Laboratorio de Inmunología
L-121
Equipo 3Pérez Pérez José Manuel
Pérez Sevilla Alma Beatriz
2802 – 2009-2
¿Qué es sistema inmune?
• Inespecíficos:
Comprende
Barreras Naturales
pH, piel, saliva,
lagrimas
Humorales
-Citocinas
-Interleucinas
-Interferones
-Complemento via
Lectinas
Celulares
- NK, Macrófagos,
Neutrofilos, basofilos
Específicos Linfocitos T y B
Órganos linfoides
Primarios
Secundarios
Medula ósea
Timo
Medula ósea
Bazo
Ganglios linfáticos
Placa de Peye
Ganglios linfáticos
mesentéricos
Tejido linfoide
asociado a los
bronquios
Órgano
linfoides
Bazo
Bazo
• Pulpa Roja:
• Se destruye a los eritrocitos viejos
• Pulpa Blanca:
• Se encuentran los linfocitos T y los linfocitos B, que se activan en presencia de antígenos.
• GALT: es el tejido linfoide asociado al tubo digestivo, que incluye amígdalas, apéndice vermiforme y placas de Peyer.
• BALT: es el tejido linfoide asociado al aparato respiratorio.
• MALT: es el tejido linfoide asociado a las mucosas
Tejidos del sistema inmune
• Por primera vez un Ag se pone en contacto con el Ab
• Periodo de latencia 7 a 10 días
• Predomina IgM
Respuesta Primaria
• segundo encuentro con el mimo Ag o con un Ag muy parecido
• Respuesta rápida de 3 a 5 días
• Cantidad mucho mayor de IgG
Respuesta Secundaria
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Inmunidad
• Respuesta inducida una vez producido el contacto con Ag
• Respuesta inmune formada por anticuerpos y linfocitos T
• Confiere resistencia a largo plazo (producción Ab)
• Lenta progresión de la resistencia y la necesidad de contacto prolongado con el antígeno
Activa
• Respuesta basada en anticuerpos ya existentes en otro hospedero
• transmitidos de forma natural a través de la placenta o a través del calostro
• forma de protección rápida, pero de corta duración
Pasiva
Inmunidad
• Respuesta no especifica
• Respuesta rapidainmediata
• Mediada por células
• Macrófagos, Neutrofilos, basofilos
• Mediada componentes humorales:
• Complemento
• Citocinas, IL
• Sin memoria inmunológica
Innata
• Respuesta especifica contra patógenos y antígenos
• Tiempo de demora para una respuesta maxima
• Mediada por celulas
• Linfocitos T y B
• Mediada por componentes
• Complemento
• Conduce a Memoria
Adaptativa
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Inmunoglobulinas
Ig Fija complemento / Clase
% Suero Forma Sitios
IgM 1 5-10% Pentámero/10sitios
No difunde bien a tejidos
IgG 1,3 y 2* la 4 no 80% monómero
IgA no Dinero Leche materna, saliva, lagrimas,
IgD No 0.02% Monómero
IgE no Monómero
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• CFA vs un antígeno de eritrocito se suspenden en una capa de agar que contenga los antígenos de eritrocito, el anticuerpo secretado por una célula se difundirá a través del agar, reaccionara con los eritrocitos, y formara un complejo localizado
Fundamento
• Cuando se añade complemento a la capa eritrocito-linfocito, solo aquellos eritrocitos que han reaccionado con el anticuerpo fijaran el complemento y se consumará su lisis. Esto produce zonas localizadas de hemólisis..
Fundamento
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Antes de la práctica
SE TOMA 4 ML DE
MEM
Preparar Tubo para Dilución en MEM
1.9 mL de MEM
Dilución 1:20
Dilución 1:30
2.9 mL de MEM
Se deja
sedimentar 1
minutos
0.1 mL del
sobrenadante
0.1 mL del
sobrenadante
0.1 mL de dilución
2 mL de Agarosa
45°C
2 mL de suero de cobayo
Esperar a solidificar
0.2 mL de GR al 10%
37°C 45 minutos
Agitar y vaciar rápido, uniformizar
∞
37°C 30 minutosDesechar suero
complemento y
sustituir con 2 mL
MEM frio
• Cálculos:
• CFP x 10 x Dilución x 4 = Células por bazo
• CPF: Placas líticas contadas
• 10: Se toma una decima parte
• Dilución: Sea 20 o 30
• 4: Medio total, 4 mL de MEM
• Ejemplo:
• CFP x 10 x 20 x 4 = miles de Células
• CFP x 800 = miles de celulas
Roitt I, et al. Inmunología, 5ª edición. Harcourt, España 2000. pp
1- 26
Gualde N, Bourinat-Lafon J. Inmunología, Vol 20. Ed. Norma,
México 1994. pp 23-50
Hudson L. C. Hay F. Inmunología práctica. Ed. Jims. España
1979. pp 27-51.
Weir M.D. Handbook of experimental inmunology. 3ª edición, Ed.
Blacknell Scientificc Publications.
Referencias: