Cribado de cromosomopatías
mediante el estudio de ADN fetal en
sangre materna
Javier Suela
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
DE DONDE VENIMOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Semana 8 Semana 12 Semana 20 Semana 32 Semana 4 Parto
Eco confirmación
TRIPLE
CRIBADO:
PAPP-A, bHCG
TEST
EMBARAZO
Eco del triple cribado: Estado general
Transucencia nucal Mediciones sec. de Down: nariz, ductus, tricúspide…
Eco alta resolución:
Revisión estado general.
Evaluación cardíaca Evaluación todos los
órganos (puede haber eco
semana 16 en caso de sospecha previa de cardiopatía u otros)
Estudio RHD
Vacuna RHD
Semana 14: fin ILE libre Semana 22: fin ILE
malformación no letal
Eco tardía de malformaciones Revisión estado general.
Evaluación cardíaca Evaluación todos los órganos
ECOGRAFIA
BIOQUÍMICA
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“Microquimerismo”
Transferencia materno/fetal Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Trofoblasto trisómico sangre materna
Determinación por sexo (XY)
Separación por MACS (eritroblastos)
(técnica alternativa)
También se propuso citometría
Rendimiento MUY pobre (<1 cel / 100000)
Céls. fetales en sangre materna Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
¿Qué es el ADN libre en plasma?
El ADN libre circulante (cfDNA) son
restos celulares apoptóticos que se
degradan y excretan por nuestro
cuerpo
Varios usos de interés:
- Biopsia líquida (tumor)
- Presencia fetal en sangre materna
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ADN libre en plasma (cfDNA)
Estudios oncológicos:
Un 30% de los pacientes con cáncer presentaban
cfDNA con la tecnología de detección del momento
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Dennis Lo
El contenido de ADN fetal libre en plasma materno es 970
veces mayor que el nivel de ADN contenido en células fetales
en sangre materna.
La cantidad de ADN fetal libre en plasma materno crece
durante el embarazo, y puede detectarse en plasma materno a
partir de la 5ª semana de gestación.
El ADN fetal libre en plasma desaparece extremadamente
rápido tras el nacimiento. La vida media de este ADN es de
16.3 minutos, siendo prácticamente indetectable en 2 horas.
cfDNA fetal en sangre materna
El cfDNA fetal es PLACENTARIO
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Análisis Trisomía 21: 753 embarazadas Sensibilidad: 100% Especificidad: 97.9%
BMJ 2011;342:c7401
Dennis Lo
Jun Wang
Kypros Nicolaides
Aplicación del cfDNA fetal Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
DÓNDE ESTAMOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Metaanálisis para NIPT Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Nuestra experiencia (2015-2016)
- En sintonía con la mayoría de estudios publicados
- T18 y T13 podrían tener menor VPP por causa de CPM
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
El NIPT es un CRIBADO. NO SUSTITUYE A LA TÉCNICA INVASIVA En embarazos con patología fetal la técnica de primer orden es la INVASIVA La embarazada debe conocer los pros y contras de la técnica antes de elegir, así como los datos de contingencia (sensibilidad, especificidad, VPP, VPN…)
Se debe ofrecer la confirmación de un ALTO RIESGO Se debe recomendar un estudio con medición de fracción fetal (rec >4%) Se debe hacer consentimiento, consejo pre y post test No es un análisis de TODO el genoma (no es infalible)
¿Cómo trabajar con NIPT? Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
El NIPT es un CRIBADO. EL NIPT DETECTA cfDNA, Y POR TANTO ES SENSIBLE A SU MODIFICACIÓN: - Mosaicismos de confinamiento placentario o exclusivamente fetal - Madre portadora de patología a testar - Gemelo evanescente - Cualquier contaminación de cfDNA (exógena o endógena) UN RESULTADO NO INFORMATIVO (FF<4%) PUEDE SER RELEVANTE
¿Qué limitaciones tiene el NIPT? Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Mosaicismo feto/placenta (CFM, CPM)
NIPT
Biopsia coriónica
L.Amniót ico
Concordancia
ALTO RIESGO ALTO RIESGO BAJO RIESGO
POSITIVO POSITIVO NEGATIVO
NEGATIVO POSITIVO POSITIVO
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Nuestra experiencia: 1 caso con cariograma complejo (CCR tipo IVa posteriori)
Presencia de DNA materno tumoral
El ADN plasmático tumoral
materno podría ser detectable por
NIPT (retrospectivo)
7 casos de cáncer / 125426
Isocromosoma 8p
Monosomía 9
Duplicación 11q24qter
Deleción 17p
Monosomía 19
Duplicación 20q
Deleción Xq intersticial
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Seguimiento no informativos
Otros estudios informan, además, de posibles aneuploidías
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Guía de recomendaciones de la ACMG acerca de:
- Qué tecnología usar
- Qué informar
- Qué parámetros epidemiológicos son relevantes (S, ESP, VPP, VPN…)
- Qué consejo dar a las pacientes
Guías clínicas y consensos Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Guías clínicas y consensos
NIPT como test contingente
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Guías clínicas y consensos
NIPT como test contingente
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Implantación del NIPT en el SNS (globalizado)
2015
Uso contigente de NIPT en el SNS 2016 2017 HOY
En proceso / en proyecto
Sin datos (uso esporádico)
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HACIA DONDE VAMOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Dos preguntas de futuro
- ¿DEBE DEMOCRATIZARSE EL USO DEL NIPT?
