30,000 GENES IDENTIFICACION Y CLONACION GEN
( MAPA GENETICA )
IDENTIFICACION Y CLONACION GEN
( MAPA GENETICA )
1er. TRATAMIENTO GENICO ( 4 SEP 1990 ) DEFICIENCIA DE ADENOSIN DEAMINASA
1er. TRATAMIENTO GENICO ( 4 SEP 1990 ) DEFICIENCIA DE ADENOSIN DEAMINASA
CLON 1983CLON 1983
PATRONES HEREDITARIOS
A) HERENCIA TRADICIONAL - MENDELIANA ( MONOGENICA )
• AUTOSOMICA DOMINANTE
• AUTOSOMICA RECESIVA
• LIGADA AL “X” DOMINANTE Y RECESIVA
B) HERENCIA NEO - MENDELIANA
• ( POLIGENICA - MULTIFACTORIAL )
A) HERENCIA TRADICIONAL - MENDELIANA ( MONOGENICA )
• AUTOSOMICA DOMINANTE
• AUTOSOMICA RECESIVA
• LIGADA AL “X” DOMINANTE Y RECESIVA
B) HERENCIA NEO - MENDELIANA
• ( POLIGENICA - MULTIFACTORIAL )
PATRONES HEREDITARIOSPATRONES HEREDITARIOS
C) HERENCIA ATIPICA - CRIPTICA NO-TRADICIONAL
• MITOCONDRIAL - CITOPLASMICA - MATERNA
• DISOMIA UNIPARENTAL
ISODISOMIA
HETERODISOMIA
• “IMPRINTING”
• ANTICIPACION
• SOBREEXPANSION ALELICA
• MOSAICISMO SOMATICO Y / O GERMINAL
• DELECION DE GENES CONTIGUOS
C) HERENCIA ATIPICA - CRIPTICA NO-TRADICIONAL
• MITOCONDRIAL - CITOPLASMICA - MATERNA
• DISOMIA UNIPARENTAL
ISODISOMIA
HETERODISOMIA
• “IMPRINTING”
• ANTICIPACION
• SOBREEXPANSION ALELICA
• MOSAICISMO SOMATICO Y / O GERMINAL
• DELECION DE GENES CONTIGUOS
TERAPIA GENICA 2002
� El uso de la GENETICA y la manipulación por el humano, ha llevado a crear la posibilidad de la TERAPIA GENICA en las enfermedades humanas, siendo un campo del arte de la conjuncion de las
� CIENCIAS BASICAS ---------MEDICINA CLINICA
TERAPIA GENICA 2002
TERAPIA GENICA
Es hoy por hoy una fuente potencial para la atención de enfermedades hereditarias que son devastadoras de la salud humana
QUE ES LA TERAPIA GENICA ?
ES EL TRATAMIENTO CON ACIDO
NUCLEICO ADN/ARN POR
TRANSFERENCIA PARA LA
INSERCION DE UN SEGMENTO
FUNCIONANTE EN UN PACIENTE
PARA CORREGIR LA
ENFERMEDAD GENETICA AL
GENERAR UNA NUEVA FUNCION
EN LA CELULA
TERAPIA GENICA 2002
El 2% de las enfermedades hereditarias escausada por la expresión de un simple gene
HERENCIA MENDELIANA ------------ > 8,200 enf.
RETOS:Heterogeneidad
Expresión variableDiferencia de alélos
Efecto ambientalDosis Génica ( background)
TERAPIA GENICA
UN GRAN NUMERO DE ENFERMEDADES GENETICAS PROVOCAN UN DAÑO IRREVERSIBLE Y DEVASTADOR DURANTE LA VIDA PRENATAL
ESTAS SON LAS ENFERMEDADES QUE PUEDEN BENEFICIARSE DE LA TERAPIA ANTES DE QUE SE MANIFIESTEN , POR LO CUAL LA TERAPIA GENICA IN UTERO TIENE VENTAJAS POTENCIALES SOBRE LA POSNATAL.
