CONTROL DE CALIDAD EN PRUEBAS CUALITATIVAS (Urianálisis y Serología)
Yurani Lopera MoralesEspecialista Control de Calidad
Control de Calidad en Métodos Cualitativos• Definiciones
• Estadística No Paramétrica
• Control de Calidad InternoSistema analítico, materiales de control, BPL
• Control de Calidad Urianálisis
• Control de Calidad Serología
Temario
Objetivo principal
Conocer aspectos importantes de los métodos cualitativos para elegir correctamente la estadística aplicable y obtener correctas
conclusiones.
Definición
Método Cualitativo
Método Semicuantitativo
Presencia
Ausencia
Reactivo
No Reactivo
(Grados)
Datos no paramétricos
Datos no paramétricos
Datos cualitativos ordinales: Se pueden ordenar losvalores obtenidos.Ej: Tira reactiva, sedimento urinario, crecimientomicrobiano, etc.
Estadística descriptiva para datos no paramétricos:Mediana, moda, percentiles y porcentaje de acuerdo.
Control de Calidad Interno
Materiales de Control
Sustancias con propiedades específicas establecidas lascuales permiten conocer la variabilidad de lametodología
Control de Calidad Interno
Tipos
Primera opinión o in kit
Segunda opinión
Tercera opinión
Precisión
Exactitud
Valores de corte EIA (Analitos Tipo B)
Serología
Materiales de Control
Control de Calidad Interno
¿Cuál es su objetivo?
Conocer la variabilidad del sistema analítico.
Verificar diariamente si el sistema analítico se encuentra dentro de la
variabilidad esperada.
Alerta al analista sobre problemas en el sistema analítico, que pueden
invalidar la utilidad clínica de los resultados de los pacientes.
Control de Calidad Interno (Sistema analítico)
Componentes:
Analizadores (consumibles)
Reactivos, Calibradores
Equipos e Instrumentos adicionales
Factores Ambientales
Proceso estandarizado:Preparación y manejo del control, calibración y muestras.
Proceso Documental constante
Personal:Capacitado
Comprometido
Control de Calidad Interno
Características
Matriz humana (conmutable) Estabilizantes y Conservadores
Contener la mayor cantidad de analitos de un área de laboratorio
Concentraciones cercanas a niveles de decisión médica
Estabilidad antes y después de abrir cada vial
Caducidad prolongada
Para uso en varios instrumentos
Programa de Comparación Interlaboratorios (PCI)
Áreas de laboratorio
Microbiología (Bacteriología, Parasitología,Micología)
Urianálisis
Serología (virología)
Inmunohematología
Inmunofluorescencia
Diagnóstico molecular
Control de Calidad
Punto 5 – “Requisitos Técnicos”
Personal (Responsabilidades, capacitaciones, evaluaciones,vestimenta, conducta)
Instalaciones y condiciones ambientales (inmobiliario,climatización, espacio físico, mantenimiento)
Equipo y reactivos (Carpetas, inventarios, mantenimientospreventivos y correctivos)
NMX-EC-15189 (Buenas Prácticas del Laboratorio)
Control de Calidad en Urianálisis
Glucosa
0
30
100
3001000
Tira reactiva Control
500 mg/dL
La CLSI recomienda que lavariabilidad no vaya más allá deuna categoría alrededor del valoresperado
Control de Calidad en Urianálisis Glucosa
Control 2 - 500 mg/dLControl 1 - 0 mg/dL
Control de Calidad en Urianálisis
GlucosaControl 2 - 500 mg/dLControl 1 - 0 mg/dL
Control de Calidad en Urianálisis Glucosa (PCI)
Grupo Par Control 2 - 500 mg/dLControl 1 - 0 mg/dL
Control de Calidad en Urianálisis
Sedimento (GR)Control 2 - 350 eri/uL
Control 1 – Neg <10 eri/uL
Control de Calidad en Urianálisis
Sedimento (GR)Control 2 - 300 eri/uL
Control 1 – Neg <10 eri/uL
Control de Calidad en Urianálisis
Sedimento (PCI)Grupo Par Control 2 - 300 eri/uL (50hpf)
Control 1 – Neg <10 eri/uL (2hpf)
10 10
Control de Calidad Externo Urianálisis
Control de Calidad Externo Urianálisis
≥80%
Control de Calidad Externo Urianálisis
30%
20%
70%
80%≥80%
Control de Calidad Externo Urianálisis
≥80%
Control de Calidad Externo Urianálisis
Control de Calidad Externo Urianálisis
Control de Calidad Externo Urianálisis
Serología Infecciosa: Control de calidad (Fase analítica). Evaluación del desempeño analítico.