¿DEBE SER UN CRIBADO DE POBLACIÓN GENERAL?
¿DEBE SUSTITUIR AL CRIBADO COMBINADO ACTUAL?
¿QUÉ SITUACIONES HAY QUE ANALIZAR?
- ¿DEBE AMPLIARSE LA CAPACIDAD DE DETECCIÓN DE LA TÉCNICA?
¿DEBEN ANALIZARSE OTRAS ANEUPLOIDÍAS?
¿MICRODELECIONES?
¿HASTA DÓNDE PODEMOS LLEGAR?
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¿Debe democratizarse su uso?
¿CRIBADO GENERAL DE ANEUPLOIDÍAS DE INTERÉS?
Utilización de las técnicas actuales de manera más generalizada
PROS:
Reducción técnicas invasivas
Simplificación protocolos
Detección de falsos negativos
CONTRAS:
Evaluación real de las aneuploidías a cribar
Podría aparecer otra cohorte de falsos negativos
NO DEJA DE HABER RESULTADOS DISCREPANTES
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¿Debe democratizarse su uso?
¿CRIBADO GENERAL DE ANEUPLOIDÍAS DE INTERÉS?
Utilización de las técnicas actuales de manera más generalizada
PROS:
Reducción técnicas invasivas
Simplificación protocolos
Detección de falsos negativos
CONTRAS:
Evaluación real de las aneuploidías a cribar
Podría aparecer otra cohorte de falsos negativos
NO DEJA DE HABER RESULTADOS DISCREPANTES
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Análisis de otras regiones - actual
Es posible ver otras regiones del genoma
No hay base de datos estadística
Profundidad baja (>10Mb)
Debe tratarse como sospecha
(no hay series suficientes de VPP y VPN)
Importante conocer indicación caso
Nuestro conocimiento es residual:
Pallister Killian (tetra12p)
Caso trisomía 14 placentario
(UPD materna por rescate cromosómico)
del10q11q22 de novo
Del16q11q22 de novo
Trisomía 22 en mosaico fetal
Pero también algún caso
exclusivamente placentario
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Las técnicas de NGS cada vez son más potentes y precisas: WGS
¿Y si incrementamos el número de lecturas?
Análisis de otras regiones - futuro Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
¿ARRAY-CGH EN SANGRE MATERNA?
En casos con patología fetal (o de manera general?). Sería una CVS no invasiva
PROS:
Reducción técnicas invasivas
NIPT para todos los estudios, con o sin malformación
CONTRAS:
Generalizar este estudio incrementaría test invasivos
(variantes sólo placentarias rescatadas)
La madre podría seguir generando problemas (cromosoma X, etc.)
Análisis de otras regiones - futuro Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
El NIPT es un CRIBADO. NO SUSTITUYE A LA TÉCNICA INVASIVA Hoy por hoy es una técnica muy útil para descartar el FP del cribado bioquímico Cada vez más utilizado en clínica diaria
La tecnología permite analizar cada vez más información, pero todo debe estudiarse desde un correcto consejo genético, pre y post test A nivel futuro, se plantea como: 1. Un cribado para población general 2. Un array-CGH en sangre materna (limitaciones como biopsia coriónica)
Conclusiones Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
GRACIAS A: LABORATORIO
TRISONIM
AL RESTO DEL EQUIPO NIMGENETICS, COLABORADORES, PACIENTES
Y A VOSOTROS POR ESCUCHARME
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