� Enf. NeurológicasTay SachsNiemann- PickLesch-NyhanLeucodistrofiasGangliosidosis
Enf Hematológicas TalasemiasEnf. Inmunológicas InmunodeficienciasEnf. Metabólicas Osteopetrosis
Manejo de Soporte Terapia Farmacológico
Manifestaciones clínicasEnfermedad genética
Terapia génica ??Terapia celular
VNTR y sus genes
flanqueadores
VNTR y sus genes
flanqueadores
Gen de InsulinaGen de InsulinaVNTRVNTR
Gen de Tirosina
Hidroxilasa
Gen de Tirosina
HidroxilasaGen de IGF2Gen de IGF2
VNTR presenta repetidos en tándem de 14 pares de bases.
3 grupos dependiendo del tamaño.
VNTR presenta repetidos en tándem de 14 pares de bases.
3 grupos dependiendo del tamaño.
14 DE junio de 1999
De 313 protocolos en los US
40 ( 13%) son para el tratamiento de 15 diferentes enfermedades genéticas.
REQUERIMIENTOS MINIMOS PARA TERAPIA GENICA
� IDENTIFICACION DEL LOCUS AFECTADO
� UN CLON DE ADN COMPLEMENTARIO (cADN ) DEL GEN
� IMPACTO FAVORABLE PARA CONTROLAR ENFERMEDAD Y PROPORCION RIESGO - BENEFICIO EN COMPARACION CON TERAPIAS ALTERNATIVAS
� BASES SUFICIENTES BIOQUIMICAS DE LA ENFERMEDAD PARA ASEGURAR QUE LA TRANSFERENCIA CORRIGA LA PATOLOGIA DE BASE Y PREVENGA O INVIERTA LAS ANOMALIAS FENOTIPICAS GRAVES
REQUERIMIENTOS MINIMOS PARA TERAPIA GENICA FETALREQUERIMIENTOS MINIMOS PARA TERAPIA GENICA FETAL
• UNA CELULA DIANA APROPIADA EN BASE A SU VIDA MEDIA , POTENCIAL DE REPLICACION Y DE SU BIOLOGIA BIEN DEFINIDA
• ESTUDIOS PREVIOS EN MODELOS ANIMALES QUE SUGIERAN QUE EL VECTOR , LA CONSTRUCCION DEL GENE Y LA CELULA DIANA SON APROPIADAS
• ANTES DE LA SEMANA 14 IDEALMENTE
• UNA CELULA DIANA APROPIADA EN BASE A SU VIDA MEDIA , POTENCIAL DE REPLICACION Y DE SU BIOLOGIA BIEN DEFINIDA
• ESTUDIOS PREVIOS EN MODELOS ANIMALES QUE SUGIERAN QUE EL VECTOR , LA CONSTRUCCION DEL GENE Y LA CELULA DIANA SON APROPIADAS
• ANTES DE LA SEMANA 14 IDEALMENTE
NUEVOS HORIZONTES EN LA TERAPIA GENICA
VECTORES PARA LA TRANSFERENCIA IN UTERO
TRANSFERENCIA GENES
EXPRESION GENES
ENFERMEDAD CONTROLADA
•VIRUS
( RETROVIRUS Y ADENOVIRUS)
•NO VIRUS
LIPOSOMAS cationicos
DNA DESNUDO
DNA PROTEGIDO
CROMOSOMAS ARTIFICIALES
CELULAS ARTIFICIALES
CELULAS TRONCALES
•VIRUS
( RETROVIRUS Y ADENOVIRUS)
•NO VIRUS
LIPOSOMAS cationicos
DNA DESNUDO
DNA PROTEGIDO
CROMOSOMAS ARTIFICIALES
CELULAS ARTIFICIALES
CELULAS TRONCALES
TERAPIA GENICA
LINEA SOMATICA
CORRIGE PERO EN UNA SOLA GENERACION
“CELULAS DE DONADOR DE
MEDULA OSEA O HIGADO”
LINEA SOMATICA
CORRIGE PERO EN UNA SOLA GENERACION
“CELULAS DE DONADOR DE
MEDULA OSEA O HIGADO”
LINEA GERMINAL
CELULAS DE REIMPLANTACION O ETAPA TEMPRANA
LINEA GERMINAL
CELULAS DE REIMPLANTACION O ETAPA TEMPRANA
VIRUS
RETROVIRUS
� 10 kb de ADN � Aumenta la población viral
rápidamente� Menos eficiencia en la
traducción in vivo� Infecta solo células en