Verificación de los procedimientos de exámenes serológicos.
Objetivo principal
Detectar eficientemente muestras con enfermedadesinfecciosas y endémicas
Control de calidad en Serología (Fase analítica)
Control de calidad en Serología
Pre-analítica Analítica Post-analítica
Preparación del donador
Toma de muestra (Muestra incorrecta, volumen,
identificación)
Almacenamiento
Transporte
Condiciones óptimas del “Sistema Analítico”
Control de CalidadInterno
Control de Calidad Externo
Emisión del resultado (Tiempo, errores de captura, asesoría)
Definiciones (Tipos de resultados)
TAMIZAJE - ESCRUTINIO - CRIVADO -
SCREENING - DESPISTAJE - PRESUNTIVA
INTERPRETACIÓN:
Reactivo
No reactivo
Zona Gris ó Dudoso
Semicuantitativo
Pruebas presuntivas para la detección de anticuerpos o antígenosde agentes infecciosos transmisibles.
Definiciones (Tipos de resultados)
CONFIRMATORIAS Ó
SUPLEMENTARIAS
INTERPRETACIÓN:
Positivo
Negativo
Indeterminado
Cualitativo
Pruebas de laboratorio adicionales que apoyan los resultados delas pruebas de tamizaje. No siempre las confirma
Definiciones
ALGORITMO VIH InDRE
(OMS/NOM)
Suero/Plasma
Prueba presuntiva 1(ELISA, Aglutinación, Dot ELISA)
No reactiva Reactiva
Reportar comoNegativo Prueba presuntiva 2
(ELISA, Aglutinación, Dot ELISA)No reactiva
Reactiva
Prueba Confirmatoria(WB, IFI, RIPA)
Repetir por duplicado
Negativa Indeterminada Positiva
Hacer seguimiento cada 3 meseshasta definir estado serológico
Definiciones
Tamizaje
“Todo sospechoso es culpable hasta que se pruebe lo contrario”
Prepondera la SENSIBILIDAD sobre la especificidad.
No utiliza pruebas suplementarias o confirmatorias de maneraobligatoria.
Es guiado por uso de algoritmos hasta su aprobación, para uso odescarte.
SENSIBILIDAD: Capacidad de una prueba de laboratorio para detectar verdaderos reactivoso verdaderos positivos.
Excluye falsos negativos
Definiciones
Diagnóstico
“Todo sospechoso es inocente hasta que se pruebe lo contrario”
Prepondera la ESPECIFICIDAD sobre la sensibilidad.
Utiliza una prueba suplementaria o confirmatoria.
Es guiado por uso de algoritmos hasta su identificación.
ESPECIFICIDAD: Capacidad de una prueba de laboratorio para identificar todos losnegativos o no reactivos correctamente.
Excluye falsos positivos
DefinicionesValor de corte – “Cut off” - Index
Cifra que permite diferenciar los resultados reactivos de los no reactivos de unaprueba o procedimiento.
Establecido por el fabricante
Va cambiando por factores ambientales, lavados, degradación, desgaste
Definiciones“Zona Gris” ó Zona Dudosa (10%)
Sanos
Definiciones (Falsos negativos)
Sanos
Falsos Negativos
Definiciones (Falsos positivos)
Falsos Positivos
Enfermos
Definiciones (Index en donadores sanos)
Definiciones
Sensibilidad Clínica
Capacidad del reactivo en reconocer mutantes, variantes,genotipos
Ej; HIV 1 y 2, HCV 7 genotipos y más de 52 subtipos (México1, 2 y 3), AgsHB (más de 20 mutantes)
Anticuerpos de diferentes clases IgG, IgM e IgA
Combinar en la medida de lo posible el uso de Ag y Ab parareducir el periodo de ventana
Definiciones
Sensibilidad Analítica
Se refiere a la concentración mínima, de Anticuerpo oAntígeno, que el reactivo es capaz de detectar
También conocida como límite de detección
Se da en unidades; pg/mL (Antígenos) y UI/mL(Anticuerpos)
Definiciones
Especificidad
Está asociada fuertemente al material biológico del reactivo
Anticuerpos; Monoclonal o policlonal
• Epítope dirigido (mutantes AgsHB)
• Diferentes Ab monoclonales
Antígenos; lisados, péptidos sintéticos, Agrecombinantes, procesos de purificación
Tipo (HIV 1 y 2)
Ejemplos
Ejemplos
REGIONES
MUTACIONES
HBs 1
Y 100 S
L 109 P
S 113 T
T 114 S
T 118 A, T 118 V
HBs 2
P 120 S, P 120 T
T 123 N
HBs 3
C 124 R
T 125 M
T 126 S
P 127 T, P 127 A
Q 129 R
G 130 N
N 131 T
K 133 I, M 133 T
F 134 N
HBs 4
P 142 S
T 143 L, T 143 S,
S 143 L
D 144 A, D 144 E
G 145 R, G 145 K
Mutaciones del AgHBs
ESTAS
MUTACIONES
SON LAS MÁS
REPRESENTATIVAS
REPORTADAS
POR LA
BIBLIOGRAFÍA
Ejemplos
FASE SÓLIDA CON 3 Ab MONOCLONALES
Ejemplos
Ejemplos
Definiciones
Notas
La Sensibilidad y Especificidad es reactivo dependiente(Sensibilidad clínica y analítica)
Pruebas de tamizaje; mayor sensibilidad (100%) menorespecificidad
Pruebas suplementarias; mayor especificidad (100%)
Es muy recomendable evaluar el valor de corte en poblaciónmestiza-mexicana
Control de calidad interno
Materiales de control
Característica Segunda Opinión Tercera Opinión
Matriz similar a los pacientes
Si Si
Manipulado y estandarizado
Usuario adición de conservadores y estabilizantes
Proveedor
Débil positivo Dilución necesaria Sin diluciones
Caducidad prolongada Menos de tres meses Hasta dos años
Multianalito No *Si
Uso de ultracongelador Necesario No
PCI No Si
Confiabilidad Menor Mayor
Control de calidad interno (frecuencia)
ELISA - microplaca
Se sugiere procesar controles al principio y fin de las muestras
Si se puede a la mitad de la corrida aumenta la probabilidad dedetectar errores
Preferentemente no estén a la misma altura
Control de calidad interno (frecuencia)
Sistemas continuos
Se sugiere procesar controles al principio y fin de las muestras, porturno (si existen)
Dependiendo del número de test a procesar diarios se sugiere procesarcada 50 o 100 test
= Dato material de control dentro de límites permitidos
= Muestra de Paciente resultado correcto
24 hrs
Control de calidad interno (frecuencia)
Sistemas continuos
24 hrs
= Dato material de control fuera de límites permitidos
Control de calidad interno (frecuencia)
= Dato material de control fuera de límites permitidos
= Dato material de control dentro de límites permitidos
Control de calidad interno
Controles débiles positivos
Lo marca la NOM-253
Ayudan a monitorear la sensibilidad del método encondiciones de rutina
Entre más cerca este del valor de corte generalmente lavariabilidad aumenta
NOM-253-SSA1-2012; Un CDP no deberá ser mayor a tresveces el valor de corte
Control de calidad interno
Controles débiles positivos
En los laboratorios de América Latina cambia un poco
Control de calidad interno (Estadística)
Desempeño analítico
200192188 204 208 212196
100
50
Frecuencia
x = Concentración
Distribución Gaussiana
y = Frecuencia
Control de calidad interno (Estadística)
Es un fenómeno que afecta a la materia de forma universal. Encontrol de calidad, los eventos de medición arrojan resultadosdiferentes como consecuencia de la variación de sus componentes ylas sustancias a medir
Variabilidad
Desempeño Analítico
200192188 204 208 212196
100
50
x = Concentración
y = Frecuencia
Conjunto Homogéneo
de Datos
Control de calidad interno (Estadística)
Conjunto Homogéneo de Datos (CHD)
Igual lote de reactivo
Igual lote de calibrador
Sistema analítico sin cambios importantes (Mttoscorrectivos o preventivos mayores) “Condiciones Estables”
Proceso estandarizado del manejo material de control
Asignación de decimales correctos
Control de calidad interno (Estadística)
Análisis de desempeño
Distribución Normal o Gaussiana
Media
Desviación Estándar
Control de Calidad Interno (Estadística)
El promedio aritmético de un conjunto de datos puntuales
Media
Brinda un estimado de la tendencia central de distribución que debe
esperase cuando el ensayo trabaja bajo condiciones estables
1.- 5.02
2.- 5.15
3.- 5.91
4.- 5.49
5.- 5.64
6.- 5.75
7.- 5.91
X = 5.55
Control de Calidad Interno (Estadística)
Cuantifica el grado de dispersión de los datos puntuales en relación con
la media.