división� Puede insertarse en sitios
no idóneos y provocar división incontrolable de la célula y formar un tumor
� Es ideal para STEM Cel´s
ADENOVIRUS
� 30kb de ADN� Los mas comunes son del
serotipo 2 y 5 � Infecta células en división y
en interfase � Se replica con gran
facilidad se simplifica la administracion in vivo
� Es altamente inmunogenético
� Replica en semanas
TERAPIA GENICA
Ex vivo
Se obtienen células fetales y se inoculan in
vitro para luego transferir las células del
cultivo
“CELULAS DE DONADOR
HEMATOPOYETICAS
Ex vivo
Se obtienen células fetales y se inoculan in
vitro para luego transferir las células del
cultivo
“CELULAS DE DONADOR
HEMATOPOYETICAS
In vivo
Se transfiere directamente el gene al tejido seleccionado
especialmente el hígado
In vivo
Se transfiere directamente el gene al tejido seleccionado
especialmente el hígado
Geneintegrado
GeneNo-integrado
Terapia génica
División Celular
Expresión largo plazo Expresión transitoria
Vectores no-Virales
� Menor toxicidad� Menor inmunogenicidad� Puede repetirse la transferencia � Son capaces de asociarse y construir grandes
cadenas de ADN� Potencializa o promueve la expresión de varios
genes en diferentes estadios del desarrollo� Se asocia a téjidos específicos debido a ligándos
lípídicos
PROBLEMAS POTENCIALES CON LA TGIU
Daño materno� Diseminación transplacentaria del gene
Daño fetal� Mutagénesis insercional al ADN normal� Formación de tumores� Se requiere de explorar mas riesgos potenciales
dado que se tiene poca experiencia en humanos� Respuesta inmune – tolerancia inadecuada� insuficientes niveles de expresión del transgene
UNINJURED ( CTR ) INJURED, UNTREATED( INJ )
INJURED, CONTROL VECTOR TRANSFECTED ( INJ + CV ) INJURED, ec NOS TRANSFECTED ( INJ + NOS )
PROTOCOLOS
� MAS DE 300 PROTOCOLOS SON ACEPTADOS POR LA NIH
� MAS DE 600 ENFERMOS HAN SIDO TRANSFERIDOS CON TERAPIA GENICA DE MAS DE UNA DOCENA DE ENFERMEDADES HEREDITARIAS PRINCIPALMENTE METABOLICAS DEBIDO A QUE CON UNA SOLA SECUENCIA GENICA ES POSIBLE MODIFICAR LA ENFERMEDAD
� Todas se encuentran en la FASE I-ll� No se ha determinado en ningún caso eficacia de
curación y se ha presentado una muerte por transfección viral como vector.
� CELULAS STEM HEMATOPOYETICAS� ANEMIA DE FANCON I� TALASEMIAS� HEMOFILIA
ENF. ORTOPEDIAENF. ONCOLOGICAS
ENF. HEMATOLOGICAS
ENF.HEPATICASENF.HEPATICAS� HIPERCOLESTERONEMIA FAMILIAR� HEPATITIS VIRAL� CIRROSIS ALCOHOLICA
� HIPERCOLESTERONEMIA FAMILIAR� HEPATITIS VIRAL� CIRROSIS ALCOHOLICA
ENF.CARDIVASCULARESENF.CARDIVASCULARES � ANGIOGENESIS� INFARTO AL MIOCARDIO� ANGIOGENESIS� INFARTO AL MIOCARDIO
ENF.NEUROLOGICASENF.NEUROLOGICAS� PARKINSON� ESCLEROSIS AMIOTROFICA� ESCLEROSIS MULTIPLE
� PARKINSON� ESCLEROSIS AMIOTROFICA� ESCLEROSIS MULTIPLE
NORMAS:ETICASLEGALESCONSTITUCIONALESCIVIL