Se utiliza para establecer el intervalo que determina la aceptación del
resultado del control.
Desviación Estándar (DE)
+/- 1 DE
+/- 2 DE
+/- 3 DE
Control de Calidad Interno (Estadística)
Expresa la DE en porcentaje y es una medida de variabilidad de los
resultados que permite comparar diferentes concentraciones, equipos,
metodologías).
Coeficiente de Variación (CV)
X = 60
DE = 1.5
X = 140
DE = 3.5
CV = 2.5 CV = 2.5
Control de calidad interno (Estadística)
Asignación correcta de valores
Valor provisto por el fabricante del material decontrol en el inserto.
Cálculo o estimación basada en puntos recientes(20 datos durante 4 semanas)
La media y desviación estándar asignados deben representar el desempeño actual del método en el
laboratorio
Control de calidad interno (Gráfica LJ)
X = 3.71DE = 0.64
CV = 17.4
Control de calidad interno (Interpretación)
HCV
X = 3.71DE = 0.64
CV = 17.4
Inserto de Reactivo
Control de calidad interno (interpretación)
HCV
CV=4.5
Control de calidad interno (Interpretación)HCVCV = 6.4
CV = 17.4
2.74
Control de calidad interno (Interpretación)
HIV
HCV
Control de Calidad Interno (Interpretación)
¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?
Control de Calidad Interno (Interpretación)
¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?
X = 1.5DE = 0.3
CV = 20
ZG (10%)
2.5% de pacientes FN
Control de Calidad Interno (Interpretación)
¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?
X = 1.5DE = 0.23
CV = 15
ZG (10%)
1.25% de pacientes FN
Control de Calidad Interno (Interpretación)
¿Cuánta variabilidad podría ser permitida para un CHD?
X = 1.5DE = 0.15
CV = 10
ZG (10%)
< 1.0% de pacientes FN
Control de Calidad Interno
Cambios de lote
Programa de Comparación Interlaboratorio
Indicadores de Calidad
Datos del Lab
Media
DE
CV
# puntos
Gpos Consenso
Media
DE
CV
# puntos
# labs
Valores que determinan el
desempeño de un sistema analítico
IDE
CVR
Programa de Comparación Interlaboratorio
Veracidad
Expresa al error sistemático en términos de DE de la media del grupo de
consenso
Índice de Desviación Estándar (IDE)
IDE = DE del Gpo.
Media del Lab – Media del Gpo.
Intervalo Aceptable
-2 a +2
Programa de Comparación Interlaboratorio
Precisión
Es un valor calculado que compara el CV del laboratorio de una prueba
específica con el CV del grupo de consenso.
Intervalo Aceptable
0 a 2
Ratio del Coeficiente de Variación (CVR)
CVR =CV del Gpo
CV del Laboratorio
Programa de Comparación Interlaboratorio
Verificación de Parámetros Estadísticos
Control de Calidad Externo SerologíaC
ual
itat
ivo
Control de Calidad Externo Serología
Cuantitativo
Control de Calidad Externo Serología
Cuantitativo
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