NORMAS:ETICASLEGALESCONSTITUCIONALESCIVIL
REGULACION DE LA REVOLUCION GENETICAREGULACION DE LA REVOLUCION GENETICA
DISCRIMINACION GENETICADISCRIMINACION GENETICADISCRIMINACION GENETICA
NORMASRECTORES DE PLURALIDAD
NORMASNORMASRECTORES DE RECTORES DE PLURALIDADPLURALIDAD
PRINCIPIOSRECTORES DE
ESTRUCTURA HUMANA
PRINCIPIOSPRINCIPIOSRECTORES DE RECTORES DE
ESTRUCTURA HUMANAESTRUCTURA HUMANA
ETICA - DERECHOETICA - DERECHO
CONFIABILIDADCLARIDAD DE LA INFORMACION
COMPETENCIA PROFESIONAL
CONFIABILIDADCONFIABILIDADCLARIDAD DE LA INFORMACIONCLARIDAD DE LA INFORMACION
COMPETENCIA PROFESIONALCOMPETENCIA PROFESIONAL
REFLEXIONES
� LA TERAPIA FETAL SE SUSTENTA EN UN DIAGNOSTICO DE GRAN PRESICION PARA SU EXITO
� EL ENTUSIASMO DE APLICAR TERAPIA FETAL DEBE LLEVAR UN PROFUNDO ANALISIS MULTIDISCIPLINARIO PARA SU PRUDENTE Y JUICIOSA APLICACION
� ES UNA OPCION PARA EL FETO ENFERMO DE ESTE MILENIO
� EL MANEJO DEL BINOMIO MADRE - FETO COLOCA EN ALERTA AL GINECO-OBSTETRA SOBRE EL RIESGO FETAL Y EL POTENCIAL DAÑO MATERNO
AREAS EN DESARROLLO Y RETOS DE LA GENETICA MOLECULAR Y CELULAR ACTUAL:AREAS EN DESARROLLO Y RETOS DE LA GENETICA MOLECULAR Y CELULAR ACTUAL:
• CORRECCION DE ENF. GENETICAS DE DAÑO SEVERO PRENATAL
• ATENUAR O CORREGIR DESARROLLO ADVERSO EN SISTEMA NERVIOSO
• CORREGIR ALTERACIONES ANATOMICAS QUE INCLUYAN PROTEINAS ESTRUCTURALES
• ENFERMEDADES METABOLICAS
• CORRECCION DE ENF. GENETICAS DE DAÑO SEVERO PRENATAL
• ATENUAR O CORREGIR DESARROLLO ADVERSO EN SISTEMA NERVIOSO
• CORREGIR ALTERACIONES ANATOMICAS QUE INCLUYAN PROTEINAS ESTRUCTURALES
• ENFERMEDADES METABOLICAS
CONCLUSIONESCONCLUSIONES
� LOS AVANCES EN LA TERAPIA GENICA FETAL, DEPENDEN ASPECTOS CIENTÍFICOS, CLÍNICOS, SOCIALES, ECONOMICOS Y POLÍTICOS PARA EL MANEJO INTEGRAL DE LOS PACIENTES
� LA TERAPIA GENICA ES EN EL FUTURO UNA ALTERNATIVA QUE NO HAY QUE OLVIDAR
� CONOCER LA GENETICA DEL EMBRION INTEGRA LA POSIBLE OPCION EN LA ACTUALIDAD
� LA TERAPIA GENICA IN UTERO, ES PROMISORIA PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES GENETICAS QUE PRODUCE DAÑO SEVERO ANTES DEL NACIMIENTO, PERO TODAVIA NO ESTA LISTA, MADURAR ASPECTOS EPGENETICOS Y ETICOS QUE DEN SEGURIDAD.
STEM CELLS
� STEM CELLS FETALES� STEM CELLS ADULTO
Que son ?Que diferencia existe entre los dos
tipos?Porque no se utilizan las celulas del
adulto?Que problemas eticos se han
presentado?Que enfermedades pueden o podrian
ser tratadas?Como se adquiere la muestra ideal?
La conformación epigenética de cualquier celulasomática
es marcadamente diferente de los gametos maduros.
El citoplasma del ovocito puede revertir las modificaciones epigeneticas y crear un estado totipotencial
Por ello es posible considerar que los mecanismos epigenéticos se
Ubican en el citoplasma del ovocito ???????